一種基于石墨炔和銀納米籠的人麻疹免疫傳感器的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種基于石墨炔和銀納米籠的人麻疹免疫傳感器的制備方法，屬于新型生物傳感檢測技術(shù)領(lǐng)域。石墨炔擁有sp雜化態(tài)形成的碳碳三鍵線性結(jié)構(gòu)、無順反異構(gòu)體和高共軛等優(yōu)點，具備優(yōu)異的電學、光學和光電性能而成為下一代新的電子和光電器件的關(guān)鍵材料。同時利用硫堇與石墨炔良好的π?π共軛作用，實現(xiàn)了信號分子的高通量負載，減少了因結(jié)合不穩(wěn)定造成的信號誤差。因此，基于石墨炔和銀納米籠的電化學免疫傳感器實現(xiàn)了對麻疹病毒的靈敏檢測。
【專利說明】
一種基于石墨炔和銀納米籠的人麻疹免疫傳感器的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種基于石墨炔和銀納米籠的人麻疹免疫傳感器的制備方法，采用石墨炔@硫堇GyOTH復合材料作為檢測基底材料，增強導電性的同時，又使得信號分子硫堇成功固定在傳感表面上，通過銀納米籠的交聯(lián)作用，制備一種檢測人麻疹的電化學免疫傳感器，屬于新型功能材料與生物傳感檢測技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]麻疹病毒是麻疹的病原體，它是兒童常見的一種急性傳染病，其傳染性很強，以皮丘疹、發(fā)熱及呼吸道癥狀為特征。尤其是在發(fā)展中國家，麻疹仍然是兒童死亡的一個重要原因。因此對于麻疹的病前靈敏檢測顯得尤為重要。
[0003]目前對于人麻疹病毒的檢測方法不是很多，主要以酶聯(lián)免疫法為主。但是酶聯(lián)免疫法存在著很多缺點，例如來自代謝物的干擾，它們在原型藥的免疫測定中具有交叉反應性，能顯著干擾生物利用度的測定;或者是來自抗體形成的干擾，可影響蛋白多肽類藥物的清除和藥理作用，并對其定量測定產(chǎn)生影響。免疫傳感器是將免疫學方法與分析化學方法相結(jié)合的一種生物傳感器，通過抗原與抗體之間的特異性結(jié)合，構(gòu)建了結(jié)構(gòu)簡單、選擇性好、操作簡便、靈敏度高、易于小型化、可連續(xù)、快速自動化檢測分析的免疫傳感器。本發(fā)明制備了一種基于石墨炔和銀納米籠的人麻疹免疫傳感器。
[0004]本發(fā)明采用硫堇與石墨炔良好的31-31共軛作用形成的復合材料為基底材料，實現(xiàn)了信號分子的高通量負載，減少了因結(jié)合不穩(wěn)定造成的信號誤差。銀納米籠作為連接基底材料和免疫分子的交聯(lián)劑，在保證穩(wěn)定性的前提下，增加了人麻疹抗體分子的負載，實現(xiàn)了對麻疹病毒的靈敏檢測。該方法具有成本低、特異性好、檢測快速等優(yōu)點，而且制備過程較為簡單，有效克服了目前人麻疹病毒檢測方法的不足。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的之一是基于石墨炔O硫堇GyOTH復合材料為基底材料，構(gòu)建了一種無酶，超靈敏的電化學免疫傳感器。
[0006]本發(fā)明的目的之二是將銀納米籠作為檢測抗體的負載物，實現(xiàn)了對人麻疹病毒的超靈敏檢測。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
1.一種基于石墨炔和銀納米籠的人麻疹免疫傳感器的制備方法
(1)將直徑3mm的玻碳電極用Al2O3拋光粉打磨，超純水清洗干凈;將5?10 yU0.7?5 mg/mL石墨炔O硫堇GyOTH復合材料滴加到電極表面，超純水沖洗，室溫下瞭干成膜；
