專利名稱：：一種治療乳蛾的中藥及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療乳蛾的中藥及其制備方法，屬于中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：急乳蛾，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)稱為急性扁桃體炎，是腭扁桃體的急性非特異性炎癥。常伴有程度不等，范圍不一的急性咽炎，是一種常見的咽部疾病。多發(fā)生在兒童及青年。臨床以扁桃體紅腫疼痛為其主要特征。本病如失治、誤治，由于炎癥向鄰近組織擴(kuò)展，常致扁桃體周圍濃腫，若治療不徹底，可遷延成慢性扁桃體炎，可導(dǎo)致如風(fēng)濕熱、腎小球腎炎、心肌炎等全身并發(fā)病，嚴(yán)重危害青少年的身體健康。西醫(yī)治療此病以抗生素和糖皮質(zhì)激素為主，而對于反復(fù)發(fā)作者，釆用手術(shù)切除扁桃體。但由于抗生素的濫用及過量使用，使其副作用越來越多，如對神經(jīng)系統(tǒng)的影響、血液系統(tǒng)的影響、二重感染及電解質(zhì)紊亂等，表明西醫(yī)治療此病并不完全理想，且此類藥無抗病毒的作用，藥價也較高。中醫(yī)，認(rèn)為此病為風(fēng)熱之邪入侵肺系搏結(jié)于喉核，致使脈絡(luò)受阻，肌膜受灼，喉核紅腫疼痛，治法應(yīng)既疏風(fēng)祛除表邪，又清熱解毒去其里熱，同時利咽消腫。市場上己有的中藥制劑如牛黃解毒片、六神丸、清開靈等，多具有清熱解毒，利咽消腫的作用，而疏風(fēng)作用較弱，并且長期服用還可引起中毒反應(yīng)。
發(fā)明內(nèi)容針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明的目的在于提供一種治療乳蛾的中藥及其制備方法，這種中藥既能疏風(fēng)清熱，解毒、消腫利咽，又能抗病毒，且服用方便，藥源廣泛。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采取的技術(shù)方案是一種治療乳蛾的中藥，其由如下重量份額的原料藥制成牛蒡子490-510份；馬勃320-340份；荊芥490-510份；僵蠶490-510份;蟬蛻490-510份和升麻160-170份。所述治療乳蛾的中藥，原料藥的重量份額為牛蒡子500份；馬勃333份；荊芥500份；僵蠶500份；蟬蛻500份和升麻167份。制備治療乳蛾的中藥的方法，其由包括如下步驟a:對牛蒡子提取對牛蒡子通過乙醇提取，濾過回收乙醇后將提取液濃縮成稠膏備用；b:對荊芥提取將荊芥通過蒸餾法提取揮發(fā)油，將揮發(fā)油溶于乙醇中，并與e糊精包合，然后將包合物干燥后備用，將蒸餾后的水溶液收集備用；C:對馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻提取將馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻用水煎煮獲得水溶液，將獲得水溶液；d:混合將步驟C和步驟b中的水溶液合并，濾過，濃縮成稠膏后與步驟a中的稠膏合并，減壓干燥后與步驟b中的包合物合并混合。制備治療乳蛾的中藥的方法，在步驟d中，稠膏合并后，經(jīng)過減壓干燥，然后粉碎成細(xì)分，與步驟b中粉碎后的包合物合并混合，在合并混合物中加入輔料，以乙醇制顆粒，5(TC干燥即成。所述制備治療乳蛾的中藥的方法，在步驟a中，取牛蒡子，用6倍量60%的乙醇回流提取二次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成稠膏。所述制備治療乳蛾的中藥的方法，在步驟b中，將荊芥加入8倍量的水，蒸餾提取揮發(fā)油1.5小時，將提取到的揮發(fā)油溶于乙醇，揮發(fā)油與乙醇的比例為1:3,加入到40。C的3—環(huán)糊精飽和水溶液中，揮發(fā)油環(huán)糊精水的比例為1:8:80，4(TC恒溫攪拌2小時，冷藏24小時，濾過，5(TC干燥，成包合物。所述制備治療乳蛾的中藥的方法，在歩驟c中，在馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻中加IO倍量水，煎煮二次，每次1小時，合并煎液，濾過而成提取水溶液。本發(fā)明要治療的乳蛾病，發(fā)病多因素體肺胃積熱，加之起居失常，衛(wèi)外失固，風(fēng)熱邪毒乘虛由口鼻而入，與氣血搏結(jié)于喉核，發(fā)為紅腫疼痛，系外感風(fēng)熱所致，根據(jù)八綱辯證及衛(wèi)氣營血施治原則，表熱宜散宜疏，故治療總以疏風(fēng)清熱為大法；而風(fēng)熱搏于咽喉，障礙氣血運(yùn)行，則咽喉漸之腫脹，于是咽痛不適，吞咽不利，咽喉干灼，喉核紅腫諸癥眾生；若風(fēng)熱侵襲入內(nèi)，衛(wèi)氣營運(yùn)受阻，敷布不利，則可伴見惡寒發(fā)熱，頭痛。體倦等癥；綜觀施治病證風(fēng)熱邪毒郁表，咽喉腫痛之病機(jī)，故確立了疏散風(fēng)熱，解毒利咽之法。本發(fā)明以牛蒡子為君藥。牛蒡子辛苦而涼，入肺胃經(jīng)，具有疏散風(fēng)熱，解毒之功效，為散風(fēng)除熱解毒之要藥，能清風(fēng)熱，祛熱毒，散結(jié)氣，利咽喉，為治療外感風(fēng)熱所致咽喉腫痛之首選藥，本發(fā)明用之，疏風(fēng)清熱，解毒利咽而為君藥。本發(fā)明以馬勃、荊芥為臣藥。