專利名稱：：Tpo肽化合物和藥物組合物在治療貧血中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明提供了結(jié)合并激活血小板生成素受體(c-mpl或TP0-R)或換句話講，充當(dāng)血小板生成素("TP0")激動劑的肽化合物。本發(fā)明可應(yīng)用于生物化學(xué)和藥物化學(xué)領(lǐng)域，并且尤其是提供了TPO激動劑以用于治療人的疾病。本發(fā)明的肽化合物可以用于治療貧血和/或預(yù)防貧血的發(fā)展和/或維持紅細(xì)胞的正常產(chǎn)生。
背景技術(shù)：
：已經(jīng)克隆并鑒定了編碼TP0的基因。參見Kuter等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA91:11104-11108(1994);Barley等人，Cell77:1117-1124(1994);Kaushansky等人，Nature369:568-571(1994);Wendling等人，Nature369:571-574(1994)以及Sauvage等人，Nature369:533-538(1994)。TP0是具有至少兩種形式的糖蛋白，這兩種形式的表觀分子量為25kDa和31kDa，具有共同的N末端氨基酸序列。參見，Bartley等人，Cell77:1117-1124(1994)。TP0看起來具有由潛在的Arg-Arg裂解位點分開的兩個截然不同的區(qū)域。氨基末端區(qū)在人和小鼠中是高度保守的，并且與促紅細(xì)胞生成素和a-干擾素和b-干擾素具有一些同源性。羧基末端區(qū)顯示了廣泛的物種分化性。人的TP0-R(也稱為c-nipl)的DNA序列和編碼的肽序列已經(jīng)有所描述。參見Vigon等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:5640-5644(1992)。TPO-R是血細(xì)胞生成素生長因子受體家族的一個成員，該家族是具有如下特征的一個家族胞外結(jié)構(gòu)域具有共同的結(jié)構(gòu)設(shè)計，包括N-末端部分中的四個保守的C殘基和鄰近跨膜區(qū)的WSXffS基序(SEQIDN0:1)。參見BazanProc.Natl.Acad.Sci.USA87:6934-6938(1990)。該受體在血細(xì)胞生成中發(fā)揮功能性作用的證據(jù)包括觀測到其表達(dá)局限于小鼠中的脾臟、骨髓或胎肝(參見Souyri等人，Cell63:1137-1147(1990))和人中的巨核細(xì)胞、血小板和CD34+細(xì)胞(參見Methia等人，Blood82:1395-1401(1993))。一些工作者推測，該受體以同型二聚體行使功能，類似于G-CSF和促紅細(xì)胞生成素的受體的情形?？寺〉腡P0-R基因的可用性推動了對這種重要受體的激動劑的研究。重組受體蛋白的可用性使得能在多種隨機(jī)和半隨機(jī)的肽多樣性產(chǎn)生系統(tǒng)中研究受體-配體相互作用。美國專利No.6,251,864、6,083,913、6，121，238、5，932，546、5,869,451、6,506,362禾口6,465,430以及Cwirla等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA87:6378-6382(1990)中公開了這些系統(tǒng)，將每篇上述這些參考文獻(xiàn)以引用方式并入本文。在血液中循環(huán)的形態(tài)學(xué)上可辨別的和功能能性的細(xì)胞包括紅細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞、B-淋巴細(xì)胞、T-淋巴細(xì)胞、非B-淋巴細(xì)胞、非T-淋巴細(xì)胞和血小板。這些成熟的造血細(xì)胞源于各自譜系的形態(tài)學(xué)上可辨別的分裂前體細(xì)胞并按照需要，由各自譜系的形態(tài)學(xué)上可辨別的分裂前體細(xì)胞所替代，例如成紅細(xì)胞對紅細(xì)胞系，原粒細(xì)胞、前髓細(xì)胞和髓細(xì)胞對粒細(xì)胞系，以及巨核細(xì)胞對血小板。前體細(xì)胞源于更原始的細(xì)胞，可以相當(dāng)簡單地將這些更原始的細(xì)胞分為兩個主要的亞組干細(xì)胞和祖細(xì)胞(對于綜述，參見Broxmeyer，H.E.在Oncology/Hematology1:227-257(1983)中題為"ColonyAssaysofHematopoieticProgenitorCellsandCorrelationstoClinicalSituations"(造血祖細(xì)胞的集落測定法和與臨床情況的相關(guān)性)的CRCCriticalReview(CRC評論綜述))。干細(xì)胞和祖細(xì)胞的定義是可操作的，并且取決于功能標(biāo)準(zhǔn)而不是形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。干細(xì)胞具有廣泛的自我更新或自我維持能力(Lajtha，Differentiation,14:23(1979))，這是必要的，因為缺少或耗盡這些細(xì)胞可以導(dǎo)致一種或多種細(xì)胞譜系的完全耗盡，這是將在短時間內(nèi)導(dǎo)致疾病和死亡的事件。一些干細(xì)胞在需要時分化，而一些干細(xì)胞產(chǎn)生其它干細(xì)胞以維持這些細(xì)胞的庫存。因而，除了維持它們自身的類型，多能干細(xì)胞還能分化成幾種亞系的祖細(xì)胞，這些祖細(xì)胞具有更有限的自我更新能力或不具有自我更新能力。這些祖細(xì)胞最終產(chǎn)生形態(tài)學(xué)上可以辨別的前體細(xì)胞。祖細(xì)胞能夠沿一種或多于一種的髓系分化途徑增殖和分化(Lajtha，BloodCells,5:447(1979))。多種傳染原、遺傳異常和環(huán)境因素可以引起一種或多種造血細(xì)胞類型的缺乏。而且，用于治療癌和某些免疫障礙的化療療法和放射療法可以引起各類血細(xì)胞減少癥，或貧血、中性粒細(xì)胞減少癥和血小板減少癥的綜合病癥。因而，造血細(xì)胞的增加或置換通常對這些治療的成功是關(guān)鍵性的。(關(guān)于血液障礙及其起因的一般性討論，請參見如ScientificAmericanMedicine中的"Hematology"，E.Rubenstein禾口D.Federman(編輯)，第2巻，第5章，ScientificAmerican,NewYork(1996))。當(dāng)前可用于許多造血障礙以及由化學(xué)療法或放射療法引起的內(nèi)源性造血細(xì)胞破壞的療法是骨髓移植。然而，骨髓移植的使用受到嚴(yán)格限制，因為找到完全匹配的(遺傳上相同的)供體是極其罕見的，除了其中可利用同卵雙生同胞或其中緩解期的患者的骨髓細(xì)胞以活力冷凍狀態(tài)保存的情形外。除了這種自體移植的情形外，存在著不可避免的某種程度的遺傳錯配，這引起嚴(yán)重的并且有時是致命的并發(fā)癥。這些并發(fā)癥是雙重的。首先，通常預(yù)先用藥物使患者免疫無能，以便避免對外來骨髓細(xì)胞的免疫排異反應(yīng)(宿主抗移植物反應(yīng))。其次，當(dāng)且如果供體骨髓細(xì)胞變得確立時，它們可以攻擊患者(移植物抗宿主病)，其將患者識別為外來物。即使使用了密切匹配的親體供體(familydonor)，部分錯配的這些并發(fā)癥是直接因從遺傳不同的個體移植骨髓而引起的高死亡率和發(fā)病率的原因。研究還認(rèn)為外周血是用于造血重建的干細(xì)胞的來源(Nothdurtt，W.等人，1977,Scand.J.Haematol.19:470-481;Sarpel,S.C.等人，1979，Exp.Hematol.7:113-120;Ragharachar，A.等人，1983，J.Cell.Biochem.Suppl.7A:78;Juttner，C.A.等人，1985，Brit.J.Haematol.61:739-745;Abrams，R.A.等人，1983,J.Cell.Biochem.Suppl.7A:53;Prummer，0.等人，1985，Exp.Hematol.13:891-898)。在一些研究中，對患有各種白血病的患者(Reiffers，J.等人，1986，Exp.Hematol.14:312—315;Goldman,J.M.等人，1980,Br.J.Haematol.45:223-231;Tilly，H.等人，Jul.19,1986，TheLancet,pp.154-155;也參見To，L,B.和Juttner，C.A.，1987，Brit.J.Haematol.66:285-288及其中引用的參考文獻(xiàn))和患有淋巴瘤的患者(Korbling，M.等人，1986，Blood67:529-532)已經(jīng)獲得了有希望的結(jié)果。然而使用外周血的其它試驗未能實現(xiàn)重建(Hershko,C.等人，1979，TheLancet1:945-947;0chs，H.D.等人，1981,Pediatr.Res.15:601)。研究還探究了將胎肝細(xì)胞移植(Cain，G.R.等人，1986，Transplantation41:32-25;0chs,H.D.等人，1981,Pediatr.Res.15:601;Paige,C.J.等人，1981，J.Exp.Med.153:154-165;Touraine，J.L.，1980,ExcerptaMed.514:277;Touraine，J.L.，1983，BirthDefects19:139;還參見Good,R.A.