專(zhuān)利名稱(chēng)：影響身體組織的機(jī)械和/或化學(xué)性能的光化學(xué)治療的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明的領(lǐng)域舉例來(lái)說(shuō)涉及藥物學(xué)、解剖學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)或分子生物學(xué)。特別地，本發(fā)明的領(lǐng)域涉及眼科藥物，包括眼科學(xué)。
背景技術(shù)：
圓錐角膜
圓錐角膜(Rabinowitz，1998；Krachmer et al，1994；Bron，1988)是最常見(jiàn)的角膜營(yíng)養(yǎng)不良，2000個(gè)人中影響1個(gè)人。圓錐角膜引起角膜變薄，是以角膜發(fā)展的圓錐形狀來(lái)命名的。角膜形狀的漸進(jìn)性變形通常在早期成人期變得引人注意，引起越來(lái)越嚴(yán)重的散光、近視和高階象差，其難以通過(guò)眼鏡或隱形眼鏡來(lái)矯正。當(dāng)變形達(dá)到折射性校正不再可能的一點(diǎn)時(shí)，角膜移植是唯一的選擇。
需要強(qiáng)化角膜并阻止疾病發(fā)展的方法。有證據(jù)表明，在糖尿病中發(fā)生的角膜膠原的交聯(lián)提供了對(duì)圓錐角膜的保護(hù)(Seiler et al.，2000)。另外，一些小組報(bào)道了通過(guò)常見(jiàn)的交聯(lián)劑對(duì)角膜的強(qiáng)化。甘油醛已經(jīng)被用作角膜交聯(lián)劑，但是它具有顯著的毒性。一種最小化藥物本身的毒性的方法利用了表面給藥的核黃素，其然后接受紫外光(Tae etal.，2000；Tessier et al.，2002；Spoerl and Seiler，1999；Spoerl et al.，1997；Wollensak et al.，2003)。3年或更久的長(zhǎng)期研究已經(jīng)顯示，用UV活化的交聯(lián)治療角膜可以提供足夠的結(jié)構(gòu)加強(qiáng)以減慢或停止圓錐角膜的發(fā)展(Wollensak et al.，2003；Wollensak，2006)。
當(dāng)紫外線活化的核黃素代表了圓錐角膜的治療中可能的進(jìn)展，它將是克服這種治療的局限性最理想的。核黃素/UV需要伴有長(zhǎng)期潰瘍風(fēng)險(xiǎn)的痛苦的上皮去除；它利用UV光線，具有對(duì)眼睛組織的損害的固有風(fēng)險(xiǎn)；它需要30分鐘的照射，這在臨床上是不希望的并且提高了角膜感染的風(fēng)險(xiǎn)。因而，在臨床上，需要一種阻止疾病發(fā)展并且補(bǔ)救紫外線活化的核黃素治療的缺點(diǎn)的治療。特別是，眼科藥物領(lǐng)域中需要一種或多種以下的1)改進(jìn)的藥物；2)改進(jìn)的藥物給藥；和3)改進(jìn)的照射方案。
近視
在美國(guó)和歐洲，近視影響了人群的30％，在某些亞洲國(guó)家影響了人群的70-90％。(Lin LL，Shih YF，Hsiao CK，Chen CJ，Lee LA，Hung PT.Epidemiologic study of the prevalence and severity of myopiaamong schoolchildren in Taiwan in 2000.J Formos Med Assoc.2001；100(10)684-91；Chow，Y.C，Dhillon，B.B.，Chew，P.T.&Chew，S.J.Refractive errors in Singapore medical students.Singapore MedicalJournal 45，470-474(1990)；Wong，T.Y.，F(xiàn)oster，P.J.，Hee，J.J.，Ng，T.P.，Tielsch，J.M.，Chew，S.J.，Johnson，G.J.&Seah，S.K.Prevalence and risk factors for refractive errors in adult Chinese inSingapore.Investigative Ophthalmology&Visual Science 41，2486-2494(2000))。大于8屈光度的高度近視影響了美國(guó)人群的0.2-0.4％，在亞洲國(guó)家中高達(dá)1％的人群(Sperduto，R.D.，Seigel，D.D.，Roberts，J.J.&Rowland，M.M.Prevalence of myopia in the United States.405-407(1983)；Tokoro，T.On the definition of pathologic myopia in groupstudies.Acta Opthalmol Suppl 185，107-108(1998))。實(shí)際上，退化性近視是在中國(guó)大陸、臺(tái)灣省和日本中不可治療的失明的主要原因，在美國(guó)排第七位(Xu L，Wang Y，Li Y，Wang Y，Cui T，Li J，Jonas JB.Causes of blindness and visual impairment in urban and rural areas inBeijingthe Beijing Eye Study.Ophthalmology.20061131134.el-ll；HsuWM，Cheng CY，Liu JH，Tsai SY，Chou P.Prevalence and causes of visualimpairment in an elderly Chinese population in Taiwanthe Shihpai EyeStudy.Ophthalmology.2004；111(1)62-9；Iwase A，Araie M，TomidokoroA，Yamamoto T，Shimizu H，Kitazawa Y；Tajimi Study Group.Prevalenceand causes of low vision and blindness in a Japanese adult populationtheTajimi Study.Ophthalmology.2006；113(8)1354-62；Curtin，B.J.Themyopiasbasic science and clinical management(Lippincott Williams&Wilkins，1985)。
在退化性近視中，存在著眼睛的漸進(jìn)性的軸向伸長(zhǎng)。退化性近視中過(guò)度的軸向伸長(zhǎng)引起了眼睛面層(鞏膜和脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜組織)的伸長(zhǎng)和變薄。由于這種伸長(zhǎng)和變薄優(yōu)先地在后極發(fā)生并涉及黃斑，患有退化性近視的眼睛經(jīng)歷了視覺(jué)喪失。在退化性近視中鞏膜變薄和伸長(zhǎng)的原因還沒(méi)完全了解，但是鞏膜膠原的增強(qiáng)的周轉(zhuǎn)和鞏膜的氨基多糖的改變?cè)诩膊≈衅鹆俗饔谩Ｓ捎谠诮曋徐柲さ臋C(jī)械性能被改變，眼睛由于眼內(nèi)壓的負(fù)載效果傾向于伸長(zhǎng)。當(dāng)在病理性近視中鞏膜伸長(zhǎng)時(shí)，鄰近的視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜也伸長(zhǎng)了，并且在黃斑區(qū)域中伸長(zhǎng)是不成比例的，在這里鞏膜和視網(wǎng)膜變薄是最大的。這引起了焦點(diǎn)外突(focalout-pouching)或葡萄腫的形成。隨著黃斑組織伸長(zhǎng)，視網(wǎng)膜細(xì)胞萎縮，引起不可逆的視覺(jué)喪失。
來(lái)自黃斑萎縮和脈絡(luò)膜新血管形成的視覺(jué)喪失是退化性近視中最常見(jiàn)的，患有這種疾病的患者還傾向于視網(wǎng)膜脫離和黃斑孔洞形成。雖然在世界范圍內(nèi)很大的人群受到這種疾病的影響，但是當(dāng)前沒(méi)有有效的方法來(lái)延緩發(fā)展并降低視覺(jué)喪失的比率。
進(jìn)行性近視誘發(fā)的屈光不正容易通過(guò)眼鏡、隱形眼鏡、角膜折射手術(shù)或眼內(nèi)透鏡來(lái)矯正，這些形式不能阻止由脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜組織的伸長(zhǎng)誘發(fā)的視覺(jué)喪失。此外，治療退化性近視中脈絡(luò)膜新血管形成的當(dāng)前的方法，例如光動(dòng)力治療是最低限度地有效的(Blinder，K.J.，Blumenkranz，M.S.，Bressler，N.M.，Bressler，S.B.，Donati，G.，Lewis，H.，Lim，J.I.，Menchini，U.，Miller，J.W.，Mones，J.M.，Potter，M.J.，Pournaras，C，Reaves，A.，Rosenfeld，P.，Schachat，A.P.，Schmidt-Erfurth，U.，Sickenberg，M.，Singerman，L.J.，Slakter，J.，Strong，H.A.，Virgili，G.&Williams，G.A.Verteporfin therapy ofsubfoveal choroidal neovascularization in pathologic myopia-2-year resultsof a randomized clinical Trial-VIP report NO.3.Ophthalmology 110，667-673(2003))。對(duì)于脈絡(luò)膜新血管形成的治療，抗血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)治療例如
的作用還沒(méi)有被建立。已經(jīng)進(jìn)行了各種嘗試來(lái)延緩近視的發(fā)展，包括鞏使用膜成形術(shù)、鞏膜加強(qiáng)，甚至嘗試圍繞眼睛的聚合物泡沫(Avetisov，E.S.，Tarutta，E.P.，Iomdina，E.N.，Vinetskaya，M.I.&Andreyeva，L.D.Nonsurgical and surgical methods ofsclera reinforcement in progressive myopia.Acta OphthalmologicaScandinavica 75，618-623(1997)；Chua，W.H.，Tan，D.，Balakrishnan，V.&Chan，Y.H.Progression of childhood myopia following cessation ofatropine treatment.Investigative Ophthalmology&Visual Science 46(2005)；Tarutta，Y.P.，Iomdina，Y.N.，Shamkhalova，E.S.，Andreyeva，L.D.&Maximova，M.V.Sclera Fortification In Children At A High-RiskOf Progressive Myopia.Vestnik Oftalmologii 108，14-17(1992)；Politzer，M.Experiences In Medical-Treatment Of Progressive Myopia.KlinischeMonatsblatter Fur Augenheilkunde 171，616-619(1977)；Belyaev，V.S.&flyina，T.S.Late Results Of Scleroplasty In Surgical Treatment OfProgressive Myopia.Eye Ear Nose And Throat Monthly 54，109-113(1975)；Chauvaud，D.，Assouline，M.&Perrenoud，F(xiàn).Scleralreinforcement.Journal Francais D Ophtalmologie 20，374-382(1997)；Jacob，J.T.，Lin，J.J.&Mikal，S.P.Synthetic scleral reinforcementmaterials.3.Changes in surface and bulk physical properties.Journal OfBiomedical Materials Research 37，525-533(1997)；Korobelnik，J.F.，D′Hermies，F(xiàn).，Chauvaud，D.，Legeais，J.M.，Hoang-Xuan，T.&Renard，G.Expanded polytetrafluoroethylene episcleral implants used as encirclingscleral buckling-An experimental and histopathological study.OphthalmicResearch 32，110-117(2000)；Mortemousque，B.，Leger，F(xiàn).，Velou，S.，Graffan，R.，Colin，J.&Korobelnik，J.F.S/e-PTFE episcleral bucklingimplantsAn experimental and histopathologic study.Journal OfBiomedical Materials Research 63，686-691(2002)；Jacoblabarre，J.T.，Assouline，M.，Conway，M.D.，Thompson，H.W.&McDonald，M.B.Effects Of Scleral Reinforcement On The Elongation Of Growing Cat Eyes.Archives Of Ophthalmology 111，979-986(1993))。主要因?yàn)檫@些形式在良好對(duì)照的臨床試驗(yàn)中仍是未經(jīng)證實(shí)的，它們都沒(méi)有被廣泛地采用來(lái)控制患有退化性近視的患者。其他的治療，例如滴眼劑(Chua WH，Balakrishnan V，Chan YH，Tong L，Ling Y，Quah BL，Tan D.Atropinefor the treatment of childhood myopia.Ophthalmology.2006Dec；113(12)2285-91；Siatkowski RM，Cotter S，Miller JM，Scher CA，CrockettRS，Novack GD；US Pirenzepine Study Group.Safety and efficacy of 2％pirenzepine ophthalmic gel in children with myopiaa 1-year，multicenter，double-masked，placebo-controlled parallel study.Arch Ophthalmol.2004；122(11)1667-74)、眼睛運(yùn)動(dòng)(Khoo CY，Chong J，Rajan U.A 3-yearstudy on the effect of RGP contact lenses on myopic children.SingaporeMedJ 1999；40230-7)和接觸透鏡治療(Shih YF，Lin LL，Hwang CY，et al.The effects of qi-qong ocular exercise on accommodation.Clin JPhysiol 1995；3835-42)具有很小的或未被證明的效力。如果可能減慢或阻止退化性近視中眼球的異常的軸向伸長(zhǎng)，視覺(jué)喪失可能被阻止。
