專利名稱：用于治療動(dòng)脈粥樣硬化的肽基被動(dòng)免疫接種療法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及對(duì)載脂蛋白B的衍生物肽產(chǎn)生的新分離的人類抗體，尤其涉及用于免疫接種療法的抗體治療動(dòng)脈粥樣硬化，它們的制備方法，以及用所述抗體進(jìn)行被動(dòng)免疫接種的方法。本發(fā)明尤其包括對(duì)表1中列出的肽的氧化形式，特別是經(jīng)MDA修飾的肽所產(chǎn)生的任何一種分離的抗體，優(yōu)選與合適的載體和佐劑配合使用，作為預(yù)防和治療局部缺血心血管性疾病的免疫療法或抗動(dòng)脈粥樣硬化“疫苗”。
背景技術(shù)：
已知體液免疫的保護(hù)效果是通過結(jié)構(gòu)相關(guān)的糖蛋白一族稱為抗體來調(diào)節(jié)?？贵w通過與抗原結(jié)合啟動(dòng)它們的生物活性?？贵w與抗原結(jié)合通常對(duì)一種抗原是特異的，并且這種結(jié)合通常有高的親和性?？贵w由B-淋巴細(xì)胞產(chǎn)生。血液中含有很多不同的抗體，一種源于B-細(xì)胞克隆，一種具有獨(dú)特的結(jié)構(gòu)并對(duì)抗原有特異性?？贵w存在于B-淋巴細(xì)胞表面上，血漿中，組織間質(zhì)液中，以及分泌液如唾液和黏膜表面上的黏液中。所有抗體在整體結(jié)構(gòu)上是相似的，這解釋了物理化學(xué)特征如電荷和溶解度具有一定的相似性。所有抗體具有由兩個(gè)相同的輕鏈，每個(gè)約M千道爾頓，和兩個(gè)相同的重鏈，每個(gè)約55-70千道爾頓組成的共同的核結(jié)構(gòu)。一個(gè)輕鏈連在每個(gè)重鏈上，兩個(gè)重鏈相互連在一起。輕鏈和重鏈都包含一系列重復(fù)的同系單元，每個(gè)約有110個(gè)氨基酸殘基長，以普通的球型獨(dú)立折疊，叫做免疫球蛋白(Ig)域。兩個(gè)重鏈結(jié)合形成的抗體區(qū)是疏水性的。已知抗體，特別是單克隆抗體，當(dāng)它們處于相反的物理或化學(xué)條件時(shí)，輕鏈與重鏈的連接點(diǎn)處裂開。由于抗體含有許多半胱氨酸殘基，它們有很多半胱氨酸-半胱氨酸二硫鍵。所有免疫球蛋白(Ig)域都包含兩層具有三或四股反平行多肽鏈的折疊片。盡管它們整體相似，根據(jù)物理化學(xué)特性如尺寸、電荷和溶解度以及它們與抗原結(jié)合的性能，抗體分子可分為少量的不同類和亞類。人類的抗體分子類別為IgA，IgD，IgE，IgG和IgM。每類中的個(gè)體稱作相同的同型。IgA和IgG同型進(jìn)一步細(xì)分為亞型，稱作IgAl，IgA2及IgGl，IgG2，IgG3和IgG4。在一個(gè)同型中所有抗體的重鏈共用氨基酸序列單元的廣延區(qū)，但與屬于其它同型或亞型的抗體不同。重鏈用希臘字母表的字母對(duì)應(yīng)抗體全部的同型來命名，例如，IgA包含.α .，IgD包含.δ . (delta), IgE包含.ε · (epsilon), IgG包含.Y . (gamma)，及IgM包含.μ . (mu)重鏈。IgG，IgE和IgD以單體循環(huán)，而隱藏形式的IgA和IgM分別是二聚體或五聚體，并通過J鏈?zhǔn)蛊浞€(wěn)定。一些IgA分子以單體或三聚體存在。在每個(gè)個(gè)體中有IO8至101°個(gè)結(jié)構(gòu)不同的抗體分子，每個(gè)在它們的抗原結(jié)合部位都有唯一的氨基酸序列?？贵w中的序列差異主要存在于重鏈和輕鏈的氨基末端區(qū)稱為可變
23(V)區(qū)以區(qū)別于更穩(wěn)定的恒定(C)區(qū)里的三次短伸縮中。動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性疾病，它引起大動(dòng)脈和中等尺寸動(dòng)脈的最內(nèi)層(內(nèi)膜)變厚。它使血流量降低，并能在含有受影響脈管的器官里引起局部缺血和組織損壞。動(dòng)脈粥樣硬化是心血管性疾病包括心肌梗塞，中風(fēng)和末梢動(dòng)脈疾病的主要原因。它在西方國家是導(dǎo)致死亡的主要原因，并預(yù)計(jì)在二十年內(nèi)將變成全世界范圍內(nèi)導(dǎo)致死亡的原因。脂蛋白，主要是低密度脂蛋白(LDL)在脈管的細(xì)胞外間質(zhì)中的積聚作用引起了疾病。這些低密度脂蛋白(LDL)顆粒聚集并受到氧化變性。氧化的低密度脂蛋白是有害的，并引起血管損傷。動(dòng)脈粥樣硬化在很多方面表現(xiàn)出對(duì)這種包括炎癥和纖維化在內(nèi)的損傷的應(yīng)答。1989年I^linski與其合作者在人類中識(shí)別出對(duì)氧化的低密度脂蛋白產(chǎn)生的循環(huán)自身抗體。這一觀察表明動(dòng)脈粥樣硬化可能是由對(duì)氧化的脂蛋白產(chǎn)生的免疫反應(yīng)所引起的一種自身免疫病。這時(shí)，一些實(shí)驗(yàn)室開始研究對(duì)氧化的低密度脂蛋白產(chǎn)生的抗體滴定度與心血管性疾病之間的聯(lián)系。然而，這些研究中出現(xiàn)的圖片很不清楚。對(duì)氧化的低密度脂蛋白中大量不同的抗原決定部位存在抗體，但這些抗原決定部位的結(jié)構(gòu)并不知道。于是“氧化的低密度脂蛋白抗體”一詞是指不同抗體的未知混合物，而并非一個(gè)特定的抗體。T細(xì)胞-非依賴性IgM抗體比T-細(xì)胞依賴性IgG抗體更常見。對(duì)氧化的低密度脂蛋白產(chǎn)生的抗體在患心血管性疾病的病人和健康對(duì)比者中均出現(xiàn)。雖然有一些早期研究報(bào)道了氧化的低密度脂蛋白抗體滴定度與心血管性疾病之間的聯(lián)系，其余的研究沒有找到這種關(guān)聯(lián)。這些研究的主要缺點(diǎn)是用于測定抗體滴定度的ELISA測試使用氧化的低密度脂蛋白顆粒作為配體。低密度脂蛋白組合物在不同個(gè)體中是不同的，氧化修飾的程度很難控制與評(píng)估，并且不能測定對(duì)氧化的低密度脂蛋白顆粒中不同抗原決定部位產(chǎn)生的抗體的水平。某種程度上，由于技術(shù)問題，用現(xiàn)有的技術(shù)評(píng)價(jià)對(duì)氧化的低密度脂蛋白產(chǎn)生的抗體響應(yīng)作用迄今為止還是很困難的，然而，如果用完好的氧化的低密度脂蛋白顆粒不可能產(chǎn)生清晰的并可重現(xiàn)的疫苗成份。另一方面研究對(duì)血管壁中氧化的低密度脂蛋白產(chǎn)生的自身免疫反應(yīng)可能在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展方面起著重要作用，使動(dòng)物對(duì)自身氧化的低密度脂蛋白產(chǎn)生免疫。支持這一方法的思想是如果利用傳統(tǒng)的免疫接種技術(shù)加強(qiáng)對(duì)氧化的低密度脂蛋白產(chǎn)生的自身免疫反應(yīng)，將導(dǎo)致血管炎癥加重且動(dòng)脈粥樣硬化加重。為驗(yàn)證這種假設(shè)，用同種氧化的低密度脂蛋白使兔子免疫，然后用高膽固醇食物喂養(yǎng)動(dòng)物3個(gè)月而誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化。然而，與原始的假設(shè)相反，用氧化的低密度脂蛋白的免疫接種具有減少了約50%的動(dòng)脈粥樣硬化的保護(hù)效果。在隨后的高膽固醇膳食與血管囊狀損傷相結(jié)合產(chǎn)生更具攻擊性斑塊的研究中也獲得了類似的結(jié)果。與我們的研究同時(shí)，一些其它實(shí)驗(yàn)室也報(bào)道了類似的觀察結(jié)果。匯集現(xiàn)有的數(shù)據(jù)清楚地表明，存在防止動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展的免疫反應(yīng)，并且這些免疫反應(yīng)包括對(duì)氧化的低密度脂蛋白產(chǎn)生的自身免疫。這些觀察也說明了開發(fā)一種免疫療法或“疫苗”用來治療人類基于動(dòng)脈粥樣硬化的心血管性疾病的可能性。一種方法是自身的低密度脂蛋白通過暴露于例如銅中而被氧化之后，用其對(duì)個(gè)體進(jìn)行免疫。然而，由于不知道在氧化的低密度脂蛋白中哪種結(jié)構(gòu)負(fù)責(zé)誘發(fā)保護(hù)性免疫，以及是否氧化的低密度脂蛋白也可以包含能導(dǎo)致相反免疫反應(yīng)的抗原決定部位，使這種方法變得復(fù)雜化。
識(shí)別氧化的低密度脂蛋白中的抗原決定部位在以下幾個(gè)方面很重要首先，一個(gè)或幾個(gè)這些抗原決定部位可能負(fù)責(zé)激活抗致動(dòng)脈粥樣化免疫應(yīng)答，在用氧化的低密度脂蛋白進(jìn)行免疫的動(dòng)物身上可觀察到這一點(diǎn)。因此含有這些抗原決定部位的肽提供了開發(fā)出用于人類的免疫療法或“動(dòng)脈粥樣硬化疫苗”的可能性。進(jìn)而，可用它們來治療在人類中逐步擴(kuò)展的動(dòng)脈粥樣硬化。其次，含有識(shí)別的抗原決定部位的肽可用于開發(fā)ELISAs，它能檢測出針對(duì)氧化的低密度脂蛋白中特定結(jié)構(gòu)產(chǎn)生的抗體。這樣的ELISAs將比目前使用氧化的低密度脂蛋白顆粒作抗原的ELISAs更精確更可靠。它還可以分析對(duì)氧化的低密度脂蛋白中不同的抗原決定部位產(chǎn)生的免疫應(yīng)答與心血管性疾病之間的聯(lián)系。美國專利5，972，890涉及用肽診斷動(dòng)脈粥樣硬化。所述美國專利提供的技術(shù)原理上是一種放射物理診斷形式。肽序列被放射性標(biāo)記并被注入血流中。如果這個(gè)肽序列與在載脂蛋白B中存在的序列相同，它將連接到為載脂蛋白B存在的受體的組織上。在脈管中，這在所有動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的上面。于是可以測定脈管壁中的放射性濃度，例如，用Y照相方法。因此該技術(shù)是放射物理診斷方法，它基于被放射性標(biāo)記了的肽序列進(jìn)入存在于動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中它們正常的組織受體中，并利用外部放射性分析對(duì)其進(jìn)行檢測。它是識(shí)別動(dòng)脈粥樣硬化斑塊直接的分析方法。它需要給病人施加放射性化合物。公開的研究成果O^linski等，1995，和George等，1998)表明對(duì)氧化的低密度脂蛋白產(chǎn)生的免疫接種作用削減了動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展。這表明對(duì)氧化的低密度脂蛋白產(chǎn)生的免疫反應(yīng)通常具有防護(hù)效果。然而，在此給出的結(jié)果令人吃驚的是并非總是這樣。例如，用肽#10，45，154，199和240的混合物進(jìn)行免疫接種，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展加劇。用其它肽序列如肽序列#1，和30-34進(jìn)行的免疫接種對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展根本沒效果。結(jié)果令人吃驚是因?yàn)?，它們?yōu)閷?duì)氧化的低密度脂蛋白產(chǎn)生的免疫反應(yīng)是能防止發(fā)展，還是促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展，還是根本沒有效果取決于它們針對(duì)于氧化的低密度脂蛋白中的哪種結(jié)構(gòu)這一事實(shí)提供了依據(jù)。這些發(fā)現(xiàn)使研發(fā)出能分離出保護(hù)的免疫反應(yīng)活性的免疫接種方法成為可能。而且，它們顯示如果所用顆粒含有能引起致動(dòng)脈粥樣化免疫反應(yīng)的高水平結(jié)構(gòu)，用完整氧化的低密度脂蛋白進(jìn)行的免疫接種可能具有有害的效果。本發(fā)明的技術(shù)是基于完全不同的原理和方法。根據(jù)權(quán)利要求1，本發(fā)明涉及對(duì)載脂蛋白B氧化片斷產(chǎn)生的抗體，這種抗體用于對(duì)心血管性疾病的免疫接種。作為主動(dòng)免疫接種的替代，利用上述已識(shí)別的肽，用預(yù)先制備的針對(duì)相同的肽產(chǎn)生的抗體進(jìn)行被動(dòng)免疫接種是極有可能的?？梢再x予這種抗體希望的特性，例如有關(guān)特異性和交叉反應(yīng)性，同型，親和性和血漿半衰期。隨著單克隆抗體技術(shù)(Milstein和Kehler,1975 Nature, 256 :495-7)的出現(xiàn)，開發(fā)具有預(yù)定特性抗體的可能性已變得很顯然。這一技術(shù)使用鼠雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生大量相同的，但是鼠的抗體。實(shí)際上，使用鼠單克隆抗體來治療例如癌癥開始了大量臨床前和臨床試驗(yàn)。但是，由于抗體并非源自人類，病人的免疫系統(tǒng)將它們識(shí)別為外來物，并對(duì)它們產(chǎn)生抗體。因此，鼠抗體的功效和血漿半衰期降低，并經(jīng)常由外來抗體引起過敏性的副作用，從而阻礙了成功治療。為解決這些問題，采用一些方法以減少特定的有治療潛能抗體的鼠成分。第一種方法包括制造所謂嵌合抗體的技術(shù)，其中抗體的鼠可變區(qū)轉(zhuǎn)化成人恒定區(qū)，產(chǎn)生主要是人類的抗體(Neuberger等，1985，Nature 314:268-70)。進(jìn)一步改良該方法，開發(fā)出人源化抗體，其中接觸抗原的鼠抗體區(qū)，即所說的互補(bǔ)性決定區(qū)(CDRs)轉(zhuǎn)化成人類抗體構(gòu)架。這種抗體幾乎完全是人類的，當(dāng)向病人給藥時(shí)，很少會(huì)引起有害的抗體反應(yīng)。一些嵌合或人源化抗體已經(jīng)注冊為治療藥物并且現(xiàn)在在各種指標(biāo)中廣泛使用(Borrebaeck和Carlsson，2001，Curr. Opin. Pharmacol. 1 :404-408)。如今也可用重組技術(shù)產(chǎn)生完全的人類抗體。使用包括十億不同抗體的典型大庫。與以前使用嵌合或人源化的例如鼠抗體技術(shù)相反，本技術(shù)并不依賴于動(dòng)物的免疫接種產(chǎn)生特定抗體。替代的，重組物庫包含大量預(yù)先制備的抗體變異體，對(duì)于任何一種抗原庫可能有至少一種特定的抗體。因而，使用這樣的庫，問題變成了一個(gè)，尋找?guī)熘幸呀?jīng)存在的特定結(jié)合物，而并非通過免疫接種產(chǎn)生。為了在庫中以有效的方式找到良好的結(jié)合物，已經(jīng)發(fā)明了各種系統(tǒng)，其中表型即抗體或抗體片斷被連接到它的基因型即編碼基因上。最常用的這樣的系統(tǒng)叫做噬菌體顯示系統(tǒng)，其中抗體片斷在絲狀噬菌體顆粒表面與噬菌體覆蓋蛋白融合時(shí)被表達(dá)，顯示，同時(shí)攜帶遺傳信息編碼顯示的分子(McCafferty等人，1990，Nature348 552-554)?？梢酝ㄟ^與可懷疑的抗原結(jié)合，選擇能顯示對(duì)特殊抗原有特異性的抗體片斷的噬菌體。分離出的噬菌體可被放大，并且基因編碼選出抗體的可變區(qū)，可選擇性地轉(zhuǎn)化成其它抗體形式，如全長免疫球蛋白，并用現(xiàn)有技術(shù)中已知的合適的載體和宿主細(xì)胞以高量表達(dá)。在噬菌體顆粒上表現(xiàn)出的抗體特異性形式可能不同。最常用的形式是Fab(Griffiths 等人，1994. EMBO J. 13 :3245-3260)和單鏈(scFv) (Hoogenboom 等人，1992，JMol Biol. 227 :381-388)，兩者都包括抗體的可變抗原結(jié)合區(qū)。單鏈形式由通過柔性接頭連接到輕鏈可變區(qū)(VL)上的重鏈可變區(qū)(VH)組成(US 4，946，778)。在用作分析試劑或治療劑之前，表現(xiàn)出的抗體特異性被轉(zhuǎn)化成可溶形式，如Fab或scFv及分析的那些。在后續(xù)步驟中，被識(shí)別出具有需要特征的抗體片斷還可以被轉(zhuǎn)化成其它形式如全長抗體。最近出現(xiàn)了一種在抗體庫中生成變體的新技術(shù)(W098/32845，Soderlind等，2000,Nature Bio Technol. 18 :852-856)。出自這個(gè)庫的抗體片斷都有相同的構(gòu)架區(qū)，只是它們的CDRs不同。由于構(gòu)架區(qū)是生殖系序列，預(yù)計(jì)來自這個(gè)庫或類似庫的抗體用相同的技術(shù)產(chǎn)生的免疫原性特別低(Soderlind等人，2000，Nature BioTechnol. 18 :852-856)。預(yù)計(jì)這種特性對(duì)于治療抗體，大大降低了病人對(duì)給藥抗體產(chǎn)生抗體的風(fēng)險(xiǎn)，從而減少了過敏性，出現(xiàn)封閉性抗體和使抗體有較長血漿半衰期的風(fēng)險(xiǎn)。來自重組物庫的一些抗體現(xiàn)在已進(jìn)入臨床，并預(yù)計(jì)未來將提供治療性藥物。因而，當(dāng)遇到開發(fā)用于人類的治療抗體挑戰(zhàn)時(shí)，現(xiàn)有技術(shù)使人們認(rèn)識(shí)到不能使用以前的雜交瘤技術(shù)，而應(yīng)使用現(xiàn)代的重組物庫技術(shù)(Soderlind等人，2001，Comb.Chem. &High Throughput Screen. 4 :409-416)。實(shí)現(xiàn)將識(shí)別的肽(PCT/SE02/00679)，并且是本發(fā)明的整體，能用作抗原產(chǎn)生具有預(yù)定特性的完全人類抗體。與以前的技術(shù)(US6，225, 070)相反，抗原結(jié)構(gòu)即本發(fā)明使用的肽確定為與用于治療抗體的靶序列特別相關(guān)(PCT/SE02/00679)。本發(fā)明中，抗體來自抗體庫，不需要免疫接種脂蛋白缺乏的老鼠以產(chǎn)生鼠抗體(US 6，225，070)。此外，產(chǎn)生的抗體完全是人類的，并且當(dāng)向病人給藥時(shí)，預(yù)計(jì)不會(huì)產(chǎn)生任何不希望的免疫學(xué)反應(yīng)。使用的肽，且以前已識(shí)別(PCT/SE02/00679)如下表 1
26
A.高IgG，有MDA-差異Pll. FLDTVYGNCSTHFTVKTRKGP25. PQCSTHILQffLKRVHANPLLP74. VISIPRLQAEARSEILAHWS
B.高IgM，無MDA-差異
P 40.P 68.P 94.P 99.P 100P 102P 103P 105
P 177
C.高IgG，無MDA差異P143. IALDDAKINFNEKLSQLQTYP210. KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH
D.NHS/AHP, IgG-ak〉2，有 MDA-差異
KLVKEALKESQLPTVMDFRK
LKFVTQAEGAKQTEATMTFK
DGSLRHKFLDSNIKFSHVEK
KGTyrGLSGQRDPNTGlRLNGE
RLNGESNLRFNSSYLQGTNQ
SLTSTSDLQSGIIKNTASLK
TASLKYENYELTLKSDTNGK
DMTFSKQNALLRSEYQADYE
MKVKIIRTIDQMQNSELQWP
Pl.eeemlenvslvcpkdatrfkP 129.GSTSHHLVSRKSISAALEHKP 148.IENIDFNKSGSSTASV^IQN V ■ . . ■ ■ ■'. .............. .P 162.IREVTQRLNGEIQALELPQKP 252,EVDVLTKYSQPEDSIjPFFEE. NHS/AHP, IgM-ak >2，有MDA-差異P 301.HTFLIYITELLKKLQSTTVMP 30；LLDIANYtM EQIQDDCTGDEP 31.CTGDEDVTYKlKRVIGlNIMeQP 32.GNMGQTMEQLTPELKSSILKP 33.SSILKCVQSTKPSLMIQKAAP 34.IQKAAIQALRKMEPKDKDQEP 100.RLNGESNLRFNSSYLQGTNQP 107.SLNSHGLELISIADILGTDKINP 149.WIQNVDTKVQIftIQIQEKLQP 169.T^SDWWTLAAKNtTDFZVECjP 236.EATLQRIYSLWEHSfKNHLXiF. NHS/AHP, IgG-ak <0. 5，無MDA-差異P 10.ALLVPPETEEAKQVLFLDTV
P 45.IEIGLEGKGf^FtLEALFGK
P Hi.SGASMKLTTNGRFREHNAKF
P 154.NLIGDFEVAEKINAFRAKVH
P 199.GHSVLTAKGM ALFGEGKAEF
P 222.FKSSVITLNTNAELFNQSDI
ρ 240.FPDLGQEVALNANTKNQKIR或一種或多種這些肽的活性部位。在上面的表1中，下面是適合的(A)對(duì)經(jīng)MDA修飾的肽產(chǎn)生高水平的IgG抗體的片段(n = 3)，(B)產(chǎn)生高水平的IgM抗體的片段，但自然的和經(jīng)MDA修飾的肽之間無差異(n =9)，(C)產(chǎn)生高水平的IgG抗體的片斷，但自然的和經(jīng)MDA修飾的肽之間無差異(n =2)，(D)對(duì)經(jīng)MDA修飾的肽產(chǎn)生高水平的IgG抗體的片斷，并且在NHP樣品池中的抗體至少是AHP樣品池中抗體的兩倍(n = 5)，(E)對(duì)經(jīng)MDA修飾的肽產(chǎn)生高水平的IgM抗體的片斷，并且在NHP樣品池中的抗體至少是AHP樣品池中抗體的兩倍(n = 11)，以及(F)產(chǎn)生高水平的IgG抗體的片斷，但完整的與經(jīng)MDA修飾的肽之間無差異，但在AHP樣品池中的抗體至少是NHP樣品池中抗體的兩倍(n = 7)。發(fā)明概述本發(fā)明涉及使用針對(duì)至少一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的至少一種分離的人類抗體或其抗體片斷制造藥物組合物，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療動(dòng)脈粥樣硬化。另外，本發(fā)明涉及這些抗體的重組物制備，以及本發(fā)明涉及利用氧化的載脂蛋白B片斷，特別是上述的片斷作為抗原，產(chǎn)生這樣的抗體進(jìn)行被動(dòng)免疫接種的方法。本發(fā)明利用分離的抗體片斷庫生成針對(duì)氧化的特別是經(jīng)MDA修飾的Apo BlOO肽的特定人類抗體片斷。已識(shí)別的具有所需特性的抗體片斷于是可以復(fù)原成全長人體免疫球蛋白，為治療目的使用。本發(fā)明的特征參考下面帶編號(hào)的段落，進(jìn)一步對(duì)本發(fā)明進(jìn)行描述1.針對(duì)至少一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的至少一種分離的人類抗體或抗體片斷在制備通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物組合物中的應(yīng)用。2.根據(jù)第1段所述的應(yīng)用，其中氧化片斷選自以下組中的一種或多種FLDTVYGNCSTHFTVKTRKGPQCSTHILQffLKRVHANPLLVISIPRLQAEARSEILAHWSKLVKEALKESQLPTVMDFRK
