專(zhuān)利名稱(chēng)：：纖溶酶用于預(yù)防或降低非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展率和治療其他眼部病癥的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于預(yù)防或降低非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變進(jìn)展為增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展率的非手術(shù)方法，以及用于治療其他眼部病癥如視網(wǎng)膜缺血、視網(wǎng)膜炎癥、視網(wǎng)膜水腫、黃斑裂孔、牽拉性視網(wǎng)膜脫離、牽拉性視網(wǎng)膜病變、玻璃體出血和牽拉性黃斑病變的非手術(shù)方法，所述方法通過(guò)向患者玻璃體內(nèi)給藥足以不經(jīng)過(guò)手術(shù)而產(chǎn)生玻璃體后脫離的有效量的絲氨酸蛋白酶進(jìn)行。
背景技術(shù)：
：絲氨酸蛋白酶是已知且熟知的，其包括纖溶酶、微纖溶酶(microplasmin)禾卩小纖溶酶(miniplasmin)。美國(guó)專(zhuān)利2,624,691和3,234,106公開(kāi)了從血液中純化纖溶酶的方法。美國(guó)專(zhuān)利4,774,087公開(kāi)了高pH下通過(guò)纖溶酶/纖溶酶原作用產(chǎn)生的微纖溶酶和微纖溶酶原。美國(guó)專(zhuān)利5,304,118公開(kāi)了一種用于對(duì)眼睛進(jìn)行玻璃體切割術(shù)的方法，其通過(guò)將纖溶酶引入玻璃體液中，從而導(dǎo)致玻璃體后脫離，之后除去玻璃體，并用無(wú)菌生理鹽水代替。美國(guó)專(zhuān)利5,637,299公開(kāi)了用去糖基化形式的纖溶酶增強(qiáng)溶栓治療。美國(guó)專(zhuān)利5,722,428公開(kāi)了一種用于產(chǎn)生玻璃體后脫離的方法，其采用特異性切割I(lǐng)V型膠原和纖連蛋白的酶，促使玻璃體部分或完全后脫離。美國(guó)專(zhuān)利6，355，243公開(kāi)了溶栓治療的方法，其通過(guò)導(dǎo)管向凝塊部位直接給藥活性纖溶酶。美國(guó)專(zhuān)利6,585,972公開(kāi)了用于使眼睛玻璃體中的膠原交聯(lián)并導(dǎo)致玻璃體后界膜與視網(wǎng)膜分離的方法。美國(guó)專(zhuān)利6,733,750公開(kāi)了通過(guò)將包含纖溶酶原和纖溶酶原激活劑酶的組合物引入眼腔中引起玻璃體后脫離以溶解玻璃體中的血凝塊的方法。有報(bào)道前述組合物引起玻璃體與視網(wǎng)膜的基本完全后脫離，而不引起難以控制或嚴(yán)重的視網(wǎng)膜炎癥，并溶解玻璃體中的血凝塊。美國(guó)專(zhuān)利6，787，135公開(kāi)了將足以引起玻璃體后脫離的量的纖溶酶引入玻璃體中，將玻璃體從眼中機(jī)械分離，將替代液引入眼中，并將足以降低玻璃體中總金屬蛋白酶活性的量的纖溶酶引入眼中。己公布的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)2002/0042652公開(kāi)了一種用于抑制血管增生的方法，其通過(guò)在眼中引入組合物誘導(dǎo)玻璃體后脫離進(jìn)行。該組合包含纖溶酶原、膠原交聯(lián)劑以及至少一種纖溶酶原激活劑。所述組合物以有效引起玻璃體交聯(lián)并引起玻璃體與視網(wǎng)膜基本上完全或部分脫離而不引起視網(wǎng)膜炎癥的量引入玻璃體中。己公布的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)2002/0139378公開(kāi)了一種用于使得玻璃體后皮質(zhì)與眼視網(wǎng)膜分離的方法。該方法包括在眼的玻璃體液中引入纖溶酶的步驟。纖溶酶的引入可以通過(guò)注射或通過(guò)緩釋裝置進(jìn)行。已公布的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)2002/0192794公開(kāi)了用于生產(chǎn)可逆的滅活酸化纖溶酶的方法，所述可逆的滅活酸化纖溶酶可用于溶栓治療的給藥中。已公布的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)2003/0026798公開(kāi)了溶栓的方法，其使得可以使用一種包含可逆的滅活酸化纖溶酶的纖維溶解組合物并將纖溶酶定位遞送至血管栓塞部位。已公布的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)2003/0113313公開(kāi)了一種用于抑制血管增生的方法，其通過(guò)在眼中單獨(dú)引入各成分，以在眼中產(chǎn)生引起玻璃體完全后脫離的量的纖溶酶，其中玻璃體視網(wǎng)膜交界面沒(méi)有任何玻璃體皮質(zhì)殘留物。該方法給藥賴(lài)氨酸-纖溶酶原、至少一種重組纖溶酶原激活劑和嗜熱菌蛋白酶以及用于在玻璃體中形成腔的氣體輔劑的組合。已公布的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)2003/0147877公幵了一種用于液化眼中玻璃體液的方法。所述方法包括將纖溶酶遞送入眼中玻璃體內(nèi)并使玻璃體和纖溶酶共同溫育一段時(shí)間的步驟。纖溶酶可以通過(guò)注射或緩釋裝置引入，并可以用于治療眼部病癥如糖尿病視網(wǎng)膜病變、黃斑裂孔、黃斑皺褶、眼內(nèi)感染、眼內(nèi)異物以及視網(wǎng)膜脫離。已公開(kāi)的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)2003/0175263('263)公開(kāi)了調(diào)節(jié)眼玻璃體中總基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)活性的方法。還公開(kāi)了酶輔助的玻璃體切割術(shù)方法，其包括將足以引起玻璃體后脫離的量的纖溶酶引入玻璃體中，將玻璃體從眼中機(jī)械分離，將替代液引入眼中，并將足以降低玻璃體中總基質(zhì)金屬蛋白酶活性的量的纖溶酶加入眼中的替代液中。已公布的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)'263第0006段提到一單位纖溶酶活性通過(guò)生色底物S-2251的水解進(jìn)行測(cè)定，其引用Friberger的出版物，優(yōu)選地，用于抑制玻璃體切割術(shù)后玻璃體中的MMP活性的纖溶酶的量小于一個(gè)單位。'263的摘要指出該發(fā)明提供了抑制多種疾病病癥進(jìn)展的方法，所述病癥包括增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變。