專利名稱::一種含有卡維地洛和血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑的藥物組合物在制備用于治療腎病的藥物...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
:本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域:
,具體涉及一種含有卡維地洛和血管緊張素n受體拮抗劑的藥物組合物在制備用于治療腎病的藥物中的用途。背榮技術(shù)隨著醫(yī)藥科學(xué)的不斷發(fā)展,人們逐漸對(duì)腎病的危害有了更深的認(rèn)識(shí),由流行病學(xué)調(diào)查證據(jù)表明,慢性腎臟病已經(jīng)成為一個(gè)威脅全世界公共健康的主要疾病,這是公共衛(wèi)生學(xué)專家和醫(yī)學(xué)專家最近十幾年來才認(rèn)識(shí)到的客觀事實(shí)。慢性腎臟病包括多種腎臟疾病如慢性腎小球腎炎、fBJ質(zhì)性腎炎、慢性尿路感染、腎小管疾病、獰尿病腎病、狼瘡性腎炎、腎血管疾病和腎功能不全尿毒癥等。如治療不及時(shí)或不當(dāng),可能導(dǎo)致尿毒癥,使得大量代謝廢物在體內(nèi)蓄積,機(jī)體內(nèi)環(huán)境遭到破壞,最終可能導(dǎo)致死亡??ňS地洛是一種新的非選擇性的腎上腺素能第三代受體阻滯劑,是一種新型有多種藥理活性的抗高血壓藥物,兼有e受體和a受體的雙重阻滯作用,具有良好的無內(nèi)源性擬交感神經(jīng)活性,高濃度時(shí)尚有鈣拮抗作用,且具有明顯的抗自由基、抗氧化、心臟和神經(jīng)保護(hù)、抗心律失常和抗缺血作用,有調(diào)節(jié)代謝紊亂、阻止平滑肌細(xì)胞增殖及抑制心肌細(xì)胞凋亡等作用。因此,卡維地洛不僅具有較好的降壓作用,而且能夠逆轉(zhuǎn)心血管重構(gòu),有利于心力衰竭、心肌梗塞、動(dòng)脈粥樣硬化、血管再狹窄等疾病的治療??ňS地洛被認(rèn)為是一種非常有前途的藥物,在臨床試驗(yàn)中廣泛應(yīng)用于輕、中度原發(fā)性高血壓的治療,冠心病及充血性心力衰竭的治療,并和其它降壓藥聯(lián)合應(yīng)用于慢性充血性心力衰竭的治療。近些年來對(duì)卡維地洛的研究進(jìn)一歩深化,通過臨床觀察,發(fā)現(xiàn)它的藥理學(xué)作用比第l,2代P—受體阻滯劑更廣,能阻滯3^腎上腺素能受休(a、Pl和e受休),并具有調(diào)節(jié)兒茶酚胺對(duì)心臟、末梢血管和腎臟的不利影響,逆轉(zhuǎn)血管緊張素和受體改變等的聯(lián)合調(diào)節(jié)作用。近年M世的血管緊張素I1受體拮抗劑被譽(yù)為九十年代心血管藥物的一個(gè)里程碑。血管緊張素II通過AT1受體介導(dǎo)體內(nèi)絕大部分的生理和病理反應(yīng),在高血壓、粥樣硬化、心室肥厚、糖尿病和腎病中的發(fā)生發(fā)展都起到重耍作用。1994年第一個(gè)非膚類ATi受體拮抗劑氯沙坦應(yīng)用于臨床,隨后-4H:同類藥物如纈沙坦、伊貝沙坦等相繼上市。上述些藥物均選擇性作用于AT1受體,降壓作用持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),通常一日只需l次。隨著人們對(duì)AT1受體拮抗劑的臨床應(yīng)用和研究的深入,它越來越顯現(xiàn)出其在降壓領(lǐng)域的重要地位。臨床研究表明,ATI受體拮抗劑具有與ACE抑制劑類似的降壓效果和靶器官保護(hù)作用,而且不良反應(yīng)顯然要少于ACE抑制劑,很少發(fā)生相關(guān)的咳嗽和低血壓,這可能是由于AT1受體拮抗劑不影響ACE活性,從而不會(huì)導(dǎo)致緩激肽的蓄積。