專利名稱：：一種治療肺結(jié)核的藥物制備方法及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及藥品制備方法及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，特別涉及芩部丹方顆粒劑制備方法及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，屬醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：結(jié)核病是一種古老的疾病，是嚴(yán)重危害人類健康的傳染病，是我國(guó)重點(diǎn)控制的重大疾病之一，也是全球關(guān)注的公共衛(wèi)生問(wèn)題和社會(huì)問(wèn)題。近年耐藥結(jié)核病的急驟增多，使結(jié)核病疫情明顯回升，2000年全國(guó)流調(diào)資料顯示，初始耐藥率為18.6%，其中對(duì)兩種以上一線抗癆藥耐藥者近60%;獲得性耐藥率為46.5%;耐多藥結(jié)核病(MDR.TB)耐藥率為10.7%,其中初始耐藥率為7.6%，獲得性耐藥率為17.1%，估計(jì)200萬(wàn)菌陽(yáng)肺結(jié)核病患者中近1/4為耐藥病例，由此而產(chǎn)生的大量"久治不愈"，對(duì)各種抗癆藥物耐藥、長(zhǎng)期排菌的慢性傳染性病人，對(duì)患者本人、家庭和社會(huì)都帶來(lái)了極大的痛苦和威脅。目前，臨床上用于抗結(jié)核的化藥只有12種，其中一線藥物異煙肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇均有明顯的肝毒性，鏈霉素有明顯的腎毒性及第八對(duì)腦神經(jīng)損害，二線藥多有明顯的胃腸道反應(yīng)或腎毒性、肝毒性，而抗結(jié)核治療必須聯(lián)合用藥，單用一二種藥易致細(xì)菌耐藥，造成結(jié)核病難治。全殺藥，異煙肼、利福平合用增加肝毒性。隨著抗結(jié)核藥的廣泛應(yīng)用，多重耐藥菌和藥物的毒副作用已成為化療失敗的主要原因，使相當(dāng)一部分肺結(jié)核患者病灶反復(fù)惡化，形成難治性肺結(jié)核。大量的中醫(yī)藥研究顯示，在化療的同時(shí)，配合中醫(yī)藥治療，有增加患者的依從性、提高患者的免疫能力和藥物殺菌、抑菌效果、降低毒性、降低耐藥的發(fā)生率等種種優(yōu)勢(shì)?？偨Y(jié)推廣中醫(yī)藥防治肺結(jié)核的經(jīng)驗(yàn)對(duì)提高肺結(jié)核的治愈率有重要意義。早在50年代，邵長(zhǎng)榮發(fā)現(xiàn)在治療"癆病"中，許多報(bào)道運(yùn)用養(yǎng)陰潤(rùn)肺之劑，但療效不理想，痰菌往往不能轉(zhuǎn)陰，他查找了大量古代文獻(xiàn)選用黃苳清肺泄火，結(jié)合百部殺蟲止咳，再加丹參可改善病灶周圍的血液循環(huán)，去瘀生新，有利于藥物滲透，從而創(chuàng)制了"芩部丹方"，并制成芩部丹片應(yīng)用于臨床，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該藥除了使部分結(jié)核病人痰菌轉(zhuǎn)陰外，陰虛證也得到了改善。已公開(kāi)"芩部丹片"的制備工藝是發(fā)明專利，一種治療肺結(jié)核的藥物及其制備方法，申請(qǐng)?zhí)?00510028635.3，制備方法是百部10-30份、黃芩5-15份、丹參6-18份，百部用乙醇提取、鹽酸處理得百部總生物堿，黃芩提取黃芩苷，丹參用醇提取后，用水提取，大孔樹(shù)脂處理水提取物。該工藝的缺陷是百部中含有抗病原微生物成分和有鎮(zhèn)咳、祛痰作用的百部生物堿，該工藝只提取百部總生物堿，丟失了抗病原微生物成分，進(jìn)而降低了治療肺結(jié)核的療效；大孔樹(shù)脂處理丹參水提取物，可使大孔樹(shù)脂骨架殘留物如苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、烷烴類、二乙基苯類(二乙烯基)等有機(jī)殘留物引入提取物中，產(chǎn)生對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)、骨髓等的毒性；該工藝復(fù)雜成本高。現(xiàn)有技術(shù)還沒(méi)有"芩部丹方"制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，無(wú)法在生產(chǎn)和使用中有效的保證產(chǎn)品質(zhì)量，進(jìn)而藥品療效得不到保證。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種治療肺結(jié)核的"芩部丹方"顆粒劑的制備方法。該方法工藝簡(jiǎn)單合理，能較多的保留藥物有效成分，不使用大孔樹(shù)脂，無(wú)大孔樹(shù)脂有機(jī)殘留物引入，生產(chǎn)成本低。本發(fā)明另一個(gè)目的是提供一種"芩部丹方"制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，使"芩部丹方"制劑在生產(chǎn)和使用中有效的保證產(chǎn)品質(zhì)量，進(jìn)而保證藥品療效。本發(fā)明目的一種治療肺結(jié)核的"芩部丹方"顆粒劑的制備方法是這樣實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明的藥物重量配比為丹參300-400份、百部700-800份、黃苳300-400份優(yōu)選為丹參375份、百部750份、黃芩375份本發(fā)明"芩部丹方"制劑通過(guò)如下方法步驟制備(1)丹參加7倍量乙醇回流提取2小時(shí)，回收乙醇，濃縮成稠膏。