專利名稱：刺榆不同提取物的降血脂和抗氧化活性及在醫(yī)藥中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明公開了刺榆總黃酮和水提取物的制備方法，適于藥物新產(chǎn)品的開發(fā)。本發(fā) 明還公開了以下兩個(gè)藥理活性(1)刺榆總黃酮和水提取物對(duì)高脂血癥具有預(yù)防治療作用 且隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng)，具有相繼出現(xiàn)降低血清總膽固醇(TC)含量、降低低密度脂蛋白膽 固醇(LDL-C)含量的作用。(2)刺榆總黃酮具有抗氧化和清除羥自由基的作用。屬于中藥 有效成分提取制備及其在醫(yī)藥和保健品領(lǐng)域中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
刺榆(Hemipteleadavidii)，隸屬于榆科(Ulmaceae)刺榆屬(Hemiptelea)的特 有植物。內(nèi)蒙古東部的蒙古族在幾百年前就有食用其嫩莖葉的習(xí)慣。據(jù)當(dāng)?shù)孛耖g調(diào)查刺榆 嫩莖葉具有降脂、滑腸和延年益壽的作用。據(jù)《本草拾遺》記載，刺榆性味淡、澀，平。主要 功效為解毒消腫。主治癰腫；葉治水腫，癰腫。高脂血癥是動(dòng)脈粥樣硬化的主要發(fā)病因素之一，也是形成高血壓、糖尿病的一個(gè) 危險(xiǎn)因素，還可以導(dǎo)致脂肪肝、腎衰竭、肝硬化、結(jié)腸癌等多種疾病的發(fā)生。臨床實(shí)踐證明， 降血脂治療可使冠心病發(fā)生率明顯降低。自由基是帶有未成對(duì)電子的分子或離子，可對(duì)機(jī) 體產(chǎn)生毒害，破壞生物大分子，影響細(xì)胞活性，尤其是損害細(xì)胞膜。現(xiàn)已明確自由基與多種 病理現(xiàn)象有關(guān)聯(lián)，如衰老、腫瘤、炎癥心腦血管疾病等、黃酮類物質(zhì)是人體必需營(yíng)養(yǎng)素，人體自身不能合成，只能從食物中攝取。黃酮類化 合物廣泛分布在植物中。黃酮類物質(zhì)具有抗腫瘤、抗氧化、降血壓、降血脂等多種活性，因此 對(duì)黃酮類物質(zhì)的研究也越來越受到人們的關(guān)注。黃酮類物質(zhì)降血脂作用機(jī)理主要通過過氧 化作用實(shí)現(xiàn)。而活性多糖降血脂的機(jī)理與蛋白質(zhì)類似，大部分都遵從與膽固醇或其轉(zhuǎn)化物 膽酸的結(jié)合，從而抑制其在腸內(nèi)的吸收，增加腸的蠕動(dòng)和促進(jìn)膽固醇向膽酸的轉(zhuǎn)化，從而增 加排泄量。但是刺榆總黃酮和水提取物及其藥理活性的研究卻至今未見有報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開了刺榆總黃酮和水提取物對(duì)高脂血癥具有預(yù)防治療作用；隨著用藥時(shí) 間的延長(zhǎng)，具有相繼出現(xiàn)降低血清總膽固醇含量；降低低密度脂蛋白膽固醇含量的作用。本發(fā)明還公開了刺榆總黃酮具有很好的抗氧化和清除羥基自由基的作用。本發(fā)明提供了從刺榆中提取總黃酮和水提取物成分的制備方法。本發(fā)明進(jìn)一步提供了刺榆總黃酮和水提取物在抗氧化和治療高脂血癥中的藥物 用途。本發(fā)明刺榆的總黃酮和水提取物成分，可由下述方法制備獲得刺榆總黃酮的制備刺榆嫩莖葉置于烘箱中45°C烘干，粉碎后過60目篩。然后加 入3倍量95%乙醇60°C提取6小時(shí)，重復(fù)三次。合并提取液，將合并后的提取物濃縮至一 定體積，加水成混懸液，依次用等量的石油醚和正己烷萃取，萃取后將水層蒸干，即得到乙 醇提取物。再用95%的乙醇溶解過濾，將濾液減壓回收后蒸干。將蒸干后的乙醇提取物溶于水，過聚酰胺柱。依次用水、40%乙醇和95%乙醇洗脫。將上述洗脫液減壓回收后蒸干。 其中40%乙醇洗脫液為制備的黃酮類物質(zhì)。水提取物的制備刺榆嫩莖葉置于烘箱中45°C烘干，粉碎后過60目篩。用水100°C 提取2次，每次2小時(shí)，將合并的提取液濾過得到濾液，減壓回收至很少體積，蒸干得到多糖 提取物。