專利名稱：：一種注射用促肝細胞生長素凍干粉針劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種生物藥品的制備方法，尤其涉及一種注射用促肝細胞生長素凍干粉針劑的制備方法。
背景技術(shù)：
：多年來，研究人員一直在研究能阻止肝細胞壞死和能促進肝細胞再生的物質(zhì)，并且該領(lǐng)域的研究集中在肝臟本身所產(chǎn)生的肝再生刺激因子的上，其中促肝細胞生長素已被證明具有激肝細胞再生的作用。多組分小分子肽類混合物，分子量在10,000Da以下。其主要藥理作用是能明顯刺激新生肝細胞的DNA合成，改善肝臟枯否細胞的吞噬功能，對四氯化碳誘導(dǎo)的肝細胞損傷有較好的保護作用，對D-氨基半乳糖誘致的肝衰竭有明顯的提高存活率的作用。臨床用于各種重型病毒性肝炎，如急性、亞急性、慢性重癥肝炎的早期或中期的輔助治療。促肝細胞生長素自上市以來，己廣泛使用多年，臨床療效確切。促肝細胞生長素系采用勻漿、變性、離心、分級超濾等現(xiàn)代生物技術(shù)手段提取純化制備而成。提取純化后的母液經(jīng)過稀釋和加入適當?shù)妮o助成分后被制備成水針劑等各種劑型，用于臨床治療。目前，現(xiàn)有的促肝細胞生長素的注射劑多采用水針劑，而在實際應(yīng)用中，促肝細胞生長素在產(chǎn)品的儲存、運輸及銷售各個環(huán)節(jié)都要求環(huán)境保存溫度在一定范圍內(nèi)，而對于水針劑還需要保證在此溫度范圍內(nèi)不發(fā)生凍結(jié)，以避免對藥物有效成分的破壞。因此促肝細胞生長素注射液水針劑型在運輸和銷售時需要的溫控條件非常嚴格，從而使這一環(huán)節(jié)變得復(fù)雜，并且增加了成本。此外，促肝細胞生長素的水溶液在保存和使用過程中對光敏感，從而使產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定。為改善上述情況，現(xiàn)有技術(shù)將上述促肝細胞生長素注射液的水針劑型轉(zhuǎn)變?yōu)榉坩槃瑥亩岣吡舜俑渭毎L素的穩(wěn)定性。但這些現(xiàn)有技術(shù)中的促肝細胞生長素注射液粉針劑的制備方法存在生產(chǎn)周期長，產(chǎn)量低、操作工藝復(fù)雜、技術(shù)含量要求高等問題。
發(fā)明內(nèi)容有鑒于此，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于，克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，提供一種產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可控并且操作工藝簡單的注射用促肝細胞生長素凍干粉針劑的制備方法。本發(fā)明的制備方法包括①稱取促肝細胞生長素溶液10000體積分數(shù)，無菌條件下攪拌均勻；②向溶液中加入骨架劑，調(diào)pH值范圍為6.0-7.0，定容；③除菌過濾23次，收集濾液；④灌裝，凍干；即得到促肝細胞生長素凍干粉針劑的制備方法，其中，所述凍干的時間依次為誦4(TC為5小時，-40。C一15。C為6小時，-15匸~-5匸為3小時，-5°C5。C為2小時，5。C40。C為4小時，40。C為8.5小時，凍干總用時28.5小時。由于本發(fā)明將預(yù)凍溫度控制在促肝細胞生長素溶液共熔點以下10。C2(TC,保持5小時，使藥品凍實后再升溫，并且由于本發(fā)明中升華干燥時的供熱量控制得較好，適當放慢了升溫速度，控制溫度不超過共熔點，因而更好的防止了噴瓶。此外，如果干燥時間過長，也會造成產(chǎn)品外觀不合格，因此本發(fā)明凍干總用時28.5小時，所得產(chǎn)品質(zhì)地疏松，加水后迅速溶解，很快恢復(fù)藥液的原有特性。如果在開始凍結(jié)時降溫速度快，使制品形成細結(jié)晶，密度大，升華受到阻力較大，水分不易蒸發(fā)掉，制品會逐漸潮解致使體積收縮而造成外形不飽滿或形成團狀。如果凍結(jié)速度過慢，水晶成長時間較長，則易發(fā)生濃縮，致使藥物與溶劑分離、成品結(jié)構(gòu)不均勻。本發(fā)明經(jīng)反復(fù)多次試驗，制定了本品的最佳凍干曲線，所制得的產(chǎn)品具有足夠的強度，不破碎成粉，外形飽滿、不萎縮，色澤均勻，含水量低，多孔性好，加水后能迅速復(fù)溶。