專利名稱：：殼聚糖在制備防治家蠶細(xì)菌性敗血病藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種防治家蠶病害藥物
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其涉及殼聚糖在制備防治家蠶細(xì)菌性敗血病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：蠶絲業(yè)是中國一項(xiàng)頗具資源優(yōu)勢的傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)，已具有5000多年歷史，作為農(nóng)民的一項(xiàng)傳統(tǒng)副業(yè)，是農(nóng)民增收的重要途徑之一。家蠶是當(dāng)今飼養(yǎng)規(guī)模最大、技術(shù)最成熟的經(jīng)濟(jì)昆蟲；由于其自身的特點(diǎn)，對病原細(xì)菌的抵御能力有限，極易感染細(xì)菌導(dǎo)致死亡。由靈菌(Sem^/awarcascms)引起的細(xì)菌性敗血病是蠶業(yè)生產(chǎn)上的常見病，對蠶繭的高產(chǎn)和穩(wěn)產(chǎn)影響極大。目前的防治方法主要有在蠶體撒上體外消毒粉劑與通過添食抗菌藥殺死侵入體內(nèi)的細(xì)菌兩種，但前者費(fèi)時費(fèi)力且對侵入體內(nèi)的病菌防效不明顯，后者防效不錯但易誘發(fā)家蠶的抗藥性，且成本較高。另外，由于蠶蛹已成為餐桌上的美味佳肴，由這些化學(xué)藥劑處理過的家蠶得到的蠶蛹供人們食用后，殘留藥劑將對人的身體健康產(chǎn)生不良影響。殼聚糖是由甲殼素經(jīng)脫乙?；幚砗蟮漠a(chǎn)物，通常將脫乙酰度大于55%的甲殼素稱作殼聚糖，其學(xué)名為聚氨基葡萄糖，化學(xué)名(1,4)-2-氨基-2-脫氧-13-D-葡萄糖，廣泛存在于蝦、蟹等動物外殼和藻類、真菌的細(xì)胞壁中。殼聚糖是一種抗菌譜較廣的天然物質(zhì)，對細(xì)菌、酵母菌和真菌等均有不同程度的抑制作用。殼聚糖具有良好的生物相溶性，可生物降解性以及無毒副作用，其分子內(nèi)含有-OH和-NHr活性基團(tuán)，易與多種有機(jī)物發(fā)生反應(yīng)，目前廣泛應(yīng)用在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、化工、環(huán)境保護(hù)和水處理等領(lǐng)域。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一種殼聚糖在制備防治家蠶細(xì)菌性敗血病藥物中的應(yīng)3用，該藥物防治效果好，而且在蠶體無毒性和副作用,食用不影響人身體健康。本發(fā)明防治家蠶細(xì)菌性敗血病藥物以殼聚糖為主要成份，添加常規(guī)的藥用賦形劑，如水等，制成水劑、粉劑等劑型。所述的殼聚糖的脫乙酰度優(yōu)選大于85%,易獲得，成本低。本發(fā)明還提供了一種上述藥物的制備方法，包括以下步驟:將殼聚糖粉末溶于體積百分比為1%的冰醋酸溶液中，然后添加水配制成濃度為0.01~0.1mg/mL的殼聚糖溶液。冰醋酸主要是用于調(diào)節(jié)pH值，使得殼聚糖溶解，其用量和濃度可以根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)整。采用上述制備的濃度為0,10mg/mL的殼聚糖溶液浸泡過的桑葉喂食家蠶，接種了靈菌的家蠶死亡率從95.0%下降到48.3%。該藥物能顯著降^u家蠶細(xì)菌性敗血病菌的感染風(fēng)險，治療效果顯著。采用該藥物防治家蠶細(xì)菌性敗血病簡單易行，成本較低；更重要的是防治環(huán)節(jié)不會對防治人員的健康產(chǎn)生任何威脅。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1將脫乙酰度大于85%的殼聚糖粉末溶解于體積百分比為1%的冰醋酸中，添加蒸餾水配制成濃度分別為O.