專利名稱：：一種參舌組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種參舌組合物及其制備方法，尤其是一種臨床上用于抑制腫瘤、增強(qiáng)免疫力，預(yù)防和治療各種癌癥參舌組合物及其制備方法。技術(shù)背景癌癥也叫惡性腫瘤，是繼心腦血管疾病之后發(fā)病率和致死率很高的疾病，嚴(yán)重威脅著人類的健康。從衛(wèi)生部疾病司獲悉，20世紀(jì)70年代我國(guó)的惡性腫瘤僅占死亡原因的第三位，而90年代以來則上升為第二位。我國(guó)惡性腫瘤發(fā)病率與30年以前比，增長(zhǎng)了29.4%，消除年齡構(gòu)成不同的影響，增長(zhǎng)率仍為11.6%。專家預(yù)計(jì)，在今后的20-30年內(nèi)，我國(guó)的腫瘤發(fā)病率、死亡率都將繼續(xù)上升。目前，傳統(tǒng)的對(duì)惡性腫瘤的治療方法主要采用化療、放療、手術(shù)三種方法?；熀头暖熕幬镌跉┘?xì)胞的同時(shí)也破壞大量的正常細(xì)胞，對(duì)造血等增殖較快的組織細(xì)胞的毒性很大，諸如免疫抑制，骨髓抑制、心臟毒性等；手術(shù)治療只能除去可見的病癥，術(shù)后易發(fā)生腫瘤的轉(zhuǎn)移，很難改善患者生存質(zhì)量。近年來，中醫(yī)藥學(xué)在中藥對(duì)抗腫瘤方面進(jìn)行了大量的研究，而且隨著研究的深入，己經(jīng)開始在分子水平上對(duì)中藥抗腫瘤的機(jī)理進(jìn)行了初步探討。紅參(RADIXGINSENGRUBRA),為五加科植物人參PanaxginsengC.A.Mey.的栽培品(習(xí)稱"圓參")經(jīng)蒸制后的干燥根，經(jīng)過清洗、分選、蒸制、晾曬、烘干等工序加工而成。人參除了含有多種皂甙外，還含有人參炔醇(panaxynol)、|3-欖湘烯(demene)等揮發(fā)性成分，以及單糖、雙糖、三聚糖、多種氨基酸。人參的地上部分含有黃酮類化合物，稱人參黃甙(panasenoside)、三葉甙(trifolin)、人參皂甙、糖類等。紅參在蒸制過程中，因熱處理會(huì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，成分上會(huì)發(fā)生變化。紅參中除含有上述成分外，還含有其特有的成分20(S)-人參皂甙-3-1^3、20-(R)-人參皂甙Rg2、2020-(R)-人參皂甙Rhl、人參皂甙Rh2，揮發(fā)性成分人參三炔(panaxytriol)，以及紅參酸性多糖(RGAP)。而且，研究表明紅參比人參含有更多的人參皂甙Rhl，Rg3，Rg2。此外，有人還從紅參中分離出既能防腐又能解熱鎮(zhèn)痛作用的水楊酰胺(salicymide)。中醫(yī)認(rèn)為紅參具有大補(bǔ)元?dú)猓堂撋?，益智安神等功效。研究表明人參皂甙單體Rh2(GSRh2)是一種人參三醇型皂甙，是紅參的主要抗癌成分。通過癌細(xì)胞體外培養(yǎng)與癌癥動(dòng)物模型最新研究表明，紅參特有的人參皂甙Rh2能明顯的抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)、誘發(fā)癌細(xì)胞凋亡、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。紅參中含有的多糖具有抑制毒激素，促進(jìn)脂肪分解的作用，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，可明顯降低原發(fā)性腫瘤的發(fā)病率。白花蛇舌草(HedyotisdiffUsaWilld)，是茜草科耳草屬植物，別名蛇舌草、舌針草、龍舌草、鶴色草等。其性甘寒、微苦，以全草供藥用，具有清熱解毒、活血化淤、利水滲濕、消腫止痛的功效。臨床上廣泛應(yīng)用于各種癌癥的治療。白花蛇舌草成分比較復(fù)雜，包括甾體、蒽醌、黃酮、三萜、環(huán)烯醚萜。其中萜類成分具有一定的抗菌消炎作用；三萜成分熊果酸具有明顯的抗腫瘤、抗氧化作用。白花蛇舌草中所含有的多糖具有高度的免疫活性，有明顯的免疫增強(qiáng)作用。申請(qǐng)?zhí)枮?00510042044.1、2005100031655.6、200510094404.2的三個(gè)專利均涉及到白花蛇舌草的提取方法，并將之制成注射液。白花蛇舌草注射液被收藏為中藥成方制劑17冊(cè)WS3-Z-006-93(Z)中。以上專利和該標(biāo)準(zhǔn)均是采用乙醇提取其醇溶性部分后將藥棄去，沒有保留具有免疫作用、抑制腫瘤生長(zhǎng)的水溶性多糖成分，降低了藥物臨床療效，減少了原料的利用率。而且質(zhì)量控制中總黃酮的測(cè)定采用分光光度法，以蘆丁計(jì)，專屬性不強(qiáng)，有效成分(部位)不明確，加重了用藥的不安全隱患。