(2)丹參藥渣和百部、黃芩加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮1.5小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濃縮成稠膏。(3)合并步驟(1)、步驟(2)稠膏，干燥，粉碎，得干膏粉。(4)成型。取步驟(3)所得干膏粉加入制劑學(xué)中常用輔料，用制劑學(xué)中常用顆粒劑制備方法制成顆粒劑。以上各組份中，重量是以生藥計(jì)算的，在本發(fā)明中，若重量以克為單位，該組成可制成顆粒劑1000克。以上各組成是按重量份作為配比的，在生產(chǎn)時(shí)可按照相應(yīng)的比例增大或減少，如大規(guī)模生產(chǎn)可以以千克或以噸為單位，重量可以增大或減少，但各組份之間的生藥重量配比比例不變。本發(fā)明由"芩部丹方"改進(jìn)而得，功用清熱潤(rùn)肺，活血抗癆。主治肺癆兼夾瘀血，潮熱，咳嗽，胸痛如刺，或胸中肌膚甲錯(cuò)，面目黧黑，舌質(zhì)暗或有瘀斑，脈沉澀者。亦用于皮膚結(jié)核、流痰、瘰疬。本發(fā)明一種治療肺結(jié)核的藥物"芩部丹方"顆粒制備方法的有益效果是:用水提取，符合中醫(yī)傳統(tǒng)煎湯服用習(xí)慣，具有中醫(yī)特色，百部即保留了百部總生物堿，也未丟失抗病原微生物成分，進(jìn)而可提高治療肺結(jié)核的療效；不用大孔樹(shù)脂處理，可避免大孔樹(shù)脂骨架殘留物如苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、烷烴類、二乙基苯類(二乙烯基)等有機(jī)殘留物引入提取物中，進(jìn)而避免大孔樹(shù)脂骨架有機(jī)殘留物產(chǎn)生的毒性；該工藝簡(jiǎn)單成本低。本發(fā)明另一個(gè)目的是提供一種"芩部丹方"制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法是這樣實(shí)現(xiàn)的性狀本品為淺棕至深棕紅色顆粒，味苦、微甜。鑒別(1)取本品5g，研細(xì)，加甲醇20ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。另取黃芩對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取黃零苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含0.5mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2u1分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸為展開(kāi)劑，預(yù)飽和30分鐘，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品和對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。(2)取本品5g，研細(xì)，加乙醚30ml，超聲處理IO分鐘，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹參對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取丹參酮IL對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每lml含2mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)已烷一乙酸乙酯(6:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)。(3)取本品8g，研細(xì)，加7(m乙醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸去乙醇，殘?jiān)訚獍痹囈赫{(diào)節(jié)pH值至1011，再加氯仿20ml振搖提取，分取氯仿層，蒸干，殘?jiān)?%鹽酸溶液5ml使溶解，濾過(guò)。濾液分作兩份一份中滴加碘化鉍鉀試液，生成橙紅色沉淀；另一份中滴加硅鎢酸試液，生成乳白色沉淀。檢査應(yīng)符合《中國(guó)藥典》2005年版一部顆粒劑(附錄IC)項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。含量測(cè)定黃芩苷照《中國(guó)藥典》2005年版一部高效液相色譜法測(cè)定(附錄VID)。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280mri。理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)應(yīng)不低于2500。對(duì)照品溶液的制備精密稱取在6(TC減壓干燥4小時(shí)的黃芩苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含60ug的溶液，即得。供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取約0.5g，精密稱定，置50ml量瓶中，加50%甲醇，超聲處理(功率250W，工作頻率33KHZ)20分鐘，放冷，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每克含黃芩以黃芩苷(C21H18Ou)計(jì)，不得少于9mg。以上質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法是"芩部丹方"顆粒劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，在處方不變，提取工藝條件又能保證其藥物治療肺結(jié)核的基本物質(zhì)不變的情況下，本發(fā)明"芩部丹方"制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法用于其它劑型的檢驗(yàn)同樣適用。