等人，1983，CellularI謹(jǐn)unol.82:44-45及其中引用的參考文獻(xiàn))或新生兒脾細(xì)胞移植(Yunis，E.J.等人，1974，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.72:4100)用作造血重建的干細(xì)胞源。在免疫重建試驗中也進(jìn)行了新生兒胸腺細(xì)胞的移植(Vickery，A.C.等人，1983,J.Parasitol.69(3):478-485;Hirokawa，K.等人，1982，Clin.Immunol.Immunopathol.22:297-304)。顯然，非常需要體外擴(kuò)展血細(xì)胞的方法或體內(nèi)增加造血細(xì)胞產(chǎn)生的療法。貧血被定義為血液中血紅蛋白濃度的降低，其通常與總的循環(huán)紅細(xì)胞量的減少相關(guān)。不管是什么原因，貧血降低了血液的攜氧能力，并且在足夠嚴(yán)重時，引起臨床癥狀和臨床體征。在臨床上，貧血的特征在于皮膚和粘膜的蒼白，以及在于缺氧現(xiàn)象，最常見為虛弱、疲勞、無精打采或頭暈的現(xiàn)象。心肌缺氧可以引起高動力循環(huán)，心率和心搏出量增加。可能會發(fā)展噴射型血流雜音，并且如果貧血足夠嚴(yán)重，可能跟著發(fā)生心力衰竭。貧血通常以如下兩種方式的其中一種來分類通過病因?qū)W分類(基于原因)或通過形態(tài)學(xué)分類(基于形狀和大小的改變)。更普遍采用病因?qū)W分類。當(dāng)一個個體的抗體與另一個體的紅細(xì)胞(RBC)反應(yīng)時發(fā)生同種免疫溶血性貧血。同種免疫溶血性貧血通常在ABO血型不相容性輸血和新生兒恒河猴血清型疾病后發(fā)生。其也可以在同種異體移植后發(fā)生。(Hoffbrand，A.V.在EssentialHematology,第3版，BlackwellScientificPublications,1993，第90頁中的文章)。某些藥物的施用可以引起藥物誘發(fā)的暫時性貧血。這可以通過以下三種機(jī)理發(fā)生1)抗體對抗藥物-紅細(xì)胞膜復(fù)合物(如青霉素或頭孢噻吩)；2)補(bǔ)體經(jīng)由藥物-蛋白質(zhì)(抗原)-抗體復(fù)合物沉積于紅細(xì)胞表面上(如奎尼丁或氯磺丙脲)；或3)自身免疫溶血性貧血，其中藥物的作用未知(如甲基多巴)。在每種情況下，貧血只在藥物中斷時消失(然而，使用甲基多巴時，抗體可能會持續(xù)許多個月)。(Hoffbrand,A.V.在EssentialHematology,第3版，BlackwellScientificPublications,1993，第90-1頁中的文章)。再生障礙性貧血定義為由骨髓發(fā)育不全引起的各類血細(xì)胞減少癥(貧血、白細(xì)胞減少癥和血小板減少癥)。其分為以下主要類型先天型(范可尼貧血)和沒有明顯直接原因的后天型(特發(fā)性貧血)。次要原因可能由多種工業(yè)因素、醫(yī)源性因素和傳染性因素引起。根本原因看起來是造血多能干細(xì)胞數(shù)量的大幅減少和剩余干細(xì)胞的缺陷或?qū)顾鼈兊拿庖叻磻?yīng)，這些缺陷或免疫反應(yīng)使得它們不能充分分裂和分化來增加骨髓。(Hoffbrand，A.V.在EssentialHematology,第3版，BlackwellScientificPublications,1993，第121頁中的文章)。在某些情況下已經(jīng)證實了體外抑制促紅細(xì)胞生成素或阻斷造血干細(xì)胞分化的抑制性T細(xì)胞以及免疫球蛋白。(Andreoli，T.在EssentialsofMedicine,W.B.Saunders,1986，第349頁中文章)。Neelis等人，Blood,90(1):58-63(1997)公開了人重組TP0在暴露于5Gy全身照射(300-kVx-射線)的恒河猴中刺激了紅細(xì)胞譜系的恢復(fù)，網(wǎng)織紅細(xì)胞再生的開始比在安慰劑處理的動物中要早10天。Neelis等人還公開了血紅蛋白和血細(xì)胞比容的值比對照中有所提高。Basser等人，Blood,89(9):3118-3128(1997)還公開了PEG-rHuMGDF加非格司亭的施用提高了暴露于600mg/m2的卡鉑和1,200mg/m2的環(huán)磷酰胺的患者的外周血祖細(xì)胞。Papayannopoulou等人，Exp.Hematol.，24(5):660-669(1996)公開了EP0和TP0對體外向紅細(xì)胞生成和血小板生成分化的影響。Kaushansky等人，J.Clin.Invest.,96(3):1683-1687(1995)公開了TP0與EPO協(xié)同作用來擴(kuò)增紅系祖細(xì)胞。Kaushansky等人，Exp.Hematol.，24(2):265-269(1996)公開了TP0在骨髓抑制動物中擴(kuò)增了BFU-E、CFU-GM和CFU-Mk祖細(xì)胞。貧血是一個嚴(yán)重的問題，并且促使去找尋能預(yù)防貧血發(fā)展、治療貧血、促進(jìn)RBC前體存活和/或維持紅細(xì)胞正常產(chǎn)生的血生長因子激動劑。本發(fā)明提供了這樣一種激動劑。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及定義的低分子量肽化合物在治療貧血中的用途。該定義的低分子量肽化合物具有與TP0-R強(qiáng)烈結(jié)合的特性，可以激活TP0-R，與已知的TP0激動劑相比潛在地具有減少的副作用，并且具有體外和體內(nèi)剌激紅細(xì)胞產(chǎn)生的能力。該低分子量肽化合物可以是多種形式，例如單體、二聚體和低聚體和/或可以用親水聚合物衍生化。因此，這種肽化合物可用于治療和/或預(yù)防貧血的治療目的以及可用于研究貧血的診斷目的。適用于治療和/或診斷目的的肽化合物具有的IC5。為約2mM或更少，并且更優(yōu)選2nM或更少，所述的ICs。是通過例如Baf/3結(jié)合測定法(如下所討論的)測定，其中較低的IC5。與較強(qiáng)的對TP0-R的結(jié)合親和力相關(guān)。對于藥學(xué)目的，肽化合物優(yōu)選具有的ICs。不大于約100"M，更優(yōu)選不大于約500nM，更優(yōu)選不大于約100pm，并且更優(yōu)選不大于約5pm。適用于治療和/或診斷目的的肽化合物具有的ECs。為約2niM或更少，并且更優(yōu)選2nM或更少，所述的EC5。是在熟知的測定法中用所熟知的技術(shù)，例如Baf/3結(jié)合測定法(如下所討論的)測定，其中較低的ECs。與較強(qiáng)的對TP0-R的結(jié)合親和力相關(guān)。對于藥學(xué)目的，所述肽化合物優(yōu)選具有的ECs。不大于約100uM，更優(yōu)選不大于約500nM，更優(yōu)選不大于約100pm，并且更優(yōu)選不大于約5pra。所述肽化合物的分子量的范圍是約500至約8,000道爾頓，更優(yōu)選約900至約2000道爾頓。如果如本文所描述，將肽化合物低聚化、二聚化和/或用親水性聚合物衍生化，則這種肽的分子量將更大并且范圍可以是約1500至約120，000道爾頓，更優(yōu)選約3,000至約80，000道爾頓，并且更優(yōu)選約30，000至約50，000道爾頓。合適的親水性聚合物包括但不限于聚烷基醚(例如聚乙二醇和聚丙二醇)、聚乙酸、聚乙醇酸、聚氧化烯、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯垸酮、纖維素和纖維素衍生物、葡聚糖和葡聚糖衍生物等，如美國專利No.5，672,662和5，869，451中所描述的，特此以引用的方式將其整個內(nèi)容并入本文。當(dāng)用親水性聚合物衍生肽化合物時，它們的溶解度和循環(huán)半衰期增加并且它們的免疫原性受到掩蔽?？梢酝瓿缮鲜鲅苌鼈兊慕Y(jié)合活性具有極小的(如果有的話)減少。一般而言，這種親水性聚合物的平均分子量范圍為約500至約100，000道爾頓，更優(yōu)選約2,000至約40，000道爾頓，并且甚至更優(yōu)選約5,000至約20,000道爾頓。在優(yōu)選的實施方案中，這種親水性聚合物具有的平均分子量為約5，000道爾頓、10，000道爾頓和20，000道爾頓。本發(fā)明的肽化合物可以利用以下參考文獻(xiàn)中列出的任意方法用這種聚合物衍生或連接到這種衍生物上Zallipsky，S.，BioconjugateChem.，6:150-165(1995);Monfardini，C等人，BioconjugateChem.，6:62-69(1995);美國專禾UNo.4，640，835;美國專利No.4，496，689;美國專利No.4,301,144;美國專利No.4，670，417;美國專利No.4,791,192;美國專利No.4，179，337或W095/34326，將所有上述文獻(xiàn)以引用的方式全文并入本文。在目前優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的肽化合物用聚乙二醇(PEG)衍生。PEG是具有兩個末端羥基的氧化乙烯重復(fù)單元的直鏈水溶性聚合物。PEG根據(jù)它們的分子量進(jìn)行分類，其分子量的范圍通常為約500道爾頓至約40,000道爾頓。在當(dāng)前優(yōu)選的實施方案中，采用的PEG具有的分子量范圍是5,000道爾頓至約20，000道爾頓。連接至本發(fā)明的肽化合物的PEG可以是支鏈的或非支鏈的。(參見，例如Monfardini,C.等人，BioconjugateChem.，6:62-69(1995))。PEG可以從NektarTherapeutics(SanCarlo,CA)(加拿大圣卡洛的耐克塔療法公司)、SigmaChemicalCo.