馬勃清肺利咽，解毒，善治咽喉腫痛。既可散郁熱，也能清肺胃，確屬喉積良藥，且辛平而散，治療乳蛾適應(yīng)病證，甚為穩(wěn)妥；荊芥發(fā)表祛風(fēng)，治療感冒發(fā)熱，頭痛，咽喉腫痛，《本草綱目》認(rèn)為荊芥能"散風(fēng)熱，清頭目，利咽喉，消瘡腫"，正與本方用意吻合，馬勃，荊芥合用，既可疏風(fēng)清熱，與君藥有協(xié)同作用，解毒利咽，又可清解肺胃郁熱，共為臣藥。本方以僵蠶、蟬蛻為佐藥。僵蠶祛風(fēng)泄熱，化痰散結(jié)，治療喉風(fēng)，喉痹確有良效，為治療急性咽炎，喉炎的常用藥；蟬蛻疏風(fēng)散熱，多用于治咽痛音啞等癥。二藥合用，疏風(fēng)散熱，散結(jié)利咽，佐助君臣諸藥祛除急性扁桃體炎諸癥，而為佐藥。本方以升麻為使藥。升麻升陽發(fā)表解毒，可助群藥疏散風(fēng)熱，解毒利咽，且善提清氣，可引藥上行直達(dá)病所，用為使藥，總之，本發(fā)明組方精巧，用藥輕靈，切合病機(jī)及中藥方劑學(xué)原理，用于治療乳蛾病具有很好的療效。具體實施例方式實施例1制備治療乳蛾的中藥1、備料取牛蒡子490份；馬勃320份；荊芥490份；僵蠶490份；蟬蛻490份和升麻160份。其中牛蒡子除去雜質(zhì)，洗凈，干燥；馬勃除去雜質(zhì)，剪成小塊；荊芥除去雜質(zhì)，噴淋清水，洗凈，潤透，切段，曬干；僵蠶淘洗后干燥，除去雜質(zhì)；蟬蛻除去雜質(zhì)，洗凈，曬干；升麻除去雜質(zhì)，略泡，洗凈，潤透，切厚片，干燥。2、對牛蒡子提取牛蒡子，加6倍量60%乙醇回流提取二次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成的稠膏備用；3、對荊芥提取取荊芥加8倍量水，蒸餾提取揮發(fā)油1.5小時，收集揮發(fā)油，將揮發(fā)油溶于乙醇(揮發(fā)油一乙醇l:3)，加入到4(TC的P-環(huán)糊精飽合水溶液中(揮發(fā)油一e環(huán)糊精一水比例為1:8:80)，4(TC恒溫攪拌2小時，冷藏24小時，濾過，50。C千燥，過篩，備用；蒸餾后的水溶液另器收集備用。4、對馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻提取將馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻內(nèi)加入10倍量水，煎煮二次，每次1小時，合并煎液，濾過，濾液與上述水溶液合并，濃縮至成稠膏。在這里，也可以將荊芥提取后的藥渣加入馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻內(nèi)一并提取，從而使荊芥得到更進(jìn)一步的提取。5、混合將4中獲得的稠膏與2中的稠膏合并，減壓千燥(0.()8Mpa，80°C)，粉碎成細(xì)粉，加入荊芥揮發(fā)油包合物及輔料適量，以乙醇制顆粒，5(TC干燥，即得，這里的輔料為糊精和蔗糖。實施例2制備治療乳蛾的中藥1、備料取牛蒡子510份；馬勃340份；荊芥510份；僵蠶510份；蟬蛻510份和升麻170份。其中牛蒡子除去雜質(zhì)，洗凈，干燥；馬勃除去雜質(zhì)，剪成小塊；荊芥除去雜質(zhì)，噴淋清水，洗凈，潤透，切段，曬干；僵蠶淘洗后干燥，除去雜質(zhì)；蟬蛻除去雜質(zhì)，洗凈，曬干；升麻除去雜質(zhì)，略泡，洗凈，潤透，切厚片，干燥。2、對牛蒡子提取牛蒡子，加6倍量60%乙醇回流提取二次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成稠膏備用；3、對荊芥提取取荊芥加8倍量水，蒸餾提取揮發(fā)油1.5小時，收集揮發(fā)油，將揮發(fā)油溶于乙醇(揮發(fā)油一乙醇l:3)，加入到4(TC的13環(huán)糊精飽合水溶液中(揮發(fā)油一e環(huán)糊精一水比例為1:8:80)，4(TC恒溫攪拌2小時，冷藏24小時，濾過，5(TC干燥，過篩，備用；蒸餾后的水溶液另器收集備用。4、對馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻提取將馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻內(nèi)加入10倍量水，煎煮二次，每次1小時，合并煎液，濾過，濾液與上述水溶液合并，濃縮成稠膏。在這里，也可以將荊芥提取后的藥渣加入馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻內(nèi)一并提取，從而使荊芥得到更進(jìn)一步的提取。5、混合將4中獲得的稠膏與2中的稠膏合并，減壓干燥(0.08Mpa，80°C)，粉碎成細(xì)粉，加入荊芥揮發(fā)油包合物、及輔料適量，以乙醇制顆粒，5(TC干燥即得，這里的輔料為糊精和蔗糖。最佳實施例制備治療乳蛾的中藥1、備料取牛蒡子500份；馬勃333份；荊芥500份；僵蠶500份；蟬蛻500份和升麻167份。其中牛蒡子除去雜質(zhì)，洗凈，干燥；馬勃除去雜質(zhì)，剪成小塊；荊芥除去雜質(zhì)，噴淋清水，洗凈，潤透，切段，曬干；僵蠶淘洗后干燥，除去雜質(zhì)；蟬蛻除去雜質(zhì)，洗凈，曬干；升麻除去雜質(zhì)，略泡，洗凈，潤透，切厚片，干燥。