專利名稱：一種復(fù)方丹參膠囊及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種復(fù)方丹參膠囊及其制備方法。
背景技術(shù)：
丹參、黃芪、川芎為中醫(yī)常用藥，以細(xì)胞膜色譜法對(duì)丹參、川芎和黃芪進(jìn)行活性篩選并結(jié)合離體藥理實(shí)驗(yàn)所得的結(jié)果為指導(dǎo)，得到丹參、川芎和黃芪三味藥的有效部位，丹參的有效部位是丹參酮類，有增加冠脈流量，改善微循環(huán)和保護(hù)缺血心肌的作用，隱丹參酮和丹參酮IIA是其主要有效成分。川芎的有效部位是揮發(fā)油，其主要藥理作用也是對(duì)心血管系統(tǒng)，擴(kuò)張冠脈，降低心肌耗氧量，改善外周循環(huán)，其主要有效成分是藁本內(nèi)酯。黃芪味甘性平，有補(bǔ)氣生陽、調(diào)和脾胃、潤肺生津、祛痰之功效，能夠緩解心衰及心肌缺血，黃芪中主要成分黃芪甲苷。
在目前的丹參的有效成分的提取中，大多數(shù)采用傳統(tǒng)的水煎后經(jīng)醇沉或酸，堿處理等方法.但采用傳統(tǒng)的水煎法需要對(duì)生藥進(jìn)行長時(shí)間的加熱，而往往會(huì)破壞某些有效成分并為進(jìn)一步的提取分離增添麻煩。丹參中的有效成分丹參酮IIA和隱丹參酮以及其它丹參酮類化合物對(duì)光和熱不穩(wěn)定，且丹參酮類化合物脂溶性較大，因而考慮到用超臨界流體萃取法提取丹參酮類化合物。超臨界流體萃取技術(shù)被視為對(duì)現(xiàn)代中藥高效提取分離的一種全新方法，具有高擴(kuò)散性、高溶解能力、低粘性、無污染、不易燃、低溫操作、無毒無害、成本低廉、不破壞生藥的特點(diǎn)，其溫度控制在70℃以下，適合對(duì)于濕、熱、光敏性和芳香性物質(zhì)提取分離，采用這樣的技術(shù)能克服原提取煮沸、收膏和干燥工序?qū)Φ⑼惢衔锏钠茐?，適合于丹參中有效成分的提取。
川芎中揮發(fā)油的提取有傳統(tǒng)的水蒸汽蒸餾法和超臨界流體萃取法，通過對(duì)超臨界流體萃取法和水蒸汽蒸餾法的對(duì)照實(shí)驗(yàn)，結(jié)果超臨界提取物揮發(fā)油的含量過低而且其主要有效成分藁本內(nèi)酯的含量也較水蒸汽蒸餾法低.采用水蒸汽蒸餾法工藝簡單，成本較低，適用于工業(yè)化大生產(chǎn)。
目前黃芪總皂苷的提取方法有水提法、醇提法。然而黃芪甲苷在黃芪提取物中含量較低需進(jìn)一步精制，精制的方法有萃取法精制、樹脂吸附法精制和超臨界流體萃取法、其中樹脂吸附精制法具有操作簡便、無污染、成本較低等優(yōu)點(diǎn)，因此采用醇提加樹脂吸附精制法提取分離黃芪總皂苷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，提供一種復(fù)方丹參膠囊及其制備方法。
為了實(shí)現(xiàn)上述任務(wù)，本發(fā)明采取如下的技術(shù)解決方案一種復(fù)方丹參膠囊，其特征在于制得的該丹參復(fù)方膠囊由以下活性成分提取物按重量比例組成丹參脂溶性提取物川芎揮發(fā)油黃芪總皂苷提取物等于1∶4∶2，余量為常規(guī)的藥用膠囊輔料。
所述的丹參提取物中至少含有丹參酮IIA和隱丹參酮，且每100克丹參提取物中含有的丹參酮IIA和隱丹參酮以總丹參酮計(jì)不少于50克；所述川芎揮發(fā)油提取物中至少含有藁本內(nèi)酯，且每100克川芎提取物中含有揮發(fā)油不少于50克；所述黃芪總皂苷提取物中至少含有黃芪甲苷，且每100克黃芪總皂苷提取物中含有的總皂苷不少于50克。
上述復(fù)方丹參膠囊的制備方法，其特征在于，包括以下步驟取處方量丹參藥材，粉碎后在萃取釜的萃取壓力保持為20Mpa～40MPa，萃取溫度為30℃～50℃，加入藥材量的5％～20％體積/質(zhì)量的乙醇作攜帶劑，分離釜的解析壓力和解析溫度分別為5MPa～7MPa和30℃～50℃，萃取2～4h后，分取提取物，揮去乙醇，得丹參提取物；取處方量川芎藥材飲片，置多功能提取罐中，加藥材飲片8倍量水浸泡1h，然后采用水蒸汽蒸餾法蒸餾12h，得到的餾出液靜置分層，取上層得川芎揮發(fā)油；取處方量黃芪藥材飲片，置多功能提取罐中，加黃芪藥材飲片8倍量的75％的乙醇提取2次，每次3h，合并提取液，過濾除去沉淀，黃芪醇提液濃縮成水溶液，上大孔吸附樹脂洗脫，收集洗脫部位，回收溶劑，蒸干，即得黃芪總皂苷提取物；將上述丹參提取物、川芎揮發(fā)油、黃芪總皂苷提取物按處方量配制，和常規(guī)的藥用膠囊輔料按常規(guī)的工藝制備成膠囊即可。
本發(fā)明的復(fù)方丹參膠囊，其中丹參脂溶性提取物主要作用于心肌，川芎揮發(fā)油主要作用于血管，黃芪總皂苷提取物主要是增強(qiáng)免疫力，將其復(fù)配得到的中藥制劑，成分明確，機(jī)理清楚，其副作用小，安全性高，是治療心肌缺血的良好中藥復(fù)方。另外在制備過程中根據(jù)細(xì)胞膜受體色譜模型篩選，結(jié)合藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果，證實(shí)了丹參中的主要有效部位為丹參脂溶性成分，有效成分為丹參酮IIA和隱丹參酮；川芎中的主要有效部位為川芎揮發(fā)油；黃芪中的主要有效部位為黃芪總皂苷，并改進(jìn)了傳統(tǒng)的丹參、川芎、黃芪提取方法，制得的復(fù)方膠囊中含有的中藥原料中有效成分含量高的有效部位。


