專利名稱：一種銀杏內酯的新用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種銀杏內酯的新用途，特別涉及一種銀杏內酯及其制劑在 治療動脈粥樣硬化性血栓性腦梗死和腔隙性腦梗死方面的新用途。
技術背景動脈粥樣硬化性血栓性腦梗死、腔隙性腦梗死為嚴重危害人類健康的常 見病、多發(fā)病，屬于中醫(yī)"中風"的范疇。由于中風起病急驟，變化多端而 速疾，如"矢石之中的，若暴風之疾速"，故古代醫(yī)家取名為"中風"，又因 其發(fā)病突然，亦稱之為"卒中"。其形成有原始病因和誘發(fā)因素，原始原因 以個體素質、情志不調、飲食不節(jié)為主，誘發(fā)因素主要為煩勞、惱怒、醉飽 無常等。病位在腦，與心、肝、腎、脾密切相關，病理因素為風、痰、火、 氣、疲、虛。病機主要為陰陽失調，氣血逆亂，上沖于腦，輕者中經(jīng)絡，重 者中臟腑，中經(jīng)絡者多為腦血栓形成，腦栓塞等。臨床表現(xiàn)一般為頭暈、口 流涎水，口眼歪斜或口角抽動，語言欠清，或舌強言謇，或失語，偏身麻木, 手足活動欠利，或半身不遂等癥的痰瘀阻絡證患者，治療應采用化痰祛瘀法。 西醫(yī)所稱的腦梗死是由于腦供血障礙，缺血、缺氧導致腦組織發(fā)生缺血性壞 死并產生相應的神經(jīng)功能障礙。其治療多采用抗血小板聚集劑、鈣拮抗劑、 血管擴張劑等。據(jù)文獻報道，目前治療動脈粥樣硬化性血栓性腦梗死和腔隙性腦梗死的 主要藥物有由云南特有植物燈盞細辛(燈盞花)提取、精制而成的燈盞細辛 注射液，由中藥玄參、石斛、牛膝等藥物制成的脈絡寧注射液，由中藥白蒺 藜全草中提取的有效成分制成的腦心多泰膠囊，主要由黃芪、丹參、當歸、 川芎、紅花、乳香、沒藥、桂枝、全蝎、地龍、水蛭等中藥制成的腦心通膠 囊，由柴胡、枳實、川芎、丹參、澤蘭、水蛭、地龍等中藥制成的通栓靈膠 囊，由人參，全蝎，水蛭，蜈蚣，土鱉蟲，蟬蛻，赤勺和冰片等中藥制成的 通心絡膠囊等。目前還未見有關銀杏內酯可以治療動脈粥樣硬化性血栓性腦
梗死、腔隙性腦梗死的報道。 發(fā)明內容本發(fā)明的目的在于公開一種銀杏內酯及其制劑在治療動脈粥樣硬化性 血栓性腦梗死、腔隙性腦梗死方面的新用途。銀杏內酯是特異的血小板活化因子拮抗劑，其作用機理是銀杏內酯能競爭性地與人體血小板，白細胞、肺細胞等細胞膜上的PAF受體結合，使PAF 失去作用，表現(xiàn)出拮抗活性，PAF是許多疾病產生的介質之一，銀杏內酯對 其拮抗作用，表明銀杏內酯能防治血栓形成，中風病發(fā)生，器官移植體排斥， 某些炎癥及呼吸道過敏性疾病(特別是哮喘)等。銀杏內酯及其制劑可為心 腦血管疾病，特別是動脈粥樣硬化性血栓性腦梗死、腔隙性腦梗死臨床用藥 提供療效確切、生物利用度高的臨床藥物。 本發(fā)明目的是通過如下實驗例實現(xiàn)的 實驗例1銀杏內酯iv給藥對大鼠實驗性腦缺血的保護作用1、 藥品與試劑銀杏內酯用溶媒稀釋至所需濃度，高、中、低劑量的 濃度分別為0.50%， 0.25%， 0.13%;尼莫地平注射液，批號，CATEZ1德國拜 爾出品；金納多注射液，批號6580199，德國舒培大藥廠出品；丙二醛測 定試劑盒(MDA)，批號20000715;超氧化物歧化酶測定試劑盒(SOD)，批號 20000705;谷胱苷肽測定試劑盒(GSH)，批號20000721;乳酸測定試劑盒(LA)， 批號20000705，考馬斯亮蘭試劑盒，批號20000825，均由南京建成生物工 程研究所生產。2、 受試動物SD大白鼠，體重為300-400g，雄性，由中國藥科大學動 物飼養(yǎng)室提供，合格證號蘇動質97004。3、 實驗方法和結果3. 1銀杏內酯iv對局灶性腦缺血大鼠腦功能、梗塞率和腦含水量的影響 取雄性SD大鼠80只，體重300-400g，按體重隨機分為8組，分別為銀 杏內酯高劑量組30.0mg/kg，中劑量組15. Omg/kg，低劑量組7. 5mg/kg，溶 媒對照組，陽性對照尼膜同注射液組0.2mg/kg，陽性對照金納多注射液組 1. Oml/kg，假手術組及缺血模型對照組(均給以等量生理鹽水0. 6ml/100g);
