專利名稱：一種生物學(xué)提取方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物學(xué)提取方法及其在藥品、保健品、食品、飲料生產(chǎn)中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
大部分中藥材的有效成分往往包裹在細(xì)胞壁內(nèi)。植物細(xì)胞壁是由纖維素、半纖維素、果膠質(zhì)、木質(zhì)素等物質(zhì)構(gòu)成的致密結(jié)構(gòu)。在藥用植物有效成分提取過程中，當(dāng)存在于細(xì)胞原生質(zhì)體中的有效成分向提取介質(zhì)擴(kuò)散時(shí)，必須克服細(xì)胞壁及細(xì)胞間質(zhì)的雙重阻力，選用適當(dāng)?shù)拿缸饔糜谒幱弥参锊牧希缢饫w維素的纖維素酶、水解果膠質(zhì)的果膠酶等等，可以使細(xì)胞壁及細(xì)胞間質(zhì)中的纖維素、半纖維素、果膠質(zhì)等物質(zhì)被降解，破壞細(xì)胞壁的致密構(gòu)造，減小細(xì)胞壁、細(xì)胞間質(zhì)等傳質(zhì)屏障對(duì)有效成分從細(xì)胞內(nèi)向細(xì)胞外提取介質(zhì)擴(kuò)散的傳質(zhì)阻力，從而有利于有效藥物成分的溶出提取。另一方面，通過選擇適當(dāng)?shù)拿割悾梢杂行У氖怪兴幉闹械哪繕?biāo)物溶出，同時(shí)控制非目標(biāo)物的溶出，提高溶出轉(zhuǎn)移效率的同時(shí)，為后續(xù)的提取液精制創(chuàng)造有利條件。如在葛根黃酮的工業(yè)提取中就常用淀粉酶水解葛根中含有的大量淀粉?？傊阜ㄌ崛∵^程的實(shí)質(zhì)就是通過酶促水解反應(yīng)強(qiáng)化傳質(zhì)過程。
目前，用于中藥提取方面研究較多的酶是纖維素酶，大部分中藥材的細(xì)胞壁主要是由纖維素類物質(zhì)構(gòu)成的，植物的有效成分往往包裹在細(xì)胞內(nèi)部；纖維素則是由β-D-葡萄糖以1，4-β-葡萄糖苷鍵連接，用纖維素酶酶解可以破壞纖維素的1，4-β-葡萄糖苷鍵，使植物細(xì)胞壁破壞，有利于對(duì)有效成分的提取。根據(jù)這一原理，國內(nèi)有人將纖維素酶用于黃柏提取小檗堿中的預(yù)處理，并與未加酶的提取進(jìn)行對(duì)比，經(jīng)薄層層析法測(cè)定，其有效成分小檗堿的收率可從0.870％提高到1.156％。此后又有人研究將其用于黃連、穿心蓮提取時(shí)的預(yù)處理。薄層色譜分析結(jié)果證明，黃連中小檗堿收率可從2.5148％提高到4.2336％；穿心蓮內(nèi)酯收率可從0.252％提高到0.321％，有效成分的收率均有明顯提高。
名稱為“酶處理提取中藥材中皂甙成分的方法”、專利號(hào)為96115151.X的專利報(bào)道了一種酶處理提取中藥材中皂甙成分的方法，其特征是(1)將被提取物加水浸泡，(2)取內(nèi)切糖苷酶類或其它不含外切糖苷酶成分的酶類與被提取物水浸液相混合、反應(yīng)，(3)以水、乙醇或甲醇作浸出劑，采用浸出法工藝步驟對(duì)經(jīng)過上述酶處理步驟的被提取物進(jìn)行浸出、提取皂甙成分。其優(yōu)點(diǎn)是可將皂甙提取率提高20～150％以上、而且皂甙結(jié)構(gòu)不被破壞，同時(shí)還提高了其它可溶性物質(zhì)的提取率。
名稱為“一種提取中藥成份的方法”、專利號(hào)為90107831.X的專利報(bào)道了一種中藥成份的提取方法，主要通過用液體預(yù)浸提然后加入蛋白質(zhì)，最好為蛋清，作為沉淀劑，把藥物有效部位和無效部分分離，這種方法可代替常用的乙醇和其它沉淀劑沉淀法，節(jié)約、安全、高效，被提取物含雜質(zhì)少。其特征在于用液體進(jìn)行預(yù)浸提，加入蛋白質(zhì)使其部分成份溶于或絡(luò)入其中。