使用高濃度的纖溶酶產(chǎn)生PVD后，在短時(shí)間(0.5-2小時(shí))內(nèi)跟著進(jìn)行手術(shù)去除內(nèi)界膜后，使用少于一個(gè)單位的纖溶酶抑制增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展。因此，在這種情況下，該濃度的纖溶酶不會(huì)導(dǎo)致玻璃體后脫離(PVD)，因?yàn)镻VD已經(jīng)通過(guò)藥理學(xué)和手術(shù)介入完成。'263的第0020段指出，在其實(shí)施美國(guó)專(zhuān)利5,304,118中所描述的玻璃體切割術(shù)方法中，在手術(shù)切割玻璃體前產(chǎn)生玻璃體后脫離所需要的纖溶酶的量為1至3個(gè)單位的纖溶酶。令人驚奇地，申請(qǐng)人已發(fā)現(xiàn)，當(dāng)將纖溶酶注射入玻璃體中并使得保持在其中時(shí)，不用進(jìn)一步的手術(shù)，少得多的量的纖溶酶就能夠產(chǎn)生PVD。申請(qǐng)人使用等價(jià)于約0.5至約1000pig的纖溶酶注射入玻璃體內(nèi)，優(yōu)選約1.0至500pg的纖溶酶注射入玻璃體內(nèi)，更優(yōu)選約10至400pg的纖溶酶注射入玻璃體內(nèi)，最優(yōu)選約50至200pg的纖溶酶注射入玻璃體內(nèi)，通過(guò)不進(jìn)行手術(shù)而產(chǎn)生PVD來(lái)預(yù)防或降低非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變進(jìn)展為增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展率。根據(jù)'263方法的1個(gè)單位相當(dāng)于4.7個(gè)國(guó)際單位(不同底物)。因此，<1個(gè)"單位"將等于小于4.7IU。申請(qǐng)人的纖溶酶為22.5)ig/IU，因此申請(qǐng)人的0.5至1000ng的范圍相當(dāng)于0.02IU至(大約)44.4IU或'263單位為0.005-9.45RJ。申請(qǐng)人通過(guò)引起PVD而不是通過(guò)滅活玻璃/丄i^4"tAA、n^4"="、4^Z"^L7TETO_/rr*"U丄iAl丄、ki"^=1、r^z:Amrrrtn廿tr^=rtiV^上l、_tLf^iy+TM于住twMMr術(shù)近i丁了貝叨現(xiàn)pnK4t^菅土'i土鵬乂水，內(nèi)個(gè)xra月吳訥艾tfj進(jìn);皮率。根據(jù)美國(guó)專(zhuān)利5,304,118('11S)，其需要1至3個(gè)單位的纖溶酶來(lái)引起PVD。根據(jù)'263，注射入眼中的替代液中的纖溶酶小于1個(gè)單位抑制玻璃體切割手術(shù)后增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展。在'263中，申請(qǐng)人采用小于1個(gè)單位的纖溶酶來(lái)預(yù)防或降低非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展率，其通過(guò)引起PVD而不進(jìn)行手術(shù)來(lái)進(jìn)行。已公布的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)2004/0081643公開(kāi)了一種用于抑制血管增生的方法，其通過(guò)在眼內(nèi)引入組合物以引起玻璃體后脫離來(lái)進(jìn)行。所述組合物包含至少兩種選自特別是纖溶酶和嗜熱菌蛋白酶的化合物，其量足以引起玻璃體從視網(wǎng)膜基本完全或部分后脫離而不引起視網(wǎng)膜炎癥并且溶解玻璃體中的血凝塊。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供一種用于預(yù)防或降低非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變進(jìn)展為增生形式的糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展率的非手術(shù)方法，其通過(guò)向患有非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的患者玻璃體內(nèi)給藥有效量的絲氨酸蛋白酶，所述有效量的絲氨酸蛋白酶足以不經(jīng)過(guò)手術(shù)而導(dǎo)致玻璃體后脫離。優(yōu)選地，所述絲氨酸蛋白酶選自纖溶酶、微纖溶酶和小纖溶酶。更優(yōu)選地，所述絲氨酸蛋白酶是纖溶酶，且該纖溶酶從由人血液分級(jí)分離得到的纖溶酶原獲得。所述絲氨酸蛋白酶以等價(jià)于約0.5至約1000嗎的纖溶酶的量玻璃體內(nèi)給藥注射入玻璃體內(nèi)，優(yōu)選約1.0至500pg的纖溶酶注射入玻璃體內(nèi)，更優(yōu)選約10至400pg的纖溶酶注射入玻璃體內(nèi)，最優(yōu)選約50至200pg的纖溶酶注射入玻璃體內(nèi)。該方法的實(shí)施既不用去除玻璃體(例如玻璃體切割術(shù))也不需要MMP的滅活。本發(fā)明還提供了一種用于治療視網(wǎng)膜缺血、視網(wǎng)膜炎癥、視網(wǎng)膜水腫、黃斑裂孔、牽拉性視網(wǎng)膜脫離、牽拉性視網(wǎng)膜病變、玻璃體出血以及牽拉性黃斑病變的非手術(shù)方法，其通過(guò)向患有這些眼部病癥中的一種或多種的患者玻璃體內(nèi)給藥有效量的絲氨酸蛋白酶以降低視網(wǎng)膜缺血、視網(wǎng)膜炎癥、視網(wǎng)膜水腫、黃斑裂孔、牽拉性視網(wǎng)膜脫離、牽拉性視網(wǎng)膜病變、玻璃體出血以及牽拉性黃斑病變。更優(yōu)選地，所述絲氨酸蛋白酶為纖溶酶、微纖溶酶和小纖溶酶。最優(yōu)選地，所述絲氨酸蛋白酶為從人血液分級(jí)分離得到的纖溶酶原獲得的纖溶酶。所述方法中采用的絲氨酸蛋白酶濃度以及給藥途徑與糖尿病視網(wǎng)膜病變病例中的一樣。具體實(shí)施例方式本發(fā)明可用于非手術(shù)性預(yù)防或降低非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變進(jìn)展為增生形式的糖尿病視網(wǎng)膜病變，其通過(guò)向患有非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的患者玻璃體內(nèi)給藥有效量的絲氨酸蛋白酶，所述有效量的絲氨酸蛋白酶足以不經(jīng)過(guò)手術(shù)而產(chǎn)生玻璃體后脫離。本發(fā)明中采用的絲氨酸蛋白酶可以是纖溶酶、微纖溶酶或小纖溶酶或任何形式的可能在眼玻璃體中導(dǎo)致活性纖溶酶、微纖溶酶或小纖溶酶釋放的纖溶酶，其單獨(dú)給藥或與除組織型纖溶酶原激活劑(tpa)之外的激活劑組合。