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LKFVTQAEGAKQTEATMTFK
DGSLRHKFLDSNIKFSHVEK
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DMTFSKQNALLRSEYQADYE
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CTCDEDYITKIKRVIGNMGQ
GNMGQTMEQLTPELKSSILK
SSILKCVQSTKPSLMIQKAA
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FKSSVITLNTNAELFNQSDI
FPDLGQEVALNANTKNQKIR,
或其活性部位。
3.根據(jù)第1-2段所述的應(yīng)用，其中用丙二醛氧化片斷。
4.根據(jù)第1-2段所述的應(yīng)用，其中用銅氧化片斷。
5.根據(jù)第1-4段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括選自下列核酸序列組中的重鏈可變區(qū)(Vh)
GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAATAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTCAGTAGGTACTACTACGGACCATCTTTCTACTTTGACTCCTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 1)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCGGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCCGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTATCGGGTGTTAGTTGGAATGGCAGTAGGACGCACTATGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGCGGCTAGGTACTCCTACTACTACTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 3)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGCTATTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATCAGTGGTAGTGGTCGTAGGACATACTACGCAGACTCCGTGCAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGC CTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGATTGGTCTCCTATGGTTCGGGGAGTTTCGGTTTTGACTACGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 5)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGTTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAACTCTTGGTGGTAGTGGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAAGTTAGGGGGGCGATCCCGATATGGGCGGTGGCCCCGCCAATTTGACTACTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC (SEQ. ID. NO. 7)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATCAGTGGCCGTGGGGGTAGTTCCTACTACGCAGACTCCGTGAGGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGACTTTCCTACAGCTATGGTTACGAGGGGGCCTACTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 9)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTGGTCGTTTCATTTACTACGCAGACTCAATGAAGGGCCGCTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTACGAGGCTCCGGAGAGGGAGCTACTTCTGGGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ. ID. NO. 11)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGAACGTATTGGATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTAGCAGTAGCAGTAATTACATATTCTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGACTCAGACGGAGCAGCTGGTACGGGGGGTACTGGTTCGACCCCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ.ID. NO. 19)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCAACTACATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGC AAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTAGGCCGGTATAACTGGAAGACGGGGCATGCTTTTGATATCTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ.ID. NO. 21)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCCGTGACTACTACGTGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTAGTGGTAGTGGGGGTAGGACATACTACGCAGACTCCGTGGAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCATGTATTACTGTGCCAGAGTATCCGCCCTTCGGAGACCCATGACTACAGTAACTACTTACTGGTTCGACCCCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA (SEQ. ID. NO. 23)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCCGCTATTAGTGGTAGTGGTAACACATACTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGCCTCCCACCGTATATTAGGTTATGCTTTTGATATCTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ. ID. NO. 25)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTAGTGTTGGTGGACATAGGACATATTATGCAGATTCCGTGAAGGGCCGGTCCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCACGGATACGGGTGGGTCCGTCCGGCGGGGCCTTTGACTACTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ. ID. NO. 27)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATCCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGGCTCACAAATATTTTGACTGGTTATTATACCTCAGGATATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA (SEQ. ID. NO. 29)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGTTCTTGGATGAGTTGGGTCCGCCAGGCT CCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTAGGGAACTACGGTTTCTACCACTACATGGACGTCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ.ID. NO. 31)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGCTATTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAAT
31TAAACGGTTACGATTCGGCTGGACCCCTTTTGACTACTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ.ID. NO. 33)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTCAATAGCAAAAAGTGGTATGAGGGCTACTTCTTTGACTACTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ.ID. NO. 35)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTACTAGTAGTAATTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTCAAGAAGTATAGCAGTGGCTGGTACTCGAATTATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ. ID. NO. 37).6.根據(jù)第1-4段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括選自下列核酸序列組中的輕鏈可變區(qū)(Vl)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGGTCCAACATTGGGAATAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAACAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTG ATTATTTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTCATTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 2)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAAATAATGCTGTAAACTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGGAATGATCGGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTCAGACCTGGGGCACTGGCCGGGGGGTATTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 4)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCAGCTCCAATATCGGAAGTAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACTACAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAGTGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 6)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGAATAACTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGTAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAGTCATTGGCTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 8)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGGAATATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGGAATATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTTAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAACCTGGGATGACAGCCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 10)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGCGGTGAGTCTGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGTAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 12)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGGAATAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGGAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTCATTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 20)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGGACCTACAACATTGGAAATAATTATGTATCGTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACATCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGTCAGGCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 22)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGGAGCTCCAACATTGGGAATAGTTATGTCTCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGGAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGGATGGGATGACACCCTGCGTGCTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 24)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCCGCTCCAACATCGGGAGAAATGCTGTTAGTTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGCTAACAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGGCAGCCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCC(SEQ. ID. NO. 26)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAACACCAACATTGGGAAGAACTATGTATCTTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGCTAATAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCGTCATGGGATGCCAGCCTGAATGGTTGGGTATTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 28)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCACCTCCAACATTGGGAAGAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCT GACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGCCAGCCTCAGTGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 30)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAGGCAGCTCAAACATCGGAAAAAGAGGTGTAAATTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAGAAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCTACATGGGATTACAGCCTCAATGCTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 32)CAGTCTGTTCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAAATAATGGTGTAAACTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAACAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGCGTGGTTGGCTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 34)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGGAATAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGTCTGAGTGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 36)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAGCATTGGGAATAATTTTGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGACAATAATAAGCGACCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 38)7.根據(jù)第1-6段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括選自下列核酸序列組中的重鏈可變區(qū)(VH)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAATAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGA AGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTCAGTAGGTACTACTACGGACCATCTTTCTACTTTGACTCCTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 1)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCGGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCCGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTATCGGGTGTTAGTTGGAATGGCAGTAGGACGCACTATGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGCGGCTAGGTACTCCTACTACTACTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 3)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGCTATTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATCAGTGGTAGTGGTCGTAGGACATACTACGCAGACTCCGTGCAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGATTGGTCTCCTATGGTTCGGGGAGTTTCGGTTTTGACTACTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 5)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCA
34GCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGTTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAACTCTTGGTGGTAGTGGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAAGTTAGGGGGGCGATCCCGATATGGGCGGTGGCCCCGCCAATTTGACTACTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC (SEQ. ID. NO. 7)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATCAGTGGCCGTGGGGGTAGTTCCTACTACGCAGACTCCGTGAGGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGACTTTCCTACAGCTATGGTTACGAGGGGGCCTACTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 9)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTGGTCGTTTCATTTACTACGCAGACTCAATG AAGGGCCGCTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTACGAGGCTCCGGAGAGGGAGCTACTTCTGGGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 11) GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGC
AGCCTCTGGATTCACCTTTAGAACGTATTGGATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTC
TCATCTATTAGCAGTAGCAGTAATTACATATTCTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAA
TTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGACTCA
GACGGAGCAGCTGGTACGGGGGGTACTGGTTCGACCCCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ.
ID. NO. 19)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCAACTACATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTAGGCCGGTATAACTGGAAGACGGGGCATGCTTTTGATATCTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ.ID. NO. 21)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCCGTGACTACTACGTGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTAGTGGTAGTGGGGGTAGGACATACTACGCAGACTCCGTGGAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCATGTATTACTGTGCCAGAGTATCCGCCCTTCGGAGACCCATGACTACAGTAACTACTTACTGGTTCGACCCCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA (SEQ. ID. NO. 23)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCCGCTATTAGTGGTAGTGGTAACACATACTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGCCTCCCACCGTATATTAGGTTATGCTTTTGATATCTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ. ID. NO. 25)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCT CCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTAGTGTTGGTGGACATAGGACATATTATGCAGATTCCGTGAAGGGCCGGTCCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCACGGATACGGGTGGGTCCGTCCGGCGGGGCCTTTGACTACTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ.ID. NO. 27)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATCCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGGCTCACAAATATTTTGACTGGTTATTATACCTCAGGATATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA (SEQ. ID. NO. 29)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGTTCTTGGATGAGTTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTAGGGAACTACGGTTTCTACCACTACATGGACGTCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ. ID. NO. 31)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGCTATTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAATTAAACGGTTACGATTCGGCTGGACCCCTTTTGACTACTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ.ID. NO. 33)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGG GGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATCTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTCAATAGCAAAAAGTGGTATGAGGGCTACTTCTTTGACTACTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ.ID. NO. 35)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTC TCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTACTAGTAGTAATTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTCAAGAAGTATAGCAGTGGCTGGTACTCGAATTATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ. ID. NO. 37)與至少一種選自下列核酸序列組中的輕鏈可變區(qū)相結(jié)合CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGGTCCAACATTGGGAATAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCAT
36CTATGGTAACAACAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTCATTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 2)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAAATAATGCTGTAAACTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGGAATGATCGGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTCAGACCTGGGGCACTGGCCGGGGGGTATTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 4)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCAGCTCCAATAATCGGAAGTAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACTACAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAGTGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 6)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGAAATAACTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGTAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAGTCATTGGCTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT (SEQ. ID. NO. 8)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGGAATAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGGAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTTAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAACCTGGGATGACAGCCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 10)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGCGGTGAGTCTGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGTAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 12)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGGAATAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGGAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTCATTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 20)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGGACCTACAACATTGGAAATAATTATGTATCGTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACATCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGTCAGGCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 22)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGGAGCTCCAACATTGGGAATAGTTATGTCTCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGGAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGGATGGGATGACACCCTGCGTGCTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 24)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCCGCTCCAACATCGGGAGAAATGCTGTTAGTTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGCTAACAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGGCAGCCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCC(SEQ. ID. NO. 26)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAACACCAACATTGGGAAGAACTATGTATCTTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGCTAATAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCGTCATGGGATGCCAGCCTGAATGGTTGGGTATTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 28)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCACCTCCAACATTGGGAAGAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGCCAGCCTCAGTGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 30)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAGGCAGCTCAAACATCGGAAAAAGAGGTGTAAATTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAGAAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCTACATGGGATTACAGCCTCAATGCTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 32)CAGTCTGTTCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAAATAATGGTGTAAACTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAACAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGCGTGGTTGGCTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 34)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGGAATAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTC CCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGTCTGAGTGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 36)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAGCATTGGGAATAATTTTGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGACAATAATAAGCGACCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 38)
8.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAATAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTCAGTAGGTACTACTACGGACCATCTTTCTACTTTGACTCCTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 1)和輕鏈可變區(qū)(Vl)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGGTCCAACATTGGGAATAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAACAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTCATTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 2).9.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCGGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCCGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTATCGGGTGTTAGTTGGAATGGCAGTAGGACGCACTATGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAG CCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGCGGCTAGGTACTCCTACTACTACTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 3)和輕鏈可變區(qū)(Vl)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAAATAATGCTGTAAACTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGGAATGATCGGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTCAGACCTGGGGCACTGGCCGGGGGGTATTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 4)10.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGCTATTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATCAGTGGTAGTGGTCGTAGGACATACTACGCAGACTCCGTGCAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGATTGGTCTCCTATGGTTCGGGGAGTTTCGGTTTTGACTACTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 5)和輕鏈可變區(qū)(Vl)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCAGCTCCAATATCGGAAGTAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACTACAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAGTGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 6)
11.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGTTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAACTCTTGGTGGTAGTGGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAAC AGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAAGTTAGGGGGGCGATCCCGATATGGGCGGTGGCCCCGCCAATTTGACTACTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC (SEQ. ID. NO. 7)和輕鏈可變區(qū)(VL)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGAAATACTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGTAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAGTCATTGGCTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 8)12.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATCAGTGGCCGTGGGGGTAGTTCCTACTACGCAGACTCCGTGAGGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGACTTTCCTACAGCTATGGTTACGAGGGGGCCTACTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 9)和輕鏈可變區(qū)(Vl)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGGAATAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGGAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTTAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAACCTGGGATGACAGCCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 10)13.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGA AGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTGGTCGTTTCATTTACTACGCAGACTCAATGAAGGGCCGCTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTACGAGGCTCCGGAGAGGGAGCTACTTCTGGGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCAGC(SEQ.ID. NO. 11)和輕鏈可變區(qū)(VJCAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGCGGTGAGTCTGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGTAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 12)
