專利名稱：：白細(xì)胞介素-1α免疫誘導(dǎo)預(yù)防動脈粥樣硬化的自身抗體的制作方法白細(xì)胞介素-la免疫誘導(dǎo)預(yù)防動脈粥樣硬化的自身抗體0001本申請要求2006年5月15日提交的序列號60/S00，029的權(quán)益，并通過引用將其引入。
背景技術(shù)：
：0002白細(xì)胞介素-lcx(IL-loO被很好地表征為炎癥的主要介質(zhì)(primarymediator),并且其在炎癥相關(guān)疾病中的作用已在幾個動物模型中得到暗示。在普通人群中已經(jīng)相對較高頻率地檢測到抗白細(xì)胞介素(IL)-la的人IgG自身抗體(autoantibodies,aAb)。事實上，據(jù)報道20%以上的表面健康的人具有高度特異性的IL-lcxaAb。雖然對攜帶天然IL-laaAb的男性的觀察已表明內(nèi)源性IL-lcx的中和性在降低炎癥相關(guān)疾病——如動脈粥樣硬化或風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎——進展風(fēng)險中的作用，但是，這些研究沒有排除在這些個體內(nèi)存在其它的自身抗體，并且，一直難以建立因果關(guān)系，這些抗IL-la抗體的生理作用還沒有明確確定。附圖簡述0003圖lC57BL/6小鼠三次皮下注射在明礬中的IL-la-PPD偶聯(lián)物后，在第56天在C57BL/6小鼠中抗IL-la自身抗體的形成()。對照小鼠僅用在明礬中的PPD免疫(■)。0004圖2抗體依賴性補體介導(dǎo)的EL-4細(xì)胞殺傷。EL-4細(xì)胞與連續(xù)稀釋的小鼠抗小鼠IL-lct多克隆抗血清一起溫育。死亡細(xì)胞與活細(xì)胞的比例與血清濃度成正比。人抗小鼠IL-la單克隆抗體作為陽性對照。與幼鼠血清溫育或僅與培養(yǎng)基溫育作為兩個陰性對照。發(fā)明詳述0005ApoE-A小鼠具有工程改造的脂類運輸缺陷(lipidtransportdefect),該脂類運輸缺陷導(dǎo)致在主動脈中動脈粥樣硬化樣斑塊的快速發(fā)展。這些小鼠被認(rèn)為是人類動脈粥樣硬化最有說服力的模型(mostcompellingmodel)，因為它們是高膽固醇血的，并自然地發(fā)展成動脈病變。ApoE-A小鼠也因此被廣泛用作研究動脈粥樣硬化和進行治療的模型系統(tǒng)。0006本發(fā)明提供了IL-la的抗體中和的動物模型，其可通過例如對八(^-/-小鼠進行抗化-101的免疫來獲得。所有被免疫的動物會產(chǎn)生抗IL-la的IgGaAb，其會保持在高水平。來源于免疫小鼠血清的IL-laaAb抑制IL-la與IL-la反應(yīng)性鼠T細(xì)胞系NOB-l的結(jié)合，并在體內(nèi)中和IL-la(而不是IL-l(3誘導(dǎo)的IL-6)。0007被喂食高脂肪飲食的對照ApoE-Z-小鼠在主動脈里形成動脈粥樣硬化樣病變。該病變的標(biāo)志是巨噬細(xì)胞浸潤、壞死性核和具有不同量細(xì)胞外基質(zhì)的平滑肌細(xì)胞增殖。與此相比，進行抗化-1<1免疫的八0￡-/-動物，其動脈粥樣硬化病變的水平已大幅度降低，并產(chǎn)生驚人的對動脈粥樣硬化進展的抗性。在免疫前已具有脂肪紋(動脈粥樣硬化病變的開始)的小鼠中，用IL-la免疫可以阻止動脈粥樣硬化病變的發(fā)展，以使血管床保持基本健康。0008在通過免疫產(chǎn)生的內(nèi)源性IL-la自身抗體存在的情況下，八(^-/-小鼠得以良好預(yù)防動脈粥樣硬化相關(guān)疾病(如外周缺血性心臟病、冠狀動脈疾病、腦血管疾病和外周動脈的疾病(peripheralarterialdisease))。因此，本發(fā)明提供了精致的動物模型(elegantanimalmodel)，其支持我們以前的臨床觀察具有天然IL-loiaAb的男性與不具有中和性IL-laaAb的男性相比，具有降低的動脈粥樣硬化相關(guān)心臟疾病發(fā)病率。0009由于已經(jīng)發(fā)現(xiàn)天然產(chǎn)生IL-laaAb的人發(fā)生動脈粥樣硬化的風(fēng)險較小，所以很可能天然IL-lcxaAb可在中和血管內(nèi)皮細(xì)胞中的IL-la有害炎癥作用方面發(fā)揮生理作用。