于實驗前四天，每天尾靜脈注射給藥一次，第四天最后一次于缺血前30分 鐘給藥；參考Longa等人的方法，采用頸內動脈線栓法制備大鼠大腦中動脈 閉塞(MCA0)模型；大鼠用10%水合三氯乙醛(300mg/kg) ip麻醉，仰臥恒 溫手術臺上頸部正中切口，暴露右側頸總動脈，向外牽引二腹肌及胸鎖乳突 肌，由頸總動脈分叉處向頭端依次游離，結扎并剪斷頸外動脈的分支枕骨 下動脈和甲狀腺上動脈，在頸外動脈遠端結扎，切斷頸外動脈使其主干游離 備用，然后分離頸內動脈，用絲線在頸外動脈根部打一松扣，夾閉頸總動脈 和頸內動脈。將長4cm，直徑0.26mm的尼龍線經(jīng)頸外動脈主干切口，緩慢向 頸內動脈入顱方向推進，以頸總動脈分叉處為標記，推進20mm左右時感到 阻力，即達到了較細的大腦前動脈內，阻斷了MCA的所有血供來源，扎緊頸 外動脈根部松扣； 一小時后，拔出尼龍線，扎緊動脈殘端；縫合皮膚，完成 MCAO導致局灶性腦缺血-再灌模型；假手術組大鼠麻醉后，僅暴露頸內外動 脈分叉，不閉塞MCA。術后24小時按Bederson的方法對動物的行為缺陷進 行分級評分，標準如下0級未觀察到神經(jīng)癥狀；1級提尾懸空時，動物的手術對側前肢表 現(xiàn)為腕肘屈曲，肩內旋，肘外展，緊貼胸壁；2級將動物置于光滑平面上，推手術側肩向對側移動時，阻力降低；3級動物自由行走時向手術對側環(huán)轉或轉圈；4級；軟癱，肢體無自發(fā)活動。MCA0 24小時后，斷頭處死大鼠，取出全腦，左右腦分別切開，稱重；在右腦視交叉及其前后各2mm處，做冠狀切，腦切片于1%TTC溶液中避光37°C孵育25分鐘，用眼科鑷分離蒼白區(qū)(梗塞區(qū))和非蒼白區(qū)(正常區(qū))，計算梗塞百分比如下梗塞百分比(%)=蒼白區(qū)重量/(蒼白區(qū)重量+非蒼白區(qū)重量)X 100% 將染色后的腦組織置于ll(TC烘箱烘干，對照大腦濕重求出腦含水量如下腦組織含水量(%) = (l-腦組織干重/腦組織濕重)X 100% 結果銀杏內酯注射液7.5mg/kg， 15.0mg/kg， 30. 0mg/kg iv能使MCA0 大鼠的腦卒中評分降低(P〈0.01)， MCA0梗塞范圍縮小(P〈0.01)，腦組織含水 量減少(P〈0.01)，其高、中劑量作用強度與金納多比較無明顯差異。 3. 2銀杏內酯iv給藥對局灶性腦缺血大鼠腦勻漿生化指標的影響 取雄性大鼠80只，300-400g，分組給藥及手術方法如前；MCA0 24h后， 大鼠斷頭處死，取腦，去除小腦；將大腦用生理鹽水制成10%勻漿，按南京 建成生物工程研究所提供的試劑盒說明書，測定大腦組織中的超氧化物歧化 酶(SOD)，谷胱甘肽(GSH)，丙二醛(MDA)和乳酸(LD)含量；腦勻漿蛋白含量 按考馬斯亮藍法測定。結果銀杏內酯iv給藥可使局灶性腦缺血大鼠再灌注損傷的腦組織內的 MDA， LA等含量降低，表明組織缺血缺氧和過氧化程度受到明顯抑制；同時 SOD和GSH含量增加，反映了藥物對機體抗氧化能力和清除自由基的能力有 提高(P〈0.01)。3. 3銀杏內酯iv給藥對局灶性腦缺血大鼠腦組織學的影響 取雄性大鼠40只，300-400g，隨機分為每組5只，給藥及手術方法如前；MCA0后24h斷頭處死大鼠，取出全腦于10%甲醛溶液中固定；標本于臘 制模具中切片后作H. E.