專(zhuān)利名稱(chēng)：治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療急慢性肝炎地中藥復(fù)方制劑及其制備方法，屬于中藥制藥的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
臨床常見(jiàn)的甲型、乙型、丙型、戊型肝炎均為全身性傳染病，主要分為急性肝炎(有黃疸型及無(wú)黃疸型)、慢性肝炎(慢性遷延性型、慢性活動(dòng)性型)(也表現(xiàn)為有黃疸或無(wú)黃疸)，屬于中醫(yī)“黃疸”、“脅痛”、“郁癥”、“集聚”等病范疇。中醫(yī)認(rèn)為，本病多因感受濕熱、疫癘或飲食失當(dāng)所引起，而濕熱蘊(yùn)結(jié)在肝炎整個(gè)過(guò)程中占有重要地位。其主要表現(xiàn)為面目發(fā)黃，小便黃如濃茶，惡心、厭食，胃脘及右肋悶痛等，于中醫(yī)中屬雜病類(lèi)。無(wú)論急慢性肝炎及有無(wú)黃疸，均可見(jiàn)食欲不振、脘悶惡心、脅痛腹脹、肢體因重乏力或風(fēng)黃疸，也可見(jiàn)舌紅苔膩、脈弦、弦滑等濕熱蘊(yùn)結(jié)證。
臨床用于治療肝炎的藥物品種繁多，抗病毒治療無(wú)論西藥、中藥均在探索階段。更多的藥物旨在保護(hù)肝細(xì)胞、利膽、改善癥狀、縮短病程及抗肝纖維化。在此方面中藥有著較好的療效和更廣闊的市場(chǎng)。近年生產(chǎn)的垂盆草沖劑、乙肝寧沖劑，長(zhǎng)春、本溪出產(chǎn)的乙肝系列沖劑、常熟制藥廠出產(chǎn)的苦黃靜脈注射液，以及根據(jù)中醫(yī)藥臨床研制的聯(lián)苯雙酯、強(qiáng)力寧等都在肝病治療中取得一定療效。中醫(yī)藥是一個(gè)偉大的寶庫(kù)，有很多優(yōu)秀處方尚待我們研究、開(kāi)發(fā)、應(yīng)用于臨床。為了發(fā)揮民族醫(yī)藥在肝病治療上的優(yōu)勢(shì)，我們把臨床長(zhǎng)期使用的、行之有效的驗(yàn)方采用合理工藝研制成療效確切、成本低、無(wú)毒副作用、病人易于服用和接受的抗肝炎制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑及其制備方法，本發(fā)明采用合理的制備工藝，所得制劑生物利用度高，吸收快，療效確切，成本低，無(wú)毒副作用，服用方便，病人易于接受。
本發(fā)明是這樣構(gòu)成的按照重量組份計(jì)算，它是用苦參50～500份、梔子50～500份、黃柏50～500份、丹參100～1000份、水飛薊素1～10份再加適量輔料制成片劑，分散片，膠囊劑，軟膠囊劑，微囊劑，顆粒劑，注射劑，粉針劑，凍干粉針劑，微丸劑，滴丸劑，糖漿劑，散劑，浸膏劑，煎膏劑，口服液體制劑及其他藥學(xué)上可以接受的劑型。
具體的說(shuō)，按照重量組份計(jì)算，它是用苦參200份、梔子200份、黃柏200份、丹參600份、水飛薊素5份再加適量輔料制成顆粒劑、片劑、分散片、膠囊劑、軟膠囊劑、散劑、微丸劑、滴丸劑或口服液體制劑。
治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑的制備方法為取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素及適量輔料，按常規(guī)方法制成不同的制劑。
所述制劑中的分散片這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素、50～200重量份的微晶纖維素、1～10重量份的甘露醇；另按重量比取3～7％的羧甲基淀粉鈉、2～5％的低取代羥丙基纖維素，混勻，取其3/5與上述物料混勻，用濃度2～5％聚乙烯吡咯烷酮的水溶液作粘合劑，40目篩制濕粒、整粒；按重量比外加0.5～1％的硬脂酸鎂、1～3％的微粉硅膠及剩余2/5羧甲基淀粉鈉和低取代羥丙基纖維素的混合粉于制好的顆粒中，混勻，壓片，即得。
所述制劑中的顆粒劑這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素，混勻，再加入500～700重量份的蔗糖、100～200重量份的糊精制粒，干燥，即得。
所述制劑中的微丸劑這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素和100～500重量份的淀粉，用濃度為70～85％的乙醇溶液制軟材，制好的軟材用微丸機(jī)制丸，濕料擠壓過(guò)0.8mm篩孔，條狀濕粒切斷滾圓，50～60℃干燥成型，過(guò)16～20目篩選丸，即得。
所述制劑中的軟膠囊劑這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素，另加入5～20重量份的乙基纖維素、1～10重量份的吐溫-80，混勻；按藥物量∶基質(zhì)量＝1∶1.5～1∶2加入大豆油，混勻；膠皮的配方為明膠∶甘油∶水∶二氧化鈦＝100∶45∶100∶2，配料化膠條件為稱(chēng)量配料，投入化膠罐中，冷浸60～90分鐘后逐漸升溫至65±5℃，攪拌3～5小時(shí)并同時(shí)抽真空除氣泡，待膠料均勻后放料，濾過(guò)后裝入膠囊機(jī)之膠料桶中；調(diào)試壓丸機(jī)，明膠盒溫控65℃，噴體溫控45℃，滾模轉(zhuǎn)速2.0，膠皮厚度0.8mm，室內(nèi)溫度18～25℃，相對(duì)濕度小于40％，壓丸；干燥采用滾動(dòng)定型干燥與托盤(pán)干燥兩步結(jié)合，滾動(dòng)定型干燥2～5小時(shí)，干燥溫度25±5℃，干燥相對(duì)濕度低于40％，干燥時(shí)間在24～48小時(shí)，即得。
所述制劑中的滴丸劑這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素，另加入前述物料2倍重量的聚乙二醇4000、1倍重量的聚氧乙烯單硬脂酸酯S-40，混合均勻，水浴上熔融，攪勻，滴于二甲基硅油中成丸，滴距4～6cm，滴口徑2.5mm/2mm，混合藥膏溫度80±5℃，冷卻液高度70±5cm，即得。
所述制劑中的片劑這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素和10～100重量份的淀粉，另按重量比加入3～5％的羧甲基淀粉鈉，混勻，用20～50％乙醇制粒，干燥，整粒，按重量比外加1～3％的羧甲基淀粉鈉、0.5～1％的硬脂酸鎂，混勻，壓片，包衣，即得。
所述制劑中的口服液這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素、1～10重量份吐溫-80、1～5重量份的苯甲酸鈉，另按重量比加入2～5％的阿司帕坦，混勻，過(guò)濾，滅菌，加入蒸餾水至1000ml，即得。