2、對牛蒡子提取牛蒡子，加6倍量60%乙醇回流提取二次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成稠膏備用；3、對荊芥提取取荊芥加8倍量水，蒸餾提取揮發(fā)油1.5小時，收集揮發(fā)油，將揮發(fā)油溶于乙醇(揮發(fā)油一乙醇l:3)，加入到4(TC的e-環(huán)糊精飽合水溶液中(揮發(fā)油一P環(huán)糊精一水比例為1:8:80)，40。C恒溫攪拌2小時，冷藏24小時，濾過，5(TC干燥，過篩，備用；蒸餾后的水溶液另器收集備用。4、對馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻提取將馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻內(nèi)加入10倍量水，煎煮二次，每次1小時，合并煎液，濾過，濾液與上述水溶液合并，濃縮成稠膏。在這里，也可以將荊芥提取后的藥渣加入馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻內(nèi)一并提取，從而使荊芥得到更進(jìn)一步的提取。5、混合將4中獲得的稠膏與2中的稠膏合并，減壓干燥(0.08Mpa，8(TC)，粉碎成細(xì)粉，加入荊芥揮發(fā)油包合物、及輔料適量，以乙醇制顆粒，5(TC干燥即得，這里的輔料為糊精和蔗糖。在本發(fā)明中，藥品可以制成顆粒，可以壓片或裝成膠囊。本發(fā)明的藥效學(xué)試驗實驗材料1.1受試藥物本發(fā)明配方和工藝制作的顆粒狀藥物，名稱為蒡勃乳蛾消顆粒賦形劑對照賦形劑由糊精、糖粉、甜蜜素組成，配成65%濃度，按10ml/kg灌胃。陽性對照藥(一)阿斯匹林(腸溶片)，每片含乙酰水楊酸25mg，臨床成人每日口服50mg，選擇小鼠劑量為0.3g/kg，大鼠劑量為0.2g/kg。陽性對照藥(二)阿莫西林片，選擇小鼠劑量為0.52g/kg，相當(dāng)于2倍等效劑量。陽性對照藥(三)四鹽酸胍(GuamdineHCL)，臨用時以RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液配制成所需濃度。用于體外抗病毒試驗。陽性對照藥(四)靈丹草膠囊，選擇小鼠劑量為0.7g/kg，相當(dāng)于2倍等效劑量。陽性對照藥(五)咳平片，每片含10mg鹽酸氯哌丁，批號20040101。選擇小鼠劑量為0.5g/kg，相當(dāng)于2倍等效劑量。1.2試驗動物封閉群，遠(yuǎn)交系，Wistar大白鼠，體重120150克，雌雄各半；昆明種小白鼠，體重1820克，雌雄各半。1.2.動物伺養(yǎng)條件動物室為普通級，室溫25。C，相對溫度40%。通風(fēng)、光照良好，采用標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)。動物為雌、雄分開同性混籠飼養(yǎng)，每籠動物5只，每天上午定時給藥及定量給食給水1次，并測量其前l(fā)日的剩余量。1.3試驗病毒柯薩奇B3病毒(CoxsackieB3virus),Nancy株腺病毒7型(Ad7)流感病毒(FM1)1.4菌種及菌號國家標(biāo)準(zhǔn)菌種金黃色葡萄球菌26003大腸埃希氏菌31001地方菌種肺炎克雷伯氏桿菌13883糞鏈球菌ATCC29212福氏志賀氏ATCC120221.5細(xì)胞人羊膜(FL)細(xì)胞。狗腎細(xì)胞(MDCK)。1.6試劑RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)液，；新生小牛血清，；胰蛋白酶，；噻唑藍(lán)(MTT，3-4,5隱dimethylthiazo(-2-yl)-2，5-diphenylte-trazoliumdromide)。2.劑量選擇由于半數(shù)致死量LD^未能測出，故參照臨床用藥劑量及最大給藥劑量測定值選擇動物用藥量。臨床成人每天服30g生藥，相當(dāng)于0.43g生藥/kg，按人體與動物體表面積等效劑量比值計算，選擇小鼠3種劑量為15.6g、7.8g、3.9g生藥/kg，大鼠3種劑量為10.8g、5.4g、2.7g生藥/kg(分別為4倍、2倍及等效劑量)，動物均灌胃給藥Gg)。給藥途徑與臨床相一致。3.試驗方法與結(jié)果3.1、抗炎試驗3.1.1蒡勃乳蛾消對蛋清性大鼠足腫脹的影響[2]取大鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，每組動物10只，，第1、2、3組為蒡勃乳蛾消高、中、低劑量組，劑量分別為10.8、5.4、2.7g生藥/kg，(分別相當(dāng)于4倍、2倍、等效劑量)，第四組為陽性藥阿斯匹林(當(dāng)日給藥1次)，劑量0.2g/kg,，第五組為對照組，各組按劑量每日ig給藥1次，連續(xù)給藥3天，對照組按給藥高劑量給予賦形劑。灌胃(ig)給藥。試驗時用自制窄帶尺測量大鼠右后足踝關(guān)節(jié)周長作為致炎前周長并記錄，于末次給藥30mm后，分別在大鼠右后足皮下注射新鮮蛋清O.lml/只。每0.5小時測右后足踝關(guān)節(jié)周長1次，共觀察2.0hr。以每鼠右后足自身為對照，足腫脹度-致炎后踝關(guān)節(jié)周長一致炎前踝關(guān)節(jié)周長(mm)，結(jié)果見表l。表1蒡勃乳蛾消對蛋清性大鼠足腫脹的影響(X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>由表1結(jié)果表明，蒡勃乳蛾消高、中劑量組對1一2h大鼠蛋清性足腫脹具有明顯的抑制作用，其中l(wèi)hr后抑制作用最強(qiáng)，但作用不如陽性藥阿斯匹林，說明本品對蛋清短效致炎具有一定的拮抗作用。