染色，對大腦皮層海馬進行病理組織學檢查。假手術組各例腦組織神經(jīng)元及膠質細胞正常，核膜清楚，核仁明顯， 未見神經(jīng)變性、壞死及炎細胞浸潤等明顯病理改變；缺血模型組各例腦組織均見神經(jīng)元結構模糊，胞體腫脹，尼氏小體減 少或消失，出現(xiàn)不同程度的核深染，核固縮，核溶解，核體不規(guī)則，并見明 顯軟化灶形成；銀杏內酯iv給藥三個劑量組大腦皮質錐體細胞和腦實質神經(jīng)細胞的 核固縮、核溶解程度比缺血對照組明顯減輕，軟化灶減少；其中高劑量效果 比較顯著，而低劑量組的效果不明顯；金納多注射液對照組和尼膜同注射液對照組也對腦缺血造成的腦組織 損傷有明顯保護作用；病理結果表明銀杏內酯可明顯改善局灶性腦缺血下大鼠的腦代謝；維 持腦缺血狀態(tài)下神經(jīng)細胞的正常形態(tài)和功能，延緩、減輕其壞死。4、 實驗結論 4. 1銀杏內酯7. 5 mg/kg， 15. 0 mg/kg， 30. 0mg/kg iv能使MCAO大鼠的 腦卒中評分降低，MCAO梗塞范圍縮小，腦組織含水量減少(P〈0.01)，其作用 強度與金納多注射液比較無明顯差異；4.2銀杏內酯7.5 mg/kg， 15.0mg/kg， 30. Omg/kg iv可使局灶性腦缺 血大鼠再灌注損傷的腦組織內的MDA， LA等含量降低(P〈0.01)，表明組織缺 血缺氧和過氧化程度受到明顯抑制；同時S0D和GSH含量增加(P〈0.01)，反 映了藥物對機體抗氧化能力和清除自由基的能力有提高。4.3銀杏內酯7.5 mg/kg， 15.0 mg/kg， 30. Omg/kg iv可明顯保護局灶 性腦缺血大鼠再灌注損傷的腦組織結構，大腦皮質錐體細胞和腦實質神經(jīng)細 胞的核固縮、核溶解程度比缺血對照組明顯減輕，軟化灶減少。 實驗例2銀杏內酯iv給藥對血小板功能和血液流變學的影響1、 藥品與試劑銀杏內酯用溶媒稀釋至所需濃度(高、中、低劑量的濃度分別為0.075%、 0.15%、 0.3%，離體試驗0.01%);金鈉多注射液，批號 6580199，德國舒培大藥廠出品。2、 實驗動物家兔，1.9-2.5kg，雌雄兼用，東南大學醫(yī)學院動物中心 提供，合格證號蘇動質97002。3、 實驗方法和結果3.1銀杏內酯iv給藥對PAF誘導家兔體外血小板聚集的影響 家兔25只，雌雄兼用，體重1.9-2.5kg，兔心內取血4.5ral，放入含有3.8% 枸緣酸鈉O. 5ml的聚乙烯離心管內混勻；將標本于LDZ4-0. 8離心機以500rpm 離心3min分離富血小板血漿(PRP)約0. 5ml，再將剩余沉淀物以2500rpm 離心15min,分離出貧血小板血漿(PPP)， PRP中血小板數(shù)為25-45萬/mm3; 取PRP200ul于比濁管內，分別加入O. lmg/ml的銀杏內酯2.5y 1、 5ul、 10ul，銀杏內酯溶劑10ul， 13mg/ml的阿司匹林組10ul， ASP溶劑(20% 聚乙二醇-400) 10 u 1，生理鹽水對照5ul，金鈉多注射液(含銀杏葉提取物 0.35mg/ml) 5ul; 37""C下溫育5min后，加入PAF誘導劑(終濃度為 0.16u g/ml)，按比濁法用SPA-4型多功能血小板聚集儀測定各組PRP在3min 內最大聚集率(％)和1分鐘解聚率，并與溶劑組比較，計算藥物聚集抑制率。 結果銀杏內酯0.99ug/ml、 1.96ug/ml、 3.85yg/ml，對PAF誘導的兔 體外血小板聚集均有明顯抑制作用和解聚作用，并有明顯劑量依賴性(r值 為0.9997)，與溶劑組比較均有顯著差異(P〈0.01);銀杏內酯對血小板聚集 抑制率與1分鐘解聚率具有明顯相關性(r=0.9503);銀杏內酯抑制PAF誘 導血小板聚集作用的ICs。