專(zhuān)利名稱(chēng)：：胡桃分離提取物及其獲取方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及胡桃分離提取物，在其用于制備治療病毒、真菌和細(xì)菌疾病的藥物的時(shí)間內(nèi)具有高效性和高穩(wěn)定性。本發(fā)明還涉及獲取所述胡桃分離提取物的方法。
背景技術(shù)：
：胡桃提取物和泥罨劑被用于流行的食療藥物已經(jīng)有很多年。胡桃樹(shù)的樹(shù)皮、葉子或果實(shí)中含有沒(méi)食子單寧、兒茶(catequic)單寧、胡桃醌、胡桃定(juglandine)、胡蘿卜素、肌醇、焦倍酚、維生素C和其他物質(zhì)。已證明胡桃樹(shù)皮(中國(guó)東北)主要含有5-羥基-l，4-萘醌(胡桃醌)、1，4，5-三羥基萘(氫化胡桃醌)、氫化胡桃醌的糖苷、羥基-ot-四氫萘酮的糖苷，以及這些糖苷的沒(méi)食子酸衍生物。還已知胡桃殼富含維生素C,且葉子中含有p-胡蘿卜素、維生素B1、B2和B6。胡桃醌被認(rèn)為是一種具有抗微生物、抗肺瘤和抗寄生蟲(chóng)作用的天然產(chǎn)物，并具有抗真菌和殺菌特性。因此，其可在多種市場(chǎng)產(chǎn)品中被找到，包括染發(fā)組合物和緞胡桃木油中。從胡桃殼中制備的胡桃醌是一種在飲食補(bǔ)充劑中有活性的活性組分。有證據(jù)表明胡桃醌是一種強(qiáng)力的化學(xué)治療或化學(xué)預(yù)防試劑。美國(guó)國(guó)家癌癥研究所(NCI)的治療研發(fā)小組在其對(duì)HIV-1的研究中評(píng)估了胡桃醌。2001年10月的US6,296,838涉及一種用于治療和預(yù)防人類(lèi)指曱的真菌感染的局部用抗真菌組合物。具體地，US6,296,838描述了這種具有協(xié)同效應(yīng)的提取物含有10-15%提取自胡桃殼的胡桃醌和20-30%匙葉甘松(Nardostachysjatamansi)、香根草(Vetiveriazizanioides)或長(zhǎng)春花(Catharanthusroseus)的碾碎的才艮的混合物，因?yàn)榧?吏進(jìn)4亍長(zhǎng)期治療，僅含胡桃醌的提取物在長(zhǎng)期治療過(guò)程中的效力和對(duì)真菌的毒性作4用非常低。為了獲得所述提取物，需將胡桃殼分離、水洗和風(fēng)干。然后將其磨碎，并用選自丙酮、乙醇和丁醇的溶劑提取胡桃醌。從提取物中除去溶劑，再將其冷卻以除去蠟類(lèi)，從而使得胡桃醌得以被部分分餾。現(xiàn)有技術(shù)中所述的胡桃分離提取物是基于從胡桃樹(shù)富含活性成分的部分中提取可抗真菌、抗細(xì)菌或抗病毒的確定活性成分。目前有含有提取自胡桃殼的胡桃醌的抗真菌組合物或含高濃度維生素c的組合物，其中維生素c來(lái)自某些廣為人知的富含維生素c的組織之---胡桃樹(shù)葉組織。含有胡桃分離提取物的組合物存在的缺點(diǎn)是必須在制備后馬上給藥，因?yàn)樗鼋M合物效力會(huì)隨著時(shí)間流逝而降低導(dǎo)致其壽命較短。因此，由于所述胡桃分離提取物的低穩(wěn)定性，含有該提取物的組合物必須在幾天之內(nèi)生產(chǎn)和給藥，以在治療中達(dá)到合適的效力。所以，由于所述提取物中胡桃醌的低穩(wěn)定性，所述基于胡桃分離提取物的組合物的應(yīng)用具有時(shí)間上的限制，而且它們只能專(zhuān)用于抗真菌、抗細(xì)菌或抗病毒。因此，還沒(méi)有任何能夠較長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定并且不依賴(lài)生產(chǎn)時(shí)間(momentofpreparation)的僅來(lái)源自胡桃的提取物。此外，也還沒(méi)有任何能夠同時(shí)具有抗真菌、抗細(xì)菌和抗病毒性質(zhì)并且長(zhǎng)時(shí)間保持穩(wěn)定的含所述提取物的組合物。
