專利名稱：抗組胺物質(zhì)及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種花粉癥、蕁麻疹、支氣管哮喘、特應(yīng)癥等的過敏癥 狀的改善物質(zhì)及其制備方法。
背景技術(shù)：
所謂過敏是指免疫反應(yīng)針對特定抗原過剩地發(fā)生。過敏按其發(fā)生機(jī)
制大致分為I型至V型，花粉癥和蕁麻疹、支氣管哮喘屬于I型。另外， 特應(yīng)癥也與I型過敏近似。 一般認(rèn)為I型過敏是由于通過IgE抗體與肥 大細(xì)胞或嗜堿細(xì)胞結(jié)合，從這些細(xì)胞中釋放出的組胺或白三烯于全身游 走而引起的。
作為對特應(yīng)性皮炎等有效的外用皮膚病治療劑、或者作為對胃炎、
胃潰瘍等有效的消化系統(tǒng)疾病治療用內(nèi)服藥，已知有以甜葉菊莖部的發(fā) 酵濃縮液作為有效成分的物質(zhì)。進(jìn)而，作為具有對花粉癥等過敏癥狀有 效的抗組胺作用的物質(zhì)，已知有使甜葉菊的植物組織的提取液發(fā)酵而得 到的物質(zhì)。
進(jìn)而，鑒于在上述技術(shù)中甜葉菊植物組織的發(fā)酵需要90日以上的長 時(shí)間的課題，為了可以縮短甜葉菊提取物的發(fā)酵所需的時(shí)間，同時(shí)可以 得到改善過敏癥狀的物質(zhì)，本發(fā)明人以前公開了 一種過敏癥狀改善物質(zhì) 的制備方法，其特征在于，將甜葉菊的植物組織粉碎、混合、加入到精 制水中，加熱，攪拌，冷卻，過濾得到濾液，將該濾液減壓濃縮，得到 甜葉菊提取物，向該甜葉菊提取物中加入酵母菌使之發(fā)酵(參見特開 2005 - 35888號公報(bào))。
如上所述，已經(jīng)公開且銷售了多種花粉癥和特應(yīng)癥等的改善物質(zhì)， 但與目前的程度相比進(jìn)一步提高過敏癥狀的改善程度，是多數(shù)患者的共 同愿望。目前的狀況中，人們謀求比現(xiàn)有物質(zhì)更優(yōu)異的過敏癥狀改善物質(zhì)，潛心地進(jìn)行研究開發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，為了特別地改善I型過敏癥狀，提供一種具有 比現(xiàn)有物質(zhì)更優(yōu)異的抗組胺作用的物質(zhì)。
為了解決上述課題，進(jìn)行了反復(fù)研究，結(jié)果本發(fā)明人成功地制成了 以甜葉菊植物組織為原料的、具有比現(xiàn)有物質(zhì)更加優(yōu)異的抗組胺作用的
括下述步驟向經(jīng)干燥的甜葉菊植物組織中加入酵母及水使之發(fā)酵的步 驟；用乙醇水溶液提取由該發(fā)酵步驟得到的發(fā)酵甜葉菊的步驟；將由該 提取步驟得到的提取液濃縮的步驟；將由該濃縮步驟得到的濃縮液分 餾，收集90%乙醇可溶餾分的步驟。
本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)由上述制備方法得到的物質(zhì)可確認(rèn)具有強(qiáng)的抗組胺 作用。因此，該物質(zhì)可以廣泛應(yīng)用于特別適于呈現(xiàn)I型過敏癥狀的患者 的化妝用品和外用劑、內(nèi)服劑等。
并且，由上述制備方法得到的物質(zhì)完全不產(chǎn)生讓人不快的氣味。相 對于此，由上述專利文獻(xiàn)l中記載的制備方法得到的抗組胺物質(zhì)存在有 時(shí)伴有讓人不快的氣味的問題。由本發(fā)明得到的物質(zhì)不存在上述問題， 因此在外用劑、特別是化妝用品中配合時(shí)，具有比現(xiàn)有物質(zhì)易于使用的 明顯優(yōu)點(diǎn)。因此，本發(fā)明在其范圍內(nèi)包括含有由上述制備方法得到的物 質(zhì)的化妝用品和藥品(外用劑.內(nèi)用劑)。
