專利名稱：富烯和富瓦烯類似物及它們在治療癌癥中的應(yīng)用的制作方法
專利說明富烯和富瓦烯類似物及它們在治療癌癥中的應(yīng)用 發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明涉及治療原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性癌癥的新方法和組合物。這些方法和組合物使用富烯和/或富瓦烯。這些化合物和包含這些化合物的藥物組合物對于治療人的原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性癌癥是特別有用的。本發(fā)明也包括施用該治療性化合物或組合物的各種模式。
本發(fā)明是在政府支持下完成的，國立衛(wèi)生研究院頒發(fā)的授權(quán)號是AR47901。政府對本發(fā)明具有一定權(quán)利。

背景技術(shù)：
癌癥的首要特征在于，給定正常組織產(chǎn)生的異常細(xì)胞數(shù)量增加，這些異常細(xì)胞侵入鄰近的組織，以及惡性細(xì)胞通過淋巴或生血擴散到局部淋巴結(jié)和遠(yuǎn)端位點(轉(zhuǎn)移)。癌癥是一個多步驟的過程，從較小的癌前變化開始，在一定條件下可以發(fā)展成瘤形成。惡性內(nèi)皮腫瘤在涉及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和其主要的促有絲分裂受體血管內(nèi)皮生長因子受體2的自分泌環(huán)的設(shè)置中出現(xiàn)。
活性氧簇(ROS)據(jù)信是癌癥中生長和血管發(fā)生的介導(dǎo)子。ROS增多通常與細(xì)胞例如Ras-變異細(xì)胞和用生長因子處理的細(xì)胞生長相關(guān)。當(dāng)非變異細(xì)胞對調(diào)節(jié)ROS產(chǎn)生的生長因子/細(xì)胞因子應(yīng)答時，培養(yǎng)中的腫瘤細(xì)胞通常會過度地產(chǎn)生H2O2。
NAD(P)H氧化酶(Nox)是一種細(xì)胞表面蛋白，具有對苯二酚(NADH)氧化酶和蛋白質(zhì)二硫化物-硫醇互變活性。一般地，大多數(shù)形式的酶可以同等有效地利用NADH或NADPH。有很多形式的Nox，包括Nox 1-5、二元氧化酶1和2(Duox 1和2)以及p22(phox)、p47(phox)和小G蛋白Rac1。
Nox據(jù)信會導(dǎo)致在某些癌癥中ROS的水平升高。產(chǎn)生活性氧的Nox酶涉及血管生成開關(guān)，Nox抑制劑對于體外ang-2產(chǎn)生和體內(nèi)bEnd.3腫瘤生長具有作用，可以使用Nox酶抑制劑藥理性地抑制ang-2產(chǎn)生，所述Nox酶抑制劑幾乎消除了體內(nèi)bEnd.3血管瘤的生長。因此，靶向ang-2產(chǎn)生的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)阻滯可以用于在體內(nèi)治療人的血管瘤。Journal of Investigative Dermatology advance onlinepublication，1 June 2006；doi10.1038/sj.jid.5700413。
對于特定的Nox酶，據(jù)顯示，Nox1轉(zhuǎn)染到前列腺癌細(xì)胞株中引人注目地增強了腫瘤生長(Arbiser等人PNAS 99715-720，2001)，前列腺瘤顯示出H2O2水平升高。此外，近來發(fā)現(xiàn)，前列腺瘤顯示了較高水平的Nox1和過氧化氫(Lim等人，Prostate.2005Feb1；62(2)200-7)。Nox1依賴性過氧化物產(chǎn)生也顯示出會控制結(jié)腸腺癌細(xì)胞遷移(Sadok等人，Biochim.Biophys.Acta.1783(1)23-33(Jan 2008))。Sadok證明了，抑制或向下調(diào)節(jié)Nox1導(dǎo)致過氧化物產(chǎn)生減少以及α2β1整連蛋白膜利用率下降。因此，在前列腺癌中Nox蛋白水平和ROS是相關(guān)的，Nox1/H2O2的增加與致腫瘤性的增加相關(guān)。
Nox4據(jù)信涉及癌細(xì)胞例如前列腺癌細(xì)胞凋亡的抑制(Vaquero等人，J Biol Chem.2004Aug 13；279(33)34643-54)。Vaquero建議，由NAD(P)H氧化酶(極可能是Nox4)產(chǎn)生的生長因子誘導(dǎo)的ROS保護(hù)前列腺癌細(xì)胞免于凋亡，在某些前列腺細(xì)胞(即MIA PaCa-2和PANC-1細(xì)胞)中用Nox4反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染抑制了NAD(P)H氧化酶的活性和ROS產(chǎn)生，并會在這些細(xì)胞中刺激凋亡。
Akt是PI3K的一種下游信號分子，已知它會誘導(dǎo)產(chǎn)生ROS的酶Nox4表達(dá)。一個研究將Akt引入到放射狀生長的WM35黑素瘤以檢驗Akt的過度表達(dá)是否足以將細(xì)胞從放射狀生長轉(zhuǎn)變?yōu)榇怪鄙L。Akt的過度表達(dá)導(dǎo)致VEGF向上調(diào)節(jié)，過氧化物ROS產(chǎn)生增加以及轉(zhuǎn)變?yōu)楦@著的糖酵解代謝。皮下植入過度表達(dá)Akt的WM35細(xì)胞產(chǎn)生了體內(nèi)快速生長的腫瘤，而媒介控制細(xì)胞(vector control cells)不會產(chǎn)生腫瘤。Arbiser等人，J.Clini.Invest.117(10)2762-2765(2007)。該數(shù)據(jù)支持了下列論斷抑制Akt可以抑制向下調(diào)節(jié)Nox 4的產(chǎn)生，然后抑制過氧化物產(chǎn)生，并由此治療癌癥。
Duox 1和2是氣道內(nèi)皮的主要Nox種類，據(jù)信它們是氣道中活性氧產(chǎn)生的主要來源之一(Luxen等人，Cancer Res.2008Feb 15；68(4)1037-45)。因此，對這些酶的抑制對于治療人肺癌是非常有用的。
一些作者根據(jù)特征將Nox分為兩類。一種是激素-不敏感性和藥物-響應(yīng)性(即，通過奎寧-位點抑制劑例如辣椒素或抗腫瘤的磺酰脲類，LY181984)，稱作“tNox”，其對于癌細(xì)胞具有特異性。另一種是與非變異細(xì)胞的質(zhì)膜相連的藥物中立性構(gòu)型，稱作“CNox”(Bruno等人，1992，Biochem.J.284625-628及Morre和Morre，1995，Protoplasma184188-195)。
癌細(xì)胞顯示藥物敏感性以及激素和生長因子中立性(tNox)，還有藥物抑制的以及激素和生長因子依賴性(CNox)活性，而非變異細(xì)胞僅有藥物抑制性的激素和藥物響應(yīng)性CNox。像癌細(xì)胞的tNox一樣，CNox能夠氧化NADH，但是具有受激素和生長因子調(diào)節(jié)的活性。因此，一些作者創(chuàng)立的理論認(rèn)為，tNox的抑制劑(據(jù)信包括一種或多種上述的Nox酶，例如Nox4)可以用于治療癌癥。
除了治療癌癥，Nox抑制劑也有望為涉及活性氧的很多其他的炎性、變性和血管疾病提供治療效果。
例如，據(jù)報道，Nox在視網(wǎng)膜血管炎癥中發(fā)揮作用，而且使缺血誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和視網(wǎng)膜新血管形成增加(Al-Shabrawey等人，Invest，Ophthalmol，Vis，Sci.(2008))。使用野生型小鼠、缺乏Nox2的小鼠和用NADPH氧化酶抑制劑夾竹桃麻素治療的小鼠，在內(nèi)毒素血癥和鏈脲霉素誘導(dǎo)的糖尿病模型中進(jìn)行了研究，證明了清除Nox2顯著抑制了內(nèi)毒素血癥和糖尿病誘導(dǎo)的ICAM-1表達(dá)增加和白細(xì)胞停滯。夾竹桃麻素治療在預(yù)防糖尿病誘導(dǎo)的ICAM-1表達(dá)增加、白細(xì)胞停滯和血-視網(wǎng)膜屏障崩潰中與清除Nox2一樣有效，提示Nox2是糖尿病性視網(wǎng)膜病的這些早期現(xiàn)象的主要原因。
增加ROS引導(dǎo)和抗氧化劑抑制了視網(wǎng)膜色素上皮中凋亡細(xì)胞的損失(Glotkin等人，2006 IOVS，474614-4623)。人們認(rèn)為這會在干型與年齡有關(guān)的黃斑變性的發(fā)展中發(fā)揮作用。同樣，使用抗氧化劑也在具有AMD的大脈網(wǎng)膜小疣的患者中減緩發(fā)展成為新血管形成(Coleman和Chew，2007，Curr.Opin.Ophthalmol.18(3)220-223)。
NADP+還原酶降低了視黃醛和視黃酸的濃度，接著就可以保護(hù)細(xì)胞免于視黃醛誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡(Lee等人，J.Biol.Chem.，282(49)35621-8(2007)。廣義上講，抑制NADPH氧化酶與增加NADP+還原酶的比率具有相同的效果，對于視黃醛或視黃酸介導(dǎo)的視網(wǎng)膜變性具有有益效果。
在早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病的模型中，特異性抑制NADPH氧化酶顯示出可以減少血管發(fā)生(A1-Shabraway等人，2005，Am.J.Pathol.167(2)599-607和Saito等人，2007，Mol.Vision，13840-853)。此外，在糖尿病動物中觀察到了ROS增加，這種增加與VEGF活性增強相關(guān)。類似地，人們認(rèn)為，氧化應(yīng)激是糖尿病性視網(wǎng)膜病發(fā)生的重要因素(Kowluru和Chan，2007，Expt.Diabetes Res..Article ID 43603)。