發(fā)明內(nèi)容因此，本發(fā)明的第一方面是提供不依賴(lài)于生產(chǎn)時(shí)間的并且長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定的基于胡桃的分離提取物。本發(fā)明的第二方面是提供能夠同時(shí)有效地用于抗真菌、抗細(xì)菌和抗病毒治療的基于胡桃的分離提取物。本發(fā)明的第三方面是提供可獲得根據(jù)本發(fā)明前兩方面的胡桃分離提取物的方法。本發(fā)明的第四方面是根據(jù)本發(fā)明第一方面的胡桃分離提取物用于制備治療病毒、真菌和細(xì)菌疾病的藥物的用途。本發(fā)明的第五方面是提供一種含有根據(jù)本發(fā)明第一方面的胡桃分離提取物的組合物，用于制備治療病毒、真菌和細(xì)菌疾病的藥物。定義本發(fā)明中的"未成熟的胡桃果實(shí)"是指所述胡桃處于乳狀蠟(Lactic-Waxy)成熟狀態(tài)。所述成熟狀態(tài)一般發(fā)生于6月10號(hào)和9月15號(hào)之間，更接近7月10號(hào)和8月IO號(hào)之間，但是所述日期可根據(jù)果實(shí)成熟地點(diǎn)的天氣而有所變化。圖1示出了一個(gè)本發(fā)明方法的流程圖，其中用少于IO分鐘的提取時(shí)間獲得胡桃提取物。圖2是不同提取時(shí)間的胡桃提取物中胡桃醌百分比含量相對(duì)于從制備時(shí)起的時(shí)間的變化的圖示。從所述圖2中可以看出只有當(dāng)提取時(shí)間少于lO分鐘時(shí)(--),胡桃醌的含量是隨時(shí)間保持穩(wěn)定的。具體實(shí)施例方式提取物的最終性質(zhì)的決定性條件。有利地，根據(jù)本發(fā)明第一方面的胡桃分離提取物是隨時(shí)間穩(wěn)定的，并具有可同時(shí)用于抗真菌、抗細(xì)菌和抗病毒的性質(zhì)。根據(jù)本發(fā)明前三方面，本發(fā)明提供了胡桃分離提取物，其特征在于所述提取物是通過(guò)包括如下步驟的方法獲取的i)采集不成熟胡桃果實(shí)作為原料；ii)制備用于提取的原料；iii)冷凍上一步制備的原料；iv)干燥；v)在少于IO分鐘的時(shí)間內(nèi)完成提??；vi)過(guò)濾；和vii)最終包裝。具體地，所述制備用于拔:取的原料的步驟(ii)優(yōu)選地包括機(jī)械清洗、自來(lái)水清洗、蒸餾水清洗和風(fēng)干。優(yōu)選地，所述冷凍步驟(iii)包括將胡桃果實(shí)置于溫度為-18到-20"的冷凍室中70-170小時(shí)，甚至更優(yōu)選地為120±5小時(shí)。具體地，所述干燥步驟(iv)包括，首先，剝?nèi)±鋬龅暮业耐鈿?-3mm的薄層，然后，將它們置于托盤(pán)中干燥(優(yōu)選地置于太陽(yáng)下)，再置于溫度為38°C±2。C的干燥室中，直至濕度低于10%。所述提取步驟(v)包括將在所述干燥步驟中獲得的干燥物切成小片，加入1/2到1/5重量/體積比、優(yōu)選為1/3的重量/體積比的乙醇(96%)，然后在10分鐘之內(nèi)、優(yōu)選5分鐘之內(nèi)、甚至更優(yōu)選2分鐘之內(nèi)進(jìn)行提取。所述提取物的過(guò)濾步驟優(yōu)選為在一個(gè)初級(jí)凈化過(guò)濾器中進(jìn)行，然后在0.25±0.005MPa的壓力下在一個(gè)細(xì)孔除菌過(guò)濾器中進(jìn)行。只要不背離本發(fā)明的發(fā)明構(gòu)思，本領(lǐng)域的技術(shù)人員對(duì)步驟i)到iv)，vi)和vii)進(jìn)行的修改也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。