人參皂甙的提取方法對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是相當(dāng)熟悉了；例如CN1110563、CN1277205等公開了人參提取物的制備；白花蛇舌草中黃酮的提取方法可以參考申請(qǐng)?zhí)?00510042044.1、200510031655.6、200510094404.2等專利，也可以參考部頒標(biāo)準(zhǔn)，中藥成方制劑17冊(cè)WS3-Z-006-93(Z)的標(biāo)準(zhǔn)。這些文獻(xiàn)的內(nèi)容都納入本文參考。但是這些文獻(xiàn)中的提取方法都僅提取了醇溶性的成分，而將具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、起預(yù)防和治療腫瘤作用的水溶性多糖成分棄去，降低了該組方的臨床療效，浪費(fèi)了有效的資源。申請(qǐng)?zhí)枮?00510104352.2的專利，公開了以人參、白花蛇舌草、黃芪三味藥材組成的藥物組合物。該專利將三味藥材分別提取人參多糖或皂甙，白花蛇舌草總黃酮，黃芪多糖或皂甙。該專利藥味多，操作工藝繁瑣，所提取物或是皂甙或是多糖，而不是皂甙和多糖二種成分有機(jī)結(jié)合在一起，起協(xié)同作用。另一方面也沒有提取白花蛇舌草的多糖成分。所公開的藥物組合物均沒有充分利用藥材資源。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明為解決
背景技術(shù)：
中存在的上述技術(shù)問題，而提供一種最大限度提高藥材利用率，節(jié)約資源，獲得臨床療效好、質(zhì)量穩(wěn)定的紅參^卩白花蛇舌草中的藥效成分，同時(shí)制成便于臨床使用的制劑，更有效的治療癌癥，減輕患者的痛苦的參舌組合物及其制備方法。本發(fā)明的技術(shù)解決方案是本發(fā)明為一種參舌組合物，其特殊之處在于所述參舌組合物組分包括80-150份的紅參和60-120份的白花蛇舌草或由80-150份紅參和60-120份白花蛇舌草的原料藥制備而成的醇提取物和水提取物。上述紅參和白花蛇舌草的醇提取物包括醇提取物即醇包括皂甙、黃酮、對(duì)羥基香豆酸和三萜類，所述紅參和白花蛇舌草的水提取物包括水溶性多一種參舌組合物的制備方法，其特殊之處在于該方法包括以下步驟1〉按配比取紅參和白花舌蛇草，將紅參粉碎成粗粉，白花舌蛇草剪段，分別加乙醇溶液回流提取3次，每次持續(xù)lh，濾過，濾渣晾干，備用；2〉將步驟l〉中所得兩份濾液合并，再用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為8-9，靜置8-12小時(shí)，過濾，所得濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH為6-7，放置，過濾，接著從濾液中回收乙醇至無(wú)醇味，即得醇提取物；3)將步驟l〉中的藥渣加水煎煮兩次，第一次lh，第二次0.5h，過濾，合并濾液，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05-1.10(在4(TC下測(cè)量)，加乙醇醇沉，醇度達(dá)80%,靜置過夜，濾過，濾液回收乙醇，取沉淀加水溶解，濾過濃縮，加乙醇醇沉，醇度達(dá)85%，靜置6-8h，過濾，濾液回收乙醇，沉淀用乙醇洗滌兩次，真空減壓干燥，即得水提取物。上述步驟1〉中乙醇溶液的濃度為60-卯％，優(yōu)選為75%;加入的乙醇體積為藥材重量的6-8倍。上述步驟3)中水煎煮時(shí)加入水的體積為藥材重量的6-10倍，優(yōu)選為6-8倍。一種含參舌組合物的藥物制劑，其特殊之處征在于該藥物制劑包括參舌組合物和藥學(xué)上可接受的輔劑。上述藥物制劑為口服制劑時(shí)，參舌提取的醇提物占15-40%，多糖成分占5-20%;為注射液時(shí)，參舌提取的醇提物占10-25%，多糖成分占5-15%上述藥學(xué)上可接受輔劑是能與活性成分相容的藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑和稀釋劑中的一種或幾種。上述賦形劑是水、生理鹽水、葡萄糖、甘油、乙醇或其類似物及其組合。當(dāng)藥物制劑為凍干粉針劑時(shí)，所述藥學(xué)上可接受的載體選自甘露醇、乳糖、右旋糖酐、葡萄糖、甘氨酸、水解明膠、聚維酮和氯化鈉中的一種或幾種。當(dāng)藥物制劑為口服制劑時(shí)，所述藥學(xué)上可接受的載體選自淀粉、乳糖、微晶纖維素、交聯(lián)PVP和羧甲基淀粉鈉中的一種或幾種。一般的化療藥劑不容易進(jìn)入癌細(xì)胞，所以一般的治療效果并不是太好。癌細(xì)胞中的P-糖蛋白(P-glycoprotein)可以將化療藥物排出，所以會(huì)造成癌細(xì)胞對(duì)化學(xué)藥物產(chǎn)生耐受性差。由于紅參中Rh2親水親油的特性，能抑制癌細(xì)胞中的P-糖蛋白，可以輕易的進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)而殺死癌細(xì)胞。白花蛇舌草含有的黃酮、三萜類成分能增強(qiáng)單核細(xì)胞的細(xì)胞因子產(chǎn)生，并增強(qiáng)單核細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的吞噬功能。