因此，本發(fā)明還提供了治療個體的方法，所述個體包括人類，其處于動脈粥樣硬化相關(guān)疾病(如外周缺血性心臟病、冠狀動脈疾病、腦血管疾病和外周動脈的疾病)發(fā)生的風(fēng)險下，該方法是通過誘導(dǎo)對抗這些疾病的保護性IL-la自身抗體實現(xiàn)的。在大約20^沒有明顯的健康缺陷的人群中臨床觀察到IL-1(X自身抗體，表明施用抗IL-la的中和性自身抗體不會造成健康風(fēng)險。此外，IL-la敲除小鼠也顯然是健康的，其支持了這種方法是安全的。因此，在人體內(nèi)誘導(dǎo)IL-laaAb是降低動脈粥樣硬化相關(guān)疾病的風(fēng)險和嚴(yán)重性的安全有效的方法。0010可使用本領(lǐng)域已知的任何免疫方法以在動物模型或哺乳動物(如貓、狗、綿羊、豬、山羊；優(yōu)選人類)患者中達(dá)到期望的自身抗體反應(yīng)(見下表)。<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>0011在本公開內(nèi)容中引用的所有專利、專利申請和參考文獻通過引用明確引入于此。上述公開內(nèi)容一般性地描述本發(fā)明。更加完整的理解可通過參考以下具體實施例獲得，實施例只提供用于說明目的，而不企圖限制本發(fā)明范圍。實施例1ApoE敲除小鼠0012ApoE-Z匿小鼠取自JacksonLaboratory,BarHarbor,ME。只使用雄性動物，以避免性別對血管病變發(fā)生可能的影響；此外，進行觀察IL-laaAb在動脈粥樣硬化進展中的保護作用的臨床研究，這一點，只在男性中進行。使用10周齡小鼠，喂食高膽固醇含量膳食(1.25%的膽固醇、0%的膽酯;ResearchDiets,NewBrunswick,NJ)。小鼠喂養(yǎng)該膳食IO周，然后處死。采集血樣，并灌注主動脈，分割成部分，然后按照標(biāo)準(zhǔn)方法固定或冷凍。用鼠IL-la免疫0013根據(jù)Svenson等，JImmunolMethods.2000Mar6;236(1-2):1-8所述方法，使用以0.41(w/w)的比率偶聯(lián)至結(jié)核菌素純化蛋白衍生物(PPD)的鼠IL-la免疫小鼠。在尾基部皮下注射接種小鼠。重復(fù)接種3次，相隔三周。為了分析IL-laaAb，每次注射后2周從小鼠眼眶后叢(retroorbitalplexus)取血。對照動物使用不含IL-la的PPD溶液，按相同時間表接種。實施例3分析0014小鼠IgG對IL-la的反應(yīng)按照Svenson等人，2000所述進行測定。IL-la對IgG的飽和結(jié)合分析如所述(Svenson等，JClinInvest.1993Nov;92(5):2533-9)實施。同樣的樣本在蛋白GSepharose柱和含SephadexG-75特級的柱上平行運行(Svenson等，Cytokine.1992Mar;4(2):125-33)，用以將與血清IgG結(jié)合的^I-IL-la同與血清的總結(jié)合進行比較。0015按照Svenson等，2000中所述，利用NOB-l鼠T細(xì)胞系實施細(xì)胞受體分析。IL-laRIA和IL-6ELISA也按照Svenson等，2000所述實施。0016體內(nèi)IL-6誘導(dǎo)按照Svenson等，2000所述實施。實施例4ApoE-A小鼠中天然抗IL-laaAb的缺乏0017從15只10周到10個月大的八(^-/-小鼠得到的血清都為1§0抗IL-laaAb陰性。實施例5在ApoE-A小鼠中產(chǎn)生IL-laaAb0018用偶聯(lián)至PPD的IL-loi接種四次后，所有小鼠都具有高IL-laIgGaAb效價。在僅用PPD接種的對照小鼠血清中沒有發(fā)現(xiàn)aAb。在接種后3個月，組間沒有顯著重量差異。實施例6誘導(dǎo)的IL-laaAb的表征0019在檢測到陽性小鼠接種后的2周和6周，收集血清。與血清結(jié)合的總IL-la和與IgG結(jié)合的總IL-loc之間沒有差異。Kd范圍從O.lnM到1.3nM(例如，0.1、0,15、0,2、0,25、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1,3nM)。