更優(yōu)選地，所述纖溶酶、微纖溶酶或小纖溶酶應(yīng)該來(lái)自人纖溶酶、微纖溶酶或小纖溶酶或在結(jié)構(gòu)和功能上與人纖溶酶、微纖溶酶或小纖溶酶相同。最優(yōu)選地，本發(fā)明中使用的絲氨酸蛋白酶應(yīng)該是來(lái)自人血或通過(guò)在經(jīng)遺傳修飾使得產(chǎn)生人纖溶酶或天然滅活前體纖溶酶原的酵母、細(xì)菌或單細(xì)胞植物或哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)人纖溶酶而得到的人纖溶酶。在優(yōu)選的方法中，所述絲氨酸蛋白酶應(yīng)該以約0.5至約1000|Lig的纖溶酶的量給藥注射入玻璃體內(nèi)，優(yōu)選約1.0至500pg的纖溶酶注射入玻璃體內(nèi)，更優(yōu)選約10至400)ig的纖溶酶注射入玻璃體內(nèi)，最優(yōu)選約50至200ng的纖溶酶注射入玻璃體內(nèi)，從而產(chǎn)生PVD。所述方法可以通過(guò)注射或插管經(jīng)玻璃體內(nèi)給藥絲氨酸蛋白酶進(jìn)行。優(yōu)選的玻璃體內(nèi)給藥方式為玻璃體腔內(nèi)的多位點(diǎn)注射。更優(yōu)選的玻璃體內(nèi)給藥方式為在接近靶組織的部位注射。最優(yōu)選的玻璃體內(nèi)給藥形式為當(dāng)患者的頭部面向上時(shí)注射入中部玻璃體內(nèi)。除了用于預(yù)防或降低非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展率外，所述絲氨酸蛋白酶還可用于非手術(shù)性治療視網(wǎng)膜缺血、視網(wǎng)膜炎癥、視網(wǎng)膜水腫、黃斑裂孔、牽拉性視網(wǎng)膜脫離、牽拉性視網(wǎng)膜病變、玻璃體出血以及牽拉性黃斑病變，其通過(guò)向患有這些眼部病癥中的一種或多種的患者玻璃體內(nèi)給藥有效量的絲氨酸蛋白酶來(lái)進(jìn)行，以治療特定的眼部病癥。在用于預(yù)防或降低非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展率的方法中，絲氨酸蛋白酶、濃度以及給藥方法可以以這些疾病病癥的治療類(lèi)似的方式變化。所述方法可以通過(guò)以下方式經(jīng)玻璃體內(nèi)給藥絲氨酸蛋白酶注射含有該酶的溶液；注射含有該酶和用于控制pH的額外賦形劑的溶液；注射含有該酶和用于控制重量克分子滲透濃度的額外賦形劑的溶液；注射含有該酶和用于控制pH、離子強(qiáng)度和重量克分子滲透濃度的額外賦形劑的溶液；注射含有該酶和在Jensen(US3，950,513)教導(dǎo)的pH變化中提供給該酶穩(wěn)定性的額外賦形劑的溶液；注射含有該酶和提供絲氨酸蛋白酶最佳凍干的額外賦形劑的溶液，所述最佳凍干包括凍干餅的外觀(guān)，用水、水與非水溶劑的混合物、單獨(dú)非水溶劑的復(fù)制(reconstitution)時(shí)間，以及酶活性的保持。所述方法可以通過(guò)以下方式經(jīng)玻璃體內(nèi)給藥絲氨酸蛋白酶之前30分鐘至2小時(shí)玻璃體內(nèi)注射鋪展劑(即Vitrase⑧、透明質(zhì)酸酶(hylauronidase)等)注射含有該酶的溶液；注射含有該酶和用于控制pH的額外賦形劑的溶液；注射含有該酶和用于控制重量克分子滲透濃度的額外賦形劑的溶液；注射含有該酶和用于控制pH、離子強(qiáng)度和重量克分子滲透濃度的額外賦形劑的溶液；注射含有該酶和在Jensen(US3，950，513)教導(dǎo)的pH變化中提供給該酶穩(wěn)定性的額外賦形劑的溶液；注射含有該酶和提供絲氨酸蛋白酶最佳凍干的額外賦形劑的溶液，所述最佳凍干包括凍干餅的外觀(guān)，用水、水與非水溶劑的混合物、單獨(dú)非水溶劑的復(fù)制時(shí)間，以及酶活性的保持。所述方法還可以通過(guò)以下方式經(jīng)玻璃體內(nèi)給藥絲氨酸蛋白酶進(jìn)行-注射含有所需酶的膠束溶液；注射含有所需酶和用于控制pH和離子強(qiáng)度的賦形劑的膠束溶液；注射含有所需酶和在Jensen(US3,950，513)教導(dǎo)的pH變化中穩(wěn)定該酶的額外賦形劑的膠束溶液；注射含有所需酶的膠束溶液，其中所述膠束的表面活性劑成分優(yōu)選得到帶正電的膠束，更優(yōu)選得到帶負(fù)電的膠束，最優(yōu)選得到不帶電(中性)的膠束；注射含有所需酶的膠束溶液，其中所述膠束的表面活性劑成分主要是單體表面活性分子；注射含有所需酶的膠束溶液，其中所述膠束的成分主要為一種或多種非離子型聚合物表面活性劑(例如，吐溫類(lèi)、司盤(pán)類(lèi)、普流羅尼類(lèi)、Tetronics、Myj、Brij以及聚乙二醇(PEG))。所述方法還可以通過(guò)以下方式經(jīng)玻璃體內(nèi)注射絲氨酸蛋白酶進(jìn)行注射包含該酶或僅包含該酶的懸浮液，其中所述酶可以為固體懸浮顆?；虼嬖谟谠陬w粒懸浮液的液相中的溶液中；注射包含該酶或僅包含該酶的懸浮液，其中所述酶可以為固體懸浮顆?；蚺c控制懸浮液液相pH的賦形劑一起存在于在顆粒懸浮液的液相中的溶液中；注射包含該酶或僅包含該酶的懸浮液，其中所述酶可以為固體懸浮顆?；蚺c控制懸浮液液相重量克分子滲透濃度的賦形劑一起存在于在顆粒懸浮液的液相中的溶液中；注射包含該酶或僅包含該酶的懸浮液，其中所述酶可以為固體懸浮顆?；蚺c控制懸浮液液相的pH、離子強(qiáng)度和重量克分子滲透濃度的賦形劑一起存在于在液相中的溶液中；注射包含該酶或僅包含該酶的懸浮液，其中所述酶可以為固體懸浮顆?；虼嬖谟谠谝合嗪驮贘ensen(US3，950,513)教導(dǎo)的pH變化中穩(wěn)定該酶的額外賦形劑中的溶液中；注射包含該酶或僅包含該酶的懸浮液，其中所述酶可以為固體懸浮顆粒或與提供絲氨酸蛋白酶最佳凍干的額外賦形劑一起存在于在顆粒懸浮液的液相中的溶液中，所述最佳凍干包括凍干餅的外觀(guān)，用水、水與非水溶劑的混合物、單獨(dú)非水溶劑的復(fù)制時(shí)間，以及酶活性的保持。另外要理解，通過(guò)懸浮劑，意在描述在連續(xù)液相中的固體顆粒分散體。另外，要理解這些分散體需要特定的添加劑以對(duì)懸浮液提供物理穩(wěn)定性和粒徑控制，如本領(lǐng)域所公知的，所述添加劑如表面活性劑和聚合物。用于這些懸浮劑的生產(chǎn)方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是熟知的，其在多種教科書(shū)(即Remington、Martindale)、規(guī)章指南(例如USP、EP、JP)和包括專(zhuān)利和出版物在內(nèi)的文獻(xiàn)均有描述，所有這些都包括在本公開(kāi)中。