圖l是本發(fā)明上述方法的一個(gè)非限制性的圖解。本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)提取時(shí)間對(duì)所述胡桃分離提取物的最終性質(zhì)非常關(guān)鍵。本發(fā)明W目信當(dāng)提取時(shí)間增加時(shí)，可能影響所獲提取物隨時(shí)間的穩(wěn)定性和效力的其他組分也會(huì)被從胡桃中提取出來(lái)。令人驚訝地，本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明第一方面獲得的胡桃分離提取物保持了同時(shí)抗真菌、抗細(xì)菌和抗病毒的性質(zhì)，并且是隨時(shí)間穩(wěn)定的。因此，本發(fā)明還提供一種用于獲得根據(jù)本發(fā)明第一方面定義的胡桃分離提取物的方法。本發(fā)明的發(fā)明人將胡桃醌的穩(wěn)定性評(píng)估為所述提取步驟v)中所用時(shí)間的函數(shù)。從下表1可看出，步驟v)中所用的提取時(shí)間越長(zhǎng)，活性成分胡桃醌隨時(shí)間的穩(wěn)定性越低。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>從表l顯示的結(jié)果可看出，當(dāng)步驟v)中的提取時(shí)間增加時(shí)，最終提取物中的胡桃醌的含量會(huì)下降，且所述胡桃醌提取物在制備后隨時(shí)間的穩(wěn)定性也會(huì)下降。令人驚訝地，用少于10分鐘的提取時(shí)間獲得的胡桃醌提取物在其制備后的最長(zhǎng)至24個(gè)月的時(shí)間內(nèi)保持穩(wěn)定，因此其效力不依賴(lài)于其制備后的時(shí)間，而是依賴(lài)于提取所用的時(shí)間，參見(jiàn)圖2和試驗(yàn)編號(hào)1。有利地，根據(jù)本發(fā)明的第一方面獲得的胡桃醌分離提取物具有兩年以上的穩(wěn)定性，大大超過(guò)現(xiàn)有技術(shù)中公開(kāi)的胡桃提取物的若干天的穩(wěn)定性。所述本發(fā)明的胡桃分離提取物可用于治療皰療、水痘、皮膚或指曱上的真菌，通常用于治療皮膚疾病。本發(fā)明的提取物的給藥可通過(guò)局部、腹膜內(nèi)或口服的形式進(jìn)行，例如以液體、霜?jiǎng)┗蚱瑒┑男问剑潜景l(fā)明的提取物的其他應(yīng)用形式也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明的發(fā)明人還研究了試驗(yàn)l到5(表l)中的根據(jù)本發(fā)明第一方面的分離提取物對(duì)于細(xì)菌、真菌和病毒的效力。參見(jiàn)下表2。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>綠膿假單孢菌(Pseudomonasaeruginosa)ATCC9027(+)(+)(+)(+)(+)黑曲霉(Aspergillusniger)ATCC16404(+)(+)(+)(+)(+)白色念珠菌(Candidaalbicans)ATCC10231(+)(+)(+)(+)(+)1型單純皰療病毒HSV-1(+*)(+*)(+*)(+*)(+*)6葡萄球菌ATCC6538(+)(-)(-)(-)(-)綠膿假單孢菌ATCC9027(+)(-)(-)(-)(-)黑曲霉ATCC16404(+)(-)(-)(-)(-)白色念珠菌ATCC10231(+)(+)(+)(+)(+)1型單純皰滲病毒HSV-1(+*)(-*)(-*)(-*)(-*)12葡萄球菌ATCC6538(+)(-)(-)(-)(-)綠膿假單孢菌ATCC9027(+)(-)(-)(-)(-)