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一種枸杞多糖提取物及其藥用用途的制作方法

文檔序號:1197632閱讀:436來源:國知局
專利名稱:一種枸杞多糖提取物及其藥用用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及枸杞多糖及其藥用用途。
背景技術(shù)
對中藥多糖的研究始于50年代末,經(jīng)過近年來對多糖不斷的深入研究,對其 作用又有了新的認(rèn)識,它參與細(xì)胞的各種生命現(xiàn)象的調(diào)節(jié),如免疫細(xì)胞間信息的 傳遞和感受,與細(xì)胞表面的多糖體的介導(dǎo)密切相關(guān),大量的藥理和臨床研究表明, 多糖類化合物是一種免疫調(diào)節(jié)劑,它能激活免疫細(xì)胞,提高機(jī)體的免疫功能,而對 正常細(xì)胞沒有毒副作用,還具有抗腫瘤、降血糖、降血脂、抗炎、抗凝血、抗輻 射、抗病毒等多方面的活性。多糖的免疫調(diào)節(jié)多糖對抗體的免疫調(diào)節(jié)作用,主要 通過以下幾種方式和途徑,(1)激活巨噬細(xì)胞;(2)激活網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES);
(3)激活T和B淋巴細(xì)胞;(4)激活補(bǔ)體許多植物多糖有激活補(bǔ)體的作用,補(bǔ)體 蛋白上存在的識別點可識別多糖的結(jié)構(gòu)??拱┗钚?,抗癌活性是多糖類化合物所 顯示的重要生物活性。(1)增強(qiáng)機(jī)體免疫功能而發(fā)揮抗腫瘤作用;(2)誘生腫瘤 壞死因子(TNF); (3)改變細(xì)胞膜的生化特性;(4)抗自由基作用。(河北職工醫(yī) 學(xué)院學(xué)報第15巻第3期《植物多糖的藥理研究概況》李建恒鄭富穩(wěn))。大量的文 獻(xiàn)和專利報道枸杞多糖都具有很好的抗癌活性,作為中藥的有效部位不應(yīng)舍棄。 但現(xiàn)有技術(shù)中保留的枸杞多糖是多糖中的全部,沒有針對多糖進(jìn)行深入的研究, 特別是藥效作用不是很好或很弱的部分進(jìn)行深入的研究。
現(xiàn)有文獻(xiàn)記載了多糖的提取分離和純化方法,但大多數(shù)采用的柱層析的方法, 而這種方法是無法工業(yè)化生產(chǎn)的,造成資源的巨大浪費(fèi)。 發(fā)明內(nèi)容基于上述原因,我們通過科學(xué)的實驗,確定枸杞多糖中酸性多糖和中性多糖 是其藥效活性較好的部分,將藥效作用不好的堿性多糖去除,在盡量保留有效部 位的基礎(chǔ)上,將無效部位盡量去除,同時根據(jù)保留的有效部位的物質(zhì)基礎(chǔ),采用 超濾和離子交換有機(jī)結(jié)合的方法,得到枸杞多糖有效提取物。
本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的。
一種枸杞子多糖提取物,其中酸性多糖含量為85%—95%,中性多糖為1% 一5%。
其中優(yōu)選的枸杞多糖提取物為酸性多糖90%—95。%,中性多糖1%—3%。 一種枸杞子多糖提取物為活性成分制備的藥物制劑。 種枸杞子多糖提取物在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
一種枸杞子多糖提取物,其制備方法為
(1) 取枸杞子,加水提取,提取液濃縮,濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)到40% — 60%,靜置,沉淀物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到70%—80%, 靜置,沉淀物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到80%_90%,靜置, 沉淀物,干燥,得到干燥物;
(2) 取干燥物,用水溶解完全,用截取分子量為10000的超濾裝置進(jìn)行超濾, 保留大于分子量10000的溶液,將溶液濃縮,濃縮液上陰離子交換樹脂,保留洗 脫液;
(3) 洗脫液用截取分子量為500000的超濾裝置進(jìn)行草綠,保留小于分子量 500000的溶液,濃縮,干燥,得到枸杞子多糖提取物。
注上述離子交換樹脂按照現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行選擇。
一、檢測分析多糖的檢測分析
運(yùn)用高效液相色譜法進(jìn)行檢測分析。 各種單糖標(biāo)準(zhǔn)品均為生化試劑,其它為分析試劑。
儀器:Beckman-332型高效液相色譜儀,島津RID-6A示差折光檢測器,色譜柱 MICROSORB-MVTM86-700-C5NH25pm。
方法取樣品加乙醇沉淀,用高速離心儀進(jìn)行離心,離心沉淀物用蒸餾水溶 解后,進(jìn)樣20ul。
結(jié)果見表l:
表l制劑中有效成分含量比較
多糖含量
組別
mg/瓶
本發(fā)明水針劑121.3
本發(fā)明輸液劑119.6