具體實(shí)施例方式
以下，用附圖詳細(xì)地說明本發(fā)明的實(shí)施方式。
首先，根據(jù)圖1的流程圖詳細(xì)地說明本發(fā)明的抗組胺物質(zhì)的制備方法。
步驟1是將作為原料的甜葉菊的植物組織干燥 粉碎的步驟。作為本 發(fā)明的原料之一 的甜葉菊植物是原產(chǎn)于南美巴拉圭的菊科的多年生植 物，學(xué)名為甜葉菊(Stevia Rebaudiana Bertoni)。在日本栽培時(shí)，通常經(jīng)2月至5月，將種子、林苗或插枝的苗定植，開始栽培。 一般在甜葉菊 植物充分地成熟的10月至11月上旬左右進(jìn)行收獲。
本發(fā)明的抗組胺物質(zhì)，以使該甜葉菊的植物組織充分干燥、將其微 細(xì)粉碎而制成的干燥甜葉菊粉末用作原料。所謂粉末，只要是將各片的 大小粉碎成大概為lcm以下即可。另外，優(yōu)選挑選甜葉菊植物的葉部及 莖部進(jìn)行使用。
在甜葉菊植物的葉部及莖部的干燥中優(yōu)選盡量在進(jìn)行換氣的室內(nèi)、 在常溫下進(jìn)行，不優(yōu)選進(jìn)行急劇加熱等。
步驟2是使步驟1中得到的干燥甜葉菊粉末發(fā)酵的步驟。如上所述， 本發(fā)明的抗組胺物質(zhì)的制備方法的特征之一在于，使干燥甜葉菊粉末直 接發(fā)酵。相對于此，在上述特開2005 -35888號公報(bào)公開的制備方法中， 按照首先從干燥甜葉菊粉末中提取提取物、再使該提取提取物發(fā)酵的順 序進(jìn)行。但是，根據(jù)本發(fā)明人隨后的研究結(jié)果表明，使干燥甜葉菊粉末 直接發(fā)酵的方法可以制備抗組胺效果強(qiáng)的物質(zhì)。
干燥甜葉菊粉末的發(fā)酵可以如下進(jìn)行向干燥甜葉菊粉末中加入水 和酵母，將其攪拌，放置。加入水的量只要是發(fā)酵所需的量即可，將整 體濕潤的程度的量為充分量。作為酵母，優(yōu)選使用酵母菌 (SaccAara^yces )屬。
干燥甜葉菊粉末的發(fā)酵優(yōu)選"完全地"進(jìn)行。如果舔嘗沒有發(fā)酵的甜 葉菊粉末則有甜味，但經(jīng)完全發(fā)酵的甜葉菊粉末未確認(rèn)到甜味。因此， 優(yōu)選進(jìn)行發(fā)酵直到完全感覺不到甜味為止。為了使之完全地發(fā)酵，在常 溫的情況下需要放置大概2 ~ 3周的時(shí)間。
酵母的種類使用酵母菌(Sacc/^ram;;c^)屬。在發(fā)酵的步驟中，首 先，使干燥甜葉菊粉末中含有水分，然后，加入上述酵母，在常溫下于 2~3周期間內(nèi)一邊補(bǔ)充水分一邊使其繼續(xù)發(fā)酵。判斷甜葉菊粉末的發(fā)酵 是否"完全"地進(jìn)行，例如可以通過如下步驟進(jìn)行將甜葉菊粉末含在口 中，將感覺不到其甜味的時(shí)刻認(rèn)定為"完全地"發(fā)酵結(jié)束。
步驟3是將步驟2中得到的發(fā)酵甜葉菊粉末提取"農(nóng)縮的步驟，重要的 是在提取中使用乙醇。這是由于，在之后的步驟4中，收集90%乙醇可溶餾分，是本發(fā)明的特征之一。
乙醇提取可以如下進(jìn)行準(zhǔn)備30%左右的乙醇水溶液，向其中加入 發(fā)酵甜葉菊粉末， 一邊溫和地?cái)嚢枰贿呍诔叵率怪檾?shù)小時(shí)~數(shù) 日。以140目左右的大小將其過濾，將所得濾液作為提取液。本發(fā)明的 制備方法中，將上述提取液進(jìn)一步在60。C左右的溫度下減壓濃縮，由此 濃縮提取液。