上述文獻(xiàn)報(bào)道及現(xiàn)有其他中藥材酶法提取，其特點(diǎn)都是要加入特定高純度的微生物或酶類，這樣就提高了酶法提取技術(shù)在產(chǎn)業(yè)中應(yīng)用的困難，同時(shí)也會(huì)因?yàn)槊傅姆N類較單一而使生物學(xué)降解作用不徹底，導(dǎo)致在中藥材酶法提取的生產(chǎn)實(shí)際中生物學(xué)方法的作用得不到充分發(fā)揮。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種生物學(xué)提取方法以及該方法在藥品、食品、保健品、飲料生產(chǎn)中的應(yīng)用。申請(qǐng)人經(jīng)過長期研究，探索出一種以發(fā)酵液類產(chǎn)品為發(fā)酵介質(zhì)，不另外添加菌種或酶類，生物學(xué)作用時(shí)間更持久，更利于中藥材等有效成分提取加工的生物學(xué)提取方法本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的一種生物學(xué)提取方法為用天然來源或者經(jīng)過初步純化生產(chǎn)的微生物在發(fā)酵介質(zhì)中對(duì)原料物質(zhì)進(jìn)行浸泡發(fā)酵，發(fā)酵溫度為10～80℃，發(fā)酵生產(chǎn)時(shí)間1～70天，pH值1.0～12.0。(通過對(duì)體系pH的監(jiān)測(cè)，可以為生產(chǎn)的質(zhì)量一致等方面提供較為直觀的證據(jù)。因?yàn)橐坏┯须s菌感染，體系發(fā)酵過程中的pH變化就會(huì)出現(xiàn)不同的趨勢(shì)。)所述的微生物來源于原料物質(zhì)本身或者含有生物活力的發(fā)酵液，所含微生物菌種為曲霉屬、根霉屬、毛霉屬、紅曲霉菌屬、擔(dān)子菌類、酵母菌、產(chǎn)酸耐酸類的細(xì)菌中的一種或多種。
所述的發(fā)酵介質(zhì)為純化水或含有生物活力的發(fā)酵液。
所述的發(fā)酵液為醋、乙醇或乳酸。
發(fā)酵生產(chǎn)過程中不攪拌不通氧或攪拌通氧。具體根據(jù)主要微生物菌群的生長情況進(jìn)行調(diào)節(jié)，適當(dāng)?shù)脑黾訑嚢鑿?qiáng)度，增加通氧量，可維持微生物菌群的良好生長及最大限度利用體系中的酶活力。
如上所述生物學(xué)提取方法在中藥、保健品、功能性食品或功能性飲料的生產(chǎn)中的應(yīng)用。
在中藥生產(chǎn)中的應(yīng)用如(1)八味和胃口服液的生產(chǎn)工藝為取五靈脂12.5g、竹茹25g、醋制延胡索25g、木香12.5g、五味子25g、甘草12.5g、麥冬50g和沙參37.5g，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻，加入含有酶類及菌類的特種醋1000ml，10～65℃溫度下浸泡發(fā)酵1～10天，pH值范圍為3.0～5.0，隔日攪拌1次，于第8天隔水蒸2小時(shí)，放冷，濾過，濾液加入單糖漿100ml，加水至總量1000ml，混勻，濾過，灌裝，滅菌，即得。
上述含有酶類及菌類的特種醋可以從市場(chǎng)上選購，也可以在普通的醋中添加酶類及菌類。特種醋中酶類及菌類的含量＞0即可，增加酶類及菌類的含量可相應(yīng)縮短發(fā)酵時(shí)間。
(2)杜仲提取物的生產(chǎn)工藝為取杜仲藥材(杜仲皮或杜仲葉)100克，粉碎成細(xì)粉，加純化水適量，密封，10～75℃溫度下浸泡發(fā)酵5～20天，pH值范圍為3.0～9.0，過濾，濃縮，干燥，即得。
在保健品生產(chǎn)中的應(yīng)用如五精酒的生產(chǎn)工藝為(1)先將細(xì)曲1.2kg加工成細(xì)末，備用；(2)枸杞子500g、松葉600g、黃精400g、白術(shù)400g和天冬500g置于大砂鍋中，加水煮到10升，待冷備用；(3)將糯米12.5kg淘凈，蒸煮后瀝半干，倒入凈缸中待冷；(4)將藥并汁倒入缸中，加入細(xì)曲末，用柳枝攪拌均勻，加蓋密封，置保溫處，浸泡發(fā)酵溫度為10～85℃，pH值范圍為3.0～9.0；(5)5～50日后開封，壓榨去糟渣，過濾裝瓶備用。
在功能性食品、功能性飲料生產(chǎn)中的應(yīng)用，其生產(chǎn)工藝為將蔬菜洗干凈后，蔭干至表面無水；密封，用適量的鹽水浸泡，10～85℃溫度下浸泡發(fā)酵5～50天，pH值范圍為3.0～9.0；調(diào)和，根據(jù)產(chǎn)品需要進(jìn)行相應(yīng)的后處理，即得成品。