為1. 15u g/ml。3.2銀杏內酯iv給藥對家兔體內血小板數(shù)和PAF誘導血小板聚集的影響家兔52只，雌雄兼用，體重1.9-2.5kg，隨機分6組，銀杏內酯為 0.75mg/kg、 1.50mg/kg、 3. Omg/kg三個劑量組，溶劑組，生理鹽水(NS)對 照組，金鈉多注射液組，iv給藥容量為lml/kg，每天給藥一次，連續(xù)給藥4 天，第4天給藥后15min心臟內取血，ASP組ig 150mg/kg，給藥容量為2ml/kg， 于第5天給藥后60min取血，各組取血約2.7ml，血小板聚集測定法同前， 血小板數(shù)用直接計數(shù)法測定。結果銀杏內酯高、中、低三個劑量組對血小板數(shù)無明顯影響，對PAF 誘導血小板聚集有明顯抑制作用，并呈劑量依賴關系(r=0.9350);中、高 劑量對1分鐘解聚率有顯著作用。3. 3銀杏內酯iv給藥對家兔血液流變學的影響家兔54只，雌雄兼用，體重1. 9-2. 5kg，隨機分為銀杏內酯0. 75 mg/kg、 1.5 mg/kg、 3.0mg/kg 3個劑量組，溶劑組，生理鹽水(NS)對照組，ASP (ig給藥)150mg/kg組，金鈉多注射組(銀杏葉提取物1.75mg/kg)， iv給 藥容量均為lml/kg，每天給藥一次，連續(xù)給藥4天，于第4天給藥后15min 心臟取血3-4ml， ASP組ig給藥5天，第5天給藥后60min取血(1) 全血粘度比測定，兔血1.5ml放入含3ul肝素試管中，自然干燥， 混勻，用LBY-N6A自動清洗旋轉式粘度計測定10S1、605—1、 150S^時全血粘度；(2) 紅細胞壓積，兔血1.5ml放入含肝素抗凝管中混勻，用毛細吸管 吸取抗凝血慢慢注入溫氏壓積管內至"10"刻度處，以3000rp離心30min， 讀取紅細胞壓積數(shù)；結果高劑量組可明顯降低家兔紅細胞壓積和全血粘度(比)，尤其對 高切變速率的全血粘度(比)作用更明顯(P<0.01)，高劑量3. Omg/kg組對 低、中、高切變速率的全血粘度(比)均有明顯改善作用(P〈0.05或0.01)， 表明銀杏內酯對紅細胞變形能力有明顯改善作用，能改善微循環(huán)。 4、實驗結論銀杏內酯0.99Pg/rol、 L96l^g/ml、 3. 80^g/ml對PAF誘導家兔體外血小 板聚集均有明顯抑制作用(P〈0.01)，并有明顯解聚作用(P〈0.01);對ADP 誘導血小板聚集作用較弱(P〈0.05或P〈0.01)，無明顯解聚作用(P〉0.05); 該藥靜脈注射0.75mg/kg、 1.50mg/kg、 3. Omg/kg對PAF誘導的家兔體內血 小板聚集均有明顯抑制作用(P〈0.01)，中、高劑量組還有明顯解聚作用 (P〈0.01);對兔血小板數(shù)無明顯作用(P〉0.05)。銀杏內酯靜脈注射1.50mg/kg、 3.0mg/kg可明顯降低兔紅細胞壓積 (P〈0.01)和全血粘度(比)尤其對高切變速率的全血粘度(比)作用更明 顯(P〈0.01)。實驗例3:銀杏內酯灌胃給藥治療缺血性腦損傷的藥效學的研究1、 藥品與試劑銀杏內酯含量95.3%,配制方法將該藥用0.5 %CMC-Na稀釋到所需濃度；尼莫地平河南華利制藥廠提供，批號9812.4; 丙二醛測定試劑盒(MDA)，批號20000715;超氧化物歧化酶測定試劑盒(SOD)， 批號20000705;乳酸脫氫酶(LDH)批號20000712;谷胱苷肽測定試劑盒(GSH)， 批號20000721;乳酸測定試劑盒(LA)，批號20000705，均有南京建成生物 工程研究所提供。