實施例7誘導(dǎo)的抗IL-laaAb的表征0020用RIA檢測IL-laaAb?？寡骞δ芘cSvenson等，ZOOO所公開的相似。實施例8受體結(jié)合的抑制0021^I-IL-la與鼠細(xì)胞系NOB-l的結(jié)合被所有接種兩周后收集的aAb陽性血清抑制至少10X(例如，至少IO、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90或95%)，并且如Svenson等，2000所述進行檢測。aAb-陰性對照作是陰性的。實施例9IL-la的體內(nèi)中和0022代表性抗血清的中和活性按照Svenson等，2000所述檢測。數(shù)據(jù)表明，IL-laaAb在NOB-1細(xì)胞中中和IL-1a活性。實施例IO動脈粥樣硬化病變的分析0023在不同時間點殺死小鼠，對動脈粥樣硬化的程度進行評估。斑塊沉積和動脈粥樣硬化病變在主動脈根和胸腹主動脈中評定，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化方法(例如Trogan等，ProcNatlAcadSciUSA.2002Feb19;99(4):2234-9;Chaabane等，InvestRadiol.2003Aug;38(8):532-8)量化。在IL-la免疫的ApoE-A小鼠中，主動脈根動脈粥樣硬化病變區(qū)與ApoE-A對照小鼠相比，顯著降低(例如，至少IO、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90或95%)。動脈粥樣硬化病變的的發(fā)展也在用蘇丹(Sudan)IV染色的降主動脈的制品中檢測。在IL-kx免疫的ApoE-Z-小鼠的腹部主動脈中，嗜蘇丹的脂富集病變的形成與它們同窩出生的對照組相比，顯著降低(例如，至少10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85，90或95%)。同樣地，與對照相比，在IL-kx免疫的動物中，主動脈弓部分中動脈粥樣硬化病變的形成一—其用蘇木精-伊紅染色后顯現(xiàn)——顯著減少(例如，至少10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90或95%)。0024對照八？(^-/-小鼠的冠狀動脈腔面積(11^1^1area)，與對照小鼠相比顯著減少(例如，至少10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90或95%)。主動脈根的組織學(xué)分析表明八(^-/-對照的心血管內(nèi)膜中存在0068-陽性細(xì)胞，而IL-la免疫的動物沒有存在CD6S-陽性細(xì)胞。實施例11材料和方法用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)汲懂抗IL-la抗體效價0025人或鼠IL-k分別在96孔ELISA板上溫育過夜，每孔用0.5嗎/mllOO(il體積的量。板隨后用磷酸緩沖鹽溶液(phosphatebufferedsaline,PBS)+0.05%吐溫20(Tween20)洗滌4次，然后用封閉液進行飽和，所述封閉液含有在PBS+0.05%吐溫20中的1%牛血清白蛋白(bovineserumalbumin,BSA)。在室溫下，每孔j吏用200pl這種封閉緩沖液l-2小時。然后用PBS+0.050/。Tween20(PBST)再洗滌板4次。100ml連續(xù)稀釋的血清樣品(在PBST+1XBSA中1:2稀釋)隨后加入，并在室溫下溫育一小時或4'C溫育過夜。然后再次用PBST洗滌板4次。然后加入辣根過氧化物酶(Horseradishperoxidise，HRP)偶聯(lián)的抗Fc-抗體作為二抗(在具有1XBSA的PBST中1:2000稀釋，每孔加100^U，l小時，室溫)。人0.2W山羊抗人IgG-HRP在400WPBST+1XBSA中。小鼠0.5^1HRP山羊抗小鼠IgG(H+L)。然后，板再次用PBST洗滌4次。用ABTS緩沖液進行顯色反應(yīng)(coloringreaction)。