圖1是黃芪皂苷吸附量曲線圖；圖2是黃芪皂苷70％乙醇洗脫曲線圖；圖3是不同濃度的NaOH對(duì)黃芪總皂苷得率和含量的影響。
以下結(jié)合附圖和發(fā)明人給出的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明的復(fù)方丹參膠囊，由以下活性成分提取物按重量比例組成丹參提取物∶川芎揮發(fā)油∶黃芪總皂苷提取物等于1∶4∶2，余量為常規(guī)的藥用膠囊輔料。
上述復(fù)方丹參膠囊的制備方法，包括下列步驟取處方量丹參藥材，粉碎過10目篩在萃取釜的萃取壓力保持為30MPa，萃取溫度為30℃，加入藥材量體積/質(zhì)量20％的乙醇作攜帶劑，分離釜的解析壓力和解析溫度分別為5MPa和50℃，萃取3h后，分取提取物，揮去乙醇得丹參提取物。
取處方量川芎藥材飲片，置多功能提取罐中，加8倍量水浸泡1h后，蒸餾12h，餾出液靜置分層，取上層得川芎揮發(fā)油。
取處方量黃芪藥材飲片，置多功能提取罐中，用8倍量的75％的乙醇提取2次，每次3h。合并提取液，過濾除去沉淀，1g黃芪醇提液濃縮成2mL的水溶液，上1mL大孔吸附樹脂，分別用5倍樹脂床體積的水、5倍樹脂床體積的0.1％NaOH、8倍樹脂床體積的20％乙醇、8倍樹脂床體積的70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，回收溶劑，蒸干，即得黃芪總皂苷提取物；將上述丹參提取物、川芎揮發(fā)油、黃芪總皂苷提取物按處方量配制，加入常規(guī)的藥用膠囊輔料，按常規(guī)的工藝制備成膠囊即可。
制備的實(shí)驗(yàn)方法1.1丹參工藝研究通過改變萃取釜壓力(MPa)、萃取溫度(℃)、萃取時(shí)間(h)、攜帶劑用量(％)、解析壓力(MPa)、解析溫度(℃)和藥材粉碎度(目)，采用7因素3水平正交試驗(yàn)(L18(37))表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并以有效部位總丹參酮量、有效成分丹參酮IIA和隱丹參酮之和量為指標(biāo)選擇提取丹參中有效成分的最佳條件，見表1～1。
表1～1因素水平表