所述方法還可以通過(guò)以下方式經(jīng)玻璃體內(nèi)給藥絲氨酸蛋白酶進(jìn)行注射含有活性酶的脂質(zhì)體溶液，其來(lái)自含有該酶的冷凍脂質(zhì)體溶液或含有該酶的凍干脂質(zhì)體溶液；注射含有活性酶的脂質(zhì)體，其來(lái)自含有該酶以及賦形劑的冷凍脂質(zhì)體溶液或含有該酶以及賦形劑的凍干脂質(zhì)體溶液，所述賦形劑控制脂質(zhì)體溶液水相的pH，其中內(nèi)部水相的pH可以不同于外部連續(xù)溶液相的pH;注射含有活性酶的脂質(zhì)體，其來(lái)自含有該酶以及賦形劑的冷凍脂質(zhì)體溶液或含有該酶以及賦形劑的凍干脂質(zhì)體溶液，所述賦形劑控制脂質(zhì)體溶液的重量克分子滲透濃度；注射含有活性酶的脂質(zhì)體，其來(lái)自含有該酶以及賦形劑的冷凍脂質(zhì)體溶液或含有該酶以及賦形劑的凍干脂質(zhì)體溶液，所述賦形劑提供絲氨酸蛋白酶脂質(zhì)體溶液的最佳凍干，所述最佳凍干包括凍干餅的外觀(guān)，用水、水與非水溶劑的混合物、單獨(dú)非水溶劑的復(fù)溶時(shí)間，以及酶活性的保持；注射含有活性酶的脂質(zhì)體，其來(lái)自含有該酶以及賦形劑的冷凍脂質(zhì)體溶液或含有該酶以及賦形劑的凍干脂質(zhì)體溶液，所述賦形劑穩(wěn)定酶對(duì)Jensen(US3,950,513)教導(dǎo)的pH變化、離子強(qiáng)度和重量克分子滲透濃度；以及注射含有滅活的活性絲氨酸蛋白酶前體的脂質(zhì)體。理解，在每種情況下，所述酶可以位于脂質(zhì)體內(nèi)、脂質(zhì)體的己占體積(excludedvolume)之外或在脂質(zhì)體雙層內(nèi)外同時(shí)存在，另外，術(shù)語(yǔ)"脂質(zhì)體"可以代表單層囊泡、多層囊泡、chocleates以及"noisome"囊泡，其中niosome己為本領(lǐng)域熟知，為由單層磷脂而非傳統(tǒng)的雙層磷脂穩(wěn)定的非水核心。還理解，脂質(zhì)體溶液中的雙層成分在將這些絲氨酸蛋白酶遞送至玻璃體中也被請(qǐng)求保護(hù)。另外，理解，脂質(zhì)體溶液的單個(gè)粒徑可以從小于80nm至大于1000nm變化。最后，還注意，本申請(qǐng)的脂質(zhì)體表面可以是帶正電、帶負(fù)電或相對(duì)中性的?？梢岳斫猓趲щ娭|(zhì)體的情況下單個(gè)磷脂部分可以與酶很好地復(fù)合，從而對(duì)于注射入玻璃體內(nèi)穩(wěn)定纖溶酶pH、重量克分子滲透濃度和/或張力的改變。所述方法還可以通過(guò)以下方式經(jīng)玻璃體內(nèi)給藥絲氨酸蛋白酶進(jìn)行注射含有所需酶的水包油型乳液；注射含有所需酶和控制pH、離子強(qiáng)度和重量克分子滲透濃度的賦形劑的水包油型乳液；注射含有所需酶和穩(wěn)定酶對(duì)Jensen(US3，950，513)教導(dǎo)的pH變化和離子強(qiáng)度變化的賦形劑的水包油型乳液；注射含有所需酶的水包油型乳液，其中油相使所需酶對(duì)pH的變化穩(wěn)定。理解，酶最可能位于這些水包油型乳液的連續(xù)水相中。然而，本領(lǐng)域技術(shù)人員將意識(shí)到，所述酶還可以以油包水型乳液的形式給藥，其中其將位于懸浮于連續(xù)非水相中的水泡中。在該情況下，本文還公開(kāi)了水泡中和連續(xù)非水相中的多種賦形劑的存在。所述方法還可以通過(guò)以下方式經(jīng)玻璃體內(nèi)給藥絲氨酸蛋白酶進(jìn)行將含有所需酶的速溶片加入玻璃體中；將含有所需酶和賦形劑的速溶片加入玻璃體中，所述賦形劑對(duì)片劑制備提供重要的性質(zhì)，所述性質(zhì)包括可壓性、光滑度、硬度和密度；將含有所需酶和賦形劑的速溶片加入玻璃體中，所述賦形劑使酶對(duì)pH和離子強(qiáng)度變化穩(wěn)定；將含有所需酶和賦形劑的速溶片加入玻璃體中，所述賦形劑在幾分鐘到幾小時(shí)內(nèi)控制活性酶的釋放。這些片劑為本領(lǐng)域中己知的，包括小片(MiniTablet),其大小為0.5mnK直徑〈4mm，更優(yōu)選為1.0mm〈直徑〈2mm，最優(yōu)選為1.25mnK直徑〈.75mm，長(zhǎng)度由片劑混合物的劑量(酶濃度)決定。通常其長(zhǎng)度為^0mm，更優(yōu)選為〈5mm,最優(yōu)選為〈2mm。所述方法還可以通過(guò)經(jīng)玻璃體內(nèi)給藥絲氨酸蛋白酶進(jìn)行所述絲氨酸蛋白酶作為粉末；作為與賦形劑混合的粉末，所述賦形劑控制pH和離子強(qiáng)度；作為與賦形劑混合并懸浮于非水溶劑(例如礦物油、維生素e、硅油、全氟碳油、植物油、花生油、紅花油、甘油)中的粉末；作為與賦形劑混合并制粒成顆粒用于給藥于眼的粉末；作為與賦形劑混合并制粒和篩分用于經(jīng)氣霧劑給藥于眼或懸浮于以上給出的溶劑中的粉末。任何以上的實(shí)施方法都可以是優(yōu)選的實(shí)施方法。更優(yōu)選的實(shí)施方法為向眼中注射澄清溶液，最優(yōu)選的實(shí)施方法為向眼中注射含有使酶對(duì)pH穩(wěn)定的賦形劑的澄清溶液。這些賦形劑包括但不限于e氨基己酸、賴(lài)氨酸、精氨酸、白蛋白、人血清白蛋白、碳酸銨以及Jensen(US3,950,513)教導(dǎo)的其他賦形劑。上述制劑的一個(gè)引人注意的補(bǔ)充為密相制劑(denseformulation)的使用，其提供注射后對(duì)視網(wǎng)膜的靶向。例如，給仰臥患者注射于上述任何制劑中的所需絲氨酸蛋白酶后，如果溶液的密度顯著高于周?chē)牟Ａw液，則注射液將向視網(wǎng)膜沉積。能促進(jìn)該密度增加的試劑包括可溶性X射線(xiàn)造影劑(例如，碘海醇、碘克沙醇、碘美普爾、碘佛醇等)、濃糖溶液(例如蔗糖)和已知對(duì)注射人體安全的重金屬絡(luò)合物(例如MRI造影劑)。這些試劑能夠提高注射制劑的密度，本文的公開(kāi)內(nèi)容并不限于它們的使用，而是包括所有這樣的密度增加物質(zhì)。上述制劑的另一個(gè)有趣的補(bǔ)充為粘性制劑的使用，其提供注射后向視網(wǎng)膜的延遲擴(kuò)散。例如，給仰臥患者注射于上述任何制劑中的絲氨酸蛋白酶后，如果溶液的粘度顯著高于周?chē)牟Ａw液，則注射液將延遲擴(kuò)散。能促進(jìn)該粘度增加的試劑包括可溶性X射線(xiàn)造影劑(例如碘海醇、碘克沙醇、碘美普爾、碘佛醇等)、濃縮糖溶液(例如蔗糖)和可溶性聚合物(例如PVP、PVA、PEG等)以及聚合物表面活性劑如Tetronics和Pluronics。這些試劑能夠提高注射制劑的粘度，本文的公開(kāi)內(nèi)容并不限于它們的使用，而是包括所有這樣的粘度增加物質(zhì)。在聚合物表面活性劑的特定情況下，已知高濃度的這些材料能夠誘導(dǎo)反向溫度凝膠效應(yīng)。因此，當(dāng)注射入玻璃體內(nèi)和溫度由室溫變?yōu)轶w溫(例如37。C)時(shí)，制劑將凝膠化，從而更抑制玻璃體內(nèi)的所述酶的擴(kuò)散。