步驟4是將步驟3中得到的濃縮提取液分餾，收集90%乙醇可溶餾分 的步驟。分餾可以如下進(jìn)行將濃縮提取液通過DIAION (注冊商標(biāo)) HP-20等離子交換樹脂的柱子?？梢源_認(rèn)被分餾的90%乙醇可溶餾分 有強(qiáng)的抗組胺作用。
為了便于保存.搬運(yùn)，也可以將被分餾的90%乙醇可溶餾分冷凍-干 燥(步驟5)。由此，完成了本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方式的抗組胺物質(zhì)的制備 步驟。
<試驗(yàn)例>
對經(jīng)過圖l所示的步驟l ~5得到的本發(fā)明物質(zhì)，使用豚鼠離體回腸 標(biāo)本進(jìn)行關(guān)于抗組胺作用的藥理學(xué)試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)如下進(jìn)行從豚鼠中摘出 回腸，根據(jù)Magnus法測定由組胺誘發(fā)的等長性收縮。
將組胺10^M ( histamine 1(T6M)用于豚鼠離體回腸標(biāo)本時(shí)，可以誘 發(fā)收縮。因此，在使用由上述制法得到的本發(fā)明物質(zhì)的前后，使用組胺 1(T6M，觀察收縮反應(yīng)的差異，由此考察本發(fā)明物質(zhì)對收縮反應(yīng)的影響。 收縮通過張力轉(zhuǎn)換器(BG - 10， Kulite Semiconductor, U. S. A )用直流 增幅器(Unipulse抹式會社制AM20)進(jìn)行記錄。組胺使用和光純藥工業(yè) 抹式會社制的產(chǎn) 品。
為了使用本發(fā)明物質(zhì)，使本發(fā)明物質(zhì)溶解于作為營養(yǎng)液的洛-林液 (Locke - Ringer液)，制成試液。制成本發(fā)明物質(zhì)的濃度不同的3種試 液，分別調(diào)節(jié)本發(fā)明物質(zhì)的濃度，使其分別為lCrSg/ml、 104g/ml、 l(T3g / ml。試液在Magnus管中直接使用。
洛-林液的組成為NaCl-154、 KC1 = 5.6、 CaCl2 = 2.2、 MgCl2 = 2.1、 NaHC03 = 5.9、 Glucose = 2.8 (pH = 7.4 )。營養(yǎng)液通入95 % 02和5 % C02的混合氣體。
實(shí)驗(yàn)在室溫(23~24°C)下進(jìn)行。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果示于圖2A 圖2C。圖2A是本發(fā)明物質(zhì)濃度l(TSg/ml的試 液的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在第6小時(shí)22分鐘將10"摩爾的組胺用于豚鼠離體回腸標(biāo) 本，測定收縮反應(yīng)，將其作為對照。標(biāo)本的收縮結(jié)束后，在第6小時(shí)30 分鐘將本發(fā)明物質(zhì)濃度10—Sg/ml的試液用于標(biāo)本，進(jìn)而在第6小時(shí)33分 鐘再次將組胺10-6摩爾用于標(biāo)本。上述測定中由Unipulse林式會社制 AM20得到的記錄曲線圖如圖2 A所示。
圖2A的曲線圖的橫軸表示時(shí)間，l格表示2分鐘?？v軸表示電壓，與 回腸標(biāo)本的收縮的幅度大致成比例(圖2B，圖2C同樣)。以第一次使 用組胺時(shí)的收縮的幅度為100時(shí)，第二次使用組胺時(shí)的收縮的幅度在曲 線圖上可以讀取為89.7。第二次使用組胺時(shí)收縮的幅度變小一般認(rèn)為是 試液的抗組胺效果51起的。