*攜帶劑采用乙醇，攜帶劑量為與藥材之比(體積/重量)。
(1)材料與儀器供含量測(cè)定用丹參酮IIA和隱丹參酮對(duì)照品(購自中國藥品生物制品檢定所)；TSP高效液相色譜儀(美國Thermo Finigan公司)，1712型電子天平(德國Sartorius公司)，HA220～50～06超臨界萃取裝置(江蘇南通華安超臨界萃取有限公司)。
(2)試驗(yàn)方法及結(jié)果分析用L18(37)正交表安排試驗(yàn)，取丹參藥材飲片，粉碎，稱取藥粉2kg，置于5L萃取釜中。待制冷裝置與萃取釜和分離釜加溫裝置正常工作后，打開壓縮泵加壓到所需壓力，調(diào)整二氧化碳流速至40kg·h～1循環(huán)萃取，按預(yù)定的因素水平和試驗(yàn)安排進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果見表1～2。
表1～2正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表及結(jié)果


注總*表示總丹參酮；隱**表示隱丹參酮和丹參酮IIA含量之和。
將正交試驗(yàn)結(jié)果用SAS軟件進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表1～3，表1～4。
表1～3總丹參酮提取量方差分析表

表1～4隱丹參酮和丹參酮IIA提取量方差分析表

以總丹參酮提取量為考察指標(biāo)，由表1～2中極差R值大小顯示，各因素作用主次為A＞D＞G＞E＞C＞F＞B；方差分析結(jié)果表明A因素的影響有顯著性意義，以A2B1C2D3E1F2G1組合為佳。以隱丹參酮和丹參酮IIA提取量為考察指標(biāo)，由表1～2中極差R值大小顯示，各因素作用主次為A＞D＞G＞C＞B＞E＞F；方差分析結(jié)果表明A因素的影響有顯著性意義，以A3B2C3D3E3F1G1組合為佳。
(3)驗(yàn)證試驗(yàn)根據(jù)優(yōu)選工藝結(jié)果，對(duì)其進(jìn)行了驗(yàn)證試驗(yàn)。用同一批丹參藥材，稱取2kg，分別按A2B1C2D3E1F2G1與A3B2C3D3E3F1G1進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)，并測(cè)定總丹參酮提取量以及隱丹參酮和丹參酮IIA提取量，結(jié)果見表1～5。
表1～5驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

由表可見，以總丹參酮提取量作為考察指標(biāo)，工藝A2B1C2D3E1F2G1較優(yōu)；以隱丹參酮和丹參酮IIA提取量為指標(biāo)，工藝A3B2C3D3E3F1G1較優(yōu)，考慮到實(shí)際應(yīng)用中的節(jié)時(shí)節(jié)能，以及丹參酮類化合物的熱不穩(wěn)定性，確定工藝為A2B1C2D3E1F2G1，即藥材粉碎過10目篩在萃取釜的萃取壓力保持為30MPa，萃取溫度為30℃，加入藥材量20％(體積/質(zhì)量)的乙醇作攜帶劑，萃取3h，分離釜的解析壓力和解析溫度分別為5MPa和50℃。
1.2川芎工藝研究川芎有效部位為揮發(fā)油。根據(jù)工藝設(shè)計(jì)，川芎藥材采用多功能提取罐提取。提取條件以揮發(fā)油得率為指標(biāo)進(jìn)行考察，以浸泡時(shí)間(A)、提取時(shí)間(B)，加水量(C)作為考察因素，采用L9(34)正交試驗(yàn)表進(jìn)行試驗(yàn)，見表2～1。
表2～1因素水平表