所述制劑中的膠囊劑這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素、50～200重量份的淀粉、5～30重量份的硫酸鈣混合均勻，用乙醇制粒，充填，即得。
本方中，苦參苦寒、清熱燥濕、解毒殺蟲(chóng)；梔子苦寒、清熱利濕、涼血散瘀；針對(duì)本病濕熱蘊(yùn)結(jié)之病機(jī)，以清熱利濕，故苦參、梔子共為君藥。黃柏苦寒、清熱瀉火、燥濕解毒，助君藥清熱祛濕之功，為臣藥；丹參苦微寒，活血祛瘀，通經(jīng)止痛，既有止脅痛之功，又有通利經(jīng)脈以助祛邪之用，為佐藥；五味藥共奏利肝膽濕熱，健脾和胃，活血祛瘀之功效，對(duì)濕熱蘊(yùn)結(jié)之實(shí)證肝炎有很好的療效。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所提供的微丸崩解性好，生物利用度高，刺激性小，特別適合老年人及吞服藥片或膠囊有困難的患者服用；分散片服用方式較多，可以吞服、含服和吮吸服用，遠(yuǎn)比其它口服固體制劑應(yīng)用方便，同時(shí)，該藥品遇水可在3分鐘內(nèi)迅速崩解形成均勻分散的水溶液，解決了有效成分生物利用度不高的問(wèn)題；軟膠囊劑將藥物封閉于軟膠殼中，解決了藥物遇濕熱不穩(wěn)定的問(wèn)題，還可以掩蓋藥物不良口味、氣味，起到增加穩(wěn)定性、改善生物利用度的作用；顆粒劑口感良好，同時(shí)吸收快，生物利用度高；片劑劑量準(zhǔn)確，內(nèi)容物含量差異小，成型較好，崩解時(shí)間短。
藥典規(guī)定分散片必須在19℃～21℃水中3min內(nèi)完全崩解，對(duì)混懸性、生物利用度、分散均勻度等也有較高要求。申請(qǐng)人在研制分散片的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提取物有較大吸濕性，使得對(duì)成型工藝處方中各種輔料的種類(lèi)以及用量選擇要求非常嚴(yán)格，稍有偏差，就會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品不合格。
微丸的直徑小于2.5mm，類(lèi)于顆粒性質(zhì)，生物利用度高。申請(qǐng)人在研制本產(chǎn)品時(shí)，最大的困難就是浸膏吸濕性強(qiáng)而流動(dòng)性差，可塑性差，難以成型以及溶散較慢。
軟膠囊在胃腸道中崩解快，囊殼破裂后，藥物迅速分散，故藥物釋放溶出快，顯效迅速，生物利用度高；半透光軟膠囊與較好的包裝材料可保護(hù)藥物不受濕氣和空氣中氧、光線的作用，從而提高不穩(wěn)定成分的穩(wěn)定性；所以軟膠囊本身的穩(wěn)定性及成型工藝直接影響產(chǎn)品的穩(wěn)定性，是十分關(guān)鍵的技術(shù)。
申請(qǐng)人在研制滴丸的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，常用的基質(zhì)聚乙二醇類(lèi)系酯化而成，是一種具表面活性的水溶性基質(zhì)(熔點(diǎn)為46～51℃)，對(duì)難溶性藥物的溶解度不佳，我們加入S-40改變聚乙二醇類(lèi)本身不具有親酯結(jié)構(gòu)和表面活性的性質(zhì)，有利于藥物的吸收，但是如果S-40的用量過(guò)高，會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品引濕性增強(qiáng)。
本申請(qǐng)人還進(jìn)行了一系列的試驗(yàn)，以?xún)?yōu)選本發(fā)明藥物制劑的制備工藝、使用的輔料種類(lèi)及用量比例等，使其達(dá)到最佳效果。
實(shí)驗(yàn)例1成型工藝研究
(1)分散片成型工藝
遇水可迅速崩解形成均勻的粘性懸液的水分散片，解決了崩解性差，溶出緩慢的缺點(diǎn)，本申請(qǐng)人制得的分散片在19℃-21℃水中3min內(nèi)完全崩解，混懸性好、生物利用度高、分散均勻。
①輔料篩選
從上表可以看出，配方2所制成的片子其崩解時(shí)間最短，分散均勻性很好，符合分散片的要求。
(2)微丸劑成型工藝
微丸直徑小于2.5mm，類(lèi)于顆粒性質(zhì)，生物利用度高，申請(qǐng)人在研制本發(fā)明產(chǎn)品時(shí)，最大的困難就是浸膏吸濕性強(qiáng)而流動(dòng)性差，可塑性差，難以成型以及溶散較慢。在研制本發(fā)明產(chǎn)品微丸時(shí)，采用本申請(qǐng)人篩選得到的微丸制造技術(shù)和輔料使得產(chǎn)品易于崩解，生物利用度高，性質(zhì)良好。
取混合藥粉，用乙醇溶液適量作潤(rùn)濕劑，濕法制粒法制成軟材，使之達(dá)到手握成團(tuán)，捏之能散，備用。研究重點(diǎn)是乙醇濃度對(duì)制丸的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表。
乙醇濃度考察
結(jié)果可見(jiàn)，采用70～85％的乙醇溶液為粘合劑制粒較為理想。
(3)軟膠囊劑成型工藝
軟膠囊在胃腸道中崩解快，囊殼破裂后，藥物迅速分散，故藥物釋放溶出快，顯效迅速，生物利用度高；半透光軟膠囊與較好的包裝材料可保護(hù)藥物不受濕氣和空氣中氧、光線的作用，從而提高不穩(wěn)定成分的穩(wěn)定性，所以膠囊的穩(wěn)定性及成型工藝是十分關(guān)鍵的技術(shù)。
①分散介質(zhì)(或稱(chēng)基質(zhì))選擇
在填充物料與基質(zhì)能混合均勻，并能通暢輸料及壓丸的前提下，盡量減少基質(zhì)用量。通過(guò)多次試驗(yàn)，確定藥物量(g)∶基質(zhì)量(g)＝1∶1.5～2為宜，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表。
基質(zhì)用量考察表
②膠囊殼配方篩選
按下表配料比例配料，放入500ml抽濾瓶中，65±5℃水浴溶化，自動(dòng)攪拌化膠，同時(shí)抽真空，真空度0.095Mpa左右，經(jīng)3～5小時(shí)后保溫放置1～2小時(shí)，過(guò)濾膠液，取一部分膠液測(cè)定粘度及其它性能，一部分膠液在鐵板上均勻鋪成一薄層(先在下面抹一層液體石蠟)，放置于次日觀察膠皮性能再作評(píng)價(jià)，將各指標(biāo)的考察結(jié)果由好至差依次用″+++″，″++″，″+″，“-”表示，結(jié)果見(jiàn)表。
膠皮配料篩選結(jié)果
經(jīng)以上篩選，綜合評(píng)價(jià)，考慮到填充物料的特點(diǎn)，選擇配方2即明膠100∶甘油45∶水100。