the anatomic basis of visual field loss.ROS在青光眼的發(fā)生中具有兩種不同的效果。首先，ROS增加導(dǎo)致小梁網(wǎng)的細(xì)胞質(zhì)增加(并且由此使眼內(nèi)壓增加，Sacca等人，2007，Exp.Eye Res.84(3)389-399)。隨著時間的推移，活性氧簇的增加也被認(rèn)為會刺激視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡(Tezel，2006，Prog.Retin.Eye Res.25(5)490-513)，喪失了視野的解剖學(xué)基礎(chǔ)。
在非眼部皮膚組織中，來自花粉的NADPH氧化酶顯示出了可以延長變應(yīng)性應(yīng)答。抑制NADPH氧化酶減小了肥大細(xì)胞脫顆粒作用，可以用于變應(yīng)性眼病(Nishikawa等人，2007，BBRC，362(2)504-509)。
盡管缺乏抑制NADPH氧化酶會為一些所述眼病提供治療效果的直接實驗證據(jù)，但是抑制NADPH氧化酶有望改變細(xì)胞的氧化還原平衡，這樣可以通過間接手段在各種疾病中具有治療性。
NADPH氧化酶的抑制劑對于治療干眼也是有效的，這是基于下列觀察NADPH氧化酶在角膜上皮和基質(zhì)細(xì)胞中構(gòu)成性地表達(dá)(O′Brien等人，2006，IOVS，47853-863)。作者建議，過氧化陰離子的產(chǎn)生會在角膜的炎癥中發(fā)揮作用。
至于特異性的Nox酶在炎性疾病中的作用，據(jù)信包含Nox2-的NADPH氧化酶和Akt激活會在加壓素II-誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大中發(fā)揮關(guān)鍵作用(Physiol.Genomics 26180-191，2006)。
因此，據(jù)信Nox會在一些癌癥和炎性疾病中導(dǎo)致ROS水平升高，用適當(dāng)?shù)囊种苿┲委煂τ谥委熯@些癌癥和炎性疾病是有用的。
仍然需要不具有一般由非選擇性常規(guī)化療劑導(dǎo)致的不良作用的癌癥治療劑。此外還需要與活性氧簇有關(guān)的炎性、變性和血管性疾病的其他治療劑。本發(fā)明提供了這樣的化合物、組合物和方法。
發(fā)明簡述 公開了化合物，包含這些化合物的藥物組合物，其制備方法及應(yīng)用。在一個實施方案中，該化合物是富烯和/或富瓦烯類似物，其可以是通過環(huán)戊二烯基陰離子與在適當(dāng)?shù)闹虚g體上的一個或多個酮或醛基反應(yīng)而形成的。在另一個實施方案中，該化合物是富烯和/或富瓦烯類似物，其可以是通過包含富烯和/或富瓦烯的羧酸(或者酸的鹵化物或其酸酐)與在糖、核苷、核苷酸或氨基酸、或寡核苷酸和肽(包括核苷酸或氨基酸)上的羥基、硫醇或胺基反應(yīng)而形成的。
代表性的化合物包括類固醇和類固醇前體例如膽固醇、黃體酮、睪酮或雌激素，染料例如靛青和苯甲酮，姜黃素以及包含醛和酮的姜黃烯類的富烯和/或富瓦烯類似物。
也公開了這些包含富烯和/或富瓦烯的化合物的合成、特征和抗腫瘤能力的評價。
不希望受特定理論的限制，據(jù)信，這些化合物通過下列機制中的一種或多種來發(fā)揮功能 a)抑制所有形式的Nox， b)特異性抑制Nox 1-5， 特異性抑制Nox 2和/或Nox 4(后者在癌細(xì)胞中比在正常細(xì)胞中更為普遍)， d)抑制Nox酶，其在癌細(xì)胞中比在正常細(xì)胞中更為普遍，Nox酶下文稱作tNox， e)抑制ROS，和 f)刺激過氧化物清除劑，例如清除酶系統(tǒng)的促酶、過氧化物歧化酶I(Zn2+/Cu2+SOD)和II(MN-SOD)，以及谷胱甘肽過氧化物酶。
在本文的實施例中給出了這些化合物可以抑制ROS的證據(jù)，它表明，電子自旋共振譜證明了當(dāng)這些化合物加到過氧化物歧化酶上，它們改變了過氧化物歧化酶的光譜，顯然將其轉(zhuǎn)變成自由基。
用這些化合物中的一種或多種治療選擇性地殺死了癌細(xì)胞，而不會殺死健康細(xì)胞，因此提供了選擇性的抗癌療法。最重要的是，這些化合物可以有效對抗已經(jīng)變?yōu)檗D(zhuǎn)移性的癌細(xì)胞。如上所討論，殺死癌細(xì)胞的機制包括抑制tNOX，而不會顯著影響CNox，這樣有效地抑制了細(xì)胞增殖，特別是在轉(zhuǎn)移性腫瘤中更是如此，或者抑制任何的Nox酶例如在癌細(xì)胞中普遍存在的Nox4。也就是說，在一些實施方案中，Nox是在癌細(xì)胞中而非正常細(xì)胞中選擇性表達(dá)的物質(zhì)，在其他實施方案中，Nox在癌細(xì)胞中表達(dá)的濃度高于正常細(xì)胞。
藥物組合物包含有效量的本文所述的化合物和藥學(xué)可接受的載體或賦形劑。當(dāng)以有效量使用時，該化合物可以發(fā)揮治療劑的作用，預(yù)防和/或治療種類廣泛的癌癥，特別是轉(zhuǎn)移性癌癥，據(jù)信在這種作用中該化合物是安全和有效的?？梢灾委熀?或預(yù)防的代表性的癌癥包括黑素瘤，白血病，非小細(xì)胞性肺、結(jié)腸、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)、腎、卵巢、乳腺和前列腺癌。其他藥物組合物可以用于治療眼病。
在下文的詳述和實施例中將會更詳細(xì)地解釋本發(fā)明的前述和其他方面。
附圖簡述 附

圖1的圖，代表的是各種受試化合物對Nox2活性的抑制，這是在用不同濃度的載體對照物或各種受試化合物處理的PMA-刺激的Cos-phox細(xì)胞中通過H2O2的產(chǎn)生確定的。
附圖2的圖，顯示的是姜黃素富烯對于體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的效果(平均腫瘤體積)。
附圖3的圖，顯示的是用載體或或富烯-5(4-(環(huán)戊-2，4-二烯亞基甲基)-5-甲基-1H-咪唑)治療并暴露于暗光或亮光下的小鼠的平均ERG b-波振幅(μm)。
附圖4是過氧化物歧化酶和富烯5(“靛青富烯”)的電子自旋共振(“ESR”)譜。
發(fā)明詳述 公開了化合物，包含該化合物的藥物組合物，其制備方法及應(yīng)用。
下列定義用于理解如本文所述的本發(fā)明的邊界和范圍。
本文使用的“烷基”是指直鏈或支鏈的烷基，包括C1-C8，優(yōu)選C1-C5，例如甲基、乙基或異丙基；“取代的烷基”是指還具有一個或多個取代基例如羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、芳基、雜環(huán)、鹵素、氨基、羧基、氨甲酰基、氰基等等的烷基；“烯基”是指直鏈或支鏈并具有至少一個碳碳雙鍵的的烴基，包括C1-C8，優(yōu)選C1-C5；“取代的烯基”是指還具有一個或多個上述定義的取代基的烯基；“環(huán)烷基”是指包含3到8個碳原子，優(yōu)選3到6個碳原子的飽和或不飽和、非芳香的、包含環(huán)的基團(tuán)；“取代的環(huán)烷基”是指還具有一個或多個上述定義的取代基的環(huán)烷基；“芳基”是指具有6到10個碳原子的芳香基；“取代的芳基”是指還具有一個或多個上述定義的取代基的芳基；“烷芳基”是指被烷基取代的芳基；“取代的烷芳基”是指還具有一個或多個上述定義的取代基的烷芳基；“芳烷基”是指被芳基取代的烷基；“取代的芳烷基”是指還具有一個或多個上述定義的取代基的芳烷基；“雜環(huán)基”是指包含一個或多個雜原子(例如O，N，S)作為環(huán)結(jié)構(gòu)的一部分并且在環(huán)上具有2到7個碳原子的飽和或不包含環(huán)基；“取代的雜環(huán)基”是指還具有一個或多個上述定義的取代基的雜環(huán)基。
I.化合物 該化合物是富烯和/或富瓦烯類似物，這些化合物的前藥或代謝產(chǎn)物，及其藥學(xué)可接受的鹽。在一個實施方案中，該化合物一般落入下文提供的通式之一中
其中 X是O、S、CH2或NR′，其中各個R′分別是氫、C1-6烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、或芳烷基(例如芐基)；并且 該芳基或雜芳環(huán)可以在任何的游離位置被H或如本文所述的取代基G取代，并且x和y是0到3的整數(shù)。
在其他實施方案中，該化合物是化合物的醚、硫醚或胺衍生物，其中化合物最初包括羥基、硫醇或氨基，其中如本文所述，該基團(tuán)已與包括富烯或富瓦烯部分和羧酸或活化的羧酸部分的化合物反應(yīng)。一種包含富烯的羧酸如下所示
其中羰基與中間體上的羥基、硫醇或氨基相連形成酯、硫酯或酰胺鍵。例如可以通過使用不同的包含酮或醛的羧酸，通過與環(huán)戊二烯基陰離子的類似反應(yīng)制備類似的化合物。
可以用于通過與包含富烯-或富瓦烯的羧酸、酸的鹵化物或酸酐反應(yīng)制備本文所述的化合物的代表性的包含羥基、硫醇和胺的部分包括天然或合成的糖、多元醇、聚亞烷基二醇例如聚乙二醇、核苷和核苷酸(例如，通過與這些化合物上的3′和/或5′-羥基反應(yīng))、短(即25mer或更少的)寡核苷酸，包括包含核苷，羥基、硫醇和/或胺的氨基酸、包括這些氨基酸的肽和蛋白質(zhì)，以及下式的化合物
或其他如上所述的包含富烯-或富瓦烯的羧酸部分或活化的羧酸部分，條件是至少一個R不是H。