如改為片劑，性狀項(xiàng)改為本品為淺棕至深棕紅色韻片，檢查項(xiàng)改為應(yīng)符合《中國(guó)藥典》2005年版一部片劑(附錄ID)項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。其它質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法不變。如改為膠囊劑，性狀改為本品內(nèi)容物為淺棕至深棕紅色的顆粒和粉末，檢査項(xiàng)改為應(yīng)符合《中國(guó)藥典》2005年版一部膠囊(附錄IG)項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定，其它質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法改為取本品內(nèi)容物即可。為了更好的理解本發(fā)明，以下通過(guò)試驗(yàn)例進(jìn)一步闡述本發(fā)明的有益效果。下面試驗(yàn)旨在進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的作用，而非本發(fā)明的限制。試驗(yàn)例一.本發(fā)明芩部丹顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定方法研究性狀根據(jù)本品性狀描述，本品為淺棕色至深棕紅色顆粒；味苦、微甜。鑒別制定了黃芩、百部、丹參的鑒別。(1)黃芩的薄層鑒別取本品5g，研細(xì)，加甲醇20ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。另取黃芩對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取黃芩苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含0.5mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2^1分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸為展開(kāi)劑，預(yù)飽和30分鐘，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品和對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。(2)丹參中丹參酮IlA的薄層鑒別取本品5g，研細(xì)，加乙醚30ml，超聲處理10分鐘，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹參對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取丹參酮IlA對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每lml含2mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5^1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)已烷一乙酸乙酯(6:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)。(3)百部的鑒別取本品8g，研細(xì)，加70。/。乙醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸去乙醇，殘?jiān)訚獍痹囈赫{(diào)節(jié)pH值至1011，再加氯仿20ml振搖提取，分取氯仿層，蒸干，殘?jiān)?%鹽醉溶液5ml使溶解，濾過(guò)。濾液分作兩份一份中滴加碘化鉍鉀試液，生成橙紅色沉淀；另一份中滴加硅鎢酸試液，生成乳白色沉淀。檢查應(yīng)符合顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國(guó)藥典2005年版一部附錄IC)。1依據(jù)《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄IXF砷鹽檢查法，第一法對(duì)"芩部丹顆粒"砷鹽進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果<2PPm。同時(shí)依據(jù)《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄IXE重金屬檢査法，第二法XT芩部丹顆粒"重金屬進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果<10PPm。因此未列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)如下。1.1砷鹽檢查法標(biāo)準(zhǔn)砷溶液精密稱取105'C干燥至恒重的三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中，加20M氫氧化鈉溶液5ml溶解后，用適量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取jC備液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml用水稀釋至刻度，搖勻即得(每lml相當(dāng)于l.Oug的As)。標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備裝置的準(zhǔn)備取醋酸鉛棉花適量(60—100mg)撕成疏松狀，每次少量，用細(xì)玻璃棒均勻地裝入導(dǎo)氣管C中，松緊要適度，裝管高度為60—80mm。