2、 受試動物昆明種小鼠，雌雄各半，18—22g; SD大白鼠，雌雄各半， 220—300g;以上動物由中國藥科大學動物室提供，合格證號蘇動質97004。3、 試驗方法與結果3.1銀杏內酯ig對大鼠實驗性局灶性腦缺血的保護作用 取雄性SD大鼠72只，體重250-300g，按體重隨機分為6組，分別為銀 杏內酯高劑量組50.0 mg/kg、中劑量組25. 0mg/kg、低劑量組12. 5mg/kg; 陽性對照藥尼莫地平組1. 5mg/kg，假手術組及缺血模型對照組均給等量的 0.5%CMC-Na;各組大鼠每天灌胃給藥一次，給藥容積為lml/100g，共給藥 7天，于末次給藥60分鐘后造模。參考Longa等人的方法，采用頸內動脈線
栓法制備大鼠大腦中動脈閉塞(MCA0)模型。大鼠用10%水合三氯乙醛 (300mg/kg) ip麻醉，仰臥恒溫手術臺上于頸部正中切口，暴露右側頸總 動脈，向外牽引二腹肌及胸鎖乳突肌，由頸總動脈分叉處向頭端依次游離， 結扎并剪斷頸外動脈的分支；枕骨下動脈和甲狀腺上動脈，在頸外動脈遠端 結扎，切斷頸外動脈使其主干游離備用，然后分離頸內動脈，用絲線在頸外 動脈根部打一松扣，夾閉頸總動脈和頸內動脈。將長4cm直徑0. 26mm的尼 龍線經(jīng)頸外動脈主干切口，緩慢向頸內動脈入顱方向推進，以頸總動脈分叉 處為標記，推進20mm左右時感到阻力，即達到了較細的大腦前動脈內，阻 斷了MCA的所有血供來源，扎緊頸外動脈根部松扣。 一小時后，拔出尼龍線， 扎緊動脈殘端?？p合皮膚，完成MCAO導致局灶性腦缺血-再灌模型。假手術 組大鼠麻醉后，僅暴露頸內外動脈分叉，不閉塞MCA。術后24h按張均田的方法對動物的行為缺陷進行分級評分，標準如下 l級提鼠尾離地面約l尺，觀察前肢情況。正常大鼠兩前肢對稱的伸向地 面。有左肩內旋，左前肢內收者，評分為4分。否則為0分。 2級將動物置于平滑地板上，分別推左(或右)肩向對側移動，檢查抵抗 推動的阻力。正常大鼠雙側阻力明顯對稱。右肩向左側移動時，發(fā)現(xiàn)阻力下 降者，根據(jù)下降的程度不同，評分為l-3分。3級將動物兩前肢置于一金屬網(wǎng)上，觀察兩前肢的肌肉張力。正常大鼠兩前肢肌肉張力明顯對稱。發(fā)生左前肢肌張力下降者，根據(jù)下降的輕重，評分0-3分，根據(jù)以上標準評分，滿分10分，分數(shù)越高，說明動物的行為障礙越 嚴重。評分用單盲法。MCA0 24h后，斷頭處死大鼠，取出全腦，去除嗅球、小腦和低位腦干后 稱取大腦濕重。然后將大腦冠狀切四刀，切成五片，第一刀在腦前極與視交 叉連線中點處；第二刀在視交叉部位；第三刀在漏斗柄部位；第四刀在漏斗 柄與后時尾極之間。腦切片于1%TTC溶液中避光37i:孵育30分鐘，用眼科 鑷分離蒼白區(qū)(梗塞區(qū))和非蒼白區(qū)(正常區(qū))，計算梗塞百分比如下 梗塞百分比(%)=蒼白區(qū)重量/ (蒼白區(qū)重量+非蒼白區(qū)重量)X 100% 將染色后的腦組織置于105'C烘箱中24h干燥至恒重。烘干后稱取干重，