③遮光劑選擇
透明膠囊殼易致不穩(wěn)定，故需加入一定量的遮光劑。經(jīng)考察選擇二氧化鈦(鈦白粉)作遮光劑可達(dá)到有效的遮光效果，且質(zhì)量穩(wěn)定，不與膠漿及填充物料發(fā)生化學(xué)變化。其用量經(jīng)考察以明膠∶甘油∶水∶二氧化鈦＝100∶45∶100∶2為宜，且對(duì)膠皮質(zhì)量影響不大，結(jié)果見(jiàn)下表。
遮光劑用量選擇表
實(shí)驗(yàn)證明，膠囊配方中加入遮光劑質(zhì)量更加穩(wěn)定。
(4)滴丸成型工藝
①基質(zhì)的篩選
滴丸載藥量較小，如果基質(zhì)、滴距、熔融藥液溫度、滴速不適合藥物的性質(zhì)，產(chǎn)品不僅難以成型，而且服用量大，患者使用及其不便。
基質(zhì)與主藥的融合情況比較表
上表結(jié)果表明，處方3熔融藥液的流動(dòng)性好，載藥量較大，滴丸成型性好，光滑、圓潤(rùn)，丸重差異小，溶散較快，這是由于聚乙二醇類(lèi)基質(zhì)酯化而成，是一種具有表面活性的水溶性基質(zhì)(熔點(diǎn)為46～51℃)，S-40改變了聚乙二醇類(lèi)本身不具有親酯結(jié)構(gòu)和表面活性的性質(zhì)，改善難溶性藥物的溶解度，有利于藥物的吸收。
②滴距、滴速、溫度的選擇
滴頭的內(nèi)徑為2mm、外徑為2.5mm。評(píng)價(jià)指標(biāo)丸重合格率按《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版一部質(zhì)量差異要求符合±15％之內(nèi)。
結(jié)果表明，本發(fā)明滴丸的最佳條件滴于二甲基硅油中成丸，滴距4～6cm，滴口徑2.5mm/2mm，混合藥膏溫度75～85℃，冷卻液高度65～75cm。
本申請(qǐng)人還進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)，以證明本發(fā)明提供的藥物具有有效的效果。
實(shí)驗(yàn)例2藥效學(xué)研究
一、材料
藥品與試劑本發(fā)明原粉，每1g粉末相當(dāng)于生藥5.56g；四氯化碳(CCL4)為市售分析純，使用時(shí)用花生油稀釋?zhuān)患癉-半乳糖胺(D-GaIN)鹽酸鹽，購(gòu)自北京科枝協(xié)作中心精細(xì)化學(xué)分部；聯(lián)苯雙酯購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所實(shí)驗(yàn)藥廠去氫膽酸、環(huán)磷酰胺(cy)、左旋咪唑均為市售；RPMl1640完全培養(yǎng)液RPMl164Gibco公司生產(chǎn)加10％新生小牛血清，L-谷氨酰胺2Mm、青霉素100u/ml、鏈霉素100u/ml而成；刀豆蛋白A(DonA)，Sigma公司產(chǎn)品。3H-TDR(3H-胸腺嘧啶苷)，北京原子能研究所生產(chǎn)；硫乙槨酸鹽培養(yǎng)基，北京市海淀區(qū)微生物培養(yǎng)制品廠生產(chǎn)；中性紅試劑及谷丙轉(zhuǎn)胺酶(SGPT)測(cè)定藥盒、谷草轉(zhuǎn)胺酶(SGPT)測(cè)定藥盒、血清蛋白測(cè)定藥盒、血清總蛋白測(cè)定藥盒，均購(gòu)自北京化工廠。
動(dòng)物昆明種小鼠、NIH種小鼠、C37BL/6小鼠，雄性，18～22g；Wistar種雄性大鼠。均購(gòu)自中國(guó)中醫(yī)研究院動(dòng)物室。
二、方法與結(jié)果
1、本發(fā)明藥物對(duì)動(dòng)物急、慢性肝損傷的影響
①本發(fā)明藥物對(duì)CCL4所致小鼠急性肝損傷的影響
昆明種小鼠50只，隨機(jī)分為5組；分別為對(duì)照組、模型組、聯(lián)苯雙酯0.3g/kg組、本發(fā)明3g/kg和1g/kg組。各給藥組按劑量每日灌胃給藥一次，對(duì)照組和模型組同時(shí)給予等容量的生理鹽水，連續(xù)6日，第5日上午給藥后1小時(shí)，模型組與各給藥組小鼠皮下注射0.5％CCL40.1ml/kg(10ml/kg)對(duì)照組皮下注射等容量生理鹽水，當(dāng)日下午加強(qiáng)給藥一次，禁食12h后，于第6日上午給藥后1h，斷頭取血，離心(10,000g×5min)，用賴(lài)氏法測(cè)定血清中SGPT和SGOT活力單位。
表1 本發(fā)明對(duì)CCL4所致急性肝損傷小鼠血清轉(zhuǎn)胺酶的影響(X±SD)
*、**和***與模型比較P＜0.05、P＜0.01和P＜0.001。
表1結(jié)果表明，小鼠皮下注射CCL4后24h，血清SGPT和SGOT活力明顯高于對(duì)照組。聯(lián)苯雙酯組及本發(fā)明3g/kg和1g/kg組小鼠血清SGTP和SGOT活力均顯著低于模型組，(P＜0.05、P＜0.01和P＜0.001)。本發(fā)明與聯(lián)苯雙酯組之間無(wú)顯著差別(P＞0.05)。
②本發(fā)明藥物對(duì)D-半乳糖胺所致小鼠急性肝損傷的影響
實(shí)驗(yàn)分組與給藥方法均與上述實(shí)驗(yàn)①相同，于給藥第5日上午各組小鼠皮下注射D
alN0.8g/kg(容量0.1ml/10g)，對(duì)照組皮下注射等容量生理鹽水，當(dāng)日下午加強(qiáng)給藥一次，禁食12h后于第6日上午給藥后1h斷頭取血，離心(10,000g×5min)，用賴(lài)氏法測(cè)定血清中SG-PT、SGOT活力。
表2 本發(fā)明對(duì)D-gallon所致急性肝損傷小鼠血清轉(zhuǎn)胺酶的影響(X±SD)
*和**與模型比較P＜0.05和P＜0.01。
表2結(jié)果表明，小鼠皮下注射D-GalN24h后，血清轉(zhuǎn)胺酶活力明顯升高(P＜0.01)，本發(fā)明3g/kg、1g/kg和聯(lián)苯雙酯0.3g/kg組小鼠血清中轉(zhuǎn)胺酶活力顯著低于模型組(P＜0.05)，本發(fā)明兩個(gè)劑量組與聯(lián)苯雙酯組之間均無(wú)顯著差別(P＜0.05)。
③本發(fā)明藥物對(duì)CCL4所致大鼠慢性肝損傷的影響
取雄性大鼠106只，體重130～140g隨機(jī)分為5組，對(duì)照組(20只)、模型組(22只)、聯(lián)苯雙酯組150mg/kg(20只)。