黑曲霉ATCC16404(+)(-)(-)(-)(-)白色念珠菌ATCC10231(+)(+)(+)(+)(+)9<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>腳注(+)抑制生長(zhǎng)；(-)不抑制生長(zhǎng)；(+*)在DR(骨肉瘤)細(xì)胞培養(yǎng)物中和人類(lèi)肌皮成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)物中抑制HSV-1病毒的復(fù)制；(-*)在DR(骨肉瘤)細(xì)胞培養(yǎng)物中和人類(lèi)肌皮成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)物中不抑制HSV-1病毒的復(fù)制；從前表顯示的數(shù)據(jù)可看出當(dāng)提取時(shí)間增加時(shí)，提取物隨制備后的時(shí)間而效力降低。所示結(jié)果表明，根據(jù)本發(fā)明第一方面的胡桃分離提取物在其制備后的最長(zhǎng)至24個(gè)月的時(shí)間內(nèi)保持了對(duì)細(xì)菌、真菌和病毒的效力，且所述效力依賴(lài)于提取步驟中所用的時(shí)間(試驗(yàn)1)。因此,根據(jù)本發(fā)明的第四方面，本發(fā)明還提供了可用于制備治療病毒、真菌和細(xì)菌疾病的藥物的胡桃分離提取物。本發(fā)明還涉及一種含有根據(jù)本發(fā)明第一方面的提取物的組合物，及其用于制備治療病毒、真菌和細(xì)菌疾病的藥物的用途。下文的一些細(xì)胞毒性研究表明根據(jù)本發(fā)明第一方面的提取物適用于人類(lèi)。一般毒性研究在大鼠和小鼠體內(nèi)對(duì)根據(jù)本發(fā)明第一方面的胡桃分離提取物(以下簡(jiǎn)稱(chēng)為提取物)進(jìn)行了毒理學(xué)評(píng)估，其中對(duì)大鼠和小鼠用不同濃度的提取物進(jìn)行胃內(nèi)給藥。使用胃內(nèi)給藥是為了對(duì)急性感染和病毒栽體中的皰滲病毒都能產(chǎn)生全身性效力。因此，該提取物可被認(rèn)為是一種天然抗病毒的化學(xué)治療藥物。然而，因?yàn)樗鎏崛∥锏慕o藥是通過(guò)全身性吸收的方式，可以預(yù)料其會(huì)表現(xiàn)一定的毒性，這也在對(duì)大鼠和小鼠的亞急性研究中得到證實(shí)。然而必須指出，即使當(dāng)以最大劑量進(jìn)行胃內(nèi)給藥時(shí)，致死結(jié)果的頻率也非常低，從而無(wú)法確定平均致死劑量(LDs。等)。所述提取物既沒(méi)有物質(zhì)累積性質(zhì)，也沒(méi)有對(duì)骨髓細(xì)胞的誘變作用。關(guān)于一般毒性，有必要指出對(duì)CNS的作用和對(duì)幼年動(dòng)物的體重增長(zhǎng)的抑制作用。涉及薄壁組織器官的毒性特別地包括肝臟薄壁組織細(xì)胞的衰退和腎臟排泄功能的改變。脾臟和腎上腺質(zhì)量的減少似乎反映了30天的長(zhǎng)期處理所導(dǎo)致的應(yīng)激狀態(tài)(參見(jiàn)表1.1，5%乙醇)。同樣，已確定了導(dǎo)致大鼠中正常指標(biāo)的最小偏差的提取物劑量，這在傳統(tǒng)上被當(dāng)作最大耐受劑量，即給藥0.5ml濃度為0.5%的溶液持續(xù)30天。對(duì)于人類(lèi)，這相當(dāng)于250-500ml所述濃度的溶液。實(shí)際上，如人們所熟知的，在臨床條件下試驗(yàn)了1/100-1/10的所述最小毒性劑量或"無(wú)活性，，劑量，即每天2.5-5.0ml濃度為0.5%的溶液。因此，對(duì)經(jīng)皮膚施用數(shù)次的不同濃度的提取物溶液的毒理學(xué)評(píng)估的結(jié)果表明，劑量為0.2ml濃度為0.5%的溶液的制劑不會(huì)導(dǎo)致明顯的中毒作用。