因此，本發(fā)明所涉及的制備方法所制得的產(chǎn)品劑量準確，外觀優(yōu)良。本發(fā)明所涉及的注射用促肝細胞生長素凍干粉針劑的制備方法中，在凍干時要加入骨架劑，該骨架劑優(yōu)選為甘露醇。甘露醇的用量為甘露醇用量為60mg~100mg/mL定容后促肝細胞生長素溶液。通過加入上述骨架劑甘露醇，可進一步提高采用本發(fā)明所涉及的制備方法制得的凍干產(chǎn)品的外觀形狀和疏松度，并且使產(chǎn)品的表面更加平整。優(yōu)選地，所述促肝細胞生長素溶液由促肝細胞生長素原液稀釋而成，所述促肝細胞生長素原液的用量為5mg15mg/mL定容后促肝細胞生長素溶液。所述除菌過濾包括至少一次0.45iam除菌過濾和至少一次0.22|im除菌過濾。優(yōu)選為，先后經(jīng)過一次0.45iam除菌過濾和一次0.22iim除菌過濾，經(jīng)過兩次除菌過濾過率，按照本發(fā)明方法制備的凍干粉針劑符合IOO級的注射藥物標準。因此本發(fā)明所涉及的注射用促肝細胞生長素凍干粉針劑的制備方法，其操作工藝筒單、技術(shù)含量要求不高、生產(chǎn)周期相對較短，并且所制得的產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可控，有利于長期貯存。圖1本發(fā)明實施例的注射用促肝細胞生長素凍干粉針劑的凍干曲線。具體實施例方式以下對本發(fā)明的實施例進行進一步詳細的說明，但本發(fā)明并非僅限于本實施例。實施例1.處方:處方1:促肝細胞生長素原液，g甘露醇2400g注射用水加至40000mL制成10000瓶處方2:促肝細胞生長素原液400g甘露醇3200g注射用水加至40000mL制成10000瓶處方1:促肝細胞一生長素原液600g甘露醇4000g注射用水加至40000mL制成10000瓶2.制備方法以處方2為例，稱取促肝細胞生長素原液400g，解凍成液體，用75%的酒精擦外包裝，紫外線消毒，無菌條件下解包合并，攪拌均勻，再向原液中加入3200g的骨架劑甘露醇溶解稀釋，將稀釋液在無菌條件下調(diào)pH值6.07.0之間，而后定容至40000mL,0.45pm過濾，收集濾液，無菌條件下再將濾液0.22inm除菌過濾，然后將濾液以4ml/支半加膠塞灌裝，進行凍干，從而得到成品促肝細胞生長素凍干粉針劑，其中，凍干的時間依次為預(yù)凍-40。C為5小時，4(TC一15。C為6小時，-15。C-5t:為36小時，-5匸~5匸為2小時,5'C40。C為4小時，40。C為8.5小時，凍干總用時28.5小時。本發(fā)明所涉及的骨架劑甘露醇的用量并非僅限于本實施例的320mg/瓶，也可以是240400mg/瓶之間的任意值，但優(yōu)選的是320mg/瓶。上述是以處方2為例，說明本發(fā)明的制備方法，對于其他處方的藥物，制備方法完全一致，只需要更加處方調(diào)整藥物中各組分的用量。[pH值對本品的影響]由于促肝細胞生長素注射液(預(yù)凍液)的pH范圍為6.0~7.0，并且本發(fā)明涉及的注射用促肝細胞生長素凍千粉針劑的制備方法中只加入了中性的骨架劑甘露醇，因此對注射用促肝細胞生長素凍干粉針劑溶液的pH幾乎沒有影響，故本發(fā)明注射用促肝細胞生長素凍干粉針劑pH范圍也設(shè)定為6.0~7.0。[甘露醇用量的考察]由于本品為凍干制劑，為了使藥品凍干后形成很好的外觀形狀和疏松度，故在凍干時應(yīng)加入一定量的骨架劑。本發(fā)明選用甘露醇作-骨架劑，并對不同的甘露醇用量進行了試驗，以按處方2制備的粉針劑為例，其試驗結(jié)果如表1所示。表l甘露醇用量試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>試驗結(jié)果表明，甘露醇用量在320mg/瓶時外觀性狀和疏松度最佳?？紤]到生產(chǎn)成本和方便性，本發(fā)明的處方工藝中甘露醇的用量優(yōu)選為320mg/瓶。對應(yīng)地，按照同樣的實驗方法，處方1中甘露醇的用量優(yōu)選為240mg/瓶；處方3中甘露醇的用量優(yōu)選為400mg/瓶。經(jīng)反復(fù)多次試驗，制定了本發(fā)明涉及產(chǎn)品的最佳凍干時間(如圖1所示)凍干的時間依次為-40。C為5小時，-40匸-15匸為6小時，-15。