ABTS緩沖液(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸，Sigma目錄號A-1888，150mg;0.1M檸檬酸，F(xiàn)isheranhydrous,目錄號A-940，500毫升；用NaOH顆粒將pH值調(diào)整到4.35，llml等分樣品被保存在-20。C、40%SDS(80gSDS溶于200mlddH20)中，并添加200mlDMF(N,N-二甲基甲酰胺))。向每個孔加IOOplABTS緩沖液。當(dāng)良好對比度可見時，通過加入100^12%草酸溶液停止反應(yīng)。然后，用ELISA讀數(shù)器在波長405nm下測量光密度。小鼠0026ApoE-/-小鼠從Jackson實驗室(BarHarbor,Maine,B6.129P2-Apoetm^7J株)獲得。Apoet"^突變純合小鼠表現(xiàn)出血漿總膽固醇水平的顯著增加，這不受年齡或性別的影響。在3月齡時，在主動脈近端發(fā)現(xiàn)脂肪紋。病變隨著年齡而發(fā)展，病變的發(fā)展伴隨脂質(zhì)減少和伸長的細(xì)胞增加，這是前動脈粥樣硬化病變更晚期的典型特征。已報道在混合的C57BL/6xl29遺傳背景上攜帶這一突變的小鼠中甘油三酯水平適度增加。老年ApoE缺陷小鼠(大于17個月)已顯示出在大腦中形成黃瘤性病變(xanthomatouslesion)，所述大腦大部分由結(jié)晶膽固醇裂隙、脂質(zhì)小球和泡沫細(xì)胞組成。在脈絡(luò)叢和腹穹窿中可見較小的黃瘤。最近的研究表明，ApoE缺陷小鼠具有對應(yīng)激的改變的反應(yīng)、受損的空間學(xué)習(xí)和記憶、改變的長時程增強和突觸損傷。C57BL/6和SCID小鼠從Harlan(Horst，荷蘭)獲得。用與PPD偶聯(lián)的IL-la和IL-ip免疫小鼠0027IL-la和IL-l(3從eBioscience(SanDiego,CA)獲得。PPD從StatensSerumInstitute(Copenhagen,Denmark)獲得。偶聯(lián)方法改編自Svenson等(SvensonM,2000)。IL-la和IL陽l卩在4。C與PPD以0.41(w/w)的比例并且在0.1W戊二醛存在下溫育48小時(IL-1/PPD二0.41)。作為對照，PPD被平行處理，但不含IL-la或IL-ip。偶聯(lián)物隨后被吸附到Al(OH)3(Rehydragel;ReheisChemical,Dublin,Ireland),以使終體積中具有1.5%的Al(OH)3。0028與明磯在室溫下溫育90分鐘。顆粒隨后用0.9XNaCl洗滌，并將其重懸在0.9^NaCl中，達(dá)到ll嗎IL-la/100nl懸液，假設(shè)70。/。IL-lot被吸附到A1(0H)3(使用^I-IL-la在實驗性研究中發(fā)現(xiàn))。IL-1(3偶聯(lián)物以同樣方式制備。對照懸液同樣地稀釋以匹配IL-la-PPD偶聯(lián)物中PPD的量。該偶聯(lián)物儲存在《C備用。實施例12C57BL/6小鼠中抗IL-la抗體反應(yīng)的產(chǎn)生0029由于免疫系統(tǒng)對自身蛋白質(zhì)如細(xì)胞因子的耐受，所以主動免疫必須打破自身耐受性。對大多數(shù)自身蛋白來說，免疫耐受是由于缺乏特異性T細(xì)胞——這是胸腺中負(fù)選擇的結(jié)果~引起的。相反，潛在的自身反應(yīng)B細(xì)胞通常存在。當(dāng)僅注射像IL-la這樣的自身蛋白時，由于缺乏T細(xì)胞的幫助，這些B細(xì)胞不會應(yīng)答。將一種外源蛋白，如PPD，與自身抗原IL-la偶聯(lián)，就提供了T細(xì)胞對B細(xì)胞刺激的幫助，因為T細(xì)胞識別PPD，導(dǎo)致受刺激的B細(xì)胞針對IL-l(x和PPD產(chǎn)生抗體。0030因此，我們用明礬中的IL-la-PPD偶聯(lián)物接種小鼠，以確保T細(xì)胞對IL-la-特異性B細(xì)胞產(chǎn)生有效的幫助。抗體效價用ELISA測定。5只小鼠的組接受用15昭偶聯(lián)至10嗎PPD的重組IL-la進行的皮下免疫，該偶聯(lián)采用與戊二醛溫育的步驟進行。