ATI受體拮抗劑是在受體水平阻斷血管緊張素II的作用,所以能夠比ACE抑制劑更為完全地抑制血管緊張素II的不利效應(yīng)。最近的大規(guī)模臨床研究表明,AT1受體拮抗劑對(duì)高血壓患者的心臟、血管和腎臟有直接的保護(hù)作用,而且這種保護(hù)作用不依賴于藥物的降壓效應(yīng)。這些特點(diǎn)無疑增加了AT1受體拮抗劑的臨床應(yīng)用價(jià)值,特別是高危高血壓患者。目前血管緊張素n受體拮抗劑(ARB)已被廣泛應(yīng)用于臨床。1、高血壓包括對(duì)各種輕、中度高血壓都有良好的療效,迄今的臨床試驗(yàn)證實(shí)ARB在抗高血壓方面至少與其他類藥物有相同療效。2、心力衰竭充血性心力衰竭的主要病因?yàn)楦哐獕骸⒐谛牟?包括心肌梗塞)、瓣膜病、心肌病等許多心血管疾病所致,RAS在心'衰病理生理機(jī)制中起重要作用,ACEI對(duì)心衰的治療中取得較好療效,因此,它作為治療心衰的首選藥物,也常指為治療心衰的金標(biāo)準(zhǔn)。3、左室肥厚研究證明血管緊張素n引起心肌蛋白合成增加,細(xì)胞肥大,基質(zhì)增加,主要是AT1受體起作用,故ARB可逆轉(zhuǎn)LVH。4、對(duì)腎臟保護(hù)作用在非腎性高血壓患者和腎性疾病患者中用A朋治療對(duì)腎小球?yàn)V過率沒有影響,ARB能減少高血壓或糖尿病所致腎功能不全加重。腎功能的進(jìn)行性惡化與RAS激活有關(guān),主要是ANGII既可通過增加腎小球毛細(xì)血管內(nèi)壓這一間接途徑造成對(duì)腎臟的損害,亦可通過刺激腎臟細(xì)胞分泌各種細(xì)胞因子引起腎臟損傷。研究發(fā)現(xiàn),氯沙坦能明顯減少伴有糖尿病或腎功能正常的高血壓患者的蛋白尿,并有促進(jìn)尿酸、尿鈉排泄的腎臟保護(hù)作用。JoharmeS等將纈沙坦用于腎功能不全病人,能降低血壓,有效增加腎血流量并減少尿蛋白量,微量蛋白尿和高血壓是促使糖尿病腎病發(fā)生發(fā)展的重要危險(xiǎn)因素。有實(shí)驗(yàn)表明,伊貝沙坦對(duì)并發(fā)糖尿病的高血壓患者有改善腎功能和微量蛋白尿的效應(yīng)。5、對(duì)腦的保護(hù)作用RAS以及局部AngII參與腦血流自動(dòng)調(diào)節(jié),維持腦血流的相對(duì)穩(wěn)定,A腿可產(chǎn)生腦血流自動(dòng)調(diào)節(jié)的有益變化,故用ARB使周身血壓降低,但不會(huì)引起腦血流減少。6、對(duì)血管的保護(hù)作用高血壓患者外周血管阻力的增高與血管本身的功能和結(jié)構(gòu)改變有關(guān),由于血管側(cè)壓升高,使血小板凝聚,血小板衍化生長(zhǎng)因子釋放,血管平滑肌細(xì)胞增殖、肥大和遷移,基質(zhì)增多,血管壁增厚,管腔縮小使血管對(duì)活性物質(zhì)反應(yīng)性增高,血管儲(chǔ)備功能下降,這種血管重塑對(duì)患者危害極大。7、對(duì)心肌梗塞(MI)作用心肌內(nèi)部RAS可能在MI發(fā)生、發(fā)展中起主要作用,ARB、ACEI或腎素抑制劑,均可減少室性心律失常的持續(xù)時(shí)間,而僅ARB具有明顯減少室性心律失常持續(xù)時(shí)間的作用,結(jié)果顯示ARB在MI的應(yīng)用價(jià)值可能優(yōu)于ACEI??傊?,血管緊張素II受體拮抗劑(ARB)作為新的-類藥物,在高血壓、心力衰竭、心肌梗塞、腎臟病、糖尿病及心腦血管疾病防治中有廣泛前景,現(xiàn)有的臨床資料表明血管緊張素ll(AngII)受體拮抗劑類制劑安全、有效,耐受性好,有心、'腦、腎保護(hù)作用。