延遲擴(kuò)散對(duì)于確保所述酶在擴(kuò)散到視網(wǎng)膜和眼內(nèi)其他表面之前停留在注射處而不是從注射部位播散(即沿注射針跡上行)可能是重要的。作為上述實(shí)施方法的實(shí)例，絲氨酸蛋白酶可以如下表所示配制表l.注射用絲氨酸蛋白酶<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>表2成分量/mL%組成絲氨酸蛋白酶2.0mg0.2海藻糖20mg2乙酸鹽(鈉)2.4mg0.24e氨基己酸3.0mg0.3精氨酸34.8mg3.48生理鹽水足量至1mL93.78表3<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>表7<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>表8<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>表9<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>表10<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>表13<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>用固體片劑的制劑也能夠用來(lái)實(shí)施本發(fā)明，以下表表示:表16<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>表19<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>以上表16-表20中代表的片劑為速溶片劑，其在給藥于眼玻璃體內(nèi)后30分鐘內(nèi)釋放活性酶。實(shí)施例下述實(shí)施例例示了可以如何使用本發(fā)明用于非手術(shù)預(yù)防或降低非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展率和用于治療其他眼部病癥。實(shí)施例1采用27號(hào)針將3.0<pH<8.0的制劑通過(guò)平坦部注射入患有非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變患者的玻璃體，所述制劑含有5%的糖類(lèi)(例如海藻糖、甘露糖(manose)、葡萄糖、果糖、木糖、半乳糖)、少量的緩沖劑(如乙酸鹽、檸檬酸鹽)、等價(jià)于約2.0mg/ml的量的纖溶酶(該量取決于眼體積而變化)并任選地含有纖溶酶穩(wěn)定劑(例如二元氨基酸或其衍生物如e氨基己酸)。纖溶酶的濃度一次注射而不經(jīng)過(guò)手術(shù)足以產(chǎn)生玻璃體后脫離(PVD)。PVD通過(guò)單獨(dú)地常規(guī)眼部檢查、光學(xué)相干斷層成像、B型超聲掃描或其任意組合進(jìn)行確認(rèn)。如果不能確認(rèn)PVD，可以再進(jìn)行一次或多次注射。PVD的產(chǎn)生預(yù)防或降低了非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變進(jìn)展為增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的風(fēng)險(xiǎn)。實(shí)施例2在白內(nèi)障手術(shù)之前，采用27號(hào)針將3.0<pH<8.0的制劑通過(guò)平坦部注射入玻璃體內(nèi)，以引起PVD，作為針對(duì)糖尿病患者術(shù)后黃斑水腫的預(yù)防，所述制劑含有5%的糖類(lèi)(例如海藻糖、甘露糖、葡萄糖、果糖、木糖、半乳糖)、少量的緩沖劑(如乙酸鹽、檸檬酸鹽)、等價(jià)于約2.0mg/ml的量的纖溶酶(該量取決于眼體積而變化)并任選地含有纖溶酶穩(wěn)定劑(例如二元氨基酸或其衍生物如e氨基己酸)。該預(yù)防方法將適用于手術(shù)前具有臨床顯著黃斑水腫的糖尿病患者或通常約定接受白內(nèi)障手術(shù)的糖尿病患者。纖溶酶的濃度一次注射而不經(jīng)過(guò)手術(shù)足以產(chǎn)生玻璃體后脫離(PVD)。PVD通過(guò)單獨(dú)地常規(guī)眼部檢查、光學(xué)相干斷層成像、B型超聲掃描或其任意組合進(jìn)行確認(rèn)。如果不能確認(rèn)PVD，可以再進(jìn)行一次或多次注射。PVD的產(chǎn)生預(yù)防或降低了接受白內(nèi)障手術(shù)的患者的術(shù)后黃斑水腫的風(fēng)險(xiǎn)。纖溶酶注射以在白內(nèi)障手術(shù)前導(dǎo)致預(yù)防性PVD也適用于需要進(jìn)行白內(nèi)障手術(shù)的高度近視患者、透明晶狀體置換患者或任何其他眼內(nèi)屈光手術(shù)的患者。實(shí)施例3患者診斷為具有視網(wǎng)膜脫離風(fēng)險(xiǎn)(例如出現(xiàn)臨床顯著的玻璃體視網(wǎng)膜膜牽拉或出現(xiàn)玻璃體視網(wǎng)膜變性病癥，另一只眼睛己出現(xiàn)視網(wǎng)膜脫離)后，采用實(shí)施例1中所述的制劑和方法將纖溶酶經(jīng)玻璃體內(nèi)注射入玻璃體內(nèi)，其劑量不經(jīng)手術(shù)足以依次酶促切割玻璃體視網(wǎng)膜膜和引起玻璃體剝離，從而預(yù)防了視網(wǎng)膜脫離。實(shí)施例4診斷為玻璃體視網(wǎng)膜牽拉引起黃斑病變或視網(wǎng)膜病變后，采用實(shí)施例1中所述的制劑和方法將纖溶酶經(jīng)玻璃體內(nèi)注射入玻璃體后部，其劑量不經(jīng)手術(shù)足以引起玻璃體后剝離，從而治療牽拉性黃斑病變或牽拉性視網(wǎng)膜病變。實(shí)施例5如實(shí)施例1所述的制劑，其中將該制劑在本領(lǐng)域公知的條件下凍干，獲得穩(wěn)定的固體餅，其可以用注射用水、生理鹽水或磷酸鹽緩沖鹽水復(fù)溶，以提供供玻璃體內(nèi)注射用的澄清溶液。復(fù)溶體積取決于治療本文所述疾病的最終需要的濃度以及要治療的眼睛的大??；然而，對(duì)于含有25mg纖溶酶的餅，優(yōu)選加入足夠的溶劑以復(fù)溶成5mg/ml濃度的纖溶酶，更優(yōu)選加入足夠的溶劑以復(fù)溶成2mg/ml濃度的纖溶酶。盡管多種不同溶劑均可以用來(lái)復(fù)溶凍干餅，不過(guò)優(yōu)選注射用水、生理鹽水和磷酸鹽緩沖鹽水。更優(yōu)選注射用水和生理鹽水，最優(yōu)選生理鹽水。同樣清楚，纖溶酶的穩(wěn)定劑可以存在于凍干餅中或溶劑中，用于保護(hù)當(dāng)注射入玻璃體內(nèi)時(shí)纖溶酶對(duì)于pH的變化穩(wěn)定。