紅參和白花蛇舌草中含有的多糖則能刺激體液免疫和細(xì)胞免疫功能，增強(qiáng)NK細(xì)胞活性，增加淋巴轉(zhuǎn)化率，對(duì)S180、ESA，U14等動(dòng)物移植腫瘤均有明顯的抑制作用，本發(fā)明將傳統(tǒng)的中藥的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)相結(jié)合，經(jīng)過反復(fù)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)將紅參與白花蛇舌草配伍后，具有明顯的協(xié)同效應(yīng)，能夠顯著協(xié)同的提高抗腫瘤活性，顯著的增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力，并由此獲得了一種提取高質(zhì)量、高收率的紅參、白花蛇舌草中的皂甙、人參皂甙Rh2、黃酮、對(duì)羥基香豆酸、萜類的醇提物和水溶性多糖成分的提取方法，并且將紅參、白花蛇舌草中的醇溶性Rh2、黃酮類、三萜類成分與水溶性多糖成分有機(jī)結(jié)合起來，起到了協(xié)同作用，增效減毒，共同起到治療和預(yù)防腫瘤的作用，大大提高了產(chǎn)品臨床療效，提高了藥材利用率。另外本發(fā)明的藥物組合物可以作為誘導(dǎo)分化劑單獨(dú)使用，也可以與西藥分化劑聯(lián)合應(yīng)用，能夠克服化療不良反應(yīng)，可以更好的治療癌癥。圖1紅參藥材的指紋圖譜圖；圖2白花蛇舌草的指紋圖譜圖；圖3參舌注射劑、中間體、紅參、白花蛇舌草的指紋圖譜相關(guān)圖。具體實(shí)施方式本發(fā)明的參舌組合物組分可以由重量份數(shù)的80-150份的紅參和60-120份的白花蛇舌草直接混合而成，或者也可由80-150份紅參和60-120份白花蛇舌草的原料藥制備而成的醇提取物和水提取物構(gòu)成。其中紅參和白花蛇舌草的醇提取物包括皂甙、黃酮、對(duì)羥基香豆酸和三萜類，紅參和白花蛇舌草的水提取物包括水溶性多糖。本發(fā)明用紅參而不是人參，紅參抗癌和提高免疫作用比人參效果好。大量藥理和臨床試驗(yàn)驗(yàn)證了紅參中特有的人參皂甙Rh2，為抗癌的特效成分，而人參不含該抗癌成分。另一方面提取物包括了醇提取物皂甙、黃酮類及水溶性多糖兩大部分，二者起到了協(xié)同抗癌和提高免疫作用。本發(fā)明根據(jù)紅參、白花蛇舌草藥材的性質(zhì)以及各自成分的化學(xué)性質(zhì)，提取醇提取物和水提取物的具體步驟如下1)將紅參80-150份粉碎成最粗粉，白花舌蛇草60-120份，剪段，加乙醇回流提取3次，每次lh，過濾，濾渣晾干，備用；2)將步驟l)中的濾液合并，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為8-9，靜置8-128小時(shí)，過濾，濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH為6-7，放置，濾過，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，備用。即得醇提取物皂甙、黃酮、對(duì)羥基香豆酸、三萜類等成分；3)取步驟l)中的藥渣加水煎煮兩次，第一次lh，第二次0.5h,過濾，合并濾液。濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05-U0(4(TC測(cè))，加乙醇醇沉，醇度達(dá)80%，靜置過夜，濾過。濾液回收乙醇。取沉淀加水溶解，濾過濃縮，加乙醇醇沉，醇度達(dá)85%，靜置6-8h，過濾，濾液回收乙醇，沉淀用乙醇洗滌兩次，真空減壓干燥，即得水提物多糖成分。步驟l)中的乙醇溶液的濃度為60-90%，優(yōu)選為75%。加入乙醇溶液的體積為藥材重量的6-8倍。步驟2)中的加水煎煮時(shí)加入水的體積為藥材重量的6-10倍，優(yōu)選為6-8倍。參舌組合物中紅參、白花蛇舌草，可以用相應(yīng)的紅參提取物和白花蛇舌草提取物來代替，具體的加入量可根據(jù)具體情況而定，例如紅參提取物中含有人參皂甙、多糖以及白花舌蛇草含有的總黃酮、多糖的含量。本發(fā)明還提供了一種含有參舌組合物的藥物制劑，其包括參舌組合物和藥學(xué)上可接受的輔劑。當(dāng)藥物制劑為口服制劑時(shí)，參舌組合物的醇提取物占15-40%,水提取物多糖成分占5-20%;當(dāng)藥物制劑為注射液時(shí)，參舌組合物的醇提取物占10-25%，水提取物多糖成分占5-15%。藥學(xué)上可接受的輔劑包括藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑、稀釋劑等，它們與活性成分相容。運(yùn)用藥學(xué)上可接受的輔劑制備藥物組合物對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說是公知的。