血管緊張素n受體拮抗劑對(duì)腎臟的保護(hù)作用是眾所周知的,通過檢索發(fā)現(xiàn)已有聯(lián)今使用卡維地洛和纈沙坦治療難治性心力衰竭的報(bào)道,尚未發(fā)現(xiàn)國(guó)內(nèi)外有聯(lián)合使用卡維地洛和血管緊張素n受體拮抗劑類藥物治療腎病的相關(guān)文獻(xiàn),本發(fā)明在利用公開已知的血管緊張素II受體拮抗劑類藥物對(duì)腎病有特殊療效和卡維地洛在高血壓治療方面的顯著作用,通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)兩者聯(lián)合應(yīng)用在對(duì)腎病的治療方面確實(shí)有協(xié)同作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一種含有活性成分卡維地洛和血管緊張素II受體拮抗劑的藥物組合物在制備用于治療腎病的藥物中的用途。本發(fā)明的目的在于利用卡維地洛和血管緊張素n受體拮抗劑這兩者的協(xié)同聯(lián)合用藥發(fā)明一種更有效治療腎病的方法。該藥物組合物用于治療腎病,尤其是糖尿病腎病和高血壓腎病。所述的血管緊張素H受體拮抗劑包括氯沙坦、纈沙坦、替米沙坦、依普沙坦、厄貝沙坦、坎地沙坦、他索沙坦?;诂F(xiàn)在臨床上使用血管緊張素n受體拮抗辨i類藥物來治療腎病效果并不很理想,并且伴有嚴(yán)重不良反應(yīng)的現(xiàn)狀,我們魯南制藥股份有限公司根據(jù)臨床和患者的需求創(chuàng)造性的在現(xiàn)有方案中引入/3受體阻滯劑卡維地洛,取得了非常好的協(xié)同效果。由實(shí)施例ii、實(shí)施例12和實(shí)施例13可以看出血管緊張素II受體拮抗劑與卡維地洛聯(lián)合應(yīng)用在治療腎病方面紘單純使用血管緊張素II受體拮抗劑藥物有相當(dāng)明顯的優(yōu)勢(shì)。本發(fā)明組合物的治療腎病的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在下列幾個(gè)方面一、血管緊張素H受體拮抗劑與卡維地洛聯(lián)合應(yīng)用對(duì)腎病具有很好的協(xié)同治療效果。二、根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,臨床長(zhǎng)期使用本發(fā)明的組合物制備的藥物,對(duì)腎病患者的長(zhǎng)期生存率會(huì)產(chǎn)生有益的影響,會(huì)對(duì)患者的預(yù)后產(chǎn)生積極的影響,這也是本發(fā)明所解決的最具有意義的臨床治療問題。三、本發(fā)明的適用范圍廣。本發(fā)明由于其協(xié)同作用機(jī)審i適用于多種類型的腎病患者,尤其適甩于高血壓腎病患者和糖尿病腎病患者。另外對(duì)于急性腎功能不全、慢性腎功能不全及各類疾病引起的繼發(fā)性腎病會(huì)有很好的效果。根據(jù)藥物的性質(zhì)和患者用藥方便的需要,我們將本發(fā)明的藥tf組合物制備成片劑、膠囊、顆粒劑、滴丸、散劑、口服液、注射劑。其中片劑包括普通片劑、分散片、緩釋片等熟型。其中卡維地洛和血管緊張素II受體拮抗劑的組成比例為1:3~1:25,優(yōu)選比例為1:":10。具體實(shí)施例現(xiàn)通過如下實(shí)施例進(jìn)一歩說明本發(fā)明的內(nèi)容,但本發(fā)明的應(yīng)用范圍不限于下列實(shí)施例。實(shí)施例l復(fù)方片劑卡維地洛10g纈沙坦30g微晶纖維素10g淀粉I鄉(xiāng)g硬脂酸鎂2g幾甲基淀粉鈉20g!0%淀粉漿適量制備工藝將處方量的卡維地洛和纈沙坦過l柳目篩,羧甲基淀粉鈉、淀粉、微晶纖維素過抑目篩,混勻后加入適量10%淀粉漿制粒,干燥后加入硬脂酸鎂后壓片,即得。