本發(fā)明粉針劑121,5
結(jié)論通過以上檢測分析實驗表明,本發(fā)明工藝具有實際意義。 二、藥理實施例 實施例1
對氣虛型大鼠肝腫瘤抑制作用
實驗動物大鼠,150g 180g,雌雄不分。(由沈陽藥科大學(xué)中藥藥理教研室根 據(jù)文獻(xiàn)造成氣虛模型)
實驗藥物本發(fā)明各組枸杞多糖提取物(多糖類有效部位制備而成,北京藥 物藥物開發(fā)有限公司實驗室提供);黃芪多糖粉針劑(山西中醫(yī)研究院提供);枸杞堿性多糖;生理鹽水。
實驗方法取大鼠作W256的肝內(nèi)接種,接種7天后,用戊巴比妥鈉按35mg /kg的劑量腹腔注射麻醉,固定,剖腹暴露肝,測量肝上腫瘤表面最大徑(a)和最 小徑(b),按(a*b2) /2=V (腫瘤體積)。分離胃、十二指腸動脈、肝總動脈和肝 固有動脈,結(jié)扎胃、十二指腸動脈遠(yuǎn)端,以銀夾阻斷肝總動脈,于手術(shù)放大鏡下 在胃十二指腸動脈上切口并插入外徑0.3mm導(dǎo)管后再送入肝固有動脈,然后按實 驗分組分別注入受試藥物,給藥劑量為12mg有效部位/kg,生理鹽水等容不等量, 術(shù)后拔管結(jié)扎胃十二指腸動脈,放開肝總動脈銀夾,再縫合切口,將大鼠置于動 物室待蘇醒,繼續(xù)飼養(yǎng)觀察,手術(shù)后8天,按上法檢測腫瘤體積,結(jié)果見表l: 表1本發(fā)明提取物對氣虛型大鼠肝腫瘤抑制作用
iij 給藥前腫瘤體積 給藥后腫瘤體積 體積變化百分?jǐn)?shù)~~
mm3 mm3 %
生理鹽水 4.19±0.76 6.25±1.09 " +49.2
黃芪多糖粉針劑 4.24±0.85 3.30±0.94* -22.7*
本發(fā)明枸杞多糖提取物 4.34±0.72 2.54±0.86** -41.5**
枸杞堿性多糖4.11±0.65 4.34±0.99 +5.6
與生理鹽水組比較* 〈0.05, **P 〈0.01 按上述方法,在進(jìn)行實驗,觀察大鼠存活天數(shù),見表2
表2大鼠存活天數(shù)比較
存活天數(shù)
組別
(大)
生理鹽水 15.9±1.6 黃芪多糖粉針劑 20.3±1.5 本發(fā)明枸杞多糖提取物 24.6±2.4 枸杞堿性多糖 16.2±1.4
實施例2
物理、化學(xué)和生物因素均能誘發(fā)癌癥,但人癌發(fā)病原因的80%-90%認(rèn)為是環(huán)境化學(xué)物質(zhì)引起的。
對二乙基亞硝胺(DENA)誘發(fā)大鼠肝癌的抑制 實驗動物大鼠30只,120g左右,雌雄不分。
實驗藥物本本發(fā)明各組枸杞多糖提取物(多糖類有效部位制備而成,北京 藥物藥物開發(fā)有限公司實驗室提供);黃芪多糖粉針劑(山西中醫(yī)研究院提供); 枸杞堿性多糖;生理鹽水。
實驗方法用含二乙基亞硝胺(DENA)的飲水喂養(yǎng)大鼠,36周得原發(fā)性肝 癌,按照實施例l進(jìn)行實驗,實驗結(jié)果見表3:
表3本發(fā)明提取物對腫瘤的抑制
,, 給藥前腫瘤體積 組別 ,給藥后腫瘤體積
mm3
生理鹽水 10.03±1.0916.54±3.26
黃芪多糖粉針劑 10.28±0.978.03±2.17**-
本發(fā)明枸杞多糖提取物 10.54±1.036.45±1.95**
枸杞堿性多糖 10.83±0.9512.34±1.83
與生理鹽水組比較+P 〈0.05, **P 〈0.01
表4大鼠存活天數(shù)比較
組別存活天數(shù) (天)
生理鹽水9.8土1.9
黃芪多糖粉針劑13.6士2.3
本發(fā)明枸杞多糖提取物16.7±1.4
枸杞堿性多糖10.2±0.9
三、制備實施例 實施例1
(l)取枸杞子,加水提取,提取液濃縮,濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)到40%,
靜置,沉淀物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到70%,靜置,沉淀物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到80%,靜置,沉淀物,干燥, 得到干燥物;
(2) 取千燥物,用水溶解完全,用截取分子量為10000的超濾裝置進(jìn)行超濾, 保留大于分子量10000的溶液,將溶液濃縮,濃縮液上陰離子交換樹脂,保留洗 脫液;
(3) 洗脫液用截取分子量為500000的超濾裝置進(jìn)行草綠,保留小于分子量 500000的溶液,濃縮,干燥,得到枸杞子多糖提取物。
注上述離子交換樹脂按照現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行選擇。
枸杞子多糖提取物,其特征在于酸性多糖含量為85%,中性多糖為5%。 枸杞子多糖提取物為活性成分制備的藥物制劑。 枸杞子多糖提取物在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
實施例2