經(jīng)過藥理篩選，上述刺榆總黃酮和水提取物成分，都有不同程度的預(yù)防治療高脂 血癥作用，且刺榆總黃酮具有良好的抗氧化作用。按藥劑學(xué)方法，可以將本發(fā)明的總黃酮和水提取物成分制成多種臨床藥物劑型作 為治療高脂血癥和抗氧化的藥物，所說的藥劑是任何一種藥劑學(xué)上所說的劑型本發(fā)明的藥物組合物含有療效有效量的刺榆總黃酮和水提取物為活性成分，以及 含有一種或多種藥學(xué)上可以接受的載體。上述的載體是指藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體，包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、黏合劑、 濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體。本發(fā)明可以組合物的形式通過口服、靜脈、肌肉注射或胃腸外給藥方式施用于這 種治療的患者。按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)生產(chǎn)方法制備各種劑型如片劑、顆粒劑、沖劑、膠囊、栓 劑、噴霧劑、緩釋劑和注射劑。也可使其活性成分與一種或多種載體或藥物組合，制成所需 劑型。下述的藥理實(shí)驗(yàn)證實(shí)了刺榆總黃酮和水提取物具有預(yù)防高脂血癥和抗氧化的藥 理活性。刺榆總黃酮和水提取物預(yù)防性給藥對(duì)試驗(yàn)性高脂血癥大鼠血脂含量的影響摘要方法觀察刺榆總黃酮和水提取物預(yù)防性給藥4周對(duì)試驗(yàn)性高脂血癥大鼠血 脂含量的影響。結(jié)果①刺榆總黃酮分別以4. 5g/kg、l. 5g/kg和0. 5g/kg預(yù)防性灌胃給藥 4周。其中有兩個(gè)給藥劑量組(4. 5g/kg和1. 5g/kg)動(dòng)物的血清總膽固醇含量和低密度脂 蛋白膽固醇含量均明顯低于高脂模型組(為P <0.01或P <0. 05)。②刺榆水提取物分別 以2. 7g/kg、0. 9g/kg和0. 3g/kg預(yù)防性灌胃給藥4周。其中的2. 7g/kg劑最組動(dòng)物的血清 總膽固醇含量和低密度脂蛋白含量均明顯低于高脂模型組(均為P < 0. 05)，而且0. 9g/kg 劑量組動(dòng)物血清總膽固醇含量明顯低于高脂模型組(為P<0. 05)。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，刺 榆總黃酮和水提取物預(yù)防性給藥4周可明顯抑制試驗(yàn)性大鼠高脂血癥的形成，主要能明顯 降低血清總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇含量。結(jié)論刺榆總黃酮和水提取物對(duì)高脂血癥 具有預(yù)防治療作用；隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng)，具有相繼出現(xiàn)降低血清總膽固醇含量；降低低 密度脂蛋白膽固醇含量的作用。1 材料1. 1藥物刺榆總黃酮和水提取物，由上述方法獲得；血脂康膠囊，批號(hào)20060608，北京北大維信生物科技有限公司產(chǎn)品；膽固醇，批號(hào)060608，上海新興化工試劑研究所產(chǎn)品；丙硫氧嘧啶片，批號(hào)050901，上海復(fù)星朝輝藥業(yè)有限公司；豬油，由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)膳食科提供；血清總膽固醇(TC)試劑盒，批號(hào)070391、甘油三酯(TG)試劑盒，批號(hào)071461、