在退化性近視中發(fā)生的眼球的過(guò)度的軸向伸長(zhǎng)在黃斑的后極中優(yōu)先地發(fā)生。在退化性近視中鞏膜變薄和伸長(zhǎng)的原因還沒(méi)完全了解，但是膠原纖維直徑的降低、鞏膜膠原的增強(qiáng)的周轉(zhuǎn)和鞏膜氨基多糖的改變是影響因素(McBrien，N.A.&Gentle，A.Role ofthe sclera in thedevelopment and pathological complications of myopia.Progress In RetinalAnd Eye Research 22，307-338(2003))。由于近視中鞏膜的機(jī)械性能被改變，眼睛由于眼內(nèi)壓的負(fù)載效果傾向于伸長(zhǎng)。充分地提高鞏膜的拉伸強(qiáng)度或系數(shù)將阻止眼睛伸長(zhǎng)并降低近視的發(fā)展。這種治療將不僅在初期的退化性近視患者中，而且在患有早期發(fā)作近視的患者中是有用的，來(lái)防止發(fā)展成更高度的屈光不正。
當(dāng)前，還沒(méi)有已證明的手段來(lái)防止在退化性近視中發(fā)生的過(guò)度的眼睛伸長(zhǎng)。如果可能減慢或防止眼睛伸長(zhǎng)，近視的發(fā)展可以被降低，并且至少部分地防止視覺(jué)喪失。如果黃斑區(qū)域中鞏膜的漸進(jìn)性伸長(zhǎng)被延緩，視網(wǎng)膜伸長(zhǎng)或進(jìn)一步的視網(wǎng)膜伸長(zhǎng)將不會(huì)發(fā)生，視力可以被保持。已經(jīng)進(jìn)行了努力，用置于眼睛周?chē)耐獠康墓w鞏膜或合成聚合物條帶來(lái)支持黃斑區(qū)域，但是這沒(méi)有被證明有效。人工地增大鞏膜的拉伸強(qiáng)度或模量本身是防止眼睛伸長(zhǎng)并降低近視的發(fā)展的方法。
Wollensak和Speorl已經(jīng)報(bào)道了利用膠原交聯(lián)劑，包括戊二醛、甘油醛和核黃素-UVA治療來(lái)體外地強(qiáng)化人類(lèi)和豬的鞏膜(Wollensak，G.&Spoerl，E.Collagen crosslinking of human and porcinesclera.Journal Of Cataract And Refractive Surgery 30，689-695(2004))。與未治療的對(duì)照相比，戊二醛、甘油醛和核黃素-UVA治療分別將楊氏模量提高了122％、34％和29％。由于它們不是光線活化的，作者報(bào)道說(shuō)，可能難以在空間上控制戊二醛和甘油醛的交聯(lián)效果。在血管和神經(jīng)結(jié)構(gòu)中不希望的膠原交聯(lián)可能具有特別的副作用。就此來(lái)說(shuō)使用光活化的核黃素看來(lái)是可取的；然而，UVA光線是潛在細(xì)胞毒性的，治療圓錐角膜的角膜的可比較的暴露需要30分鐘照射(Wollensak G.Crosslinkingtreatment of progressive keratoconusnew hope.Curr Opin Ophthalmol.2006；17(4)356-60)。雖然在后極中鞏膜基質(zhì)成分的交聯(lián)將提高鞏膜模量并潛在地延緩近視發(fā)展，仍然需要無(wú)毒的交聯(lián)劑，其可以利用對(duì)較低毒性的光源的短的暴露來(lái)活化。
美國(guó)公開(kāi)的申請(qǐng)?zhí)?0050271590，其內(nèi)容通過(guò)引用合并在此，公開(kāi)了利用交聯(lián)化學(xué)物質(zhì)來(lái)共價(jià)連接鞏膜膠原和/或其他鞏膜蛋白以提高鞏膜拉伸強(qiáng)度或模量的方法。該方法利用了化學(xué)交聯(lián)劑，某些具有不希望的毒性分布，通過(guò)將化學(xué)物質(zhì)包裹在以受控方式被破壞來(lái)釋放交聯(lián)劑化學(xué)物質(zhì)的光不穩(wěn)定結(jié)構(gòu)中，從而限制暴露的區(qū)域和在某些情況下的毒性影響。
考慮到當(dāng)前的療法對(duì)于治療圓錐角膜和近視的局限性，需要沒(méi)有這種局限性的新的療法。本發(fā)明滿足了這種需求。
發(fā)明概述
本發(fā)明涉及在個(gè)體中影響身體組織的一種或多種機(jī)械和/或化學(xué)性能的療法。在特定的實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及在個(gè)體中影響身體組織的一種或多種機(jī)械和/或化學(xué)性能的一種或多種光化學(xué)的療法。所述療法可以用于身體中的任何組織，至少包括眼組織、血管壁、肺泡結(jié)構(gòu)(例如，在COPD患者中)和損傷的心臟組織，例如，用于擴(kuò)張性心肌癥的緩解。在特定的實(shí)施方式中，所述療法用于眼組織。示范性的眼組織至少包括角膜、鞏膜、視神經(jīng)、小梁網(wǎng)、結(jié)膜、脈絡(luò)膜和視網(wǎng)膜下空間。
在特定的實(shí)施方式中，本發(fā)明采用了一種療法，其是對(duì)用于某些眼科應(yīng)用的特定療法的改進(jìn)。在進(jìn)一步特定的實(shí)施方式中，本發(fā)明改進(jìn)了用于組織的交聯(lián)的UV照射治療，所述組織例如角膜或鞏膜。這種治療將具有一種或多種以下的例舉性的規(guī)格1)可以用可見(jiàn)光來(lái)活化以影響組織的機(jī)械和/或化學(xué)性能的光引發(fā)劑化合物，例如改善角膜的機(jī)械性能來(lái)抵抗?jié)u進(jìn)性的膨脹；2)可以以最小的疼痛和/或最小的風(fēng)險(xiǎn)被導(dǎo)入的光引發(fā)劑化合物；3)對(duì)于眼睛結(jié)構(gòu)無(wú)毒的光引發(fā)劑化合物；4)以安全的照射水平發(fā)生活化的光引發(fā)劑化合物；5)以低于或等于例如30分鐘照射發(fā)生活化的光引發(fā)劑化合物。
在本發(fā)明的特定的實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種或多種以下的需求1)展現(xiàn)了用于強(qiáng)化組織(例如角膜或鞏膜，舉例來(lái)說(shuō))的有效的光引發(fā)劑化合物，具有低毒性并且被可見(jiàn)光活化；2)描述了改善的光引發(fā)劑化合物或其衍生物，其能夠避免移動(dòng)上皮(例如角膜的圓錐角膜治療)來(lái)給藥，包括，例如(a)藥物的表面應(yīng)用，所述藥物本身或在修飾之后可以以足夠的濃度跨越角膜上皮來(lái)以治療有效量到達(dá)角膜基質(zhì)；和/或(b)利用精細(xì)規(guī)格的針將藥物注射到基質(zhì)中；和/或3)展現(xiàn)了利用約30分鐘或更短地施加的光線的降低的照射時(shí)間，來(lái)影響所述組織，例如來(lái)穩(wěn)定角膜的形狀，舉例來(lái)說(shuō)。
提供了本發(fā)明用于眼科需求的示范性的應(yīng)用。在特定的實(shí)施方式中，本發(fā)明被用于角膜，包括以下的通過(guò)停止圓錐角膜的發(fā)展及其他角膜擴(kuò)張，例如LASIK后的擴(kuò)張、透明邊緣變性來(lái)防止角膜移植(角膜成形術(shù))的需要；允許患有圓錐角膜或其他角膜變性的患者安全地經(jīng)歷折射手術(shù)；和/或在折射手術(shù)后穩(wěn)定角膜形狀，特別是如果圓錐角膜后來(lái)變得明顯。本發(fā)明還提供了利用使用可見(jiàn)光的光活化交聯(lián)來(lái)穩(wěn)定眼睛中任何地方的組織，包括例如鞏膜的方法。
雖然在特定的實(shí)施方式中本發(fā)明采用了可見(jiàn)光，在可選擇的實(shí)施方式中，本發(fā)明利用了紫外光或紅外光。在進(jìn)一步特定的實(shí)施方式中，本發(fā)明還應(yīng)用于利用雙光子或多光子活化的光引發(fā)劑活化。
在本發(fā)明的某些方面，采用了光引發(fā)劑化合物來(lái)影響受試者中內(nèi)源組織的構(gòu)成分子之間的交聯(lián)。
此處的某些實(shí)施方式是改變受試者中組織的機(jī)械和/或化學(xué)性質(zhì)的方法，包括步驟 a)向所述受試者的組織提供光引發(fā)劑化合物，和 b)通過(guò)對(duì)所述組織的可見(jiàn)光照射來(lái)活化所述光引發(fā)劑化合物， 從而所述光引發(fā)劑化合物直接改變所述組織的機(jī)械和/或化學(xué)性質(zhì)。
此處的某些實(shí)施方式是段落
的方法，其中所述方法被進(jìn)一步定義為強(qiáng)化所述組織、穩(wěn)定所述組織形狀、改變所述組織的形狀或其組合。
此處的某些實(shí)施方式是段落
或
的方法，其中所述組織是眼睛組織。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述眼睛組織至少包括一部分角膜和/或鞏膜。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述眼睛組織至少包括一部分篩狀板。
此處的一些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述組織至少包括一部分角膜，所述方法與角膜手術(shù)基本上同時(shí)地進(jìn)行，以治療有效量提供所述光引發(fā)劑，其直接降低術(shù)后角膜變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中 a)所述受試者患有眼睛變形狀況或處于發(fā)生眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)中，所述眼睛變形狀況包括圓錐角膜、激光輔助的原位角膜磨鑲術(shù)(LASIK)后的擴(kuò)張、光折射角膜切除術(shù)(PRK)后的擴(kuò)張、感染后的擴(kuò)張、外周的擴(kuò)張、角膜的類(lèi)風(fēng)濕性狀況、退化性近視、常規(guī)近視、鞏膜葡萄腫、眼睛高壓性青光眼或低眼壓性青光眼中的一種或多種。
b)以治療有效量提供所述光引發(fā)劑，其直接治療或直接降低所述眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)，和 c)所述可見(jiàn)光照射在30分鐘或更短的時(shí)間內(nèi)發(fā)生。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述受試者患有角膜擴(kuò)張。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述受試者患有圓錐角膜。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述個(gè)體患有退化性近視。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述光引發(fā)劑化合物包括光引發(fā)劑、PEG光引發(fā)劑或其組合，所述光引發(fā)劑具有式I
其中R1、R2、R3和R4各自獨(dú)立地是H、鹵素或NO2，及其藥學(xué)上的鹽。
此處的某些實(shí)施方式是段落
的方法，其中R1、R2、R3、R4各自獨(dú)立地是H、Br或NO2。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述光引發(fā)劑化合物包括曙紅Y、曙紅B或熒光素。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述的提供步驟被進(jìn)一步定義為表面地或通過(guò)注射提供所述光引發(fā)劑。
此處的某些實(shí)施方式是治療或降低受試者中眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)的方法，包括步驟 a)以治療有效量向所述受試者的眼睛組織提供光引發(fā)劑化合物；和 b)通過(guò)對(duì)所述組織的可見(jiàn)光照射來(lái)活化所述光引發(fā)劑化合物， 從而所述光引發(fā)劑化合物直接治療或降低所述眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)。
此處的某些實(shí)施方式是段落
的方法，其中提供所述光引發(fā)劑來(lái)治療眼睛變形狀況，并且治療有效量的所述光引發(fā)劑通過(guò)強(qiáng)化所述眼睛組織、穩(wěn)定所述眼睛組織形狀、改變所述眼睛組織的形狀或其組合來(lái)治療眼睛變形狀況的癥狀。
此處的某些實(shí)施方式是段落
或
的方法，其中所述眼睛組織至少包括一部分篩狀板、角膜和/或鞏膜。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述受試者患有或處在患有眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)中，所述眼睛變形狀況包括圓錐角膜、激光輔助的原位角膜磨鑲術(shù)(LASIK)后的擴(kuò)張、光折射角膜切除術(shù)(PRK)后的擴(kuò)張、感染后的擴(kuò)張、外周的擴(kuò)張、角膜的類(lèi)風(fēng)濕性狀況、退化性近視、常規(guī)近視或鞏膜葡萄腫、眼睛高壓性青光眼或低眼壓性青光眼中的一種或多種。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述眼睛變形狀況是退化性近視。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述眼睛變形狀況是圓錐角膜。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述光引發(fā)劑化合物包含式I所定義的化合物
其中R1、R2、R3和R4各自獨(dú)立地是H、鹵素或NO2，及其藥學(xué)上的鹽。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述光引發(fā)劑化合物包含式I所代表的化合物的聚乙二醇衍生物。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述光引發(fā)劑化合物能夠在利用包含500±50nm波長(zhǎng)、1-100mW/cm2的照明強(qiáng)度的光線照射所述光引發(fā)劑化合物30分鐘或更短時(shí)直接治療所述眼睛的變形狀況。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述光引發(fā)劑是通過(guò)表面的給藥提供的。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述光引發(fā)劑是通過(guò)注射提供的。
此處的一些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述眼睛組織至少包括一部分角膜，所述方法與角膜手術(shù)基本上同時(shí)地進(jìn)行，以治療有效量提供所述光引發(fā)劑，其直接降低術(shù)后角膜變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)。
此處的某些實(shí)施方式是光引發(fā)劑化合物用于制造藥物的用途，所述藥物用于通過(guò)所述光引發(fā)劑化合物直接治療或預(yù)防眼睛變形狀況。