本發(fā)明的藥物組合物包含一種或多種本發(fā)明紅參、白花蛇舌草醇提取物和水溶性多糖成分組合物作為活性成分，和藥學(xué)上可接受的輔劑(如本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的載體、賦形劑、稀釋劑等)組合在一起，配制成各種制劑，優(yōu)選為固體制劑和液體制劑。本發(fā)明的制劑可以為單位劑量形式，如片劑、丸劑、膠囊(包括持續(xù)釋放或延遲釋釋放形式)、粉劑、混懸劑、顆粒劑、酊劑、糖漿劑、乳液劑、懸浮液、針劑、等劑型以及各種緩釋劑型，從而適合各種給藥方式，例如口服、非腸道注射、粘膜、肌肉、靜脈內(nèi)、皮下、眼內(nèi)、皮內(nèi)或經(jīng)過皮膚等的給藥形式。優(yōu)選本發(fā)明的藥物制劑為注射劑、凍干粉針劑或口服制劑。載體、賦形劑、稀釋劑是藥學(xué)上可接受的并與活性成分相容。可以選用的合適的賦形劑優(yōu)選但不僅限于水、生理鹽水、葡萄糖，甘油、乙醇或其類似物及其組合。當(dāng)本發(fā)明的藥物制劑為凍干粉針劑時(shí)，優(yōu)選其中藥學(xué)上可接受的載體選自甘露醇、乳糖、右旋糖酐、葡萄糖、甘氨酸、水解明膠、聚維酮和氯化鈉中的一種或幾種。而當(dāng)本發(fā)明的藥物制劑為口服制劑時(shí)，優(yōu)選其中藥學(xué)上可接受的載體選自淀粉、乳糖、微晶纖維素、交聯(lián)PVP和羧甲基淀粉鈉中的一種或幾種。本發(fā)明還提供了含有參舌組合物的藥物制劑的制備方法，其包括將參舌組合物和藥學(xué)上可接受的載體混合的過程。藥物的制備方式可以采用本專業(yè)的一般技術(shù)人員所公知的方法從而制備成合適的制劑。例如，可包括將紅參、白花蛇舌草醇提取物減壓干燥或噴霧干燥，然后和水溶性多糖混合并制成固體制劑的過程。也可以將紅參、白花蛇舌草醇提取物不進(jìn)行干燥直接溶于水，然后和水溶性多糖混合稀釋成注射劑的過程。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了口服制劑的具體方法，即將紅參、白花蛇舌草組合物和藥學(xué)上可接受的載體，混合制軟材，制粒，干燥，整粒，壓片，包衣，可得到相應(yīng)的片劑藥品。在另一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明還提供了注射劑的具體制法，取紅參、白花蛇舌草醇提取物、水溶性多糖和藥學(xué)上可接受的載體，用注射用水溶解，用40%氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值6.5-8.0，然后向溶解產(chǎn)物加入針用活性炭，攪拌15分鐘，冷藏過夜，用孔徑為0.45pm的過濾膜過濾，然后將濾液通過0.22pm微孔濾膜除菌過濾，接著無(wú)菌分裝，冷凍干燥，如果要進(jìn)行冷凍干燥，還可以包括冷凍干燥的步驟，最后軋蓋、包裝，即得相應(yīng)藥品。本發(fā)明還提供了參舌組合物在制備用于預(yù)防和/或治療癌癥的藥物中的應(yīng)用以及補(bǔ)充手術(shù)、放療和化療的不足。優(yōu)給藥的劑量和形式一般由醫(yī)師根據(jù)患者的具體情況(如年齡、體重、性別、患病時(shí)間、身體狀況等)確定。一般而言，以紅參、白花蛇舌草計(jì)，給藥的劑量為紅參0.10.8mg/kg患者體重，白花舌蛇草0.1~0.8mg/kg優(yōu)選為紅參0.2~0.5mg/kg，白花舌蛇草為0.2~0.5mg/kg(相當(dāng)于原生藥)。給藥形式根據(jù)各種藥物制劑的劑型及其生物利用度來確定，適合的給藥形式有口服、非腸道注射、粘膜、肌肉、靜脈內(nèi)、皮下、眼內(nèi)、皮內(nèi)或經(jīng)過皮膚等給藥形式，優(yōu)選口服給藥。為了便于理解，以下將通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行描述。需要特別指出的是，這些描述僅僅是示例性的描述，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明范圍的限制。依據(jù)本說明書的論述，本發(fā)明的許多變化、改變對(duì)所屬領(lǐng)域技術(shù)人員來講都是顯而易見的了。實(shí)施例一參舌片劑的制備1.1紅參、白花蛇舌草提取物的制備1)取紅參1800g粉碎成最粗粉，白花蛇舌草1200g，剪段，加8倍的75%乙醇，每次回流lh，過濾，濾渣晾干，備用；2)濾液合并，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為8.38，靜置8-12小時(shí)，過濾，濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH為6.45，放置過濾，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，清膏減壓干燥或噴霧干燥，即得醇提取物皂甙、黃酮、對(duì)羥基香豆酸、三萜類等成分200g。