本發(fā)明利用生物學(xué)原理、方法來幫助中藥材等物質(zhì)中有效成分的釋放和轉(zhuǎn)化。與以往技術(shù)的不同在于利用含有生物酶的發(fā)酵產(chǎn)品(發(fā)酵液類的酒精產(chǎn)品、醋產(chǎn)品或乳酸類產(chǎn)品等等)進(jìn)行浸泡發(fā)酵，利用原發(fā)酵液中的微生物對(duì)藥材等物質(zhì)進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，利用原發(fā)酵液產(chǎn)品帶來的生物酶及浸泡發(fā)酵過程中新產(chǎn)生的酶類對(duì)藥材等物質(zhì)進(jìn)行必要的降解和轉(zhuǎn)化。
在這個(gè)發(fā)酵生產(chǎn)過程中利用的酶類有多個(gè)來源，一是發(fā)酵液帶來的酶類，二是在浸泡發(fā)酵過程中，由微生物重新分泌產(chǎn)生的酶類。該過程中涉及的生物學(xué)作用主要有三個(gè)一是微生物對(duì)藥材等物質(zhì)中各種營養(yǎng)成分的利用，促進(jìn)了組織中各種成分的流動(dòng)轉(zhuǎn)移；二是各種酶類對(duì)藥材等組織的有效降解，破壞了植物的組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)，直接增加組織內(nèi)成分的流動(dòng)轉(zhuǎn)移；三是對(duì)藥材等物質(zhì)中特定成分的生物學(xué)轉(zhuǎn)化，微生物或酶類對(duì)特定成分的轉(zhuǎn)化，這些作用包括酶促降解、酶促合成等作用。
由于本發(fā)明的工藝是利用微生物在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酶類及微生物本身對(duì)藥材等原料物質(zhì)進(jìn)行加工處理，而在整個(gè)浸泡發(fā)酵過程中，微生物在不斷的生長，同時(shí)也在不斷的分泌胞外酶，所以，整個(gè)產(chǎn)品的生產(chǎn)周期相對(duì)要長，但是在生產(chǎn)過程中很少利用高溫等這類的較劇烈的生產(chǎn)方式。但是，一定的利用這些物理學(xué)方式比如加熱或超聲處理，可進(jìn)一步提高生產(chǎn)的效果。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明利用生物學(xué)原理、方法幫助中藥材等物質(zhì)中有效成分的釋放和轉(zhuǎn)化，利用發(fā)酵工程與酶學(xué)降解相結(jié)合的技術(shù)，用發(fā)酵液類產(chǎn)品作為生產(chǎn)輔料，對(duì)原料物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵轉(zhuǎn)化及酶學(xué)降解，不需要額外接種微生物或添加酶類，大幅度提高了有效成分的提取效率，促進(jìn)了原料物中各種成分的釋放，對(duì)于保健類藥品、食品的生產(chǎn)有很大的幫助。同時(shí)，由于發(fā)酵過程的生物學(xué)轉(zhuǎn)化作用，對(duì)藥材成分進(jìn)行了必要的轉(zhuǎn)化，使其利于人體吸收，大大改善了產(chǎn)品的使用效果。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1八味和胃口服液的生產(chǎn)配方五靈脂12.5g、竹茹25g、延胡索(醋制)25g、木香12.5g、五味子25g、甘草12.5g、麥冬50g、沙參37.5g。
生產(chǎn)工藝為五靈脂、竹茹、延胡索(醋制)、木香、五味子、甘草、麥冬、沙參八味藥材，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻，加入含有酶類及菌類的特種醋1000ml，10～65℃溫度下浸泡發(fā)酵7天，pH值范圍為3.0～5.0，隔日攪拌1次，于第3天隔水蒸2小時(shí)，放冷，濾過，濾液加入單糖漿100ml，加水至總量1000ml，混勻，濾過，灌裝，滅菌，即得。