實(shí)旌例2復(fù)方散劑卡維地洛2.5g厄貝沙坦(52.5g微晶纖維素H)g淀粉拘g(shù)制備工藝將處方量的卡維地洛和厄貝沙坦過100目篩,淀粉、微晶纖維素過80巨篩,混合均勻,分裝,即得。實(shí)施例3復(fù)方片劑卡維地洛坎地沙坦酯10g微晶纖維素Mg淀粉140g10%淀粉漿適量羧甲基淀粉鈉20g硬脂酸鎂2g制備工藝將處方量的卡維地洛和坎地沙坦酯過100目篩,羧甲基淀粉鈉、淀粉、微晶纖維素過80目篩,混勻后力BA^量10%淀粉漿制粒,干燥后加入硬脂酸鎂后壓片,即得。實(shí)施例4復(fù)方分散片卡維地洛10g氯沙坦50g羧甲基纖維素鈣30g交聯(lián)聚乙烯吡咯垸酮30g微晶纖維素100g10%淀粉漿適量硬脂酸鎂2g制備工藝將處方量盼卡維地洛和氯沙坦過M)O目篩,羧甲基纖維素鈣、交聯(lián)聚乙烯吡咯垸酮、微晶纖維素過8目篩,混勻后加入適量10%淀粉漿制粒,干燥后加入硬脂酸鎂后壓片,即得。實(shí)施例5復(fù)方顆粒劑卡維地洛的g纈沙坦50g乳糖120g交聯(lián)聚乙烯吡咯烷鵬40g75%乙醇溶液適量制備工藝將處方量的卡維地洛和纈沙坦過100目篩,把交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮和乳糖粉碎過篩后混合、加入75%乙醇溶液制粒、F燥、總混后進(jìn)行顆粒分裝即可。實(shí)施例6復(fù)方膠囊卡維地洛8g氯沙坦柳g微晶纖維素160g硬脂酸鎂2g微粉硅膠lg制備工藝將藥物和上述輔料混合均勻,審上成均勻微粉,填充至空心膠囊內(nèi),然后封口、整理包裝,即得。實(shí)施例7復(fù)方滴丸卡維地洛2.5g纈沙坦12.5g聚乙二醇-6006135g制備工藝將處方量的卡維地洛和纈沙坦過i柳目篩,與聚乙二醇-60oe混勻,加熱至熔融狀態(tài),攪拌均勻,在保溫狀態(tài)下采用機(jī)械裝置將藥料滴入冷的二甲基硅油中,冷卻成型,洗去二甲基硅油,即得。實(shí)施例8復(fù)方緩釋片卡維地洛10g替米沙坦30g乙基纖維素50g微晶纖維素lGOg乳糖45g80%乙醇溶液適量硬脂酸鎂2g制備工藝將處方量的卡維地洛、替米沙坦和乙基纖維素、微晶纖維素、乳糖混合均勻加入80%乙醇溶液制粒、在70t80TC下干燥、整粒,后加入處方量的硬脂酸鎂混合均勻,壓片,即得。實(shí)施例9復(fù)方緩釋片卡維地洛10g纈沙坦5Qg瓜耳膠340g微晶纖維素30g95%乙醇溶液適量硬脂酸鎂4g制備工藝將處方量的卡維地洛、纈沙坦、瓜耳膠、微晶纖維素混合均勻加入95%乙醇溶液制粒,在7&TC柳"C下干燥、整接,在顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂混勻,壓片,即得。實(shí)躺IO復(fù)方口服液卡維地洛12g纈沙坦40g錯(cuò)240g苯甲酸鈉0.5g純化水加至1000ml制備工藝將處方量的卡維地洛、纈沙坦、乳糖混合均勻加80%左右的處方的水?dāng)嚢杈鶆?,加水至全量,加入即得苯甲酸鈉攪拌均勻,過濾,灌裝,滅菌,即得。實(shí)旌例11卡維地洛和纈沙坦復(fù)方對(duì)大鼠加速型腎小球硬化的治療效果方法加速型腎小球硬化模型的建立采取在摘除一側(cè)腎的基礎(chǔ)上通過兩次尾靜脈注射柔紅霉素,建立腎病動(dòng)物模型。切除一側(cè)腎,可對(duì)殘腎造成高灌注,高濾過,高跨膜壓狀態(tài),將原分布于雙腎的柔紅霉素集中于一側(cè)腎臟,減少了用量,減弱了副作用,加速了病變的發(fā)展,促使病變趨向一致。柔紅霉素能產(chǎn)生自由基和脂質(zhì)過氧化的毒副作用及針對(duì)腎小球和腎小管上皮細(xì)胞產(chǎn)生的直接毒性。