然而，在組織學(xué)上表現(xiàn)出表皮上角質(zhì)化過(guò)程的某種程度的加強(qiáng)，但是表皮細(xì)胞層沒(méi)有增加且對(duì)皮膚自身(真皮)沒(méi)有炎癥作用。50°/。的提取物溶液導(dǎo)致皮膚出現(xiàn)明顯的角化過(guò)度、干燥和硬化。在組織學(xué)上，伴隨角質(zhì)化過(guò)程的加強(qiáng)，還導(dǎo)致表皮中細(xì)胞層的增加，但是在這種情況下仍然沒(méi)有觀察到炎癥反應(yīng)。在這個(gè)劑量下，沒(méi)有觀察到(通過(guò)吸收的)全身性毒性跡象。在使用小鼠進(jìn)行的兩周長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)中，小鼠接受了約4倍體積的同濃度的溶液(5%和50°/。的溶液)。使用5%提取物溶液時(shí)，已經(jīng)可以見(jiàn)到經(jīng)組織學(xué)確認(rèn)的皮膚反應(yīng)(以脫落和增厚的方式)，沒(méi)有炎癥反應(yīng)。還可在觀察到粒細(xì)胞生成反應(yīng)，表現(xiàn)為嚙齒類(lèi)特有的由造血"淋巴細(xì)胞"類(lèi)型轉(zhuǎn)變?yōu)?粒細(xì)胞"類(lèi)型。濃度為5%的制劑沒(méi)有導(dǎo)致直腸末端黏膜發(fā)生任何破壞性或炎性變化。在這個(gè)劑量下，未觀察到一般的全身性毒性作用的癥狀。將特別高濃度(50%)的提取物用于皮膚會(huì)伴隨全身性毒性作用。還觀察到該制劑的特征性質(zhì)，尤其是在不對(duì)皮膚和粘膜產(chǎn)生炎性作用的情況下刺激角質(zhì)化和粒細(xì)胞生成(粒細(xì)胞增多)。當(dāng)使用經(jīng)皮下途徑的給藥模擬對(duì)所述制劑的強(qiáng)烈經(jīng)皮吸收時(shí)，全身性作用最特征性標(biāo)志是導(dǎo)致發(fā)生CNS抑制現(xiàn)象的神經(jīng)毒性。以所確定的小鼠中平均毒性劑量和其他指標(biāo)為基礎(chǔ)(動(dòng)物體內(nèi)TD50-0.4ml濃度為17±3.8%的溶液，TD16-0.4ml濃度為10%的溶液，TD84-0.4邁l濃度為35°/的溶液)，使用劑量為1.0-1.5ml/Kg的濃度為5%的溶液作為大鼠局部皮膚給藥時(shí)的近似非毒性劑量。濃度為5-50%的提取物溶液用于皮膚時(shí)，既沒(méi)有局部刺激性，也沒(méi)有致過(guò)敏(變應(yīng)原性)作用?？共《净钚匝芯勘狙芯康哪繕?biāo)是檢驗(yàn)用于制造制劑的根據(jù)本發(fā)明第一方面的胡桃分離提取物(以下簡(jiǎn)稱(chēng)為提取物)，以證明其在細(xì)胞培養(yǎng)物中存在抗病毒活性(抗皰療)。下列細(xì)胞被作為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ褪褂霉侨饬龅倪B續(xù)細(xì)胞系DR(獲自佐治亞特危感染國(guó)家中心病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)室)和人類(lèi)肌皮來(lái)源的成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng)物(流產(chǎn)材料，獲自佐治亞衛(wèi)生部產(chǎn)科學(xué)、婦科學(xué)和圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)研究所)。病毒材料I型單純皰滲病毒，獲自俄羅斯聯(lián)邦衛(wèi)生部病毒制劑研究所病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)室保藏室(莫斯科)。