(2)滴加5?10HL的銀納米籠在電極表面，超純水沖洗，室溫下晾干；
(3)依次滴加5?10yL人麻疹I(lǐng)gM抗體，5?10 yL、質(zhì)量分數(shù)為0.5%?5%的牛血清白蛋白BSA溶液于電極表面，超純水沖洗，4 0C冰箱中晾干；
(4)滴加5?10HU0.003?2.8 ng/mL的一系列不同濃度的人麻疹I(lǐng)gM抗原標準溶液至電極表面，超純水沖洗，4 0C冰箱中晾干。
[0008]2.石墨炔O硫堇GyOTH復合材料的制備
將2 ~ 8 mg的石墨炔Gy和0.1 ~ 5 mg的硫堇TH加入I?3 mL的超純水中，振蕩12 h，得到復合材料石墨炔@硫堇GyOTH。
[0009]3.銀納米籠的制備
將0.1?2 g聚乙烯吡咯烷酮PVP，0.1?4 mL飽和硫化鈉乙二醇溶液加入到10?100mL乙二醇溶液中，于80?160°(:下加熱2.5 h，得到混合液A;將0.01?10 mg的硝酸銀加入到混合液A中，80?160°C下保持10?100分鐘，得到Ag納米籠。
[0010]本發(fā)明的有益成果
(I)石墨炔的使用，實現(xiàn)了對傳感器底層比表面積成功放大，同時能夠很好的促進電極表面的電子傳遞，實現(xiàn)了高通量負載。
[0011](2)石墨炔O硫堇GyOTH復合材料的使用，使得信號分子得以增加，擴展了傳感器的線性范圍，降低了檢出限。
[0012](3)銀納米籠的使用，增加了傳感器表面的電子傳輸能量，增強了傳感器的穩(wěn)定性，實現(xiàn)了超靈敏穩(wěn)定檢測。
【具體實施方式】
[0013]實施例1
一種基于石墨炔和銀納米籠的人麻疹免疫傳感器的制備方法
(1)將直徑3mm的玻碳電極用Al2O3拋光粉打磨，超純水清洗干凈;將5 yU0.7 mg/mL石墨炔@硫堇GyOTH復合材料滴加到電極表面，超純水沖洗，室溫下晾干成膜；
(2)滴加5HL的銀納米籠在電極表面，超純水沖洗，室溫下晾干；
(3)依次滴加5UL人麻疹I(lǐng)gM抗體，5 uL、質(zhì)量分數(shù)為0.5%的牛血清白蛋白BSA溶液于電極表面，超純水沖洗，4 0C冰箱中晾干；
(4)滴加5UU0.003?2.8 ng/mL的一系列不同濃度的人麻疹I(lǐng)gM抗原標準溶液至電極表面，超純水沖洗，4 V冰箱中晾干。
[0014]實施例2
一種基于石墨炔和銀納米籠的人麻疹免疫傳感器的制備方法
(1)將直徑3mm的玻碳電極用Al2O3拋光粉打磨，超純水清洗干凈;將6.5汕、2 mg/mL石墨炔@硫堇GyOTH復合材料滴加到電極表面，超純水沖洗，室溫下晾干成膜；
(2)滴加6.5UL的銀納米籠在電極表面，超純水沖洗，室溫下晾干；
(3)依次滴加6.5UL人麻疹I(lǐng)gM抗體，6.5 yL、質(zhì)量分數(shù)為3%的牛血清白蛋白BSA溶液于電極表面，超純水沖洗，4 0C冰箱中晾干；
(4)滴加6.5yL、0.003 ~ 2.8 ng/mL的一系列不同濃度的人麻疹I(lǐng)gM抗原標準溶液至電極表面，超純水沖洗，4 V冰箱中晾干。
[0015]實施例3
一種基于石墨炔和銀納米籠的人麻疹免疫傳感器的制備方法
(I)將直徑3 mm的玻碳電極用Al2O3拋光粉打磨，超純水清洗干凈;將10 pL,5 mg/mL石墨炔@硫堇GyOTH復合材料滴加到電極表面，超純水沖洗，室溫下晾干成膜； (2)滴加10nL的銀納米籠在電極表面，超純水沖洗，室溫下晾干；
(3)依次滴加10UL人麻疹I(lǐng)gM抗體，10 uL、質(zhì)量分數(shù)為5%的牛血清白蛋白BSA溶液于電極表面，超純水沖洗，4 0C冰箱中晾干；