各給藥組按劑量每日灌胃給藥一次，連續(xù)三個(gè)月。于給藥第5日起每周皮下注射CCL40.2ml/100g，CCL4濃度依次為5％、10％、20％和30％，每三周遞增一個(gè)濃度。末次注射CCL448h(禁食12h)后，各組斷頭處死8只大鼠，取肝臟稱(chēng)重，計(jì)算肝指數(shù)(肝組織重/體重×100％)。剩余大鼠采用眼眶后靜脈叢取血。所有血樣品離心(10,000g×5min)，用賴(lài)氏法測(cè)定血清SGPT和SGOT活力；用雙縮脲法測(cè)定血清總蛋白含量；用溴甲酚綠法測(cè)定血清白蛋白含量；用堿水解法測(cè)定血清中總羥脯氨酸的含量。而后剩余大鼠繼續(xù)按規(guī)定劑量每日灌胃給藥一次(各組均停用CCL4)，共14日，禁食12小時(shí)后，斷頭取血取肝臟。按上述相同方法測(cè)定血清中SGPT、SGOT、總蛋白、白蛋白以及總羥脯氨酸的含量。
表3 本發(fā)明對(duì)CCL4所致慢性肝損傷大鼠死亡率的影響
*與模型組比較P＜0.05(X2檢驗(yàn))。
表3結(jié)果表明，大鼠連續(xù)注射CCL4三個(gè)月期間，部分動(dòng)物死亡，模型組殘廢率為27.3％，與正常組比較有顯著性差異(P＜0.05)，本發(fā)明1g/kg、0.3g/kg和聯(lián)苯雙酯0.15g/kg組的死亡率分別為13.6％、4.5％和20％，結(jié)果表明各給藥組可使動(dòng)物死亡率下降，其中0.3g/kg組有顯著保護(hù)作用(P＜0.05)。
表4 本發(fā)明對(duì)CCL4所致慢性肝損傷大鼠血清轉(zhuǎn)胺酶的影響
**、***與模型組比較P＜0.02、P＜0.001；△△與聯(lián)苯雙酯組比較P＜0.01。
表4結(jié)果表明，大鼠連續(xù)皮下注射CCL4三個(gè)月后，血清SGPT和SGOT活力顯著增強(qiáng)，與對(duì)照組比較P＜0.001。本發(fā)明各劑量組大鼠血清轉(zhuǎn)胺酶活力顯著降低，與模型組比較P＜0.001和P＜0.01。本發(fā)明各劑量組之間無(wú)顯著性差異。聯(lián)苯雙酯組大鼠血清中轉(zhuǎn)胺酶活力也顯著低于模型組(P＜0.05和P＜0.001)，本發(fā)明組與聯(lián)苯雙酯組之間無(wú)顯著性差異。停止注射CCL4繼續(xù)用藥14天后，模型組大鼠血清轉(zhuǎn)胺酶活力有所恢復(fù)，但仍顯著高于正常對(duì)照組(P＜0.001)，本發(fā)明各劑量組與聯(lián)苯雙酯組大鼠血清轉(zhuǎn)胺酶活力均顯著低于模型組(P＜0.01和P＜0.001)，與對(duì)照組之間無(wú)顯著性差異，本發(fā)明與聯(lián)苯雙酯組之間也無(wú)顯著性差異。
表5 本發(fā)明對(duì)CCL4所致慢性肝損血清總蛋白、白蛋白含量的影響
*、**和***與模型組比較P＜0.05、P＜0.01和P＜0.001；△與聯(lián)苯雙酯組比較P＜0.05。
表5結(jié)果表明大鼠連續(xù)皮下注射CCL4三個(gè)月，血清白蛋白和血清總蛋白含量均顯著下降，本發(fā)明各劑量組以及聯(lián)苯雙酯組大鼠血清白蛋白均顯著高于模型組(P＜0.01和P＜0.001)，本發(fā)明0.3g/kg組顯著高于聯(lián)苯雙酯組(P＜0.05)。給藥組血清總蛋白含量也有所增加，其中聯(lián)苯雙酯與模型組比較有顯著性差異(P＜0.01)，本發(fā)明1g/kg組與模型組比較，P值接近0.05，(t＝1.85)停用CCL4二周后，模型組大鼠血清中白蛋白和總蛋白含量有所回升，各給藥組大鼠血清中白蛋白的含量仍高于模型組，其中本發(fā)明0.3g/kg組和聯(lián)苯雙酯組與模型組比較，仍有顯著性差(P＜0.01)。并且本發(fā)明0.3g/kg組顯著高于聯(lián)苯雙酯組(P＜0.05)。
2、本發(fā)明藥物對(duì)正常麻醉大鼠膽汁流量的影響
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所用均為Wistar雄性大鼠，禁食12h后用烏拉坦麻醉(1g/kg)，仰位固定后沿腹正中線切口約2cm，從胃幽門(mén)部向下找到十二指腸，并在十二指腸降部腸系膜中找到白色膽管，于膽管下穿一細(xì)線，用眼科剪在膽管上剪一“V”形切口，將長(zhǎng)約5cm直徑約1.5mm的膽汁引流管向肝臟方面插入，立即可見(jiàn)有淡黃綠色膽汁流出，將事先穿刀的細(xì)線扎住膽管，并用一小三角燒瓶收集膽汁，實(shí)驗(yàn)前收集30min膽汁，然后由十二指腸給藥。對(duì)照組注射等容量生理鹽水，收集給藥后0～30′、30～60′、60～90′、90～120′和120～180′時(shí)間內(nèi)的膽汁流量，計(jì)算膽汁流量增長(zhǎng)百分率
(給藥后膽汁流量-給藥前膽汁流量)/給藥前膽汁流量×100％
表6 本發(fā)明對(duì)正常麻醉大鼠膽汁流量的影響
*、**和***藥物與對(duì)照組比較P＜0.05、P＜0.01和P＜0.001；△、△△和△△△藥物去氫膽酸比較P＜0.05、P＜0.01和P＜0.001。
表6結(jié)果表明，正常大鼠注射生理鹽水后3小時(shí)內(nèi)膽汁分泌量逐漸減少，本發(fā)明3g/kg組在給藥后30′、60′、90′、120′至180′時(shí)的各個(gè)時(shí)間間隔中的膽汁流量均明顯高于對(duì)照組(P＜0.001和P＜0.01)。1g/kg組大鼠膽汁流量也有一定程度的增加，分別在給藥后90′和120′時(shí)間段內(nèi)的膽汁流量顯著高于對(duì)照組。去氫膽酸在給藥后3小時(shí)內(nèi)膽汁流量均明顯高于對(duì)照組(P＜0.001 P＜0.01和P＜0.05)。
3、本發(fā)明藥物對(duì)小鼠免疫功能的影響
①本發(fā)明藥物對(duì)小鼠T細(xì)胞增殖的影響
NIH小鼠48只，隨機(jī)均分成6組，分別是正常對(duì)照組、CY模型組、CY+LMS陽(yáng)性對(duì)照組、CY+本發(fā)明大劑量組(2g/kg)、CY+本發(fā)明小劑量組(0.5g/kg)，除正常對(duì)照組外。各組小鼠腹腔注射CY100mg/kg后，CY+LMS陽(yáng)性對(duì)照組每天灌服LMS25mg/kg，CY+本發(fā)明各組按劑量灌胃給藥。連續(xù)7日，正常對(duì)照組每天服等量生理鹽水。第7日各組小鼠摘眼球放血斷椎處死，按常規(guī)無(wú)菌取脾制備脾細(xì)胞，用RPMI1640完全培養(yǎng)液配成5×106/ml脾細(xì)胞懸液加96孔培養(yǎng)板，每孔100ml，再在每孔加入每1ml含ConA10ugRPM1640完全培養(yǎng)液100μ1，放37℃5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)72h，在結(jié)束細(xì)胞培養(yǎng)前6～8h，每孔加3H-TdR0.5uci，液閃儀(Beckman公司)測(cè)CPM。