注提取時(shí)間為沸騰后時(shí)間(1)含量指標(biāo)分析方法精密稱取川芎約100g，參照《中國藥典》2005年版一部附錄揮發(fā)油測(cè)定法提取揮發(fā)油，冷卻后成半固體狀，稱重。
得率＝揮發(fā)油重量/原生藥重量(2)正交試驗(yàn)結(jié)果分析試驗(yàn)結(jié)果根據(jù)表2～1設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，對(duì)9份樣品分別按“含量指標(biāo)分析方法”測(cè)定，結(jié)果見表2～2。
表2～2正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表及結(jié)果

方差分析將正交試驗(yàn)結(jié)果(表2～2)用SPSS12.0軟件進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表2～3。
表2～3方差分析表

由表2～2、表2～3可知，B因素的影響有顯著性意義，A和C因素的影響無顯著性意義。極差RB＞RC＞RA，若以RA做誤差估計(jì)，RB和RC分別是RC的15.8倍和1.7倍，由此可知提取時(shí)間是影響揮發(fā)油得率的重要因素，其次是加水量，最后是浸泡時(shí)間。再結(jié)合各因素的K值進(jìn)行分析，結(jié)果表明最佳條件是A1B3C2。即浸泡1h，提取12h，加水8倍。
(3)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)由于優(yōu)選的工藝未包括在正交設(shè)計(jì)表的9次試驗(yàn)中，故對(duì)其進(jìn)行了驗(yàn)證試驗(yàn)。用同一批藥材，稱取100g，按A1B3C2進(jìn)行試驗(yàn)，按正交試驗(yàn)方法，測(cè)定揮發(fā)油的含量(見表2～4)。
表2～4驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果(n＝3)

由驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果看出，工藝穩(wěn)定性良好。
(4)最佳提取條件的確定蒸餾12h后川芎揮發(fā)油基本不再被蒸出，總得率約為0.5％，故確定川芎揮發(fā)油蒸餾時(shí)間為12h。
由以上試驗(yàn)，精密稱取川芎約100g，加水約8倍，浸泡1h，提取12h，重復(fù)3次，結(jié)果為0.50±0.03g。說明此提取條件穩(wěn)定可行。
綜上所述，川芎揮發(fā)油的最佳提取條件是加8倍量的水，浸泡1h，提取12h。工業(yè)上多采用多功能提取罐提取，則餾出液靜置分層，取上層得川芎揮發(fā)油。
1.3黃芪工藝研究黃芪有效部位的制備可分為兩個(gè)步驟，即醇提工藝和大孔吸附樹脂處理工藝。醇提工藝中先對(duì)提取次數(shù)進(jìn)行考察，再以乙醇濃度、提取時(shí)間、溶劑倍數(shù)為因素進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，以干浸膏得率及總皂苷的含量為考察指標(biāo)，對(duì)工藝進(jìn)行優(yōu)化。用大孔吸附樹脂法不僅能除去醇提物中的雜質(zhì)，提高有效成分總皂苷的含量以達(dá)到新藥要求，而且制備工藝簡單，只采用醇—水系統(tǒng)操作，避免有機(jī)溶劑的介入，可以放大到大工業(yè)生產(chǎn)。
黃芪主要成分為總皂苷，在預(yù)實(shí)驗(yàn)中，以浸膏和總皂苷的得率為考察指標(biāo)，對(duì)適宜的乙醇濃度進(jìn)行了考察，選取乙醇濃度為50％、60％、70％、80％、和90％進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果以80％乙醇濃度總皂苷提取率較高，從而將正交實(shí)驗(yàn)中乙醇濃度水平設(shè)為75％、80％和85％；然后對(duì)提取次數(shù)進(jìn)行考查，結(jié)果顯示提取2次時(shí)，黃芪總皂苷的提取量已達(dá)到90％％以上，所以提取次數(shù)定為2次。以乙醇濃度、乙醇倍數(shù)、提取時(shí)間為因素，采用L9(34)正交試驗(yàn)表進(jìn)行試驗(yàn)，見表3～1。
表3～1因素水平表