IL-l(x-PPD偶聯(lián)物隨后吸附到明礬。小鼠接受三次這樣的皮下免疫，時間間隔為2周。這種免疫產(chǎn)生高效價的抗IL-l(x抗體，而用明砜中的PPD免疫的對照小鼠未能誘導(dǎo)出可檢測的抗體效價(圖l)?？笽L-lct抗體的誘導(dǎo)需要至少2次注射。在僅僅注射一次明礬中的重組IL-loi-PPD偶聯(lián)物之后，血清中檢測不到抗體反應(yīng)。但在用明礬中的重組IL-k-PPD偶聯(lián)物第三次注射后，所有接種的小鼠都產(chǎn)生抗IL-la抗體。實施例13對IL-la的主動免疫防止動脈粥樣硬化的形成0031在第0天、第14天和第28天，通過在頸部區(qū)域皮下給藥，用在氫氧化鋁中與10(igPPD(由結(jié)核分枝桿菌(M^Z^c"/oi)純化的蛋白衍生物)偶聯(lián)的15嗎鼠IL-la對ApoE敲除小鼠(6周齡)進行主動免疫。注射體積為100pl，氫氧化鋁的量為約lmg。對照小鼠進行類似處理，但是使用含有相同量的PPD和氫氧化鋁，但不包含IL-la的制品。在第0、28、42和56天，從尾靜脈血液取樣，用ELISA法測量抗IL-lot抗體反應(yīng)。首次免疫后4周，開始給小鼠動脈粥樣硬化膳食，其中食物小球包含16%脂肪、1.16。％膽固醇和0.5%膽酸，這是已知的加速動脈粥樣硬化的膳食。然后，小鼠在18周齡處以安樂死。其主動脈被移出用于肉眼和顯微鏡分析。組織學(xué)切片用蘇木精和伊紅(HE)，以及蘇丹(Sudan)染色。0032此時間點后，在雙目顯微鏡下檢查切開的主動脈，在針對IL-la主動免疫的ApoE-A小鼠中顯示出動脈粥樣硬化斑塊明顯地減少，但僅針對PPD免疫的ApoE-A對照小鼠沒有這種減少。實施例14對IL-lot的被動免疫防止動脈粥樣硬化的形成0033使用明礬中的IL-la-PPD偶聯(lián)物三次皮下注射，對C57BL/6小鼠進行對IL-la的主動免疫。56天后，采集它們的血清，并用ELISA確定抗IL-la抗體效價的產(chǎn)生。200ji1這種血清被動轉(zhuǎn)移至6周齡的ApoE敲除小鼠。每周重復(fù)這些被動血清轉(zhuǎn)移。對照ApoE-A小鼠每周被動地接受來自幼C57BL/6小鼠血清的被動轉(zhuǎn)移。從這些被動血清轉(zhuǎn)移開始，八0￡-/-小鼠被喂食動脈粥樣硬化膳食，其中食物小球含有16%脂肪、1.16%膽固醇和0.5%膽酸，用以加速動脈粥樣硬化的形成。對照ApoE-A小鼠以每周間隔被動轉(zhuǎn)移200ml來自幼C57BL/6小鼠的血清。6周后小鼠被處以安樂死，進行主動脈的肉眼分析和組織學(xué)分析。組織學(xué)分析包括橫切片的蘇木精和伊紅染色，以及蘇丹染色。0034這6周后，在雙目顯微鏡下檢查切開的主動脈，在被動轉(zhuǎn)移抗IL-la抗血清的六(^-/-小鼠中顯示出動脈粥樣硬化斑塊明顯地減少，但僅接受幼血清的ApoE-/-對照小鼠沒有這種減少。實施例15對IL-la的主動免疫保持動脈粥樣硬化沒有效果0035在第0天、第14天和第28天，通過在頸部區(qū)域皮下給藥，用在氫氧化鋁中與10嗎PPD(由結(jié)核分枝桿菌純化的蛋白衍生物)偶聯(lián)的15嗎鼠IL-la對ApoE敲除小鼠(6周齡)進行主動免疫。注射體積為IOOjil，氫氧化鋁的量為約lmg。對照小鼠進行類似的處理，但是使用含有相同量的PPD和氫氧化鋁，但不包含IL-la的制品。在第O、28、42和56天，從尾靜脈血液取樣，用ELISA法測量抗IL-la抗體反應(yīng)。首次免疫后4周，開始給小鼠動脈粥樣硬化膳食，其中食物小球包含16%脂肪、1.16%膽固醇和0.5%膽酸，這是已知的加速動脈粥樣硬化的膳食。然后，小鼠在18周齡處以安樂死。其主動脈被移出用于肉眼和顯微鏡分析。組織學(xué)切片用蘇木精和伊紅(HE)以及蘇丹染色。0036此時間點后，在雙目顯微鏡下檢查切開的主動脈，在對IL-la抗血清免疫的ApoE-A小鼠和對照ApoE-A小鼠兩者中，顯示出具有相同程度的動脈粥樣硬化斑塊。實施例16對IL-la的被動免疫保持動脈粥樣硬化沒有效果0037使用明礬中IL-la-PPD偶聯(lián)物三次皮下注射，對C57BL/6小鼠進行對IL-la的主動免疫，。56天后，采集它們的血清，并用ELISA確定抗IL-la抗體效價的產(chǎn)生。