表7 本發(fā)明對(duì)小鼠脾下細(xì)胞增殖的影響
△△△與正常對(duì)照組比較P＜0.001，***與模型組比較P＜0.001。
從表7結(jié)果可見(jiàn)，Cy模型組小鼠脾t細(xì)胞增殖與正常對(duì)照組比較有明顯減弱(P＜0.001)。說(shuō)明CY明顯抑制了小鼠脾T細(xì)胞的增殖。Cy+左旋咪唑組小鼠脾T細(xì)胞增殖與Cy模型組比cpm值顯著升高，接近正常對(duì)照組水平(P＞0.05)，表明左旋咪唑?qū)y所致免疫抑制小鼠脾T細(xì)胞增殖有恢復(fù)作用。Cy+本發(fā)明大、中、小劑量組小鼠脾T細(xì)胞增殖與Cy模型組比均有明顯的升高(P＜0.001)，說(shuō)明本發(fā)明對(duì)Cy所致免疫抑制小鼠脾T細(xì)胞增殖有恢復(fù)作用。
②本發(fā)明藥物對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞(MΦ)吞噬功能的影響
NIH種小鼠40只，隨機(jī)分成5組，分別是正常對(duì)照組、LMS陽(yáng)性對(duì)照組、本發(fā)明大劑量組(2g/kg)、中劑量組(1g/kg)、小劑量組(0.5g/kg)，LMS陽(yáng)性對(duì)照組每天灌服LMS，本發(fā)明各組劑量每日灌胃給藥，連續(xù)7天，正常對(duì)照組給予等量生理鹽水。各組于給藥第4天，向各鼠腹腔內(nèi)注入10％硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基0.8ml/只，以誘導(dǎo)腹腔MΦ，第8天各組小鼠分別放血斷椎處死。按常規(guī)制備小鼠腹腔MΦ后，用RPM1640完全培養(yǎng)液配成5×106/ml MΦ懸液。參考文獻(xiàn)方法進(jìn)行MΦ吞噬功能檢測(cè)，用Bio-Rad公司酶標(biāo)儀在492nm波長(zhǎng)下測(cè)OD值。
表8 本發(fā)明對(duì)小鼠腹腔MΦ吞噬功能的影響
***與正常組比較P＜0.001。
表8結(jié)果表明，左旋咪唑、本發(fā)明2g/kg、1g/kg組均對(duì)小鼠腹腔MΦ吞噬功能有促進(jìn)作用，與正常對(duì)照組比較，有非常顯著差異(P＜0.001)，而0.5g/kg組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
三、討論
本發(fā)明為純中藥制劑，全方具有清熱祛濕、利膽退黃、活血化瘀等功效，該方主要中藥藥效已有報(bào)導(dǎo)，茵陳、梔子、丹參均有明顯保肝作用，均可使肝損傷的各項(xiàng)指標(biāo)有所改善，保肝作用機(jī)理可能與抑制葡萄糖醛酸酶，從而減少葡萄糖醛分解，增加肝臟的解毒功能有關(guān)。臨床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)丹參對(duì)急、慢性活動(dòng)期、慢性遷延性肝炎，甚至對(duì)一些難治的肝火病例均有較好的療效，且無(wú)明顯副作用。梔子、黃柏、苦參各種制劑對(duì)麻醉犬、豚鼠、大鼠能促進(jìn)膽汁分泌，有一定的利膽作用。此外苦參成份苦參堿可使外周白細(xì)胞增多，白細(xì)胞吞噬能力增強(qiáng)，可增強(qiáng)機(jī)體的免疫反應(yīng)。該方中大多數(shù)藥，如苦參、黃柏、丹參、梔子等均有明顯的抗炎作用，有助于消除肝炎早期細(xì)胞腫脹，減輕肝細(xì)胞變性和壞死，減輕肝臟纖維化。上述作用為本藥治療遷延性肝炎提供了藥理學(xué)依據(jù)。
主要藥效學(xué)研究結(jié)果表明，本發(fā)明具有預(yù)防和治療動(dòng)物急、慢性遷延性肝炎的功效，能明顯降低CCL4和D-CalN引起的小鼠血清轉(zhuǎn)胺酶增加，降酶作用與0.3g/kg聯(lián)苯雙酯相似，說(shuō)明該復(fù)方中藥對(duì)急性肝損傷有較好的保護(hù)作用。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果還證明，本發(fā)明還具有利膽作用，可使正常大鼠膽汁分泌量增加，小劑量(1g/kg)組作用較弱，大劑量(3g/kg)作用比較顯著，但均弱于去氫膽酸。免疫功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，本發(fā)明對(duì)免疫受抑小鼠脾T細(xì)胞增殖和IL-2生成均有一定的恢復(fù)作用，對(duì)正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞功能亦有促進(jìn)作用。這些結(jié)果表明本發(fā)明對(duì)參與機(jī)體細(xì)胞免疫功能的細(xì)胞和能夠活化T、B細(xì)胞，NK細(xì)胞的淋巴因子IL-2以及參與機(jī)體非特異性免疫功能中的一類(lèi)重要細(xì)胞-MΦ均有不同程度的增強(qiáng)作用，說(shuō)明該方除有保肝作用外，還有免疫增強(qiáng)作用。
綜上所述，實(shí)驗(yàn)證實(shí)本發(fā)明具有良好的保肝作用和增強(qiáng)免疫功能，是一種很有前途的可供臨床使用的治療急慢性肝炎的藥物。
實(shí)驗(yàn)例3毒理研究
1、本發(fā)明制劑口服最大耐受量測(cè)定
目的觀察一次大劑量口服受試藥對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生的毒性反應(yīng)和死亡情況。
受試藥本發(fā)明原粉(下稱(chēng)本發(fā)明，每克相當(dāng)于生藥5.56g)。
方法昆明種小鼠20只，體重18.8±0.9g，雌雄各半，試驗(yàn)前用蒸餾水溶解藥品(每1ml溶液含本發(fā)明0.167g，合生藥0.93g)。小鼠禁食12小時(shí)，按0.5ml/10g體重灌胃給藥，1日內(nèi)給藥3次，給藥后繼續(xù)飼養(yǎng)7天，觀察小鼠活動(dòng)情況，第7日稱(chēng)重。
結(jié)果7日內(nèi)未發(fā)生小鼠死亡，生長(zhǎng)良好，第7日體重為27.6±1.34g，平均體重增長(zhǎng)8.8±1.3g，給藥當(dāng)日小鼠活動(dòng)有所減少(肉眼觀察)，12h后恢復(fù)正常，其它未見(jiàn)任何不良反應(yīng)。
結(jié)論本發(fā)明小鼠口服最大耐受量大于138.8g/kg，該劑量相當(dāng)于小鼠有效量的140倍數(shù)以上，相當(dāng)于大鼠有效量的464倍以上，相當(dāng)于臨床人用量的52倍以上(成人按60kg計(jì)算)。