40
14.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGAACGTATTGGATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTAGCAGTAGCAGTAATTACATATTCTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGACTCAGACGGAGCAGCTGGTACGGGGGGTACTGGTTCGACCCCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA SEQ.ID. NO. 19)和輕鏈可變區(qū)(VJCAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAGCTCCAACATTGGGAATAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGGAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTCATTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 20)15.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCAACTTACATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCC AGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTAGGCCGGTATAACTGGAAGACGGGGCATGCTTTTGATATCTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ.ID. NO. 21)和輕鏈可變區(qū)(VJCAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGGACCTACAACATTGGAAATAATTATGTATCGTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACATCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGTCAGGCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 22)16.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCCGTGACTACTACGTGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTAGTGGTAGTGGGGGTAGGACATACTACGCAGACTCCGTGGAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCATGTATTACTGTGCCAGAGTATCCGCCCTTCGGAGACCCATGACTACAGTAACTACTTACTGGTTCGACCCCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA (SEQ. ID. NO. 23)和輕鏈可變區(qū)(Vl)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGGAGCTCCAACATTGGGAATAGTTATGTCTCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGGAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGGATGGGATGACACCCTGCGTGCTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 24)
17.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCCGCTATTAGTGGTAGTGGTAACACATACTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGCCTCCCACCGTATATTAGGTTATGCTTTTGATATCTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ. ID. NO. 25)和輕鏈可變區(qū)(Vl)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCCGCTCCAACATCGGGAGAAATGCTGTTAGTTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGCTAACAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGGCAGCCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCC(SEQ. ID. NO. 26)18.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTAGTGTTGGTGGACATAGGACATATTATGCAGATTCCGTGAAGGGCCGGTCCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCACGGATACGGGTGGGTCCGTCCGGCGGGGCCTTTGACTACTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ. ID. NO. 27)和輕鏈可變區(qū)(VJ CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCAACACCAACATTGGGAAGAACTATGTATCTTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGCTAATAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCGTCATGGGATGCCAGCCTGAATGGTT GGGTATTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 28)19.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATCCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTG CCGTGTATTACTGTGCGAGGCTCACAAATATTTTGACTGGTTATTATACCTCAGGATATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA (SEQ. ID. NO. 29)和輕鏈可變區(qū)(VL)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCACCTCCAACATTGGGAAG AATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATGGTAACAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGCCAGCCTCAGTGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 30)20.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGTTCTTGGATGAGTTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTC ATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATT CCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTAGGG AACTACGGTTTCTACCACTACATGGACGTCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ. ID. NO. 31)和輕鏈可變區(qū)(VL)CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCT GGAGGCAGCTCAAACATCGGAAAAAGAGGTGTAAATTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCAT CTATGGTAACAGAAATCGGCCCTCAGGGGTCCCT GACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTG GCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCTACATGGGATTACAGCCTCAATGCTTGGGT GTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 32)21.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGC AGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGCTATTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTC TCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACA ATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAAT TAAACGGTTACGATTCGGCTGGACCCCTTTTGACTACTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ. ID. NO. 33)和輕鏈可變區(qū)(VJCAGTCTGTTCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGTTCT GGAAGCAGCTCCAACATCGGAAATAATGGTGTAAACTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCAT CTATGGTAACAACAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGG CCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGCGTGGTTGGCTG TTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 34)22.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGC AGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTC TCATCCATTAGTAGTAGTAGTAGTTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAA TTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTCA ATAGCAAAAAGTGGTATGAGGGCTACTTCTTTGACTACTGGGGCCAGGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(SEQ. ID. NO. 35)和輕鏈可變區(qū)(VJCAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATC TCCTGCTC TGGAAGCAGCTCCAACATTGGGAATAATTATGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCA TCTATGGTAACAGCAATCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTG GCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGTCTGAGTGGTTGGGT GTTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 36)23.根據(jù)第7段所述的應(yīng)用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCA GCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTC
43ATCCATTAGTACTAGTAGTAATTACATATACTACGCAGACTCAGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATT CCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTCAAG AAGTATAGCAGTGGCTGGTACTCGAATTATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGTACACTGGTCACCGTGAGCTCA(S EQ. ID. NO. 37)和輕鏈可變區(qū)(VJCAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCCTGCTCT GGAAGCAGCTCCAGCATTGGGAATAATTTTGTATCCTGGTATCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCAT CTATGACAATAATAAGCGACCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGG CCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTTGGGTG TTCGGCGGAGGAACCAAGCTGACGGTCCTAGGT(SEQ. ID. NO. 38)24.針對(duì)至少一種apo BlOO的氧化片斷產(chǎn)生的抗體，包括選自下列核酸序列組中的重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 1，SEQ. ID. NO. 3，SEQ. ID. NO. 5，SEQ. ID. NO. 7，SEQ. ID. NO. 9，SEQ. ID. NO. 11，SEQ. ID. NO. 19，SEQ. ID. NO. 21，SEQ. ID. NO. 23，SEQ. ID. NO. 25，SEQ. ID. NO. 27， SEQ. ID. NO. 29，SEQ. ID. NO. 31，SEQ. ID. NO. 33，SEQ. ID. NO. 35，SEQ. ID. NO. 3725.針對(duì)至少一種apo BlOO的氧化片斷產(chǎn)生的抗體，包括選自下列核酸序列組中的輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 2，SEQ. ID. NO. 4，SEQ. ID. NO. 6，SEQ. ID. NO. 8，SEQ. ID. NO. 10，SEQ. ID. NO. 12，SEQ. ID. NO. 20，SEQ. ID. NO. 22，SEQ. ID. NO. 24，SEQ. ID. NO. 26，SEQ. ID. NO. 28， SEQ. ID. NO. 30，SEQ. ID. NO. 32，SEQ. ID. NO. 34，SEQ. ID. NO. 36，SEQ. ID. NO. 3826.針對(duì)至少一種apo BlOO的氧化片斷產(chǎn)生的抗體，包括選自下列核酸序列組中的重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 1，SEQ. ID. NO. 3，SEQ. ID. NO. 5，SEQ. ID. NO. 7，SEQ. ID. NO. 9，SEQ. ID. NO. 11，SEQ. ID. NO. 19，SEQ. ID. NO. 21，SEQ. ID. NO. 23，SEQ. ID. NO. 25，SEQ. ID. NO. 27， SEQ. ID. NO. 29，SEQ. ID. NO. 31，SEQ. ID. NO. 33，SEQ. ID. NO. 35，SEQ. ID. NO. 37與選自下列核酸序列組中的輕鏈可變區(qū)相結(jié)合SEQ. ID. NO. 2，SEQ. ID. NO. 4，SEQ. ID. NO. 6，SEQ. ID. NO. 8，SEQ. ID. NO. 10，SEQ. ID. NO. 12，SEQ. ID. NO. 20，SEQ. ID. NO. 22，SEQ. ID. NO. 24，SEQ. ID. NO. 26，SEQ. ID. NO. 28， SEQ. ID. NO. 30，SEQ. ID. NO. 32，SEQ. ID. NO. 34，SEQ. ID. NO. 36，SEQ. ID. NO. 3827.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 1和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 228.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 3和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 4
29.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 5和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 630.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 7和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 831.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(VH)SEQ. ID. NO. 9和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 1032.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(VH)SEQ.ID.N0.il和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 1233.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 19和輕鏈可變區(qū)(VJSEQ. ID. NO. 2034.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 21和輕鏈可變區(qū)(VJSEQ. ID. NO. 2235.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(VH)SEQ. ID. NO. 23和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 2436.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(VH)SEQ. ID. NO. 25和輕鏈可變區(qū)(Vl)
45
SEQ. ID. NO. 2637.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 27和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 2838.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 29和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 3039.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 31和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 3240.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 33和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 3441.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 35和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 3642.根據(jù)第沈段所述的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 37和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 3843.制備根據(jù)第M-42段所述的分離抗體的方法，利用片斷庫生成針對(duì)氧化的特別是經(jīng)MDA修飾的Apo B100肽產(chǎn)生的特定人類抗體片斷，其中將識(shí)別出的具有所需特征的抗體片斷復(fù)原成全長的人體免疫球蛋白，為治療目的使用。44.對(duì)根據(jù)第22段所述的分離的人類抗體進(jìn)行擴(kuò)增的方法，利用重組技術(shù)，包括利用PCR-擴(kuò)增將基因編碼選出的scFv的可變部分轉(zhuǎn)移到全長的人類IgGl載體，其中使用的引物是用來擴(kuò)增VH-片斷的引物5' VH 5' -GGT GTGCATTC CGAGGTGCAGCTGTTGGAG(SEQ. ID. NO 13)