3)取晾干后的藥渣加水煎煮兩次，第一次加8倍的水，煎煮lh，第二次加6倍的水，煎煮0.5h，過濾，將兩份濾液合并。濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05-1.10(40。C時(shí)測(cè))，加乙醇醇沉，醇度達(dá)80%，靜置8h，濾過。濾液回收乙醇。取沉淀加水溶解，濾過，濾液濃縮，加乙醇醇沉，醇度達(dá)85。％，靜置過夜，過濾，濾液回收乙醇，沉淀用乙醇洗漆脫水兩次，真空減壓干燥，即得深咖啡色水提物多糖成分80g。1.2參舌片劑的制備處方<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>制備方法將紅參、白花蛇舌草醇提取物200g粉碎，過80目篩，備用；將紅參、白花蛇舌草水提物多糖80g，過80目篩。將兩者混勻。加入乳糖100g，微晶纖維素45g，交聯(lián)PVP15g，混合均勻。用5XPVP乙醇溶液制軟材，20目制粒，5(TC鼓風(fēng)干燥，18目篩整粒。加入硬脂酸鎂3g，混合均勻，壓制成片，包衣，即得。實(shí)施例二參舌口服液的制備2.1紅參、白花蛇舌草提取物的制備1)取紅參1000g粉碎成最粗粉，白花蛇舌草800g，剪段，加6倍的80%乙醇，每次回流lh，過濾，濾渣晾干，備用；2)濾液合并，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為8.67，靜置8-12小時(shí)，過濾，濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH為6.55，放置過濾，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，即得醇提取物皂甙、黃酮、對(duì)羥基香豆酸、三萜類等成分。3)取晾干后的藥渣加水煎煮兩次，第一次加IO倍的水，煎煮lh，第二次加8倍的水，煎煮0.5h，過濾，合并濾液。濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05-1.10(4(TC測(cè))，加乙醇醇沉，醇度達(dá)80%，靜置8h，濾過。濾液回收乙醇。取沉淀加水溶解，濾過，濾液濃縮，加乙醇醇沉，醇度達(dá)85%,靜置6h，過濾，濾液回收乙醇，沉淀用乙醇洗滌兩次，真空減壓干燥，即得深咖啡色水提物多糖成分40g。2.2參舌口服液的制備將醇提取物加到600ml水中，加熱攪拌至溶解后，加入水提物多糖成分48g，攪拌溶解。加入蔗糖400g，加入適量的三梨醇鉀，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為7.26(6.5-7.5)，加注射用水至1000ml，濾過，分裝，10ml/瓶，灌封，流通蒸汽滅菌即得。實(shí)施例三參舌注射液的制備3.1紅參、白花蛇舌草提取物的制備1)取紅參800g粉碎成最粗粉，白花蛇舌草1200g，剪段，加8倍的80%乙醇，每次回流lh，過濾，濾渣晾干，備用；2)濾液合并，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為8.38，靜置8-12小時(shí)，過濾，濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH為6.45，放置過濾，濾液西收乙醇至無(wú)醇味，即得醇提取物皂甙、黃酮、對(duì)羥基香豆酸、三萜類等成分。3)取晾干后的藥渣加水煎煮兩次，第一次加8倍的水，煎煮lh，第二次加8倍的水，煎煮0.5h，過濾，合并濾液。濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05-1.10(4(TC測(cè))，加乙醇醇沉，醇度達(dá)80%，靜置8h，濾過。濾液回收乙醇。取沉淀加水溶解，濾過，濾液濃縮，加乙醇醇沉，醇度達(dá)85%,靜置6h，過濾，濾液回收乙醇，沉淀用乙醇洗滌兩次，真空減壓干燥，即得深咖啡色水提物多糖成分41g。3.2參舌注射液的制備將醇提取物加到800ml水中，加熱攪拌至溶解后，加入水提物多糖成分41g，攪拌溶解。用40X氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH7.45(6.5-8.0)，加入活性碳5g，70-80'C下，攪拌15min，置冰箱冷藏過夜。濾過，濾液中加入10g聚三梨酯80、亞硫酸鈉lg，充分?jǐn)嚢杈鶆颍瑸V液定容至1000ml，0.22pm微孔濾膜濾過，灌裝于10ml安瓿中，封口，流通蒸汽滅菌30min，冷卻，燈檢，包裝，即得。參見圖l、2、3,在該實(shí)施例三中制備參舌組合物的實(shí)施方案中，為了獲得了適合于靜脈注射的高質(zhì)量的制劑，采用中藥指紋圖譜這一分析方法來控制藥材、中間體和制劑的質(zhì)量。中藥指紋圖譜對(duì)本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該是相當(dāng)熟悉的了。中藥指紋圖譜是指中藥材經(jīng)一定處理后，采用一定的分析手段和分析儀器檢測(cè)而得到的，能夠表示該藥材和相應(yīng)制劑的各組分特性的共有峰的特征。