(1)材料與儀器黃芪甲苷對(duì)照品(購自中國藥品生物制品檢定所)，752紫外光柵分光光度計(jì)，香草醛，高氯酸，冰醋酸，甲醇(西安試劑廠)。
(2)測(cè)定方法
①樣品制備精密稱取提取物0.2g，用10mL水加熱溶解，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇萃取3次(20mL/次)，合并正丁醇液，用氨水洗2次(20mL/次)，蒸干正丁醇部分。用5mL水微熱溶解，過D101型大孔吸附樹脂(1.0cm，長12cm)，分別用50mL水、30mL40％乙醇和50mL70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，蒸干，用10mL甲醇溶解并定容。
②標(biāo)準(zhǔn)曲線精密稱取2.5mg黃芪甲苷于5mL容量瓶中甲醇溶解并定容。分別從中吸取0.1mL，0.2mL，0.3mL，0.4mL，0.5mL和0.6mL于6個(gè)干凈的離心管中，常溫下?lián)]干溶劑，加入5％香草醛冰醋酸溶液0.2mL和高氯酸0.8mL，搖勻，置于70℃水浴中加熱15min，冷卻，精密加入5mL冰醋酸，搖勻，用分光光度計(jì)測(cè)定其吸收值，波長578nm。結(jié)果見表3～2。
表3～2黃芪皂苷標(biāo)準(zhǔn)曲線

C＝0.0113+0.318A r＝0.9998③樣品測(cè)定取提取物約0.2g，照“樣品制備”項(xiàng)下進(jìn)行操作，測(cè)定。
(3)試驗(yàn)方法及結(jié)果用L9(34)正交表安排試驗(yàn)，取黃芪藥材飲片，粉碎，過20目篩，稱取藥粉約20g，9份，分別置于500mL燒瓶中，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表3～3。
表3～3正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表及結(jié)果


(4)方差分析將正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表3～4。
表3～4總皂苷方差分析表

由以上表可知，以總皂苷得率為指標(biāo)，因素對(duì)指標(biāo)影響大小的次序?yàn)镃＞B＞A，即乙醇用量對(duì)得率影響最大，其次是回流時(shí)間。
(5)驗(yàn)證試驗(yàn)根據(jù)優(yōu)選的工藝，對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。用同一批藥材，稱取約20g，分別按A2B1C2、A2B2C3與A2B2C2進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)，按正交試驗(yàn)方法，測(cè)定浸膏量及總皂苷量，結(jié)果見表3～5。
表3～5驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

由表3～5可見，以總皂苷為指標(biāo)，A3B3C2提取量最大，故確定A3B3C2為最佳工藝，即藥材用8倍量75％乙醇提取2次，每次3h。大孔吸附樹脂純化工藝優(yōu)化①大孔樹脂的預(yù)處理將大孔樹脂用乙醇浸泡24h，濕法裝柱后，先用乙醇清洗至流出液加水不渾濁為止，再用蒸餾水洗至水液澄清。用過的大孔樹脂柱，自頂端加入30g.L～1NaOH溶液清洗至流出液呈強(qiáng)堿性，浸泡12h，再以蒸餾水洗至水液呈中性。
②大孔樹脂吸附性能的考察以黃芪皂苷為指標(biāo)考察大孔吸附樹脂對(duì)皂苷的動(dòng)態(tài)吸附性能。取50mL預(yù)處理過的D101大孔吸附樹脂。將黃芪浸膏用蒸餾水溶解，作為上柱樣品。等體積收集流出液，50mL/瓶，測(cè)定流出液中黃芪皂苷濃度。規(guī)定當(dāng)流出液中黃芪皂苷濃度超過0.1mg.mL～1時(shí)為泄露，結(jié)果50mL大孔吸附樹脂可處理28倍量樹脂床體積的黃芪溶液(黃芪皂苷濃度為1.0mg/mL)而不發(fā)生泄露(圖1)，可吸附1.4g黃芪皂苷，達(dá)到飽和時(shí)可處理58倍樹脂床體積的提取液，吸附量可達(dá)58mg/mL。為避免損失，規(guī)定上樣量為泄露點(diǎn)的一半，即每1mL樹脂上樣14mg黃芪皂苷量，轉(zhuǎn)換成藥材提取物為50g黃芪藥材經(jīng)提取后，提取液稀釋成100mL，上50mL經(jīng)處理過的D101型大孔吸附樹脂。
③洗脫劑的選擇取50mL已處理的樹脂，按吸附量曲線所得結(jié)果上樣，分別用水、20％乙醇、40％乙醇、70％乙醇和乙醇各250mL洗脫(先后洗脫)，蒸干，測(cè)定黃芪提取物的皂苷含量，結(jié)果見表3～6。
表3～6黃芪總皂苷洗脫劑的選擇