(西格瑪化工公司)和其它公司商購獲得。這種PEG包括但不限于單甲氧基聚乙二醇(MePEG-0H)、單甲氧基聚乙二醇-琥珀酸酯(MePEG-S)、單甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亞胺琥珀酸酯(MePEG-S-NHS)、單甲氧基聚乙二醇-胺(MePEG-NH2)、單甲氧基聚乙二醇-三氟乙基磺酸酯(MePEG-TRES)和單甲氧基聚乙二醇-咪唑基-羰基(MePEG-IM)。簡而言之，在一個實施方案中，所釆用的親水性聚合物(例如PEG)優(yōu)選在一個末端由惰性基團(tuán)(例如甲氧基或乙氧基)封端。因此，該聚合物在另一端通過與合適的活化劑反應(yīng)而活化，所述的活化劑是例如氰尿酰鹵(如氰尿酰氯、氰尿酰溴或氰尿酰氟)、二咪唑(diimadozle)、酐試劑(如二鹵代琥珀酐，例如二溴代琥珀酐)、酰疊氮、對重氮二甲苯醚、3-(對重氮苯氧基)-2-羥丙基醚)等?；罨木酆衔锶缓笈c本發(fā)明的肽化合物反應(yīng)而產(chǎn)生用聚合物衍生的肽化合物。作為選擇，可以活化本發(fā)明的肽化合物中的官能團(tuán)以與聚合物反應(yīng)，或者用已知的偶聯(lián)方法在協(xié)同的偶聯(lián)反應(yīng)中將這兩個基團(tuán)連接。將容易理解，可以利用眾多本領(lǐng)域技術(shù)人員已知并使用的其它反應(yīng)方案將本發(fā)明的肽化合物用PEG衍生。在用于診斷目的時，肽化合物優(yōu)選用可檢測標(biāo)記物進(jìn)行標(biāo)記，并因此，沒有這種標(biāo)記的肽化合物在制備經(jīng)標(biāo)記的肽化合物中用作中間產(chǎn)物。優(yōu)選的肽化合物是這樣的肽，其具有(1)分子量少于約5000道爾頓，不管是單體、二聚體還是低聚體，以及(2)由ICs。表示的對TP0-R的結(jié)合親和力不大于約100niM，其中零個或多個肽基[-C(O)NR-]鍵已經(jīng)由非肽鍵(例如--CH2-氨基甲酸酯鍵[一CH2—0C(0)魔--];膦酸酯鍵；--CH2-磺酰胺[一CH2--S(0)2NR-]鍵;脲[--NHC(O)NH--]鍵；—CH2-仲胺鍵；或烷基化肽鍵[一C(O)NR6—，其中R6是低級垸基])置換；這樣的肽，其中N-末端衍生為--NRR'基團(tuán)；衍生為-NRC(O)R基團(tuán)；衍生為-NRC(0)OR基團(tuán)；衍生為--NRS(0)2R基團(tuán)；衍生為一NHC(0)NHR基團(tuán)，其中R和R'是氫或低級烷基，但須R和R'兩者不都為氫；衍生為琥珀酰亞胺基團(tuán)；衍生為苯甲氧基羰基一NH--(CBZ--NH—)基團(tuán)；或衍生為在苯環(huán)上具有1-3個取代基的苯甲氧基羰基-NH-基團(tuán)，所述的取代基選自由低級烷基、低級烷氧基、氯和溴組成的組；或這樣的肽，其中C末端衍生為--C(O)R2，其中R2選自由低級烷氧基和一NR3R4(其中W和R4獨立地選自由氫和低級烷基組成的組)組成的組。據(jù)發(fā)現(xiàn)，核心肽化合物可以包含如下氨基酸序列(SEQIDN0:2):XiX2X3X5乂6X7其中X,是C、L、M、P、Q、V;&是F、K、L、N、Q、R、S、T或V;X3是C、F、I、L、M、R、S、V或W;X4是20種遺傳編碼的L-氨基酸的任意一種；Xs是A、D、E、G、K、M、Q、R、S、T、V或Y;X6是P-(2-萘基)丙氨酸(2-Nal);以及X7是C、G、I、K、L、M、N、R或V。在一個優(yōu)選的實施方案中，核心肽化合物包含如下氨基酸序列(SEQIDNO:3):X8GX'X2X3X4X5(2-Nal)X7其中X,至X7是如上定義；以及每個X8殘基獨立地選自20種遺傳編碼的L-氨基酸的任意一種、它們立體異構(gòu)的D-氨基酸；以及非天然氨基酸。在又一個優(yōu)選的實施方案中，核心肽化合物包含如下氨基酸序列(SEQIDN0:4):X9X8GX,M3X4X5(2-Nal)X7其中X9是A、C、E、G、I、L、M、P、R、Q、S、T或V;以及Xs是A、C、D、E、K、L、Q、R、S、T或V。更優(yōu)選的是，Xg是A或I;以及Xs是D、E或K。特別優(yōu)選的肽化合物是(SEQIDNO:5):IEGPTLRQ(2-Nal)LAAR(Sar)其中(Sar)是肌氨酸。在另一實施方案中，將肽化合物二聚化或低聚化以增加該肽化合物的親和性和/或活性。特別優(yōu)選的肽化合物是具有由賴氨酰胺殘基連接的兩個相同14肽的29肽。因而特別優(yōu)選的肽化合物是(SEQIDN0:6，本文中也稱為"1號TP0化合物")IEGPTLRQ(2-Nal)LAAR(Sar)K(NH2)/lEGPTLRQ(2-Nal)LAAR(Sar)更優(yōu)選的肽化合物是聚乙二醇化形式的"1號TP0化合物"。該聚乙二醇化形式可包括共價連接至每個N末端異亮氨酸上的20，000MPEG殘基。這種化合物的一個例子的完整分子結(jié)構(gòu)詳細(xì)描述如下(該化合物在本文中稱為PEG化"1號TPO化合物")。PEG化"1號TPO化合物"的完整化學(xué)名稱為甲氧基聚乙二醇20000-丙酰-L-異亮氨酰-L-谷氨酰-甘氨酰-L-脯氨酰-L-蘇氨酰-L-亮氨酰-L-精氨酰-L-谷氨酰胺酰-L-2-萘基丙氨酰-L-亮氨酰-L-丙氨酰-L-丙氨酰-L-精氨酰-肌氨酰-Ne-(甲氧基聚乙二醇20000-丙酰-L-異亮氨酰-L-谷氨酰-甘氨酰-L-脯氨酰-L-蘇氨酰-L-亮氨酰-L-精氨酰-L-谷氨酰胺酰-L-2-萘基丙氨酰-L-亮氨酰-L-丙氨酰-L-丙氨酰-L-精氮酰-肌氨酰-)-賴氨酰胺。PEG化"1號TP0化合物"是由賴氨酰胺殘基連接的兩個相同的14氨基酸肽組成，并且在每個N-端連接至大約20，000道爾頓分子量的聚乙二醇(PEG)鏈上。沒有PEG的母體肽的分子量為3,295道爾頓，而具有兩個PEG鏈時分子量近43，295道爾頓。PEG化"1號TP0化合物"簡化的分子結(jié)構(gòu)為(MPEG-Ile-Glu-Gly-Pro-Thr-Leu-Arg-Gin-(2-Nal)_Leu-Ala-Ala-Arg-(Sar))2-Lys-NH2;其中(2-Nal)是P-(2-萘基)丙氨酸，(Sar)是肌氨酸，而MPEG是甲氧基聚(乙二醇)(分子量大約為20，000道爾頓)。一種或多種肽化合物，并且特別是PEG化的肽化合物，包括其可藥用等價物(本文中通稱"肽化合物"、"TPO肽化合物"或"本發(fā)明的TPO肽化合物")，可用于預(yù)防和治療由TPO介導(dǎo)的疾病，并且尤其是用于治療和/或預(yù)防貧血。因而，本發(fā)明提供了用于治療和/或預(yù)防貧血的方法，其中讓患有貧血的患者或預(yù)期發(fā)展出貧血的患者接受，或給其施用治療或預(yù)防有效劑量或量的本發(fā)明的肽化合物。本發(fā)明還提供了藥物組合物，該藥物組合物包括一種或多種本文所述的肽化合物和生理學(xué)上可接受的載體。這種藥物組合物可以有多種形式，包括口服劑型，以及可吸入粉末和溶液以及可注射和可輸注溶液。圖1示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對血紅蛋白水平的影響，如實施例1中說明的。圖2示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對紅細(xì)胞計數(shù)的影響，如實施例1中說明的。圖3示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對血細(xì)胞比容的影響，如實施例1中說明的。圖4示出了PEG化"1號TPO化合物"處理對體重的影響，如實施例1中說明的。圖5示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對血紅蛋白水平的影響，如實施例2中說明的。圖6示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對紅細(xì)胞計數(shù)的影響，如實施例2中說明的。圖7示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對血細(xì)胞比容的影響，如實施例2中說明的。圖8示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對體重的影響，如實施例2中說明的。圖9示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對血紅蛋白水平的影響，如實施例3中說明的。圖10示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對紅細(xì)胞計數(shù)的影響，如實施例3中說明的。圖11示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對血細(xì)胞比容的影響，如實施例3中說明的。圖12示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對體重的影響，如實施例3中說明的。圖13示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對血細(xì)胞比容的影響，如實施例4中說明的。圖14示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對體重的影響，如實施例4中說明的。圖15示出了PEG化"1號TP0化合物"處理對體重的影響，如實施例5中說明的。圖16示出了據(jù)信為PEG化"1號TP0化合物"抗貧血的作用機(jī)理。圖17示出了據(jù)信為PEG化"1號TP0化合物"對造血細(xì)胞的一些譜系效果。