3丄2、蒡勃乳蛾消對小鼠二甲苯耳廓腫脹影響取50只小鼠，隨機(jī)分為5組，每組動物10只，第l、2、3組為蒡勃乳蛾消高、中、低劑量組，劑量分別為15.6g、7.8g、3.9g生藥/kg(分別相當(dāng)于4倍、2倍及等效劑量)，第4組為陽性藥阿斯匹林，劑量0.3g/kg，第5組為對照組，各組動物按劑量每日ig給藥1次，連續(xù)3次，對照組按給藥高劑量容積給予賦形劑。于末次給藥后lh，于右耳廓兩側(cè)均勻涂抹二甲苯30ul做為致炎耳，左耳作為對照，致炎后2h剪下兩耳，用9mm打孔器，在同一耳面部位打孔，以等同打孔耳片稱重，以兩耳重量差為腫脹度。結(jié)果見表2。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>由表2結(jié)果表明，蒡勃乳蛾消15.6g生藥/kg劑量具有明顯的抑制耳廓腫脹作用，抑制率為19.0%，但作用不如陽性藥阿斯匹林組，中、低劑量組亦有一定的抑制趨勢。3丄3蒡勃乳蛾消對小鼠腹腔通透性的影響取60只小鼠，隨機(jī)分為5組，每組動物10只，，第l、2、3組為蒡勃乳蛾消高、中、低劑量組，劑量分別為15.6g、7.8g、3.9g生藥/kg(分別相當(dāng)于等效劑量4倍、2倍及等效劑量)，第4組為陽性藥阿斯匹林，劑量為0.30g/kg,第5組為對照組，每日ig給藥l次，動物連續(xù)灌胃給藥5天，于末次給藥1小時后尾靜脈注射0.5%伊文思藍(lán)溶液O.lml/10g，立即腹腔注射0.6%醋酸生理鹽水溶液0.2ml/只，20分鐘后處死小鼠，剪開腹腔，用生理鹽水沖洗，收集沖洗液，調(diào)至5ml，離心，取上清液，用752型分光光度計于590nm處測吸收度，測OD值，結(jié)果見表3。表3蒡勃乳蛾消對醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性的影響動物數(shù)OD值(只)(X士SD)0.018±0.0054**0.019±0.0050**0.021±0.0020*0.017±0.0030***0.026±0.0056與對照組比較*P<0.05**P<0.01***P<0.001由表3結(jié)果表明，蒡勃乳蛾消高、中、低三種劑量均對小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性具有不同程度的抑制作用。3.2抗病毒試驗組別劑量(g生藥/kg)蒡勃乳蛾消15.6107.8103.910阿斯匹林0.310對照組(賦形劑)103.2.1蒡勃乳蛾消、黃芪注射液和鹽酸胍對體外培養(yǎng)人羊膜(FL)將待測藥物分別用RPM1640配制成5000Mg/ml、2500Pg/ml、2000Pg/ml、1500Pg/ml、1000Pg/m、800Pg/ml、400Pg/ml、200Pg/ml、100Hg/ml、50Pg/ml的溶液。在人羊膜(FL)細(xì)胞上以MTT法分別測定最大無毒劑量(TDO)和半數(shù)中毒劑量(TD50)。蒡勃乳蛾消對人羊膜(FL)細(xì)胞的TDO為80(mg/ml,黃芪注射液為500mg/ml，鹽酸胍為250tig/ml(結(jié)果見表4)。3.2.2.試驗分組試驗設(shè)正常細(xì)胞對照組、完全病毒感染組、陽性藥物對照組(鹽酸胍)、同類藥物對照組(黃芪注射液)和試驗組。試驗組再分為3組，自蒡勃乳蛾消TDO開始設(shè)800Pg/ml、400Pg/ml、200Pg/ml，每組又分為先加藥后感染病毒組、感染病毒同時加藥組和先感染病毒后加藥組。同類藥物對照組(黃芪注射液)的試驗濃度為500mg/ml。陽性藥物對照組(鹽酸胍)的試驗濃度為250"g/ml。4.2.3抗病毒試驗人羊膜(FL)細(xì)胞2.0X105Cell/0.lml接種于96孔板(柯薩奇B:,病毒、腺病毒7型)，0.lml/孔；狗腎細(xì)胞(MDCK)2.0X105Cell/0.lml接種于96孔板。待培養(yǎng)24小時貼壁后，分別以100TCID^的柯薩奇B:,(Nancy株)、腺病毒7型和流感病毒(FM1)感染相應(yīng)宿主細(xì)胞，保持2小時傾出，將待測藥物和陽性對照藥物自最大無毒濃度(TDO)開始制成3個稀釋度加入細(xì)胞，顯微鏡下觀察CPE，根據(jù)CPE的破壞程度分為4級，艮口+---為《25%++--為《50%++-+--為《75%++++為《100%(結(jié)果表5、6、7)。同時進(jìn)行病毒繁殖抑制試驗，MTT檢測結(jié)果表明，蒡勃乳蛾消對柯薩奇B:;病毒標(biāo)準(zhǔn)毒株Nancy株、腺病毒7型株和流感病毒(FM1)株均具有較強(qiáng)的抑制作用(見表4、5、6)。以上各試驗組均與病毒對照組進(jìn)行t檢驗，證明各藥物試驗組與病毒對照組比較均具有極顯著性差異水平飾.OOl)o<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>表6.蒡勃乳蛾消對腺病毒的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>3.2.4試驗結(jié)論試驗結(jié)果表明，蒡勃乳蛾消對柯薩奇B:,型病毒、腺病毒7型和流感病毒(FM1)均具有較強(qiáng)的抑制作用；提示本品對由柯薩奇B型病毒、腺病毒和流感病毒而引發(fā)的急性咽喉炎可能同樣也具有一定的治療作用?？滤_奇B組病毒、腺病毒和流感病毒是急性咽喉炎主要的致病因素之一。