對照大腦濕重求出腦含水量如下腦組織含水量(%)二(1-腦組織干重/腦組織濕重)X 100%由表1可知，銀杏內酯三個劑量能明顯降低MCA0大鼠的腦卒中評分，縮小MCA0梗塞范圍，減少腦組織含水量，以上表明銀杏內酯對腦缺血有較好的保護作用。表l銀杏內酯注射液對局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)行為、腦梗塞率和腦含水量的影響(；±s)組別劑量(mg/kg)n神經(jīng)行為評分腦梗塞率(％)腦含水量(％)假手術組一120. 30 ±0. 50*77. 97 ±0. 90模型對照組_98. 20 ±1.3015.28±0.7181.06±0. 6812.5106. 80 ±1.40*14. 26±1. 3180. 21±0. 77*銀杏內酯25.0116.30±1.70*13.21±1. 19林79. 58 ±0. 93**50.0105. 70 ±1.20**12. 77±1.07**78. 74 ±0. 65**尼膜地平組1. 5106. 60 ±1. 70*13. 58 ±1.07**79. 49 ±1.07**注*p〈0.05, **p<0.01 與模型對照組比較3. 2對局灶性腦缺血大鼠腦勻漿生化指標的影響分組、給藥劑量、造模方法同前。MCA0 24h后，大鼠放血處死，取腦， 去除嗅球、小腦和低位腦干后，將大腦用生理鹽水制成10%勻漿，測定大腦 組織中的超氧化物歧化酶(SOD)，丙二醛(MDA)和乳酸脫氫酶(L鵬含量和腦 勻漿蛋白含量。由表2可見銀杏內酯可使局灶性腦缺血大鼠再灌注損傷的腦組織內的 MDA含量降低，表明組織缺血缺氧和過氧化程度受到明顯抑制；同時提高SOD 含量和LDH的活力，表明該藥物對機體抗氧化能力和清除自由基的能力有提 高作用。
表2銀杏內酯對局灶性腦缺血大鼠腦勻漿生化指標的影響(ZFlO，如Bll劑量MDAS0DLDH組別(rag/kg)nmol/mgprotNU/mgprotu/mgprot假手術組一56.30±21. 1 *66.3±4.8 *8.4±1.7 *模型對照組_168.8±35.222. 6±8. 23. 7±1. 112.5118. 7 ±28. 2**32. 7±9. 4*4.7±1.9銀杏內酯25. 0113. 3 ±29.0**35.6±11. 7林5. 6±1. 0林50.094.0 ±25. 6**45. 1±7. 2**6. 1±0. 7**尼膜地平組1.5113. 8 ±35. 3林40. 3 ±8. 9**5. 3 ±1.37**注*p〈0.05， **p〈0.01與模型對照組比較3. 3對局灶性腦缺血大鼠腦組織學的影響分組、給藥劑量、造模方法同前。MCA0后24h斷頭處死大鼠，取出全腦 于10%甲醛溶液中固定。標本于臘制模具中切片后作H.E.染色，對大腦皮層 海馬進行病理組織學檢査。假手術組各例腦組織神經(jīng)元及膠質細胞正常，核膜清楚，核仁明顯， 未見神經(jīng)變性、壞死及炎細胞浸潤等明顯病理改變。缺血模型組各例腦組織均見神經(jīng)元結構模糊，胞體腫脹，尼氏小體減少或消失，出現(xiàn)不同程度的核深染，核固縮，核溶解，核體不規(guī)則，并見明 顯軟化灶形成。銀杏內酯三個劑量組，大腦皮質錐體細胞和腦實質神經(jīng)細胞的核固縮、 核溶解程度比缺血對照組明顯減輕，軟化灶減少。其中高劑量效果最為顯著, 而低劑量組的效果不明顯。尼膜地平組對照組大腦皮質錐體細胞和腦實質神經(jīng)細胞的核固縮、核溶 解程度與缺血對照組相比也明顯減輕，軟化灶也減少，對腦缺血造成的腦組 織損傷也有明顯保護作用。4、 實驗結果由以上試驗可知，銀杏內酯可延長小鼠在耐缺氧狀態(tài)下的存活時間；可 增加小鼠不完全腦缺血模型的存活個數(shù)；對大鼠局灶性腦缺血及實驗性全腦 缺血均有一定的保護作用。實驗例4 銀杏內酯注射液治療動脈粥樣硬化性血栓性腦梗死的臨床研究1. 治療方法試驗組銀杏內酯注射液l支/次。