此處的某些實(shí)施方式是光引發(fā)劑化合物，其用作藥物用于直接治療或降低眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)前述段落
到
的任一項(xiàng)的用途，其中所述直接治療、預(yù)防或降低眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)包括提高眼睛組織的模量。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
的用途，其中所述眼睛組織至少包括一部分鞏膜和/或角膜，任選地包括鞏膜和/或角膜的全部。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)前述段落
到
的任一項(xiàng)的用途，其中所述眼睛變形狀況選自由圓錐角膜、激光輔助的原位角膜磨鑲術(shù)(LASIK)后的擴(kuò)張、光折射角膜切除術(shù)(PRK)后的擴(kuò)張、感染后的擴(kuò)張、外周的擴(kuò)張、角膜的類(lèi)風(fēng)濕性狀況、退化性近視、常規(guī)近視或鞏膜葡萄腫、眼睛高壓性青光眼或低眼壓性青光眼及其及其組合構(gòu)成的組。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)前述段落
到
的任一項(xiàng)的用途，其中所述眼睛變形狀況是退化性近視。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)前述段落
到
的任一項(xiàng)的用途，其中所述眼睛變形狀況是圓錐角膜。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)前述段落
到
的任一項(xiàng)的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物包含具有式I的化合物
其中R1、R2、R3和R4各自獨(dú)立地是H、鹵素或NO2，及其藥學(xué)上的鹽。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)前述段落
的用途，其中R1、R2、R3、R4各自獨(dú)立地是H、Br或NO2。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)前述段落
到
的任一項(xiàng)的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物包含曙紅Y、曙紅B或熒光素。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)前述段落
到
的任一項(xiàng)的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物包含其聚乙二醇衍生物。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)前述段落
到
的任一項(xiàng)的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物能夠在眼睛組織內(nèi)利用可見(jiàn)光照明所述光引發(fā)劑化合物30分鐘或更短時(shí)直接治療或降低所述眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)前述段落
到
的任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物用于表面的給藥。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)前述段落
到
的任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物用于通過(guò)注射給藥。
此處的某些實(shí)施方式是光引發(fā)劑化合物用于制造藥物的用途，所述藥物用于直接改變組織的機(jī)械和/或化學(xué)性質(zhì)。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
的用途，其中所述組織是眼睛組織，并且所述眼睛組織的機(jī)械和/或化學(xué)性質(zhì)的直接改變包括增大的眼睛組織的模量。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
的用途，其中所述眼睛組織至少包括一部分鞏膜、篩狀板或角膜，并且任選地包括鞏膜和/或角膜和/或篩狀板的全部。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
到
的用途，其中所述眼睛組織處在患有或存在風(fēng)險(xiǎn)患有狀況的受試者的眼睛中，所述狀況選自由圓錐角膜、激光輔助的原位角膜磨鑲術(shù)(LASIK)后的擴(kuò)張、光折射角膜切除術(shù)(PRK)后的擴(kuò)張、感染后的擴(kuò)張、外周的擴(kuò)張、角膜的類(lèi)風(fēng)濕性狀況、退化性近視、常規(guī)近視或鞏膜葡萄腫、眼睛高壓性青光眼或低眼壓性青光眼及其及其組合構(gòu)成的組。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
的用途，其中所述眼睛變形狀況是退化性近視。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
的用途，其中所述眼睛變形狀況是圓錐角膜。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
到
的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物包含具有式I的化合物
其中R1、R2、R3和R4各自獨(dú)立地是H、鹵素或NO2，及其藥學(xué)上的鹽。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
的用途，其中R1、R2、R3、R4各自獨(dú)立地是H、Br或NO2。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
到
的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物包括曙紅Y、曙紅B或熒光素。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
到
的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物包含式I的化合物的聚乙二醇衍生物。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
到
的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物能夠在利用包含500±50nm波長(zhǎng)、1-100mW/cm2的照明強(qiáng)度的光線照射所述光引發(fā)劑化合物30分鐘或更短時(shí)直接治療或降低所述眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
到
的用途，其中所述藥物用于表面的給藥。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
到
的用途，其中所述藥物用于通過(guò)注射給藥。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
到
的用途，其中所述直接治療眼睛變形狀況、直接降低眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)或直接預(yù)防眼睛變形狀況包括以500±50nm波長(zhǎng)、1-100mW/cm2的照明強(qiáng)度照射所述藥物。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
的方法，其中所述提供和活化步驟之間的持續(xù)時(shí)間是約1到120分鐘之間；約1到60分鐘之間；約60到120分鐘之間；約1到30分鐘之間；約30到60分鐘之間；約60到90分鐘之間；約90到120分鐘之間；約5分鐘到約10分鐘之間；或約1分鐘到5分鐘之間。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
或
的方法，其中所述方法被重復(fù)一、二、三、四、五次或更多次。
此處的某些實(shí)施方式是段落
到
或
到
的方法，其中所述活化步驟不超過(guò)約30分鐘；不超過(guò)約20分鐘；不超過(guò)約10分鐘；不超過(guò)約5分鐘；不超過(guò)約1分鐘；或不超過(guò)約30秒。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
到
的用途，其中所述藥物用于在光活化之后被提供給組織，所述提供和活化步驟之間的持續(xù)時(shí)間是約1到120分鐘之間；約1到60分鐘之間；約60到120分鐘之間；約1到30分鐘之間；約30到60分鐘之間；約60到90分鐘之間；約90到120分鐘之間；約5分鐘到約10分鐘之間；或約1分鐘到5分鐘之間。
此處的某些實(shí)施方式是根據(jù)段落
到
或
的用途，其中用光線活化所述藥物不超過(guò)約30分鐘；不超過(guò)約20分鐘；不超過(guò)約10分鐘；不超過(guò)約5分鐘；不超過(guò)約1分鐘；或不超過(guò)約30秒。
上文已經(jīng)列出了本發(fā)明的某些特征和技術(shù)效果，目的在于隨后的發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明可以被更好地理解。在下文中將描述本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)，其形成了本發(fā)明的權(quán)利要求的主題。本領(lǐng)域技術(shù)人員要理解的是，所公開(kāi)的構(gòu)思和具體實(shí)施方式
可以作為基礎(chǔ)容易地利用，用于修改或設(shè)計(jì)其他結(jié)構(gòu)用于進(jìn)行本發(fā)明的相同目的。本領(lǐng)域技術(shù)人員還要認(rèn)識(shí)的是，這種相當(dāng)?shù)募軜?gòu)不背離在附隨的權(quán)利要求中闡述的本發(fā)明的精神和范圍。被認(rèn)為是本發(fā)明的特征的新的設(shè)計(jì)，包括它的結(jié)構(gòu)和運(yùn)作方法，與進(jìn)一步的目的和優(yōu)點(diǎn)一起，根據(jù)以下的描述在連同附圖一起考慮時(shí)將被更好地理解。然而，要明確地了解的是，每一個(gè)附圖僅僅為了說(shuō)明和描述的目的來(lái)提供，而不意圖作為本發(fā)明的界限的定義。
附圖的簡(jiǎn)要描述
為了更完全了解本發(fā)明，與附圖一起參考以下的描述。
圖1是監(jiān)視在高壓施加期間眼睛形狀改變的示范性的設(shè)備。
圖2圖示地舉例說(shuō)明了由于提高的眼內(nèi)壓的眼睛膨脹(尺寸是眼睛的數(shù)字圖象的像素的數(shù)量)。
圖3顯示了來(lái)自眼睛膨脹研究的示范性的數(shù)據(jù)，其中剜出的眼睛相同地保持在22mmHg的IOP中一小時(shí)，隨后對(duì)照眼在22mmHg的IOP中23小時(shí)，測(cè)試眼85mmHg的IOP中23小時(shí)。在所有以下的附圖中的眼睛膨脹研究遵循這一方案，在實(shí)施例小節(jié)中進(jìn)一步詳述。
圖4顯示了來(lái)自眼睛膨脹研究的示范性的數(shù)據(jù)，其中三對(duì)治療的和相伴的對(duì)照眼睛(分別I2959和DPBS)經(jīng)歷了提高的IOP。時(shí)間t＝0相應(yīng)于85mmHg IOP后1小時(shí)的測(cè)量。PS和DE的改變表明UV活化的12959穩(wěn)定鞏膜的能力。
圖5顯示了來(lái)自眼睛膨脹研究的示范性的數(shù)據(jù)，其中五對(duì)治療的和相伴的對(duì)照眼睛(分別曙紅Y/TEOA和DPBS)經(jīng)歷了提高的IOP。時(shí)間t＝0相應(yīng)于IOP從正常水平提高到85mmHg。PS和DE的變化表明在24小時(shí)時(shí)間內(nèi)可見(jiàn)光活化的曙紅Y穩(wěn)定鞏膜的能力。
圖6顯示了來(lái)自曙紅Y/TEOA(組2)和曙紅Y/TEOA載體(組3)處理的兔眼睛的組織病理檢查的示范性的組織切片，a)組2兔子的照射區(qū)域顯示了輕微的炎癥和中度疤痕，b)組2的兔子的結(jié)膜沒(méi)有收縮的區(qū)域顯示了正常的鞏膜和結(jié)膜，c)組3(對(duì)照)兔子的照射的區(qū)域顯示了輕微的炎癥和中度疤痕，d)組3兔子的結(jié)膜沒(méi)有收縮的區(qū)域顯示了正常的鞏膜和結(jié)膜。所有圖中的箭頭指示在注意到炎癥和傷疤處的鞏膜/結(jié)膜的邊界。
圖7A和7B顯示了在角膜上皮完整的眼上使用曙紅Y的眼睛膨脹研究的典型結(jié)果(以數(shù)字圖象像素來(lái)度量)。
圖8A和8B顯示了在添加曙紅Y之前移除角膜上皮的眼上使用曙紅Y的眼睛膨脹研究的典型結(jié)果(以數(shù)字圖象像素來(lái)度量)。
圖9顯示了產(chǎn)生曙紅Y的PEG衍生物的示范性的化學(xué)合成途徑。
圖10復(fù)制了共焦顯微鏡檢查圖像，顯示了(圖10A)鞏膜的背景熒光，以及(圖10B)10分鐘的孵育之后熒光素標(biāo)記的PEG-丙烯酸酯的穿透。繪圖顯示了在10分鐘孵育和隨后的照射之后，作為鞏膜的深度的函數(shù)的、標(biāo)準(zhǔn)化的熒光平均強(qiáng)度。
圖11A顯示了用于測(cè)量進(jìn)入組織例如角膜的藥物擴(kuò)散的示范性的狹縫燈設(shè)備。a)設(shè)備的上視圖。B)照相機(jī)中所見(jiàn)的熒光。圖11B。狹縫燈圖像顯示了A)曙紅Y治療的角膜的完全厚度(濾色片2外置，圖11A)，B)基質(zhì)內(nèi)分離的熒光(濾色片2內(nèi)置，如圖11A中所示)；C)以及利用
軟件的自動(dòng)的熒光強(qiáng)度分析。
圖12顯示了通過(guò)浸入處理溶液(上述的曙紅Y濃度，每一列相應(yīng)于表2中的制劑)中1小時(shí)(或*6小時(shí))來(lái)處理的、上皮保留完整的(頂部行)或之前去除上皮的(底部行)剜出的豬眼睛的基質(zhì)的狹縫燈圖像。
發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明
與長(zhǎng)期存在的專(zhuān)利法慣例保持一致，當(dāng)在本說(shuō)明書(shū)中使用時(shí)，詞語(yǔ)“一個(gè)”和“一種”與包含表述“一個(gè)或多個(gè)”的詞語(yǔ)一致，包括權(quán)利要求。詞語(yǔ)“包含”和“包括”表明開(kāi)放的權(quán)利要求或權(quán)利要求界限。本發(fā)明的某些實(shí)施方式可以由或基本上由本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)組成要素、方法步驟和/或方法組成。期待的是，在此描述的任何方法或組合物可以相對(duì)于在此描述的任何其他方法或組合物來(lái)實(shí)現(xiàn)。
定義