(H、0.05和0.10mg/mL的殼聚糖溶液，取各種濃度的殼聚糖溶液5mL，每份里面加入相同濃度的靈菌敗血病菌懸浮液，使混合溶液中的病菌濃度一致(l.Oxio7CFU/mL);以蒸餾水代替殼聚糖粉作為對照，室溫下振蕩2小時后查驗(yàn)病菌數(shù)量，結(jié)果如下表l不同濃度殼聚糖溶液對靈菌病原生長的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>從表i可以看出，在離體條件下，0.01mg/mL與0.05mg/mL的殼聚糖溶液能完全抑制病原菌的增殖，0,10mg/mL的殼聚糖溶液甚至能殺死已有的病原菌。實(shí)施例2取濃度為0.1Qmg/mL的殼聚糖溶液，加入一定濃度的靈菌敗血病菌懸浮液，使病菌在溶液中濃度約為107CFU/mL(7.00log10CFU/mL)，對混合后0.5、1.0、2.0和4.0小時的混合溶液取樣記數(shù)，記錄其中的靈菌敗血病菌數(shù)量。以蒸餾水代替殼聚糖作為對照。結(jié)果顯示，在病菌懸浮液中加入殼聚糖后，病菌數(shù)量急劇減少，顯示出較好的殺菌作用。表2不同培養(yǎng)時間對殼聚糖溶液((UOmg/mL)抑菌活性的影響培養(yǎng)時間(小時)病原菌數(shù)量(bg1QCFU/mL)對照殼聚糖0.07.777.770.57.185.991.07.405.972.07,325.654.07,295.00實(shí)施例3用濃度為0.10mg/mL的殼聚糖溶液浸泡桑葉，喂食家蠶24小時后，對蠶體接種靈菌敗血病菌，以下五個處理作為對照(D以沒有經(jīng)過殼聚糖溶液處理的普通桑葉喂食家蠶，對家蠶接種病菌；②以沒有經(jīng)過殼聚糖處理的桑葉喂食家蠶，對家蠶接種蒸餾水；③以經(jīng)過殼聚糖處理的桑葉喂食家蠶，對家蠶接種蒸餾水；④以沒有經(jīng)過殼聚糖處理的桑葉喂食家蠶，對家蠶不接種；⑤以經(jīng)過殼聚糖處理的桑葉喂食家蠶，對家蠶不接種。分別于接種后24、48和72小時統(tǒng)計家蠶死亡率。表3殼聚糖溶液處理桑葉防治家蠶靈菌敗血病的效果處理家蠶死亡率<24小時48小時:%)72小時普通桑葉喂食+接種病原菌83.391.795.0殼聚糖處理桑葉喂食+接種病原菌43.348.348.3普通桑葉喂食+接種蒸餾水0.00.00.0殼聚糖處理桑葉喂食+接種蒸餾水0.00.00.0普通桑葉喂食+不接種0,00.00.0殼聚糖處理桑葉喂食+不接種0.00.00.0從表3可以看出，以殼聚糖溶液浸泡過的桑葉喂食不會影響家蠶的生長；接種病原菌后,家蠶在72小時內(nèi)的死亡率分別達(dá)到83.3%、91.7%和95.0%,但是以本發(fā)明所述方法處理后，死亡率迅速下降到43.3%、48.3%和48.3%，防病效果明顯。權(quán)利要求1、殼聚糖在制備防治家蠶細(xì)菌性敗血病藥物中的應(yīng)用。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述的殼聚糖脫乙酰度大于85%。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物為濃度為0.01~0.1mg/ml的殼聚糖水溶液。全文摘要本發(fā)明公開了一種殼聚糖在制備防治家蠶細(xì)菌性敗血病中的應(yīng)用。本發(fā)明藥物能顯著降低家蠶細(xì)菌性敗血病菌的感染風(fēng)險，治療效果顯著。采用本發(fā)明藥物防治家蠶細(xì)菌性敗血病簡單易行，成本較低；更重要的是防治環(huán)節(jié)不會對防治人員的健康產(chǎn)生任何威脅。文檔編號A61K31/722GK101579354SQ20091009904公開日2009年11月18日申請日期2009年6月4日優(yōu)先權(quán)日2009年6月4日發(fā)明者余山紅,斌李,婷蘇,謝關(guān)林申請人:浙江大學(xué)