圖18A和圖18B示出了用PEG化"1號TP0化合物"處理所導(dǎo)致的對經(jīng)卡鉑處理的小鼠的血小板和血細(xì)胞比容的影響，如實施例6中說明的。圖19示出了用PEG化"1號TPO化合物"處理所導(dǎo)致的對經(jīng)卡鉑處理的小鼠的腦切片中纖維蛋白原沉積和血凝塊的影響，如實施例6中說明的。圖20示出了PEG化"1號TP0化合物"對Baf/3細(xì)胞中人TP0-R的激活的影響，如實施例7中說明的。圖21表明PEG化"1號TP0化合物"激活了Baf/3細(xì)胞，其以劑量依賴的方式重組表達(dá)人TP0-R，如實施例7中說明的。具體實施例方式闡明了以下定義以說明和定義用于描述本發(fā)明的多個術(shù)語的含義和范圍。"激動劑"指生物活性配體，其結(jié)合至其互補(bǔ)的生物活性受體并激活后者，以在該受體中引起生物學(xué)響應(yīng)或增強(qiáng)該受體預(yù)先存在的生物活性。"EC5。"和"半數(shù)有效濃度"指產(chǎn)生50%的對該激動劑的最大可能有效響應(yīng)時激動劑的濃度。"IC5。"和"半數(shù)抑制濃度"指置換了50%的激動劑特異性結(jié)合時的競爭性配體的濃度。"可藥用等價物"包括但不限于可藥用鹽、酸加成鹽、酯、酰胺、水合物、代謝產(chǎn)物、前藥和電子等排體。許多可藥用等價物預(yù)期具有與本發(fā)明的肽化合物相同或類似的體外或體內(nèi)活性。"可藥用鹽"指通常用于制藥工業(yè)的非毒性堿金屬鹽、堿土金屬鹽和銨鹽，包括鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、鈣鹽、鎂鹽、鋇鹽、銨鹽和精蛋白鋅鹽，其通過本領(lǐng)域所熟知的方法制備。該術(shù)語還包括非毒性酸加成鹽，其通常通過讓本發(fā)明的肽化合物與合適的有機(jī)或無機(jī)酸反應(yīng)而制備。代表性的鹽包括鹽酸鹽、溴酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、醋酸鹽、草酸鹽、戊酸鹽、油酸鹽、月桂酸鹽、硼酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、萘磺酸鹽等。"可藥用酸加成鹽"指這樣的鹽，該鹽保持了該游離堿的生物學(xué)效應(yīng)和性質(zhì)，并且不會在生物學(xué)上或其它方面不可取，該鹽是與無機(jī)酸(例如鹽酸、溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等)和有機(jī)酸(例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、丙二酸、琥珀酸、馬來酸、延胡索酸、酒石酸、擰檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸等)形成。對于可藥用酸加成鹽作為前藥的描述，參見Bundgaard，H.(同上)。"可藥用酯"指這樣的酯，該酯在酯鍵水解時保持了羧酸或醇的生物學(xué)效應(yīng)和性質(zhì)，并且不會在生物學(xué)上或其它方面不可取。對于可藥用酯作為前藥的描述，參見Bundgaard,H.編輯的DesignofProdrugs,ElsevierSciencePublishers,Amsterdam(1985)。這些酯通常由對應(yīng)的羧酸和醇形成。一般而言，酯的形成可以通過常規(guī)的合成技術(shù)來完成。(參見，例如MarchAdvancedOrganicChemistry,第3版，JohnWiley&Sons,NewYork(1985)，第1157頁及其中引用的參考文獻(xiàn)和Mark等人，EncyclopediaofChemicalTechnology,JohnWiley&Sons,NewYork(1980))。該酯的醇組分通常將包括(i)C2-(:12脂族醇，其可以含有或不含一個或多個雙鍵并可以含有或不含支化碳，或(ii)C7-C,2芳族醇或雜芳醇。本發(fā)明還考慮那些組合物的用途，所述的組合物既可以是本文描述的酯，又可以是其可藥用酸加成鹽。"可藥用酰胺"指這樣的酰胺，該酰胺在酰胺鍵水解時保持了羧酸或胺的生物學(xué)效應(yīng)和性質(zhì)，并且不會在生物學(xué)上或其它方面是不可取的。對于可藥用酰胺作為前藥的描述，參見Bundgaard，H.編輯的DesignofProdrugs,ElsevierSciencePublishers,Amsterdam(1985)。這些酉先月安通常由對應(yīng)的羧酸和胺形成。一般而言，酰胺的形成可以通過常規(guī)的合成技術(shù)來完成。(參見，例如MarchAdvancedOrganicChemistry,第3版，JohnWiley&Sons,NewYork(1985)，第1152頁，和Mark等人，EncyclopediaofChemicalTechnology,JohnWiley&Sons,NewYork(1980))。本發(fā)明還考慮那些組合物的用途，所述的組合物既可以是本文描述的酰胺，又可以是其可藥用酸加成鹽。"可藥用或可治療用載體"指這樣的載體介質(zhì)，其不會干擾活性成分的生物學(xué)活性的有效性并且其對宿主或患者沒有毒性。"立體異構(gòu)體"指具有與另一者相同的分子量、化學(xué)組成和構(gòu)造，但是原子分組不同。即，某些相同的化學(xué)部分在空間中有不同的取向，并因而，當(dāng)是純的時，具有旋轉(zhuǎn)偏振光平面的能力。然而，一些純立體異構(gòu)體具有的光學(xué)旋轉(zhuǎn)可能如此微小以致用目前的儀器無法檢測。本發(fā)明的肽化合物可以具有一個或多個不對稱碳原子，并因而包括多種立體異構(gòu)體。所有立體異構(gòu)體都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。如應(yīng)用于本發(fā)明組合物的，"治療或藥學(xué)有效量"指足以誘導(dǎo)所需生物學(xué)效果的組合物的量。該效果可以是病征、癥狀或病因的緩和，或生物系統(tǒng)中任何其它期望的改變。在本發(fā)明中，所述效果通常涉及紅細(xì)胞產(chǎn)生的增加。肽中的氨基酸殘基縮寫如下苯丙氨酸是Phe或F;亮氨酸是Leu或L;異亮氨酸是Ile或I;甲硫氨酸是Met或M;纈氨酸是Val或V;絲氨酸是Ser或S;脯氨酸是Pro或P;蘇氨酸是Thr或T;丙氨酸是Ala或A;酪氨酸是Tyr或Y;組氨酸是His或H;谷氨酰胺是Gin或Q;天冬酰胺是Asn或N;賴氨酸是Lys或K;天冬氨酸是Asp或D;谷氨酸是Glu或E;半胱氨酸是Cys或C;色氨酸是Trp或W;精氨酸是Arg或R;以及甘氨酸是Gly或G。另外Bu是丁氧基，Bzl是芐基，CHA是環(huán)己胺，Ac是乙?；?，Me是甲基，Pen是青霉胺，Aib是氨基異丁酸，Nva是正纈氨酸，Abu是氨基丁酸，Thi是噻吩丙氨酸，0Bn是0-芐基，以及hyp是羥脯氨酸。除了僅由天然存在的氨基酸組成的肽，還提供了擬肽(p印tidominietic)或肽類似物。肽類似物通常用于制藥工業(yè)作為非肽藥物，其具有的性質(zhì)類似于模板肽的性質(zhì)。這些類型的非肽化合物稱為"肽模擬物"或"擬肽"(Fauchere，J.Adv.DrugRes.15:29(1986);Veber和FreidingerTINS,第392頁(1985);和Evans等人，J.Med.Chem.30:1229(1987)，將這些文獻(xiàn)以引用的方式并入本文)。結(jié)構(gòu)上類似于治療上有用的肽的肽模擬物可以用于產(chǎn)生等價的或增強(qiáng)的治療或預(yù)防效果。一般而言，擬肽在結(jié)構(gòu)上類似于范例多肽(即具有生物學(xué)或藥理學(xué)活性的多肽)，例如天然存在的受體結(jié)合多肽，但是具有的一個或多個肽鍵任選由選自以下組成的組的鍵置換一CH2NH—、一CH2S—、--CH2--CH2--、--CH=CH--(順式和反式)、--C0CH2—、--CH(OH)CH2--和--CH2SO--，該置換是通過本領(lǐng)域已知的方法并另外在如下參考文獻(xiàn)中描述Spatola，A.F.，ChemistryandBiochemistryofAminoAcids,Peptides,andProteins,B.Weinstein，編輯，MarcelDekker，NewYork,第267頁(1983);Spatola，A.F.,VegaData(March1983)，第1巻，第3期，P印tideBackboneModifications(綜述)；Morley,TrendsPharmSci(1980)，第463-468頁(綜述)；Hudson,D.等人，IntJP印tProtRes14:177-185(1979)(—CH2NH--,CH2CH2--);Spatola等人，LifeSci38:1243-1249(1986)(—CH2--S);HarmJ.Chem.SocPerkinTrans.I307-314(1982)(--CH--CH—，順式和反式)；Almquist等人，J.Med.Chem.23:1392-1398(1980)(--C0CH2--);Jennings-White等人，TetrahedronLett23:2533(1982)(--C0CH2—);Szelke等人，EuropeanAppln.EP45665CA(1982):97:39405(1982)(—CH(OH)CH2—);Holladay等人，TetrahedronLett24:4401-4404(1983)(--C(OH)CH2--);和HrubyLifeSci31:189-199(1982)(--CH2—S—)；將以上每篇文獻(xiàn)以引用的方式并入本文。尤其優(yōu)選的非肽鍵是一CH2NH—。