為了進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)，使用了交叉評(píng)估方法，包括對(duì)不同濃度的提取物(1:5至1:80)和不同稀釋度的病毒的(1:10至1:10，000，000,傳統(tǒng)上表示為-l.0lg到-7.0lg)同時(shí)分析。此方法能夠顯示所述制劑和劑量之間相互作用的更細(xì)微差另'j,也能夠顯示最大程度保護(hù)細(xì)胞免于所述病毒感染的最優(yōu)化變量(ZdrodovskiP-F"SokolovM丄一Rukovodstvopolaboratornoydiagnostikevirusnikhirikketsioznikhbolezney[Manualofanalyticaldiagnosticofviralandrickettsiandiseases]M.，"Meditsina"，1965,c396)。對(duì)所獲結(jié)果的分析使得可以無(wú)疑義地?cái)喽ㄓ糜谥圃焖鲋苿┑脑撝参锾崛∥锬軌蛞种艱R細(xì)胞培養(yǎng)物(骨肉瘤)和人類(lèi)肌皮成纖維細(xì)胞中皰瘆單純病毒的復(fù)制。當(dāng)以1:5的稀釋度使用該提取物時(shí)，這種作用更加強(qiáng)烈(考慮到可能對(duì)細(xì)胞有細(xì)胞毒性作用，沒(méi)有特意對(duì)純提取物進(jìn)行試驗(yàn))。對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物中所述提取物和病毒進(jìn)行交叉評(píng)估的方法能夠證明該提取物的保護(hù)性抗皰滲作用，并發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)感染過(guò)程的某些規(guī)律。抗皰滲活性研究在體外研究中，根據(jù)第一方面的胡桃分離提取物(以下簡(jiǎn)稱(chēng)為提取物)顯示出在人類(lèi)成纖維細(xì)胞和DR骨肉瘤的細(xì)胞培養(yǎng)物中有抗單純皰滲病毒(HSV)的保護(hù)性作用，從而使得有必要在小白鼠體內(nèi)研究該提取物的抗病毒作用。為此目的，應(yīng)用小白鼠皰滲感染模型來(lái)研究動(dòng)物死亡率和病毒復(fù)制指數(shù)。就抗體保護(hù)、吞噬作用和干擾素活性對(duì)所述生物體的免疫系統(tǒng)狀態(tài)進(jìn)行了評(píng)估。也對(duì)懷孕雌鼠體內(nèi)皰滲病毒的胚胎毒性和誘變作用以及抗氧化保護(hù)的狀態(tài)進(jìn)行了分析。在用該提取物處理的被感染小鼠中對(duì)所有這些參數(shù)進(jìn)行了研究。研究的結(jié)果有力地證明，該提取物可被成功地用于選擇性地中和皰滲病毒的免疫抑制作用。我們可以為該提取物所表現(xiàn)出的性質(zhì)提出多種不同的機(jī)制，但是最可接受的是如下機(jī)制在皰滲病毒存在的情況下，在所述生物體內(nèi)發(fā)生了激素失衡，并且發(fā)生全身性缺氧和細(xì)胞缺氧，然后這些破壞性過(guò)程導(dǎo)致中毒。所有這些現(xiàn)象要么是源于已經(jīng)存在的免疫病理作用，要么是由它們本身導(dǎo)致的。換句話說(shuō)，在皰滲病毒存在的情況下，至少產(chǎn)生了全部所述四種因素激素失衡、組織缺氧、中毒和免疫病理現(xiàn)象，它們彼此具有相互惡化的作用。所迷提取物的保護(hù)作用的機(jī)制之一是其抗氧化性質(zhì)，這有利于細(xì)胞內(nèi)水平(包括免疫細(xì)胞)的呼吸的重建。