用玻璃棒夾取溴化汞試紙1片(其大小能覆蓋D頂口徑而不露出平面外為宜)，置旋塞D頂端平面上，蓋住孔徑，蓋上旋蓋E并旋緊。精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml，置A瓶中，加鹽酸5ml與水21ml，再加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g，立即將準(zhǔn)備好的導(dǎo)氣管C密塞于A瓶，并將A瓶置25-4(TC水浴中反應(yīng)45分鐘，取出溴化汞試紙，即得。供試品的制備取本品研細(xì)，稱取lg，精密稱定,加氫氧化鈣lg，混合,加少量水，攪勻,干燥后先用小火燒灼使炭化，再在50060(TC熾灼使完全灰化，放冷，加水4ml，使溶解，再加鹽酸5ml與水適量使成28ml,作為供試品溶液。依法檢查。檢查法取供試品溶液，置A瓶中，加碘化鉀5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g,立即將準(zhǔn)備好的導(dǎo)氣管C密塞于A瓶，并將A瓶置25-4(TC水浴中反應(yīng)45分鐘，取出溴化汞試紙，將生成的砷斑與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較，即得。結(jié)果判定供試液生成的砷斑比標(biāo)準(zhǔn)砷斑色淺,判為符合規(guī)定。1.2重金屬檢查法標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備精密稱取硝酸鉛0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml與水50ml溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，做貯備液備用。臨用前，精密量取貯備液10ml置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每lml相當(dāng)于10ug的Pb)。供試品溶液的制備取本品研細(xì)，稱取lg，精密稱定,置已熾灼至恒重的坩堝中，緩緩熾灼至完全炭化，放冷至室溫，加硫酸lml使?jié)駶?rùn)，低溫加熱至硫酸除盡后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷，在500-60(TC熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至對(duì)酚酞指示液顯中性，再加醋酸鹽緩沖液(PH3.5)2ml，微熱溶解后，移至納氏比色管中，加水稀釋成25ml(乙管)；另取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液(PH3.5)2ml，加水稀釋成15ml，微熱溶解后，移至納氏比色管中，用移液管加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液lml，再加水稀釋成25ml(甲管)，依法檢查。檢査法在上述兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較不得更深。結(jié)果判定乙管中顯出的顏色與甲管比較不得更深,含重金屬量小于10ppm。3批樣品重金屬、砷鹽試驗(yàn)結(jié)果如下。表13批樣品重金屬、砷鹽試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>含量測(cè)定1、儀器與試藥島津Lc-10ATVP型高效液相色譜儀；KromassilC18色譜柱5u，250X4.6mm，N-2000雙通道色譜工作站；Kromassilds色譜柱5u，250X4.6mm，Anastar色譜工作站。黃苳苷對(duì)照品(編號(hào)110715-200212,中國(guó)藥品生物制品檢定所，供含量測(cè)定用)。所用甲醇為色譜純。其它試劑均為分析純。2、專屬性實(shí)驗(yàn)分別取黃芩苷對(duì)照品、供試品(20060601)和不含黃芩的顆?？瞻?，照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中方法測(cè)定，得HPLC圖譜空白樣品對(duì)本品的測(cè)定無(wú)干擾；樣品和黃芩苷對(duì)照品在相應(yīng)的主峰位置上有相應(yīng)的色譜峰，且分離度較好。本方法操作簡(jiǎn)單，專屬性強(qiáng)。3、提取測(cè)定方法的設(shè)計(jì)根據(jù)黃芩苷的性質(zhì)，選用70%乙醇、50%甲醇為溶劑，分別采用超聲提取及回流提取，溶劑量設(shè)為30ml、40ml、50ml，時(shí)間設(shè)為10分鐘、20分鐘、30分鐘。實(shí)驗(yàn)如下取本品(批號(hào)20060601)10g，研細(xì)，取約0.5g，精密稱定，加相應(yīng)溶劑，提取，放冷，以相應(yīng)試劑稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml置10ml量瓶中，用相應(yīng)試劑稀釋至刻度，搖勻，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。測(cè)定結(jié)果表4<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>結(jié)果表明，本品回流提取與超聲提取測(cè)得含量接近，故采用超聲提取；以50%甲醇較70%乙醇提取分離效果好，故選擇以50%甲醇提?。患右毫繉?duì)測(cè)定無(wú)明顯影響；超聲提取20分鐘己提取完全，為確保提取完全，減小實(shí)驗(yàn)誤差選，故選擇以50%甲醇50ml超聲提取30分鐘。