討論實(shí)驗(yàn)采用與臨床相同給藥途徑方法觀察該復(fù)方急性毒性，結(jié)果表明，口服給藥未發(fā)現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)，因藥物溶解性和給藥容量限制，無(wú)法再加大劑量。該復(fù)方口服最大耐受量已達(dá)到小鼠和大鼠保肝作用有效量的140倍和464倍以上，由此可見(jiàn)該中藥制劑是安全的。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1取苦參200g、梔子200g、黃柏200g、丹參600g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入5g水飛薊素、100g微晶纖維素、5g甘露醇；另按重量比取5％的羧甲基淀粉鈉、4％的低取代羥丙基纖維素，混勻，取其3/5與上述物料混勻，用濃度3％聚乙烯吡咯烷酮的水溶液作粘合劑，40目篩制濕粒、整粒；按重量比外加0.8％的硬脂酸鎂、2％的微粉硅膠及剩余2/5羧甲基淀粉鈉和低取代羥丙基纖維素的混合粉于制好的顆粒中，混勻，壓片，即得分散片。本產(chǎn)品口服，一次1片，一日3次。
實(shí)施例2取苦參100g、梔子50g、黃柏500g、丹參100g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入10g水飛薊素、50g微晶纖維素、1g甘露醇；另按重量比取3％的羧甲基淀粉鈉、2％的低取代羥丙基纖維素，混勻，取其3/5與上述物料混勻，用濃度2％聚乙烯吡咯烷酮的水溶液作粘合劑，40目篩制濕粒、整粒；按重量比外加0.5％的硬脂酸鎂、1％的微粉硅膠及剩余2/5羧甲基淀粉鈉和低取代羥丙基纖維素的混合粉于制好的顆粒中，混勻，壓片，即得分散片。
實(shí)施例3取苦參200g、梔子50g、黃柏400g、丹參100g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入1g水飛薊素、200g微晶纖維素、10g甘露醇；另按重量比取7％的羧甲基淀粉鈉、5％的低取代羥丙基纖維素，混勻，取其3/5與上述物料混勻，用濃度5％聚乙烯吡咯烷酮的水溶液作粘合劑，40目篩制濕粒、整粒；按重量比外加1％的硬脂酸鎂、3％的微粉硅膠及剩余2/5羧甲基淀粉鈉和低取代羥丙基纖維素的混合粉于制好的顆粒中，混勻，壓片，即得分散片。
實(shí)施例4取苦參250g、梔子100g、黃柏500g、丹參200g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入1g水飛薊素，混勻，再加入蔗糖600g、糊精150g制粒，干燥，即得顆粒劑。本產(chǎn)品開(kāi)水沖服，一次1袋，一日3次。
實(shí)施例5取苦參300g、梔子200g、黃柏500g、丹參300g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入5g水飛薊素，混勻，再加入蔗糖700g、糊精200g制粒，干燥，即得顆粒劑。
實(shí)施例6取苦參300g、梔子500g、黃柏300g、丹參500g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入10g水飛薊素，混勻，再加入蔗糖500g、糊精100g制粒，干燥，即得顆粒劑。
實(shí)施例7取苦參400g、梔子400g、黃柏100g、丹參300g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入10g水飛薊素和300g淀粉，用濃度為65％乙醇溶液制軟材，制好的軟材用微丸機(jī)制丸，濕料擠壓過(guò)0.8mm篩孔，條狀濕粒切斷滾圓，50～60℃干燥成型，過(guò)18目篩選丸，即得微丸劑。本產(chǎn)品口服，一次1丸，一日3次。
實(shí)施例8取苦參400g、梔子500g、黃柏200g、丹參700g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入5g水飛薊素和500g淀粉，用濃度為85％乙醇溶液制軟材，制好的軟材用微丸機(jī)制丸，濕料擠壓過(guò)0.8mm篩孔，條狀濕粒切斷滾圓，50～60℃干燥成型，過(guò)20目篩選丸，即得微丸劑。
實(shí)施例9取苦參400g、梔子300g、黃柏300g、丹參800g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入1g水飛薊素和100g淀粉，用濃度為50％乙醇溶液制軟材，制好的軟材用微丸機(jī)制丸，濕料擠壓過(guò)0.8mm篩孔，條狀濕粒切斷滾圓，50～60℃干燥成型，過(guò)16目篩選丸，即得微丸劑。
實(shí)施例10取苦參500g、梔子500g、黃柏300g、丹參800g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入1g水飛薊素，另加入10g乙基纖維素、5g土溫-80，混勻；按藥物量∶基質(zhì)量＝1∶1.8加入大豆油，混勻；膠皮的配方為明膠∶甘油∶水∶二氧化鈦＝100∶45∶100∶2，配料化膠條件為稱(chēng)量配料，投入化膠罐中，冷浸75分鐘后逐漸升溫至65±5℃，攪拌3～5小時(shí)并同時(shí)抽真空除氣泡，待膠料均勻后放料，濾過(guò)后裝入膠囊機(jī)之膠料桶中；調(diào)試壓丸機(jī)，明膠盒溫控65℃，噴體溫控45℃，滾模轉(zhuǎn)速2.0，膠皮厚度0.8mm，室內(nèi)溫度18～25℃，相對(duì)濕度小于40％，壓丸；干燥采用滾動(dòng)定型干燥與托盤(pán)干燥兩步結(jié)合，滾動(dòng)定型干燥2～5小時(shí)，干燥溫度25±5℃，干燥相對(duì)濕度應(yīng)低于40％，干燥時(shí)間在24～48小時(shí)，即得軟膠囊劑。本產(chǎn)品口服，一次1粒，一日3次。
實(shí)施例11取苦參500g、梔子400g、黃柏100g、丹參1000g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入5g水飛薊素，另加入5g乙基纖維素、1g土溫-80，混勻；按藥物量∶基質(zhì)量＝1∶1.5加入大豆油，混勻；膠皮的配方為明膠∶甘油∶水∶二氧化鈦＝100∶45∶100∶2，配料化膠條件為稱(chēng)量配料，投入化膠罐中，冷浸60分鐘后逐漸升溫至65±5℃，攪拌3～5小時(shí)并同時(shí)抽真空除氣泡，待膠料均勻后放料，濾過(guò)后裝入膠囊機(jī)之膠料桶中；調(diào)試壓丸機(jī)，明膠盒溫控65℃，噴體溫控45℃，滾模轉(zhuǎn)速2.0，膠皮厚度0.8mm，室內(nèi)溫度18～25℃，相對(duì)濕度小于40％，壓丸；干燥采用滾動(dòng)定型干燥與托盤(pán)干燥兩步結(jié)合，滾動(dòng)定型干燥2～5小時(shí)，干燥溫度25±5℃，干燥相對(duì)濕度應(yīng)低于40％，干燥時(shí)間在24～48小時(shí)，即得軟膠囊劑。