在此使用的術(shù)語(yǔ)“角膜”是指眼睛前部的透明的、圓丘狀的覆蓋物。它通常作為折射面起作用，提供眼睛的超過(guò)一半的聚焦功能。在角膜中沒(méi)有血管，因而它通常是澄明的并且具有光滑表面。它包括5層上皮、鮑曼膜、基質(zhì)、德塞梅膜和內(nèi)皮。角膜還比身體的任何其他地方包含更多的神經(jīng)末梢。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“交聯(lián)(crosslink)”或“交聯(lián)(crosslinking)”是指兩個(gè)分子之間共價(jià)鍵的形成。例如，膠原分子可以與其他膠原分子交聯(lián)來(lái)形成通過(guò)共價(jià)鍵保持在一起的內(nèi)部連接的膠原分子的網(wǎng)絡(luò)。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“擴(kuò)張”是指中空器官的擴(kuò)大或伸長(zhǎng)。在本發(fā)明的特定的實(shí)施方式中，該術(shù)語(yǔ)是指眼睛組織，例如角膜的膨隆。在進(jìn)一步特定的實(shí)施方式中，所述擴(kuò)張是手術(shù)誘導(dǎo)的，而在可選擇的實(shí)施方式中，它不是由于手術(shù)，可以是由于示范性的醫(yī)學(xué)狀況圓錐角膜。在特定的情況下，擴(kuò)張是激光輔助的原位角膜磨鑲術(shù)(LASIK)的結(jié)果。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“圓錐角膜”是指一種醫(yī)學(xué)狀況，其中通常為圓形的角膜由于角膜的變薄和/或膨隆而發(fā)展成錐體樣形狀。在光線進(jìn)入眼睛去往感光的視網(wǎng)膜途中，錐體的形狀引起光線的不規(guī)則折射，這引起亂視。圓錐角膜是進(jìn)行性疾病，可以在一只眼睛或雙眼中發(fā)生。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“鞏膜”是指眼睛的堅(jiān)韌的、不透明的(通常白色的)、外側(cè)的纖維層，前方與角膜相連，后方與視神經(jīng)相連。它包括膠原和彈力纖維，通常被稱(chēng)為“眼白”。多條肌肉圍繞眼睛連接在鞏膜上并控制它的運(yùn)動(dòng)。在眼睛的后端，視神經(jīng)連接到鞏膜上。在此使用的術(shù)語(yǔ)“鞏膜”是指眼睛的外側(cè)的纖維層，前方與角膜相連，后方與視神經(jīng)相連。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“組織的機(jī)械和/或化學(xué)性質(zhì)”是指組織的生物物理學(xué)性質(zhì)。機(jī)械性能的實(shí)例包括但不限于拉伸強(qiáng)度、抗壓強(qiáng)度、彎曲強(qiáng)度、模量、伸長(zhǎng)和韌性(應(yīng)力-應(yīng)變)?；瘜W(xué)性質(zhì)的實(shí)例包括但不限于組織成分(例如，膠原對(duì)比交聯(lián)的膠原)的化學(xué)鍵的性質(zhì)、組織能夠保持的水化的水?dāng)?shù)量、組織組成部分的生物降解或轉(zhuǎn)換率。
術(shù)語(yǔ)“改變組織的形狀”是指將光引發(fā)劑治療與改變組織形狀的裝置組合來(lái)將所述組織穩(wěn)定在所述改變的形狀中。例如，通過(guò)被設(shè)計(jì)用來(lái)誘導(dǎo)角膜處于將會(huì)改善任一眼的視力的形狀中的塑料鑄型的方式，可以暫時(shí)地重塑角膜。通過(guò)組合這種塑形裝置和治療有效量的光引發(fā)劑，通過(guò)在塑形裝置就位時(shí)照射，在形狀改變裝置去除之后可以維持組織的矯正的形狀。
術(shù)語(yǔ)“治療有效量”是指直接引起組織的一種或多種機(jī)械或化學(xué)性能的改變到足夠程度、以治療眼睛變形狀況的癥狀所需的數(shù)量。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“眼睛變形狀況”是指受試者的眼中的疾病或物理改變，其引起研究的一種或多種結(jié)構(gòu)的尺寸的改變。在某些實(shí)施方式中，這種尺寸改變引起視力的改變。眼睛變形狀況的特定實(shí)例包括角膜變形狀況如圓錐角膜(包括后部圓錐角膜)；激光輔助的原位角膜磨鑲術(shù)(LASIK)后的擴(kuò)張和光折射角膜切除術(shù)(PRK)后的擴(kuò)張的術(shù)后角膜變形狀況；感染后擴(kuò)張、外周的擴(kuò)張、角膜的類(lèi)風(fēng)濕性的狀況、退化性近視、常規(guī)近視、鞏膜葡萄腫以及青光眼(包括眼睛高壓青光眼和低眼壓性青光眼)。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“光引發(fā)劑”是指能夠?qū)⑽盏墓饽芰浚话闶荱V或可見(jiàn)光轉(zhuǎn)化成引發(fā)物種形式，例如自由基或陽(yáng)離子的化學(xué)能的化合物。根據(jù)引發(fā)的自由基形成的機(jī)制，光引發(fā)劑一般被分成兩種類(lèi)型類(lèi)型I光引發(fā)劑在照射時(shí)經(jīng)歷單分子的鍵裂解產(chǎn)生自由基；類(lèi)型II光引發(fā)劑經(jīng)歷雙分子反應(yīng)，其中光引發(fā)劑的激發(fā)態(tài)與第二分子(輔助引發(fā)劑)反應(yīng)來(lái)產(chǎn)生自由基。類(lèi)型I和類(lèi)型II的UV光引發(fā)劑是已知的，而可見(jiàn)光光引發(fā)劑一般屬于類(lèi)型II類(lèi)別。熟練的技術(shù)人員認(rèn)識(shí)到，光引發(fā)劑的選擇確定了采用的光源的類(lèi)型，不同的光引發(fā)劑在不同的波長(zhǎng)下具有活性并且具有不同的效力。特別地，光引發(fā)劑可以被激發(fā)的空間分辨率取決于光引發(fā)劑是經(jīng)過(guò)單一光子還是經(jīng)過(guò)多個(gè)光子激發(fā)。在特定的實(shí)施方式中光引發(fā)劑可以是水溶性的，被氧抑制，優(yōu)選的是生物相容的。光引發(fā)劑進(jìn)入鞏膜和/或角膜的擴(kuò)散取決于化合物的大小，以及光引發(fā)劑與組織的親水性的和/或疏水性相互作用。希望的擴(kuò)散速率將是快速的，以最小化治療時(shí)間。高效率的光引發(fā)劑是希望的，因?yàn)檎丈淠芰?、照射時(shí)間和光引發(fā)劑濃度被最小化。優(yōu)選地，氧充當(dāng)降低光引發(fā)劑的效力的抑制劑。這種抑制將提供保護(hù)攜帶氧氣的血管免于光引發(fā)劑的光活化的任何有害影響的方法。在特定的實(shí)施方式中，采用水溶性的、無(wú)毒的并且對(duì)氧濃度的量敏感的光引發(fā)劑。示范性的光引發(fā)劑包括此處的式I的化合物、
2959、以及在美國(guó)公開(kāi)的申請(qǐng)?zhí)?0050271590的圖10B、10C和10E中公開(kāi)的那些光引發(fā)劑。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“模量”是指常數(shù)或系數(shù)，其代表，例如數(shù)字上地代表物質(zhì)或本體具有機(jī)械性能的程度(例如強(qiáng)度或彈性)。熟練的技術(shù)人員認(rèn)識(shí)到，模量的范圍取決于確切的測(cè)量方法、被測(cè)量的模量的特定類(lèi)型、測(cè)量的物質(zhì)，對(duì)于鞏膜來(lái)說(shuō)，組織的狀況(如年齡或健康狀況)以及組織在眼球上的位置。模量的實(shí)例包括楊氏模量(也稱(chēng)為Young模量、彈性模數(shù)、彈性模量或拉伸模量)、體積模量(K)和剪切模量(G，或有時(shí)S或(i)也稱(chēng)為剛性模量。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“眼睛組織”是指眼睛中存在的或與眼睛相關(guān)的不連續(xù)的組織類(lèi)型。在某些實(shí)施方式中，所述眼睛組織是建立和/或維持眼睛的形狀的結(jié)構(gòu)組織。在其他實(shí)施方式中，所述眼睛組織對(duì)眼睛的視力有貢獻(xiàn)。眼睛組織的特定實(shí)例包括鞏膜、篩狀板和角膜。
術(shù)語(yǔ)“直接治療”、“直接處理”、“直接降低風(fēng)險(xiǎn)”等等是指基于光引發(fā)劑的療法，其中光引發(fā)劑直接與組織成分相互作用來(lái)引起組織性質(zhì)的改變。光引發(fā)劑的直接治療不同于間接的光引發(fā)劑治療，其中光引發(fā)劑與一種或多種其他化學(xué)試劑相互作用來(lái)改變另一種化學(xué)試劑的結(jié)構(gòu)，另一種化學(xué)試劑的改變引起組織性質(zhì)的改變。間接的光引發(fā)劑治療的實(shí)例在美國(guó)公開(kāi)的申請(qǐng)?zhí)?0050271590中找到，其中曙紅Y/TEOA被用作PEGDM交聯(lián)的光引發(fā)劑用于鞏膜組織的加強(qiáng)。本發(fā)明不包括間接的光引發(fā)劑療法。在此使用的術(shù)語(yǔ)“直接治療”、“直接處理”等等另外是指疾病或狀況例如眼睛變形狀況的至少一種癥狀的改善。舉例來(lái)說(shuō)，在近視中，癥狀包括鞏膜的拉伸長(zhǎng)、鞏膜的變薄或鞏膜的削弱。此外，熟練的技術(shù)人員認(rèn)識(shí)到，所述治療不需要改善視力，例如改善視力到其最大的程度。在特定的方面，該術(shù)語(yǔ)是指阻止眼睛變形狀況例如退化性近視或圓錐角膜的發(fā)展或減緩發(fā)展。在具體的實(shí)施方式中，視力穩(wěn)定。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“聚乙二醇”和“PEG”是指一種化合物，其包含乙二醇的超過(guò)一個(gè)部分的或全部的聚(乙二醇)主干單體，有或者沒(méi)有不同端基，以及包含某些單體或沒(méi)有其他單體，例如，二甲基硅氧烷、甲基丙烯酸甲酯、賴(lài)氨酸、精氨酸、硫酸軟骨素、硫酸角蛋白，等等。在特定的實(shí)施方式中，它被定義為包含乙二醇(-OCH2CH2-)的重復(fù)單元的寡聚體或聚合物。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“近視(myopia)”，也可以稱(chēng)為近視(near-sightedness)，是指清楚地看見(jiàn)近處的物體但不能在一定距離處看清物體的能力。本發(fā)明適合于所有形式和程度的近視。在特定的實(shí)施方式中，近視是病理性的并且被診斷，此時(shí)眼球伸長(zhǎng)與眼球后部的眼睛組織的變薄相關(guān)。高度近視被定義為超過(guò)8屈光度。
如在此使用的，術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”是指那些鹽，在可接受的醫(yī)學(xué)判斷的范圍內(nèi)，它們適合于與人類(lèi)和低等動(dòng)物的組織接觸而沒(méi)有過(guò)度的毒性、刺激、變態(tài)反應(yīng)等等，并且與合理的效益/風(fēng)險(xiǎn)比例相稱(chēng)。胺、羧酸類(lèi)及其他類(lèi)型的化合物的藥學(xué)上可接受的鹽是本領(lǐng)域公知的。例如，S.M.Berge等人在J.Pharmaceutical Sciences，66119(1977)中描述了藥學(xué)上可接受的鹽，通過(guò)參考文獻(xiàn)合并在此。所述的鹽可以在本發(fā)明的化合物的最終的分離和純化期間原位地制備，或通過(guò)使游離酸或游離堿官能團(tuán)與適合的試劑反應(yīng)來(lái)單獨(dú)地制備，如下文一般描述的。例如，游離堿官能團(tuán)可以與適合的酸反應(yīng)。此外，當(dāng)本發(fā)明的化合物帶有酸性部分時(shí)，其適合的藥學(xué)上可接受的鹽可以包括金屬鹽，例如堿金屬鹽，例如鈉或鉀鹽；以及堿土金屬鹽，例如鈣或鎂鹽。藥學(xué)上可接受的、無(wú)毒的酸加鹽的實(shí)例是氨基與無(wú)機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸，或與有機(jī)酸例如乙酸、草酸、順丁烯二酸、酒石酸、枸櫞酸、丁二酸或丙二酸，或通過(guò)使用本領(lǐng)域中使用的其他方法例如離子交換而形成的鹽。其他藥學(xué)上可接受的鹽包括己二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸酯、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、甲酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡糖酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基-乙烷磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋(píng)果酸鹽、馬來(lái)酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過(guò)硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽、戊酸鹽，等等。代表性的堿或堿土金屬鹽包括鈉、鋰、鉀、鈣、鎂鹽等等。在合適時(shí)，進(jìn)一步的藥學(xué)上可接受的鹽包括無(wú)毒的銨、季銨以及利用平衡離子例如鹵離子、氫氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低級(jí)烷磺酸根和芳基磺酸根形成的胺陽(yáng)離子。
在此使用的“基本上同時(shí)地進(jìn)行”意思是在一定時(shí)間內(nèi)應(yīng)用在此公開(kāi)的方法，其在時(shí)間上與預(yù)防或降低潛在的并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)的操作足夠接近。進(jìn)行所述操作的醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)人員將被此處的指導(dǎo)和實(shí)例良好地告知，從而能夠確定合適的時(shí)機(jī)。在某些實(shí)施方式中，在此公開(kāi)的方法的應(yīng)用在醫(yī)學(xué)操作之后，以及在特定的實(shí)施方式中，在醫(yī)學(xué)操作之后至多5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、60、75、90或120分鐘或更久。
在此使用的“角膜手術(shù)”是指任何醫(yī)學(xué)操作，其涉及重塑或以外科方式改變角膜，例如激光輔助的原位角膜磨鑲術(shù)(LASIK)或光折射角膜切除術(shù)(PRK)。
在此使用的“可見(jiàn)光”是指具有約400nm到約780nm波長(zhǎng)的電磁輻射。在某些實(shí)施方式中，可見(jiàn)光是具有a)約400nm-約750nm，b)約400nm到約700nm，或c)約450nm到約700nm的波長(zhǎng)的電磁輻射。
本發(fā)明的實(shí)施方式
在本發(fā)明的實(shí)施方式中，有涉及改變個(gè)體的身體中組織的一種或多種機(jī)械和/或化學(xué)性能的方法和組合物。在某些情況下，所述組織是眼睛組織，在特定的實(shí)施方式中，所述眼睛組織是角膜或鞏膜。在又特別示范性的實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及改變例如患有圓錐角膜的個(gè)體的角膜的一種或多種機(jī)械和/或化學(xué)性能。
