專利名稱：：一種注射用魚腥草凍干粉針的制備方法
技術領域：
：本發(fā)明屬于中藥的制藥
技術領域：
，具體涉及一種注射用魚腥草凍干粉針的制備方法.二.
背景技術：
：魚腥草為三白草科蕺菜屬植物蕺菜HouttuyniacordataThunb.的全草，其性味辛、寒，具有清熱解毒、消腫排膿、利尿通淋及止痰化咳等功效。臨床主要用于肺癰吐膿、痰熱喘咳、熱痢熱淋、癰腫瘡毒。魚腥草有效成分主要有癸酰乙醛(魚腥草素)、甲基壬酮、月桂醛。魚腥草注射液具有清熱，解毒，利濕功效。臨床用于治療肺膿瘍，痰熱咳嗽，療效顯著。但是，魚腥草注射液在臨床使用過程中，出現(xiàn)了許多不良反應。國家藥品不良反應監(jiān)測中心統(tǒng)計的數(shù)據(jù)表明，2000年以來，與魚腥草類注射劑有關的不良反應有4000余例，其中嚴重不良反應200余例。報告顯示，使用魚腥草注射液注射劑后，引起患者過敏性休克、全身過敏反應、胸悶、心悸、呼吸困難和重癥藥疹等嚴重不良反應，已明確顯示該藥品在臨床用藥存在嚴重安全隱患。國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布通告，要求自2006年6月1日起，在全國范圍內(nèi)暫停使用魚腥草注射液等7種注射劑，暫停受理和審批魚腥草注射液等7個注射劑的各類注冊申請。通過對魚腥草注射液出現(xiàn)的不良反應進行綜合分析，我們認為除了個體差異(尤其是過敏性體質(zhì))、聯(lián)合用藥、靜脈注射時滴速過快等原因外，其根本原因是原制備工藝不合理在提取、濾過時未能將過敏性物質(zhì)完全去除；在配液工藝中加入了本身具有溶血作用的增溶劑土溫-80;由于是注射用水溶液，產(chǎn)品的穩(wěn)定性較凍干粉針差。目前，盡管魚腥草注射液也有許多專利，但這些專利均沒有徹底解決問題。如申請?zhí)枮?00410096731.7的專利"魚腥草注射液制備工藝"雖然采用了二氧化碳超臨界萃取技術，但沒有使用超濾和冷凍干燥技術，而且仍然加入了土溫-80;申請?zhí)枮?00410046098.0的專利"一種魚腥草凍干粉針針劑及其制備方法"雖然采用了冷凍干燥技術且未使用土溫-80，但沒有采用二氧化碳超臨界萃取和超濾技術。三.
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種不良反應少、高效的注射用魚腥草凍干粉針的制備方法。本發(fā)明針對上述存在問題進行了相應的全面改進。采用超臨界萃取和超濾去除了過敏性物質(zhì)，取消使用增溶劑土溫-80，將注射用水溶液制備成質(zhì)量穩(wěn)定的注射用凍干粉針針劑，從而顯著提高了產(chǎn)品療效，大大降低了不良反應。一種注射用魚腥草凍干粉針的制備方法，其特征在于制備步驟如下(l)取魚腥草2kg，洗凈，干燥，粉碎；(2)進行二氧化碳超臨界萃取，將萃取物水蒸汽蒸餾，蒸餾液進行超濾處理；(3)濾液加入適宜輔料，冷凍干燥，即得。在上述步驟(2)中所述的二氧化碳超'臨界萃取的條件為萃取壓力20-30mPa，溫度20-5(TC，C02流量20-60kg/h。在上述步驟(2)中所述的水蒸汽蒸餾的條件為在上述超臨界萃取物中加入315倍水，蒸餾16小時，收集蒸餾液0.54倍；在上述步驟(2)中所述的超濾的條件為取上述步驟3的蒸餾液，加入注射用水至1000ml，用分子量為3000~50000的超濾膜進行超濾分離；在上述步驟(3)中所述的冷凍干燥的條件為取步驟(2)的超濾液，在無菌條件下分裝至西林瓶中，先預凍至-4055'C，保持2~4小時，調(diào)節(jié)真空度至O.OlmPa，升華干燥1248小時，再升溫至10~30°C，干燥48小時。