實(shí)施例12取苦參500g、梔子50g、黃柏50g、丹參1000g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入10g水飛薊素，另加入20g乙基纖維素、10g土溫-80，混勻；按藥物量∶基質(zhì)量＝1∶2加入大豆油，混勻；膠皮的配方為明膠∶甘油∶水∶二氧化鈦＝100∶45∶100∶2，配料化膠條件為稱(chēng)量配料，投入化膠罐中，冷浸90分鐘后逐漸升溫至65±5℃，攪拌3～5小時(shí)并同時(shí)抽真空除氣泡，待膠料均勻后放料，濾過(guò)后裝入膠囊機(jī)之膠料桶中；調(diào)試壓丸機(jī)，明膠盒溫控65℃，噴體溫控45℃，滾模轉(zhuǎn)速2.0，膠皮厚度0.8mm，室內(nèi)溫度18～25℃，相對(duì)濕度小于40％，壓丸；干燥采用滾動(dòng)定型干燥與托盤(pán)干燥兩步結(jié)合，滾動(dòng)定型干燥2～5小時(shí)，干燥溫度25±5℃，干燥相對(duì)濕度應(yīng)低于40％，干燥時(shí)間在24～48小時(shí)，即得軟膠囊劑。
實(shí)施例13取苦參100g、梔子50g、黃柏50g、丹參700g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入5g水飛薊素，另加入前述物料2倍重量的聚乙二醇4000、1倍重量的聚氧乙烯單硬脂酸酯S-40，混合均勻，水浴上熔解，攪勻，滴于二甲基硅油中成丸，滴距4～6cm，滴口徑2.5mm/2mm，混合藥膏溫度80±5℃，冷卻液高度70±5cm，即得滴丸劑。本產(chǎn)品口服，一次1丸，一日3次。
實(shí)施例14取苦參50g、梔子50g、黃柏500g、丹參900g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入1g水飛薊素，另加入前述物料2倍重量的聚乙二醇4000、1倍重量的聚氧乙烯單硬脂酸酯S-40，混合均勻，水浴上熔解，攪勻，滴于二甲基硅油中成丸，滴距4～6cm，滴口徑2.5mm/2mm，混合藥膏溫度80±5℃，冷卻液高度70±5cm，即得滴丸劑。
實(shí)施例15取苦參200g、梔子200g、黃柏400g、丹參500g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入10g水飛薊素，另加入前述物料2倍重量的聚乙二醇4000、1倍重量的聚氧乙烯單硬脂酸酯S-40，混合均勻，水浴上熔解，攪勻，滴于二甲基硅油中成丸，滴距4～6cm，滴口徑2.5mm/2mm，混合藥膏溫度80±5℃，冷卻液高度70±5cm，即得滴丸劑。
實(shí)施例16取苦參500g、梔子500g、黃柏500g、丹參500g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入5g水飛薊素和50g淀粉，另按重量比加入4％的羧甲基淀粉鈉，混勻，用35％乙醇制粒，干燥，整粒，按重量比外加2％的羧甲基淀粉鈉、0.8％的硬脂酸鎂，混勻，壓片，包衣，即得片劑。本產(chǎn)品口服，一次1片，一日3次。
實(shí)施例17取苦參50g、梔子100g、黃柏500g、丹參900g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入10g水飛薊素和10g淀粉，另按重量比加入3％的羧甲基淀粉鈉，混勻，用20％乙醇制粒，干燥，整粒，按重量比外加1％的羧甲基淀粉鈉、0.5％的硬脂酸鎂，混勻，壓片，包衣，即得片劑。
實(shí)施例18取苦參50g、梔子200g、黃柏400g、丹參600g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入8g水飛薊素和100g淀粉，另按重量比加入5％的羧甲基淀粉鈉，混勻，用50％乙醇制粒，干燥，整粒，按重量比外加3％的羧甲基淀粉鈉、1％的硬脂酸鎂，混勻，壓片，包衣，即得片劑。
實(shí)施例19取苦參100g、梔子200g、黃柏300g、丹參400g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入3g水飛薊素、5g土溫-80、3g苯甲酸鈉，另按重量比加入3％的阿司帕坦，混勻，過(guò)濾，滅菌，加入蒸餾水至1000ml，即得口服液體制劑。本產(chǎn)品口服，一次10ml，一日3次。
實(shí)施例20取苦參100g、梔子300g、黃柏50g、丹參600g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入5g水飛薊素、1g土溫-80、1g苯甲酸鈉，另按重量比加入2％的阿司帕坦，混勻，過(guò)濾，滅菌，加入蒸餾水至1000ml，即得口服液體制劑。
實(shí)施例21取苦參200g、梔子400g、黃柏50g、丹參100g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入3g水飛薊素、10g土溫-80、5g苯甲酸鈉，另按重量比加入5％的阿司帕坦，混勻，過(guò)濾，滅菌，加入蒸餾水至1000ml，即得口服液體制劑。
實(shí)施例22取苦參300g、梔子100g、黃柏100g、丹參400g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入10g水飛薊素、100g淀粉、15g硫酸鈣混合均勻，用乙醇制粒，充填，即得膠囊劑。本產(chǎn)品口服，一次1粒，一日3次。
實(shí)施例23取苦參200g、梔子200g、黃柏200g、丹參1000g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入8g水飛薊素、50g淀粉、5g硫酸鈣混合均勻，用乙醇制粒，充填，即得膠囊劑。
實(shí)施例24取苦參500g、梔子300g、黃柏400g、丹參600g加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.15(25℃)的清膏，加入1g水飛薊素、200g淀粉、30g硫酸鈣混合均勻，用乙醇制粒，充填，即得膠囊劑。
權(quán)利要求
1.一種治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑，其特征在于按照重量組份計(jì)算，它是用苦參50～500份、梔子50～500份、黃柏50～500份、丹參100～1000份、水飛薊素1～10份再加適量輔料制成片劑，分散片，膠囊劑，軟膠囊劑，微囊劑，顆粒劑，注射劑，粉針劑，凍干粉針劑，微丸劑，滴丸劑，糖漿劑，散劑，浸膏劑，煎膏劑，口服液體制劑及其他藥學(xué)上可以接受的劑型。