(1) 取枸杞子,加水提取,提取液濃縮,濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)到60%, 靜置,沉淀物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到80%,靜置,沉淀 物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到90%,靜置,沉淀物,干燥, 得到干燥物;
(2) 取干燥物,用水溶解完全,用截取分子量為10000的超濾裝置進(jìn)行超濾, 保留大于分子量10000的溶液,將溶液濃縮,濃縮液上陰離子交換樹脂,保留洗 脫液;
(3) 洗脫液用截取分子量為500000的超濾裝置進(jìn)行草綠,保留小于分子量 500000的溶液,濃縮,干燥,得到枸杞子多糖提取物。
注上述離子交換樹脂按照現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行選擇。枸杞子多糖提取物,其特征在于酸性多糖含量為95%,中性多糖為1%。
枸杞子多糖提取物為活性成分制備的藥物制劑。
枸杞子多糖提取物在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
實施例3
(1) 取枸杞子,加水提取,提取液濃縮,濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)到50%, 靜置,沉淀物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到75%,靜置,沉淀 物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到85%,靜置,沉淀物,干燥, 得到干燥物;
(2) 取干燥物,用水溶解完全,用截取分子量為10000的超濾裝置進(jìn)行超濾, 保留大于分子量10000的溶液,將溶液濃縮,濃縮液上陰離子交換樹脂,保留洗 脫液;
(3) 洗脫液用截取分子量為500000的超濾裝置進(jìn)行草綠,保留小于分子量 500000的溶液,濃縮,干燥,得到枸杞子多糖提取物。
注上述離子交換樹脂按照現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行選擇。
枸杞子多糖提取物,其特征在于酸性多糖含量為90%,中性多糖為1%。 枸杞子多糖提取物為活性成分制備的藥物制劑。 枸杞子多糖提取物在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
實施例4
(1)取枸杞子,加水提取,提取液濃縮,濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)到45%, 靜置,沉淀物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到60%,靜置,沉淀 物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到90%,靜置,沉淀物,干燥,得到干燥物;
(2) 取干燥物,用水溶解完全,用截取分子量為10000的超濾裝置進(jìn)行超濾, 保留大于分子量10000的溶液,將溶液濃縮,濃縮液上陰離子交換樹脂,保留洗 脫液;
(3) 洗脫液用截取分子量為500000的超濾裝置進(jìn)行草綠,保留小于分子量 500000的溶液,濃縮,干燥,得到枸杞子多糖提取物。
注上述離子交換樹脂按照現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行選擇。
枸杞子多糖提取物,其特征在于酸性多糖含量為86%,中性多糖為4%。
枸杞子多糖提取物為活性成分制備的藥物制劑。
枸杞子多糖提取物在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
實施例5
(1) 取枸杞子,加水提取,提取液濃縮,濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)到55%, 靜置,沉淀物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到80%,靜置,沉淀 物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到90%,靜置,沉淀物,干燥, 得到干燥物;
(2) 取干燥物,用水溶解完全,用截取分子量為10000的超濾裝置進(jìn)行超濾, 保留大于分子量10000的溶液,將溶液濃縮,濃縮液上陰離子交換樹脂,保留洗 脫液;
(3) 洗脫液用截取分子量為500000的超濾裝置進(jìn)行草綠,保留小于分子量 500000的溶液,濃縮,干燥,得到枸杞子多糖提取物。
注上述離子交換樹脂按照現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行選擇。
枸杞子多糖提取物,其特征在于酸性多糖含量為95%,中性多糖為3%。枸杞子多糖提取物為活性成分制備的藥物制劑。 枸杞子多糖提取物在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
實施例6