上述試驗結(jié)果顯然表明，蒡勃乳蛾消可減少扁桃體炎的發(fā)生，同時對由病毒感染所致的組織細(xì)胞損傷具有一定的恢復(fù)和保護(hù)作用。由于蒡勃乳蛾消是根據(jù)一定中醫(yī)藥理論和廣泛的臨床經(jīng)驗結(jié)合而成的中藥II類復(fù)方制劑，現(xiàn)代研究結(jié)果又證明了其抗病毒的作用，所以它能達(dá)到祛風(fēng)利咽、清熱解毒之功效。蒡勃乳蛾消的體外抗病毒作用為臨床上應(yīng)用該藥物治療急性咽喉炎提供了一定的藥效學(xué)依據(jù)。3.3抑菌試驗3.3.1、蒡勃乳蛾消對體外細(xì)菌培養(yǎng)的抑制作用[6]把6種實驗菌接種在普通哥倫比亞血平皿上，37。C孵育16-18小時取出，用生理鹽稀釋，使菌液濃度為10"ml菌，試驗時取無菌試管10支，將藥液原液按等比倍數(shù)稀釋，濃度分別為0.5g、0.25g、0.13g、0.06g、0.03g、0.015g、0.0075g生藥/ml后，再取10支試管每管加lml藥液和O.lml菌液，充分混勻后，37"C孵育18小時，結(jié)果以藥液管是否澄清、液面有無霉菌環(huán)為指標(biāo)，如藥液管澄清、液面無霉菌環(huán)，則該管藥物有抗菌作用；如藥液管為渾濁，液面有霉菌環(huán)，則該管藥物無抗菌作用。以完全無菌生長最低藥物濃度作為藥物對該菌株的最低抑菌濃度(MIC)。結(jié)果見表8。表8蒡勃乳蛾消對6種實驗菌體外(試管法)藥敏試驗大腸埃希氏菌0.015金黃色葡萄球菌0.06肺炎鏈球菌0.5肺炎克雷佰氏桿菌0.25福氏志賀氏菌0.25糞鏈球菌0.5由表8結(jié)果表明，蒡勃乳蛾消不同梯度藥液均能測出最低抑菌濃3.3.2、對金黃色葡萄球菌體內(nèi)感染小鼠的保護(hù)作用將金黃色葡萄球菌(購于中國藥品生物制品檢定所菌號26003)進(jìn)行培養(yǎng)37r孵育16-18小時取出，用生理鹽水以10倍順序稀釋，同時加入5%濃度胃粘膜素(以強(qiáng)化毒力)制成不同梯度的菌懸液。經(jīng)預(yù)試驗，本試驗條件下腹腔注射金黃色葡萄球菌最小致死量(MLD)為10—2。正式試驗，取小鼠120只，雌雄各半，體重18-20g，隨機(jī)分為6組，每組20只，第l、2、3、4組為蒡勃乳蛾消四個劑量組，劑量分別為31.2g、15.6g、7.8g、3.9g生藥/kg(分別相當(dāng)于等效劑量的8倍、4倍、2倍及等效劑量)，第5組為陽性藥阿莫西林膠囊組，劑量為520mg/kg(相當(dāng)于2倍等效劑量)，第6組為對照組，每日堪給藥2次，上、下午各一次，連續(xù)給藥兩天，于第4次給藥后腹腔注射10—2金黃色葡萄球菌懸液，每只0.5ml，觀察24h死亡動物數(shù)，計算死亡率并進(jìn)行入2統(tǒng)計學(xué)處理，結(jié)果見表9。最低抑菌濃度(MIC)蒡勃乳蛾消(g粉/ml)表9、對金黃色葡萄球菌體內(nèi)(腹腔)感染小鼠的保護(hù)作用<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>表9結(jié)果表明，蒡勃乳蛾消31.2g、15.6g生藥/kg劑量均對金黃色葡萄球菌致小鼠體內(nèi)感染有不同程度的抑制作用，其中高劑量組抑菌作用最為明顯，與對照組比較經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理PO.Ol，P<0.05。3.3.3、蒡勃乳蛾消對肺炎鏈球菌體內(nèi)感染小鼠的保護(hù)作用將肺炎鏈球菌進(jìn)行培養(yǎng)37。C孵育16-18小時取出，用生理鹽水以IO倍順序稀釋，同時加入5%濃度胃粘膜素(以強(qiáng)化毒力)制成不同梯度的菌懸液。經(jīng)預(yù)試驗，本試驗條件下腹腔注射肺炎鏈球菌最小致死量(MLD)為10"。正式試驗，取小鼠90只，雌雄各半，體重18-20g，隨機(jī)分為6組，每組15只，第l、2、3、4組為蒡勃乳蛾消四個劑量組，劑量分別為31.2g、15.6g、7.8g、3.9g生藥/kg，第5組為陽性藥阿莫西林膠囊組，劑量為0.52g/kg(相當(dāng)于2倍等效劑量)，第6組為對照組，每日ig給藥2次，上、下午各一次，連續(xù)給藥兩天，于第4次給藥后腹腔注射肺炎鏈球菌，每只0.5ml，觀察48h死亡動物數(shù)，計算死亡率并進(jìn)行入2統(tǒng)計學(xué)處理，結(jié)果見表IO。表10對肺炎鏈球菌體內(nèi)'〔腹腔)感染小<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>由表10結(jié)果表明，4個劑量均對肺炎鏈球菌致小鼠體內(nèi)感染有不同程度的抑制趨勢，其中高、中劑量組抗菌作用最為明顯，與對照組比較經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理P<0.05。4.4、解熱試驗4.4.1蒡勃乳蛾消對酵母致大鼠發(fā)熱的影響取大鼠40只，隨機(jī)分為5組，每組動物8只，第l、2、3組為蒡勃乳蛾消高、中、低劑量組，劑量分別為10.8g、5.4g、2.7g生藥/kg(分別相當(dāng)于4倍、2倍及等效劑量)，第4組為陽性藥阿斯匹林，劑量0.20g/kg，第5組為對照組。各組按劑量灌胃(ig)給藥。在給藥前，每只大鼠測正常體溫，并記錄。試驗時，于每只大鼠皮下注射10%新鮮啤酒酵母混懸液3ml/kg，在致熱后6hr，各組動物按所示劑量給藥，觀察并記錄給藥后0.5hr、lhr、1.5hr、2hr、3hr的解熱作用，結(jié)果見表ll。