3' VH 5' -GACGTACGACTCACCTGAGCTCACGGTGACCAG(SEQ. ID. NO 14)和用來擴(kuò)增VL-片斷的引物5' VL 5' -GGTGTGCATTCCCAGTCTGTGCTGACTCAG(SEQ. ID. NO 15)3' VL 5' -GACGTACGTTCTACTCACCTAGGACCGTCAGCTT(SEQ. ID. NO 16)45.根據(jù)第44段所述的方法，其中通過菌落PCR用下列引物識(shí)別含有帶重鏈可變區(qū)和可變輕鏈插入片斷的重鏈區(qū)和輕鏈區(qū)質(zhì)粒的菌落正向引物5‘-ATGGGTGACAATGACATC(SEQ. ID. NO 17)反向引物5‘-AAGCTTGCTAGCGTACG(SEQ. ID. NO 18)46.對(duì)哺乳動(dòng)物優(yōu)選人類進(jìn)行被動(dòng)免疫接種的方法，其中給藥一治療或預(yù)防有效量的針對(duì)至少一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的分離的人類抗體，治療動(dòng)脈粥樣硬化。47.根據(jù)第46段所述的方法，氧化片斷選自以下組中的一種或多種FLDTVYGNCSTHFTVKTRKGPQCSTHILQffLKRVHANPLLVISIPRLQAEARSEILAHWSKLVKEALKESQLPTVMDFRKLKFVTQAEGAKQTEATMTFKDGSLRHKFLDSNIKFSHVEKKGTYGLSCQRDPNTGRLNGERLNGESNLRFNSSYLQGTNQSLTSTSDLQSGIIKNTASLKTASLKYENYELTLKSDTNGKDMTFSKQNALLRSEYQADYEMKVKIIRTIDQMQNSELQffPIALDDAKINFNEKLSQLQTYKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHEEEMLENVSLVCPKDATRFKGSTSHHLVSRKSISAALEHKIENlDFNKSGSSTASffIQNVIREVTQRLNGEIQALELPQKEVDVLTKYSQPEDSLIPFFEHTFLIYITELLKKLQSTTVMLLDIANYLMEQIQDDCTCDECTCDEDYITKIKRVIGNMGQGNMGQTMEQLTPELKSSILKSSILKCVQSTKPSLMIQKAAIQKAAIQALRKMEPKDKDQERLNGESNLRFNSSYLQGTNQSLNSHGLELNADILGTDKINWIQNVDTKYQIRIQIQEKLQ
TYISDffffTLAAKNLTDFAEQEATLQRIYSLffEHSTKNHLQALLVPPETEEAKQVLFLDTVIEIGLEGKGFEPTLEALFGKSGASMKLTTNGRFREHNAKFNLI⑶FEVAEKINAFRAKVHGHSVLTAKGMALFGEGKAEFFKSSVITLNTNAELFNQSDIFPDLGQEVALNANTKNQKIR,或其活性部位。48.根據(jù)第46-47段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括對(duì)apo BlOO的氧化片斷產(chǎn)生的抗體，含有選自下列核酸序列組中的重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 1，SEQ. ID. NO. 3，SEQ. ID. NO. 5，SEQ. ID. NO. 7，SEQ. ID. NO. 9，SEQ. ID. NO. 11，SEQ. ID. NO. 19，SEQ. ID. NO. 21，SEQ. ID. NO. 23，SEQ. ID. NO. 25，SEQ. ID. NO. 27， SEQ. ID. NO. 29，SEQ. ID. NO. 31，SEQ. ID. NO. 33，SEQ. ID. NO. 35，SEQ. ID. NO. 3749.根據(jù)第36-37段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括對(duì)apo BlOO的氧化片斷產(chǎn)生的抗體，含有選自下列核酸序列組中的輕鏈可變區(qū)SEQ. ID. NO. 2，SEQ. ID. NO. 4，SEQ. ID. NO. 6，SEQ. ID. NO. 8，SEQ. ID. NO. 10，SEQ. ID. NO. 12，SEQ. ID. NO. 20，SEQ. ID. NO. 22，SEQ. ID. NO. 24，SEQ. ID. NO. 26，SEQ. ID. NO. 28， SEQ. ID. NO. 30，SEQ. ID. NO. 32，SEQ. ID. NO. 34，SEQ. ID. NO. 36，SEQ. ID. NO. 3850.根據(jù)第38-39段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括對(duì)apo BlOO的氧化片斷產(chǎn)生的抗體，含有選自下列核酸序列組中的重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 1，SEQ. ID. NO. 3，SEQ. ID. NO. 5，SEQ. ID. NO. 7，SEQ. ID. NO. 9，SEQ. ID. NO. 11，SEQ. ID. NO. 19，SEQ. ID. NO. 21，SEQ. ID. NO. 23，SEQ. ID. NO. 25，SEQ. ID. NO. 27， SEQ. ID. NO. 29，SEQ. ID. NO. 31，SEQ. ID. NO. 33，SEQ. ID. NO. 3S, SEQ. ID. NO. 37與選自下列核酸序列組中的輕鏈可變區(qū)相結(jié)合SEQ. ID. NO. 2，SEQ. ID. NO. 4，SEQ. ID. NO. 6，SEQ. ID. NO. 8，SEQ. ID. NO. 10，SEQ. ID. NO. 12，SEQ. ID. NO. 20，SEQ. ID. NO. 22，SEQ. ID. NO. 24，SEQ. ID. NO. 26，SEQ. ID. NO. 28， SEQ. ID. NO. 30，SEQ. ID. NO. 32，SEQ. ID. NO. 34，SEQ. ID. NO. 36，SEQ. ID. NO. 3851.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 1和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 252.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 3和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 4
53.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 5和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 654.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 7和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 855.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 9和輕鏈可變區(qū)(VJSEQ. ID. NO. 1056.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID.N0.il和輕鏈可變區(qū)(VJSEQ. ID. NO. 1257.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 19和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 2058.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 21和輕鏈可變區(qū)(VJSEQ. ID. NO. 2259.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 23和輕鏈可變區(qū)(VJSEQ. ID. NO. 2460.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 25和輕鏈可變區(qū)(VJ
SEQ. ID. NO. 2661.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 27和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 2862.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 29和輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 3063.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 31和輕鏈可變區(qū)(VJSEQ. ID. NO. 3264.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 33和輕鏈可變區(qū)(VJSEQ. ID. NO. 3465.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 35和輕鏈可變區(qū)(VJSEQ. ID. NO. 3666.根據(jù)第50段所述的方法，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 37和輕鏈可變區(qū)(VJSEQ. ID. NO. 3867.藥物組合物包括針對(duì)至少一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的分離的人類抗體，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療動(dòng)脈粥樣硬化，其中抗體與藥物賦形劑結(jié)合存在。


具體的說明詳細(xì)參考附圖，其中
圖1顯示了由對(duì)MDA修飾的和自然的低密度脂蛋白(LDL) (A)或?qū)DA修飾的和自然的肽(B)進(jìn)行篩選得到的酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)結(jié)果。
圖2顯示了抗體克隆MDA低密度脂蛋白和自然的低密度脂蛋白的劑量反應(yīng)ELISA。
50圖3顯示了與經(jīng)MDA修飾的ApoB-IOO肽結(jié)合的洗出的抗體克隆的可變區(qū)DNA序列。 圖 4 顯示了基于從 Lars Norderhaug (1997，J. Immunol. Meth.，204 :77-87)得到的表達(dá)載體的圖解。
圖5顯示了 IgG結(jié)合到MDA修飾的和自然的低密度脂蛋白(LDL)上的ELISA結(jié)果。圖表顯示了用兔-抗-人類IgG-HRP(DAK0 P214)檢測25ng純化的IgG，在700nm處的發(fā)光結(jié)果。培養(yǎng)盤用0.5yg低密度脂蛋白/孔覆蓋。
圖6顯示了喂食高膽固醇膳食的apo E-/-小鼠在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展方面的抗體效果。 圖7顯示了喂食高膽固醇膳食的apo E-/-小鼠在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展方面的IEI-E3抗體的劑量反應(yīng)。
圖8顯示了在培養(yǎng)的人類氧化的低密度脂蛋白和自然的低密度脂蛋白的巨噬細(xì)胞中攝取的抗體效果。
圖9顯示了分離的抗體與經(jīng)MDA修飾的和自然的Ap0BlOO衍生肽的結(jié)合。 發(fā)明詳述下面以來自分離的抗體片斷庫中的人類抗體并針對(duì)ApoB 100的兩個(gè)經(jīng)MDA修飾的肽為例，但并不僅限于此，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)地描述。實(shí)施例1對(duì)經(jīng)MDA 修飾的肽 IEIGL EGKGF EPTLE ALFGK(P45,表 1)禾口 KTTKQ SFDLS VKAQY KKNKH(P210,表1)產(chǎn)牛的scFv講行詵擇。靶抗原經(jīng)化學(xué)修飾為在賴氨酸和組氨酸上攜帶丙二醛(MDA) (Malone-dialdehyde)集團(tuán)。經(jīng)修飾的肽表示為 IEI (P45)和 KTT(P210)。利用BioInvent，s n-CoDeR scFv庫完成選擇，組成和產(chǎn)生的原則已在Soderlind 等2000，Nature Bio ^Technology. 18，852-856中有所描述。簡單的，CDRs從人體免疫球蛋白基因中分離出來，并被置于固定構(gòu)架中。因此，形成的免疫球蛋白可變區(qū)的變化是六個(gè) ⑶Rs全部進(jìn)入固定構(gòu)架重組的結(jié)果。構(gòu)架區(qū)是全部的生殖系并在所有的抗體中都相同。 因此，變化只限于全是自然的且來自人類的互補(bǔ)性決定區(qū)(CDRs)。該庫包括大約2 X 101°個(gè)獨(dú)立克隆并且超過2000倍的克隆作為每次選擇的輸入量。經(jīng)過三輪完成選擇。第1輪選擇，用在 PBS(137mM NaCl, 2. 7mM KC1，4. 3mM Na2HPO4,1. 4mM KH2PO4)中濃度為 20 μ g/ml 的經(jīng)MDA修飾的靶肽1. 2ml覆蓋免疫試管(NUNC maxisorb 444202)，在+4°C顛倒攪動(dòng)一夜。 然后用TPBSB5% (5% BSA, 0. 05% Tween 20，在PBS中0. 02%疊氮化鈉)封閉試管30分鐘，并在使用前用TPBSB3% (3% BSA, 0. 05% Tween 20，在PBS中0. 02%疊氮化鈉)洗滌兩次。用來自n-CodeR 庫的約2 X IO13個(gè)CFU噬菌體在1. 8ml TPBSB3 %中在室溫下對(duì)每個(gè)靶試管孵育2小時(shí)，并顛倒性攪拌。然后，用15X;3ml TPBSB3%和2X Iml PBS洗滌試管，之后用Iml/試管的2mg/ml胰蛋白胨(Roche，109819)在室溫將結(jié)合噬菌體洗脫30分鐘。這一過程利用了在scFv-融合蛋白中的特定胰蛋白胨部位，使噬菌體從靶中釋放出來。加入 100 μ 1 A 蛋白(0. 2mg/ml, Roche, cat. 236624)使反應(yīng)停止，并用 300 μ 1 PBS，最終體積為 1.細(xì)1，洗滌免疫試管。為擴(kuò)增選出的噬菌體，Ε. Coli HB101F'細(xì)胞在10ml LB培養(yǎng)基(Merck， cat. 1. 10285)中按指數(shù)生長至OD6tltl = 0. 5，用選出并洗脫的噬菌體主要按Soderlind等人，2000，Nature BioTechnol. 18，852-856所述使細(xì)胞感染。然后通過按1/4體積加入在2. 5M Nacl中濃度為20% PEG6000,使得到的噬菌體上清液沉淀，并在+4°C孵育5小時(shí)。通過 13000 X g離心沉淀30分鐘，使噬菌體成球狀，在500 μ IPBS中使噬菌體再懸浮，并在第2輪選擇中使用。擴(kuò)增的噬菌體原料用于第2輪選擇，最終體積為1. 5ml的在PBS中5% BSA，0. 05% Tween 20，0. 02%疊氮化鈉。未經(jīng)MDA修飾的肽QXl(T7M)也參與連接物連接到未經(jīng)MDA 修飾的靶肽上的競爭。混合物在用上述抗原準(zhǔn)備好的免疫試管中孵育，除了用酪蛋白代替TPBSB3%封住試管。如第1次選擇中描述的那樣，孵育和洗滌免疫試管。然后用600μ1 IOOmM Tris-甘氨酸緩沖液，ρΗ 2. 2洗脫結(jié)合噬菌體30分鐘。另外用200 μ 1甘氨酸緩沖液洗滌試管，收集洗脫物，然后用96 μ 1 IM Tris-HCl, ρΗ 8. 0中和洗脫物。在室溫下使樣本復(fù)性1小時(shí)，并用于第3輪選擇。對(duì)于第3輪選擇，向已復(fù)性的噬菌體池中加入BSA，Tween 20和疊氮化鈉至最終濃度分別為3%，0. 05%和0. 02%。加入競爭肽，與經(jīng)MDA修飾無關(guān)的肽，以及未經(jīng)修飾的自然靶肽至濃度為1Χ10_7Μ。向覆蓋著如第1次選擇中描述的靶抗原的免疫試管中加入噬菌體混合物(1100 μ 1)，并在4°C攪拌孵育過夜。然后用3X;3ml TPBSB 3%,5X3ml PBS洗滌試管，最后用如上述第1輪選擇中描述的胰蛋白胨洗脫結(jié)合噬菌體。在含100μ g/ml氨芐青霉素，15yg/ml四環(huán)素，0. 1 %葡萄糖的LB中成指數(shù)生長的HB101F，IOml中放入每份洗脫物受感染，并在30°C在200rpm的振動(dòng)恒溫箱中隔夜生長。隔夜培養(yǎng)物用于使用Biorad微量制備試劑盒(Cat. 732 6100)微量制備質(zhì)粒DNA。 為了從表達(dá)載體上去除噬菌體基因III部分，在廠商推薦的緩沖液中使用2.5U Eag-I (New England Biolabs，cat. R050)在37°C切割0. 25 μ g質(zhì)粒DNA兩小時(shí)。然后加熱樣本在65°C 失活20分鐘，并在16°C用IU T4 DNA連接酶在30 μ 1 IX連接酶緩沖液(Gibco/BRL)中連接樣本過夜。這一過程將位于噬菌體基因III片斷相反面上的兩個(gè)feg-Ι部位連接起來， 從而產(chǎn)生了末端為6xhis tag的游離scFv。經(jīng)過連接作用后，在37°C在含有30 μ 1連接混合物，3. 6μ 1 10XREACT3原料，0. 4μ 1 IM NaCl,5y 1 H2O2的溶液中消化材料2小時(shí)， 以便破壞再次連接的噬菌體基因III片斷的克隆。20ng最終產(chǎn)物轉(zhuǎn)化成有化學(xué)反應(yīng)能力的 ToplOF'，并涂敷在500cm2 Q-tray LA-盤上(100 μ g/ml Amp，葡萄糖)，以便能為進(jìn)一步的篩選挑選單一菌落。篩洗n-CoDeR^scFv庫以得到與載脂蛋白B-100經(jīng)MDA修飾的肽結(jié)合的特定抗體片斷。 為了識(shí)別能分別區(qū)分經(jīng)MDA修飾的IEI (P45)肽與自然的IEI，及經(jīng)MDA修飾的 KTT(P210)與自然的KTT的scFv，在選出的scFv表達(dá)克隆的細(xì)菌上清液上完成篩選。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方法，在Biolnvent自動(dòng)系統(tǒng)上完成菌落挑選單一克隆，表達(dá)scFv和對(duì) 1號(hào)進(jìn)行篩選。選出分別針對(duì)經(jīng)MDA修飾的IEI和KTT肽的1088和831單一克隆，并在 100 μ 1含100 μ g氨芐青霉素/ml的LB的微量滴定盤中培養(yǎng)并表達(dá)。為對(duì)1號(hào)進(jìn)行篩選，用在覆蓋緩沖液(0. IM碳酸鈉，ρΗ 9. 5)中54pmol肽/孔， 或用經(jīng)MDA修飾的肽充當(dāng)正靶，或用相應(yīng)的未經(jīng)修飾的肽充當(dāng)非靶涂覆在白色測定盤 (Greiner 655074)上。在 ELISA 中，通過 scFv 上的 C-端 myc-tag 使用 1 μ g/ml 抗-c_myc 單克隆(9E10 Roche 1667 149)在清洗緩沖液中偵測表達(dá)的scFv。將羊抗鼠堿性磷酸酶結(jié)合體(Applied Biosystems Cat#AC32ML)稀釋25000倍使用，作為二級(jí)抗體。根據(jù)廠
52商的推薦使用 CDP-Star Ready to use with Emerald II Tropix(Applied Biosystems Cat#MS100RY)進(jìn)行發(fā)光偵測。按上面描述的方法對(duì)結(jié)合經(jīng)MDA修飾的肽但非自然肽的scFv克隆再次表達(dá)，并在發(fā)光ELISA中再次篩選(表2和圖1)。對(duì)直接涂敷的肽(IOSpmol/孔覆蓋著PBS)和更多生理靶進(jìn)行試驗(yàn)；包括經(jīng)MDA修飾和未經(jīng)MDA修飾的ApoB-IOO蛋白的低密度脂蛋白(LDL) 顆粒(lPg/孔覆蓋在PBS+lmM EDTA中)當(dāng)作靶使用。陽性克隆是那些結(jié)合氧化的低密度脂蛋白和經(jīng)MDA修飾的肽而并非自然的低密度脂蛋白或肽。將抗-His抗體(MaB050RaD) 用作偵測抗體，如上面所述的方法完成ELISA。發(fā)現(xiàn)12個(gè)IEI克隆和2個(gè)KTT克隆對(duì)于肽和低密度脂蛋白的MDA修飾形式比它們的自然形式在700nm給出三倍以上高的發(fā)光信號(hào)。為了評(píng)價(jià)scFv的劑量反應(yīng)，通過對(duì)固定量(lyg/孔)的MDA低密度脂蛋白和自然的低密度脂蛋白進(jìn)行滴定，進(jìn)一步檢測識(shí)別的克隆(圖2)。表2.篩選結(jié)果。在每步篩選步驟中針對(duì)每個(gè)靶被檢驗(yàn)克隆的號(hào)數(shù)。括號(hào)中顯示的是用百分?jǐn)?shù)表示的中靶次數(shù)。
權(quán)利要求