高密度脂蛋白膽固醇(HDL-cho)試劑盒，批號(hào)070141低密度脂蛋白膽固醇(LDL-cho)試劑盒，批號(hào)070151，以上試劑盒均為中生北控生物科技股份有限公司產(chǎn)品。1. 2動(dòng)物witar大鼠90只，雄性，體重220 250g。購自吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)動(dòng)物 中心，動(dòng)物合格證號(hào)SCXK(吉)-2003-0007。1. 3儀器FCANF129004型酶標(biāo)儀，奧地利產(chǎn)。2方法和結(jié)果動(dòng)物購入后，先飼養(yǎng)觀察，使其適應(yīng)環(huán)境1周。然后隨機(jī)分為正常對(duì)照組；高脂模 型組；陽性對(duì)照藥血脂康膠囊0. 54g/kg組；刺榆總黃酮4. 5g/kg、l. 5g/kg和0. 5g/kg組； 刺榆水提取物2. 7g/kg、0. 9g/kg和0. 3g/kg組，共9組，每組10只。除第1組動(dòng)物飼以常 規(guī)飼料，作為正常對(duì)照外；其余2 9組均飼以高膽固醇飼料，高膽固醇飼料配置如下在 87. 8%基礎(chǔ)飼料基礎(chǔ)上，加入2%膽固醇、10%豬油和0.2%丙硫氧嘧啶，投食量為25g/鼠 /天。各組動(dòng)物每天ig給藥一次，ig體積為10ml/kg;正常對(duì)照和高脂模型組動(dòng)物每天灌 胃等容量蒸餾水；分別于給藥后2周和給藥后4周。將大鼠禁食(不禁水)16小時(shí)，剪尾取 血，分離血清，測(cè)定血清總膽固醇(TC)；甘油三酯(TG)；高密度脂蛋白膽固醇(HDL-cho)和 低密度脂蛋白膽固醇(LDL-cho)含量。比較各組間血脂水平有無差異，所列數(shù)據(jù)以均數(shù)加 減標(biāo)準(zhǔn)差(表示；統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法采用組間t-檢驗(yàn)。各組動(dòng)物給藥后2周和給藥后 4周，其血脂水平檢測(cè)結(jié)果見表1、表2。表1.刺榆總黃酮和水提取物預(yù)防性給藥2周對(duì)試驗(yàn)性高脂血癥大鼠血脂含量的
影響(I士S)
權(quán)利要求
刺榆不同提取物的獲得刺榆總黃酮的制備刺榆嫩莖葉置于烘箱中45℃烘干，粉碎后過60目篩。然后加入3倍量95％乙醇60℃提取6小時(shí)，重復(fù)三次。合并提取液，將合并后的提取物濃縮至一定體積，加水成混懸液，依次用等量的石油醚和正己烷萃取，萃取后將水層蒸干，即得到乙醇提取物。再用95％的乙醇溶解過濾，將濾液減壓回收后蒸干。將蒸干后的乙醇提取物溶于水，過聚酰胺柱。依次用水、40％乙醇和95％乙醇洗脫。將上述洗脫液減壓回收后蒸干。其中40％乙醇洗脫液為制備的黃酮類物質(zhì)。刺榆水提取物的制備刺榆嫩莖葉置于烘箱中45℃烘干，粉碎后過60目篩。用水100℃提取2次，每次2小時(shí)，將合并的提取液濾過得到濾液，減壓回收至很少體積，蒸干得到水提取物。
2.刺榆總黃酮和水提取物在制備預(yù)防治療高脂血癥藥物中的用途。
3.刺榆總黃酮在制備抗氧化和清除羥基自由基藥物和功能性食品中的用途。
4.用在抗氧化和清除羥自由基藥物及治療高脂血癥藥物的組合物，其中含有治療有效 量的刺榆總黃酮及水提取物成分和藥學(xué)上的可接受的載體。
5.根據(jù)權(quán)利要求2、3、4所述的藥物，其特征在于所說的藥劑是任何一種藥劑學(xué)上所說 的劑型。
全文摘要
本發(fā)明公開了刺榆總黃酮和水提取物的制備方法，還公開了以下兩個(gè)藥理活性(1)刺榆總黃酮和水提取物對(duì)高脂血癥具有預(yù)防治療作用。且隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng)，相繼出現(xiàn)降低血清總膽固醇(TC)含量、降低低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量的作用。(2)刺榆總黃酮具有抗氧化和清除羥自由基的作用。本發(fā)明不僅適宜開發(fā)預(yù)防和治療抗衰老、心腦血管疾病、動(dòng)脈粥樣硬化、炎癥等與自由基密切相關(guān)疾病的新藥及功能性保健品，還適宜開發(fā)預(yù)防和治療高脂血癥的新藥及功能性保健品。
文檔編號(hào)A61K135/00GK101940604SQ200910067230
公開日2011年1月12日 申請(qǐng)日期2009年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月6日
發(fā)明者包海鷹, 李巖, 石利春 申請(qǐng)人:包海鷹