這種肽模擬物可以具有優(yōu)于多肽實施方案的顯著優(yōu)點，包括，例如更經(jīng)濟(jì)的生產(chǎn)、更大的化學(xué)穩(wěn)定性、增強(qiáng)的藥理學(xué)性質(zhì)(半衰期、吸收率、效價、效能等)、改變的特異性(如廣譜的生物活性)、減少的抗原性等。擬肽的標(biāo)記通常涉及一種或多種標(biāo)記直接或通過間隔物(如酰胺基團(tuán))共價連接；連接至該擬肽上的非干擾性位置上，該非干擾性位置通過定量構(gòu)效數(shù)據(jù)和/或分子模擬來預(yù)測。這種非干擾性位置通常是不與所述擬肽與之結(jié)合而產(chǎn)生治療效果的大分子(如免疫球蛋白超家族分子)形成直接接觸的位置。擬肽的衍生(例如標(biāo)記)不應(yīng)該實質(zhì)上干擾該擬肽的期望生物學(xué)或藥理學(xué)活性。通常，受體結(jié)合肽的擬肽以高的親和性結(jié)合至受體并具有可檢測的生物活性(即刺激或拮抗一種或多種受體介導(dǎo)的表型改變)。同種氨基酸的D型氨基酸系統(tǒng)性取代共有序列的一種或多種氨基酸(如D型賴氨酸代替L型賴氨酸)可用于產(chǎn)生更穩(wěn)定的肽。此外，包含共有序列或基本相同的共有序列變體的約束型肽(constrainedp印tide)可以通過本領(lǐng)域已知的方法產(chǎn)生(Rizo禾口GieraschAnn.Rev.Biochem.61:387(1992)，將其以引用的方式并入本文)；例如，通過加入能形成分子內(nèi)二硫鍵(使該肽環(huán)化)的內(nèi)部半胱氨酸殘基來產(chǎn)生。"可檢測標(biāo)記"指這樣的材料，其在共價連接至本發(fā)明的肽化合物上時，使得能在已經(jīng)施用了該肽化合物的患者中體內(nèi)檢測到該肽化合物。適用的可檢測標(biāo)記是本領(lǐng)域所熟知的，并包括(例如)放射性同位素、熒光標(biāo)記(如熒光素)等。所采用的具體可檢測標(biāo)記不是關(guān)鍵的，并且是相對于待使用的標(biāo)記的量以及所使用的標(biāo)記的量時該標(biāo)記的毒性而進(jìn)行選擇。相對于這些因素而選擇標(biāo)記是本領(lǐng)域技術(shù)范疇內(nèi)所熟知的?？蓹z測標(biāo)記共價連接至肽化合物是通過本領(lǐng)域熟知的常規(guī)方法來完成。例如，當(dāng)采用'"I放射性同位素作為可檢測標(biāo)記時，'"I共價連接至肽化合物可以通過將酪氨酸并入該肽化合物并然后碘化該肽化合物來實現(xiàn)。同樣，可以用常規(guī)化學(xué)，通過例如肽化合物上的羥基基團(tuán)，將32P作為磷酸酯部分并入至該肽化合物上。本發(fā)明提供肽化合物，其結(jié)合并激活TP0-R或換句話講起TP0激動劑的作用。這些肽化合物包括"先導(dǎo)"肽化合物和"等價的"或"衍生的"肽化合物，所述"等價的"或"衍生的"肽化合物被構(gòu)建以便具有與該先導(dǎo)肽化合物相同或類似的分子結(jié)構(gòu)或形狀，但關(guān)于對水解或蛋白質(zhì)水解的敏感性和/或關(guān)于其它生物學(xué)性質(zhì)(例如增加的對受體的親和性)不同于該先導(dǎo)肽化合物。本發(fā)明還提供包含有效量的可用于治療貧血的TPO激動劑、更特別是肽化合物的組合物。還可以將本發(fā)明的肽化合物施用給溫血動物，包括人，以在體內(nèi)激活TP0-R。因而，本發(fā)明涵蓋了用于治療性處理貧血的方法，該方法包括施用足以模擬體內(nèi)TP0對TP0-R的作用的量的本發(fā)明肽化合物。本發(fā)明的肽化合物的活性可以例如在McDonaldAm.J.ofPediatricHematology/Oncology14:8-21(1992)(將其以引用的方式并入本文)中描述的多個模型之一或本文公開的測定法中進(jìn)行體外或體內(nèi)評價。根據(jù)一個實施方案，本發(fā)明的組合物可用于治療與骨髓輸注、放射療法或化學(xué)療法相關(guān)的貧血。肽化合物通常會在化學(xué)療法、放射療法或骨髓移植前或在這種暴露后進(jìn)行預(yù)防性施用。因此，本發(fā)明還提供藥物組合物，該藥物組合物包含至少一種本發(fā)明肽化合物作為活性成分，以及藥用載體或稀釋劑。本發(fā)明的肽化合物可以通過口服、肺、腸胃外(肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)(IV)或皮下注射)、吸入(經(jīng)由細(xì)粉制劑)、透皮、鼻、陰道、直腸或舌下施用途徑施用，并且可以配制成適于每種施用途徑的劑型。參見，如Bernstein等人，PCT專利公布No.WO93/25221;Pitt等人，PCT專利公布No.WO94/17784;和Pitt等人，歐洲專利申請613，683，將每篇文獻(xiàn)以引用的方式并入本文。用于口服的固體劑型包括膠囊劑、片劑、丸劑、粉劑和顆粒劑。在這些固體劑型中，將活性肽化合物與至少一種惰性的可藥用載體(例如蔗糖、乳糖或淀粉)摻合。正如在通常的實踐中那樣，這種劑型還可以包含不同于惰性稀釋劑的附加物質(zhì)，如潤滑劑(例如硬脂酸鎂)。在膠囊劑、片劑和丸劑的情況下，劑型還可以包含緩沖劑。另外，可以制備具有腸溶衣的片劑和丸劑。用于口服的液體劑型包括可藥用乳劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑，其酏劑含有通常用于本領(lǐng)域的惰性稀釋劑，例如水或鹽水。除了這些惰性稀釋劑外，組合物還可以包含佐劑，例如濕潤劑、乳化劑和助懸劑，以及甜味劑、調(diào)味劑，以及芳香劑。用于腸胃外施用的根據(jù)本發(fā)明的制劑包括無菌含水或無水溶液劑、混懸劑或乳劑。無水溶劑或載體的實例是丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄欖油和玉米油)、明膠和可注射有機(jī)酯(例如油酸乙酯)。這些劑型還可以包含佐劑，例如防腐劑、潤濕劑、乳化劑和分散劑。它們可以通過(例如)濾過阻菌過濾器、通過將滅菌劑摻入組合物中、通過輻射組合物或通過加熱組合物來滅菌。它們也可以在使用前即刻用無菌水或其它無菌注射用介質(zhì)制備o用于直腸或陰道施用的組合物優(yōu)選是栓劑，其除了活性物質(zhì)外，還可以可以包含賦形劑，例如可可脂或栓劑蠟。用于鼻內(nèi)或舌下施用的組合物也用本領(lǐng)域熟知的標(biāo)準(zhǔn)賦形劑制備。本發(fā)明的組合物也可以通過(例如)Tice和Bibi(TreatiseonControlledDrugDelivery,(編輯)A.Kydonieus,MarcelDekker，N.Y.(1992)，第315-339頁)的方法進(jìn)行微膠囊化?？梢允┯煤须幕衔锏慕M合物用于預(yù)防性和/或治療性治療。在治療性應(yīng)用中，將組合物如上描述施用給已經(jīng)患有疾病的患者，施用的量足以治愈或至少部分地停止疾病及其并發(fā)癥的癥狀。將足以實現(xiàn)這個目的的量定義為"治療有效劑量"。對該用途有效的量將取決于疾病的嚴(yán)重性和患者的體重和一般狀態(tài)。在預(yù)防性應(yīng)用中，將含有本發(fā)明肽化合物的組合物施用給易感具體疾病或有患該疾病的風(fēng)險的患者。將這樣一種量定義為"預(yù)防有效劑量"。在該用途中，確切的量同樣取決于患者的健康狀態(tài)和體重。有效治療所需的TP0激動劑的量將取決于許多不同因素，包括施用手段、耙位點、患者的生理狀態(tài)和施用的其它藥物。因而，應(yīng)該滴定治療劑量以優(yōu)化安全性和功效。通常，體外使用的劑量可以在可用于原位施用這些試劑的量上提供有用的指導(dǎo)。用于治療具體疾病的有效劑量的動物試驗將給人的劑量提供進(jìn)一步的預(yù)測性指示。在例如Gilman等人(編輯)，GoodmanandGilman的ThePharmacologicalBasisofTherapeutics,第8版，PergamonPress(1990);禾卩Remington'sPharmaceuticalSciences,第7版，MackPublishingCo.,Easton，Pa.(1985)中描述了多種考慮，將這兩篇文獻(xiàn)以引用的方式并入本文。在以每天約l|iig/kg-約300pg/kg體重的劑量范圍施用時，本發(fā)明的肽化合物對治療貧血是有效的。根據(jù)諸如疾病的嚴(yán)重性、患者的年齡和一般狀況等因素，通過施用途徑以及通過臨床主治醫(yī)生的判斷來調(diào)整所采用的具體劑量。實施例動物模型觀察了PEG化"1號TP0化合物"對用卡鉑處理的小鼠的影響。對于本文的所有實施例，在無菌鹽水中制備PEG化"1號TP0化合物"的10mg/ml的儲液。為了混合，將制備物置于200轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)動搖床上15分鐘。將該方法用于溶解PEG化"1號TP0化合物"而不產(chǎn)生泡沫。用GVMillex(0.22Mm)過濾器過濾該儲液。然后用無菌鹽水從該儲液制備給藥溶液。儲液和給藥溶液在使用當(dāng)天新鮮制備。實施例1觀察了PEG化"1號TP0化合物"對用卡鉑處理小鼠后貧血的持續(xù)時間和嚴(yán)重性的影響，所述的影響是通過血紅蛋白水平、紅細(xì)胞計數(shù)和血細(xì)胞比容的改變來測定。對于該試驗，在卡鉑給藥一天后將遞增量的PEG化"1號TP0化合物"施用給小鼠，以鑒定可能的對多個紅細(xì)胞參數(shù)的劑量依賴性影響。如下面描述的，在第-2天和第-1天通過腹膜內(nèi)施用，用卡鉑或載體(磷酸鹽緩沖鹽水，PBS)處理小鼠組。先前測定了用于在BALB/c小鼠品系中誘導(dǎo)血小板減少癥的卡鉑的最佳劑量為120mg/kg的分次總劑量(以兩天連續(xù)每天注射給藥，即2x60mg/kg)。