圖2B是本發(fā)明物質(zhì)濃度10"g/ml的試液的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，同樣地是由 Unipulse抹式會社制AM20得到的記錄曲線圖。在第4小時(shí)47分鐘將1(T6 摩爾的組胺用于豚鼠離體回腸標(biāo)本，測定收縮反應(yīng)，將其作為對照。標(biāo) 本的收縮結(jié)束后，在第4小時(shí)55分鐘將本發(fā)明物質(zhì)濃度10、/ml的試液 用于標(biāo)本，進(jìn)而在第4小時(shí)58分鐘再次將組胺10"摩爾用于標(biāo)本。
試液的本發(fā)明物質(zhì)濃度為104g / ml時(shí)，以第 一次使用組胺時(shí)的收縮 幅度(直流增幅器的電壓值)為100時(shí)，第二次使用組胺時(shí)的收縮幅度 在曲線圖上可以讀取為60。因此，可知與本發(fā)明物質(zhì)濃度為10-Sg/ml 的情況相比發(fā)揮了較強(qiáng)的抗組胺效果。
圖2C是表示本發(fā)明物質(zhì)濃度10、/ml的試液的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的記錄曲 線圖。在第6小時(shí)40分鐘將10-6摩爾的組胺用于豚鼠離體回腸標(biāo)本，測定 收縮反應(yīng)，將其作為對照。標(biāo)本的收縮結(jié)束后，在第6小時(shí)50分鐘將本 發(fā)明物質(zhì)濃度1 (T3g / ml的試液用于標(biāo)本，進(jìn)而在第6小時(shí)52分鐘再次將 組胺10-6摩爾用于標(biāo)本。
由圖2C可知，試液的本發(fā)明物質(zhì)濃度為10^g/ml時(shí)，在第二次使用 組胺時(shí)，標(biāo)本完全未顯示收縮反應(yīng)。這是本發(fā)明人完全沒有預(yù)料到的令人驚奇的結(jié)果。鑒于上述結(jié)果，可以認(rèn)為本發(fā)明物質(zhì)的抗組胺效果很強(qiáng)， 遠(yuǎn)超過目前人們所知的水平。
圖3是將圖2A ~ C的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行歸納的曲線圖，橫軸表示試液中 的本發(fā)明物質(zhì)濃度的對數(shù)，縱軸表示使用試液后的收縮反應(yīng)測定值與對 照的比。由此可以容易地看出隨著試液中的本發(fā)明物質(zhì)濃度增大，收縮 反應(yīng)驟減。
以上，給出了本發(fā)明的抗組胺物質(zhì)的制備方法的詳細(xì)步驟、和表明 由此制備方法制備得到的抗組胺物質(zhì)的效果的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果表 明，本發(fā)明的抗組胺物質(zhì)具有令人驚奇的抗組胺效果。因此，本發(fā)明的 抗組胺物質(zhì)可以廣泛應(yīng)用于化妝用品和藥品，特別是，可以期待將其應(yīng) 用于適合花粉癥和特應(yīng)癥等I型過敏的患者或呈現(xiàn)相似癥狀的患者的 化妝用品和藥品。并且，本發(fā)明的抗組胺物質(zhì)具有完全不產(chǎn)生令人不快 的氣味的優(yōu)點(diǎn)，可以將其容易地用于對氣味問題敏感的化妝用品。因此， 本發(fā)明的抗組胺物質(zhì)作為在用于呈現(xiàn)花粉癥和特應(yīng)癥等癥狀的患者的 化妝品中配合的成分，被給予了非常大的期待。