通過指紋圖譜主要特征峰的相對(duì)保留時(shí)間及含量或比例的制定和比對(duì)，能夠有效的控制產(chǎn)品質(zhì)量，保證產(chǎn)品的穩(wěn)定性。紅參中的主要成分主要表現(xiàn)為人參皂甙類，白花蛇舌草的主要成分主要為黃酮類、人參皂甙Rh2、三砲類等。本發(fā)明采用HPLC法，以酸性緩沖系統(tǒng)梯度洗脫方式，分別以人參皂甙Rh2作為紅參圖譜中參照物，以白花蛇舌草對(duì)羥基香豆酸作為參照峰，計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間、峰面積比值、平均相對(duì)保留時(shí)間和平均峰面積比值，建立了藥材的指紋圖譜。在此基礎(chǔ)上，對(duì)十批本發(fā)明實(shí)施例三獲得的參舌注射液指紋圖譜進(jìn)行分析，將數(shù)據(jù)結(jié)果導(dǎo)入計(jì)算機(jī)，經(jīng)相似度軟件計(jì)算，確定了共有的指紋色譜峰，發(fā)現(xiàn)制劑中共有的特征峰峰面積約占總峰面積的90%以上，并同時(shí)考察了制劑、中間體、藥材指紋圖譜的相關(guān)性。通過指紋圖譜的分析，確定了有效成分，保證了產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。含有參舌組合物的制劑的藥效學(xué)試驗(yàn)1)、實(shí)驗(yàn)材料1.1)動(dòng)物昆明種小白鼠10-16g，雌雄各半，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。質(zhì)量合格證號(hào)陜醫(yī)動(dòng)證字06-004。C57BL/6小鼠，體重18-22g，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，符合健康三級(jí)動(dòng)物，質(zhì)量合格證號(hào)陜醫(yī)動(dòng)證字06-018。1.2)藥品實(shí)施例二中的參舌口服液，由西安新通藥物研究有限公司提供，批號(hào)070625規(guī)格10ml/瓶18g生藥/瓶(每瓶含紅參10g，白花蛇舌草8g)。用法用量臨床上60kg體重每日喝1次，每次1瓶。計(jì)算成人日用量為18g生藥/瓶*1瓶/次/60kg體重/2411=0.3生藥/kg體重/24h。注射用環(huán)磷酰胺，山西泰盛制藥有限公司。批號(hào)060830，規(guī)格0.2g瓶。試驗(yàn)時(shí)取注射用環(huán)磷酰胺1瓶，用0.9X生理鹽水配制成30ml后使用。香菇多糖片江蘇江陰制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)061010，2.5mg/片。試驗(yàn)時(shí)將每片香菇多糖溶于3ml純凈水后使用。微達(dá)康顆粒20g/袋哈藥集團(tuán)世一堂制藥廠批號(hào)060724。試驗(yàn)時(shí)將用純凈水配成2g/ml后使用。1.3)瘤株Lewis肺癌細(xì)胞，四川抗菌素工業(yè)研究所1.4)對(duì)荷Lewis肺癌環(huán)磷酰胺化療模型動(dòng)物T淋巴細(xì)胞增殖的影響接種取C57BL/6小鼠60只，雄性，適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室7天后開始稱重，編號(hào)，隨機(jī)分為6組，每組10只。取皮下生長(zhǎng)旺盛的腫瘤作為瘤源，無(wú)菌條件操作，剔除胞膜和壞死部分，選取完好的瘤塊，置玻璃勻漿內(nèi)，加入適量的0.9%的生理鹽水，配制成比例為1:3的細(xì)胞懸液。每只動(dòng)物于右前腋下接種0.2mlLewis細(xì)胞懸液。給藥接種次日，按體重隨機(jī)分為荷瘤對(duì)照組，化療對(duì)照組，香菇多糖片組，參舌口服液大、中、小劑量組。除荷瘤對(duì)照組外，其余各組第3、5、7天(以接種次日開始計(jì)算)i.p環(huán)磷酰胺60mg/kg造模，同時(shí)按給藥方案劑量對(duì)小鼠給藥。制備淋巴細(xì)胞末次給藥24h處死小鼠，無(wú)菌取脾臟，分離脾細(xì)胞，用含有10%的RPMT-1640制備成5*106/ml脾細(xì)胞懸液。取100nl加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(每份樣本做三個(gè)復(fù)孔)，在加入10pg/mlConA10(Hil，37°C5XC02培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h，終止前4h加入MTT溶液(5mg/ml)20pl/孔，培養(yǎng)結(jié)束后，小心棄去上清液，每孔加入DMSO100nl，充分溶解后，用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值(人二570nm)。