200pl這種血清被動轉(zhuǎn)移至6周齡的ApoE敲除小鼠。每周重復(fù)這些被動血清轉(zhuǎn)移。對照ApoE-Z-小鼠接受來自幼C57BL/6小鼠200|il血清轉(zhuǎn)移。從這些被動血清轉(zhuǎn)移開始，ApoE-A小鼠被喂食動脈粥樣硬化膳食，其中食物小球含有16%脂肪、1.16%膽固醇和0.5°/。膽酸，用以加速動脈粥樣硬化的形成。對照ApoE-A小鼠以每周間隔被動轉(zhuǎn)移200ml來自幼C57BL/6小鼠的血清。6周后小鼠被處以安樂死，用于主動脈的肉眼分析和組織學(xué)分析。組織學(xué)分析包括橫切片的蘇木精伊紅染色，以及蘇丹染色。0038這6周后，在雙目顯微鏡下檢査切開的主動脈，在接受抗IL-la抗血清和接受來自幼小鼠的血清的ApoE-/-小鼠中，顯示出具有相同程度的動脈粥樣硬化斑塊。實施例17ADCK-抗體依賴性補體介導(dǎo)殺傷0039使用明礬中的IL-la-PPD偶聯(lián)物三次皮下注射，對C57BL/6小鼠進行對IL-la的主動免疫。56天后，采集它們的血清，并用ELISA確定抗IL-la自身抗體效價的產(chǎn)生。熱滅活血清。50plEL-4細(xì)胞懸液被鋪入96孔板。向這些孔的每一個中加入15pl的熱滅活血清的1:2連續(xù)稀釋液。然后在37。C溫育板20分鐘。隨后將25ml鼠血清加入每個孔。在37。C下另外溫育5h后，對孔進行拍照，隨后使用臺盼藍(lán)將死細(xì)胞與活細(xì)胞區(qū)分，在計數(shù)室對細(xì)胞進行計數(shù)。0040EL-4細(xì)胞的多克隆小鼠抗小鼠IL-la抗血清介導(dǎo)的補體依賴性殺傷為濃度依賴方式。見圖2。1權(quán)利要求1.白細(xì)胞介素-1α在制備降低哺乳動物動脈粥樣硬化相關(guān)疾病的風(fēng)險和嚴(yán)重程度的藥物中的用途。2.編碼IL-la的重組病毒在制備降低哺乳動物動脈粥樣硬化相關(guān)疾病的風(fēng)險和嚴(yán)重程度的藥物中的用途。3.與IL-la化學(xué)連接的病毒樣顆粒在制備降低哺乳動物動脈粥樣硬化相關(guān)疾病的風(fēng)險和嚴(yán)重程度的藥物中的用途。4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的用途，其中所述哺乳動物選自鼠、豬、山羊、狗、貓和綿羊。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其中所述哺乳動物是小鼠，并且所述小鼠是ApoEV-。6.根據(jù)權(quán)利要求l、2或3所述的用途，其中所述哺乳動物是人。7.根據(jù)權(quán)利要求l、2或3所述的用途，其中所述動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是外周動脈疾病。8.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的用途，其中所述動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是外周缺血性心臟病。9.根據(jù)權(quán)利要求l、2或3所述的用途，其中所述動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是冠狀動脈疾病。10.根據(jù)權(quán)利要求l、2或3所述的用途，其中所述動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是腦血管疾病。11.根據(jù)權(quán)利要求l、2或3所述的用途，其中所述動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是外周動脈的疾病。12.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求3所述的用途，其中所述IL-la是重組IL-la。13.根據(jù)權(quán)利要求2或權(quán)利要求12所述的用途，其中所述重組IL-la是鼠的或人的。14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述IL-la是與載體相連的。