實(shí)施例2八味和胃口服液的生產(chǎn)配方五靈脂12.5g、竹茹25g、延胡索(醋制)25g、木香12.5g、五味子25g、甘草12.5g、麥冬50g、沙參37.5g。
生產(chǎn)工藝為五靈脂、竹茹、延胡索(醋制)、木香、五味子、甘草、麥冬、沙參八味藥材，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻，加入含有酶類及菌類的特種醋1000ml，20～55℃溫度下浸泡發(fā)酵10天，pH值范圍為3.0～5.0，隔日攪拌1次，于第11天隔水蒸2小時(shí)，放冷，濾過。藥渣加純化水300mL，超聲處理30分鐘，過濾。合并濾液，加入單糖漿100ml，加水至總量1000ml，混勻，濾過，灌裝，滅菌，即得。
實(shí)施例3五精酒的生產(chǎn)配方枸杞子500g、松葉600g、黃精400g、白術(shù)400g、天冬500g、糯米12.5kg、細(xì)曲1.2kg生產(chǎn)工藝為(1)先將細(xì)曲加工成細(xì)末，備用；(2)枸杞子、松葉、黃精、白術(shù)、天冬五味藥置于大砂鍋中，加水煮到10升，待冷備用；(3)將糯米淘凈，蒸煮后瀝半干，倒入凈缸中待冷；(4)將藥并汁倒入缸中，加入細(xì)曲末，用柳枝攪拌均勻，加蓋密封，置保溫處，浸泡發(fā)酵溫度為10～85℃，pH值范圍為3.0～7.0；(5)21日后開封，壓榨去糟渣，過濾裝瓶備用。
實(shí)施例4五精酒的生產(chǎn)配方枸杞子500g、松葉600g、黃精400g、白術(shù)400g、天冬500g、糯米12.5kg、細(xì)曲1.2kg生產(chǎn)工藝為(1)先將細(xì)曲加工成細(xì)末，備用；(2)枸杞子、松葉、黃精、白術(shù)、天冬五味藥置于大砂鍋中，加水煮到10升，待冷備用；(3)將糯米淘凈，蒸煮后瀝半干，倒入凈缸中待冷；(4)將藥并汁倒入缸中，加入細(xì)曲末，用柳枝攪拌均勻，加蓋密封，置保溫處，浸泡發(fā)酵溫度為20～65℃，pH值范圍為4.0～9.0；(5)50日后開封，壓榨去糟渣，過濾裝瓶備用。
實(shí)施例5杜仲藥材的提取取杜仲藥材(杜仲皮或杜仲葉)100克，粉碎成細(xì)粉。加純化水適量，密封。10～75℃溫度下浸泡發(fā)酵15天，pH值范圍為3.0～7.0。提取提純有效成分，提取收率大副提高。以京尼平苷酸為考察指標(biāo)，提取率為1.65％，較常規(guī)提取方法提高了15％。
實(shí)施例6杜仲藥材的提取取杜仲藥材(杜仲皮或杜仲葉)100克，加純化水適量，密封。20～50℃溫度下浸泡發(fā)酵20天，pH值范圍為5.0～9.0。提取提純有效成分，提取收率提高了12％。
實(shí)施例7乳酸型泡菜的浸泡發(fā)酵原料胡蘿卜、榨菜頭將蔬菜洗干凈后，蔭干至表面無水。密封，用適當(dāng)量的鹽水浸泡，10～85℃溫度下浸泡發(fā)酵20天，pH值范圍為3.0～6.0。調(diào)和，根據(jù)產(chǎn)品需要進(jìn)行必要的后處理，即得成品。
實(shí)施例8乳酸型泡菜的浸泡發(fā)酵原料胡蘿卜、榨菜頭將蔬菜洗干凈后，蔭干至表面無水。接種乳酸菌，密封，用適當(dāng)量的鹽水浸泡，60～70℃溫度下浸泡發(fā)酵50天，pH值范圍為5.0～9.0。調(diào)和，根據(jù)產(chǎn)品需要進(jìn)行必要的后處理，即得成品。
權(quán)利要求
1.一種生物學(xué)提取方法，其特征在于用天然來源或者經(jīng)過初步純化生產(chǎn)的微生物在發(fā)酵介質(zhì)中對(duì)原料物質(zhì)進(jìn)行浸泡發(fā)酵，發(fā)酵溫度為10～80℃，發(fā)酵生產(chǎn)時(shí)間1～70天，pH值1.0～12.0。
2.按照權(quán)利要求1所述的生物學(xué)提取方法，其特征在于所述的微生物來源于原料物質(zhì)本身或者含有生物活力的發(fā)酵液，所含微生物菌種為曲霉屬、根霉屬、毛霉屬、紅曲霉菌屬、擔(dān)子菌類、酵母菌、產(chǎn)酸耐酸類的細(xì)菌中的一種或多種。
3.按照權(quán)利要求1所述的生物學(xué)提取方法，其特征在于所述的發(fā)酵介質(zhì)為純化水或含有生物活力的發(fā)酵液。
4.按照權(quán)利要求2或3所述的生物學(xué)提取方法，其特征在于所述的發(fā)酵液為醋、乙醇或乳酸。