<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>表11結(jié)果表明，蒡勃乳蛾消高劑量組對酵母引起大鼠發(fā)熱有明顯的解熱作用。3.5鎮(zhèn)痛作用3.5.1蒡勃乳蛾消對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響取50只小鼠，隨機(jī)分為5組，每組動物10只，，第l、2、3組為蒡勃乳蛾消高、中、低劑量組，劑量分別為15.6g、7.8g、3.9g生藥/kg(分別相當(dāng)于4倍、2倍及等效劑量)，第4組為陽性藥阿斯匹林，劑量0.3g/kg,第5組為對照組，每日ig給藥1次，動物連續(xù)灌胃給藥5天(陽性藥物當(dāng)日給藥)，于末次給藥后lhr，每鼠由腹腔注射0.6%醋酸溶液0.1ml/10g(體重)，5min后開始觀察并記錄lOmm內(nèi)'鼠扭體反應(yīng)次數(shù)，結(jié)果見表12。表12蒡勃乳蛾消對醋酸致沖、鼠扭體反應(yīng)的影響組別劑量動物數(shù)IO分鐘扭體次數(shù)(g生藥/kg)(只)CX土SD)蒡勃乳蛾消15.61017.4±6.11*7.81019.6±3.13*3.91024.7±3.89阿斯匹林0.31014.1±3.60***對照組1023.5±4.43與對照組比較*P<0.05***P<0.001表12可知，蒡勃乳蛾消高、中、低三種劑量均可降低醋酸致小鼠扭體次數(shù)，其中高劑量、中劑量作用最強(qiáng)。3.5.2對小鼠熱板反應(yīng)的影響取雌性小鼠60只，每次將1只放在熱板上，熱板溫度控制在55±0.5°C，小鼠自放在熱板上至出現(xiàn)舔后足所需時間(s)作為該小鼠的痛閾值，凡舔后足時間小于5s或大于30s或跳躍者棄之不用。將篩選過的50只小鼠隨機(jī)分成5組，每組10只，按照組別劑量，連續(xù)給藥7天，分別測末次給藥后lh、2h、3h的痛閾值。(60min仍無反應(yīng)，將小鼠取出，其痛閾以60s計算)。表13蒡勃乳蛾消對小鼠熱板反應(yīng)的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>試驗結(jié)果表明，蒡勃乳蛾消于給藥lh、2h、3h對小鼠均有明顯的止痛作用。3.6對免疫功能的影響3.6.1蒡勃乳蛾消對小鼠體內(nèi)炭粒廓清功能的影響取小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，按表14組別劑量連續(xù)灌胃給藥7天，于末次給藥1小時各鼠由尾靜脈注射印度墨汁0.1ml/10g體重，然后在注射5mm及15mm時，從小鼠眼靜脈叢取血0.025ml，加入lmg/ml碳酸鈉溶液2ml中，搖勻，以752型分光光度計60nm處測OD值，并立即處死動物，剖取肝、脾稱重，計算K值、ct值。結(jié)果見表14。<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>3VKX體重(g)a二---肝重(g)+脾重(g)表14蒡勃乳蛾消對小鼠體內(nèi)炭粒廓清功能的影P可(X±S)組別劑量動物數(shù)，，，，(g生藥/kg)(只)蒡勃乳蛾消15.6100.0296土0.0100"5.51±0.61**7.8100.0261±0.0067"*5.63土0.49"3.9100.0206±0.0066*5.18±0.69靈丹草膠囊0.7100.0211±0,0078*5,32±0.53*對照組100.0144±0.00574.74±0,57與對照組比較*P<0.05**P<0.01***P<0.001由表14可知，蒡勃乳蛾消15.6g生藥/kg、7.8g生藥/kg組可明顯提高對單核巨噬細(xì)胞的吞噬功能，與對照組比較PO.OOl。3.7蒡勃乳蛾消對小鼠的止咳作用取小鼠50只,隨機(jī)分成5組，每組動物10只，l、2、3.組為蒡勃乳蛾消高、中、低劑量組。劑量分別為15.6g、7.8g、3.9g/kg，4組為陽性藥品咳平組，5組為對照組，動物均灌胃(ig)連續(xù)3天，對照組給予同體積賦型劑，并于第3天給藥后2hr，將小鼠按照組別分批次(每鼠)放入。經(jīng)改良的二氧化碳?xì)怏w制備裝置250ml測口燒瓶中，以10ml二氧化碳定量氣體注入瓶中，觀察咳嗽的潛伏期(注入二氧化碳開始至發(fā)生小鼠咳嗽所需的時間)以引起咳嗽潛伏期(時間s)作為測定觀察指標(biāo)，并計算止咳百分率(％)。結(jié)果見表15。表15蒡勃乳蛾消對小鼠的止咳作用(X士SD)組別劑量(g生藥/kg)動物數(shù)(只)咳嗽潛伏期(S)蒡勃乳蛾消15.61033.9±11.2*蒡勃乳蛾消7.81033.4±11.0*蒡勃乳蛾消3.91031.3±13.2咳平片0.51034.3±10.1**對照1022.6±7.4與對照組比較女P0.05**P<0.01結(jié)果表明:蒡勃乳喊g消高、中劑it對小鼠具有一定的止咳作用，但作用沒有陽性對照藥作用明顯。結(jié)果通過動物實驗研究多項指標(biāo)結(jié)果表明，蒡勃乳蛾消對上呼吸道易感染細(xì)菌金黃色葡萄球菌10—2、肺炎鏈球菌致小鼠(腹腔)體內(nèi)感染，蒡勃乳蛾消高、中劑量組具有明顯的抑制作用(P<0.05)，表現(xiàn)為可明顯減少24h、48hr動物死亡數(shù)，亦可延長受感染小鼠的死亡時間，但二種劑量抑制作用不如陽性對照品阿莫西林。