15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，其中所述載體是結(jié)核菌素的純化蛋白質(zhì)衍生物(PPD)。16.根據(jù)權(quán)利要求l、權(quán)利要求2或權(quán)利要求3所述的用途，其中所述IL-la在佐劑存在下使用。17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的用途，其中所述佐劑是氫氧化鋁。18.ApoE-A小鼠，其用IL-la免疫。19.ApoE-A小鼠，其包括IL-la自身抗體。20.治療哺乳動物以降低動脈粥樣硬化相關(guān)疾病的風(fēng)險和嚴(yán)重程度的方法，其包括用IL-la免疫所述哺乳動物。21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述哺乳動物選自小鼠、豬、山羊、狗、貓和綿羊。22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的方法，其中所述哺乳動物是小鼠，且所述小鼠是ApoE-A。23.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述哺乳動物是人。24.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是外周動脈疾病。25.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是外周缺血性心臟病。26.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是冠狀動脈疾病。27.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是腦血管疾病。28.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是外周動脈的疾病。29.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述哺乳動物用重組IL-la免疫。30.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述重組IL-la是鼠的或人的。31.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述哺乳動物用與載體相連的IL-la免疫。32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中所述載體是結(jié)核菌素的純化蛋白質(zhì)衍生物(PPD)。33.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述哺乳動物在佐劑存在下用IL-la免疫。34.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，其中所述佐劑是氫氧化鋁。35.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述哺乳動物用編碼IL-la的重組病毒免疫。36.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述哺乳動物用與IL-la化學(xué)相連的病毒樣顆粒免疫。全文摘要本發(fā)明涉及白細(xì)胞介素-1α免疫誘導(dǎo)預(yù)防動脈粥樣硬化的自身抗體。用IL-1α免疫哺乳動物引起哺乳動物產(chǎn)生IL-1α自身抗體，可用于降低哺乳動物動脈粥樣硬化相關(guān)疾病的風(fēng)險和嚴(yán)重程度，或降低其進展。使用這種治療，可降低動脈粥樣硬化相關(guān)疾病如外周缺血性心臟病、冠狀動脈疾病、腦血管疾病和外周動脈的疾病的進展。文檔編號A61K48/00GK101448528SQ200780018614公開日2009年6月3日申請日期2007年5月15日優(yōu)先權(quán)日2006年5月15日發(fā)明者J·賽瑪?shù)律暾埲??？怂股锟萍脊?