從表3～6可以看出，40％乙醇、70％乙醇對(duì)黃芪皂苷的洗脫率最大，選擇70％乙醇作為皂苷的洗脫溶劑。
④大孔樹脂對(duì)黃芪皂苷的脫附性能的考察大孔樹脂主要是通過表面的范得華力進(jìn)行物理吸附，用極性有機(jī)溶劑做脫附劑，被吸附的黃芪皂苷很容易脫附下來，這種過程也是吸附樹脂再生的過程。從經(jīng)濟(jì)、效率、節(jié)能的角度考慮，選擇乙醇作為脫附劑最佳。如圖2所示，以70％乙醇液為脫附劑，等體積接收流出液，并以流出液累積體積為橫坐標(biāo)，流出液中黃芪皂苷濃度為縱坐標(biāo)作圖，得解吸曲線。由圖2可知，以黃芪皂苷為檢測(cè)指標(biāo)，用8倍量樹脂床體積的70％乙醇液為脫附劑，即可基本上將黃芪皂苷完全從樹脂上解吸下來。
⑤洗脫劑體積的考察黃芪提取物中大部分水溶性雜質(zhì)為糖類，經(jīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，大約用5倍量樹脂床體積的水可洗去大部分水溶性雜質(zhì)，流出液molish反應(yīng)為陰性，然后用8倍量樹脂床體積20％乙醇又可洗去黃酮類雜質(zhì)，最后用8倍量樹脂床體積70％乙醇即可將皂苷完全洗脫下來，見表3～7。
表3～7洗脫體積的選擇

⑥工藝重復(fù)性考察按選定的工藝制備黃芪有效部位3批，對(duì)黃芪提取物進(jìn)行皂苷含量的測(cè)定，結(jié)果見表3～8。
表3～8不同批樣品中皂苷類化合物含量測(cè)定結(jié)果