代表性的取代基G包括C1-6烷基(包括環(huán)烷基)、烯基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、鹵素(例如，F(xiàn)、Cl、Br或I)、-OR、-NR′R″、-CF3、-CN、-NO2、-C2R′、-SR′、-N3，-C(＝O)NR′R″、-NR′C(＝O)R″、-C(＝O)R′、-C(＝O)OR′、-OC(＝O)R′、-OC(＝O)N R′R″、-NR′C(＝O)OR″、-SO2R′、-SO2NR′R″和-NR′SO2R″，其中R′和R″獨立地是氫、C1-6烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或芳烷基(例如芐基)； 該化合物可以發(fā)生不同程度的對映體過量，可以用已知的手性分離技術(shù)精制外消旋混合物。
該化合物可以是游離堿或鹽(例如，作為藥學(xué)可接受的鹽)的形式。適當(dāng)藥學(xué)可接受的鹽的例子包括無機酸的加成鹽例如硫酸鹽、磷酸鹽和硝酸鹽；有機酸的加成鹽例如乙酸鹽、二氯乙酸鹽、半乳糖二酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、羥乙酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽和抗壞血酸鹽；與酸性氨基酸的鹽例如天冬氨酸鹽和谷氨酸鹽；堿金屬鹽例如鈉或鉀鹽；堿土金屬鹽例如鎂和鈣鹽；銨鹽；有機堿的鹽例如三甲胺、三乙胺、吡啶、甲基吡啶、二環(huán)己胺和N，N′-二芐基乙二胺的鹽；以及與堿性氨基酸例如賴氨酸和精氨酸的鹽。這些鹽在一些情況下可以是水合物或乙醇的溶劑化物。鹽的化學(xué)計量隨著組分的性質(zhì)而各異。
代表性的化合物包括下列化合物















上述鑒定為靛青富烯的化合物在本文中也稱作“富烯-5”。
如果需要，這些化合物中的一些可以通過在該結(jié)構(gòu)的氮原子上用C1-6烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、或芳烷基部分取代氫，或用環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或芳烷基部分取代烷基部分而具有更大的疏水性。例子包括如下化合物
II.制備化合物的方法 在一些實施方案中，可以通過將環(huán)戊二烯鈉與醛或酮反應(yīng)來制備該化合物。使用這種途徑，可以由輕易可得的包含酮或醛的原料制備很多富烯類。
代表性的醛和酮如下文所提供















其中任何的芳基/雜芳環(huán)可以被一個或多個如本文所述的取代基取代，胺(即，-NH基)可以被本文所述的R′基取代。
在其他實施方案中，可以通過將羥基、硫醇或胺基與包含富烯或富瓦烯部分和羧酸或活化的羧酸部分的化合物反應(yīng)來制備該化合物。
一般地，在脫水劑和/或堿存在下，羥基、硫醇或胺基與包含富烯-或富瓦烯的羧酸或其活化的衍生物(例如，酸的氯化物或酸酐)反應(yīng)。各種條件都是可以的。
使用酸催化劑，羧酸可以與羥基或酯基直接偶合，隨后形成水(典型地通過共沸蒸餾除去)，或者典型地在叔銨例如三乙胺存在下與酸的鹵化物或酸酐反應(yīng)。所得的化合物具有酯或硫酯鍵，通過該鍵與富烯和/或富瓦烯相連。
使用用于形成酰胺鍵的各種試劑中的一種(例如，在肽合成中使用的那些)可以將具有游離胺官能團(tuán)的中間體與包含羧酸、包含富烯或富瓦烯的部分偶合。這些試劑包括N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)磷六氟磷酸鹽(BOP)、(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷磷六氟磷酸鹽(PyBOP)、O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-二(四亞甲基)脲六氟磷酸鹽(HBPyU)、O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽(HBTU)，O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸鹽(TBTU)，和含有1-羥基苯并三唑(HOBt)的(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺)(EDCI)。在一些情況下，這些試劑可以作為聚合物供體的變體從商業(yè)上購得，它們可以極大地促進(jìn)偶合產(chǎn)物的分離。這些試劑的一個例子是與聚苯乙烯鍵合的N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(PS-DCC)。
可以例如通過將包含羧酸的部分與任意的各種試劑例如亞硫酰氯或草酰氯反應(yīng)來制備酸的鹵化物。酸的氯化物和羧酸之間的反應(yīng)典型地是在叔胺(一般是受阻的一種)存在下進(jìn)行的。
典型地，在形成酯、硫酯或酰胺鍵后，除去任何的保護(hù)基(例如，叔丁氧羰基或芐基)以得到所需的化合物。保護(hù)基和除去它們的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，例如在T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第3版，John Wiley &Sons，New York(1999)中進(jìn)行了描述。
用于制備本文所述的化合物的包含富烯和/或包含富瓦烯的羧酸是商業(yè)購得的，或者可以由商業(yè)可購得的原料制備?？梢酝ㄟ^涉及所需的特定部分和特定取代的各種合成方法來制備商業(yè)無法購得的那些。合成方法的各種改變對于有機合成領(lǐng)域的技術(shù)人員將是顯而易見的。
例如，一種包含富烯和/或包含富瓦烯的羧酸如下所示
其中羰基與中間體上的羥基、硫醇或胺基相連以形成酯、硫酯或酰胺鍵?？梢酝ㄟ^，例如將適當(dāng)保護(hù)的3-酮丁酸(或相應(yīng)的丁酸鹽)與環(huán)戊二烯基陰離子反應(yīng)形成富烯環(huán)來制備該中間體。可以將該羧酸鹽酸化以重新形成羧酸部分，如果需要，其可以進(jìn)一步反應(yīng)以形成酸酐或酸的鹵化物。使用上述的酯化、硫酯化或酰胺化化學(xué)，該羧酸、酸的鹵化物或酸酐中間體可以用于形成事實上任何包含羥基、硫醇或胺的化合物的富烯類似物。
上述中間體僅是可以用于將富烯或富瓦烯部分加入到化合物上的很多化合物中的一種。例如，可以通過使用不同的包含酮或醛的羧酸，使用環(huán)戊二烯基陰離子，通過類似反應(yīng)來制備類似的化合物。
可以用于制備本文所述的化合物通過與包含富烯或富瓦烯的羧酸、酸的鹵化物或酸酐反應(yīng)的代表性的包含羥基、硫醇或胺的部分如下所述。
天然或合成的糖、多元醇、聚亞烷基二醇例如聚乙二醇、核苷和核苷酸(例如，通過與這些化合物上的3′和/或5′-羥基反應(yīng))、短(即25mer或更少的)寡核苷酸，包括包含這些核苷、羥基、硫醇和/或胺的氨基酸、包括這些氨基酸的肽和蛋白質(zhì)，以及下式的化合物
或其他如上所述的包含富烯或富瓦烯的羧酸部分或活化的羧酸部分，條件是至少一個R不是H。
本領(lǐng)域技術(shù)人員很容易即可理解將其他取代基加入到用作原料的環(huán)戊二烯環(huán)上以制備富烯/富瓦烯，很容易即可意識到富烯/富瓦烯骨架中的其他位置。這些取代基本身可以提供有用的性質(zhì)或者用作進(jìn)一步合成操作的著手點。
典型地可以在形成環(huán)戊二烯鈉(即，通過加入堿)之前將取代基加入到環(huán)戊二烯上，所述環(huán)戊二烯鈉與適當(dāng)?shù)耐蛉┓磻?yīng)形成本文所述的化合物，或形成包含富烯/富瓦烯的羧酸/酸的鹵化物/酸酐，再與羥基、硫醇或胺基反應(yīng)以形成本文所述的化合物。
例如，可以用Cram和Partos，Electrophilic Substitution和Other Reactions of Diazocyclopentadiene，J.A.C.S.p.1273-1277(1962)的技術(shù)制備重氮基環(huán)戊二烯。
根據(jù)特定的鹵素而異，可以使用各種已知的方法將重氮基環(huán)戊二烯鹵化。適當(dāng)?shù)脑噭┑睦影ㄔ跐釮Br中的溴/水、亞硫酰氯、pyr-ICl、氟和Amberlyst-A。
通過重氮基環(huán)戊二烯中間體，可以由相應(yīng)的氨基化合物合成很多其他的類似物，所述類似物在重氮基環(huán)戊二烯的重氮位上具有取代基。可以用已知的化學(xué)，例如如上所述來制備重氮基環(huán)戊二烯。
重氮基環(huán)戊二烯的硝化產(chǎn)生了兩種異構(gòu)體，2-硝基和3-硝基環(huán)戊二烯化合物。苯重氮基四氟硼酸鹽導(dǎo)致了2-取代的產(chǎn)物，而溴化得到了四溴重氮基環(huán)戊二烯。用碘化汞汞化可以得到2，5-二碘重氮基環(huán)戊二烯。
通過典型地在酸存在下與亞硝酸鹽反應(yīng)可以將硝基衍生物還原成胺化合物。使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的一般技術(shù)，可以由重氮鹽中間體制備其他取代的類似物，包括但不限于，羥基、烷氧基、氟、氯、碘、氰基和巰基。例如，可以通過將重氮鹽中間體與水反應(yīng)，保護(hù)所得到的羥基，形成環(huán)戊二烯基陰離子并將其與適當(dāng)?shù)娜┗蛲磻?yīng)來制備羥基-富烯類似物。同樣，可以通過重氮基環(huán)戊二烯與醇的反應(yīng)來制備烷氧基富烯類似物。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所知，重氮基環(huán)戊二烯也可以用于合成氰基或鹵素化合物。使用在Hoffman等人，J.Med.Chem.36953(1993)中所述的技術(shù)可以獲得巰基取代。接著通過與氫化鈉和適當(dāng)?shù)耐榛宸磻?yīng)將這樣產(chǎn)生的硫醇轉(zhuǎn)變?yōu)橥榱蚧〈?。然后氧化，得到砜。使用有機合成領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)，通過將相應(yīng)的氨基化合物與適當(dāng)?shù)乃狒蛩岬穆然锓磻?yīng)，可以制備上述化合物的酰氨基類似物。