2.按照權(quán)利要求1所述治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑，其特征在于按照重量組份計(jì)算，它是用苦參200份、梔子200份、黃柏200份、丹參600份、水飛薊素5份再加適量輔料制成顆粒劑、片劑、分散片、膠囊劑、軟膠囊劑、散劑、微丸劑、滴丸劑或口服液體制劑。
3.如權(quán)利要求1或2所述治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素及適量輔料，按常規(guī)方法制成不同的制劑。
4.按照權(quán)利要求3所述治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的分散片這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素、50～200重量份的微晶纖維素、1～10重量份的甘露醇；另按重量比取3～7％的羧甲基淀粉鈉、2～5％的低取代羥丙基纖維素，混勻，取其3/5與上述物料混勻，用濃度2～5％聚乙烯吡咯烷酮的水溶液作粘合劑，40目篩制濕粒、整粒；按重量比外加0.5～1％的硬脂酸鎂、1～3％的微粉硅膠及剩余2/5羧甲基淀粉鈉和低取代羥丙基纖維素的混合粉于制好的顆粒中，混勻，壓片，即得。
5.按照權(quán)利要求3所述治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的顆粒劑這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素，混勻，再加入500～700重量份的蔗糖、100～200重量份的糊精制粒，干燥，即得。
6.按照權(quán)利要求3所述治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的微丸劑這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素和100～500重量份的淀粉，用濃度為70～85％的乙醇溶液制軟材，制好的軟材用微丸機(jī)制丸，濕料擠壓過(guò)0.8mm篩孔，條狀濕粒切斷滾圓，50～60℃干燥成型，過(guò)16～20目篩選丸，即得。
7.按照權(quán)利要求3所述治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的軟膠囊劑這樣制備；取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素，另加入5～20重量份的乙基纖維素、1～10重量份的吐溫-80，混勻；按藥物量∶基質(zhì)量＝1∶1.5～1∶2加入大豆油，混勻；膠皮的配方為明膠∶甘油∶水∶二氧化鈦＝100∶45∶100∶2，配料化膠條件為稱(chēng)量配料，投入化膠罐中，冷浸60～90分鐘后逐漸升溫至65±5℃，攪拌3～5小時(shí)并同時(shí)抽真空除氣泡，待膠料均勻后放料，濾過(guò)后裝入膠囊機(jī)之膠料桶中；調(diào)試壓丸機(jī)，明膠盒溫控65℃，噴體溫控45℃，滾模轉(zhuǎn)速2.0，膠皮厚度0.8mm，室內(nèi)溫度18～25℃，相對(duì)濕度小于40％，壓丸；干燥采用滾動(dòng)定型干燥與托盤(pán)干燥兩步結(jié)合，滾動(dòng)定型干燥2～5小時(shí)，干燥溫度25±5℃，干燥相對(duì)濕度低于40％，干燥時(shí)間在24～48小時(shí)，即得。
8.按照權(quán)利要求3所述治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的滴丸劑這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素，另加入前述物料2倍重量的聚乙二醇4000、1倍重量的聚氧乙烯單硬脂酸酯S-40，混合均勻，水浴上熔融，攪勻，滴于二甲基硅油中成丸，滴距4～6cm，滴口徑2.5mm/2mm，混合藥膏溫度80±5℃，冷卻液高度70±5cm，即得。
9.按照權(quán)利要求3所述治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的片劑這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素和10～100重量份的淀粉，另按重量比加入3～5％的羧甲基淀粉鈉，混勻，用20～50％乙醇制粒，干燥，整粒，按重量比外加1～3％的羧甲基淀粉鈉、0.5～1％的硬脂酸鎂，混勻，壓片，包衣，即得。
10.按照權(quán)利要求3所述治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的口服液這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素、1～10重量份吐溫-80、1～5重量份的苯甲酸鈉，另按重量比加入2～5％的阿司帕坦，混勻，過(guò)濾，滅菌，加入蒸餾水至1000ml，即得。
11.按照權(quán)利要求3所述治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的膠囊劑這樣制備取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素、50～200重量份的淀粉、5～30重量份的硫酸鈣混合均勻，用乙醇制粒，充填，即得。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑及其制備方法，按照重量組份計(jì)算，它是用苦參50～500份、梔子50～500份、黃柏50～500份、丹參100～1000份、水飛薊素1～10份再加適量輔料制成的；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所提供的制劑品種豐富，崩解性好，崩解時(shí)間短，吸收快，生物利用度高，穩(wěn)定性好，刺激性小，口感良好，服用方便。
文檔編號(hào)A61K9/08GK1872210SQ200610200369
公開(kāi)日2006年12月6日 申請(qǐng)日期2006年4月20日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月20日
發(fā)明者張芝庭, 郭宗華, 雷蕾, 楊科 申請(qǐng)人:貴州神奇集團(tuán)控股有限公司