1.使用針對(duì)一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的至少一種分離的人類抗體或抗體片斷制造藥物組合物，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中氧化片斷選自以下FLDTVYGNCSTHFTVKTRKG PQCSTHILQffLKRVHANPLL VISIPRLQAEARSEILAHWS KLVKEALKESQLPTVMDFRK LKFVTQAEGAKQTEATMTFK DGSLRHKFLDSNIKFSHVEK KGTYGLSCQRDPNTGRLNGE RLNGESNLRFNSSYLQGTNQ SLTSTSDLQSGIIKNTASLK TASLKYENYELTLKSDTNGK DMTFSKQNALLRSEYQADYE MKVKIIRTIDQMQNSELQffP IALDDAKINFNEKLSQLQTY KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH EEEMLENVSLVCPKDATRFK GSTSHHLVSRKSISAALEHK IENlDFNKSGSSTASffIQNV IREVTQRLNGEIQALELPQK EVDVLTKYSQPEDSLIPFFE HTFLIYITELLKKLQSTTVM LLDIANYLMEQIQDDCTGDE CTCDEDYITKIKRVIGNMGQ GNMGQTMEQLTPELKSSILK SSILKCVQSTKPSLMIQKAA IQKAAIQALRKMEPKDKDQE RLNGESNLRFNSSYLQGTNQ SLNSHGLELNADILGTDKIN WIQNVDTKYQIRIQIQEKLQ TYISDffffTLAAKNLTDFAEQ EATLQRIYSLffEHSTKNHLQ ALLVPPETEEAKQVLFLDTV IEIGLEGKGFEPTLEALFGK SGASMKLTTNGRFREHNAKF NLI⑶FEVAEKINAFRAKVH GHSVLTAKGMALFGEGKAEF FKSSVITLNTNAELFNQSDIFPDLGQEVALNANTKNQIQR ；其中抗體或抗體片斷的特征在于其包括核酸序列SEQID NO 1編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 2編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :5編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :7編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :8編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :9編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO: 10編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO: 11編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 12編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO: 19編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :20編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :21編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :22編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :25編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO J6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO : 編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :30編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :31編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :32編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :33編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :34編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :35編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :36編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :37編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :38編碼的輕鏈可變
2.根據(jù)權(quán)利要求1的使用，其中載脂蛋白B的氧化片斷用丙二醛氧化或用銅氧化。
3.針對(duì)載脂蛋白B的一個(gè)氧化片斷的一種抗體或抗體片斷，其中氧化片斷選自以下 FLDTVYGNCSTHFTVKTRKG ；PQCSTHILQffLKRVHANPLL ； VISIPRLQAEARSEILAHWS ； KLVKEALKESQLPTVMDFRK ； LKFVTQAEGAKQTEATMTFK ； DGSLRHKFLDSNIKFSHVEK ； KGTYGLSCQRDPNTGRLNGE ； RLNGESNLRFNSSYLQGTNQ ； SLTSTSDLQSGIIKNTASLK ； TASLKYENYELTLKSDTNGK ； DMTFSKQNALLRSEYQADYE ； MKVKIIRTIDQMQNSELQffP ； IALDDAKINFNEKLSQLQTY ； KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH ； EEEMLENVSLVCPKDATRFK ； GSTSHHLVSRKSISAALEHK ； IENlDFNKSGSSTASffIQNV ； IREVTQRLNGEIQALELPQK ； EVDVLTKYSQPEDSLIPFFE ； HTFLIYITELLKKLQSTTVM ； LLDIANYLMEQIQDDCTCDE ； CTCDEDYITKIKRVIGNMGQ ； GNMGQTMEQLTPELKSSILK ； SSILKCVQSTKPSLMIQKAA ； IQKAAIQALRKMEPKDKDQE ； RLNGESNLRFNSSYLQGTNQ ； SLNSHGLELNADILGTDKIN ； WIQNVDTKYQIRIQIQEKLQ ； TYISDffffTLAAKNLTDFAEQ ； EATLQRLYSLffEHSTKNHLQ ； ALLVPPETEEAKQVLFLDTV ； IEIGLEGKGFEPTLEALFGK ； SGASMKLTTNGRFREHNAKF ； NLI⑶FEVAEKINAFRAKVH ； GHSVLTAKGMALFGEGKAEF ； FKSSVITLNTNAELFNQSDI ； FPDLGQEVALNANTKNQKIR ；其中抗體或抗體片斷的特征在于核酸序列SEQID NO 1編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 2編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :5編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :7編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :8編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :9編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO: 10編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO: 11編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 12編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO: 19編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :20編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :21編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :22編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :25編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO J6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO : 編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :30編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :31編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :32編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :33編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :34編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :35編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :36編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQID NO :37編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :38編碼的輕鏈可變
4.根據(jù)權(quán)利要求3的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法制備 利用片斷文庫生成針對(duì)由Apo BlOO生成的氧化的肽的特定人類抗體片斷，其中將識(shí)別出的具有要求特征的抗體片斷復(fù)原成全長的人類免疫球蛋白，為治療目的使用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的抗體或抗體片斷，其中由ApoBlOO生成的氧化的肽是MDA改性肽。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法進(jìn)行擴(kuò)增利用重組技術(shù)，包括利用PCR-擴(kuò)增將基因編碼選出的scFv的可變部分轉(zhuǎn)變成全長的人類IgGl載體，其中使用的引物是 用來擴(kuò)增VH-片斷的引物5’ VH :5’ -GGTGTGCATTCCGAGGTGCAGCTGTTGGAG(SEQ. ID. NO :13) 3’ VH :5’ -GACGTACGACTCACCTGAGCTCACGGTGACCAG(SEQ. ID. NO :14) 和用來擴(kuò)增VL-片斷的引物5’ VL :5’ -GGTGTGCATTCCCAGTCTGTGCTGACTCAG(SEQ. ID. NO :15) 3’ VL :5’ -GACGTACGTTCTACTCACCTAGGACCGTCAGCTT(SEQ. ID. NO :16)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的抗體或抗體片斷，其中通過菌落PCR用下列引物識(shí)別含有帶重鏈可變區(qū)和可變輕鏈插入片斷的重鏈區(qū)和輕鏈區(qū)質(zhì)粒的菌落正向引物5，-ATGGGTGACAATGACATC(SEQ. ID. NO :17) 反向引物:5，-AAGCTTGCTAGCGTACG(SEQ. ID. NO :18)。
8.藥物組合物包括根據(jù)權(quán)利要求3針對(duì)至少一種載脂蛋白B的氧化片斷的抗體或抗體片斷，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中抗體與藥物賦形劑結(jié)合存在。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-7的抗體，或權(quán)利要求8的藥物組合物，其中缺血性心血管病為動(dòng)脈粥樣硬化。
10.使用針對(duì)一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的至少一種分離的人類抗體或抗體片斷制造藥物組合物，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中氧化片斷為IEIGLEGKGFEPTLEALFGK其中抗體或抗體片斷的特征在于其包括核酸序列SEQ ID NO 1編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 2編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :5編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :7編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :8編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO: 19編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :20編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :21編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :22編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :25編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO J6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO : 編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :30編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :31編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :32編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :33編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :34編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :35編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :36編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :37編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :38編碼的輕鏈可變區(qū)。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的使用，其中載脂蛋白B的氧化片斷用丙二醛氧化或用銅氧化。
12.針對(duì)載脂蛋白B的一個(gè)氧化片斷的一種抗體或抗體片斷，其中氧化片斷為IEIGLEGKGFEPTLEALFGK其中抗體或抗體片斷的特征在于其包括核酸序列SEQ ID NO 1編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 2編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :5編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :7編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :8編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO: 19編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :20編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :21編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :22編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :25編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO J6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO : 編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :30編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :31編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :32編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :33編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :34編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :35編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :36編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :37編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :38編碼的輕鏈可變區(qū)。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法制備利用片斷文庫生成針對(duì)由Apo BlOO生成的氧化的肽的特定人類抗體片斷，其中將識(shí)別出的具有要求特征的抗體片斷復(fù)原成全長的人類免疫球蛋白，為治療目的使用。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的抗體或抗體片斷，其中由ApoBlOO生成的氧化的肽是MDA改性肽。
15.根據(jù)權(quán)利要求13或14的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法進(jìn)行擴(kuò)增利用重組技術(shù)，包括利用PCR-擴(kuò)增將基因編碼選出的scFv的可變部分轉(zhuǎn)變成全長的人類IgGl載體，其中使用的引物是用來擴(kuò)增VH-片斷的引物5’ VH :5’ -GGTGTGCATTCCGAGGTGCAGCTGTTGGAG(SEQ. ID. NO :13)3’ VH :5’ -GACGTACGACTCACCTGAGCTCACGGTGACCAG(SEQ. ID. NO :14)和用來擴(kuò)增VL-片斷的引物5’ VL :5’ -GGTGTGCATTCCCAGTCTGTGCTGACTCAG(SEQ. ID. NO :15)3’ VL :5’ -GACGTACGTTCTACTCACCTAGGACCGTCAGCTT(SEQ. ID. NO :16)。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的抗體或抗體片斷，其中通過菌落PCR用下列引物識(shí)別含有帶重鏈可變區(qū)和可變輕鏈插入片斷的重鏈區(qū)和輕鏈區(qū)質(zhì)粒的菌落正向引物5，-ATGGGTGACAATGACATC(SEQ. ID. NO :17)反向引物5’ -AAGCTTGCTAGCGTACG(SEQ. ID. NO :18)。
17.藥物組合物包括根據(jù)權(quán)利要求12針對(duì)其載脂蛋白B的氧化片斷的抗體或抗體片斷，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中抗體與藥物賦形劑結(jié)合存在。
18.根據(jù)權(quán)利要求10-16的抗體，或權(quán)利要求17的藥物組合物，其中缺血性心血管病為動(dòng)脈粥樣硬化。
19.使用針對(duì)一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的至少一種分離的人類抗體或抗體片斷制造藥物組合物，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中氧化片斷為GSTSHHLVSRKSISAALEHK ；其中抗體或抗體片斷的特征在于其包括核酸序列SEQ ID NO: 19編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :20編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :21編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :22編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :25編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO J6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO : 編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :30編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :31編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :32編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :33編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :34編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :35編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :36編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :37編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :38編碼的輕鏈可變區(qū)。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的使用，其中載脂蛋白B的氧化片斷用丙二醛氧化或用銅氧化。