對照組舒血寧注射液5ml/次，均加于生理鹽水250ml靜脈滴注，l次/日，連續(xù)用藥14天；在試驗期間，出現(xiàn)血壓增高者，不用具有擴張血管作用的降壓藥；合并糖尿病者，可選用降糖藥；不用去纖酶、抗栓酶、尿激酶、 維腦路通、低分子右旋糖酐、復方丹參注射液、丹參注射液、脈絡寧、川芎 嗪、血塞通、清開靈等對缺血中風有治療作用的藥物，不用活血化瘀中藥內 服，不用擴張血管、抗凝、抗血小板聚集的西藥，不結合針灸、推拿治療。2. 實驗結果(1) 治療14天后，試驗組患者神經(jīng)功能缺損程度總評分平均下降5. 74 土3.27分，平均下降率為43.34±22.20,對照組患者神經(jīng)功能缺損程度總 評分平均下降4. 12士2.80分，平均下降率為33.45±20.64，兩組比較，試 驗組明顯優(yōu)于對照組(P=0.0001);(2) 治療14天后，試驗組患者生活能力狀態(tài)平均下降1. 03±0. 69級， 對照組患者生活能力狀態(tài)平均下降0.70±0.63級，兩組比較，試驗組明顯 優(yōu)于對照組；(3) 治療14天后，試驗組患者中醫(yī)證候指標(上肢不遂、下肢不遂、 口舌喁斜、舌謇或失語、感覺減退或消失、頭暈目眩、痰多而粘等按病情輕 重程度用記分方法評估)總評分平均下降6.67±4.53分，平均下降率為 37. 71 ±24. 03;對照組總評分平均下降4. 42±4. 19分，平均下降率為24. 89 ±26.04，兩組比較，試驗組明顯優(yōu)于對照組(P=0.0001);(4) 兩組治療14天后，試驗組中醫(yī)證候療效總有效率為63. 19%，對 照組為40. 59%,兩組差異有統(tǒng)計學意義；試驗組臨床療效總有效率為85. 67 %;對照組為73.27%，兩組差異有統(tǒng)計學意義。實驗例5 銀杏內酯注射液治療腔隙性腦梗死的臨床研究 1.治療方法試驗組銀杏內酯注射液l支/次。對照組舒血寧注射液5ml/次，均加于生理鹽水250ml靜脈滴注，l次/日，連續(xù)用藥14天；在試驗期間，出現(xiàn)血壓增高者，不用具有擴張血管作 用的降壓藥；合并糖尿病者，可選用降糖藥；不用去纖酶、抗栓酶、尿激酶、 維腦路通、低分子右旋糖酐、復方丹參注射液、丹參注射液、脈絡寧、川芎 嗪、血塞通、清開靈等對缺血中風有治療作用的藥物，不用活血化瘀中藥內 服，不用擴張血管、抗凝、抗血小板聚集的西藥，不結合針灸、推拿治療。 2.實驗結果(1) 治療14天后，試驗組患者神經(jīng)功能缺損程度總評分平均下降5. 21 ±3.44分，平均下降率為47.62±24.01,對照組患者神經(jīng)功能缺損程度總 評分平均下降3.67土2.74分，平均下降率為35.08士24.39，兩組比較，試 驗組明顯優(yōu)于對照組(P=0.0002);(2) 治療14天后，試驗組患者生活能力狀態(tài)平均下降0. 92±0. 87級， 對照組患者生活能力狀態(tài)平均下降0.67±0.72級，兩組比較，試驗組明顯 優(yōu)于對照組(P=0.0259);(3) 治療14天后，試驗組患者中醫(yī)證候指標(上肢不遂、下肢不遂、 口舌喁斜、舌謇或失語、感覺減退或消失、頭暈目眩、痰多而粘等按病情輕 重程度用記分方法評估)總評分平均下降7. 81 ±4. 73分，平均下降率為 45. 35±24. 70;對照組總評分平均下降5. 62±3. 94分，平均下降率為34. 04 ±23.07，兩組比較，試驗組明顯優(yōu)于對照組(P=0.0007);(4) 兩組治療14天后，試驗組中醫(yī)證候療效總有效率為72.12%，對 照組為54.90%，兩組差異有統(tǒng)計學意義(P-0.0048);試驗組臨床療效總有 效率為89.42。^;對照組為68.63%，兩組差異有統(tǒng)計學意義(P=0.0004)。下述實施例均能實現(xiàn)上述實驗例的效果。