在特定的實(shí)施方式中，為了防止由于圓錐角膜的視力損失，本發(fā)明人設(shè)計(jì)了最小侵入性的、安全的和快速的方法來(lái)在例如角膜、篩狀板或鞏膜中導(dǎo)入治療性交聯(lián)。雖然減慢圓錐角膜的發(fā)展是本發(fā)明的一個(gè)特定的實(shí)施方式，但是本發(fā)明還提供了將常規(guī)分子交聯(lián)或聚合到眼睛的其他部分例如，角膜、鞏膜和篩狀板之內(nèi)的那些部分的能力。本發(fā)明適用于各種狀況，其中組織的形狀是不穩(wěn)定的(不能維持它的正常形狀)和/或需要重新成形。與視力有關(guān)的實(shí)例包括圓錐角膜、后部圓錐角膜、激光輔助的原位角膜磨鑲術(shù)(LASIK)后的擴(kuò)張、光折射角膜切除術(shù)(PRK)后的擴(kuò)張、感染后的擴(kuò)張、外周的擴(kuò)張(例如透明邊緣角膜退化)、角膜的類(lèi)風(fēng)濕性狀況、退化性近視、常規(guī)近視、鞏膜葡萄腫、青光眼和正常張力青光眼。
本發(fā)明人已經(jīng)開(kāi)發(fā)了臨床上相關(guān)的示范性的表面給藥的或注射的光引發(fā)劑與可見(jiàn)光照射的組合，來(lái)產(chǎn)生足夠的交聯(lián)以延緩圓錐角膜的發(fā)展。利用對(duì)分子進(jìn)入角膜中的分配和轉(zhuǎn)運(yùn)的了解，人們可以修飾或產(chǎn)生穿透上皮而沒(méi)有上皮毒性的新的分子。滲透角膜的光引發(fā)劑以足夠的濃度充分地?cái)U(kuò)散到角膜基質(zhì)中以實(shí)現(xiàn)利用隨后的光活化的臨床效果。滲透角膜上皮的光引發(fā)劑是用于滲透其他組織例如鞏膜的極好的化合物。某些感興趣的光引發(fā)劑不滲透角膜上皮，可以通過(guò)注射來(lái)被遞送到基質(zhì)中。這容許人們不移除角膜上皮來(lái)治療。然后，本發(fā)明人顯示了，人們可以治療組織而不將組織暴露于潛在損傷性的UV光線。提供了由可見(jiàn)光活化的治療，由紫外線照射引起的視網(wǎng)膜和角膜損傷的風(fēng)險(xiǎn)被避免。此外，人們能夠利用照射模式來(lái)使交聯(lián)局部化以避免非目標(biāo)組織中的交聯(lián)。光引發(fā)劑濃度和光強(qiáng)度的相互作用決定了產(chǎn)生對(duì)患者必要的交聯(lián)程度所需的曝光時(shí)間。結(jié)果表明，照射時(shí)間低于5分鐘是可能的。這將把利用核黃素和紫外光線的30分鐘治療時(shí)間縮短到約5分鐘，并大大地簡(jiǎn)化被治療個(gè)體，例如患者，以及護(hù)理提供者，例如外科醫(yī)生的操作。光活化的進(jìn)一步的控制(包括在組織內(nèi)的選定深度活化，例如上皮之下和角膜的內(nèi)皮之上)可以通過(guò)將本發(fā)明擴(kuò)展到雙光子或多光子活化來(lái)實(shí)現(xiàn)。利用高度會(huì)聚的紅外光活化進(jìn)一步降低了照射誘導(dǎo)的毒性的風(fēng)險(xiǎn)。
光活化
在本發(fā)明的某些方面中，將一種或多種光引發(fā)劑提供給身體中的一種或多種組織，并且利用光線來(lái)活化它們。然而在某些方面，所述光線可以是任何種類(lèi)的，在特定的實(shí)施方式中，它是可見(jiàn)光、紫外光或紅外光。所述活化可以是雙光子或多光子活化。在進(jìn)一步特定的實(shí)施方式中，采用可見(jiàn)光照射。
暴露于曝光的持續(xù)時(shí)間可以是任何種類(lèi)的，只要目標(biāo)分子從所述光線中被活化。在特定的方面中，暴露于曝光是持續(xù)的，而在某些情況下是間歇的。在另外的方面中，光線被應(yīng)用約一秒或多秒，一分鐘或數(shù)分鐘，或一小時(shí)或數(shù)小時(shí)。在特定的情況中，光線被應(yīng)用至少約一分鐘、至少約兩分鐘、至少約三分鐘、至少約四分鐘、至少約五分鐘、至少約六分鐘、至少約七分鐘、至少約八分鐘、至少約九分鐘、至少約十分鐘、至少約十一分鐘、至少約十二分鐘、至少約十三分鐘、至少約十四分鐘、至少約十五分鐘，等等。在其他情況中，光線應(yīng)用不超過(guò)約三十分鐘、不超過(guò)約二十五分鐘、分鐘、不超過(guò)約二十分鐘、不超過(guò)約十五分鐘、不超過(guò)約十分鐘、不超過(guò)約九分鐘、不超過(guò)約八分鐘、不超過(guò)約七分鐘、不超過(guò)約六分鐘、不超過(guò)約五分鐘、不超過(guò)約四分鐘、不超過(guò)約三分鐘、不超過(guò)約二分鐘或不超過(guò)約一分鐘。
用于可見(jiàn)光照射的示范性的光源包括燈(例如，汞氙弧燈，任選地被濾色來(lái)發(fā)射一小組光波長(zhǎng))、激光和發(fā)光二極管(LED)。光線一般以1-100mW/cm2的強(qiáng)度被使用，特定的光強(qiáng)度取決于所涉及的組織和光引發(fā)劑化合物以及其他因素。技術(shù)人員將能容易地為特定的應(yīng)用調(diào)整照射的光強(qiáng)度和時(shí)間。
光引發(fā)劑
A.示范性的光引發(fā)劑
在本發(fā)明的某些實(shí)施方式中，一種或多種光引發(fā)劑被提供給個(gè)體的組織，從而所述組織的機(jī)械和/或化學(xué)性能被影響。在特定的實(shí)施方式中，一種或多種光引發(fā)劑被提供給個(gè)體的組織，從而所述組織被強(qiáng)化和/或組織的形狀被改變。在某些方面，采用治療有效量的光引發(fā)劑，其是指直接引起組織的一種或多種機(jī)械或化學(xué)性能的改變達(dá)到足夠程度以治療眼睛變形狀況的癥狀所需的數(shù)量。
在本發(fā)明中可以使用任何適合的光引發(fā)劑，只要它是可光活化的，在光活化時(shí)它直接影響希望的組織的至少一種機(jī)械和/或化學(xué)性能。在某些實(shí)施方式中，所述光引發(fā)劑是類(lèi)型II光引發(fā)劑。在其他實(shí)施方式中，所述光引發(fā)劑是可見(jiàn)光類(lèi)型II光引發(fā)劑。
在某些其他的實(shí)施方式中，所述光引發(fā)劑是由式I代表的化合物和式I的藥學(xué)上的鹽
式I 其中R1、R2、R3和R4各自獨(dú)立地是H、鹵素或NO2。
在某些實(shí)施方式中，R1、R2、R3和R4各自獨(dú)立地是H、Br、F或NO2。在某些實(shí)施方式中，R1、R2、R3和R4各自獨(dú)立地是H、Br或NO2。在再另外的實(shí)施方式中，R1、R2、R3、R4各自是氫(這種化合物也稱(chēng)為熒光素)。在其他實(shí)施方式中，R1和R4各自是NO2，并且R2和R3各自是Br(這種化合物也稱(chēng)為曙紅B)。在再另外的實(shí)施方式中，R1、R2、R3、R4各自是溴(這種化合物也稱(chēng)為曙紅Y)。
本發(fā)明的示范性的化合物曙紅Y將被用于更詳細(xì)地描述本發(fā)明。
曙紅Y是最常見(jiàn)的水溶性呫噸染料，是膠原的常見(jiàn)的染料。曙紅Y是類(lèi)型II光引發(fā)劑，其一般與三乙醇胺(TEOA)組合使用。然而，與其他類(lèi)型II光引發(fā)劑一樣，可以使用任何適合的共引發(fā)劑。曙紅Y具有約514nm的吸收峰值，通過(guò)低毒性的、可見(jiàn)的(綠色)光線被高效地活化。
曙紅Y TEOA
值得注意地，如表1所示的，在一系列的應(yīng)用中，曙紅Y本身具有很好地確立的生物相容性的記錄。
表1.表明曙紅Y光引發(fā)劑系統(tǒng)的生物相容性的文獻(xiàn)。
在特定的實(shí)施方式中，所述光引發(fā)劑與一種或多種標(biāo)記物組合，從而一旦被遞送給受試者，光引發(fā)劑的位置和/或數(shù)量可以被監(jiān)視。示范性的標(biāo)記物包括熒光標(biāo)記物，其任選地可以被選擇來(lái)在基本上不活化所述光引發(fā)劑的光波長(zhǎng)下發(fā)熒光。
雖然存在著幾乎150種不同化合物的透過(guò)性測(cè)量值(Wollensak，2006)，但是對(duì)于化學(xué)物質(zhì)跨越角膜的擴(kuò)散還沒(méi)有可靠的預(yù)測(cè)性方程(Prausnitz and Noonan，1998)。趨勢(shì)顯示出，提高的親油性可以幫助跨越上皮屏障的轉(zhuǎn)運(yùn)(Tangliu et al.，1994；Sasaki et al.，1995)。同時(shí)，從藥物上移除電荷可以改善透過(guò)性。對(duì)于上皮的穿透，體外測(cè)量值與體內(nèi)結(jié)果良好相關(guān)，只要組織樣本的上皮是完整的。在某些實(shí)施方式中，改善式I化合物通過(guò)上皮的穿透性的一種方法是通過(guò)產(chǎn)生其羧酸鹽衍生物來(lái)降低它的電荷。一種這樣的修飾是向羧酸鹽位點(diǎn)添加短的PEG。舉例來(lái)說(shuō)，人們可以通過(guò)甲苯磺?；疨EG-OH并將它接枝到羧酸位點(diǎn)來(lái)制備接枝了PEG的曙紅Y(PEG-EY)。例如，可以使用三種長(zhǎng)度的商業(yè)上可獲得的、但是是示范性的PEG-OH大約200、400和800g/mol。
角膜的最厚的層——基質(zhì)，包含膠原纖維、氨基多糖和蛋白多糖的復(fù)雜排列。根據(jù)模型系統(tǒng)的所述對(duì)角膜穩(wěn)定的分子基礎(chǔ)(膠原網(wǎng)絡(luò)、聚賴(lài)氨酸、聚精氨酸、聚胱氨酸、透明質(zhì)酸、硫酸皮膚素、硫酸角質(zhì)素、硫酸軟骨素硫酸鹽或硫酸肝素)的了解容許曙紅Y的變體或新的光引發(fā)劑化合物來(lái)實(shí)現(xiàn)提高效力的特異性相互作用。
B.光引發(fā)劑的遞送
在某些實(shí)施方式中，光引發(fā)劑可以通過(guò)任何適合的方式、并且利用任何適合的方法來(lái)被遞送，只要施加了治療有效量。在特定的實(shí)施方式中，光引發(fā)劑是表面地、通過(guò)注射、通過(guò)接觸(包括持續(xù)釋放接觸)、通過(guò)吸收了光引發(fā)劑的海綿等等來(lái)遞送?？梢圆捎玫窝蹌谀承┣闆r下所述光引發(fā)劑被凍干。光引發(fā)劑還可以通過(guò)用精細(xì)規(guī)格的針注射到基質(zhì)中來(lái)被遞送給角膜，這種基質(zhì)注射的光引發(fā)劑可以擴(kuò)散到基質(zhì)片層中。
可以針對(duì)單獨(dú)的患者來(lái)調(diào)整在光引發(fā)劑的遞送和照射之間的時(shí)間，并且該時(shí)間可以取決于多種因素，包括所述光引發(fā)劑進(jìn)入目標(biāo)組織的擴(kuò)散速率，以及光引發(fā)劑在給藥條件(例如，環(huán)境光強(qiáng)度)下的穩(wěn)定性。光引發(fā)劑可以被提供給個(gè)體，然后在一定時(shí)間以確保光引發(fā)劑到達(dá)特定位置和/或足夠水平之后，舉例來(lái)說(shuō)，然后可以進(jìn)行照射。例如，在光引發(fā)劑達(dá)到特定組織中的某一深度時(shí)，可以用狹縫燈和/或共焦顯微鏡來(lái)監(jiān)視光引發(fā)劑，然后用光線活化所述光引發(fā)劑。在特定的實(shí)例中，當(dāng)穿透角膜到某一深度時(shí)監(jiān)視所述光引發(fā)劑，然后用光線活化所述光引發(fā)劑。
在光引發(fā)劑遞送和光引發(fā)劑的光活化之間的時(shí)間可以是任何適合的持續(xù)時(shí)間，而在特定的實(shí)施方式中，該時(shí)間在秒、分鐘或小時(shí)的數(shù)量級(jí)上。在特定的實(shí)施方式中，所述時(shí)間是約一分鐘、約兩分鐘、約三分鐘，直到約120分鐘。在其他特定的實(shí)施方式中，在光引發(fā)劑遞送和光引發(fā)劑的光活化之間的持續(xù)時(shí)間不超過(guò)約一分鐘、約兩分鐘、約三分鐘、約5分鐘、約10分鐘、約20分鐘，直到約120分鐘。
C.組織照射
對(duì)光引發(fā)劑治療的組織的照明可以通過(guò)多種設(shè)備和技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)。狹縫燈遞送系統(tǒng)、光學(xué)纖維光系統(tǒng)、通過(guò)間接的檢眼鏡遞送系統(tǒng)的照明都是可容易地適合在此公開(kāi)的用途和方法的照射裝置的實(shí)例?？梢允褂萌魏芜m合的設(shè)備或技術(shù)，其能夠以合適的強(qiáng)度遞送合適波長(zhǎng)的光線持續(xù)足夠量的時(shí)間，一般地基于所使用的特定光引發(fā)劑和在此公開(kāi)的其他參數(shù)。
醫(yī)學(xué)狀況的治療
在本發(fā)明的特定的方面，所述方法和組合物可以用于有需要的受試者的任何醫(yī)學(xué)狀況。雖然在特定的方面所述受試者是人類(lèi)，在進(jìn)一步的方面中，本發(fā)明對(duì)于其他哺乳動(dòng)物，例如馬、牛、狗、貓、山羊、綿羊或豬是有用的。
根據(jù)需要可以在個(gè)體中重復(fù)治療。例如，第二次或多次治療可以在先前的治療數(shù)天內(nèi)、之前的治療數(shù)周內(nèi)、或之前的治療數(shù)月內(nèi)進(jìn)行。
A.眼睛醫(yī)學(xué)狀況
在本發(fā)明的實(shí)施方式中，有眼睛變形狀況的治療。在特定的實(shí)施方式中，所述眼睛變形狀況包括圓錐角膜、后部圓錐角膜、LASIK后的擴(kuò)張、PRK后的擴(kuò)張、感染后的擴(kuò)張、外周的擴(kuò)張(例如透明邊緣角膜變性)、角膜的類(lèi)風(fēng)濕性狀況、退化性近視、常規(guī)近視和/或鞏膜葡萄腫、青光眼、正常張力青光眼和眼睛高壓。在某些實(shí)施方式中，此處的方法可以被預(yù)防性地使用來(lái)降低或防止包括上述任一的眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)。在特定的實(shí)施方式中，此處的方法與進(jìn)行LASIK、PRK或其他角膜手術(shù)的同時(shí)或之后不久被應(yīng)用于角膜，來(lái)降低術(shù)后擴(kuò)張或其他角膜變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)，這些是這樣的手術(shù)的并發(fā)癥。
1.青光眼