(1) 取枸杞子,加水提取,提取液濃縮,濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)到60%,
靜置,沉淀物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到85%,靜置,沉淀 物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到90%,靜置,沉淀物,干燥, 得到干燥物;
(2) 取干燥物,用水溶解完全,用截取分子量為10000的超濾裝置進(jìn)行超濾, 保留大于分子量10000的溶液,將溶液濃縮,濃縮液上陰離子交換樹脂,保留洗 脫液;
(3) 洗脫液用截取分子量為500000的超濾裝置進(jìn)行草綠,保留小于分子量 500000的溶液,濃縮,干燥,得到枸杞子多糖提取物。
注上述離子交換樹脂按照現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行選擇。
枸杞子多糖提取物,其特征在于酸性多糖含量為93%,中性多糖為2%。
枸杞子多糖提取物為活性成分制備的藥物制劑。
枸杞子多糖提取物在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
實施例7
(1)取枸杞子,加水提取,提取液濃縮,濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)到50%, 靜置,沉淀物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到70%,靜置,沉淀 物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到90%,靜置,沉淀物,干燥, 得到干燥物;(2) 取干燥物,用水溶解完全,用截取分子量為10000的超濾裝置進(jìn)行超濾, 保留大于分子量10000的溶液,將溶液濃縮,濃縮液上陰離子交換樹脂,保留洗 脫液;
(3) 洗脫液用截取分子量為500000的超濾裝置進(jìn)行草綠,保留小于分子量 500000的溶液,濃縮,干燥,得到枸杞子多糖提取物。
注上述離子交換樹脂按照現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行選擇。
枸杞子多糖提取物,其特征在于酸性多糖含量為94%,中性多糖為1.5%。
枸杞子多糖提取物為活性成分制備的藥物制劑。
枸杞子多糖提取物在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
權(quán)利要求
1、一種枸杞子多糖提取物,其特征在于酸性多糖含量為85%-95%,中性多糖為1%-5%。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種枸杞子多糖提取物,其中酸性多糖90%_95 %,中性多糖1%—3%。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種枸杞子多糖提取物為活性成分制備的藥物制劑。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種枸杞子多糖提取物在制備治療抗腫瘤藥物 中的應(yīng)用。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種枸杞子多糖提取物,其特征在于制備方法為(1) 取枸杞子,加水提取,提取液濃縮,濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)到40%_ 60%,靜置,沉淀物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到70%—80%, 靜置,沉淀物加水溶解完全,過濾,濾液加乙醇使含醇量達(dá)到80%—90%,靜置, 沉淀物,干燥,得到干燥物;(2) 取干燥物,用水溶解完全,用截取分子量為10000的超濾裝置進(jìn)行超濾, 保留大于分子量10000的溶液,將溶液濃縮,濃縮液上陰離子交換樹脂,保留洗 脫液;(3) 洗脫液用截取分子量為500000的超濾裝置進(jìn)行超濾,保留小于分子量 500000的溶液,濃縮,干燥,得到枸杞子多糖提取物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種枸杞多糖提取物,其特征在于酸性多糖含量為85%-95%,中性多糖為1%-5%。本發(fā)明采用水提醇沉、超濾和離子交換有機(jī)結(jié)合的方法,提取得到枸杞多糖提取物;藥理實驗表明,本發(fā)明枸杞多糖具有很好的治療腫瘤的作用。
文檔編號A61P35/00GK101564469SQ20081010472
公開日2009年10月28日 申請日期2008年4月23日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月23日
發(fā)明者偉 李, 王愛民 申請人:北京卓越同創(chuàng)藥物研究院
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