羥基取代的類似物可以用于通過與適當(dāng)?shù)乃帷⑺岬穆然锘蛩狒磻?yīng)來制備相應(yīng)的烷酰氧基取代的化合物。同樣，羥基化合物是通過在缺電子芳香環(huán)上親核芳香取代的芳氧基和雜芳氧基的前體。這些化學(xué)是有機合成領(lǐng)域的技術(shù)人員公知的。也可以通過用烷基鹵化物和適當(dāng)?shù)膲A烷基化或者通過Mitsunobu化學(xué)，由羥基化合物制備醚衍生物，其中典型地使用三烷基或三芳基膦和偶氮二甲酸二乙酯。典型的Mitsunobu條件參見Hughes，Org.React.(N.Y.)42335(1992)和Hughes，Org.Prep.Proced.Int.28127(1996)。
氰基取代的類似物可以水解，得到相應(yīng)的羧氨基取代的化合物。進(jìn)一步水解導(dǎo)致形成相應(yīng)的羧酸取代的類似物。用氫化鋰鋁還原氰基取代的類似物得到相應(yīng)的氨甲基類似物。可以使用有機合成領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的技術(shù)，通過與適當(dāng)?shù)耐榛嚪磻?yīng)，由相應(yīng)的羧酸取代的類似物制備?；〈念愃莆?。
可以通過與適當(dāng)?shù)拇己退岽呋瘎┓磻?yīng)，將羧酸取代的類似物轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的酯?？梢杂门饸浠拟c或氫化鋰鋁還原具有酯基的化合物，產(chǎn)生相應(yīng)的羥甲基取代的類似物。接著，使用常規(guī)技術(shù)，通過與氫化鈉和適當(dāng)?shù)耐榛u化物反應(yīng)將這些類似物轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂忻巡糠值幕衔铩？商娲?，羥甲基取代的類似物可以與甲苯磺酰氯反應(yīng)，得到相應(yīng)的甲苯磺酰氧甲基類似物，通過連續(xù)用亞硫酰氯和適當(dāng)?shù)耐榛诽幚砜梢詫⑵滢D(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的烷基氨?；愃莆?。已知這些酰胺中的一些容易發(fā)生親核酰基取代，形成酮。
羥基取代的類似物可以通過與N-烷基或N-芳基異氰酸酯(鹽)反應(yīng)，用于制備N-烷基或N-芳基氨甲酰氧基取代的化合物。使用有機合成領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的技術(shù)，氨基取代的類似物可以通過分別與烷基氯甲酸酯和N-烷基-或N-芳基異氰酸酯反應(yīng)，用于制備烷氧基羧氨基(carboxamido)取代的化合物和脲衍生物。
類似地，可以用已知的化學(xué)，包括上述討論的反應(yīng)取代苯環(huán)(和吡啶、嘧啶、吡嗪和其他雜芳環(huán))。例如，硝基苯上的硝基可以與亞硝酸鈉反應(yīng)，形成重氮鹽，如上述討論處理該重氮鹽以在苯環(huán)上形成各種取代基。
III.藥物組合物 本文所述的化合物可以并入到藥物組合物中，用于在易患這樣的疾病或病癥的患者中預(yù)防疾病或病癥，和/或治療患疾病或病癥的患者。本文所述的藥物組合物包括本文所述的一種或多種富烯和/或富瓦烯類似物，和/或其藥學(xué)可接受的鹽。旋光活性化合物可以使用外消旋混合物、純對映體或者各種對映體純的化合物。
施用該化合物的方式可以不同。該組合物優(yōu)選是口服(例如，在溶劑例如水性或非水性液體中以液體形式，或在固體載體中)?？诜膬?yōu)選組合物包括丸劑、片劑、膠囊、膠囊形片劑、糖漿和溶液，包括硬明膠膠囊和定時釋放膠囊?？梢允褂每梢耘渲瞥蓡挝粍┬停蚴嵌嗷騺唲┝?。優(yōu)選的組合物是液體或半固體形式?？梢允褂冒后w的藥學(xué)惰性載體例如水或者其他藥學(xué)上相容的液體或半固體的組合物。這些液體和半固體的使用是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。
該組合物也可以通過注射施用，即靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、動脈內(nèi)、鞘內(nèi)；和腦室內(nèi)注射。靜脈內(nèi)施用是注射的一種優(yōu)選方法。注射用的適當(dāng)載體是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，包括5％葡萄糖溶液、鹽水和磷酸鹽緩沖鹽水。該化合物也可以作為輸注或注射劑(例如，作為在藥學(xué)可接受的液體或液體的混合物中的混懸液或乳劑)施用。
也可以使用其他方法，例如直腸給藥來施用該制劑。用于直腸給藥的制劑例如栓劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。該化合物可以通過吸入(例如，以氣霧劑的形式通過鼻或使用如Brooks等人的U.S.專利4,922,901所述類型的遞送裝置，將其內(nèi)容以整體引入本文)、局部(例如，以洗劑的形式)；或經(jīng)皮(例如，使用透皮貼劑，使用Novartis和Alza Corporation可購得的技術(shù))施用。盡管也可以以大塊活性化學(xué)品的形式施用該化合物，但是優(yōu)選各化合物都以藥物組合物或制劑的形式存在以有效和有力地施用。
該化合物可以摻入到藥物遞送裝置例如毫微粒、微粒、微囊等等中。代表性的微粒/毫微粒包括用環(huán)糊精例如PEG化的環(huán)糊精、脂質(zhì)體制備的那些，所述脂質(zhì)體包括小的單層囊泡和大小設(shè)計為用于宿住于生長的腫瘤周圍的毛細(xì)血管床上的脂質(zhì)體。例如在Heidel JD等人，Administration in non-human primates of escalating intravenousdoses of targeted nanoparticles containing ribonucleotidereductase subunit M2siRNA，Proc Natl Acad Sci U S A.2007Apr3；104(14)5715-21；Wongmekiat等人，Preparation of drugnanoparticles by co-grinding with cyclodextrinformationmechanism and factors affecting nanoparticle formation，ChemPharm Bull(Tokyo).2007Mar；55(3)359-63；Bartlett和Davis，Physicochemical and biological characterization of targeted，nucleic acid-containing nanoparticles，Bioconjug Chem.2007Mar-Apr；18(2)456-68；Villalonga等人，Amperometric biosensorfor xanthine with supramolecular architecture，Chem Commun(Camb).2007Mar7；(9)942-4；Def aye等人，Pharmaceutical useof cyclodextrinesperspectives for drug targeting and controlof membrane interactions，Ann Pharm Fr.2007Jan；65(1)33-49；Wang等人，Synthesis ofOligo(ethylenediamino)-beta-Cyclodextrin Modified GoldNanoparticle as a DNA Concentrator；MoI Pharm.2007Mar-Apr；4(2)189-98；Xia等人，Controlled synthesis of Y-junctionpolyaniline nanorods and nanotubesusing in situ self-assemblyof magnetic nanoparticles，J Nanosci Nanotechnol.，2006Dec；6(12)3950-4；和Nijhuis等人，Room-temperature single-electrontunneling in dendrimer-stabilized gold nanoparticles anchoredat a molecular printboard，Small.2006Dec；2(12)1422-6中描述了適當(dāng)?shù)乃幬镞f送裝置。
施用這些化合物的示例性方法對于技術(shù)人員而言是顯而易見的。這些制劑的有用性取決于所使用的特定組合物和接受治療的特定患者。這些制劑可以包含液體載體，其可以是油性的、水性的、乳化的或者包含某些適合施用方式的溶劑。
該組合物可以間歇地施用或逐步地、連續(xù)地、持續(xù)地或速率可控地施用于溫血動物(例如，哺乳動物如小鼠、大鼠、貓、兔、狗、豬、?；蚝镒?，但是有利地，施用于人。此外，施用該藥物制劑的每日時間和每日的次數(shù)可以不同。
優(yōu)選地，施用該組合物以使活性成分與癌細(xì)胞集中的區(qū)域相互作用。本文所述的化合物對于治療這些癌癥是特別有效的。