C-5。C為3小時，-5°(:5°(:為2小時，5。C4(TC為4小時，40C為8.5小時，凍干總用時28.5小時。按處方和工藝配制藥液，凍干，樣品外觀為淺黃色疏松塊狀物，表面平整，相應(yīng)地，按照處方1和處方3生產(chǎn)的粉針劑也是按照上述凍干曲線實現(xiàn)凍干。按以上處方2和工藝對本品進行了三批小試生產(chǎn)(每批配制500瓶)，三批樣品質(zhì)量均合格，檢驗結(jié)果見表2。表2樣品的檢驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>其中，多肽含量的測定按照藥典采用福林酚法測定，含多肽應(yīng)為標示量的90.0—115.0%。由此可見，三批產(chǎn)品的質(zhì)量均符合中國藥典規(guī)定(以下簡稱符合規(guī)定)，說明本品的處方和工藝是可行的。相應(yīng)地，按照處方1和處方3制備粉針劑，也可以在本試^^中得出類似的試驗結(jié)果，可見，三種處方產(chǎn)品的質(zhì)量均符合中國藥典規(guī)定(以下簡稱符合規(guī)定)，說明本品的處方和工藝是可行的。取供試樣品l批，進行影響因素試驗，分別于光照(4500Lx)、高溫(60°C)、高濕(RH92.5%)條件下放置10天，并分別于5天、10天取樣考察各項檢測指標，并與O天的檢測結(jié)果比較，檢查外觀色澤、酸度、水分、溶液的澄明度、蛋白質(zhì)、其它物質(zhì)、測定含量，結(jié)果見表表3影響因素試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>促肝細胞生廣東省藥物研究所制國家標準第九主藥長素原液藥廠生化原料車間冊廣東省藥物研究所制中國藥典2000注射用水溶劑藥廠版二部P428中國藥典2000甘露醇青島膠南明月公司溶劑版二部P89最后所應(yīng)當說明的是，以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非對本發(fā)明保護范圍的限制，盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。1權(quán)利要求1、一種注射用促肝細胞生長素凍干粉針劑的制備方法，其特征在于該制備方法包括以下步驟①稱取促肝細胞生長素溶液10000體積分數(shù)，無菌條件下攪拌均勻；②向溶液中加入骨架劑，調(diào)pH值范圍為6.0～7.0，定容；③除菌過濾2～3次，收集濾液；④灌裝，凍干；其中，所述凍干的時間依次為-40℃為5小時，-40℃～-15℃為6小時，-15℃～-5℃為3小時，-5℃～5℃為2小時，5℃～40℃為4小時，40℃為8.5小時，凍干總用時28.5小時。2、如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述骨架劑為甘露醇。3、如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于所述甘露醇用量為60mg~100mg/mL定容后促肝細胞生長素溶液。4、如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述促肝細胞生長素溶液由促肝細胞生長素原液稀釋而成，所述促肝細胞生長素原液的用量為5mg~15mg/mL定容后促肝細胞生長素溶液。5、如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述除菌過濾包括至少一次0.45"m除菌過濾和至少一次0.22|um除菌過濾。全文摘要本發(fā)明涉及一種注射用促肝細胞生長素凍干粉針劑的制備方法，該制備方法包括以下步驟稱取促肝細胞生長素溶液10000體積分數(shù)，無菌條件下攪拌均勻；向溶液中加入骨架劑，調(diào)pH值范圍為6.0～7.0，定容；除菌過濾2～3次，收集濾液；灌裝，凍干，其中，所述凍干的時間依次為-40℃為5小時，-40℃～-15℃為6小時，-15℃～-5℃為3小時，-5℃～5℃為2小時，5℃～40℃為4小時，40℃為8.5小時，凍干總用時28.5小時。文檔編號A61K35/37GK101670092SQ20091004236公開日2010年3月17日申請日期2009年9月1日優(yōu)先權(quán)日2009年9月1日發(fā)明者張隆鑫申請人:張隆鑫