4、線性關(guān)系的考察精密稱取在60'C減壓干燥4小時(shí)的黃芩苷對(duì)照品10.31mg，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，作為對(duì)照品溶液。精密吸取上述對(duì)照品溶液1、2、3、4、5、6ml分別置10ml量瓶中，分別加入甲醇至刻度，其濃度分別為20.62、41.24、61.86、82.48、103.1、123.72mg/ml。分別吸取上述對(duì)照品溶液10ul注入液相色譜儀，測(cè)得峰面積積分值。以黃芩苷對(duì)照品的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程Y=59131x-4053.1,相關(guān)系數(shù)r=0.9999。表5線性關(guān)系的考察濃度mg/ml20.6241.2461.8682.48103.!123.72峰面積121238824207383667979486257561399047276905結(jié)果表明黃芩苷進(jìn)樣量在0.20621.2372嗎之間，與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。見(jiàn)圖15、精密度實(shí)驗(yàn)5.1重復(fù)性精密吸取同一供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果如下表6重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果樣品號(hào)123456峰面積381095238312743799355RSD(%)=0.44379簡(jiǎn)3783183380S165結(jié)果表明重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果良好。5.2中間精密度取本品(批號(hào)20060601)，分別采用不同實(shí)驗(yàn)因素A、B進(jìn)行試驗(yàn)A由實(shí)驗(yàn)人a釆用W島津Lc-10ATVP型高效液相色譜儀，KromassilCw色譜柱5n，250X4.6mm，N-2000雙通道色譜工作站；B實(shí)驗(yàn)人b采用2#島津Lc-10ATVP型高效液相色譜儀，Kromassildg色譜柱5p，250X4.6mm，Anastar色譜工作站。按正文所述方法和條件提取測(cè)定，結(jié)果如下-表7中間精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>結(jié)果表明中間精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果良好。6、穩(wěn)定性試驗(yàn)取本品(批號(hào)20060601)，按正文所述方法和條件提取測(cè)定，然后于2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)各進(jìn)樣一次，測(cè)得其黃芩苷峰面積積分值，考察方法的穩(wěn)定性，結(jié)果見(jiàn)表8。表8穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>結(jié)果表明樣品在8小時(shí)內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。7、準(zhǔn)確度精密稱取已測(cè)知含量的供試品(批號(hào)20060601)0.25g，精密稱定，共6份，分別加入黃芩苷對(duì)照品3.4mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加50%甲醇適量，超聲30分鐘，放冷，加50%甲醇至刻度，搖勻，靜置，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液5ml置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻即得。測(cè)定含量，計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表9。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>A樣品所含被測(cè)成分的量B加入純品量C實(shí)測(cè)值加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果表9編號(hào)取樣量(g)樣品含量(mg)加入對(duì)照品量(mg)測(cè)得量(mg)回收率(％)10.25053.21893.63.568899.1320.25513.27803.43.4055100.1630.25623.29223.43.386199.5940.25033.21643.43,4069跳2050.25013.2〗383.53.5133跳3860.25073.22153.73.7032100.09平均回收率=99.93%RSD=0.47o/o由以上結(jié)果可知,加樣回收率良好。8、樣品含量測(cè)定結(jié)果_表10含量測(cè)定結(jié)果^￥黃芩苷含量(mg/g;試驗(yàn)例二本發(fā)明臨床試驗(yàn)臨床資料64例繼發(fā)性肺結(jié)核病復(fù)治菌陽(yáng)的患者，隨機(jī)分為2組。其中對(duì)照組32例，男20例，女12例；年齡2172歲，平均(46.5±16.l)歲；治療組32例，男22例，女10例；年齡1971歲，平均(46.3土16.3)歲。兩組一般資料經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異無(wú)顯著性(PX).05),具有可比性。