根據(jù)以上結(jié)果可以看出，經(jīng)過該工藝處理后的黃芪總皂苷含量可以達(dá)到有效部位的要求，但是放大到工業(yè)生產(chǎn)上含量將會(huì)有所降低，因此在該工藝基礎(chǔ)上仍需要繼續(xù)精制處理。繼續(xù)增加乙醇體積分?jǐn)?shù)雖然可以達(dá)到精制目的，但黃芪總皂苷損失亦相應(yīng)增大，故考慮其他方法。由于樹脂所吸附的雜質(zhì)主要為黃酮類等酸性有色物質(zhì)，而黃芪總皂苷為中性，所以考慮以稀堿溶液洗脫雜質(zhì)，對(duì)黃芪總皂苷影響較小。因此分別取50g黃芪粗粉，在以上工藝基礎(chǔ)上，水洗后以不同濃度的氫氧化鈉溶液進(jìn)行洗脫，結(jié)果見圖3。
可以看出，隨著NaOH溶液濃度的升高，黃芪總皂苷含量逐漸升高，但黃芪總皂苷的得率呈下降趨勢(shì)，綜合考慮以0.1％NaOH溶液較為合適，既可以保證黃芪總皂苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)在50％以上，又不至于使黃芪總皂苷損失過多。
⑦小結(jié)綜上所述，黃芪總皂苷的大孔吸附樹脂洗脫工藝確定為1g黃芪醇提液濃縮成2mL的水溶液，上1mL大孔吸附樹脂，分別用5倍樹脂床體積的水、5倍樹脂床體積0.1％NaOH、8倍樹脂床體積的20％乙醇、8倍樹脂床體積的70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，回收溶劑，蒸干，即得黃芪總皂苷。
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方丹參膠囊，其特征在于制得的該丹參復(fù)方膠囊由以下活性成分提取物按重量比例組成丹參提取物∶川芎揮發(fā)油∶黃芪總皂苷提取物等于1∶4∶2，余量為常規(guī)的藥用膠囊輔料。
2.如權(quán)利要求1所述的復(fù)方丹參膠囊，其特征在于，所述的丹參提取物中至少含有丹參酮IIA和隱丹參酮，且每100克丹參提取物中含有的丹參酮IIA和隱丹參酮以總丹參酮計(jì)不少于50克；所述川芎提取物中至少含有藁本內(nèi)酯，且每100克川芎提取物中含有揮發(fā)油不少于50克；所述黃芪總皂苷提取物中至少含有黃芪甲苷，且每100克黃芪總皂苷提取物中含有的總皂苷不少于50克。
3.權(quán)利要求1所述的復(fù)方丹參膠囊的制備方法，其特征在于，包括以下步驟取處方量丹參藥材，粉碎后在萃取釜的萃取壓力保持為20Mpa～40MPa，萃取溫度為30℃～50℃，加入藥材量的5％～20％體積/質(zhì)量的乙醇作攜帶劑，分離釜的解析壓力和解析溫度分別為5MPa～7MPa和30℃～50℃，萃取2～4h后，分取提取物，揮去乙醇，得丹參提取物；取處方量川芎藥材飲片，置多功能提取罐中，加藥材飲片8倍量水浸泡1h，然后采用水蒸汽蒸餾法蒸餾12h，得到的餾出液靜分層，取上層得川芎揮發(fā)油；取處方量黃芪藥材飲片，置多功能提取罐中，加黃芪藥材飲片8倍量的75％的乙醇提取2次，每次3h，合并提取液，過濾除去沉淀，黃芪醇提液濃縮成水溶液，上大孔吸附樹脂洗脫，收集洗脫部位，回收溶劑，蒸干，即得黃芪總皂苷提取物；將上述丹參提取物、川芎揮發(fā)油、黃芪總皂苷提取物按處方量配制，和常規(guī)的藥用膠囊輔料按常規(guī)的工藝制備成膠囊即可。
4.如權(quán)利3要求所述的制備方法，其特征在于，所述的丹參提取物的制備方法中的藥材粉碎后過10目篩，萃取壓力為30Mpa，萃取溫度為30℃，解析壓力和解析溫度為5MPa和50℃，萃取時(shí)間為3h。
5.如權(quán)利3要求所述的制備方法，其特征在于，所述的丹參提取物的制備方法中的攜帶劑為藥材量的20％體積/質(zhì)量的乙醇。
6.如權(quán)利3要求所述的制備方法，其特征在于，所述的黃芪醇提液濃縮過程是，將1g黃芪醇提液濃縮成2mL的水溶液，上1mL的大孔吸附樹脂洗脫。
7.如權(quán)利6要求所述的制備方法，其特征在于，所述的大孔吸附樹脂洗脫過程是分別用5倍樹脂床體積的水、5倍樹脂床體積0.1％NaOH、8倍樹脂床體積的20％乙醇、8倍樹脂床體的70％乙醇洗脫。
8.如權(quán)利3要求所述的制備方法，其特征在于，所述的收集洗脫部位是收集70％乙醇洗脫液的洗脫部位。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種復(fù)方丹參膠囊及其制備方法，制得的該丹參復(fù)方膠囊由以下活性成分提取物按重量比例組成丹參提取物川芎揮發(fā)油黃芪總皂苷提取物等于1∶4∶2，余量為常規(guī)的藥用膠囊輔料。丹參脂溶性提取物主要作用于心肌，川芎揮發(fā)油主要作用于血管，黃芪總皂苷提取物主要是增強(qiáng)免疫力，將其復(fù)配得到的中藥制劑，成分明確，機(jī)理清楚，其副作用小，安全性高，是治療心肌缺血的良好中藥復(fù)方。其制備方法改進(jìn)了傳統(tǒng)的丹參、川芎、黃芪提取方法，制得的復(fù)方膠囊中含有中藥原料中有效成分含量高的有效部位。
文檔編號(hào)A61P9/04GK1965898SQ20061010484
公開日2007年5月23日 申請(qǐng)日期2006年11月2日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月2日
發(fā)明者賀浪沖, 郭立安, 潘欣萍, 王嗣岑, 竇建衛(wèi), 李西玲, 王嫦鶴, 王佩香, 陳熙恒, 王紅英, 李漢文, 李永茂 申請(qǐng)人:西安交大保賽生物技術(shù)股份有限公司, 西安交通大學(xué)