在一些情況下，本文所述的化合物可以與預(yù)防或治療特定癌癥的其他化合物用作藥物組合物的一部分，即作為聯(lián)合治療。除了有效量的本文所述的化合物，該藥物組合物也可以包含各種其他的組分作為添加物或輔助劑。
與蛋白質(zhì)絡(luò)合 本文所述的富烯和富瓦烯類似物可以與肽和蛋白質(zhì)包括白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、VEGF、bFGF等等絡(luò)合。這些絡(luò)合物是易于制備的，并且比未絡(luò)合的化合物毒性更低。
本領(lǐng)域技術(shù)人員很容易即可認(rèn)識到如何將本文所述的化合物與蛋白質(zhì)或肽絡(luò)合。這些絡(luò)合物可以以施用未絡(luò)合化合物的任何方式施用。
聯(lián)合治療 聯(lián)合治療可以施用(a)單一的藥物組合物，其包含本文所述的富烯和/或富瓦烯類似物、至少一種本文所述的其他藥物和藥學(xué)可接受的賦形劑、稀釋劑或載體；或(b)兩種單獨的藥物組合物，包括(i)第一組合物，包含本文所述的富烯和/或富瓦烯類似物和藥學(xué)可接受的賦形劑、稀釋劑或載體，和(ii)第二組合物，包含至少一種本文所述的其他藥物和藥學(xué)可接受的賦形劑、稀釋劑或載體。藥物組合物可以同時或連續(xù)并以任意順序施用。
在用于治療或預(yù)防癌癥時，本文所述的富烯和/或富瓦烯類似物可以與作為單一藥物組合物的一部分的至少一種其他化療劑一起施用。可替代地，除其他抗癌化療劑外，可以施用該富烯和/或富瓦烯類似物。在這個實施方案中，該富烯和/或富瓦烯類似物與至少一種其他抗癌化療劑是基本上同時施用的，也就是說這些化合物是同時或一個接一個地施用的，只要這些化合物在血液中在一段時間達(dá)到治療水平即可。
聯(lián)合治療包括聯(lián)合施用本文所述的富烯和/或富瓦烯類似物或本文所述的化合物的藥學(xué)可接受的鹽或前藥、和至少一種抗癌化療劑，理想地后者通過不同機制發(fā)揮作用(即，VEGF抑制劑、烷化劑等等)。
可以用于聯(lián)合治療的已知抗癌劑的例子包括但不限于，烷化劑例如白消安、順鉑、絲裂霉素C和碳鉑；抗有絲分裂劑，例如秋水仙堿、長春堿、紫杉醇和多西紫杉醇；拓?fù)涿窱抑制劑，例如喜樹堿和托泊替康；拓?fù)涿窱I抑制劑，例如多柔比星和依托泊苷；RNA/DNA抗代謝藥，例如5-氮雜胞苷、5-氟尿嘧啶和甲氨蝶呤；DNA抗代謝藥，例如5-氟-2′-脫氧-尿苷、ara-C、羥基尿和硫鳥嘌呤；和抗體，例如

和

可以用于聯(lián)合治療的其他已知的抗癌劑包括三氧化二砷、吉西他濱、美法侖、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、長春新堿、米托胍腙、表柔比星、阿柔比星、博來霉素、米托蒽醌、依利醋銨、氟達(dá)拉濱、奧曲肽、視黃酸、他莫昔芬和阿拉諾新。下面將描述可以與富烯和/或富瓦烯類似物聯(lián)合使用的其他種類的抗癌化合物。
該富烯和/或富瓦烯類似物可以與α-1-腎上腺素受體拮抗劑例如多沙唑嗪、特拉唑嗪和坦洛新聯(lián)合，所述拮抗劑可以通過誘導(dǎo)凋亡抑制前列腺癌細(xì)胞生長(Kyprianou，N.，等人，Cancer Res 604550-4555，(2000))。
Sigma-2受體以高密度在各種腫瘤細(xì)胞類型中表達(dá)(Vilner，B.J等人，Cancer Res.55408413(1995))，sigma-2受體激動劑例如CB-64D、CB-184和氟哌啶醇激活了一種新的凋亡途徑，使得抗腫瘤藥能夠用于乳腺腫瘤細(xì)胞株(Kyprianou，N.，等人，Cancer Res.62313322(2002))。因此，該富烯和/或富瓦烯類似物可以與至少一種已知的sigma-2受體激動劑或所述藥物的藥學(xué)可接受的鹽聯(lián)合。
該富烯和/或富瓦烯類似物可以與洛伐他汀(一種HMG-CoA還原酶抑制劑)和丁酸鹽(小鼠的路易斯肺癌中凋亡的誘導(dǎo)劑)聯(lián)合，可以增強抗腫瘤效果(Giermasz，A.，等人，Int.J.Cancer 97746 750(2002))?？梢杂糜诼?lián)合治療的已知HMG-CoA還原酶抑制劑的例子包括但不限于，洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿伐他汀和西立伐他汀及其藥學(xué)可接受的鹽。
某些HIV蛋白酶抑制劑，例如茚地那韋或沙奎那韋具有有效的抗血管生成活性，并且促進(jìn)卡波西肉瘤退化(Sgadari，C.，等人，Nat.Med.8225 232(2002))。因此，(除了形成這些化合物的富烯和/或富瓦烯類似物外)，富烯和/或富瓦烯類似物可以與HIV蛋白酶抑制劑或所述藥物的藥學(xué)可接受的鹽組合。代表性的HIV蛋白酶抑制劑包括但不限于，安潑那韋、阿巴卡韋、CGP-73547、CGP-61755、DMP-450、茚地那韋、那非那韋、替拉那韋、利托那韋、沙奎那韋、ABT-378、AG 1776和BMS-232，632。
在小細(xì)胞肺癌株中，合成型維甲類例如芬維A胺(N-(4-羥基苯基)視黃酰胺，4HPR)與其他化療劑例如順鉑、依托泊苷或紫杉醇的組合具有良好的活性(Kalemkerian，G.P.，等人，Cancer Chemother.Pharmacol.43145 150(1999))。據(jù)報道，4HPR與γ-輻射組合對于膀胱癌細(xì)胞株也具有良好的活性(Zou，C.，等人，Int.J.Oncol.131037 1041(1998))。代表性的維甲類和合成型維甲醇類包括但不限于，貝沙羅汀、維甲酸、13-順式視黃酸、9-順式視黃酸、α-二氟甲基鳥氨酸、ILX23-7553、芬維A胺和N-4-羧苯基視黃酰胺。
蛋白酶體抑制劑例如乳胞素在體內(nèi)和體外的腫瘤細(xì)胞中顯示了抗腫瘤活性，包括對常規(guī)的化療劑耐受的那些腫瘤。通過抑制NF-κB的轉(zhuǎn)錄活性，蛋白酶體抑制劑也可以防止體內(nèi)血管生成和轉(zhuǎn)移，此外還能增強癌細(xì)胞對凋亡的敏感性(Almond，J.B.，等人，Leukemia 16433 443(2002))。代表性的蛋白酶體抑制劑包括但不限于，乳胞素、MG-132和PS-341。
酪氨酸激酶抑制劑例如STI 571(甲磺酸伊馬替尼，

)與其他抗白血病藥例如依托泊苷的組合具有有效的協(xié)同效果(Liu，W.M.，等人Br.J.Cancer 861472 1478(2002))。代表性的酪氨酸激酶抑制劑包括但不限于，

ZD1839(

)、SH268、染料木素、CRP2563、SU6668、SU11248和RMD121974。
異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑例如法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑R115777對于人乳腺癌具有抗腫瘤活性(Kelland，L.R.，等人，Clin.Cancer Res.73544 3550(2001))。也報道了蛋白法尼?；D(zhuǎn)移酶抑制劑SCH66336和順鉑在人癌細(xì)胞株中的協(xié)同作用(Adjei，A.A.，等人，Clin.Cancer Res.71438 1445(2001))。異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑包括法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、二牛龍牛兒基-蛋白轉(zhuǎn)移酶I型(GGPTase-I)和二牛龍牛兒基(geranylgeranyl)-蛋白轉(zhuǎn)移酶II型抑制劑，或所述藥物的藥學(xué)可接受的鹽可以與本文所述的富烯和/或富瓦烯類似物聯(lián)合使用。已知的異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的例子包括但不限于R115777、SCH66336、L-778、123、BAL9611和TAN-1813。
周期素依賴性蛋白激酶(CDK)抑制劑例如夫拉平度與其他抗癌劑例如CPT-11(一種DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑)的組合對人結(jié)腸癌細(xì)胞具有有效的，通常是協(xié)同的效果(Motwani，M.，等人，Clin.Cancer Res.74209 4219，(2001))。代表性的周期素依賴性蛋白激酶抑制劑包括但不限于，夫拉平度、UCN-01、roscovitine和奧羅莫星。
已知某些COX-2抑制劑能夠阻斷血管形成，抑制實體瘤轉(zhuǎn)移并減緩植入的胃腸癌細(xì)胞生長(Blanke，C.D.，Oncology(Hunting)16(No.4Suppl.3)17 21(2002))。代表性的COX-2抑制劑包括但不限于，塞來考昔、伐地考昔和羅非考昔。
任意的上述化合物可以與富烯和/或富瓦烯類似物在聯(lián)合治療中使用。此外，這些化合物中的很多可以使用本文所述的化學(xué)，通過該化合物上的酮、醛、羥基、硫醇和/或胺官能團(tuán)的反應(yīng)轉(zhuǎn)化為富烯和/或富瓦烯類似物。這些化合物的富烯和/或富瓦烯類似物在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
此外，該富烯和/或富瓦烯類似物可以通過與治療上有用的抗體例如

或

生長因子例如DGF、NGF；細(xì)胞因子例如IL-2、IL-4或結(jié)合到細(xì)胞表面的任何分子相連而靶向于腫瘤位點?？贵w和其他分子將把本文所述的化合物遞送到它的靶點，使其成為有效的抗癌藥。這種生物結(jié)合也可以增強這些治療上有用的抗體例如

或

的抗癌效果。
該化合物也可以通過在手術(shù)前和/或后施用該化合物與外科上的腫瘤清除結(jié)合使用，和通過在放射治療前、期間和/或后施用該化合物與放射治療結(jié)合使用。