具體實施方式
實施例l:銀杏內酯注射液，50mg/支，25 75mg/次，l次/日，治療腔隙性 腦梗死。實施例2:銀杏內酯注射液，50mg/支，25 75mg/次，l次/日，治療動脈粥 樣硬化性血栓性腦梗死。實施例3:銀杏內酯膠囊，0.35g/粒，l粒/次，3次/日，治療腔隙性腦梗死。
實施例4:銀杏內酯膠囊，0.35g/粒，l粒/次，3次/日，治療動脈粥樣硬化 性血栓性腦梗死。實施例5:銀杏內酯軟膠囊，0.35g/粒，l粒/次，3次/日，治療腔隙性腦梗 死。實施例6:銀杏內酯軟膠囊，0.35g/粒，l粒/次，3次/日，治療動脈粥樣硬 化性血栓性腦梗死。實施例7:銀杏內酯口服液，10ml/支，l支/次，3次/日，治療腔隙性腦梗 死。實施例8:銀杏內酯口服液，10ml/支，l支/次，3次/日，治療動脈粥樣硬 化性血栓性腦梗死。實施例9:銀杏內酯片，0.45g/片，5片/次，3次/日，治療腔隙性腦梗死。 實施例10:銀杏內酯片，0.45g/片，5片/次，3次/日，治療動脈粥樣硬化 性血栓性腦梗死。實施例ll:銀杏內酯丸， 一次6 9克， 一日2次，治療腔隙性腦梗死。 實施例12:銀杏內酯丸， 一次6 9克， 一日2次，治療動脈粥樣硬化性血 栓性腦梗死。實施例13:銀杏內酯滴丸，35mg/粒，10粒/次，3次/日，治療腔隙性腦梗 死。實施例14:銀杏內酯滴丸，35mg/粒，10粒/次，3次/日，治療動脈粥樣硬 化性血栓性腦梗死。實施例15:銀杏內酯顆粒，口服， 一次lg， 一日3次，lg/袋，治療腔隙性 腦梗死。實施例16:銀杏內酯顆粒，口服， 一次lg， 一日3次，lg/袋，治療動脈粥 樣硬化性血栓性腦梗死。實施例17:銀杏內酯凍干粉針，50mg/支，50 100mg/支，l次/日，治療腔 隙性腦梗死。實施例18:銀杏內酯凍干粉針，50mg/支，50 100mg/支，l次/日，治療動 脈粥樣硬化性血栓性腦梗死。
實施例19:銀杏內酯緩釋膠囊，0.35g/粒，l粒/次，3次/日，治療腔隙性 腦梗死。實施例20:銀杏內酯緩釋膠囊，0.35g/粒，l粒/次，3次/日，治療動脈粥 樣硬化性血栓性腦梗死。實施例21:銀杏內酯緩釋片，0.45g/片，5片/次，3次/日，治療腔隙性腦 梗死。實施例22:銀杏內酯緩釋片，0.45g/片，5片/次，3次/日，治療動脈粥樣 硬化性血栓性腦梗死。實施例23:銀杏內酯緩釋軟膠囊，0.35g/粒，l粒/次，3次/日，治療腔隙 性腦梗死。實施例24:銀杏內酯緩釋軟膠囊，0.35g/粒，l粒/次，3次/日，治療動脈 粥樣硬化性血栓性腦梗死。
權利要求
1、一種銀杏內酯在制備治療動脈粥樣硬化性血栓性腦梗死的藥物制劑中的應用。
2、 一種銀杏內酯在制備治療腔隙性腦梗死的藥物制劑中的應用。
3、 如權利要求1或2所述的應用，其中藥物制劑是膠囊劑、軟膠囊、 口服液、片劑、丸劑、滴丸、顆粒劑、注射液、凍干粉針劑或緩釋制劑。
全文摘要
本發(fā)明屬醫(yī)藥領域，具體而言是涉及一種銀杏內酯在制備治療動脈粥樣硬化性血栓性腦梗死和腔隙性腦梗死的藥物中的應用。實驗證明銀杏內酯及其制劑可為心腦血管疾病，特別是動脈粥樣硬化性血栓性腦梗死、腔隙性腦梗死提供療效確切、生物利用度高的臨床藥物。
文檔編號A61P9/10GK101396356SQ20071017535
公開日2009年4月1日 申請日期2007年9月28日 優(yōu)先權日2007年9月28日
發(fā)明者婭 凌, 強 尚, 戴翔翎, 柳于介, 王振中, 章晨峰, 偉 蕭 申請人:江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司