上述步驟(3)中所述的輔料為葡萄糖、氯化鈉、甘露醇或乳糖注射用凍干添加劑中的一種。本發(fā)明主要是針對原工藝存在的缺陷進行了制備工藝改進，采用超臨界萃取、超濾和冷凍干燥等組合方法，去除引起不良反應的無效雜質(zhì)，提高了產(chǎn)品的穩(wěn)定性。通過藥理實驗證明，產(chǎn)品的療效得到顯著提高，魚腥草凍干粉針對傷寒一副傷寒菌苗所引起的大鼠實驗性發(fā)熱有顯著的解熱作用，不良反應的發(fā)生率亦大大降低，實驗結(jié)果表明魚腥草粉針不會誘發(fā)速發(fā)性過敏發(fā)應。四.具體實施例方式實施例1_注射用魚腥草凍干粉針的制備方法取魚腥草2000g，洗凈，干燥，粉碎，過20目篩，進行二氧化碳超臨界萃取，萃取壓力25mPa，溫度40°C，C(V流量50kg/h，得超臨界萃取物，加入5倍量水，水蒸氣蒸餾3小時，收集蒸餾液，加入50g葡萄糖，并加注射用水至1000ml，用分子量為3000的超濾膜進行超濾，分裝至西林瓶中，先預凍至-45°C，保持2小時，調(diào)節(jié)真空度至0.lmbar，升華干燥24小時，再升溫至20'C，干燥6小時。質(zhì)檢、包裝，即得。實施例2-注射用魚腥草凍干粉針的制備方法取魚腥草2000g，洗凈，干燥，粉碎，過40目篩，進行二氧化碳超臨界萃取，萃取壓力25mPa，溫度4(TC，0)2流量50kg/h，得超臨界萃取物，加入5倍量水，水蒸氣蒸餾3小時，收集蒸餾液，加入30g乳糖，并加注射用水至lOOOmJ.，用分子量為5000的超濾膜進行超濾，分裝至西林瓶中，先預凍至-45°C,保持2小時，調(diào)節(jié)真空度至0.lmbar，升華干燥24小時，再升溫至2(TC，干燥8小時。質(zhì)檢、包裝，即得。實施例3藥效學實驗-一對內(nèi)毒性發(fā)熱的影響分別將魚腥草凍干粉針(新工藝)和魚腥草注射液(原工藝)用0.9%氯化鈉注射液配制成lmg/mL。取SPF級SD大鼠，體重150—170g雌雄各半，先測正常肛溫2—3次，隔30分鐘測1次，連續(xù)兩次測定體溫相差不應大于0.2度，取平均值為正常體溫。個體之間體溫相差不大于1.(TC。每只大鼠皮下注射傷寒—副傷寒菌苗lml/kg，每隔l小時測量一次肛溫，待體溫升高0.6'C以上時(約l一4小時)，隨機均分5組，每組10只，開始給藥。即生理鹽水組、魚腥草凍干粉針(新工藝)高、中、低三個劑量組(2.0mL、l.Oml、0.5mL)、魚腥草注射液(原工藝)組。給藥后30、60、120分鐘測量體溫一次，觀察體溫變化情況，結(jié)果見表l。表l.魚腥草凍干粉(新工藝)對實驗性發(fā)熱大鼠體溫的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>與魚腥草注射液比較P<0.05;F檢驗上表說明，魚腥草凍干粉針(新工藝)對傷寒一副傷寒菌苗所引起的大鼠實驗性發(fā)熱有顯著的解熱作用。等劑量與魚腥草注射液比較，魚腥草凍干粉針制劑作用更強。實施例4-被動皮膚過敏試驗1、藥品與試劑魚腥草粉針劑，由南京中醫(yī)藥大學中醫(yī)藥研究院制備，批號071209;天花粉蛋白，上海計劃生育研究所贈送；依文思蘭，上?；瘜W試劑采購供應站分裝，批號050518。2、動物SD大鼠，雄性，體重200土20g，由南京中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，合格證號SYXK(蘇)2002-0053。3、實驗方法(1)、致敏試驗取200土20g雄性大鼠。將卡介苗(佐劑)1支加2倍量生理鹽水稀釋后，加入天花粉充分混勻成2.5mg/mL，每鼠注射0.4mL，分別注射0.lmL于大鼠足跖部位，其余部分多點注射于肌肉和皮下。