5.按照權(quán)利要求1所述的生物學(xué)提取方法，其特征在于發(fā)酵生產(chǎn)過程中不攪拌不通氧或攪拌通氧。
6.如權(quán)利要求1所述生物學(xué)提取方法在中藥、保健品、功能性食品或功能性飲料的生產(chǎn)中的應(yīng)用。
7.按照權(quán)利要求6所述生物學(xué)提取方法在中藥生產(chǎn)中的應(yīng)用，其特征在于八味和胃口服液的生產(chǎn)工藝為取五靈脂12.5g、竹茹25g、醋制延胡索25g、木香12.5g、五味子25g、甘草12.5g、麥冬50g和沙參37.5g，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻，加入含有酶類及菌類的特種醋1000ml，10～65℃溫度下浸泡發(fā)酵1～10天，pH值范圍為3.0～5.0，隔日攪拌1次，于第8天隔水蒸2小時(shí)，放冷，濾過，濾液加入單糖漿100ml，加水至總量1000ml，混勻，濾過，灌裝，滅菌，即得。
8.按照權(quán)利要求6所述生物學(xué)提取方法在中藥生產(chǎn)中的應(yīng)用，其特征在于杜仲提取物的生產(chǎn)工藝為取杜仲藥材100克，粉碎成細(xì)粉，加純化水適量，密封，10～75℃溫度下浸泡發(fā)酵5～20天，pH值范圍為3.0～9.0，過濾，濃縮，干燥，即得。
9.按照權(quán)利要求6所述生物學(xué)提取方法在保健品生產(chǎn)中的應(yīng)用，其特征在于五精酒的生產(chǎn)工藝為(1)先將細(xì)曲1.2kg加工成細(xì)末，備用；(2)枸杞子500g、松葉600g、黃精400g、白術(shù)400g和天冬500g置于大砂鍋中，加水煮到10升，待冷備用；(3)將糯米12.5kg淘凈，蒸煮后瀝半干，倒入凈缸中待冷；(4)將藥并汁倒入缸中，加入細(xì)曲末，用柳枝攪拌均勻，加蓋密封，置保溫處，浸泡發(fā)酵溫度為10～85℃，pH值范圍為3.0～9.0；(5)5～50日后開封，壓榨去糟渣，過濾裝瓶備用。
10.按照權(quán)利要求6所述生物學(xué)提取方法在功能性食品、功能性飲料生產(chǎn)中的應(yīng)用，其特征在于功能性食品、飲料的生產(chǎn)工藝為將蔬菜洗干凈后，蔭干至表面無水；密封，用適量的鹽水浸泡，10～85℃溫度下浸泡發(fā)酵5～50天，pH值范圍為3.0～9.0；調(diào)和，根據(jù)產(chǎn)品需要進(jìn)行相應(yīng)的后處理，即得成品。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種生物學(xué)提取方法及其應(yīng)用，該方法是用天然來源或者經(jīng)過初步純化生產(chǎn)的微生物菌種對(duì)原料物質(zhì)進(jìn)行浸泡發(fā)酵，發(fā)酵溫度為10～80℃，發(fā)酵生產(chǎn)時(shí)間1～70天，pH值1.0～12.0。此方法可應(yīng)用在中藥、保健品、功能性食品或功能性飲料的生產(chǎn)中。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明利用生物學(xué)原理、方法幫助中藥材等物質(zhì)中有效成分的釋放和轉(zhuǎn)化，用發(fā)酵液類產(chǎn)品作為生產(chǎn)輔料，對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行發(fā)酵轉(zhuǎn)化及酶學(xué)降解，不需要額外接種微生物或添加酶類，大幅度提高了有效成分的提取效率，促進(jìn)了原料物中各種成分的釋放。同時(shí)，由于發(fā)酵過程的生物學(xué)轉(zhuǎn)化作用，對(duì)藥材成分進(jìn)行了必要的轉(zhuǎn)化，使其利于人體吸收，大大改善了產(chǎn)品的使用效果。
文檔編號(hào)A61P1/00GK101020911SQ200710200339
公開日2007年8月22日 申請(qǐng)日期2007年3月27日 優(yōu)先權(quán)日2007年3月27日
發(fā)明者石正國, 馬靜, 黃文榮, 李江, 王昌菊 申請(qǐng)人:貴州百花醫(yī)藥股份有限公司