該化合物的適當(dāng)劑量是有效預(yù)防疾病的癥狀發(fā)生或者治療患者所患疾病的某些癥狀的量?！坝行Я俊?、“治療量”或“有效劑量”是指足以產(chǎn)生所需的藥理學(xué)或治療學(xué)效果，因此有效地預(yù)防或治療疾病的量。
當(dāng)治療癌癥時，該富烯和/或富瓦烯類似物的有效量是足以抑制腫瘤生長的量，并且理想地，是縮小腫瘤，更理想地，是破壞腫瘤的足夠量。通過以預(yù)防的方式施用本文所述的化合物可以在開始時預(yù)防腫瘤或防止腫瘤復(fù)發(fā)。優(yōu)選地，有效量足以獲得所期望的結(jié)果，但是不足以產(chǎn)生可感知的副作用。
根據(jù)各種因素，例如患者的情況、癌癥的嚴(yán)重度以及藥物組合物的施用方式，有效劑量可以不同。當(dāng)然，患者與患者之間化合物的有效劑量是不同的，但是一般下限為發(fā)生所期望的治療效果時的量，但是低于觀察到顯著的副作用時的量。
當(dāng)根據(jù)本文所述的方法以有效量使用時，該化合物對于特定癌細(xì)胞是選擇性的，但是對于正常細(xì)胞沒有顯著的影響。
對于人類患者而言，典型的化合物的有效劑量一般需要以至少約1，通常至少約10，常常至少約25μg/24小時/患者的量施用該化合物。有效劑量一般不超過約500，通常不超過約400，常常不超過約300μg/24小時/患者。此外，施用有效劑量以使患者血漿內(nèi)的化合物濃度正常為不超過500ng/mL，常常不超過100ng/mL。
IV.使用該化合物和/或藥物組合物的方法 本文所述的化合物和包含該化合物的藥物組合物可以用于治療癌癥?？梢灾委煹拇硇缘募膊“ㄙ樕锢缪芰?，和惡性腫瘤例如，涉及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)及其主要的粗有絲分裂受體血管內(nèi)皮生長因子受體2的自分泌環(huán)引起的那些。
癌癥包括其中Nox酶(即，Nox 1，Nox 4等等)以較高濃度存在的那些，或者其中ROS介導(dǎo)癌生長的那些。
代表性的惡性腫瘤包括惡性內(nèi)皮腫瘤例如黑素瘤?？梢灾委煹钠渌┌Y包括但不限于人肉瘤和癌，例如纖維肉瘤、粘液肉瘤、脂肉瘤、軟骨肉瘤、成骨性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤(lymphangioendotheliosarooma)、淋巴管內(nèi)皮肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤文氏瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma)、基底細(xì)胞癌(basal cell carcinoma)、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、腺癌(cystadeno carcinorna)、髓樣癌、支氣管原癌、腎細(xì)胞癌、肝癌、膽管癌、絨毛膜癌、精原細(xì)胞瘤、胚胎性癌、腎母細(xì)胞瘤、宮頸癌、睪丸腫瘤、肺癌、小細(xì)胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、膠質(zhì)瘤、星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、顱咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、成血管母細(xì)胞瘤、聽神經(jīng)瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腦膜瘤、黑色素瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、白血病，例如急性淋巴細(xì)胞白血病和急性粒細(xì)胞白血病(成骨細(xì)胞的、早幼粒細(xì)胞性、粒單細(xì)胞性、單核細(xì)胞性和紅白血病)、慢性白血病(慢性髓細(xì)胞(粒細(xì)胞)性白血病和慢性淋巴細(xì)胞性白血病)；和真性紅細(xì)胞增多癥、淋巴瘤(霍奇金病和非霍奇金病)、多發(fā)性骨髓瘤、華氏巨球蛋白血癥和重鏈病，和這些癌癥的惡性形式。
在一個實施方案中，癌癥是黑素瘤、直腸癌、結(jié)腸癌、乳腺瘤(breast carcinoma)、卵巢癌、小細(xì)胞肺癌、結(jié)腸癌、慢性淋巴細(xì)胞癌、毛細(xì)胞白血病、伴食管癌(esophogeal carcinoma)、前列腺癌、乳腺癌、骨髓瘤或淋巴瘤。據(jù)信，在患癌癥的患者的血清中，這些癌癥具有循環(huán)水平的tNOX(可以包括Nox4或其他Nox酶)(參見例如U.S.5,605,810，因此將其以整體通過參考引入本文)。
在一些實施方案中，患者已經(jīng)患癌癥并且正在治療癌癥，可以或可以不具有癌癥轉(zhuǎn)移(即，繼發(fā)性癌癥)。
癌癥可以體現(xiàn)為腫瘤的形式，例如上皮組織、淋巴組織、結(jié)締組織、骨或中樞神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤。
在治療上述類型的癌癥時，該化合物也可以用作輔助療法，與現(xiàn)有的療法組合。在這些情況下，優(yōu)選以對癌細(xì)胞包括耐藥性癌細(xì)胞效果最佳，同時對正常細(xì)胞類型影響最小的方式施用活性成分。盡管這主要是通過該化合物本身的行為的特點完成的，但是也可以通過靶向的遞送藥物和/或通過調(diào)整劑量以獲得期望的效果而又不超過達(dá)到顯著的副作用所需的閾劑量來完成。
骨質(zhì)疏松癥的治療 本文所述的化合物也可以用于治療骨質(zhì)疏松癥。細(xì)胞因子RANKL(NF-κB配體的受體活化劑)通過活化破骨細(xì)胞而導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥。該化合物通過產(chǎn)生細(xì)胞凋亡、抑制破骨細(xì)胞產(chǎn)生和通過調(diào)節(jié)細(xì)胞核因子-κB活化途徑抑制侵入來抑制RANKL活性(參見，例如Mol Cancer Res.2006Sep；4(9)621-33)。
炎性疾病的治療 本文所述的化合物可以用于治療或預(yù)防炎性疾病?；钚匝鯐谘仔约膊±珙愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、哮喘、牛皮癬、excema、狼瘡、硬皮病、某些心臟疾病例如動脈粥樣硬化和冠狀動脈疾病等等中產(chǎn)生NFκB。由于該化合物能有效地抑制活性氧的產(chǎn)生，因此它們對于炎性疾病是有活性的。
該化合物也抑制某些炎癥信號，可以通過抑制這些信號減輕炎性疾病例如炎性關(guān)節(jié)炎。
類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)被認(rèn)為是最常見的系統(tǒng)性自身免疫性疾病，但是使用本文所述的化合物也可以治療其他疾病例如甲狀腺機能減退、全身性紅斑狼瘡(SLE)等等。很多疾病與慢性炎癥和TNF-α和IL-6的水平升高有關(guān)，包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、心臟病和癌癥。炎癥導(dǎo)致了很多胃腸疾病，包括但不限于，克勞恩病、腸應(yīng)激綜合征和炎性腸綜合征，使用本文所述的化合物也可以治療和/或預(yù)防這些疾病。
有人提出由于非洲淋巴瘤病毒(EBV)的再激活，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎與慢性炎癥之間的聯(lián)系，在世界90％以上的的人口中非洲淋巴瘤病毒潛伏性地感染了一定比例的記憶B細(xì)胞。在病毒發(fā)病所涉及的EBV編碼的蛋白質(zhì)中，相當(dāng)多的注意力集中于潛在膜蛋白1(LMP1)。在EBV-變異細(xì)胞中表達(dá)為蛋白質(zhì)的9種EBV基因中，LMP1是最有特征的，是能夠在體外和體內(nèi)使細(xì)胞變異，導(dǎo)致淋巴組織增生改變和變?yōu)閻盒缘奈ㄒ灰环NEBV編碼的基因產(chǎn)物。除了已經(jīng)確定的它在B細(xì)胞淋巴瘤和其他惡性腫瘤的發(fā)病學(xué)中的作用外，EBV感染還與很多人自身免疫性疾病包括RA和SLE的惡化有關(guān)。
小鼠膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(CIA)模型(Myers等人，Life Science 611861-1878(1997))在很多病理學(xué)和免疫學(xué)方面與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎相似，為評價化合物治療慢性炎癥的治療能力提供了一種穩(wěn)定的、可預(yù)測的模型。該模型可以用于，例如評價本文所述的化合物治療和/或預(yù)防這些疾病的能力。
在體外用本文所述的化合物治療小鼠B細(xì)胞株表明，在主要的小鼠B細(xì)胞中觀察到細(xì)胞因子隨著CD40和LMP1-介導(dǎo)的NFκB和AP-1活化具有并發(fā)性的劑量依賴性的降低。以劑量依賴性方式降低CD40和LMP1-介導(dǎo)的NFκB和AP-1活化的那些化合物通過抑制導(dǎo)致慢性炎癥和其他病理學(xué)的細(xì)胞因子，不論是在免疫應(yīng)答的認(rèn)知期還是在效應(yīng)期均有望具有抗炎活性。