我們采用大鼠一側(cè)腎切除加重復(fù)注射柔紅霉索,獲得了病理類型均一的腎小球硬化動(dòng)物模型。1.實(shí)驗(yàn)材料SPF級(jí)SD大鼠32只,體重80-100g,雄性32只2.操作步驟與代謝籠中分籠飼養(yǎng)。自由飲水,標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)。適應(yīng)1周,禁食12h后,0.5%戊巴比妥腹腔注射麻醉,經(jīng)背部切口摘除左側(cè)腎臟,并在腎摘除第7、14天,分別由尾靜脈注射柔紅霉素5mg/kg。隨機(jī)分為4組,每組8只,模型組(每天同林積1%鹽水灌胃)、纈沙坦組(給藥劑量40mg/kg.d)、卡維地洛組(給藥劑量4mg/kg.cO、纈沙坦卡維地洛組(給藥劑量纈沙坦40mgAg.d+卡維地洛4呢/}^.{0。各組均為灌胃給藥,所有動(dòng)物均飲用1%的鹽水。實(shí)驗(yàn)過程中,每日觀察動(dòng)物飲食、存活情況及行為活動(dòng),每日測(cè)量體重,根據(jù)體重調(diào)整藥物用量。A觀察指標(biāo)L尿中徵量白蛋白的糖定試劑1、10%(v/v〉的冰醋酸溶液(PH2.8)。2、0.303mol/L甘氨酸-冰醋酸緩沖液(PH3.0):稱取22.72g甘氨酸,用10%冰醋酸溶液稀釋成1000ml,加NaN:,100mg,室溫密封可穩(wěn)定1年。3、溴船藍(lán)(1.924ranol/L〉貯存液精確稱取257、36mgliPB,用無水乙醇溶至200ml,4匸冰箱可穩(wěn)定1年。4、溴酚藍(lán)(0.231咖ol/L)顯色劑取60mlBPB貯存液,加入2.5mlTritonX-100,用甘氨酸-冰醋酸緩沖液稀釋至50Om],室溫密封可保存l年。標(biāo)本的采集和檢測(cè)于摘腎第IO周將大鼠分別放于代謝籠中,正常飲食,收集隔夜12小時(shí)尿,準(zhǔn)確記錄尿量。取4ml,疊氮鈉處理后,離心(2000r/min)lOmin,取上清液置一20'C冰箱保存待測(cè)尿白蛋白。取大鼠尿液4ml于對(duì)應(yīng)的杯內(nèi),各加2ml顯色劑,混勻(防止產(chǎn)生氣泡〉,用紫外分光光度計(jì),于600nm下測(cè)定吸光度A。表1各組大鼠尿中微量微白蛋白測(cè)定的吸光度值組別11吸光度A(600nm)模型組80.684±0.157纈沙坦組80.503±0.164卡維地洛組80.606±0.251纈沙坦卡維地洛組&&400±0.195#'與模型組相比較,P<0.05.白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值與微量白蛋白含量呈線性關(guān)系,吸光度值可用于比較大鼠蛋白尿含量。模型組大鼠尿蛋白自第2次注射柔紅霉素后1周開始增加,第2周時(shí)尿蛋白定量24h表現(xiàn)出大量蛋白尿,并不斷增加,高峰(9周)時(shí)24h達(dá)到最大值。結(jié)果表明,卡維地洛和纈沙坦的聯(lián)合應(yīng)用在影響大鼠腎小球硬化尿微量白蛋白方面有很好的協(xié)同作用。2.腎功能指標(biāo)于摘腎第2、7、9周,分別測(cè)定每組大鼠血清肌酐(Cr〉、血清尿素氮(BUN)。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>'與模型組相比較,P<0.05,"與模型組相比較,P<0.01.模型組大鼠Cr于用藥第2周丌始增高,第9周時(shí)達(dá)高'峰(366.2士63.4)jimol/L,BUN自用藥第2周開始升高,第7周時(shí)達(dá)高峰(68.9士39.4)mmol/L,且一直持續(xù)到第9周。結(jié)果表明,纈沙坦組、卡維地洛組與模型組相比較,在這個(gè)模型中對(duì)腎臟功能的保護(hù)效果不是很明顯。