相信該提取物通過(guò)其含有的活性生理物質(zhì)(抗生素、胡桃醌和類(lèi)黃酮；微量元素；維生素C、E、PP的復(fù)合物)產(chǎn)生這些作用，這有利于加強(qiáng)所述免疫活性細(xì)胞的功能活性。因此，該提取物可以被毫無(wú)疑問(wèn)地歸類(lèi)于可有效用于預(yù)防和治療病毒和細(xì)菌感染、化膿性和炎性疾病、以及需要加強(qiáng)代謝和適應(yīng)過(guò)程的其他病理狀態(tài)的活性天然藥物。權(quán)利要求1.胡桃分離提取物，特征在于所述提取物由包括下述步驟的方法獲得i)采集未成熟胡桃果實(shí)作為原料；ii)制備用于提取的原料；iii)冷凍前一步驟中制備的原料；iv)干燥；v)在不到10分鐘的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行提?。籿i)過(guò)濾；和vii)最終包裝。2.根據(jù)權(quán)利要求1的分離提取物，其中所述制備用于提取的原料的步驟(ii)包括機(jī)械清洗、水洗和風(fēng)干。3.根據(jù)權(quán)利要求1的分離提取物，其中所述冷凍步驟(iii)包括將胡桃果實(shí)置于溫度為-18到-20iC的冷凍室中70-170小時(shí)。4.根據(jù)權(quán)利要求1的分離提取物，其中所述干燥步驟(iv)包括首先剝?nèi)±鋬龅暮业耐鈿?-3mm的薄層，然后將它們干燥至濕度低于10%。5.根據(jù)權(quán)利要求1的分離提取物，其中所述提取步驟(v)包括將在干燥步驟中獲得的干燥物分成小片，并加入1/2到1/5重量/體積比的醇，然后進(jìn)行時(shí)間少于10分鐘的提取；6.根據(jù)權(quán)利要求5的分離提取物，其中所述醇是乙醇(96W。7.根據(jù)權(quán)利要求5的分離提取物，其中所述醇為1/3的重量/體積比。8.根據(jù)權(quán)利要求5的分離提取物，其中所述提取時(shí)間少于5分鐘。9.根據(jù)權(quán)利要求5的分離提取物，其中所述提取時(shí)間少于2分鐘。10.根據(jù)權(quán)利要求1的分離提取物，其中所述提取物過(guò)濾步驟在一個(gè)初級(jí)凈化過(guò)濾器中進(jìn)行，然后在一個(gè)細(xì)孔除菌過(guò)濾器中進(jìn)行。11.獲得權(quán)利要求i-io任一項(xiàng)的胡桃分離提取物的方法。12.含有權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)的胡桃分離提取物的組合物，用作藥物。13.根據(jù)權(quán)利要求12的組合物，其特征在于以液體、片劑或霜?jiǎng)┑男问浇o藥。14.根據(jù)權(quán)利要求l-10任一項(xiàng)的提取物用于制備治療細(xì)菌、真菌和病毒疾病的藥物的用途。15.根據(jù)權(quán)利要求14的提取物的用途，所述用途為用于制備治療皰滲、水痘，以及皮膚和指曱上的真菌的藥物。全文摘要本發(fā)明涉及胡桃分離提取物，在其用于制備治療病毒、真菌和細(xì)菌疾病的藥物的時(shí)間內(nèi)具有高效性和高穩(wěn)定性，特征在于所述提取物通過(guò)包括下述步驟方法獲得i)采集未成熟胡桃果實(shí)作為原料；ii)制備用于提取的原料；iii)冷凍前一步驟中制備的原料；iv)干燥；v)用少于10分鐘的時(shí)間進(jìn)行提??；vi)過(guò)濾；和vii)最終包裝。本發(fā)明還涉及用所述提取物用于制備治療細(xì)菌、真菌和病毒疾病的藥物的應(yīng)用，以及涉及含有所述提取物的組合物。文檔編號(hào)A61K36/52GK101495128SQ200780027981公開(kāi)日2009年7月29日申請(qǐng)日期2007年5月29日優(yōu)先權(quán)日2006年6月2日發(fā)明者V·麥切列斯申請(qǐng)人:哈丁頓商業(yè)有限公司