21.針對(duì)載脂蛋白B的一個(gè)氧化片斷的一種抗體或抗體片斷，其中氧化片斷為GSTSHHLVSRKSISAALEHK ；其中抗體或抗體片斷的特征在于其包括核酸序列SEQ ID NO: 19編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :20編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :21編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :22編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :25編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO J6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO : 編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :30編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :31編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :32編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :33編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :34編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :35編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :36編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :37編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :38編碼的輕鏈可變區(qū)。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法制備利用片斷文庫生成針對(duì)由Apo BlOO生成的氧化的肽的特定人類抗體片斷，其中將識(shí)別出的具有要求特征的抗體片斷復(fù)原成全長的人類免疫球蛋白，為治療目的使用。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的抗體或抗體片斷，其中由ApoBlOO生成的氧化的肽是MDA改性肽。
24.根據(jù)權(quán)利要求22或23的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法進(jìn)行擴(kuò)增利用重組技術(shù)，包括利用PCR-擴(kuò)增將基因編碼選出的scFv的可變部分轉(zhuǎn)變成全長的人類IgGl載體，其中使用的引物是用來擴(kuò)增VH-片斷的引物5’ VH :5’ -GGTGTGCATTCCGAGGTGCAGCTGTTGGAG(SEQ. ID. NO :13)3’ VH :5’ -GACGTACGACTCACCTGAGCTCACGGTGACCAG(SEQ. ID. NO :14)和用來擴(kuò)增VL-片斷的引物5’ VL :5’ -GGTGTGCATTCCCAGTCTGTGCTGACTCAG(SEQ. ID. NO :15)3’ VL :5’ -GACGTACGTTCTACTCACCTAGGACCGTCAGCTT(SEQ. ID. NO :16)。
25.根據(jù)權(quán)利要求M的抗體或抗體片斷，其中通過菌落PCR用下列引物識(shí)別含有帶重鏈可變區(qū)和可變輕鏈插入片斷的重鏈區(qū)和輕鏈區(qū)質(zhì)粒的菌落正向引物5，-ATGGGTGACAATGACATC(SEQ. ID. NO :17)反向引物:5，-AAGCTTGCTAGCGTACG(SEQ. ID. NO :18)。
26.藥物組合物包括根據(jù)權(quán)利要求19針對(duì)其載脂蛋白B的氧化片斷的抗體或抗體片斷，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中抗體與藥物賦形劑結(jié)合存在。
27.根據(jù)權(quán)利要求19-25的抗體，或權(quán)利要求沈的藥物組合物，其中缺血性心血管病為動(dòng)脈粥樣硬化。
28.使用針對(duì)一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的至少一種分離的人類抗體或抗體片斷制造藥物組合物，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中氧化片斷為IALDDAKINFNEKLSQLQTY其中抗體或抗體片斷的特征在于其包括核酸序列SEQ ID NO: 19編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :20編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :21編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :22編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :25編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO J6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :33編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :34編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :35編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :36編碼的輕鏈可變區(qū)。
29.根據(jù)權(quán)利要求觀的使用，其中載脂蛋白B的氧化片斷用丙二醛氧化或用銅氧化。
30.針對(duì)載脂蛋白B的一個(gè)氧化片斷的一種抗體或抗體片斷，其中氧化片斷為IALDDAKINFNEKLSQLQTY其中抗體或抗體片斷的特征在于其包括核酸序列SEQ ID NO: 19編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :20編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :21編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :22編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :25編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO J6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :33編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :34編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :35編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :36編碼的輕鏈可變區(qū)。
31.根據(jù)權(quán)利要求30的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法制備利用片斷文庫生成針對(duì)由Apo BlOO生成的氧化的肽的特定人類抗體片斷，其中將識(shí)別出的具有要求特征的抗體片斷復(fù)原成全長的人類免疫球蛋白，為治療目的使用。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的抗體或抗體片斷，其中由ApoBlOO生成的氧化的肽是MDA改性肽。
33.根據(jù)權(quán)利要求31或32的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法進(jìn)行擴(kuò)增利用重組技術(shù)，包括利用PCR-擴(kuò)增將基因編碼選出的scFv的可變部分轉(zhuǎn)變成全長的人類IgGl載體，其中使用的引物是用來擴(kuò)增VH-片斷的引物5’ VH :5’ -GGTGTGCATTCCGAGGTGCAGCTGTTGGAG(SEQ. ID. NO :13)3’ VH :5’ -GACGTACGACTCACCTGAGCTCACGGTGACCAG(SEQ. ID. NO :14)和用來擴(kuò)增VL-片斷的引物5’ VL :5’ -GGTGTGCATTCCCAGTCTGTGCTGACTCAG(SEQ. ID. NO :15)3’ VL :5’ -GACGTACGTTCTACTCACCTAGGACCGTCAGCTT(SEQ. ID. NO :16)。
34.根據(jù)權(quán)利要求33的抗體或抗體片斷，其中通過菌落PCR用下列引物識(shí)別含有帶重鏈可變區(qū)和可變輕鏈插入片斷的重鏈區(qū)和輕鏈區(qū)質(zhì)粒的菌落正向引物5，-ATGGGTGACAATGACATC(SEQ. ID. NO :17)反向引物:5，-AAGCTTGCTAGCGTACG(SEQ. ID. NO :18)。
35.藥物組合物包括根據(jù)權(quán)利要求30針對(duì)其載脂蛋白B的氧化片斷的抗體或抗體片斷，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中抗體與藥物賦形劑結(jié)合存在。
36.根據(jù)權(quán)利要求觀-34的抗體，或權(quán)利要求35的藥物組合物，其中缺血性心血管病為動(dòng)脈粥樣硬化。
37.使用針對(duì)一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的至少一種分離的人類抗體或抗體片斷制造藥物組合物，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中氧化片斷為KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH其中抗體或抗體片斷的特征在于其包括核酸序列SEQ ID NO 9編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 10編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :11編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO: 12編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO 19編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :20編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :21編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQID NO :22編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :25編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQID NO J6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :33編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQID NO :34編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :35編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQID NO :36編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :37編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQID NO :38編碼的輕鏈可變區(qū)。
38.根據(jù)權(quán)利要求37的使用，其中載脂蛋白B的氧化片斷用丙二醛氧化或用銅氧化。
39.針對(duì)載脂蛋白B的一個(gè)氧化片斷的一種抗體或抗體片斷，其中氧化片斷為KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH其中抗體或抗體片斷的特征在于其包括核酸序列SEQ ID NO 9編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQID NO 10編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO 11編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQID NO: 12編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO: 19編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQID NO :20編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :21編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQID NO :22編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :25編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQID NO J6編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :33編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQID NO :34編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :35編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQID NO :36編碼的輕鏈可變區(qū)；或核酸序列SEQ ID NO :37編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :38編碼的輕鏈可變區(qū)。
40.根據(jù)權(quán)利要求39的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法制備利用片斷文庫生成針對(duì)由Apo BlOO生成的氧化的肽的特定人類抗體片斷，其中將識(shí)別出的具有要求特征的抗體片斷復(fù)原成全長的人類免疫球蛋白，為治療目的使用。
41.根據(jù)權(quán)利要求40的抗體或抗體片斷，其中由ApoBlOO生成的氧化的肽是MDA改性肽。
42.根據(jù)權(quán)利要求40或41的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法進(jìn)行擴(kuò)增利用重組技術(shù)，包括利用PCR-擴(kuò)增將基因編碼選出的scFv的可變部分轉(zhuǎn)變成全長的人類IgGl載體，其中使用的引物是用來擴(kuò)增VH-片斷的引物5’ VH :5’ -GGTGTGCATTCCGAGGTGCAGCTGTTGGAG(SEQ. ID. NO :13)3’ VH :5’ -GACGTACGACTCACCTGAGCTCACGGTGACCAG(SEQ. ID. NO :14)和用來擴(kuò)增VL-片斷的引物5’ VL :5’ -GGTGTGCATTCCCAGTCTGTGCTGACTCAG(SEQ. ID. NO :15)3’ VL :5’ -GACGTACGTTCTACTCACCTAGGACCGTCAGCTT(SEQ. ID. NO :16)。
43.根據(jù)權(quán)利要求42的抗體或抗體片斷，其中通過菌落PCR用下列引物識(shí)別含有帶重鏈可變區(qū)和可變輕鏈插入片斷的重鏈區(qū)和輕鏈區(qū)質(zhì)粒的菌落正向引物5，-ATGGGTGACAATGACATC(SEQ. ID. NO :17)反向引物:5，-AAGCTTGCTAGCGTACG(SEQ. ID. NO :18)。
44.藥物組合物包括根據(jù)權(quán)利要求39針對(duì)其載脂蛋白B的氧化片斷的抗體或抗體片斷，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中抗體與藥物賦形劑結(jié)合存在。
45.根據(jù)權(quán)利要求37-43的抗體，或權(quán)利要求44的藥物組合物，其中缺血性心血管病為動(dòng)脈粥樣硬化。
46.使用針對(duì)一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的至少一種分離的人類抗體或抗體片斷制造藥物組合物，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中氧化片斷為HTFLIYITELLKKLQSTTVM其中抗體或抗體片斷的特征在于其包括核酸序列SEQ ID NO :35編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :36編碼的輕鏈可變區(qū)。
47.根據(jù)權(quán)利要求46的使用，其中載脂蛋白B的氧化片斷用丙二醛氧化或用銅氧化。
48.針對(duì)載脂蛋白B的一個(gè)氧化片斷的一種抗體或抗體片斷，其中氧化片斷為HTFLIYITELLKKLQSTTVM其中抗體或抗體片斷的特征在于其包括核酸序列SEQ ID NO :35編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :36編碼的輕鏈可變區(qū)。
49.根據(jù)權(quán)利要求48的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法制備利用片斷文庫生成針對(duì)由Apo BlOO生成的氧化的肽的特定人類抗體片斷，其中將識(shí)別出的具有要求特征的抗體片斷復(fù)原成全長的人類免疫球蛋白，為治療目的使用。
50.根據(jù)權(quán)利要求49的抗體或抗體片斷，其中由ApoBlOO生成的氧化的肽是MDA改性肽。
51.根據(jù)權(quán)利要求49或50的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法進(jìn)行擴(kuò)增利用重組技術(shù)，包括利用PCR-擴(kuò)增將基因編碼選出的scFv的可變部分轉(zhuǎn)變成全長的人類IgGl載體，其中使用的引物是用來擴(kuò)增VH-片斷的引物5’ VH :5’ -GGTGTGCATTCCGAGGTGCAGCTGTTGGAG(SEQ. ID. NO :13)3’ VH :5’ -GACGTACGACTCACCTGAGCTCACGGTGACCAG(SEQ. ID. NO :14)和用來擴(kuò)增VL-片斷的引物5’ VL :5’ -GGTGTGCATTCCCAGTCTGTGCTGACTCAG(SEQ. ID. NO :15)3’ VL :5’ -GACGTACGTTCTACTCACCTAGGACCGTCAGCTT(SEQ. ID. NO :16)。
52.根據(jù)權(quán)利要求51的抗體或抗體片斷，其中通過菌落PCR用下列引物識(shí)別含有帶重鏈可變區(qū)和可變輕鏈插入片斷的重鏈區(qū)和輕鏈區(qū)質(zhì)粒的菌落正向引物5，-ATGGGTGACAATGACATC(SEQ. ID. NO :17)反向引物:5，-AAGCTTGCTAGCGTACG(SEQ. ID. NO :18)。
53.藥物組合物包括根據(jù)權(quán)利要求52針對(duì)其載脂蛋白B的氧化片斷的抗體或抗體片斷，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中抗體與藥物賦形劑結(jié)合存在。
54.根據(jù)權(quán)利要求46-52的抗體，或權(quán)利要求53的藥物組合物，其中缺血性心血管病為動(dòng)脈粥樣硬化。
55.使用針對(duì)至少一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的至少一種分離的人類抗體或抗體片斷制造藥物組合物，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療動(dòng)脈粥樣硬化。
56.根據(jù)權(quán)利要求55的使用，其中氧化片斷選自以下組中的一種或多種FLDTVYGNCSTHFTVKTRKGPQCSTHILQffLKRVHANPLLVISIPRLQAEARSEILAHWSKLVKEALKESQLPTVMDFRKLKFVTQAEGAKQTEATMTFKDGSLRHKFLDSNIKFSHVEKKGTYGLSCQRDPNTGRLNGERLNGESNLRFNSSYLQGTNQSLTSTSDLQSGIIKNTASLKTASLKYENYELTLKSDTNGKDMTFSKQNALLRSEYQADYEMKVKIIRTIDQMQNSELQffPIALDDAKINFNEKLSQLQTYKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHEEEMLENVSLVCPKDATRFKGSTSHHLVSRKSISAALEHKIENlDFNKSGSSTASffIQNVIREVTQRLNGEIQALELPQKEVDVLTKYSQPEDSLIPFFEHTFLIYITELLKKLQSTTVMLLDIANYLMEQIQDDCTGDECTCDEDYITKIKRVIGNMGQGNMGQTMEQLTPELKSSILKSSILKCVQSTKPSLMIQKAAIQKAAIQALRKMEPKDKDQERLNGESNLRFNSSYLQGTNQSLNSHGLELNADILGTDKINWIQNVDTKYQIRIQIQEKLQTYISDffffTLAAKNLTDFAEQEATLQRLYSLffEHSTKNHLQALLVPPETEEAKQVLFLDTVIEIGLEGKGFEPTLEALFGKSGASMKLTTNGRFREHNAKFNLI⑶FEVAEKINAFRAKVHGHSVLTAKGMALFGEGKAEFFKSSVITLNTNAELFNQSDIFPDLGQEVALNANTKNQKIR,或其活性部位。