魚腥草粉針劑組先按要求將粉針配制成相應注射液，然后將卡介苗以兩倍量藥液稀釋后，每鼠注射0.4mL，方法同天花粉組。將魚腥草粉針劑和天花粉分別致敏4只大鼠。注射后IO天經(jīng)頸動脈取血，離心分離抗血清，置-4t)以下保存?zhèn)溆谩?2)、被動皮膚致敏試驗另取200士20g正常大鼠，背部去毛，分別于皮下注射由魚腥草粉針劑及天花粉溶液致敏的抗血清0.lmL/點，48h后分別靜脈注射以1%伊文思藍配制天花粉溶液(2mg/mL)lmL/200g，和以魚腥草粉針劑配制的伊文思藍(伊文思藍含量為1%)溶液lmL/200g。30min后處死動物，翻轉(zhuǎn)背部皮膚，測量并記錄藍色反應斑直徑大小，藍斑直徑在5mm以上者判定為陽性。4、實驗結(jié)果藍斑面積如表2所示表2.魚腥草粉針劑對大鼠被動過敏反應皮膚藍斑面積的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>由表2可見，魚腥草粉針劑誘發(fā)的藍斑的直徑均小于5mra,應屬于不會誘發(fā)速發(fā)性變態(tài)的藥物范圍。陽性化合物天花粉的藍斑直徑均大于20mm。5、結(jié)論由本實驗結(jié)果可見魚腥草粉針劑應屬于不會誘發(fā)速發(fā)性過敏反應的藥物。權利要求1、一種注射用魚腥草凍干粉針的制備方法，其特征在于制備步驟如下(1)取魚腥草2kg，洗凈，干燥，粉碎；(2)進行二氧化碳超臨界萃取，將萃取物水蒸汽蒸餾，蒸餾液進行超濾處理；(3)濾液加入適宜輔料，冷凍干燥，即得。2、根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟(2)中所述的二氧化碳超臨界萃取的條件為萃取壓力20-30mPa，溫度20-50°C，C02流量20-60kg/h。3、根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟(2)中所述的水蒸汽蒸餾的條件為在上述超臨界萃取物中加入315倍水，蒸餾16小時，收集蒸餾液0.54倍。4、根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟(2)中所述的超濾的條件為取上述步驟3的蒸餾液，加入注射用水至1000ml，用分子量為3000~50000的超濾膜進行超濾分離。5、根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟(3)中所述的冷凍干燥的條件為取步驟4的超濾液，在無菌條件下分裝至西林瓶中，先預凍至-4055°C，保持2~4小時，調(diào)節(jié)真空度至O.Ol-O.lmbar，升華干燥12~48小時，再升溫至1030。C,干燥48小時。6、根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟(3)中所述的輔料為葡萄糖、氯化鈉、甘露醇或乳糖注射用凍干添加劑中的一種。全文摘要本發(fā)明公開了一種魚腥草凍干粉針劑的制備方法，其方法是取魚腥草，洗凈，干燥，粉碎，通過超臨界萃取，水蒸汽蒸餾，膜分離，冷凍干燥而得。本發(fā)明通過采用超臨界萃取、超濾、冷凍干燥組合工藝技術制備的魚腥草凍干粉針，去除了引起不良反應的無效雜質(zhì)，生產(chǎn)工藝更為先進合理，提高了產(chǎn)品的穩(wěn)定性，通過藥理實驗證明產(chǎn)品療效顯著提高，不良反應大大降低。文檔編號A61K47/02GK101249170SQ20081001985公開日2008年8月27日申請日期2008年3月19日優(yōu)先權日2008年3月19日發(fā)明者黎余,倪荷芳,劉陶世,涓吳,崔小兵,程建明申請人:南京中醫(yī)藥大學