專利名稱:褐藻酸寡糖硫酸鹽在制備防治糖尿病藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種褐藻酸寡糖硫酸鹽在制備防治糖尿病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù):
糖尿病是世界公認(rèn)的嚴(yán)重影響人民健康的疾病,是胰島素分泌不足而造成的內(nèi)分泌性疾病,也是一個多重危險因素和環(huán)境因素相互作用、發(fā)病機理復(fù)雜、病情伴隨終生的慢性疾病。特別值得注意的是,糖尿病已成為嚴(yán)重威脅人類健康的第三大病種,且發(fā)病率仍呈上升趨勢,我國糖尿病患病率已達(dá)3.62%,已跨入糖尿病中等患病率(3~10%)國家。防治糖尿病一直是人類面臨的一大課題。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種褐藻酸寡糖硫酸鹽,把它用于制備防治糖尿病的藥物,此種藥物是作用靶點清楚、分子結(jié)構(gòu)特異的新型糖尿病防治藥物。
褐藻酸寡糖硫酸鹽在制備防治糖尿病藥物中的應(yīng)用。
經(jīng)近期實驗證明,本發(fā)明所用的化合物有抑制胰淀素形成,顯著刺激胰島細(xì)胞釋放胰島素的作用,從而能產(chǎn)生防治糖尿病的效果,另外亦可有效抑制因胰淀素的生成導(dǎo)致治療糖尿病常用的磺脲類藥物的繼發(fā)性失效。該藥物可以大規(guī)模生產(chǎn),易產(chǎn)業(yè)化,且價格低廉。
附圖1為褐藻酸寡糖硫酸鹽對RIN-5F細(xì)胞體外培養(yǎng)胰島素釋放刺激效果示意圖。
附圖1中橫坐標(biāo)B為空白、C為葡萄糖對照、A1~A4表示不同濃度的褐藻酸寡糖硫酸鹽,從A1~A4濃度依次為0.2、0.4、0.8、1.0mg/mL。
具體實施例方式
本發(fā)明人在申請?zhí)枮镃N200310114498.6的專利中披露了一種褐藻酸寡糖硫酸鹽。
褐藻酸寡糖硫酸鹽對改善胰淀素的細(xì)胞毒作用,保護胰島素分泌的影響作用試驗材料與方法1、藥品與試劑胰淀素(Sigma公司)ELISA胰島素測定試劑盒(Morinaga公司)褐藻酸寡糖硫酸鈉鹽由中國海洋大學(xué)海洋藥物與食品研究所提供。
2、細(xì)胞系RIN-5F,RIN-m兩個細(xì)胞系(美國ATCC公司),RIN-m分泌胰島素和生長激素抑制素,為大鼠胰島腫瘤細(xì)胞系;RIN-5F為RIN-m的次克隆細(xì)胞系,只分泌胰島素一種激素,還分泌L-多巴-脫羧酶。
3、實驗方法將細(xì)胞(RIN-5F)種至24孔板,每孔2×105個細(xì)胞,加入培養(yǎng)液(GIBCO invitrogen cell corporation),于37℃,在重量百分濃度為5%的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72小時,更換同樣的培養(yǎng)液,再培養(yǎng)24小時后,移去培養(yǎng)液,將細(xì)胞用該培養(yǎng)液洗一次,每孔加入360μL新鮮該培養(yǎng)液,20μL濃度為16.7mmol/L的葡萄糖水溶液,20μL不同濃度褐藻酸寡糖硫酸鹽的水溶液,于37℃,重量百分濃度為5%的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3小時,取各孔的培養(yǎng)液300μL,離心除去細(xì)胞,上清液按ELISA胰島素測定試劑盒進行試驗(抗原一抗體反應(yīng),4℃反應(yīng)20小時,再進行酶反應(yīng)),同時做校準(zhǔn)曲線。
4、實驗結(jié)果1)校準(zhǔn)曲線按以上實驗方法,重復(fù)兩次,取平均值做校準(zhǔn)曲線。胰島素的濃度與吸收值呈良好的線性關(guān)系,回歸方程為y=0.0024C+0.1222,R2=0.9969,其中y為吸收值,C為胰島素濃度。
2)兩次實驗樣品的吸收值按校準(zhǔn)曲線計算出胰島素濃度,實驗結(jié)果見附圖1。由附圖1可以看出①高濃度葡萄糖可刺激RIN-5F細(xì)胞分泌胰島素;②試驗樣品褐藻酸寡糖硫酸鹽可刺激該細(xì)胞分泌大量胰島素,且這種作用顯示出量效關(guān)系規(guī)律。
權(quán)利要求
1.褐藻酸寡糖硫酸鹽在制備防治糖尿病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種褐藻酸寡糖硫酸鹽在制備防治糖尿病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所用的化合物有抑制胰淀素形成,顯著刺激胰島細(xì)胞釋放胰島素的作用,從而能產(chǎn)生防治糖尿病的效果,另外亦可有效抑制因胰淀素的生成導(dǎo)致治療糖尿病常用的磺脲類藥物的繼發(fā)性失效。該藥物可以大規(guī)模生產(chǎn),易產(chǎn)業(yè)化,且價格低廉。
文檔編號A61P3/00GK1850091SQ20061004458
公開日2006年10月25日 申請日期2006年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月26日
發(fā)明者管華詩, 呂志華, 張丹丹, 于廣利 申請人:中國海洋大學(xué)