57.根據(jù)權(quán)利要求55-56的使用，其中用丙二醛氧化片斷。
58.根據(jù)權(quán)利要求55-56的使用，其中用銅氧化片斷。
59.根據(jù)權(quán)利要求55-58的使用，其中抗體特征在于，它包括選自下列核酸序列組中的重鏈可變區(qū)(VH)(SEQ.ID.NO.1)(SEQ.ID.NO.3)(SEQ.ID.NO.5)(SEQ.ID.NO.7)(SEQ.ID.NO.9)(SEQ.ID.NO.11)(SEQ.ID.NO.19)(SEQ. ID. NO. 21)(SEQ. ID. NO. 23)(SEQ. ID. NO. 25)(SEQ. ID. NO. 27)(SEQ. ID. NO. 29)(SEQ. ID. NO. 31)(SEQ. ID. NO. 33)(SEQ. ID. NO. 35)(SEQ. ID. NO. 37)。
60.根據(jù)權(quán)利要求55-58的使用，其中抗體特征在于，它包括選自下列核酸序列組中的輕鏈可變區(qū)(SEQ. ID. NO. 2)(SEQ. ID. NO. 4)(SEQ. ID. NO. 6)(SEQ. ID. NO. 8)(SEQ. ID. NO. 10)(SEQ. ID. NO. 12)(SEQ. ID. NO. 20)(SEQ. ID. NO. 22)(SEQ. ID. NO. 24)(SEQ. ID. NO. 26)(SEQ. ID. NO. 28)(SEQ. ID. NO. 30)(SEQ. ID. NO. 32)(SEQ. ID. NO. 34)(SEQ. ID. NO. 36)(SEQ. ID. NO. 38)。
61.根據(jù)權(quán)利要求55-60的使用，其中抗體特征在于，它包括選自下列核酸序列組中的重鏈可變區(qū)(VH)(SEQ.ID.NO.1)(SEQ.ID.NO.3)(SEQ.ID.NO.5)(SEQ.ID.NO.7)(SEQ.ID.NO.9)(SEQ.ID.NO.11)(SEQ.ID.NO.19)(SEQ.ID.NO.21)(SEQ.ID.NO.23)(SEQ.ID.NO.25)(SEQ. ID. NO. 27) (SEQ. ID. NO. 29) (SEQ. ID. NO. 31) (SEQ. ID. NO. 33) (SEQ. ID. NO. 35) (SEQ. ID. NO. 37)與至少ー種選自下列核酸序列組中的輕鏈可變區(qū)(yL)相結(jié)合(SEQ. ID. NO. 2)(SEQ. ID. NO. 4)(SEQ. ID. NO. 6)(SEQ. ID. NO. 8)(SEQ. ID. NO. 10)(SEQ. ID. NO. 12)(SEQ. ID. NO. 20)(SEQ. ID. NO. 22)(SEQ. ID. NO. 24)(SEQ. ID. NO. 26)(SEQ. ID. NO. 28)(SEQ. ID. NO. 30)(SEQ. ID. NO. 32)(SEQ. ID. NO. 34)(SEQ. ID. NO. 36)(SEQ. ID. NO. 38)。
62.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ. ID. NO. 1)和輕鏈可變區(qū)(V) (SEQ. ID. NO. 2)。
63.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ. ID. NO. 3)和輕鏈可變區(qū)(V) (SEQ. ID. NO. 4)。
64.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ. ID. NO. 5)和輕鏈可變區(qū)(V) (SEQ. ID. NO. 6)。
65.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ. ID. NO. 7)和輕鏈可變區(qū)(V) (SEQ. ID. NO. 8)。
66.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ. ID. NO. 9)和輕鏈可變區(qū)(V) (SEQ. ID. NO. 10)。
67.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ. ID. NO. 11)和輕鏈可變區(qū)(Vl) (SEQ. ID. NO. 12)。
68.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ. ID. NO. 19)和輕鏈可變區(qū)(Vl) (SEQ. ID. NO. 20)。
69.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ. ID. NO. 21)和輕鏈可變區(qū)(Vl) (SEQ. ID. NO. 22)。
70.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ.ID. NO. 23)和輕鏈可變區(qū)(Vl) (SEQ. ID. NO. 24)。
71.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ.ID. NO. 25)和輕鏈可變區(qū)(Vl) (SEQ. ID. NO. 26)。
72.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ.ID. NO. 27)和輕鏈可變區(qū)(Vl) (SEQ. ID. NO. 28)。
73.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ.ID. NO. 29)和輕鏈可變區(qū)(Vl) (SEQ. ID. NO. 30)。
74.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ.ID. NO. 31)和輕鏈可變區(qū)(Vl) (SEQ. ID. NO. 32)。
75.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ.ID. NO. 33)和輕鏈可變區(qū)(Vl) (SEQ. ID. NO. 34)。
76.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ.ID. NO. 35)和輕鏈可變區(qū)(Vl) (SEQ. ID. NO. 36)。
77.根據(jù)權(quán)利要求61的使用，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)(SEQ.ID. NO. 37)和輕鏈可變區(qū)(Vl) (SEQ. ID. NO. 38)。
78.對(duì)至少一種apoB100的氧化片斷產(chǎn)生的抗體，包括選自下列核酸序列組中的重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 1，SEQ. ID. NO. 3，SEQ. ID. NO. 5，SEQ. ID. NO. 7，SEQ. ID. NO. 9，SEQ. ID. NO. 11，SEQ. ID. NO. 19，SEQ. ID. NO. 21，SEQ. ID. NO. 23，SEQ. ID. NO. 25，SEQ. ID. NO. 27，SEQ.ID. NO. 29，SEQ. ID. NO. 31，SEQ. ID. NO. 33，SEQ. ID. NO. 35，SEQ. ID. NO. 37。
79.對(duì)至少一種apoBlOO的氧化片斷產(chǎn)生的抗體，包括選自下列核酸序列組中的輕鏈可變區(qū)(Vl)SEQ. ID. NO. 2，SEQ. ID. NO. 4，SEQ. ID. NO. 6，SEQ. ID. NO. 8，SEQ. ID. NO. 10，SEQ.ID. NO. 12，SEQ. ID. NO. 20，SEQ. ID. NO. 22，SEQ. ID. NO. 24，SEQ. ID. NO. 26，SEQ. ID. NO. 28，SEQ. ID. NO. 30，SEQ. ID. NO. 32，SEQ. ID. NO. 34，SEQ. ID. NO. 36，SEQ. ID. NO. 38。
80.對(duì)至少一種ApoBlOO的氧化片斷產(chǎn)生的抗體，包括選自下列核酸序列組中的重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ. ID. NO. 1，SEQ. ID. NO. 3，SEQ. ID. NO. 5，SEQ. ID. NO. 7，SEQ. ID. NO. 9，SEQ. ID. NO. 11，SEQ. ID. NO. 19，SEQ. ID. NO. 21，SEQ. ID. NO. 23，SEQ. ID. NO. 25，SEQ. ID. NO. 27，SEQ.ID. NO. 29，SEQ. ID. NO. 31，SEQ. ID. NO. 33，SEQ. ID. NO. 35，SEQ. ID. NO. 37與選自下列核酸序列組中的輕鏈可變區(qū)相結(jié)合SEQ. ID. NO. 2，SEQ. ID. NO. 4，SEQ. ID. NO. 6，SEQ. ID. NO. 8，SEQ. ID. NO. 10，SEQ.ID. NO. 12，SEQ. ID. NO. 20，SEQ. ID. NO. 22，SEQ. ID. NO. 24，SEQ. ID. NO. 26，SEQ. ID. NO. 28，SEQ. ID. NO. 30，SEQ. ID. NO. 32，SEQ. ID. NO. 34，SEQ. ID. NO. 36，SEQ. ID. NO. 38。
81.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 1和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. NO. 2。
82.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. N0. 3和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. NO. 4。
83.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 5和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. NO. 6。
84.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 7和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. NO. 8。
85.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 9和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. NO. 10。
86.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(VH)SEQ.ID. NO. 11 和輕鏈可變區(qū)(VL)SEQ. ID. NO. 12。
87.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 19 和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. N0. 20。
88.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 21 和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. N0. 22。
89.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 23 和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. N0. 24。
90.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 25 和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. N0. 26。
91.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 27 和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. N0. 28。
92.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 29 和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. N0. 30。
93.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 31 和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. N0. 32。
94.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 33 和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. N0. 34。
95.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 35 和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. N0. 36。
96.根據(jù)權(quán)利要求80的抗體，其中抗體特征在于，它包括重鏈可變區(qū)(Vh)SEQ.ID. NO. 37 和輕鏈可變區(qū)(Vl) SEQ. ID. N0. 38。
97.制備根據(jù)權(quán)利要求78-96的分離抗體的方法，利用片斷文庫生成針對(duì)氧化的特別是Apo B100的MDA改性肽產(chǎn)生的特定人類抗體片斷，其中將識(shí)別出的具有要求特征的抗體片斷復(fù)原成全長的人類免疫球蛋白，為治療目的使用。
98.利用重組技術(shù)對(duì)根據(jù)權(quán)利要求78的分離人類抗體進(jìn)行擴(kuò)增的方法，包括利用PCR-擴(kuò)增將基因編碼選出的scFv的可變部分轉(zhuǎn)變成全長的人類IgGl載體，其中使用的引物是用來擴(kuò)增VH-片斷的引物5’ VH :5’ -GGTGTGCATTCCGAGGTGCAGCTGTTGGAG(SEQ. ID. NO :13)3’ VH :5’ -GACGTACGACTCACCTGAGCTCACGGTGACCAG(SEQ. ID. NO :14)和用來擴(kuò)增VL-片斷的引物5’ VL :5’ -GGTGTGCATTCCCAGTCTGTGCTGACTCAG(SEQ. ID. NO :15)3’ VL :5’ -GACGTACGTTCTACTCACCTAGGACCGTCAGCTT(SEQ. ID. NO :16)。
99.根據(jù)權(quán)利要求98的方法，其中通過菌落PCR用下列引物識(shí)別含有帶重鏈可變區(qū)和可變輕鏈插入片斷的重鏈區(qū)和輕鏈區(qū)質(zhì)粒的菌落正向引物5，-ATGGGTGACAATGACATC(SEQ. ID. NO :17)反向引物:5，-AAGCTTGCTAGCGTACG(SEQ. ID. NO :18)。
100.藥物組合物包括針對(duì)至少一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的分離的人類抗體，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療動(dòng)脈粥樣硬化，其中抗體與藥物賦形劑結(jié)合存在。
101.一個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列SEQ ID NO :1編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 2編碼的輕鏈可變區(qū)。
102.一個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列SEQ ID NO :5編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 6編碼的輕鏈可變區(qū)。
103.一個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列SEQ ID NO :7編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 8編碼的輕鏈可變區(qū)。
104.一個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列SEQ ID NO :9編碼的重鏈可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :10編碼的輕鏈可變區(qū)。
105.一個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 12編碼的輕鏈可變區(qū)。
106.一個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 20編碼的輕鏈可變區(qū)。
107.一個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 22編碼的輕鏈可變區(qū)。
108.一個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO J6編碼的輕鏈可變區(qū)。
109.一個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 30編碼的輕鏈可變區(qū)。
110.一個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 32編碼的輕鏈可變區(qū)。
111.一個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :34編碼的輕鏈可變區(qū)。
112.—個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO 36編碼的輕鏈可變區(qū)。
113.—個(gè)抗體或抗體片斷，其特征在于其包含了核酸序列可變區(qū)和核酸序列SEQ ID NO :38編碼的輕鏈可變區(qū)。
114.根據(jù)權(quán)利要求101-113使用抗體或抗體片斷制造藥物組合物，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病。
115.根據(jù)權(quán)利要求101-113的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法制備利用片斷文庫生成特定的人類抗體片斷，其中將識(shí)別出的具有要求特征的抗體片斷復(fù)原成全長的人類免疫球蛋白，為治療目的使用。SEQIDN0:11編碼的重鏈SEQIDNO: 19編碼的重鏈SEQIDN0:21編碼的重鏈SEQIDN0:25編碼的重鏈SEQIDNO : 編碼的重鏈SEQIDN0:31編碼的重鏈SEQIDN0:33編碼的重鏈SEQIDNO: 35編碼的重鏈SEQIDN0:37編碼的重鏈
116.根據(jù)權(quán)利要求101-113的抗體或抗體片斷，其中的抗體或抗體片斷通過以下方法進(jìn)行擴(kuò)增利用重組技術(shù)，包括利用PCR-擴(kuò)增將基因編碼選出的scFv的可變部分轉(zhuǎn)變成全長的人類IgGl載體，其中使用的引物是用來擴(kuò)增VH-片斷的引物5’ VH :5’ -GGTGTGCATTCCGAGGTGCAGCTGTTGGAG(SEQ. ID. NO :13)3’ VH :5’ -GACGTACGACTCACCTGAGCTCACGGTGACCAG(SEQ. ID. NO :14)和用來擴(kuò)增VL-片斷的引物5’ VL :5’ -GGTGTGCATTCCCAGTCTGTGCTGACTCAG(SEQ. ID. NO :15)3’ VL :5’ -GACGTACGTTCTACTCACCTAGGACCGTCAGCTT(SEQ. ID. NO :16)。
117.根據(jù)權(quán)利要求116的抗體或抗體片斷，其中通過菌落PCR用下列引物識(shí)別含有帶重鏈可變區(qū)和可變輕鏈插入片斷的重鏈區(qū)和輕鏈區(qū)質(zhì)粒的菌落正向引物5，-ATGGGTGACAATGACATC(SEQ. ID. NO :17)反向引物:5，-AAGCTTGCTAGCGTACG(SEQ. ID. NO :18)。
118.藥物組合物包括根據(jù)權(quán)利要求101-113的抗體或抗體片斷，通過被動(dòng)免疫接種方法治療或預(yù)防性治療缺血性心血管病，其中抗體與藥物賦形劑結(jié)合存在。
119.根據(jù)權(quán)利要求101-113的抗體或抗體片斷，或權(quán)利要求118的藥物組合物，其中缺血性心血管病為動(dòng)脈粥樣硬化。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于治療或預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的被動(dòng)免疫接種，利用針對(duì)至少一種載脂蛋白B的氧化片斷產(chǎn)生的分離人類抗體制造藥物組合物，通過被動(dòng)免疫接種方式治療或預(yù)防性治療動(dòng)脈粥樣硬化，以及制備這種抗體的方法，和用這種抗體為被動(dòng)免疫接種做準(zhǔn)備，治療哺乳動(dòng)物，優(yōu)選人類的方法。
文檔編號(hào)C07K14/775GK102380097SQ20111023008
公開日2012年3月21日 申請日期2003年10月6日 優(yōu)先權(quán)日2002年10月4日
發(fā)明者揚(yáng)·尼爾森, 羅蘭·卡爾松, 萊夫·斯特蘭德博格, 詹妮·本特松 申請人:生物發(fā)明國際公司