體外藥敏試驗同樣證明了本品對6種菌的抑制作用，從體外抑菌結(jié)果看，該藥具有一定的直接對抗細(xì)菌作用。體外病毒試驗表明，蒡勃乳蛾消對柯薩奇B:;型病毒、腺病毒7型和流感病毒(FM1)均具有一定的抑制作用；對由柯薩奇B型病毒、腺病毒和流感病毒而引發(fā)的急性咽喉炎可能同樣也具有一定的治療作用。這對于驅(qū)逐病邪，解除表癥是非常重要的。實驗者認(rèn)為，這可能是該藥的藥理學(xué)基礎(chǔ)之一。抗炎實驗表明，該藥可明顯抑制大鼠蛋清性足腫脹和小鼠耳廓性腫脹。同時還可明顯降低新鮮酵母致發(fā)熱大鼠0.5h-2.0h體溫，上述研究結(jié)果證實了該藥對主癥的治療作用，這與臨床療效是相符的。通過抗炎、抗病毒、抑菌、解熱、止痛、提高免疫功能等與臨床主癥相應(yīng)試驗研究，各項測定指標(biāo)結(jié)果表明O)蒡勃乳蛾消高、中劑量組對大鼠蛋清性足腫脹、小鼠二甲苯耳廓腫脹及醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高均具有明顯的抑制作用。(2)對柯薩奇B:,型病毒、腺病毒7型和流感病毒(FM1)分別具有一定的抑制作用和抑制趨勢(3)對小鼠體內(nèi)感染肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌致動物死亡本品有明顯的保護(hù)作用，同時體外抑菌試驗也表明本品對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏桿菌、糞鏈球菌、福氏志賀氏等具有不同程度的藥敏反應(yīng)。(4)可減少醋酸致小鼠扭體次數(shù)，及增加小鼠熱板痛反應(yīng)閾值，說明本品具有一定的止痛作用。(5)對啤酒酵母致大鼠發(fā)熱有明顯的抑制作用。(6)該藥亦有增強(qiáng)機(jī)體單核巨噬細(xì)胞的吞噬功能，使得碳粒廓清速率加快。(7)本品有一定的止咳作用。4、急性毒性試驗。乳蛾消粉50%濃度，給小鼠ig0.4ml/10g體重，1日內(nèi)ig連續(xù)2次，后連續(xù)觀察7天，動物活動自如，無一鼠死亡，于第8天處死小鼠，進(jìn)行剖檢，未見組織臟器明顯異常改變，結(jié)果測得小鼠ig本品最大給藥劑量為302.8g生藥/kg，相當(dāng)于臨床用藥劑量的704倍。5、長期毒性試驗。試驗取Wktar大鼠分為三個給藥劑量組，一個對照組，80只大鼠隨機(jī)分為4組，每組20只，按設(shè)定劑量每日給藥l次，連續(xù)灌胃2個月，藥后觀察動物的一般狀態(tài)情況，定期記錄體重、食量，給藥2個月及停藥后15天，各處死1/2動物，并進(jìn)行血液學(xué)、血液生化學(xué)和大體及組織病理學(xué)檢查。結(jié)果，給藥期間，各組動物未見不良反應(yīng)，體重增加量、進(jìn)食量、血液學(xué)及血液生化學(xué)各項指標(biāo)均在正常值范圍內(nèi)，動物大體臟器及主要臟器病理組織學(xué)檢査除個別動物肺部有炎性細(xì)胞浸潤外(與環(huán)境變化有關(guān)，可自行恢復(fù))，其余亦未發(fā)現(xiàn)異常病理改變。上述研究結(jié)果表明，蒡勃乳蛾消用于急性扁桃體炎的治療是有一定藥理依據(jù)的，其藥理試驗的結(jié)果與該藥臨床預(yù)試的結(jié)果基本相符，且該制劑經(jīng)急性毒性試驗與長期毒性試驗觀察，末見明顯毒副作用，提示在臨床推薦的用藥劑量下使用該藥是安全的。工藝研究及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究結(jié)果表明，所確定的制備工藝合理，制得產(chǎn)品質(zhì)量可控。三批樣品通過室溫留樣觀察，表明按確定的制備工藝生產(chǎn)的蒡勃乳蛾消在一定時間內(nèi)保持質(zhì)量穩(wěn)定不變。6、臨床實驗6.1診斷標(biāo)準(zhǔn)6.1.1中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)(1)主要臨床表現(xiàn)咽部疼痛，吞咽時加重，伴惡寒發(fā)熱或高熱，喉核紅腫，表面有黃白色膿點，不超出喉核范圍，易擦去。(2)發(fā)病特點多與氣侯變化有關(guān)，好發(fā)于兒童及青少年。(3)理化檢查血白細(xì)胞計數(shù)及嗜中性粒細(xì)胞數(shù)可增高2、中醫(yī)辨證邪襲肺經(jīng)證惡寒發(fā)熱，咽部疼痛，吞咽則加劇，可伴有干澀，灼熱感，喉核紅腫，連及周圍組織，頭痛，身倦乏力，周身酸痛，咳嗽有痰，舌偏紅，苔薄白或薄黃，脈浮。6.1.2西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)(1)病史發(fā)病急驟，常有受涼、勞累、煙酒過度、營養(yǎng)不良、身體抵抗力低下等誘因。(2)癥狀，全身不適，寒戰(zhàn)發(fā)熱，體溫升高，頭痛，頸背和四肢酸痛，食欲不振，常有便秘，咽部疼痛，吞咽時加重，常伴有耳內(nèi)疼痛。(3)檢查病人急性病容，面頰潮紅，口臭，舌苔厚白，扁桃體紅腫，隱窩口有黃白色膿點，可融合成片，狀如假膜，易擦掉，下頜淋巴結(jié)腫大及壓痛。實驗室檢查血白細(xì)胞總數(shù)可增高。6.2試驗方法蒡勃乳蛾消，一日3次，每次一袋，一周為一療程，療程結(jié)束后進(jìn)行療效評定。6.2.1觀測指標(biāo)癥狀與體征咽痛，扁桃體紅腫、發(fā)熱、咽干灼熱，頭痛，身倦乏力、周身酸痛、咳嗽、舌象、脈象等情況。