表1:參舌口服液對(duì)肺癌動(dòng)物荷Lewis肺癌環(huán)磷酰胺化療的模型動(dòng)物T淋巴細(xì)胞試驗(yàn)給藥方案<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注藥品濃度和藥品劑量單位"g/ml"和"g/kg，，為"g生藥/ml"和"g生藥/kg"的簡(jiǎn)稱。表2:參舌對(duì)荷Lewis肺癌環(huán)磷酰胺化療模型動(dòng)物T淋巴細(xì)胞增殖的影響組別樣本劑量x天OD值數(shù)(g/kgxd)荷瘤對(duì)照組環(huán)磷酰胺組香菇多糖片組參舌口服液大劑量組+環(huán)磷酰胺參舌口服液中劑量組+環(huán)磷酰胺參舌口服液小劑量組+環(huán)磷__化療對(duì)照組與荷瘤對(duì)照組比較AAApo.OOl各給藥組與化療對(duì)照組比較,P0.05"PO.01***P<0.001表2結(jié)果表明，化療對(duì)照組小鼠OD值極顯著低于荷瘤對(duì)照組(PO.OOl)，6、3-g的參舌口服液能顯著和明顯提高化療模型小組OD值(PO.01和P<0.05)o1.5)參舌口服液對(duì)肺癌動(dòng)物化療(烷化劑環(huán)磷酰胺)的增效作用接種取C57BL/6小鼠90只，雄性，適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室7天后開始稱重，編號(hào)，隨機(jī)分為9組，每組10只。取皮下生長(zhǎng)旺盛的腫瘤作為瘤源，無(wú)菌條件操作，剔除胞膜和壞死部分，選取完好的瘤塊，置玻璃勻漿內(nèi)，加入適量的0.9%的生理鹽水，配制成比例為1:3的細(xì)胞懸液。每只動(dòng)物于右前腋下接種0.2mlLewis細(xì)胞懸液。給藥接種次日，按體重隨機(jī)分為荷瘤對(duì)照組，化療對(duì)照組，微達(dá)康顆粒組，參舌口服液各劑量組、參舌口服液各劑量組(聯(lián)合化療)。除荷瘤對(duì)照組和參舌口服液各組外，其余各組從第四天開始連續(xù)7天腹腔給予化療藥100.684±0.10810——108.33mgxl0106x100.408±0.1050.535±0.0770.580±0細(xì)*'10ix100.556±0.084101.5x10(注射用環(huán)磷酰胺(15mg/kg/天)；同時(shí)各組按給藥方案連續(xù)10天給予受試藥。于末次給藥后48小時(shí)，處死動(dòng)物，稱取瘤重，并按照下式計(jì)算抑瘤率及化療藥聯(lián)合中藥治療的增效率Q(Q〉l為增效)模型組平均瘤重一治療組平均瘤重抑瘤率=-xi00%模型組平均瘤重化療加中藥組抑瘤率化療組抑瘤率+中藥組抑瘤率一化療組抑瘤率x中藥組抑瘤率表3:參舌口服液對(duì)肺癌動(dòng)物化療(烷化劑環(huán)磷酰胺)的增效作用試驗(yàn)給藥方案組別受試物給藥濃度給藥體積給藥劑_(g/ml)(ml/kg)量荷瘤對(duì)照組純凈水----10—環(huán)磷酰胺組純凈水----10—微達(dá)康顆粒組微達(dá)康顆粒2.002040參舌口服液大劑量組參舌口服液0.6106參舌口服液中劑量組參舌口服液0.3103參舌口服液小劑量組參舌口服液0.15101.5參舌口服液大劑量+環(huán)參舌口服液0.6106磷酰胺組參舌口服液中劑量+環(huán)參舌口服液0.3103磷酰胺組參舌口服液小劑量+環(huán)參舌口服液0.15101.5磷酰胺組_注藥品濃度和藥品劑量單位"g/ml"和"g/kg"為"g生藥/ml"和"g生藥/kg"的簡(jiǎn)稱。表4:參舌口服液對(duì)肺癌動(dòng)物化療(烷化劑環(huán)磷酰胺)的if效作用(X士sd)組別平均體重(g)(開始/結(jié)束)平均瘤重(g,x士sd)抑瘤率增效率荷瘤對(duì)照組19.65/23.031.106±0.206——環(huán)磷酰胺組19.79/20.370.652±0.216*"0.410—微達(dá)康顆粒+環(huán)磷酰胺19.48/21.590.441±0,165**"0週—組參舌口服液大劑』匱組19.51/21.990.858±0.298*0.224—參舌口服液中劑』匱組19.25/20.691.023±0.0970.075—參舌口服液小劑』匱組19.63/21.071.065±0.1820.037——參舌口服液大劑量:+環(huán)19.46/21.780.422±0.122**"0.6181,140磷酰胺組參舌口服液中劑量:+環(huán)19.59/20.300.568±0.278***0.486l扁磷酰胺組參舌口服液小劑量+環(huán)19.75/21.460.629±0.126*"0.4310.998磷酰胺組_注(1)其他各組與荷瘤對(duì)照組比較'P<0.05一PO.OOl(2)各給藥組(參舌口服液組()未化療組除外)與化療對(duì)照組比較AP〈0.05"PO.01表4結(jié)果顯示與荷瘤對(duì)照組比較，6g/kg參舌口服液的瘤重明顯降低(P<0.05);6、3和1.5g/kg參舌口服液組(聯(lián)合化療)均極顯著降低瘤重(P0.001)。