青光眼是世界上視覺(jué)喪失的主要原因。在青光眼中，存在著與視神經(jīng)頭部的凹陷相關(guān)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的漸進(jìn)性損失。最常見(jiàn)地，這種視神經(jīng)損傷在大于21mm Hg的提高的眼內(nèi)壓下發(fā)生。然而不少見(jiàn)的，我們可以在正常的眼內(nèi)壓下見(jiàn)到相同的視神經(jīng)凹陷(正常張力青光眼)。Burgoyne和同事已經(jīng)顯示了眼內(nèi)壓改變視神經(jīng)的支撐結(jié)構(gòu)、篩狀板以及視乳頭周的鞏膜的形狀。(1.Burgoyne，CF，Downs JC，Bellezza AJ et al.The optic nerve head(ONH)as a biomechanical structurea new paradigm for understanding the role of IOP-related stress and strainin the pathophysiology of glaucomatous optic nerve head damage.ProgRetina Eye Res.2005；2439-732.Bellezz AJ，Rintalan CJ，Thompson HW，et al.Deformation of the lamina cribrosa and anterior scleral canal wall inearly experimental glaucoma.Invest Ophthalmol Vis Sci.2003；44623-6373.Yang J，Downs JC，Girkin C，et al.3-D histomorphometry of the normaland early glaucomatous monkey optic nerve headlamina cribrosa andperipapillary scleral position and thickness.Invest Ophthalmol Vis Sci.2007；484597-4607)。眼內(nèi)壓誘導(dǎo)的后部變形和增厚篩狀板結(jié)締組織被認(rèn)為促進(jìn)了對(duì)軸突的損害，它們伸出眼外，結(jié)果導(dǎo)致青光眼性視神經(jīng)萎縮。“從工程化的角度，對(duì)損傷和永久變形敏感的ONH結(jié)締組織應(yīng)當(dāng)與它的結(jié)構(gòu)剛度直接相關(guān)，其是結(jié)構(gòu)的幾何形狀(組織體積和形態(tài))以及材料性質(zhì)(組織剛度)的組合”。(Yang J，Downs JC，Girkin C，et al.3-D histomorphometry of the normal and early glaucomatous monkey opticnerve headlamina cribrosa and peripapillary scleral position and thickness.Invest Ophthalmol Vis Sci.2007；484597-4607)。因而，如果我們改變(強(qiáng)化)篩狀板的機(jī)械性能并阻止青光眼或正常張力青光眼中該組織的變形，我們能夠降低甚至停止這些失明失調(diào)的發(fā)展。此外，在具有青光眼風(fēng)險(xiǎn)的患者中，具有眼睛高壓的那些(提高的眼內(nèi)壓而沒(méi)有視神經(jīng)頭部損傷)，在篩狀板和/或視乳頭周的鞏膜中結(jié)締組織的類(lèi)似強(qiáng)化將防止或降低青光眼的風(fēng)險(xiǎn)或青光眼的發(fā)展速度。
為了選擇性地治療篩板和/或鄰近的視乳頭周鞏膜來(lái)提高對(duì)壓力誘導(dǎo)的變形的抗性，光引發(fā)劑可以在照射之前以眼內(nèi)方式和/或以眼周方式被注射。然后可以通過(guò)眼睛的瞳孔進(jìn)行照射，并定位在篩狀板和/或視乳頭周鞏膜上。作為選擇，可以利用光學(xué)纖維探針從眼球囊下眼球囊下方法應(yīng)用照射。多光子照射可能是特別有用的，用于選擇性地控制光引發(fā)劑在目標(biāo)組織，篩狀板和/或視乳頭周鞏膜內(nèi)的活化。如果視神經(jīng)的支持組織因而被穩(wěn)定，視神經(jīng)的青光眼性萎縮可以被阻止或減慢。
B.非眼睛醫(yī)學(xué)狀況
在本發(fā)明的實(shí)施方式中，治療的組織包括一部分血管。舉例來(lái)說(shuō)，可以根據(jù)在此公開(kāi)的方法強(qiáng)化具有動(dòng)脈瘤風(fēng)險(xiǎn)的血管壁來(lái)降低動(dòng)脈瘤發(fā)展的風(fēng)險(xiǎn)，或強(qiáng)化現(xiàn)有的動(dòng)脈瘤來(lái)降低血管壁破裂的風(fēng)險(xiǎn)。
在其他實(shí)施方式中，所述組織包括疝或處于疝形成的風(fēng)險(xiǎn)中的組織。通過(guò)根據(jù)此處的方法強(qiáng)化組織，疝形成的風(fēng)險(xiǎn)或提高的疝形成的風(fēng)險(xiǎn)可以被降低。
在其他實(shí)施方式中，治療的組織包括具有變性風(fēng)險(xiǎn)的肺泡結(jié)構(gòu)，例如在COPD患者中。此處的方法強(qiáng)化肺泡結(jié)構(gòu)來(lái)降低肺泡變性的發(fā)生和速率。
在其他實(shí)施方式中，治療的組織可以是損傷的心臟組織，例如，在心肌梗塞之后?？梢酝ㄟ^(guò)此處的方法來(lái)強(qiáng)化損傷的心臟組織以改善心臟功能和/或降低心臟功能的損失速率。舉例來(lái)說(shuō)，在擴(kuò)張型心肌炎的情況下強(qiáng)化的心臟組織可以停止或降低心臟泵送能力的損失速率。
對(duì)組織的機(jī)械和/或化學(xué)性質(zhì)的改變的分析
在本發(fā)明的某些方面，測(cè)試了組織的機(jī)械和/或化學(xué)性質(zhì)的改變。各種材料測(cè)試技術(shù)是技術(shù)人員可獲得的。舉例來(lái)說(shuō)，組織的楊氏模量可以利用TA儀器AR1000血流速度計(jì)(利用栓系的平行板幾何形狀)來(lái)測(cè)量。
在本發(fā)明的某些方面，通過(guò)可視地鑒定組織的形狀改變來(lái)測(cè)試組織的改變。例如，如下所述的眼睛膨脹測(cè)試可視地測(cè)量在提高的眼內(nèi)壓之下眼睛的結(jié)構(gòu)的膨脹。
也可以在治療之前和之后采用表征組織的機(jī)械性能的本領(lǐng)域已知的其他儀器和技術(shù)。這些已知的技術(shù)可以在例如Ahearne M，YangY，Then KY，Liu KK.An indentation technique to characterize themechanical and viscoelastic properties of human and porcine corneas.AnnBiomed Eng.2007Sep；35(9)1608-16；and Gatinel D，Chaabouni S，Adam PA，Munck J，Puech M，Hoang-Xuan T.Corneal hysteresis，resistance factor，topography，and pachymetry after corneal lamellar flap.JRefract Surg.2007Jan；23(1)76-84中和在此引用的其他參考文獻(xiàn)中找到。
示范性的眼睛治療
示范性的治療操作可以是如下的。在照射之前1-120分鐘將配制的包含曙紅Y的滴眼劑的局部給藥給個(gè)體。這提供了試劑擴(kuò)散進(jìn)入鞏膜的時(shí)間。在約1-120分鐘之后，用可見(jiàn)光照射眼睛約1-5分鐘(1-100mW/cm2，波長(zhǎng)適合于特定的光引發(fā)劑，例如，對(duì)于曙紅Y是500±50nm)。眼科的平衡鹽水溶液滴眼劑可以在給藥光引發(fā)劑之后和光活化之前被用于清洗眼睛。照射的臨床實(shí)施的適合的方式包括使患者處于背臥位，通過(guò)手術(shù)顯微鏡放出光線，或使患者坐下并利用狹縫燈系統(tǒng)放出光線。人們也可以使用通過(guò)結(jié)膜下或眼球囊下方法指向鞏膜的光學(xué)纖維光源。用于照射的適合的光源包括燈、激光或發(fā)光二極管，舉例來(lái)說(shuō)?？刂茖?duì)組織的照射模式事件的適合的方法包括使照射波束光柵化、使用空間光調(diào)制器、使用數(shù)字反光鏡設(shè)備、或使用與激光相連的光學(xué)纖維，舉例來(lái)說(shuō)。所述治療穩(wěn)定鞏膜的當(dāng)前形狀，并停止或減緩與例如退化性近視相關(guān)的漸進(jìn)性改變。當(dāng)治療涉及角膜時(shí)，利用例如角膜局部解剖學(xué)評(píng)估來(lái)監(jiān)視受試者的折射改變。如果形狀改變恢復(fù)，可以在每當(dāng)必需時(shí)重復(fù)治療(例如，以3到36個(gè)月的間隔)。
曝光也可以改變曝光的量來(lái)調(diào)整在組織中發(fā)生的交聯(lián)的程度。這可以通過(guò)測(cè)量照射過(guò)程期間光引發(fā)劑的熒光強(qiáng)度的降低來(lái)定量。限定區(qū)域中的交聯(lián)可以利用光圖案或甚至通過(guò)多光子光源活化來(lái)進(jìn)行。
實(shí)施例
以下實(shí)施例被包括進(jìn)來(lái)以示范本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式。那些本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，以下的實(shí)施例中公開(kāi)的技術(shù)代表了發(fā)明人發(fā)現(xiàn)的技術(shù)能在本發(fā)明的實(shí)踐中很好地工作，因此可以認(rèn)為構(gòu)成了用于其實(shí)踐的優(yōu)選的方式。然而，本領(lǐng)域的技術(shù)人員根據(jù)當(dāng)前公開(kāi)的內(nèi)容應(yīng)當(dāng)理解，可以在公開(kāi)的具體方案中進(jìn)行許多變化，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下仍獲得相似的或類(lèi)似的結(jié)果。
實(shí)施例1 利用曙紅Y/TEOA光致引發(fā)的聚(乙二醇)二甲基丙烯酸酯(PEGDM)聚合
根據(jù)美國(guó)公開(kāi)的申請(qǐng)?zhí)?0050271590的教導(dǎo)，本發(fā)明人使用曙紅Y/TEOA作為PEGDM交聯(lián)的選擇性的光引發(fā)劑用于鞏膜組織的加強(qiáng)。令人驚訝地發(fā)現(xiàn)的是，在不存在目標(biāo)交聯(lián)劑(例如，PEGDM)的情況下，曙紅Y/TEOA對(duì)于增強(qiáng)鞏膜組織的強(qiáng)度是可比較地有效的。特別出乎意料的是，利用大約30分鐘或更短的照射時(shí)間，類(lèi)型II光引發(fā)劑能夠強(qiáng)化鞏膜達(dá)到治療上有用的程度。不希望受任何理論的限制，相信的是，曙紅Y可以充分地促進(jìn)膠原及其他鞏膜成分的直接交聯(lián)來(lái)直接地增強(qiáng)鞏膜組織的強(qiáng)度。雖然這沒(méi)有排除交聯(lián)劑例如PEGDM的共同作用，但是曙紅Y的結(jié)果暗示了更簡(jiǎn)單的制劑是可能的，其利用美國(guó)食品和藥品管理局已經(jīng)批準(zhǔn)的試劑。
實(shí)施例2 治療的組織的劑量反應(yīng)和機(jī)械性能
許多不同的技術(shù)已經(jīng)被用于初步評(píng)估鞏膜組織強(qiáng)化，包括拉伸測(cè)試、振蕩剪切測(cè)量和以下更完整地討論的眼睛擴(kuò)張分析。
利用組織切片的流變分析初步評(píng)估了有或者沒(méi)有交聯(lián)化合物的引發(fā)劑強(qiáng)化鞏膜的能力。將鞏膜切片(8mm直徑)從豬眼睛上切下，在TA儀器AR1000流變計(jì)(利用栓系的平行板幾何形狀)上測(cè)試來(lái)定量處理前和處理后模量的改變。選擇兩個(gè)實(shí)例的光引發(fā)劑用于初步評(píng)估。
2959(2-羥基-1-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-2-甲基-1-丙酮和具有三乙醇胺的曙紅Y(曙紅Y/TEOA)。
2959(12959)是在細(xì)胞封裝研究中顯示了低毒性的UV光活化的光引發(fā)劑。選擇曙紅Y/TEOA作為來(lái)自式I定義的組的、對(duì)可見(jiàn)光起反應(yīng)的實(shí)例光引發(fā)劑。鞏膜組織的剪切模量隨著12959加PEGDM治療而提高，模量改變的數(shù)量隨著氧的降低而提高(氧抑制聚合化)。利用曙紅Y/TEOA加PEGDM實(shí)現(xiàn)了類(lèi)似的結(jié)果。如以上討論的，令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，在用12959或曙紅Y/TEOA單獨(dú)治療時(shí)發(fā)生的模量方面可比較的提高。
實(shí)施例3 在近視和圓錐角膜的膨脹模型中的眼睛形狀
利用從幼小(1-2周)新西蘭白兔剜出的成對(duì)的眼睛以體外方式評(píng)估眼睛形狀的穩(wěn)定化，一只眼被處理，其伴眼作為對(duì)照。為了模擬和加速體內(nèi)存在的負(fù)載幾何結(jié)構(gòu)，通過(guò)強(qiáng)加提高的眼內(nèi)壓來(lái)機(jī)械地測(cè)試完整的眼球注射器將眼內(nèi)液體連接到Dulbecco’s(DPBS)的高位儲(chǔ)池，而眼睛的外部浸入環(huán)境壓力的DPBS中(圖1)。從幼小兔子剜出的眼睛提供了可擴(kuò)張的角膜和鞏膜組織的模型當(dāng)在體外經(jīng)受提高的眼內(nèi)壓時(shí)，角膜逐漸地向外膨隆，鞏膜壁擴(kuò)展(圖2和3)。
從兩個(gè)成直角的視點(diǎn)隨著時(shí)間的過(guò)去記錄眼球的大小和形狀。為了準(zhǔn)備用于測(cè)試的眼睛，任選地用棉拭從角膜上除去上皮，從眼球上除去外脂肪。(注意，在下文中單獨(dú)地檢查光引發(fā)劑進(jìn)入組織的穿透)。然后將眼睛浸入對(duì)照(Dulbecco’s PBS)或處理溶液(例如，0.029mM曙紅Y、90mM TEOA，DPBS中)中5分鐘。在浸泡之后，拍干眼睛從表面除去額外的溶液，然后例如對(duì)于曙紅Y/TEOA用34mW/cm2500±50nm從前方照射5分鐘和從后方照射5分鐘。然后將眼睛加載到DPBS的小室中，眼內(nèi)壓(IOP)維持在85mmHg(～4倍正常值)。分析每10分鐘拍攝了24小時(shí)的照片來(lái)定量角膜和鞏膜的伸長(zhǎng)長(zhǎng)。由發(fā)明人設(shè)計(jì)的上述完整眼睛膨脹方法測(cè)出了處理的眼睛組織的穩(wěn)定化，對(duì)于記錄模量的改變，其他方法不是足夠敏感的。
實(shí)施例4 在近視的膨脹模型中機(jī)械性能與眼睛伸長(zhǎng)和眼睛形狀的離體穩(wěn)定性的相關(guān)性
用UV活化的光引發(fā)劑12959測(cè)試顯示了這種方法直接穩(wěn)定組織的能力。將眼睛浸入0.3％12959中5分鐘，將眼睛的前部暴露于光線(10mW/cm2，365nm)10分鐘，后部10分鐘。然后將眼睛連接到鹽水儲(chǔ)存池，將壓力直接地提高到85mmHg。隨著時(shí)間的過(guò)去，處理的眼睛保持穩(wěn)定的形狀，而未處理的眼睛持續(xù)地?cái)U(kuò)展(圖4)。
用12959測(cè)試證明了強(qiáng)化眼睛組織并阻止擴(kuò)張的可能性；然而，可見(jiàn)光活化的制劑一般將更適合于臨床應(yīng)用。將眼睛浸入0.0289mM曙紅Y/90mM TEOA溶液中5分鐘，然后通過(guò)將眼睛前部暴露于可見(jiàn)光(34mW/cm2，450-550nm)5分鐘、眼睛后部5分鐘來(lái)活化。這種處理也能阻止眼睛擴(kuò)張(圖5)。
由于眼睛形狀膨脹研究的敏感性，我們能夠用低濃度的制劑進(jìn)行。曙紅Y/TEOA所例示的可見(jiàn)光活化的系統(tǒng)顯示了低強(qiáng)度、可見(jiàn)光暴露和低光引發(fā)劑濃度下的快速治療時(shí)間，所述濃度類(lèi)似于在包含曙紅Y/TEOA的FDA批準(zhǔn)的藥物中使用的濃度。
實(shí)施例5 毒性研究
進(jìn)行毒性研究來(lái)確定如上所述的制劑和曝光是否適合于在近視的動(dòng)物模型中和在臨床試驗(yàn)中使用?，F(xiàn)有廣泛的文獻(xiàn)記載了曙紅Y和TEOA的相容性。由于這種低毒的有前景的歷史，對(duì)于在眼睛中的生物相容性，這種制劑顯示了大的潛力。為了測(cè)試對(duì)曙紅Y/TEOA和可見(jiàn)光暴露的體內(nèi)反應(yīng)，利用了采用各種遞送技術(shù)的以下的實(shí)驗(yàn)。