本發(fā)明的抗組胺物質(zhì)在化妝用品中可以廣泛用于頭發(fā)用化妝品、整 發(fā)用品、養(yǎng)發(fā)用品、滋養(yǎng)頭皮用品、毛發(fā)著色用品、洗發(fā)用品、護(hù)發(fā)素 (hair rinse)、皮膚用化妝品'化妝水、化妝液、霜(cream)、乳液、 曬黑霜、防曬霜、洗滌用品、剃須膏、脫毛膏、潔面膏(facial rinse)、 面膜(pack)、化妝用油、沐浴露(bodyrinse) 、 4安摩用品、裝飾用化 妝品.粉底(foundation)、化妝底霜、香粉、口紅、眼用美容品(eye makeup)、臉頰化妝用品、身體化妝品(bodymakeup)、古龍水'香水、 浴用化妝用品、指甲化妝用品、爽身粉(bodypowder)等，另夕卜，在藥 品中可以廣泛用于散劑.細(xì)粒劑、顆粒劑、片劑、膠嚢劑、丸劑、桿劑、 筆劑、內(nèi)容液劑、外用液劑、浸膏劑、硬膏劑、栓劑、氣溶膠、氣霧劑、 藥品吸附劑、眼科用劑、注射劑、絆創(chuàng)膏等。


是表示本發(fā)明的抗組胺物質(zhì)的制備方法的流程的流程圖。
8[圖2A]是表示考察本發(fā)明物質(zhì)的抗組胺效果的實(shí)驗(yàn)結(jié)果之一的圖。 [圖2B]是表示考察本發(fā)明物質(zhì)的抗組胺效果的實(shí)驗(yàn)結(jié)果之一的圖。 [圖2C]是表示考察本發(fā)明物質(zhì)的抗組胺效果的實(shí)驗(yàn)結(jié)果之一的圖。 [圖3 ]是表示考察本發(fā)明物質(zhì)的抗組胺效果的實(shí)驗(yàn)結(jié)果之一的圖。
權(quán)利要求
1、一種抗組胺物質(zhì)的制備方法，其特征在于，包括下述步驟向干燥的甜葉菊植物組織中加入酵母及水使之發(fā)酵的步驟；用乙醇水溶液提取由所述發(fā)酵步驟得到的發(fā)酵甜葉菊的步驟；將由所述提取步驟得到的提取液濃縮的步驟；將由所述濃縮步驟得到的濃縮液分餾，收集90％乙醇可溶餾分的步驟。
2、 如權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于，在所述發(fā)酵步驟中，使甜葉菊植物組織完全地發(fā)酵。
3、 一種抗組胺物質(zhì)，其特征在于，含有將下述提取液濃縮得到的濃縮液的90%乙醇可溶餾分，所述提取液是使用乙醇水溶液提取發(fā)酵甜葉菊得到的，所述發(fā)酵甜葉菊是通過向干燥的甜葉菊植物組織中加入酵母及水使之發(fā)酵而得到的。
4、 一種化妝用品，含有由權(quán)利要求1或2所述的制備方法制備得到的抗組胺物質(zhì)，或權(quán)利要求3所述的抗組胺物質(zhì)。
5、 一種藥品，含有由權(quán)利要求1或2所述的制備方法制備得到的抗組胺物質(zhì)，或權(quán)利要求3所述的抗組胺物質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明的抗組胺物質(zhì)的制備方法的特征在于，包括下述步驟向干燥的甜葉菊植物組織中加入酵母及水使之發(fā)酵的步驟；用乙醇水溶液提取由該發(fā)酵步驟得到的發(fā)酵甜葉菊的步驟；將由該提取步驟得到的提取液濃縮的步驟；將由該濃縮步驟得到的濃縮液分餾，收集90％乙醇可溶餾分的步驟。
文檔編號A61P11/06GK101674841SQ20088001134
公開日2010年3月17日 申請日期2008年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月6日
發(fā)明者金辰彥 申請人:株式會社夏洛美