與化療對(duì)照組比較奧，6g/kg參舌口服液組在化療的基礎(chǔ)上進(jìn)一步明顯降低瘤重(P<0.05)，抑瘤率達(dá)到61.8%。與此同時(shí)，6g/kg參舌口服液(聯(lián)合化療)增效率Q值>1,提示其對(duì)肺癌動(dòng)物化療(烷化劑環(huán)磷酰胺)具有增效作用。注中國(guó)藥典規(guī)定乙醇指95乙醇，因此說明書中沒有注明濃度的乙醇均指濃度為95%的乙醇。18權(quán)利要求1.一種參舌組合物，其特征在于所述參舌組合物組分包括80-150份的紅參和60-120份的白花蛇舌草或由80-150份紅參和60-120份白花蛇舌草的原料藥制備而成的醇提取物和水提取物。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的參舌組合物，其特征在于所述紅參和白花蛇舌草的醇提取物包括皂甙、對(duì)羥基香豆酸和三萜類，所述紅參和白花蛇舌草的水提取物包括水溶性多糖。3、一種參舌組合物的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟1)按配比取紅參和白花舌蛇草，將紅參粉碎成粗粉，白花舌蛇草剪段，分別加乙醇溶液回流提取3次，每次持續(xù)lh,濾過，濾渣晾干，備用；2)將步驟l)中所得兩份濾液合并，再用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為8-9，靜置8-12小時(shí)，過濾，所得濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH為6-7，放置，過濾，接著從濾液中回收乙醇至無(wú)醇味，即得醇提取物；3)將步驟l)中的藥渣加水煎煮兩次，第一次lh，第二次0.5h，過濾，合并濾液，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05-1.10(在4(TC下測(cè)量)，加乙醇醇沉，醇度達(dá)80%，靜置過夜，濾過，濾液回收乙醇，取沉淀加水溶解，濾過濃縮，加乙醇醇沉，醇度達(dá)85%,靜置6-8h,過濾，濾液回收乙醇，沉淀用乙醇洗漆兩次，真空減壓干燥，即得水提取物。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的參舌組合物的制備方法，其特征在于所述步驟l)中乙醇溶液的濃度為60-90%，優(yōu)選為75%;加入的乙醇體積為藥材重量的6-8倍。5、根據(jù)權(quán)利要求3所述的參舌組合物的制備方法，其特征在于所述步驟3)中水煎煮時(shí)加入水的體積為藥材重量的6-10倍，優(yōu)選為6-8倍。6、一種含參舌組合物的藥物制劑，其特征在于該藥物制劑包括參舌組合物和藥學(xué)上可接受的輔劑；當(dāng)藥物制劑為口服制劑時(shí)，參舌組合物的醇提取物占15-40%，水提取物多糖成分占5-20%;當(dāng)藥物制劑為注射液時(shí)，參舌組合物的醇提取物占10-25%，水提取物多糖成分占5-15%。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的含參舌組合物的藥物制劑，其特征在于所述藥學(xué)上可接受輔劑是能與活性成分相容的藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑和稀釋劑中的一種或幾種。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的含參舌組合物的藥物制劑，其特征在于所述賦形劑是水、生理鹽水、葡萄糖、甘油、乙醇或其類似物及其組合。9、根據(jù)權(quán)利要求7所述的含參舌組合物的藥物制劑，其特征在于當(dāng)藥物制劑為凍干粉針劑時(shí)，所述藥學(xué)上可接受的載體選自甘露醇、乳糖、右旋糖酐、葡萄糖、甘氨酸、水解明膠、聚維酮和氯化鈉中的一種或幾種。10、根據(jù)權(quán)利要求7所述的含參舌組合物的藥物制劑，其特征在于當(dāng)藥物制劑為口服制劑時(shí)，所述藥學(xué)上可接受的載體選自淀粉、乳糖、微晶纖維素、交聯(lián)PVP和羧甲基淀粉鈉中的一種或幾種。全文摘要本發(fā)明涉及一種參舌組合物及其制備方法，該參舌組合物組分包括80-150份的紅參和60-120份的白花蛇舌草或由80-150份紅參和60-120份白花蛇舌草的原料藥制備而成的醇提取物和水提取物。本發(fā)明提供了一種最大限度提高藥材利用率，節(jié)約資源，獲得臨床療效好、質(zhì)量穩(wěn)定的紅參和白花蛇舌草中的藥效成分，同時(shí)制成便于臨床使用的制劑，更有效的治療癌癥，減輕患者的痛苦的參舌組合物及其制備方法。文檔編號(hào)A61K36/185GK101259180SQ20081001802公開日2008年9月10日申請(qǐng)日期2008年4月22日優(yōu)先權(quán)日2008年4月22日發(fā)明者紅王申請(qǐng)人:紅王