如表1中描述的，在第二次施用卡鉑后一天，通過靜脈內(nèi)(推注)注射，用PEG化"1號TP0化合物"或載體(無菌鹽水(SS)，無防腐劑的0.9%的氯化鈉)處理小鼠組。基于單位體重施用劑量(100^11/10g體重)。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>在第5、7、9和11天，對每個試驗組中的5只小鼠稱重并然后利用C02窒息對小鼠實施安樂死，并通過心臟穿刺放血。將血液樣品轉(zhuǎn)移至獨立的EDTA(紫頭(lavender-top))微容器中用于血液學(xué)評價。在第5天和第11天處理對照小鼠(5只)組。結(jié)果示于圖1-4中。數(shù)據(jù)通過圖表示出，表示為組的平均值+SEM。到第11天，單獨用卡鉑處理小鼠引起小鼠中的血紅蛋白水平下降約20%。用所有劑量的PEG化"1號TP0化合物"處理抑制了這種降低。RBC計數(shù)和血細(xì)胞比容小的降低也與卡鉑處理相關(guān)，該效果受到了用PEG化"1號TP0化合物"處理的抑制；然而，沒有對這種效果進(jìn)行統(tǒng)計分析。相對于第0天采集的體重測量值，單獨用卡鉑處理或用卡鉑+多種劑量的PEG化"1號TP0化合物"處理的所有組中的小鼠在第5、7和9天經(jīng)歷了體重減輕。在11天的試驗期間對一亞組小鼠的體重測量值進(jìn)行的分析暗示，僅用卡鉑處理引起了觀測到的體重降低，而全部試驗劑量的PEG化"1號TP0化合物"促進(jìn)了體重降低的恢復(fù)。到第5天，僅用卡鉑處理小鼠的小鼠開始表現(xiàn)出改變的外觀和行為。一些小鼠采取了拱起的姿勢并表現(xiàn)出萎蔫。許多小鼠也具有污染的肛門生殖器區(qū)域。PEG化"1號TP0化合物"處理以看似劑量依賴性的方式降低了這些體征的發(fā)生、頻率和嚴(yán)重性。實施例2檢驗了PEG化"1號TP0化合物"可能使小鼠骨髓造血干細(xì)胞對卡鉑處理的毒性效應(yīng)變敏感的可能性。對于該試驗，在施用卡鉑前七天或在卡鉑處理后立刻將PEG化"1號TP0化合物"的劑量施用給小鼠。在施用卡鉑前和施用卡鉑后均用PEG化"1號TP0化合物"處理另外的小鼠組。也觀察了這種給藥方案對血液學(xué)參數(shù)的影響。如下面描述的，在第7天和8天通過腹膜內(nèi)施用，用卡鉑或載體(磷酸鹽緩沖鹽水，PBS)處理小鼠組。先前測定了用于在BALB/c小鼠品系中誘導(dǎo)血小板減少癥的卡鉑的最佳劑量為120mg/kg的分次總劑量(以兩天連續(xù)每天注射給藥，即2x60mg/kg)。如表2中描述的，在第一次施用卡鉑前第七天或在第二次施用卡鉑后一小時(1小時)，通過靜脈內(nèi)(推注)注射，用PEG化"1號TP0化合物"(300ug/kg)或載體(無菌鹽水(SS)，無防腐劑的0.9%的氯化鈉)處理小鼠組。在施用卡鉑前(第0天)和施用卡鉬后(第8天，t=l小時)均用PEG化"1號TPO化合物"處理另外的小鼠組。所有的劑量施用都是基于單位體重進(jìn)行(100ul/10g體重)。28表2<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>在第14、18、22和26天，對每個試驗組中的5只小鼠稱重并然后利用C02窒息對小鼠實施安樂死，并通過心臟穿刺放血。將血液樣品轉(zhuǎn)移至獨立的EDTA(紫頭)微容器中用于血液學(xué)評價。在第14天和第26天處理對照小鼠(5只)組。結(jié)果示于圖5-8中。數(shù)據(jù)通過圖表示出，表示為組的平均值+SEM。與對照組相比較，到第18天和第22天，單獨用卡鉬處理小鼠引起了存活小鼠中血紅蛋白水平、RBC計數(shù)和血細(xì)胞比容的降低(降低大約18%)。通過在第8天(第二次卡鉑處理后1小時)施用PEG化"1號TPO化合物"和第0天額外施用PEG化"1號TPO化合物"或不額外施用PEG化"1號TPO化合物"，這些降低被阻止；然而，(僅)在第0天施用PEG化"1號TPO化合物"未能影響卡鉑誘導(dǎo)的這些紅細(xì)胞參數(shù)的改變。對照組中所有小鼠在第7天和第26天之間經(jīng)歷了正常的體重增加，而單獨用卡鉑處理的所有小鼠在相同的時間段內(nèi)有小量體重減輕(平均為大約4%)。用卡鉑和PEG化"1號TP0化合物"的多種共同處理進(jìn)行處理的所有組中的小鼠在第7天和第26天之間或者保持了體重或者經(jīng)歷了體重增加。在試驗期間分析體重測量值暗示，卡鉑處理是所觀察到的體重降低的主要原因，而用PEG化"1號TP0化合物"共同處理防止了這種體重減輕，然而沒有進(jìn)行統(tǒng)計分析。第7天(施用卡鉑前)和第26天(試驗終止)之間所觀察到的體重差別在圖8中示出。對照組中所有小鼠在整個試驗期間均表現(xiàn)正常。單獨用卡鉑處理小鼠開始表現(xiàn)出改變的外觀并且早在第12天行為表現(xiàn)為頻繁的拱起并顯示出蓬亂的體征。在試驗期的后半段，接受了卡鉑(沒有進(jìn)行PEG化"1號TP0化合物"處理或進(jìn)行了該處理)的許多小鼠釆取了拱起的姿勢并表現(xiàn)出蓬亂。在第8天用PEG化"1號TP0化合物"處理和第0天不用或用PEG化"1號TP0化合物"額外處理看起來延緩了這些體征的發(fā)生，且在第0天和第8天的處理也降低了嚴(yán)重性和持續(xù)時間；然而沒有對所述處理對系統(tǒng)性觀察現(xiàn)象的影響進(jìn)行詳細(xì)分析。實施例3觀察了實施給藥方案后PEG化"1號TP0化合物"對貧血的持續(xù)時間和嚴(yán)重性的影響，在所述給藥方案中，實施卡鉑處理后在多個時間點施用了PEG化"1號TP0化合物"。對于該試驗，在施用卡鉑后一小時(1小時)、一天(1天)或四天(4天)，將一定量的PEG化"1號TP0化合物"施用給小鼠。如下面描述的，在第-1天和0天通過腹膜內(nèi)施用，用卡鉑或載體(磷酸鹽緩沖鹽水，PBS)處理小鼠組。先前測定了用于在BALB/c小鼠品系中誘導(dǎo)血小板減少癥的卡鉑的最佳劑量為120mg/kg的分次總劑量(以兩天連續(xù)每天注射給藥，即2x60mg/kg)。如表3中描述的，在第二次施用卡鉑后一小時(第O天)、一天(第l天)或四天(第4天)，通過靜脈內(nèi)(推注)注射，用PEG化"1號TPO化合物"(300^ig/kg)或載體(無菌鹽水(SS)，無防腐劑的0.9%的氯化鈉)處理小鼠組?；趩挝惑w重施用劑量(100inl/10g體重)。表3處理組<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>在第6、8、10和12天，對每個試驗組中的5只小鼠稱重并然后利用C02-窒息對小鼠實施安樂死，并通過心臟穿刺放血。將血液樣品轉(zhuǎn)移至獨立的EDTA(紫頭)微容器中用于血液學(xué)評價。在第6天和第12天處理對照小鼠(5只)組結(jié)果示于圖9-12中。數(shù)據(jù)通過圖表示出，表示為組的平均值十SEM。與對照組相比較，到第12天，單獨用卡鉑處理小鼠引起了存活小鼠(2只小鼠)中的血紅蛋白水平、RBC計數(shù)和血細(xì)胞比容顯著降低(大約47%)。通過在第0天(用卡鉑處理后1小時)和第1天施用PEG化"1號TPO化合物"，防止了這些降低；然而在第4天施用PEG化"1號TPO化合物"未能影響卡鉑誘導(dǎo)的這些紅細(xì)胞參數(shù)的改變。相對于第-1天采集的體重測量值，單獨用卡鉑處理或用卡鉑+多種劑量的PEG化"1號TPO化合物"處理的所有組中的小鼠在第6、8、10和12天經(jīng)歷了體重減輕。在試驗期間對體重測量值的分析暗示，卡鉑是所觀察到的體重降低的主要原因。在第0天、第1天或第4天施用PEG化"1號TPO化合物"沒有顯示影響與卡鉑處理相關(guān)的體重減輕，然而沒有進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。在第-1天和第IO天之間觀察到的體重降低在圖11中示出。對照組中所有小鼠在整個試驗期間均表現(xiàn)正常。單獨用卡鉑處理的小鼠開始表現(xiàn)出改變的外觀并且早在第2天行為表現(xiàn)為頻繁的拱起并顯示出萎蔫的體征。在試驗期的后半段，接受了卡鉑(沒有進(jìn)行PEG化"1號TP0化合物"處理或進(jìn)行了該處理)的許多小鼠采取了拱起的姿勢并表現(xiàn)出萎蔫。這些小鼠中的一些也具有污染的肛門生殖器區(qū)域。其它不頻繁的體征包括顯現(xiàn)出消瘦，眼瞼下垂，并且表現(xiàn)出異常的步態(tài)(abnormalgate)。用PEG化"1號TP0化合物"處理沒有顯示具有對這些體征的發(fā)生、頻率或嚴(yán)重性的顯著影響，然而沒有進(jìn)行詳細(xì)的分析。在24小時的化學(xué)療法內(nèi)用PEG化"1號TP0化合物"施用給動物時，觀測了對卡鉑誘導(dǎo)的貧血的預(yù)防。這些數(shù)據(jù)暗示，PEG化"1號TP0化合物"具有不限于巨核細(xì)胞譜系的骨髓保護(hù)效果。實施例4對PEG化"1號TP0化合物"在經(jīng)卡鉑處理的小鼠中作為巨核細(xì)胞和紅細(xì)胞譜系的存活因子起作用的能力進(jìn)行了觀測，所述的作用是通過血液學(xué)參數(shù)的改變測定。在先前的試驗中，發(fā)現(xiàn)低至300)ag/kg的PEG化"1號TP0化合物"劑量預(yù)防了由卡鉑誘導(dǎo)的貧血。在該試驗中，對較低劑量的PEG化"1號TP0化合物"(即30、100和300|Lig/kg)對紅細(xì)胞譜系存活的效果進(jìn)行了檢驗，以鑒定該效果的劑量響應(yīng)。如下面描述的，在第-1天和0天通過腹膜內(nèi)施用，用卡鉑或載體(磷酸鹽緩沖鹽水，PBS)處理小鼠組。