癥狀體征分級量化標(biāo)準(zhǔn)主癥咽痛正常0分中/J輕度2分4分6分咽痛較輕，不影響吞咽吞咽痛吞咽時劇痛扁桃體紅腫正常0分輕度2分中度4分重度6分喉核充血喉核紅腫，有濃點喉核紅腫，分泌物成片狀(2)次癥扭正常0分輕度中度l分2分<38.5°C38.539.5°C重度3分〉39,5°C咽干灼熱正常0分輕度l分咽微千中度2分咽干灼熱重度3分咽干多飲，欲冷飲全身癥狀正常o分輕度l分全身酸痛輕或無力中度2分全身酸痛，乏力重度3分全身酸痛，乏力明顯《嗽無0分有l(wèi)分舌偏紅，苔薄白或薄黃，續(xù)'有無或其他。6.2.2療效評定標(biāo)準(zhǔn)痊愈治療7天以內(nèi)臨床癥狀及體征消失，體溫、白細(xì)胞計數(shù)恢復(fù)正常。癥狀體征總積分為0。顯效治療7天以內(nèi)，療效積分減少》67%，(治療后總積分減少》2/3)有效治療7天以內(nèi)，67%》療效積分減少》33%，(2/3》治療后總積分減少》1/3)無效治療7天以內(nèi)，療效積分減少《33%，(治療后總積分減少《1/3)6.2.3結(jié)果6.2.3.1總療效情況參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》急乳蛾的療效標(biāo)準(zhǔn)，對30例病人治療前后的癥狀體征進(jìn)行綜合評價分析，結(jié)果14例痊愈，10例顯效，4例有效，2例無效?？傆行蕿?3.3%。6.2.3.2癥狀體征改善情況治療前后癥狀體征總積分比較30例病人治療前癥狀總積分平均為13.10±3.84，治療后癥狀總積分為3.17±4.713，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，P〈0.01，具有顯著性差異。治療前后各癥狀體征分級比較P值治療前(例)治療后(例)-狀正常輕中重正常輕中重咽痛0619524222〈0.01扁桃體紅腫017103131412<0.01<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>權(quán)利要求1.一種治療乳蛾的中藥，其特征在于其由如下重量份額的原料藥制成牛蒡子490-510份；馬勃320-340份；荊芥490-510份；僵蠶490-510份；蟬蛻490-510份和升麻160-170份。2.根據(jù)權(quán)利要求l所述治療乳蛾的中藥，其特征在于原料藥的重量份額為牛蒡子500份；馬勃333份；荊芥500份；僵蠶500份；蟬蛻500份和升麻167份。3.制備權(quán)利要求1或2的治療乳蛾的中藥的方法，其特征在于其由包括如下歩驟a:對牛蒡子提取對牛蒡子通過乙醇提取，濾過回收乙醇后將提取液濃縮成稠膏備用；b:對荊芥提取將荊芥通過蒸餾法提取揮發(fā)油，將揮發(fā)油溶于乙醇中，并與P糊精包合，然后將包合物千燥后備用，將蒸餾后的水溶液收集備用；C:對馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻提取將馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻用水煎煮獲得水溶液，將獲得水溶液；d:混合將步驟C和歩驟b中的水溶液合并，濾過，濃縮成稠膏后與步驟a中的稠膏合并，減壓干燥后與步驟b中的包合物合并混合。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述制備治療乳蛾的中藥的方法，其特征在于在步驟d中，稠膏合并后，經(jīng)過減壓干燥，然后粉碎成細(xì)分，與歩驟b中粉碎后的包合物合并混合，在合并混合物中加入輔料，以乙醇制顆粒，5(TC干燥即成。5、根據(jù)權(quán)利要求3所述制備治療乳蛾的中藥的方法，其特征在于在步驟a中，取牛蒡子，用6倍量60%的乙醇回流提取二次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成稠膏。6、根據(jù)權(quán)利要求3所述制備治療乳蛾的中藥的方法，其特征在于在步驟b中，將荊芥加入8倍量的水，蒸餾提取揮發(fā)油1.5小時，將提取到的揮發(fā)油溶于乙醇，揮發(fā)油與乙醇的比例為1:3,加入到40。C的I3—環(huán)糊精飽和水溶液中，揮發(fā)油！3—環(huán)糊精水的比例為1:8:80，4(TC恒溫攪拌2小時，冷藏24小時，濾過，5(TC干燥，成包合物。7、根據(jù)權(quán)利要求3所述制備治療乳蛾的中藥的方法，其特征在于在步驟c中，在馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻中加IO倍量水，煎煮二次，每次1小時，合并煎液，濾過而成提取水溶液。全文摘要本發(fā)明公開了一種治療乳蛾的中藥及其制備方法，其由如下重量份額的原料藥制成牛蒡子490-510份；馬勃320-340份；荊芥490-510份；僵蠶490-510份；蟬蛻490-510份和升麻160-170份，制備時包括對牛蒡子提取，對荊芥提取，對馬勃、僵蠶、蟬蛻和升麻提取，及混合制藥步驟，這種治療乳蛾的中藥既能疏風(fēng)清熱，解毒、消腫利咽，又能抗病毒，且服用方便，藥源廣泛，價格低廉，對治療乳蛾有較好療效。文檔編號A61K36/185GK101352489SQ20081014747公開日2009年1月28日申請日期2008年8月19日優(yōu)先權(quán)日2008年8月19日發(fā)明者王彥山申請人:吉林省康福藥業(yè)有限公司