纈沙坦卡維地洛聯(lián)合用藥組與模型組比較有顯著性差異(pO.Ol)。說明卡維地洛和纈沙坦的聯(lián)合應(yīng)用在影響大鼠血清肌酑(Cr)、尿素氮(BUN)方面有很好的協(xié)同作用。3.膠原蛋白含量測(cè)定首先對(duì)膠原蛋白的定量方法進(jìn)行了考察,確立了適宜膠原蛋白含量淵定(以羥脯氨酸計(jì))的方法。根據(jù)羥脯氨酸在氧化劑的作用下所產(chǎn)生的氧化產(chǎn)物與二甲氨基苯甲酵作用呈現(xiàn)紫紅色的原理,根據(jù)其呈色的深淺推算羥脯氨酸的含量,按公式求出被測(cè)樣品的羥脯氨酸的含量,單位為羥脯氨酸pg/mg。羥脯氨酸為膠原纖維所特有,測(cè)定羥脯氨酸的含量,可換算成腎膠原蛋白的含量,以反映腎纖維化程度。分別準(zhǔn)確稱取各組正常大鼠腎組織濕重61.4mg,按測(cè)定試劑盒說明書測(cè)定腎臟中羥脯氨酸的含量,測(cè)得空白管吸光度0.015,標(biāo)準(zhǔn)管吸光度為0.538,羥脯氨酸計(jì)算公式如下羥脯氨酸含量(jig/mg濕重〉=(測(cè)定管吸光度-空白管吸光度)/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-空白管吸光度)*標(biāo)準(zhǔn)管含量(5ug/ml)*水解液總體積(ml〉/組織濕重(mg),再由羥脯氨酸含量折算出腎臟中總膠原含量,公式為膠原蛋白含量(嗎/mg)=羥脯氨酸/13.5%。表3組別羥脯氨酸含量模型組0.494±0.141纈沙坦組0.402±0.130卡維地洛組0.414±0.142纈沙坦+卡維ife洛組0.273±0J66##與模型組相比較,?<0.附.結(jié)果表明,卡維地洛,沙坦的聯(lián)合應(yīng)用對(duì)腎有一定的保護(hù)作用和在抑制大鼠腎纖維化方面有很好的協(xié)同作用。實(shí)施例12卡維地洛和替米沙坦復(fù)方對(duì)腎性高血壓大鼠腎臟的保護(hù)作用1-魏材料雄性SD大鼠32只,體重240260g2操作步驟手術(shù)采用3^戊巴比妥鈉(40"60mg/kg〉經(jīng)腹腔注射麻醉后,將大鼠置于溫暖的手術(shù)臺(tái),經(jīng)側(cè)腹切口,暴露左側(cè)腎臟,分離腎動(dòng)脈及分支,結(jié)扎左腎動(dòng)脈上段分支與中支,保留下段分支組,術(shù)后3d后切除右腎,構(gòu)建腎性高血壓伴腎衰的大鼠模型。大鼠術(shù)后飼養(yǎng)于清潔級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室,自由取食與飲水。隨機(jī)分為4組,每組8只,模型組(每天同體積1%鹽水灌胃〉、替米沙坦組(給藥劑量40mg/kg.d)、卡維地洛組(給藥劑暈4mg/kg.d)、替米沙坦+卡維地洛組(給藥劑量替米沙坦40mg/kg.d+卡維皿4呢/1^.d〉。各組均為灌胃給藥。所有動(dòng)物均飲用1%的鹽水。實(shí)驗(yàn)過程中,每R觀察,飲食、存活情況及行為活動(dòng),每閂測(cè)量體重,根據(jù)體重調(diào)整藥物用量。l觀察指標(biāo)l.尿中微量白蛋白的糖定標(biāo)本的采集和檢測(cè)于摘右腎第10周將大鼠分別放于代謝籠中,正常飲食,收集隔夜12小時(shí)尿,準(zhǔn)確記錄尿量.取4ml,疊氮鈉處理后,離心(2000r/min〉1Qmin,取上清液置一2(TC冰箱保存待測(cè)尿白蛋白。取保存的各組大鼠尿液4ml于對(duì)應(yīng)的杯內(nèi),各加2ml顯色劑,混勻(防止產(chǎn)生氣泡),用紫外分光光度計(jì),于600Bm下測(cè)定吸光度A。