先前測定了用于在BALB/c小鼠品系中誘導(dǎo)血小板減少癥的卡鉑的最佳劑量為120mg/kg的分次總劑量(以兩天連續(xù)每天注射給藥，即2x60mg/kg)。如表4中描述的，在第二次施用卡鉑后大約一小時，通過靜脈內(nèi)(推注)注射，用PEG化"1號TPO化合物"或載體(無菌鹽水(SS),無防腐劑的0.9%的氯化鈉)處理小鼠組?；趩挝惑w重施用劑量(100pl/10g體重)。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>Gp=組；Eut=安樂死在第6、8和12天，對每個試驗組中的5只小鼠稱重并然后利用C02窒息對小鼠實施安樂死，并通過心臟穿刺放血。將血液樣品轉(zhuǎn)移至獨立的EDTA(紫頭)微容器中用于血液學(xué)評估。在第6天和第12天處理對照小鼠(5只)組。結(jié)果在圖13-14中示出。到第12天，單獨用卡鉑處理小鼠引起小鼠中的血紅蛋白水平下降大于25%。用所有劑量的PEG化"1號TPO化合物"處理完全抑制了這種降低。PEG化"1號TPO化合物"也有效抑制了由卡鉑處理誘導(dǎo)的RBC計數(shù)和血細(xì)胞比容的降低。相對于第-1天釆集的體重測量值，單獨用卡鉑處理或用卡鉑+多種劑量的PEG化"1號TP0化合物"處理的所有組中的基本上全部小鼠在第6、8和12天經(jīng)歷了體重減輕。對13天的試驗期間測量的體重進(jìn)行分析表明，單獨用卡鉑處理引起了觀測到的體重降低。在該試驗中，PEG化"1號TP0化合物"沒有顯示出影響了體重減輕或體重恢復(fù)。到第4天，僅用卡鉑處理小鼠的小鼠開始表現(xiàn)出改變的外觀和行為。一些小鼠采取了拱起的姿勢并表現(xiàn)出蓬亂。許多小鼠還排軟的糞便。少數(shù)動物表現(xiàn)出萎蔫，并且少數(shù)有血便。用PEG化"1號TP0化合物"的處理以看似劑量依賴性的方式降低了這些體征的發(fā)生、頻率和嚴(yán)重性。PEG化"1號TP0化合物"發(fā)揮功能，在經(jīng)卡鉑處理的小鼠中維持了紅細(xì)胞譜系的存活，這通過外周血小板計數(shù)和其它血液學(xué)參數(shù)測出。在第12天，發(fā)現(xiàn)所有劑量的PEG化"1號TP0化合物"均完全阻止了卡鉑誘導(dǎo)的貧血。這些結(jié)果暗示了巨核細(xì)胞和紅細(xì)胞譜系對PEG化"1號TP0化合物"的"存活維持"效應(yīng)的差異敏感性/反應(yīng)性。實施例5如下面描述的，用相隔10天的兩輪化學(xué)治療劑(卡鉑)處理小鼠組，每輪包括連續(xù)兩天的卡鉑處理(即在第-l天和第0天以及在第IO天和第11天以70mg/kg/天施用卡鉑)。用于這些存活研究的卡鉑的劑量超過了小鼠的最大耐受劑量(即120mg/kg;在連續(xù)2天以60mg/kg/天施用)。如下面描述的，在每輪中的第二次施用卡鉑后1小時(即第0天和第11天)，通過靜脈內(nèi)(推注)注射，用PEG化"1號TP0化合物"(100網(wǎng)/kg)或載體(無菌鹽水(SS)，無防腐劑的0.9%的氯化鈉)處理小鼠?；趩挝惑w重施用劑量(100jal/10g體重)。試驗設(shè)計<table>complextableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>在第7、10、18、21和28天，對每個試驗組(25只小鼠/組)中的5只小鼠稱重并然后利用C02窒息對小鼠實施安樂死，并通過心臟穿刺放血。將血液樣品轉(zhuǎn)移至獨立的EDTA(紫頭)微容器中用于血液學(xué)評價。僅用載體處理的對照小鼠組以相同的方式進(jìn)行處理。結(jié)果在圖15中示出。用兩輪卡鉑處理小鼠導(dǎo)致發(fā)展中度貧血(在第10天和21天之間可觀察到)，而用2輪卡鉑和PEG化"1號TPO化合物"處理的小鼠在整個該期間維持了類似于對照組的血細(xì)胞比容值。有趣的是，在沒有用于血液學(xué)評價的小鼠中，僅用卡鉑處理的組中有7只小鼠在第4天和第18天間死亡，而在相同期間接受聯(lián)合治療的組中僅l只小鼠死亡，大多數(shù)死亡發(fā)生在貧血期間。這些結(jié)果暗示，卡鉑誘導(dǎo)的貧血可能促成了接受高水平化學(xué)治療的小鼠的死亡，而PEG化"1號TPO化合物"可能發(fā)揮作用通過防止貧血發(fā)展而增加小鼠的存活率。實施例6對于機(jī)理研究，用載體或遞增量的卡鉑(即60、70或80rag/kg)處理小鼠組連續(xù)2天(第-l天和第0天)。如表5中描述的，在第二次施用卡鉑后大約一小時，通過靜脈內(nèi)(推注)注射，用PEG化"1號TP0化合物"(10(^g/kg)或載體(無菌鹽水(SS)，無防腐劑的0.9%的氯化鈉)處理小鼠組。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>在第15天，將所有處理組中的小鼠用C02窒息實施安樂死，并通過心臟穿刺放血。將血液樣品轉(zhuǎn)移至獨立的EDTA(紫頭)微容器中用于血液學(xué)評估。另外，將對照小鼠和用2x70mg/kg卡鉑處理的小鼠(用或不用PEG化"1號TPO化合物"共處理)的幾種器官(包括腦)分離并處理以用于組織學(xué)檢查。針對纖維蛋白原/纖維蛋白，對這些組織的切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)處理。在第15天，用遞增量的卡鉑單獨處理小鼠引起接受2x70mg/kg劑量的小鼠中血小板數(shù)目顯著降低，并在用60和70mg/kg卡鉑(單獨)處理的小鼠中引起血細(xì)胞比容(HCT)劑量依賴性的降低。通過用PEG化"1號TPO化合物"處理完全抑制了這種由卡鉑誘導(dǎo)的血小板和RBC計數(shù)的降低。應(yīng)該注意，在試驗終止前，用2x80mg/kg卡鉑(單獨)處理的所有小鼠或者死亡，或者實施了安樂死(瀕死)。有趣的是，用2x80mg/kg卡鉑和PEG化"1號TPO化合物"處理的所有小鼠均存活直到預(yù)定的研究終止，并且在第15天沒有表現(xiàn)出血小板減少癥或貧血。對照小鼠腦的組織學(xué)評價展示了表現(xiàn)正常的小血管。許多血管含有紅細(xì)胞并表現(xiàn)了纖維蛋白原的暗淡的染色。關(guān)于纖維蛋白原/纖維蛋白的暗淡的血管內(nèi)染色是預(yù)期在這些對照小鼠中出現(xiàn)的，因為纖維蛋白原是血漿的正常組分。來自單獨用卡鉑(2x70mg/kg)處理的小鼠的腦切片含有由對纖維蛋白原/纖維蛋白強(qiáng)烈陽性染色的材料完全閉塞的小血管。在來自該劑量組的所有小鼠的組織切片中頻繁地觀察到了這些小血栓。來自用卡鉑和PEG化"1號TPO化合物"處理的小鼠的腦切片中的小血管表現(xiàn)正?；蛘唢@示出的纖維蛋白原/纖維蛋白染色僅比對照組稍暗。對于整個劑量組，注意到了單個微血栓事件。該試驗的結(jié)果表明，微血栓事件是由化學(xué)療法引起的，并且由于微血栓據(jù)認(rèn)為是有助于RBC的機(jī)械裂解，則有可能這些血管事件有助于化學(xué)療法誘導(dǎo)的貧血。另外，PEG化"1號TPO化合物"防止這些血栓事件發(fā)展的能力可能是機(jī)理的組成部分，通過該機(jī)理，PEG化"1號TPO化合物"防止了由化學(xué)療法誘導(dǎo)的貧血的發(fā)展。最后，微血栓事件也可能促進(jìn)了接受高劑量化學(xué)療法的動物的死亡。因而，PEG化"1號TPO化合物"防止這些血栓事件發(fā)展的能力可能是接受高劑量化學(xué)療法和該試劑的動物存活率增加的原因。圖18A和圖18B示出了用PEG化"1號TP0化合物"處理對經(jīng)卡鉑處理的小鼠的血小板和血細(xì)胞比容的影響[如實施例6中所說明的]。圖19顯示，施用PEG化"1號TPO化合物"減少了經(jīng)卡鉑處理的小鼠的腦切片中纖維蛋白原的沉積和血凝塊，如實施例6中所說明的。提出的作用機(jī)理圖16示出了據(jù)信為PEG化"1號TPO化合物"的抗貧血效果的作用機(jī)理。正如從圖16可以看出，化學(xué)療法誘導(dǎo)了對小血管內(nèi)皮的損傷并抑制了血細(xì)胞生成。缺少PEG化"1號TPO化合物"時，因為循環(huán)血小板由改變的內(nèi)皮激活并沉積于小血管壁上，血小板減少癥快速發(fā)展。改變的血小板(由受損的骨髓產(chǎn)生)有助于該過程?；罨难“逭T導(dǎo)纖維蛋白在受損傷的血管內(nèi)沉積并發(fā)展微血管病性血栓。這些微血管病性血栓介導(dǎo)了紅細(xì)胞的機(jī)械破壞，促進(jìn)了化學(xué)療法誘導(dǎo)的貧血的發(fā)展。用PEG化"1號TPO化合物"共處理抑制了化學(xué)療法誘導(dǎo)的對血管內(nèi)皮的損傷和/或促進(jìn)了循環(huán)血小板的抗血栓和促纖維蛋白溶解的特性。微血管病性血栓沒有發(fā)展并且紅細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性得以維持。PEG化"1號TPO化合物"對骨髓中的巨核細(xì)胞前體的作用促進(jìn)了正常血小板的產(chǎn)生。維持了止血并且防止貧血。圖17示出了據(jù)信為PEG化"1號TPO化合物"對造血細(xì)胞的一些譜系效果。實施例7結(jié)合測定肽化合物的活性可以用標(biāo)準(zhǔn)相對發(fā)光單位測定技術(shù)來測定。該測定法采用例如經(jīng)遺傳工程改造而穩(wěn)定表達(dá)受fos啟動子驅(qū)動的人TPO受體和熒光酶報告基因構(gòu)建體的嚙齒動物細(xì)胞。該測定法如下進(jìn)行將去血清的Baf/3hTP0rfos/lux細(xì)胞暴露于遞增濃度的rhTPO或肽化合物大約18小時，該細(xì)胞表達(dá)人TPO受體c-mpl(hTP0r)和熒光酶報告基因構(gòu)建體。然后將細(xì)胞在含有熒光酶底物的培養(yǎng)基中孵育并用光度計測量細(xì)胞的發(fā)光。