實(shí)施例6玻璃體內(nèi)注射化學(xué)鋪展劑例如Vitras^或透明質(zhì)酸酶后，采用實(shí)施例1中所述的制劑和方法將纖溶酶經(jīng)玻璃體內(nèi)注射入玻璃體后部，其劑量不經(jīng)過(guò)手術(shù)足以引起玻璃體后剝離，從而治療牽拉性黃斑病變或牽拉性視網(wǎng)膜病變。盡管本發(fā)明結(jié)合不同的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行了描述，但是對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言清楚，在不偏離本發(fā)明的精神和所附的權(quán)利要求的范圍內(nèi)可以有很多變化。例如，在將本發(fā)明用于不同的眼部病癥或?qū)⒈景l(fā)明用于不同制劑中時(shí)，對(duì)優(yōu)選實(shí)施方案的修改將是明顯的。權(quán)利要求1.一種用于預(yù)防或降低非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變進(jìn)展為增生性糖尿病視網(wǎng)膜病進(jìn)展率的非手術(shù)方法，其包括向患有非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的患者玻璃體內(nèi)給藥有效量的絲氨酸蛋白酶，所述有效量的絲氨酸蛋白酶足以不經(jīng)過(guò)手術(shù)而產(chǎn)生玻璃體后脫離，以預(yù)防或降低所述患者的增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展率。2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述絲氨酸蛋白酶選自基本上由纖溶酶、微纖溶酶和小纖溶酶組成的組，所述纖溶酶、微纖溶酶和小纖溶酶從人血漿或由重組技術(shù)得到。3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述絲氨酸蛋白酶為纖溶酶。4.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中所述纖溶酶從由人血液分級(jí)分離得到的纖溶酶原獲得。5.根據(jù)權(quán)利要求1和3的方法，其中注射入玻璃體內(nèi)的所述有效量的絲氨酸蛋白酶等價(jià)于約0.5至約1000pg纖溶酶。6.根據(jù)權(quán)利要求1和3的方法，其中注射入玻璃體內(nèi)的所述有效量的絲氨酸蛋白酶等價(jià)于約1至500pg纖溶酶。7.根據(jù)權(quán)利要求1和3的方法，其中注射入玻璃體內(nèi)的所述有效量的絲氨酸蛋白酶等價(jià)于約10至400纖溶酶。8.根據(jù)權(quán)利要求1和3的方法，其中注射入玻璃體內(nèi)的所述有效量的絲氨酸蛋白酶等價(jià)于約20至300jig纖溶酶。9.根據(jù)權(quán)利要求1和3的方法，其中注射入玻璃體內(nèi)的所述有效量的絲氨酸蛋白酶等價(jià)于約50至200嗎纖溶酶。10.根據(jù)權(quán)利要求l的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為注射入玻璃體內(nèi)。11.根據(jù)權(quán)利要求l的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為采用型號(hào)25或更大的針注射入玻璃體內(nèi)。12.根據(jù)權(quán)利要求l的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為采用型號(hào)25或更大的針注射以給藥10至200pL的體積。13.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為采用型號(hào)25或更大的針注射以給藥50至100pL的體積。14.根據(jù)權(quán)利要求l的方法，其中所述絲氨酸蛋白酶為纖溶酶，所述有效量為約50至200嗎纖溶酶，且所述纖溶酶通過(guò)注射入玻璃體內(nèi)給藥。15.—種用于治療視網(wǎng)膜缺血、視網(wǎng)膜炎癥、視網(wǎng)膜水腫、牽拉性視網(wǎng)膜脫離、黃斑裂孔、牽拉性視網(wǎng)膜病變、玻璃體出血或牽拉性黃斑病變的非手術(shù)方法，其包括向患有這些眼部病癥中的一種或多種的患者玻璃體內(nèi)給藥有效量的絲氨酸蛋白酶，所述有效量的絲氨酸蛋白酶足以不經(jīng)過(guò)手術(shù)而產(chǎn)生玻璃體后脫離，以預(yù)防或降低視網(wǎng)膜缺血、視網(wǎng)膜炎癥、視網(wǎng)膜水腫、牽拉性視網(wǎng)膜脫離、牽拉性視網(wǎng)膜病變、玻璃體出血和牽拉性黃斑病變。16.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中所述玻璃體后脫離之后進(jìn)行不同的手術(shù)方法。17.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中所述絲氨酸蛋白酶選自基本上由纖溶酶、微纖溶酶和小纖溶酶組成的組。18.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中所述絲氨酸蛋白酶為纖溶酶。19.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中所述纖溶酶從由人血液分級(jí)分離得到的纖溶酶原獲得。20.根據(jù)權(quán)利要求15和18的方法，其中注射入玻璃體內(nèi)的所述有效量的絲氨酸蛋白酶等價(jià)于約0.5至1000pg纖溶酶。21.根據(jù)權(quán)利要求15和18的方法，其中注射入玻璃體內(nèi)的所述有效量的絲氨酸蛋白酶等價(jià)于約1至500ng纖溶酶。22.根據(jù)權(quán)利要求15和18的方法，其中注射入玻璃體內(nèi)的所述有效量的絲氨酸蛋白酶等價(jià)于約10至400pg纖溶酶。23.根據(jù)權(quán)利要求15和18的方法，其中注射入玻璃體內(nèi)的所述有效量的絲氨酸蛋白酶等價(jià)于約20至300jag纖溶酶。24.根據(jù)權(quán)利要求15和18的方法，其中注射入玻璃體內(nèi)的所述有效量的絲氨酸蛋白酶等價(jià)于約50至200pg纖溶酶。25.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為注射入玻璃體內(nèi)。26.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為采用型號(hào)25或更大的針注射入玻璃體內(nèi)。27.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中所述絲氨酸蛋白酶為纖溶酶，所述有效量為約50至約200pg纖溶酶，且所述纖溶酶通過(guò)注射入玻璃體內(nèi)給藥。