表4組別吸光度A(600nm)模型組替米沙坦組卡維地洛組888替米沙坦+卡維地洛組80.5152±0,1870.4513±0.5440.4681±.1450.2862±0.351##與模型組相比較,P<0.05.白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值與微量白蛋白含量呈線性關(guān)系,吸光度值可用于比較大鼠蛋白尿含量。結(jié)果說明卡維地洛和綴沙坦的聯(lián)合應(yīng)用在影響腎性高血壓大鼠尿微量白蛋白方面有很好的協(xié)同作用。2-腎功能指標(biāo)于摘右腎第2、5、8周,分^U定每組大鼠血清肌斷(Cr〉、血清尿素氮(BUN)。表5第2周第5周第8周CrBUNCr(lx咖VL)《ramol/L〉(fimol/L)模型組76.6±26.812.8±1&8223.6±41.5替米^Jfi組60.3±34.611.5±t4.5189.7±45.6卡維ife^組68.7±26.214.9±18.4190.2±47.6CrBUN55.6U4.5338.4±50,64S.7i25.32妙.2±58.350.6±24.63t2.6i46.2BUN(mmol/L〉31.5±24.323.6±26.526.3±33.1替+卡組35.3±22.4*1'0.1±11.5134,5土40.2"38.5±22.9*206.9±50.6"19.6±27.2'與模型組相比較,P<0.05,"與模型組相比較,P<0.01.結(jié)果表明,卡維地洛和替米沙坦的聯(lián)合應(yīng)用在影響腎性高血壓大鼠血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)方面有良好的協(xié)同作用?!?膠原蛋白含量aj定分別準(zhǔn)確稱取各組正常大鼠腎組織濕重6L4mg,按測(cè)定試劑盒說明書測(cè)定腎臟中^脯氨酸的含量,測(cè)得空白管吸光度0.015,標(biāo)準(zhǔn)管吸光度為0.538,羥脯氨酸計(jì)算公式如下羥臁氨酸含量(叫/呢濕重〉=(測(cè)定管吸光度-空白管吸光度)/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-空白管吸光度)x標(biāo)準(zhǔn)管含量(5i^/mOx水解液總體積(mO/組織濕重(rag),再由羥脯氨酸含量折算出腎臟中總膠原含量,公式為膠原蛋白含量(嗎/呢)=羥脯氨酸/13.5%。表6_羥脯氨酸含量_模型組0.452±0.108替米沙坦組0.443±0215卡維地洛組0.399±0.266替米沙坦+卡維地洛組0.302±0.134**與模型組相比較,P<0.05.結(jié)果表明,卡維地洛和替米沙坦的聯(lián)合應(yīng)用對(duì)腎有保護(hù)作用和在抑制腎性高血壓大鼠腎纖維化方面比單獨(dú)用一種藥物有更好的療效。實(shí)施例13卡維地洛和氯沙坦復(fù)方對(duì)糖尿病型腎病的腎保護(hù)作用1.實(shí)驗(yàn)材料雄性SD大鼠32只,體重18(K-200g,SPF級(jí)。2.實(shí)驗(yàn)步驟所有大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)l周后,禁食IOh,按56mg/kg左下腹腔內(nèi)一次性注射STZ,STZ臨用前用枸櫞酸鈉一枸櫞酸三鈉緩沖液(O.lmol/L,pH4.2)配制,5min內(nèi)用完。各大鼠在同一動(dòng)物房?jī)?nèi)分籠飼養(yǎng),標(biāo)準(zhǔn)飲食。連續(xù)測(cè)3d隨機(jī)血糖,若大鼠血糖值>16.67咖01/1^即糖尿病型腎病建模成功。隨機(jī)分為4組,每組8只,模型組(每天同體積1%鹽水灌胃)、氯沙坦組(給藥劑量40mg/kg.d)、卡維地洛組(給藥劑量細(xì)g/kg.d)、氯沙坦卡維地洛組(給藥劑量氯沙坦40mg/kg.d+卡維地洛4mg/kg.