如圖20所示，PEG化"1號TPO化合物"以劑量依賴的方式激活重組表達(dá)人TPO-R的Baf/3細(xì)胞。如圖21所示，在用PEG化"1號TPO化合物"刺激細(xì)胞時觀察到了比用相同濃度的TP0刺激細(xì)胞時更強(qiáng)的TPO-R活化。PEG化"1號TP0化合物"的ECs。大約為5pM。盡管上面僅具體描述了優(yōu)選的實施方案，但應(yīng)該理解，本發(fā)明的修改形式和變化形式是可能的，只要不脫離本發(fā)明的精神和預(yù)期范圍。權(quán)利要求1.一種用于預(yù)防在治療后發(fā)展出貧血的方法，包括將有效量的TPO肽化合物施用至需要其的受試者。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述治療選自由用細(xì)胞毒性劑治療、用抗腫瘤劑治療和用放射治療組成的組。3.—種增加紅細(xì)胞產(chǎn)生的方法，包括施用有效量的TPO肽化合物至受試者。4.根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，其中所述受試者是人。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述TP0肽化合物相對于rhTP0和rhIL-ll中的一種或多種具有減少的免疫原性。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述TP0肽化合物相對于rhTP0和rhIL-11中的一種或多種具有提高的PK譜。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述有效量為約lpg/kg體重/每天至約300(ig/kg體重/每天。8.—種用于增加紅細(xì)胞產(chǎn)生的藥物組合物，包含與可藥用載體混合的TP0肽化合物。9.一種治療貧血的方法，包括將有效量的TPO肽化合物施用至需要其的受試者的步驟。10.—種用于治療貧血的藥物組合物，包含與可藥用載體混合的TPO肽化合物。11.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述紅細(xì)胞選自由譜系特異性紅細(xì)胞前體細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞和紅細(xì)胞組成的組。12.—種預(yù)防在治療后發(fā)展出貧血的方法，包括將有效量的TPO肽化合物施用至需要其的受試者，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)IEGPTLRQ(2-Nal)LAAR(Sar)(SEQIDN0:5)。13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述治療選自由用細(xì)胞毒性劑治療、用抗腫瘤劑治療和用放射治療組成的組。14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述有效量為約lpg/kg體重/每天至約300pg/kg體重/每天。15.—種增加紅細(xì)胞產(chǎn)生的方法，包括施用有效量的TPO肽化合物至受試者，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)IEGPTLRQ(2-Nal)LAAR(Sar)(SEQIDNO:5)。16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述紅細(xì)胞選自由譜系特異性紅細(xì)胞前體細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞和紅細(xì)胞組成的組。17.—種用于增加紅細(xì)胞產(chǎn)生的藥物組合物，包含與可藥用載體混合的TP0肽化合物，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)IEGPTLRQ(2-Nal)LAAR(Sar)(SEQIDNO:5)。18.—種治療貧血的方法，包括將有效量的TPO肽化合物施用至需要其的受試者的步驟，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)IEGPTLRQ(2-Nal)LAAR(Sar)(SEQIDNO:5)。19.一種用于治療貧血的藥物組合物，包含與可藥用載體混合的TPO肽化合物，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)IEGPTLRQ(2-Nal)LAAR(Sar)(SEQIDNO:5)。20.—種預(yù)防在治療后發(fā)展出貧血的方法，包括將有效量的TPO肽化合物施用至需要其的受試者，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)其中MPEG是分子量大約為20，000道爾頓的甲氧基聚(乙二醇)。21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述治療選自由用細(xì)胞毒性劑治療、用抗腫瘤劑治療和用放射治療組成的組。22.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述有效量為約lpg/kg體重/每天至約300ng/kg體重/每天。23.—種增加紅細(xì)胞產(chǎn)生的方法，包括施用有效量的TPO肽化合物至受試者，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)其中MPEG是分子量大約為20,000道爾頓的甲氧基聚(乙二醇)。24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其中所述紅細(xì)胞選自由譜系特異性紅細(xì)胞前體細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞和紅細(xì)胞組成的組。25.—種用于增加紅細(xì)胞產(chǎn)生的藥物組合物，包含與可藥用載體混合的TPO肽化合物，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)其中MPEG是分子量大約為20，000道爾頓的甲氧基聚(乙二醇)。26.—種治療貧血的方法，包括將有效量的TPO肽化合物施用至需要其的受試者的步驟，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)其中MPEG是分子量大約為20，000道爾頓的甲氧基聚(乙二醇)。27.—種用于治療貧血的藥物組合物，包含與可藥用載體混合的TPO肽化合物，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)-其中MPEG是分子量大約為20,000道爾頓的甲氧基聚(乙二醇)。28.—種預(yù)防在治療后發(fā)展出貧血的方法，包括將有效量的TPO肽化合物施用至需要其的受試者，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)IEGPTLRQ(2-Nal)LAAR(Sar)K(NH2)/lEGPTLRQ(2)LAAR(Sar)。29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的方法，其中所述治療選自由用細(xì)胞毒性劑治療、用抗腫瘤劑治療和用放射治療組成的組。30.根據(jù)權(quán)利要求28所述的方法，其中所述有效量為約l|ig/kg體重/每天至約300pg/kg體重/每天。31.—種增加紅細(xì)胞產(chǎn)生的方法，包括施用有效量的TPO肽化合物至受試者，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)IEGPTLRQ(2掘)LAAR(Sar)K(NH2)/IEGPTLRQ(2掘)LAAR(Sar)32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中所述紅細(xì)胞選自由譜系特異性紅細(xì)胞前體細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞和紅細(xì)胞組成的組。33.—種用于增加紅細(xì)胞產(chǎn)生的藥物組合物，包含與可藥用載體混合的TPO肽化合物，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)IEGPTLRQ(2-Nal)LAAR(Sar)K(NH2)/IEGPTLRQ(2掘)LAAR(Sar)34.—種治療貧血的方法，包括將有效量的TPO肽化合物施用至需要其的受試者的步驟，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>35.—種用于治療貧血的藥物組合物，包含與可藥用載體混合的TPO肽化合物，所述TPO肽化合物包含以下結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>全文摘要本發(fā)明公開了治療貧血的方法。所述方法包括施用TPO肽化合物至受試者。本發(fā)明還公開了包含TPO肽化合物和可藥用載體的藥物組合物以及采用經(jīng)標(biāo)記的TPO肽化合物的診斷方法。文檔編號A61K38/18GK101374540SQ200680052857公開日2009年2月25日申請日期2006年2月14日優(yōu)先權(quán)日2006年2月14日發(fā)明者B·R·麥唐納,E·J·于爾科夫,J·K·韋斯申請人:詹森藥業(yè)有限公司