治療方法對(duì)照組按復(fù)治菌陽(yáng)肺結(jié)核強(qiáng)化期化療方案，單用西藥抗癆治療2H3R3Z3E3((異煙肼(H)、利福平(R)、吡嗪酰胺(Z)、乙胺丁醇(E)、鏈霉素(S)，隔日1次，共2個(gè)月)，藥物劑量隔口頓服H0.6g，R0.6g，Z2.0g,E1.252006070111.61200607029.992006070312.722007080110鄰2007080212.102007080210.56200708019.092007080111.232007080111.75粒粒粒劑劑劑囊囊囊顆顆顆片片片膠膠膠g,隔日肌肉注射S0.75g。治療組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上，加萃部丹顆粒治療，口服一次15g，一日2次。療效標(biāo)準(zhǔn)1.痰菌陰轉(zhuǎn)標(biāo)準(zhǔn)痰結(jié)核分枝桿菌檢査痰菌陰轉(zhuǎn)情況，陰轉(zhuǎn)痰涂片及痰培養(yǎng)均陰性；無(wú)陰轉(zhuǎn)痰涂片或痰培養(yǎng)呈陽(yáng)性。2.X線改善療效標(biāo)準(zhǔn)X線改變情況，顯著吸收病灶吸收大于或等于l/2原病灶；吸收病灶吸收小于l/2原病灶；不變病灶無(wú)明顯變化。3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用X2檢驗(yàn)。結(jié)果1.兩組痰菌陰轉(zhuǎn)情況治療組痰菌陰轉(zhuǎn)30例，無(wú)陰轉(zhuǎn)2例，陰轉(zhuǎn)率93.75%(30/32例)；對(duì)照組痰菌陰轉(zhuǎn)23例，無(wú)陰轉(zhuǎn)10例，陰轉(zhuǎn)率71.88%(23/32例)兩組間比較差異有顯著性(P〈0.05)2.兩組X線病灶吸收情況治療組顯著吸收5例，吸收24例，不變3例，總吸收率90.63%(29/32例)；對(duì)照組顯著吸收2例，吸收15例，不變15例，總口發(fā)收率53.13%(17/32例)。兩組間比較差異有顯著性(P〈0.01)。圖l黃芩苷線性關(guān)系圖具體實(shí)施例方式以下通過(guò)具體實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。實(shí)施例l芩部丹方顆粒劑制備方法稱取丹參375g、百部750g、黃芩375g。通過(guò)如下方法步驟制備(1)丹參加7倍量乙醇回流提取2小時(shí)，回收乙醇，濃縮成稠膏。(2)丹參藥渣和百部、黃芩加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮L5小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濃縮成稠膏。(3)合并步驟(1)、步驟(2)稠膏，干燥，粉碎，得干膏粉。(4)成型。取步驟(3)所得干膏粉加入糊精240g、蔗糖粉適量至1000g，加適量水濕法制粒，8(TC以下烘干，分裝即得。實(shí)施例2芩部丹方顆粒劑制備方法丹參300g、百部600g、黃芩400g。通過(guò)如下方法歩驟制備-(1)丹參加7倍量乙醇回流提取2小時(shí)，回收乙醇，濃縮成稠膏。(2)丹參藥渣和百部、黃芩加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮1.5小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濃縮成稠膏。(3)合并步驟(1)、步驟(2)稠膏，干燥，粉碎，得干膏粉。(4)成型。取步驟(3)所得干膏粉加入糊精100g、糖精鈉2g、硬脂酸鎂1-10g、蔗糖粉適量至1000g，混勻后壓片，粉碎成顆粒，分裝即得。實(shí)施例3芩部丹方顆粒劑制備方法稱取下列中藥丹參400g、百部700g、黃芩300g。通過(guò)如下方法步驟制備(1)丹參加7倍量乙醇回流提取2小時(shí)，回收乙醇，濃縮成稠膏。(2)丹參藥渣和百部、黃零加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮L5小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濃縮成稠膏。(3)合并步驟(1)、步驟(2)稠膏，干燥，粉碎，得干膏粉。(4)成型。取步驟(3)所得干膏粉加入乳糖320g、香蘭素3g、淀粉適量至1000g，加90%乙醇適量濕法制粒，8(TC以下烘干，分裝即得。權(quán)利要求1.一種治療肺結(jié)核的藥物，處方組成按藥物重量配比為丹參300-400份、百部700-800份、黃芩300-400份，其特征在于通過(guò)如下方法步驟制備(1)丹參加7倍量乙醇回流提取2小時(shí)，回收乙醇，濃縮成稠膏。(2)丹參藥渣和百部、黃芩加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮1.5小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濃縮成稠膏。(3)合并步驟(1)、步驟(2)稠膏，干燥，粉碎，得干膏粉。(4)成型。取步驟(3)所得干膏粉加入制劑學(xué)中常用輔料，用制劑學(xué)中常用顆粒劑制備方法制成顆粒劑。2.—種治療肺結(jié)核的藥物顆粒劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，處方組成按藥物重量配比為丹參300-400份、百部700-800份、黃苳300-400份，其特征在于包括下列方法步驟性狀本品為淺棕至深棕紅色顆粒，味苦、微甜。鑒別(1)取本品5g，研細(xì)，加甲醇20ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。