眼病的治療 該化合物也適合用于治療具有炎性因素的眼病，例如濕型和干型與年齡有關(guān)的黃斑變性(AMD)、糖尿病性視網(wǎng)膜病(DR)、青光眼、新生血管性青光眼、視網(wǎng)膜脈管炎、眼色素層炎例如后色素層炎、結(jié)膜炎、視網(wǎng)膜炎、青光眼引發(fā)的視網(wǎng)膜炎、鞏膜外層炎、鞏膜炎、視神經(jīng)炎、球后視神經(jīng)炎、眼科手術(shù)后的眼部炎癥、由物理性眼損傷導(dǎo)致的眼部炎癥、白內(nèi)障、眼變應(yīng)性和干眼。
目前眼部遞送的方法包括局部施用(滴眼劑或其他適合直接施用于眼部的局部用制劑)、結(jié)膜下注射、眼周注射、玻璃體內(nèi)注射、手術(shù)植入和系統(tǒng)性途徑。
特別地，當(dāng)使用口服和靜脈途徑施用會擔(dān)心系統(tǒng)性毒性時，可以使用玻璃體內(nèi)注射、眼周注射和持續(xù)釋放植入劑在眼組織中達(dá)到藥物的治療水平。滴眼劑用于治療影響眼的外表面或眼前部的組織的疾病，一些制劑可以滲透到眼后部治療視網(wǎng)膜疾病。
某些疾病影響眼后部的組織，因此治療時難以遞送。在這些實施方案中，可以使用離子電滲(inotophoresis)來將本文所述的化合物遞送到眼后部。例如，眼的離子電滲系統(tǒng)OcuPhorTM可以安全和非侵入性地將藥物遞送到眼后部(Iomed)。離子電滲使用小的電流將電離的藥物運輸?shù)讲⒋┻^身體組織。必須小心，不要使用太高的電流密度，否則會損害眼組織。
離子電滲典型地包括使用給藥器、無效電極和電子離子電滲劑量控制器。給藥器可以是一個小的硅酮殼，包含一個傳導(dǎo)單元例如銀-氯化銀。水凝膠盒可以吸收該藥物制劑。小的柔軟的電線將該傳導(dǎo)單元與劑量控制器連接起來。在使用前立即用藥物溶液使藥盒水合，將給藥器置于下眼瞼下面的眼的鞏膜上。在治療期間眼瞼將給藥器保持于原位。通過設(shè)計和設(shè)置電子控制器來控制藥物劑量和施用速度。
神經(jīng)變性疾病的治療和/或提供神經(jīng)保護(hù) 活性氧也誘導(dǎo)炎癥和神經(jīng)變性。抑制這些活性氧簇也會產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)，包括在缺血性腦損傷例如中風(fēng)后或由鈍傷導(dǎo)致的缺血性腦損傷后保護(hù)其免于進(jìn)一步的損害，并且治療或預(yù)防神經(jīng)變性疾病例如視網(wǎng)膜變性、阿爾茨海默病、老年癡呆、早老性癡呆、帕金森病、亨廷頓舞蹈病、多發(fā)性硬化等等。
活性氧簇也會導(dǎo)致癲癇發(fā)作，因此，本文所述的化合物具有γ-氨基丁酸能(GABA能)活性，能夠改善癲癇發(fā)作。
血管性疾病的治療 其中涉及ROS的血管性疾病例如勃起機能障礙和偏頭痛也會對NADPH氧化酶抑制劑產(chǎn)生應(yīng)答。
在所有這些治療中，據(jù)信該化合物通過抑制一種或多種Nox酶例如Nox1-5，或者通過刺激過氧化物清除劑(并由此抑制ROS產(chǎn)生)，或者直接與鈍化的ROS反應(yīng)來發(fā)揮作用。
據(jù)信，包含Nox2的NADPH氧化酶和Akt激活在血管緊張素II誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大中發(fā)揮關(guān)鍵的作用(Physiol.Genomics 26180-191，2006)。因此，抑制這種Nox酶可以用于治療或預(yù)防血管緊張素II誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大。
下面提供的實施例是用于解釋本發(fā)明，而不應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是對其進(jìn)行限制。在這些實施例中，除非另有說明，所有的份和百分比都是指重量。以摩爾百分比報告反應(yīng)收率。
實施例 下面提供的實施例是用于解釋本發(fā)明，而不應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是對其進(jìn)行限制。在這些實施例中，除非另有說明，所有的份和百分比都是指重量。以摩爾百分比報告反應(yīng)收率。
實施例1NADH氧化酶的分光光度測定 可以在37℃下，在包含25mM Tris-Mes緩沖液(pH 7.2)，1mM KCN，和150μM NADH的反應(yīng)混合物中，測定340nm處NADH的消失來確定NADH氧化酶的活性。例如，可以在攪拌下，用Hitachi U3210分光光度計來測定活性，以每次5分鐘的2次間隔來連續(xù)記錄?？梢允褂?.22的毫摩爾消光系數(shù)來確定特異性活性。
實施例2測量細(xì)胞生長 來自BALB/cf C3H小鼠的小鼠乳房腫瘤亞群株4T1可以在DME-10，Dulbecco′s改良型Eagle′s培養(yǎng)基中生長，該培養(yǎng)基中補充有5％胎牛血清，5％新生牛血清，1mM混合的非必需氨基酸，2mM L-谷氨酰胺，青霉素(100單位/ml)和鏈霉素(100μg/ml)(Miller等人，1987，Brit.J.Can.56561-569和Miller等人，1990，Invasion Metastasis10101-112)。
實施例3各種受試化合物對Nox2酶的抑制 通過在12-十四酸佛波酯13-乙酸鹽(phorbol 12-myristate13-acetate(PMA))刺激的Cos-phox細(xì)胞中確定過氧化氫(H2O2)的產(chǎn)生，來檢驗各種受試化合物對Nox2酶的活性。所述Cos-phox細(xì)胞用不同濃度的載體對照和表1所示的受試化合物處理。
表1.受試化合物 Cos-phox細(xì)胞已經(jīng)在Price等人，Blood，992653-61(2002)中進(jìn)行了描述，將其通過參考引入本文。
使用如Martyn等人，Cellular Signalling，1869-82(2006)和Perry等人，J.Invest.Dermatol，1262316-22(2006)所述的高香草酸分析來測定H2O2釋放，將它們通過參考引入本文。簡言之，用Cos-phox細(xì)胞以1.5-1.75x105個細(xì)胞/孔植入到12孔板中。次日，用Hank′s平衡鹽溶液將細(xì)胞洗滌1次，用0.4mg/ml的12-十四酸佛波酯13-乙酸鹽(PMA)刺激，然后用載體對照或不同濃度(即，1μM，5μM，或20μM)的受試化合物8，10，15，16，17或18號在1ml的培養(yǎng)基中預(yù)培養(yǎng)15分鐘。然后用Hank′s平衡鹽溶液將細(xì)胞洗滌1次。在相同濃度加入載體對照或不同濃度的受試化合物8，10，15，16，17或18號，在0.5ml的高香草酸分析溶液(100mM高香草酸分析，在含Ca2+和Mg2+的Hank′s平衡鹽溶液中包含4U/ml的辣根過氧化物酶)中預(yù)培養(yǎng)，并在37℃下用細(xì)胞培養(yǎng)1小時。通過加入75ml的高香草酸分析停止緩沖液(0.1M甘氨酸/0.1M NaOH(pH 12)和25mMEDTA的磷酸鹽緩沖鹽水溶液)使反應(yīng)停止。在320nm的激發(fā)波長和440nm的發(fā)射波長下，在BioTek Synergy HT(BioTek Instruments Inc.，Winooski，Vermont，CA)上讀取熒光。
在加入(數(shù)據(jù)未顯示)或不加入受試化合物的情況下，沒有PMA刺激Cox-phox細(xì)胞就不會產(chǎn)生H2O2，因此，在這種特定的系統(tǒng)中，檢測Nox 2活性需要PMA。受試化合物8，10，15，16，17或18號抑制Cox-phox細(xì)胞中H2O2產(chǎn)生的能力如附圖1所示，表示為相對于未處理的對照物(100％)的百分比。
結(jié)果表明，受試化合物8，10，15，16，17和18號以劑量依賴性的方式抑制Nox2酶。
實施例4各種受試化合物的體外測定 用約100萬個腫瘤細(xì)胞皮下注射于裸小鼠。當(dāng)腫瘤變得可見時，用每日40mg/kg的姜黃素富烯治療它們。用100微升的乙醇重新溶解該化合物，并用900微升的20％英脫利匹特稀釋，每日腹膜內(nèi)注射0.3ml的該混合物。用游標(biāo)卡尺測量腫瘤，用式(寬度2x長度)0.52來計算腫瘤體積，其中寬度是最小的邊，2代表平方，1代表長度。
結(jié)果如下表1和附圖2所示。
表1用姜黃富烯治療 實施例5NADPH氧化酶抑制劑富烯-5在小白鼠(albino mice)中減小光誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜功能受損。
將小白鼠暴露于光亮下導(dǎo)致視網(wǎng)膜的功能受損，這種結(jié)果部分是由活性氧簇(ROS)導(dǎo)致的損傷介導(dǎo)的。通過各種應(yīng)激物激活NADPH氧化酶增加了ROS的產(chǎn)生。這些實驗的目的是測定光誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜功能受損是否是由NADPH氧化酶活性介導(dǎo)的。
方法 將Balb-C小鼠暴露于暗(20lux)或亮(10,000lux)的白光下6小時。小鼠注射溶解于載體(英脫利匹特-DMSO)的富烯-5或僅注射載體，富烯-5是一種抑制NADPH氧化酶的三苯基甲烷。每日進(jìn)行腹膜內(nèi)注射，共2周。在暴露于光后0，7，和14天取視網(wǎng)膜電流圖(ERGs)。
結(jié)果 與暴露于亮光但用富烯-5治療的小鼠相比或者于暴露于暗光的小鼠相比，注射載體并暴露于亮光的小鼠顯示了ERGa-波和b-波的振幅顯著減小。結(jié)果如附圖3所示。
結(jié)論 如ERG所測定，用NADPH氧化酶抑制劑富烯-5治療消除了亮光暴露對視網(wǎng)膜功能的損害效果?？赡苁牵凉獗┞秾?dǎo)致NADPH氧化酶激活，使得ROS產(chǎn)生增加，從而使視網(wǎng)膜細(xì)胞受損?，F(xiàn)在分析視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)、細(xì)胞凋亡、NADPH氧化酶的酶活性、氧化還原情況和ROS含量。