用通過(guò)面具給藥的1-5％吸入的異氟烷給予六只成年新西蘭白兔全身麻醉，向右眼(0D)表面給藥0.5％丙對(duì)卡因。用5％聚維酮碘對(duì)每個(gè)動(dòng)物的右眼進(jìn)行滅菌。在整個(gè)過(guò)程中，用無(wú)菌的眼用平衡鹽水溶液(BBS)洗滌眼睛。在結(jié)膜中制造一個(gè)15mm的切口，拉開(kāi)結(jié)膜來(lái)暴露鞏膜。以下述方式將200微升溶液施加到兔子鞏膜。
5分鐘之后，通過(guò)暴露于光線5分鐘來(lái)光活化治療的區(qū)域(大約450-550nm，大約34mW/cm2)。通過(guò)縫合來(lái)閉合結(jié)膜中的切口。讓所有動(dòng)物接受倍他米松(75-150微升)和頭孢唑啉(75-150微升)的結(jié)膜下注射。給予所有動(dòng)物卡洛芬(5mg/kg)和丁丙諾啡(0.05mg/kg)的注射以及2-3滴新霉素、硫酸多粘菌素B、短桿菌肽OD。檢查眼睛的疼痛或炎癥的任何病征，例如紅眼、排出物、眼瞼的上瞼下垂、瞼痙攣或畏光。每天檢查眼睛一次持續(xù)1周，然后每周一次持續(xù)另外3周。在4周之后，讓所有動(dòng)物安樂(lè)死，去除治療的眼睛，在10％福爾馬林中固定，加工用于光顯微鏡檢查(曙紅/蘇木色素染色)。記錄任何炎性細(xì)胞的存在。
在手術(shù)后2天所有手術(shù)的眼睛存在某些腫脹和炎癥。這與預(yù)計(jì)從手術(shù)操作本身得到的結(jié)果是相一致的。代表性的結(jié)果在圖6中示出。在操作后3天和在此后的每次檢查中，在任何眼睛中沒(méi)有疼痛或炎癥的病征。在組織學(xué)檢查時(shí)，在組1和2的動(dòng)物中在照射區(qū)域下存在著沿著結(jié)膜鞏膜邊界的輕微的炎癥和中度傷疤。在組3的對(duì)照眼睛中也有某些炎癥和傷疤。在所有實(shí)驗(yàn)組中，虹膜、視網(wǎng)膜和纖毛體在外觀上都是正常的。
在治療的和對(duì)照眼睛的鞏膜中沒(méi)有顯著差異，表明輕微的炎癥和傷疤的發(fā)生是手術(shù)而非治療的結(jié)果。同樣地，治療的眼睛中附近組織內(nèi)的細(xì)胞的生存力與正常眼睛的相當(dāng)。
實(shí)施例6 在圓錐角膜的膨脹模型中機(jī)械性能與眼睛拉伸長(zhǎng)和眼睛形狀的離體穩(wěn)定性的相關(guān)性
眼睛形狀膨脹模型很好地適合于作為圓錐角膜的療法的角膜強(qiáng)化(圖7和8)。如圖7中所示，利用如上所述簡(jiǎn)短的曙紅Y/TEOA處理步驟不能容許足夠的光引發(fā)劑穿透角膜用于通過(guò)直接光引發(fā)劑交聯(lián)的隨后的角膜強(qiáng)化。與這相比的是，在這個(gè)模型系統(tǒng)中測(cè)試的參數(shù)下，鞏膜充分地吸收光引發(fā)劑以允許充分的組織強(qiáng)化。充分的角膜光引發(fā)劑吸收可以通過(guò)除去覆蓋角膜的上皮以允許光引發(fā)劑向目標(biāo)組織的直接給藥來(lái)實(shí)現(xiàn)(圖8)。這種結(jié)果是完全防止在眼睛膨脹模型系統(tǒng)中角膜伸長(zhǎng)的膨脹(圖8)。
藥物穿透上皮的能力可以通過(guò)共同給藥被設(shè)計(jì)以改變上皮的化學(xué)或物理性質(zhì)的分子來(lái)增強(qiáng)(Sasaki H，Yamamura K，Mukai T，Nishida K，Nakamura J，Nakashima M，Ichikawa M.Enhancement ofOcular Drug Penetration.Critical Reviews in Therapeutic Drug CarrierSystems.1999；16(1)85-146)。使用破壞上皮屏障的合適的藥物，上皮去除將是不必要的。例如，有報(bào)告的是，在使用了表面施加的丙對(duì)卡因之后，向水中的藥物遞送提高了4倍(Ehlers W，Crouch E，WilliamsP，Riggs P.Factors Affecting Therapeutic Concentration of TopicaiAminocaproic Acid in Traumatic Hyphema.10VS.1990；31(11)2389-2394)。特別地，表面麻醉劑例如丙對(duì)卡因和丁卡因改變鈉離子通道的功能，并因而改變上皮的電生理學(xué)?？缭缴掀さ膭?shì)差的改變便于帶電分子例如式I代表的那些分子的擴(kuò)散。此外，這些麻醉劑改變上皮中細(xì)胞與細(xì)胞的結(jié)合，降低它作為屏障的有效性。在這種可選擇的方法中，眼科的丙對(duì)卡因滴劑(例如，0.5％滴劑)或丁卡因的滴劑(例如0.5％滴劑)被用于上皮完整的角膜。在大約15分鐘之后，根據(jù)此處的方法處理角膜。
實(shí)施例7 用于上皮穿透的曙紅Y的修飾
雖然上文描述的上皮去除操作是用于治療眼睛的可接受的醫(yī)學(xué)操作，本發(fā)明人已經(jīng)展現(xiàn)了曙紅Y可以順從于化學(xué)修飾，其改善它進(jìn)入完整上皮的鞏膜和角膜的穿透性。在一個(gè)實(shí)例中，聚乙二醇(PEG)共價(jià)結(jié)合到曙紅Y的羧基(圖9)，盡管降低了分子上的電荷，其容許PEG-曙紅Y溶于水中。這種化學(xué)修飾增強(qiáng)了曙紅Y進(jìn)入組織的穿透性，并降低了實(shí)現(xiàn)足夠的組織強(qiáng)化所需的化學(xué)物質(zhì)的數(shù)量。用PEG共價(jià)修飾還改變了光化活性，可以影響光引發(fā)劑療法的效力和時(shí)間過(guò)程。來(lái)自修飾的改善的穿透性結(jié)果一般應(yīng)當(dāng)針對(duì)希望的照射的時(shí)間過(guò)程保持平衡以?xún)?yōu)化治療。例如，曙紅Y和PEG-曙紅Y的混合物可以用來(lái)實(shí)現(xiàn)優(yōu)化的光引發(fā)劑穿透和照射的時(shí)間過(guò)程。
利用在鏈的相反末端帶有丙烯酸酯的接枝了熒光素的PEG進(jìn)行示范性的研究(熒光素，式I所定義的類(lèi)別內(nèi)的另一種化合物，具有與曙紅Y和式I定義的其他候選光引發(fā)劑相似的大小和疏水性)。將完整的豬眼球浸入DPBS中PEG-熒光素和12959的溶液中持續(xù)指定的時(shí)間。然后，將豬眼睛用365nm光線照射來(lái)誘導(dǎo)熒光素與組織的共價(jià)結(jié)合(12959的光致交聯(lián)用來(lái)固定PEG-藥物，從而它的分布可以被成像)。在處理的鞏膜中產(chǎn)生的熒光素的深度圖形在鞏膜的厚度上切下的組織切片中成像。模型PEG-光引發(fā)劑共軛物在數(shù)分鐘內(nèi)穿透了幾百微米進(jìn)入組織中(圖10)。在與PEG-藥物軛合物的溶液接觸5分鐘之后，在組織切片的熒光顯微照片中滲透到100微米或更多是明顯的。在與PEG-藥物共軛物的溶液接觸30分鐘之后，觀察到滲透至500微米。這些結(jié)果表明在5到30分鐘的時(shí)間內(nèi)的表面給藥適合于適當(dāng)?shù)匦揎椀乃幬飦?lái)達(dá)到組織強(qiáng)化所需的深度。
對(duì)于使用豬眼睛的曙紅Y和PEG-曙紅Y的研究，利用了依靠修改的狹縫燈的分析方法，其可以方便地轉(zhuǎn)變成臨床設(shè)備(圖11A)。已經(jīng)進(jìn)行改良來(lái)容許替換或去除濾色片1和2，將數(shù)字照相機(jī)置于與所述狹縫光源同向的、固定的角度，并且在檢查期間將剜出的豬眼睛保持在正確的位置。
借助光源的適當(dāng)?shù)臑V色片(濾色片1通過(guò)500±20nm)和來(lái)自角膜的光散射(濾色片2通過(guò)560±25nm)，曙紅Y的熒光允許我們檢視它在基質(zhì)中的穿透剖面圖。這些濾色片的使用容許我們辨別來(lái)自熒光的散射光。未處理的角膜沒(méi)有顯示熒光(兩個(gè)濾色片就位時(shí)視野顯示暗色)。在新鮮剜出的、處理的豬眼睛中，我們能夠測(cè)定整個(gè)角膜厚度上的熒光剖面圖(圖11B)。利用
程序來(lái)分析來(lái)自設(shè)備的數(shù)字圖象，該軟件確定了角膜表面、將角膜不同深度下圖像的強(qiáng)度平均化，并繪出了對(duì)照強(qiáng)度與深度的關(guān)系圖。照這樣，我們能夠檢查穿過(guò)上皮的藥物的數(shù)量和它在基質(zhì)中的分布。
從3-4月齡豬上剜出的眼睛是從Medical Science的Sierra獲得的。將新鮮的眼睛放在鹽水中、冰上裝運(yùn)。在到達(dá)時(shí)，通過(guò)除去仍然附著于眼睛上的組織來(lái)直接地清潔眼睛(小于死后42小時(shí))。然后，以散射方式和熒光模式對(duì)角膜照相，提供背景熒光的基線比較和角膜的初始尺寸。用解剖刀除去上皮或保持完整，之后將眼睛置于2ml的處理溶液中(表2)。將眼睛保持在溶液中1小時(shí)，然后移出，用大約4ml的Dulbecco氏PBS清洗，以散射和熒光模式照相。然后，清除具有完整上皮的眼睛并在此照相。在這個(gè)步驟除去上皮分離了由于已經(jīng)透入基質(zhì)的藥物的熒光。
表2.在Dulbecco的磷酸鹽緩沖鹽水中混合的處理溶液
在有和沒(méi)有上皮存在時(shí)曙紅Y向基質(zhì)中的穿透(圖12)，表明上皮抑制曙紅Y滲透進(jìn)入角膜。曙紅Y跨越上皮的顯著的滲透在用高濃度溶液(2和3)處理的角膜中是明顯的，表明上皮的去除可以通過(guò)應(yīng)用足夠濃度的光引發(fā)劑，特別是式I代表的光引發(fā)劑來(lái)避免。除了單獨(dú)的基質(zhì)的圖像之外(圖12)，還存在采用上皮采集的圖像表明上皮吸收曙紅Y。這些結(jié)果顯示，可以修飾曙紅Y分子而通過(guò)提高上皮透過(guò)性來(lái)提高進(jìn)入基質(zhì)的滲透，表明了上皮吸收的藥物可能隨著時(shí)間而被釋放到基質(zhì)中，容許在藥物遞送方法和處理時(shí)間方面的變化。
實(shí)施例8(預(yù)示的) 體外測(cè)定穩(wěn)定鞏膜和角膜形狀的最佳條件
眼睛形狀的穩(wěn)定化——將使用新西蘭白兔的成套的眼睛來(lái)研究光活化的化合物強(qiáng)化鞏膜的能力。在以上開(kāi)發(fā)的操作之后，將完整的兔眼睛清除所有的脂肪，浸入處理溶液中，用光線照射來(lái)活化所述處理，然后置于DPBS浴中，通過(guò)皮下注射針連接到升起的鹽水儲(chǔ)存池。調(diào)節(jié)儲(chǔ)存池的高度來(lái)得到85mmHg的IOP，24小時(shí)采集圖片來(lái)監(jiān)視形狀改變。將用這個(gè)測(cè)試來(lái)研究能夠改變穩(wěn)定化的程度的過(guò)程變量。要測(cè)試的一些變量包括
光引發(fā)劑濃度和構(gòu)成成分的比例最小化穩(wěn)定所需的光引發(fā)劑的數(shù)量將降低毒性的風(fēng)險(xiǎn)，而提高光引發(fā)劑的數(shù)量可以降低治療時(shí)間。提高光引發(fā)劑濃度將增大產(chǎn)生的自由基的數(shù)量，但是在某些濃度下，染料的吸收可能限制光線透過(guò)，僅容許在鞏膜角膜表面上的活化。此外，曙紅Y和TEOA的二元系統(tǒng)在當(dāng)前的成分比例下可能沒(méi)有顯示最佳的活化。將測(cè)試從0.0289mM到1mM的曙紅Y濃度、以及3mM到90mM的TEOA濃度范圍。
在向鞏膜表面進(jìn)行表面給藥期間的光引發(fā)劑接觸時(shí)間表面給藥依賴(lài)于曙紅Y和TEOA進(jìn)入鞏膜的擴(kuò)散。提高接觸時(shí)間會(huì)提高組織內(nèi)的光引發(fā)劑濃度、提高透入深度，但是也會(huì)提高患者并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)。從1分鐘直到20分鐘的浸泡時(shí)間將用于檢查提高的擴(kuò)散時(shí)間的影響。
在光引發(fā)劑施加和照射之間的延遲時(shí)間在從鞏膜上清洗光引發(fā)劑和用光線照射之間的時(shí)間中，仍然發(fā)生光引發(fā)劑的擴(kuò)散。來(lái)自表面給藥的初始濃度梯度將隨著時(shí)間變得更為均勻。組織內(nèi)的交聯(lián)與存在的光引發(fā)劑的濃度相關(guān)。通過(guò)將這個(gè)延遲時(shí)間擴(kuò)大到長(zhǎng)達(dá)20分鐘來(lái)研究產(chǎn)生梯度以及更均勻的交聯(lián)的穩(wěn)定化效果。
照射方案當(dāng)前實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定化的操作采用5分鐘的、來(lái)自Thermo Oriel 500瓦汞氙弧燈的經(jīng)過(guò)過(guò)濾的寬波段曝光(450-550nm，以34mW/cm2)。雖然這一劑量屬于根據(jù)ANSI標(biāo)準(zhǔn)的最大容許暴露極限，但是時(shí)間和強(qiáng)度的降低將進(jìn)一步提高這種操作的安全性。曙紅Y在514nm處具有峰值吸收，將照射波長(zhǎng)與之匹配會(huì)改善效力。根據(jù)曙紅Y的吸收光譜和汞氙燈的光譜輸出，對(duì)于中心在514nm的窄帶(28nm)光源的計(jì)算為相當(dāng)?shù)恼丈浞桨割A(yù)測(cè)出實(shí)現(xiàn)當(dāng)前水平的一半(15mW/cm2)的強(qiáng)度。裸露時(shí)間和強(qiáng)度將被降低來(lái)確定治療所需的最小照射時(shí)間。我們初步的結(jié)果令人驚訝地表明，在525nm處的LED發(fā)射以及在五分鐘期間僅大約7mW/cm2的功率足以穩(wěn)定在我們的眼睛膨脹模型中的眼睛的形狀。
實(shí)施例9(預(yù)示的) 在體內(nèi)強(qiáng)化鞏膜和/或角膜
體內(nèi)處理，特別是治療方法，一般將涉及光引發(fā)劑和光線向受試者的鞏膜或角膜的遞送。
將通過(guò)經(jīng)由面具給藥1-5％吸入的異氟烷和表面的0.5％丙對(duì)卡因來(lái)麻醉新西蘭白兔。用5％聚維酮碘來(lái)滅菌眼睛。在整個(gè)操作中，眼睛在眼用平衡鹽水溶液(BBS)中洗滌。在結(jié)膜中產(chǎn)生切口，牽開(kāi)器將被用于暴露眶周的間隙。最終的操作步驟中的改變將用于遞送和活化的效果的獨(dú)立研究。
光引發(fā)劑遞送光引發(fā)劑將會(huì)被注射到眼球后間隙用于鞏膜處理，或作為滴劑添加在角膜上(有或者沒(méi)有去除上皮)。為了提高接觸時(shí)間，將利用眼科粘彈劑(例如，Rayflo，Rayner Intraocular Lenses，Ltd.)的混合物來(lái)提高光引發(fā)劑溶液的粘度。根據(jù)體外眼睛形狀膨脹模型確定制劑將保持接觸的最佳持續(xù)時(shí)間。然后用BSS洗去過(guò)量的光引發(fā)劑。在清洗之后立即地，將動(dòng)物安樂(lè)死。將利用共焦顯微鏡檢查對(duì)剜出的眼睛的鞏膜的和/或角膜、以及周?chē)M織中光引發(fā)劑的存在進(jìn)行評(píng)估，來(lái)確定曙紅Y的濃度，如上文針對(duì)PEG-熒光素所顯示的(圖X)。將對(duì)顯微照片中存在的曙紅Y的熒光標(biāo)志進(jìn)行分析，來(lái)確定橫向擴(kuò)散和透入深度。
光線遞送將利用與氬激光器(514nm)或LED(525nm)相連的光學(xué)纖維來(lái)嘗試用來(lái)處理鞏膜的特定區(qū)域的交聯(lián)的定位。根據(jù)如上所述的體外工作中測(cè)定的光引發(fā)劑遞送方法，將在光線活化時(shí)結(jié)合組織的熒光標(biāo)記的示蹤分子與光活化劑制劑一起來(lái)給予(圖X)。從眶周的間隙和/或角膜表面洗去過(guò)量的制劑。將通過(guò)光纖光源將足夠的光線遞送給鞏膜和/或角膜來(lái)啟動(dòng)交聯(lián)(強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間如上文所確定的)。將用BSS洗滌眼睛，對(duì)兔子進(jìn)行安樂(lè)死，剜出眼睛。利用熒光顯微術(shù)評(píng)估交聯(lián)的深度和精確度。