(0。各組均為灌胃給藥。所有動(dòng)物均飲用1%的鹽水。實(shí)驗(yàn)過程中,每日觀察動(dòng)物飲食、存活k況及行為活動(dòng),每日測(cè)量體重,根據(jù)體重調(diào)整藥物用量。3.觀察指標(biāo)3.1腎功能指標(biāo)于大鼠血糖值達(dá)到16.67ramol/L后第2、6、9周,分別測(cè)定每組大鼠血清肌酐(Cr)、血清尿素氮(BUN)。表8<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>'與模型組相比較,P<0.05,"與模型組相比較,P<0.01.結(jié)果說明卡維地洛和氯沙坦的聯(lián)合應(yīng)用在影響糖尿病腎病大鼠血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)方面有顯著性差異,有很好的協(xié)同作用。3.2膠原蛋白含量測(cè)定分別準(zhǔn)確稱取各組正常大鼠腎組織濕重W.4mg,按測(cè)定試劑盒說明書測(cè)定腎臟中羥脯氨酸的含量,測(cè)得空白管吸光度0.015,標(biāo)準(zhǔn)管吸光度為0.538,羥脯氨酸計(jì)算公式如下羥脯氨酸含量(fig/mg濕重)=(測(cè)定管吸光度-空白管吸光度)/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-空白管吸光度)x標(biāo)準(zhǔn)管含量(5ug/ml)x水解液總體積(ml〉/組織濕重(mg〉,再由羥脯氨酸含量折算出腎臟中總膠原含量,公式為膠原蛋白含量(fig/mg)=羥脯氨酸/13.5%。表9<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>結(jié)果表明,卡維地洛和氯沙坦l聯(lián)合用藥組膠原蛋白含量最低,說明該組大鼠腎纖維化程度最輕,可得知卡維地洛和氯沙坦的聯(lián)合應(yīng)用對(duì)腎有一定的保護(hù)作用和在抑制糖尿病腎病大鼠腎纖維化方面有很好的辦同作用。權(quán)利要求1.一種含有卡維地洛和血管緊張素II受體拮抗劑的藥物組合物在用于制備治療腎病的藥物中的用途。2.如權(quán)利要求1玩述的用途,其特征在于所述的藥物組合物用于制備治療糖尿病腎病或高血壓腎病的藥物。3.如權(quán)利要求1所述的用途,其特征在于所述的藥物組合物中卡維地洛和血管緊張素II受體拮抗劑的組成比例為1:125。4.如權(quán)利要求1所述的用途,其特征在于所述的藥物組合物中卡維地洛和血管緊張素II受體拮抗劑的組成比例為1:510。5.如權(quán)利要求1所述的用途,其特征在于所述的藥物組合物可以制備成片劑、膠囊、顆粒劑、丸劑、滴丸、.口服液、散劑、注射劑,其中片劑劑型包括普通片劑、分散片、緩釋片。.6.如權(quán)利要求1所述的用途,其特征在于所述的血管緊張素II受體拮抗劑包括氯沙坦、纈沙坦、替米沙坦、依普沙坦、厄貝沙坦、坎地沙坦或他索沙坦。全文摘要本發(fā)明提供了一種含有活性成分卡維地洛和血管緊張素II受體拮抗劑的藥物組合物在制備用于治療腎病的藥物中的用途,在于利用卡維地洛和血管緊張素II受體拮抗劑這兩者的協(xié)同作用,發(fā)明一種更有效治療腎病的方法。該藥物組合物用于治療腎病、糖尿病腎病、高血壓腎病等效果顯著。文檔編號(hào)A61K31/4164GK101417132SQ200710113178公開日2009年4月29日申請(qǐng)日期2007年10月22日優(yōu)先權(quán)日2007年10月22日發(fā)明者趙志全申請(qǐng)人:魯南制藥集團(tuán)股份有限公司