小鼠暴露于暗光(對照)或?qū)е乱暰W(wǎng)膜變性的一定強度的亮光下(光誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜變性；LIRD)。這是一種經(jīng)典的嚙齒動物視網(wǎng)膜變性的模型。在各種光照條件下，一半的動物注射載體，另一半注射富烯5。在暴露1周后測定所治療小鼠的視網(wǎng)膜電流圖(ERGs)。ERG是對一束光應(yīng)答的穿過眼球的電勢改變的一個測定值，用作視網(wǎng)膜功能的指示。
數(shù)據(jù)表明，在一周時，亮光暴露誘導(dǎo)約50％的ERG b-波振幅被抑制。但是，每日用富烯5注射的大鼠顯示出ERG振幅沒有被抑制，提示在一周時富烯5防止了視覺功能受損。該數(shù)據(jù)概述于附圖3。
實施例6代表性的富烯和過氧化物歧化酶的ESR譜 Li使用ESR來證明通過分離的內(nèi)含體，NADPH依賴性地O2的產(chǎn)生(Li等人，Molecular and Cellular Biology，January 2006，p.140-154，26(1)140-154(2006))。ESR分析是在室溫下使用Brukermodel EMX ESR分光計(Bruker)進(jìn)行的。在包含50mM 5，5-二甲基-1-吡啶N-氧化物(DMPO)的總體積為500μl的PBS，pH 7.4中，用旋轉(zhuǎn)陷阱混合各樣品的泡狀部分。該溶液包含亞胺二醋酸-螯合型樹脂(10ml/L；Sigma-Aldrich)。通過加入NADPH至100μM來引發(fā)反應(yīng)，并立即置于ESR分光計中。分析DMPO-羥基加成物的形成10分鐘。設(shè)備設(shè)置如下接收器放大，1x106；調(diào)制頻率，100kHz；微波功率，40.14mW；調(diào)節(jié)振幅，1.0G；和掃描速度，1G/s。
在立即應(yīng)用時，富烯5和過氧化物歧化酶的ESR譜是在基本上如Li等人所述的條件下取得的。ESR譜(附圖4)表明，富烯5顯然通過與過氧化物反應(yīng)形成了原子團(tuán)，因此抑制了過氧化物歧化酶產(chǎn)生ROS的能力。
本發(fā)明并不限于本文所述的特定實施方案所限的范圍。的確，除了它們所述的意外，根據(jù)前文的描述和所附的附圖，本發(fā)明的各種改變對于本領(lǐng)域技術(shù)人員將變得顯而易見。這些改變也意欲落入所附的權(quán)利要求的范圍內(nèi)。
本文應(yīng)用了各種出版物，將其內(nèi)容以整體通過參考引入本文。
權(quán)利要求
1.一種在哺乳動物中治療癌癥的方法，包括給所述哺乳動物施用治療有效的量的組合物，所述組合物包括含有富烯或富瓦烯的治療劑，該治療劑的量足以抑制治療足夠量的NOX或ROS表達(dá)，以至少部分抑制腫瘤的生長。
2.權(quán)利要求1的方法，其中哺乳動物是人。
3.權(quán)利要求1的方法，其中癌癥選自血管瘤、黑素瘤、直腸癌、結(jié)腸癌、乳腺瘤、卵巢癌、小細(xì)胞肺癌、結(jié)腸癌、慢性淋巴細(xì)胞癌、毛細(xì)胞白血病、食管癌、前列腺癌、乳腺癌、骨髓瘤和淋巴瘤。
4.權(quán)利要求1的方法，其中癌癥是轉(zhuǎn)移性癌癥。
5.權(quán)利要求1的方法，其中在施用該組合物前出于進(jìn)行抗癌治療的原因，人是免疫抑制的。
6.權(quán)利要求1的方法，其中癌癥表現(xiàn)為具有細(xì)胞的實體瘤的形式，該細(xì)胞表達(dá)的一種或多種NOX酶的濃度高于在非癌細(xì)胞中所表達(dá)的濃度。
7.權(quán)利要求6的方法，其中該腫瘤是上皮組織、淋巴組織、結(jié)締組織、骨或中樞神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤。
8.權(quán)利要求1的方法，其中該化合物是經(jīng)胃腸外、口服施用的或直接施用到腫瘤中。
9.權(quán)利要求1的方法，其中該化合物是通過植入裝置施用的。
10.權(quán)利要求1的方法，其中使用持續(xù)釋放制劑進(jìn)行施用。
11.權(quán)利要求1的方法，其中該化合物具有下式之一
其中
X是O、S、NH或CH2，
x和y是0到3的整數(shù)，
G選自C1-6烷基、烯基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、鹵素、-OR′、-NR′R″、-CF3、-CN、-NO2、-C2R′、-SR′、-N3、-C(＝O)NR′R″、-NR′C(＝O)R″、-C(＝O)R′、-C(＝O)OR′、-OC(＝O)R′、-OC(＝O)NR′R″，-NR′C(＝O)OR″、-SO2R′、-SO2NR′R″和-NR′SO2R″，其中R′和R″分別是氫、C1-6烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基。
12.權(quán)利要求1的方法，其中該化合物具有下式之一
條件是至少一個R不是H。
13.權(quán)利要求1的方法，其中該化合物選自
14.一種治療眼病的方法，包括給哺乳動物施用足以治療眼病的量的含有富烯或富瓦烯的化合物。
15.權(quán)利要求14的方法，其中含有富烯或富瓦烯的化合物的量足以抑制治療足夠量的NADPH氧化酶。
16.權(quán)利要求14的方法，其中哺乳動物是人。
17.權(quán)利要求14的方法，其中眼病選自濕型或干型與年齡有關(guān)的黃斑變性(AMD)、糖尿病性視網(wǎng)膜病(DR)、青光眼、新生血管性青光眼、視網(wǎng)膜脈管炎、葡萄膜炎例如后色素層炎、結(jié)膜炎、青光眼引發(fā)的視網(wǎng)膜炎、鞏膜外層炎、鞏膜炎、視神經(jīng)炎、球后視神經(jīng)炎、白內(nèi)障、眼科手術(shù)后的眼部炎癥、由物理性眼損傷導(dǎo)致的眼部炎癥、眼變應(yīng)性和干眼。
18.權(quán)利要求14的方法，其中該化合物是以滴眼劑或其他適合直接施用于眼的局部用制劑的形式，通過局部給藥施用的。
19.權(quán)利要求14的方法，其中該化合物是通過結(jié)膜下注射、眼周注射或玻璃體內(nèi)注射施用的。
20.權(quán)利要求14的方法，其中該化合物是通過手術(shù)植入施用的。
21.權(quán)利要求14的方法，其中該化合物是通過系統(tǒng)性施用或通過離子電滲療法施用的。
22.權(quán)利要求14的方法，其中使用持續(xù)釋放制劑進(jìn)行施用。
23.權(quán)利要求14的方法，其中該化合物具有下式之一
其中
X是O、S、NH或CH2，
x和y是0到3的整數(shù)，
G選自C1-6烷基、烯基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、鹵素、-OR′、-NR′R″、-CF3、-CN、-NO2、-C2R′、-SR′、-N3、-C(＝O)NR′R″、-NR′C(＝O)R″、-C(＝O)R′、-C (＝O)OR′、-OC(＝O)R′、-OC(＝O)NR′R″，-NR′C(＝O)OR″、-SO2R′、-SO2NR′R″和-NR′SO2R″，其中R′和R″分別是氫、C1-6烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基。
24.權(quán)利要求14的方法，其該化合物具有下式之一
條件是至少一個R不是H。
25.權(quán)利要求14的方法，其中該化合物具有下式之一
26.下式之一的化合物
其中
X是O、S、NH或CH2，
x和y是0到3的整數(shù)，
G選自C1-6烷基、烯基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、鹵素、-OR′、-NR′R″、-CF3、-CN、-NO2、-C2R′、-SR′、-N3、-C(＝O)NR′R″、-NR′C(＝O)R″、-C(＝O)R′、-C(＝O)OR′、-OC(＝O)R′、-OC(＝O)NR′R″，-NR′C(＝O)OR″、-SO2R′、-SO2NR′R″和-NR′SO2R″，其中R′和R″分別是氫、C1-6烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基。
27.下式任意的化合物
條件是至少一個R不是H。
28.一種化合物，選自
29.下式的化合物
其中R′選自H、C1-6直鏈、支鏈或環(huán)烷基、芳基、芳烷基或烷芳基。
全文摘要
公開了化合物，包含該化合物的藥物組合物，其制備方法及應(yīng)用。該化合物是富烯和/或富瓦烯類似物。該化合物和組合物可以用于治療和/或預(yù)防廣泛種類的癌癥，包括耐藥性癌癥，以及很多炎性、變性和血管疾病，包括各種眼病。代表性的富烯和/或富瓦烯類似物包括各種染料、激素、糖、肽、寡核苷酸、氨基酸、核苷酸、核苷和多元醇的富烯和富瓦烯類似物。據(jù)信這些化合物至少是通過抑制Nox或ROS發(fā)揮功能。在一些實施方案中，Nox是在癌細(xì)胞而非正常細(xì)胞中選擇性表達(dá)的物質(zhì)，或者是在癌細(xì)胞中比在正常細(xì)胞中以更高的量表達(dá)的物質(zhì)。因此，該化合物是各種癌癥和其他疾病的新治療劑。
文檔編號A61K31/045GK101772344SQ200880020674
公開日2010年7月7日 申請日期2008年5月2日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月3日
發(fā)明者J·L·阿比瑟 申請人:埃默里大學(xué), 由退伍軍人事務(wù)部代表的美國政府