28.根據(jù)權(quán)利要求IO的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為向玻璃體內(nèi)注射含有絲氨酸蛋白酶的溶液。29.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為向玻璃體內(nèi)注射含有絲氨酸蛋白酶的膠束溶液。30.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為向玻璃體內(nèi)注射含有絲氨酸蛋白酶的固體顆粒懸浮液或具有該酶作為顆粒的固體顆粒懸浮液。31.根據(jù)權(quán)利要求IO的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為向玻璃體內(nèi)注射脂質(zhì)體溶液，其中所述絲氨酸蛋白酶在所述脂質(zhì)體的含水核心內(nèi)、在所述脂質(zhì)體溶液的已占體積中或兩者中都有。32.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為向玻璃體內(nèi)注射水包油型乳液，其中所述絲氨酸蛋白酶以吸附于油滴上存在或以存在于所述乳液的連續(xù)水相中存在。33.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為將分散于非水介質(zhì)中的粉末注射入玻璃體內(nèi)，其中所述粉末為絲氨酸蛋白酶。34.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為將含有絲氨酸蛋白酶和相關(guān)賦形劑的速溶小片注射入玻璃體內(nèi)。35.根據(jù)權(quán)利要求28-34的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為將根據(jù)UPS指南無(wú)菌且無(wú)內(nèi)毒素的制劑注射入玻璃體內(nèi)。36.根據(jù)權(quán)利要求28-34的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為將根據(jù)UPS指南無(wú)菌且無(wú)內(nèi)毒素并含有穩(wěn)定成分的制劑注射入玻璃體內(nèi)。37.根據(jù)權(quán)利要求36的方法，其中所述穩(wěn)定成分選自基本上由e氨基己酸、賴(lài)氨酸、精氨酸、血清白蛋白或碳酸氫銨組成的組。38.根據(jù)權(quán)利要求37的方法，其中所述穩(wěn)定成分為s氨基己酸。39.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為向玻璃體內(nèi)注射含有絲氨酸蛋白酶的溶液。40.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為向玻璃體內(nèi)注射含有絲氨酸蛋白酶的膠束溶液。41.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為向玻璃體內(nèi)注射含有絲氨酸蛋白酶的固體顆粒懸浮液或具有該酶作為顆粒的固體顆粒懸浮液。42.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為向玻璃體內(nèi)注射脂質(zhì)體溶液，其中所述絲氨酸蛋白酶在所述脂質(zhì)體的含水核心內(nèi)、所述脂質(zhì)體溶液的已占體積中或兩者中都有。43.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為向玻璃體內(nèi)注射水包油型乳液，其中所述絲氨酸蛋白酶以吸附于油滴上存在或以存在于所述乳液的連續(xù)水相中存在。44.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為將分散于非水介質(zhì)中的粉末注射入玻璃體內(nèi)，其中所述粉末為絲氨酸蛋白酶。45.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為將含有絲氨酸蛋白酶和相關(guān)賦形劑的速溶小片注射入玻璃體內(nèi)。46.根據(jù)權(quán)利要求38-45的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為向玻璃體內(nèi)注射根據(jù)UPS指南無(wú)菌且無(wú)內(nèi)毒素并含有穩(wěn)定成分的制劑。47.根據(jù)權(quán)利要求46的方法，其中所述穩(wěn)定成分選自基本上由e氨基己酸、賴(lài)氨酸、精氨酸、血清白蛋白或碳酸氫銨組成的組。48.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為注射溶液，所述溶液含有所需絲氨酸蛋白酶和通常可接受的藥用賦形劑并加有設(shè)計(jì)用來(lái)增加制劑密度使得注射后當(dāng)患者仰臥時(shí)所述制劑將趨于向患者視網(wǎng)膜沉積的成分。49.根據(jù)權(quán)利要求47的方法，其中所述穩(wěn)定成分為e氨基己酸。50.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中所述玻璃體內(nèi)給藥為注射溶液，所述溶液含有所需絲氨酸蛋白酶和通?？山邮艿乃幱觅x形劑并加有設(shè)計(jì)用來(lái)增加制劑密度使得注射后當(dāng)患者他或/她仰臥時(shí)所述制劑將趨于向患者視網(wǎng)膜沉積的成分。51.根據(jù)權(quán)利要求48的方法，其中提供增加的密度的物質(zhì)選自基本上由可溶性碘化X射線(xiàn)造影劑組成的組，所述可溶性碘化X射線(xiàn)造影劑包括碘海醇、碘克沙醇、泛影酸、碘帕醇、碘美普爾、碘克沙醇、三碘化苯和碘化油、升高濃度的蔗糖和其他糖類(lèi)以及已知用于體內(nèi)是安全的重金屬絡(luò)合物如包括omniscan⑧在內(nèi)的MRI造影劑。52.根據(jù)權(quán)利要求49的方法，其中提供增加的密度的物質(zhì)選自基本上由可溶性碘化X射線(xiàn)造影劑組成的組，所述可溶性碘化X射線(xiàn)造影劑包括碘海醇、碘克沙醇、泛影酸、碘帕醇、碘美普爾、碘克沙醇、三碘苯和碘化油、升高濃度的蔗糖和其他糖類(lèi)以及已知用于體內(nèi)安全的重金屬絡(luò)合物如包括omniscar^在內(nèi)的MRI造影劑。53.—種穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，當(dāng)復(fù)溶時(shí)其包含a)約0.01mg/ml至約10mg/ml的纖溶酶；b)約0.10mg/ml至約100mg/ml的糖類(lèi)或糖類(lèi)衍生物；c)緩沖劑；d)pH為約2至約5;禾口e)有效量的纖溶酶穩(wěn)定劑，以防止眼用纖溶酶制劑內(nèi)pH變化中或注射入玻璃體內(nèi)時(shí)纖溶酶物理穩(wěn)定性的快速改變。