(4)滴加10UU0.003?2.8 ng/mL的一系列不同濃度的人麻疹I(lǐng)gM抗原標準溶液至電極表面，超純水沖洗，4 V冰箱中晾干。
[0016]實施例4
石墨炔@硫堇GyOTH復合材料的制備
將2 mg的石墨炔Gy和0.1 mg的硫堇TH加入I mL的超純水中，振蕩12 h，得到石墨炔O硫堇GyOTH復合材料。
[0017]實施例5
石墨炔@硫堇GyOTH復合材料的制備
將6 mg的石墨炔Gy和3 mg的硫堇TH加入2 mL的超純水中，振蕩12 h，得到石墨炔O硫堇GyOTH復合材料。
[0018]實施例6
石墨炔@硫堇GyOTH復合材料的制備
將8 mg的石墨炔Gy和5 mg的硫堇TH加入3 mL的超純水中，振蕩12 h，得到石墨炔O硫堇GyOTH復合材料。
[0019]實施例7
銀納米籠的制備
將0.1 g聚乙烯吡咯烷酮PVP，0.1 mL飽和硫化鈉乙二醇溶液加入到10 mL乙二醇溶液中，于80 °(:下加熱2.5 h，得到混合液A;將0.01 mg的硝酸銀加入到混合液A中，80 °C下保持10分鐘，得到Ag納米籠。
[0020]實施例8
銀納米籠的制備
將I g聚乙烯吡咯烷酮PVP，2 mL飽和硫化鈉乙二醇溶液加入到50 mL乙二醇溶液中，于120°(:下加熱2.5 h，得到混合液A;將2 mg的硝酸銀加入到混合液A中，120°C下保持50分鐘，得到Ag納米籠。
[0021 ] 實施例9
銀納米籠的制備
將2 g聚乙烯吡咯烷酮PVP，4 mL飽和硫化鈉乙二醇溶液加入到100 mL乙二醇溶液中，于160°C下加熱2.5 h，得到混合液A ；將10 mg的硝酸銀加入到混合液A中，160 °C下保持100分鐘，得到Ag納米籠。
【主權(quán)項】
1.一種基于石墨炔和銀納米籠的人麻疹免疫傳感器的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)將直徑3mm的玻碳電極用Al2O3拋光粉打磨，超純水清洗干凈;將5?10 yU0.7?5 mg/mL石墨炔O硫堇GyOTH復合材料滴加到電極表面，超純水沖洗，室溫下瞭干成膜； (2)滴加5?10HL的銀納米籠在電極表面，超純水沖洗，室溫下晾干； (3)依次滴加5?10yL人麻疹I(lǐng)gM抗體，5?10 yL、質(zhì)量分數(shù)為0.5%?5%的牛血清白蛋白BSA溶液于電極表面，超純水沖洗，4 0C冰箱中晾干； (4)滴加5?10HU0.003?2.8 ng/mL的一系列不同濃度的人麻疹I(lǐng)gM抗原標準溶液至電極表面，超純水沖洗，4 0C冰箱中晾干。2.如權(quán)利要求1所述的一種基于石墨炔和銀納米籠的人麻疹免疫傳感器的制備方法，所述的石墨炔@硫堇GyOTH復合材料，其特征在于，包括以下步驟: 將2 ~ 8 mg的石墨炔Gy和0.1 ~ 5 mg的硫堇TH加入I?3 mL的超純水中，振蕩12 h，得到復合材料石墨炔@硫堇GyOTH。3.如權(quán)利要求1所述的一種基于石墨炔和銀納米籠的人麻疹免疫傳感器的制備方法，所述的銀納米籠，其特征在于，包括以下步驟: 將0.1?2 g聚乙烯吡咯烷酮PVP，0.1?4 mL飽和硫化鈉乙二醇溶液加入到10?100mL乙二醇溶液中，于80?160°(:下加熱2.5 h，得到混合液A;將0.01?10 mg的硝酸銀加入到混合液A中，80?160°C下保持10?100分鐘，得到Ag納米籠。
【文檔編號】G01N33/569GK105842314SQ201610339988
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年5月23日
【發(fā)明人】任祥, 魏琴, 吳丹, 馬洪敏, 龐雪輝, 李燕, 張勇
【申請人】濟南大學