另取黃芩對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取黃芩苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含0.5mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2u1分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸為展開(kāi)劑，預(yù)飽和30分鐘，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品和對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。(2)取本品5g，研細(xì)，加乙醚30ml，超聲處理IO分鐘，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹參對(duì)照藥材lg,同法制成對(duì)照藥材溶液。再取丹參酮IlA對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每lml含2mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)已垸一乙酸乙酯(6:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)。(3)取本品8g，研細(xì)，加70y。乙醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸去乙醇，殘?jiān)訚獍痹囈赫{(diào)節(jié)pH值至1011，再加氯仿20ml振搖提取，分取氯仿層，蒸干，殘?jiān)?%鹽酸溶液5ml使溶解，濾過(guò)。濾液分作兩份一份中滴加碘化鉍鉀試液，生成橙紅色沉淀；另一份中滴加硅鎢酸試液，生成乳白色沉淀。檢查應(yīng)符合《中國(guó)藥典》2005年版一部顆粒劑(附錄IC)項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。含量測(cè)定黃芩苷照《中國(guó)藥典》2005年版一部高效液相色譜法測(cè)定(附錄VID)。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。理論板數(shù)按黃苳苷峰計(jì)應(yīng)不低于2500。對(duì)照品溶液的制備精密稱取在6(TC減壓干燥4小時(shí)的黃芩苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含60ug的溶液，即得。供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取約0.5g，精密稱定，置50ml量瓶中，加50%甲醇，超聲處理(功率250W，工作頻率33KHZ)20分鐘，放冷，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每克含黃芩以黃芩苷(C21H180u)計(jì)，不得少于9mg。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種治療肺結(jié)核的藥物顆粒劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，其特征在于在處方不變，提取工藝條件又能保證其藥物治療肺結(jié)核的基本物質(zhì)不變的情況下，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法用于其它劑型的檢驗(yàn)，同樣適用。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種治療肺結(jié)核的藥物顆粒劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，其特征在于用于片劑，性狀項(xiàng)改為本品為淺棕至深棕紅色的片，檢査項(xiàng)改為應(yīng)符合《中國(guó)藥典》2005年版一部片劑(附錄ID)項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。其它質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法不變。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種治療肺結(jié)核的藥物顆粒劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，其特征在于用于膠囊劑，性狀改為本品內(nèi)容物為淺棕至深棕紅色的顆粒和粉末，檢查項(xiàng)改為應(yīng)符合《中國(guó)藥典》2005年版一部膠囊(附錄IG)項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定，其它質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法改為取本品內(nèi)容物即可。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種治療肺結(jié)核的藥物制備方法及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，處方由丹參、百部、黃芩按一定重量比組成，制成顆粒劑；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法有丹參、百部、黃芩的鑒別方法，含量有黃芩苷的含量測(cè)定方法，本發(fā)明用于治療肺結(jié)核療效好，質(zhì)量可控。文檔編號(hào)A61K36/88GK101168000SQ20071011306公開(kāi)日2008年4月30日申請(qǐng)日期2007年10月16日優(yōu)先權(quán)日2007年10月16日發(fā)明者劉金磊,昕張,晶張,張為勝,許竹梅申請(qǐng)人:濟(jì)南康眾醫(yī)藥科技開(kāi)發(fā)有限公司