毒性6只兔子的組將接受根據(jù)以上實(shí)施例確定的優(yōu)化條件的完整治療。對(duì)照組將接受沒(méi)有光活化的測(cè)試光引發(fā)劑制劑，或接受使用載體制劑的光療法。在光引發(fā)劑和光線遞送之后，用BSS沖洗眼睛來(lái)除去過(guò)量制劑。手術(shù)切口用縫合來(lái)閉合手術(shù)切口。動(dòng)物將給予頭孢唑啉(抗生素)和倍他米松(類(lèi)固醇)的結(jié)膜下注射。臨床上檢查眼睛的疼痛或炎癥的任何病征，例如眼睛的發(fā)紅、眼睛中的膿以及眼瞼的上瞼下垂，每天一次持續(xù)一周，然后每周一次持續(xù)一個(gè)月。在1個(gè)月后，將動(dòng)物安樂(lè)死。取出處理的眼睛，固定在10％福爾馬林中，加工用于光學(xué)顯微鏡檢查。記錄任何炎性細(xì)胞的存在。臨床的和組織病理學(xué)的炎癥性反應(yīng)將按1到4級(jí)來(lái)分級(jí)，1等于沒(méi)有炎癥，2等于輕微的炎癥，3等于中度炎癥，4等于嚴(yán)重的炎癥。
實(shí)施例10(預(yù)示的) 在體內(nèi)強(qiáng)化鞏膜和/或角膜
體內(nèi)處理，體外穩(wěn)定化在如上所述的體內(nèi)應(yīng)用之后，將在體外測(cè)試眼睛的穩(wěn)定性。一只眼被處理，第二只眼充當(dāng)對(duì)照。在處理后各種時(shí)間對(duì)兔子進(jìn)行安樂(lè)死(表3)。將利用上文所述壓力誘導(dǎo)的眼睛膨脹分析來(lái)測(cè)試剜出的眼睛的穩(wěn)定性。
當(dāng)在如上所述進(jìn)行的眼睛膨脹分析中經(jīng)受85mmHg IOP時(shí)，來(lái)自一個(gè)或多個(gè)組的眼睛將維持它們的形狀。
實(shí)施例11(預(yù)示的) 在近視模型系統(tǒng)中體內(nèi)強(qiáng)化鞏膜和/或角膜
已經(jīng)在豚鼠中建立了形覺(jué)剝奪近視的模型(Howlett MH，McFadden SA.，F(xiàn)orm-deprivation myopia in the guinea pig(Caviaporcellus)，Vision Res.2006Jan；46(1-2)267-83，Epub 2005Aug 31)。在5天齡，將白色塑料半球置于豚鼠的一只眼上。在形覺(jué)剝奪的僅11天之后，與未封堵的伴眼相比，存在平均-6.6D更多的近視和146μm的軸向伸長(zhǎng)。這種模型將被用于根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證光引發(fā)劑制劑和使用參數(shù)。
實(shí)驗(yàn)將測(cè)試正常眼對(duì)比近視眼(組A)、正常眼對(duì)比治療的近視眼(組B)、治療的正常眼對(duì)比治療的近視眼(組C)，以及近視眼對(duì)比治療的近視眼(組D)。
在4天齡，右眼將被脫垂出眼窩，暴露后部鞏膜。該區(qū)域?qū)⒗迷诠庖l(fā)劑溶液中浸泡的Week Cell敷涂器用上文的光引發(fā)劑(例如曙紅Y)制劑處理。在等待如上確定的合適的時(shí)間(幾分鐘)之后，將處理的區(qū)域照射來(lái)通過(guò)光引發(fā)劑誘導(dǎo)自由基形成。然后將眼睛置于眼窩中，用可吸收的縫合術(shù)來(lái)閉合結(jié)膜。一系列對(duì)照動(dòng)物將經(jīng)歷相同的操作，但沒(méi)有施加光引發(fā)劑或照射。在5天齡，在處理組和對(duì)照組中豚鼠的右眼的上方和下方膠粘上尼龍搭扣帶，將白色塑料散光罩固定在尼龍搭扣帶上。
在生命的16天，除去散光罩，進(jìn)行以下的測(cè)量紅外線角膜散光測(cè)量來(lái)確定角膜球面變曲度；利用高頻超聲(20MHz)測(cè)量軸長(zhǎng)，以及利用睫狀肌麻痹后的標(biāo)線視網(wǎng)膜檢影法測(cè)量折射誤差。在這些測(cè)量之后，將動(dòng)物處死用于完整眼球的組織學(xué)研究。
當(dāng)在如上所述進(jìn)行的眼睛膨脹分析中經(jīng)受85mmHg IOP時(shí)，來(lái)自處理的近視組的眼睛將維持它們的形狀，或者與對(duì)照眼相比在體內(nèi)維持它們的形狀。
實(shí)施例11(預(yù)示的)
患有開(kāi)角青光眼的患者在雙眼中出現(xiàn)提高的眼內(nèi)壓以及提高的視神經(jīng)凹陷。為了提供篩狀板的機(jī)械穩(wěn)定化并降低視神經(jīng)萎縮的進(jìn)展，利用睫狀體平坦部(pars plana)方法眼內(nèi)地注射曙紅Y/TEOA。5到60分鐘之后，直接在篩頁(yè)上用雙光子光源照射篩狀板。所產(chǎn)生的篩頁(yè)內(nèi)結(jié)締組織的交聯(lián)提高了它的模量并抵抗隨后的變形。使用2光子輻照源對(duì)篩頁(yè)的靶向可以借助于本領(lǐng)域公知的以及例如在美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?005/0048044中描述的運(yùn)動(dòng)敏感性光學(xué)聯(lián)接的斷層照相設(shè)備。
實(shí)施例12(預(yù)示的)
患有近視的患者選擇進(jìn)行LASIK。為了防止LASIK后擴(kuò)張，在激發(fā)二聚體消融之后將曙紅Y/TEOA施加給基質(zhì)床。然后復(fù)位皮瓣。來(lái)自基于光引發(fā)劑的治療的提高的角膜硬度降低了LASIK后擴(kuò)張的風(fēng)險(xiǎn)。
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所有在此引證的或提出的參考文獻(xiàn)通過(guò)引用將它們完整地合并在此，如同已經(jīng)它們的每一個(gè)已經(jīng)通過(guò)上文的引用特意地合并。特別地，關(guān)于參考文獻(xiàn)引證的或依靠的特定的材料，所有的參考文獻(xiàn)通過(guò)引用合并在此。
雖然已經(jīng)詳細(xì)描述了本發(fā)明和它的優(yōu)點(diǎn)，要理解的是，在此可以進(jìn)行各種變化、替換和改變而不背離由附隨的權(quán)利要求所定義的本發(fā)明的精神和范圍。此外，本申請(qǐng)的范圍不意圖受限于說(shuō)明書(shū)中描述的過(guò)程、機(jī)制、產(chǎn)品、物質(zhì)組合、手段、方法和步驟的特定實(shí)施方式。根據(jù)本發(fā)明的公開(kāi)內(nèi)容本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將容易地理解，與在此描述的相應(yīng)實(shí)施方式進(jìn)行基本上相同的功能或?qū)崿F(xiàn)基本上相同的結(jié)果的、當(dāng)前現(xiàn)有的或以后開(kāi)發(fā)的過(guò)程、機(jī)制、產(chǎn)品、物質(zhì)組合、手段、方法或步驟可以根據(jù)本發(fā)明來(lái)使用。因而，附隨的權(quán)利要求意圖在它們的范圍內(nèi)涵蓋這樣的過(guò)程、機(jī)制、產(chǎn)品、物質(zhì)組合、手段、方法或步驟。
權(quán)利要求
1.光引發(fā)劑化合物用于制造藥物的用途，所述藥物用于通過(guò)所述光引發(fā)劑化合物直接治療或預(yù)防眼睛變形狀況。
2.光引發(fā)劑化合物，用作用于直接治療或降低眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)的藥物。
3.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)的用途，其中所述直接治療、預(yù)防或降低眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)包括增大眼睛組織的模量。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的用途，其中所述眼睛組織至少包括一部分鞏膜、篩狀板或角膜，并且任選地包括鞏膜和/或角膜和/或篩狀板的全部。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)的用途，其中所述眼睛變形狀況選自由圓錐角膜、激光輔助的原位角膜磨鑲術(shù)(LASIK)后的擴(kuò)張、光折射角膜切除術(shù)(PRK)后的擴(kuò)張、感染后的擴(kuò)張、外周的擴(kuò)張、角膜的類(lèi)風(fēng)濕性狀況、退化性近視、常規(guī)近視或鞏膜葡萄腫、眼睛高壓性青光眼或低眼壓性青光眼及其及其組合構(gòu)成的組。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)的用途，其中所述眼睛變形狀況是退化性近視。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)的用途，其中所述眼睛變形狀況是圓錐角膜。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物包含具有式I的化合物
其中R1、R2、R3和R4各自獨(dú)立地是H、鹵素或NO2，及其藥學(xué)上的鹽。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的用途，其中R1、R2、R3、R4各自獨(dú)立地是H、Br或NO2。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物包含曙紅Y、曙紅B或熒光素。
11.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物包含式I所代表的化合物的聚乙二醇衍生物。
12.根據(jù)權(quán)利要求8-10的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物能夠在利用可見(jiàn)光照射所述光引發(fā)劑化合物30分鐘或更短時(shí)直接治療或降低所述眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)。
13.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物用于表面的給藥。
14.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物用于通過(guò)注射給藥。
15.光引發(fā)劑化合物用于制造藥物的用途，所述藥物用于直接改變組織的機(jī)械和/或化學(xué)性質(zhì)。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的用途，其中所述組織是眼睛組織，所述眼睛組織的機(jī)械和/或化學(xué)性質(zhì)的直接改變包括增大的眼睛組織的模量。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的用途，其中所述眼睛組織至少包括一部分鞏膜、篩狀板或角膜，并且任選地包括鞏膜和/或角膜和/或篩狀板的全部。
18.根據(jù)前述權(quán)利要求16-17中的任一項(xiàng)的用途，其中所述眼睛組織處在患有狀況或存在患有狀況的風(fēng)險(xiǎn)的受試者的眼睛中，所述狀況選自由圓錐角膜、激光輔助的原位角膜磨鑲術(shù)(LASIK)后的擴(kuò)張、光折射角膜切除術(shù)(PRK)后的擴(kuò)張、感染后的擴(kuò)張、外周的擴(kuò)張、角膜的類(lèi)風(fēng)濕性狀況、退化性近視、常規(guī)近視或鞏膜葡萄腫、眼睛高壓性青光眼或低眼壓性青光眼及其組合構(gòu)成的組。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的用途，其中所述眼睛變形狀況是退化性近視。
20.根據(jù)權(quán)利要求18的用途，其中所述眼睛變形狀況是圓錐角膜。
21.根據(jù)前述權(quán)利要求15-20中的任一項(xiàng)的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物包含具有式I的化合物
其中R1、R2、R3和R4各自獨(dú)立地是H、鹵素或NO2，及其藥學(xué)上的鹽。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的用途，其中R1、R2、R3、R4各自獨(dú)立地是H、Br或NO2。
23.根據(jù)權(quán)利要求21的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物包含曙紅Y、曙紅B或熒光素。
24.根據(jù)權(quán)利要求21-23的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物包含式I所代表的化合物的聚乙二醇衍生物。
25.根據(jù)權(quán)利要求21-24的用途，其中所述光引發(fā)劑化合物能夠在利用包含500±50nm波長(zhǎng)的光線、以1-100mW/cm2的照明強(qiáng)度照射30分鐘或更短時(shí)，直接治療或降低所述眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)。
26.根據(jù)前述權(quán)利要求15-25中的任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物用于表面的給藥。
27.根據(jù)前述權(quán)利要求15-25中的任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物用于通過(guò)注射給藥。
28.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)的用途，其中所述直接治療眼睛變形狀況、直接降低眼睛變形狀況的風(fēng)險(xiǎn)或直接預(yù)防眼睛變形狀況包括以500±50nm波長(zhǎng)、1-100mW/cm2的照明強(qiáng)度照射所述組織中的所述藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及改變身體組織、特別是眼睛組織的機(jī)械和/或化學(xué)性質(zhì)。在特定的情況中，它涉及改變或穩(wěn)定角膜的形狀，例如在患有或存在擴(kuò)張或圓錐角膜的風(fēng)險(xiǎn)的受試者中。在其他特定的情況中，它涉及在患有或存在近視的風(fēng)險(xiǎn)的受試者中強(qiáng)化鞏膜。本發(fā)明利用了對(duì)可光活化的化合物，例如，用于與組織交聯(lián)的光活化性化合物的光線照射。
文檔編號(hào)A61M35/00GK101594904SQ200780039701
公開(kāi)日2009年12月2日 申請(qǐng)日期2007年10月24日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月24日
發(fā)明者D·M·施沃茨, M·S·梅特森, J·A·科恩菲爾德, R·K·馬羅尼, R·H·格魯布斯 申請(qǐng)人:加州理工學(xué)院, 加州大學(xué)評(píng)議會(huì)