54.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述纖溶酶為約0.02mg/ml至約10mg/ml的纖溶酶。55.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述纖溶酶為約0.03mg/ml至約5mg/ml的纖溶酶。56.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述纖溶酶為約0.03mg/ml至約4mg/ml的纖溶酶。57.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述纖溶酶為約2mg/ml的纖溶酶。58.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述糖類(lèi)選自包括海藻糖、乳糖、蔗糖、甘露糖、葡萄糖、果糖、木糖、半乳糖或糖類(lèi)衍生物的組。59.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述糖類(lèi)為海藻糖。60.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述糖類(lèi)衍生物選自包括甘露糖醇、sortitol或木糖醇的組。61.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述緩沖劑選自包括乙酸鹽、擰檬酸鹽和磷酸鹽的組。62.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述緩沖劑為乙酸鹽。63.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述pH為約3至5。64.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述pH為約3.5至5。65.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述pH為約3至4。66.根據(jù)權(quán)利要求53的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述纖溶酶穩(wěn)定劑的所述有效量為約1mM至約100mM。67.根據(jù)權(quán)利要求53和66的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述纖溶酶穩(wěn)定劑為二元氨基酸或其衍生物。68.根據(jù)權(quán)利要求53和66的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述纖溶酶穩(wěn)定劑選自包括e氨基己酸、賴(lài)氨酸、精氨酸、甘氨酰甘氨酸的組。69.根據(jù)權(quán)利要求53和66的穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其中所述纖溶酶穩(wěn)定劑為e氨基己酸。70.—種穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其包含a.約0.01mg/ml至約10mg/ml的纖溶酶；b.約10mg至約50mg的海藻糖；c.乙酸鹽或檸檬酸鹽緩沖劑；d.pH為約3至約5;和e.約lmM至約lOOmM的二元氨基酸或其衍生物，以防止眼用纖溶酶制劑內(nèi)pH變化中或注射入玻璃體內(nèi)時(shí)纖溶酶物理穩(wěn)定性的快速改變。71.—種穩(wěn)定的眼用纖溶酶制劑，其包含a.約2.0mg/ml的纖溶酶；b.約20mg的海藻糖；c.乙酸鹽緩沖劑；d.pH為約3至5;和e.約3mM的e氨基己酸，以防止眼用纖溶酶制劑內(nèi)pH變化中或注射入玻璃體內(nèi)時(shí)纖溶酶物理穩(wěn)定性的快速改變。72.—種用于預(yù)防或降低視網(wǎng)膜脫離風(fēng)險(xiǎn)的方法，其包括向具有視網(wǎng)膜脫離風(fēng)險(xiǎn)的患者給藥足以產(chǎn)生玻璃體后脫離的有效量的絲氨酸蛋白酶。73.根據(jù)權(quán)利要求72的方法，其中所述絲氨酸蛋白酶選自基本上由纖溶酶、微纖溶酶和小纖溶酶組成的組。74.根據(jù)權(quán)利要求72的方法，其中所述絲氨酸蛋白酶為纖溶酶。75.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述絲氨酸蛋白酶的注射在化學(xué)鋪展劑注射后進(jìn)行，所述化學(xué)鋪展劑如Vitrase⑧或透明質(zhì)酸酶。76.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中所述絲氨酸蛋白酶的注射在化學(xué)鋪展劑注射后進(jìn)行，所述化學(xué)鋪展劑如Vitrase⑧或透明質(zhì)酸酶。77.根據(jù)權(quán)利要求53、70和71的方法，其中將粘度增強(qiáng)劑加入所述制劑中。全文摘要本發(fā)明涉及一種用于預(yù)防或降低非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變進(jìn)展為增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展率的非手術(shù)方法，其包括向患有非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的患者玻璃體內(nèi)給藥有效量的絲氨酸蛋白酶，所述有效量的絲氨酸蛋白酶不經(jīng)過(guò)手術(shù)足以產(chǎn)生玻璃體后脫離，以預(yù)防或降低所述患者的增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變的進(jìn)展。另外，本發(fā)明還公開(kāi)了一種治療眼部病癥的非手術(shù)方法，所述眼部病癥例如視網(wǎng)膜缺血、視網(wǎng)膜炎癥、視網(wǎng)膜水腫、牽拉性視網(wǎng)膜脫離、牽拉性視網(wǎng)膜病變、玻璃體出血，以及牽拉性黃斑病變，所述方法通過(guò)向患有這些病癥中的一種或多種的患者玻璃體內(nèi)給藥有效量的絲氨酸蛋白酶進(jìn)行，從而降低或治療特定的眼部病癥。優(yōu)選的絲氨酸蛋白酶為纖溶酶、微纖溶酶和小纖溶酶，最優(yōu)選纖溶酶。文檔編號(hào)A61K38/48GK101171030SQ200680015854公開(kāi)日2008年4月30日申請(qǐng)日期2006年5月10日優(yōu)先權(quán)日2005年5月11日發(fā)明者B·利維,G·L·麥金泰爾,S·P·巴特爾斯,T·L·科姆斯托克申請(qǐng)人:博士倫公司