專利名稱：：穩(wěn)定的磷酸鈣復(fù)合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及由磷酸肽穩(wěn)定的無(wú)定形磷酸鉤和/或無(wú)定形氟磷酸4丐。提供制造本發(fā)明復(fù)合物和治療或預(yù)防齲齒、牙結(jié)石、牙侵蝕/腐蝕和牙過(guò)敏的方法。由于其再礦化(修復(fù))早期的齲齒，其具有抗齲齒性，保護(hù)牙齒結(jié)構(gòu)，以及其他牙科/醫(yī)藥應(yīng)用(包括抗結(jié)石、抗侵蝕/腐蝕和抗牙過(guò)敏)。
背景技術(shù)：
：齲齒是由于通常由牙斑的牙病原菌發(fā)酵飲食糖產(chǎn)生的有機(jī)酸導(dǎo)致的牙齒的堅(jiān)硬組織的去礦化引起的。齲齒仍是一個(gè)主要的公共健康問(wèn)題。此外，恢復(fù)的牙齒表面易于遭受繞恢復(fù)邊緣的進(jìn)一步齲齒。即使在大部分發(fā)達(dá)國(guó)家通過(guò)使用氟化物降低齲齒流行，該疾病仍然是主要的公共健康問(wèn)題。牙侵蝕/腐蝕是由于飲食或反胃的酸造成的牙齒礦物質(zhì)的流失。牙過(guò)敏歸因于保護(hù)性礦化層的流失而暴露的牙本質(zhì)小管，牙骨質(zhì)和牙結(jié)石是磷酸釣礦物在牙齒表面上的不想要的增生。因此所有這些情況，齲齒、牙侵蝕/腐蝕、牙過(guò)敏和牙結(jié)石是磷酸4丐水平的失調(diào)。通過(guò)提供可生物利用的4丐和磷酸根離子補(bǔ)充流失的磷酸鉀礦物質(zhì)，用穩(wěn)定的無(wú)定形磷酸4丐(ACP)或穩(wěn)定的無(wú)定形氟磷酸4丐(ACFP)治療齲齒、牙侵蝕/腐蝕和牙過(guò)敏。穩(wěn)定的ACP和穩(wěn)定的ACFP還可結(jié)合至牙結(jié)石的表面并阻止或減少進(jìn)一步增生。因此，穩(wěn)定的ACP和穩(wěn)定的ACFP在預(yù)防和治療口腔疾病或其他醫(yī)學(xué)情況中可起重要作用。酪蛋白以膠束形式存在于牛奶中，其被認(rèn)為是半徑約100nm的近球形顆粒，分散在水、鹽、乳糖和乳清蛋白質(zhì)的連續(xù)相中(Schmidt,D.G(1982>Dev.Z)m>7C/^m.1,61-86)。酪蛋白膠束作為磷酸4丐的載體，為骨和牙齒的形成提供可生物利用的釣和磷酸根離子來(lái)源。酪蛋白膠束保持可溶的和可生物利用狀態(tài)的4丐和磷酸根離子的能力是由被稱為酪蛋白磷酸肽(CPP)的酪蛋白的多磷酸化肽片段保持。墨爾本大學(xué)申請(qǐng)的WO98/40406描述了4^性pH下產(chǎn)生的酪蛋白磷酸肽-無(wú)定形磷酸鈣復(fù)合物(CPP-ACP)和CPP穩(wěn)定的無(wú)定形氟磷酸釣復(fù)合物(CPP-ACFP)。已經(jīng)顯示這些復(fù)合物能預(yù)防釉質(zhì)去礦化和促進(jìn)動(dòng)物和人原位齲齒^^莫型(Reynolds,1998)中釉質(zhì)表面下?lián)p傷的再礦化。有效形成復(fù)合物的CPP無(wú)論其是否為全長(zhǎng)度的酪蛋白的部分都能起這個(gè)作用。可從全長(zhǎng)度的酪蛋白胰蛋白酶消化物中分離的活性物(CPP)的實(shí)例列舉在US5,015,628中且包括肽Bos(牛)X-5P(f59-79)[1〗,BosP-酪蛋白X-4P(fl-25)[2],BosoCs2-酪蛋白X-4P(f46-70)[3]和BosoCs2畫(huà)酪蛋白X-4P(fl-21)[4],如下Gln59-Met-Glu-Ala-Glu-Ser(P)-Ile-Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)-Glu-Glu-Ile-Val畫(huà)Pro畫(huà)Asn-Ser(P)-Val-Glu-Gln-Lys79asl(59-79)Argi-Glu-Leu國(guó)Glu-Glu-Leu-Asn-Val-Pro-Gly國(guó)Glu-Ile-Val畫(huà)Glu-Ser(P)-Leu-Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)-Glu-Glu國(guó)Ser國(guó)Ile匪Thr-Arg25|3(1-25)Asn46-Ala-Asn-Glu-Glu-Glu-Tyr-Ser-Ile-Gly-Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)-Glu-Glu-Ser(P)-Ala-Glu-Val-Ala-Thr-Glu-Glu-Val-Lys70as2(46-70)x[Ca2(P04)(OH)],其中x>l。優(yōu)選地，ACFP相主要為堿性相，其中所述ACFP主要包括Ca2+、P043-和F_離子。ACFP的所述堿性相的通式可以為[Ca3(P04)2]x[Ca2(P04)F]y，其中當(dāng)y:l時(shí)x》l或當(dāng)x-l時(shí)y》1。人們認(rèn)為，結(jié)構(gòu)上來(lái)看，本發(fā)明的PP穩(wěn)定的ACP復(fù)合物中的ACP含代替ACFP中氟離子的氬氧根離子。在本發(fā)明的說(shuō)明書(shū)中的"磷酸肽"是指其中至少2個(gè)氨基酸被磷酸化的氨基酸序列。序列中至少兩個(gè)磷酸氨基酸優(yōu)選為相鄰的。優(yōu)選地，所述磷酸肽包括序列A-B-C-D-E，其中A,B,C,D和E各自為磷酸絲氨酸、磷酸蘇氨酸、磷酸酪氨酸、磷酸組氨酸、谷氨酸或天冬氨酸，且A，B,C,D和E的至少2個(gè)，優(yōu)選3個(gè)為磷酸氨基酸。在一個(gè)實(shí)施例中，所述磷酸氨基酸殘基為磷酸絲氨酸，例如三個(gè)連續(xù)的磷酸絲氨酸殘基。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述磷酸肽包括三個(gè)連續(xù)的磷酸絲氨酸殘基，緊跟2個(gè)谷氨酸殘基，序列表示為Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)-Glu-Glu(其中Ser(P)為磷酸絲氨酸，Glu為谷氨酸)。在一個(gè)實(shí)施例中，所述PP為完整的酪蛋白磷酸肽(CPP)或酪蛋白的片段。因此，所述PP可為酪蛋白磷酸肽或磷酸多肽。形成的復(fù)合物的分子式為[CPP(ACP)8]n或[CPP(ACFP)8]n,其中Il等于或大于1,例如6。形成的復(fù)合物可為膠狀的復(fù)合物，其中中心顆粒集聚形成懸浮在水中的小(例如，約2-5nm)和大(例如，約100nm)膠狀顆粒。所述PP可為任何來(lái)源的；其可存在于較大多肽中，包括全長(zhǎng)度的酪蛋白多肽，或者其可通過(guò)對(duì)酪蛋白或其他富磷酸氨基酸蛋白質(zhì)如磷蛋白(phosphitin)進(jìn)行胰蛋白酶或其他酶消化或化學(xué)水解(例如通過(guò)堿或酸)進(jìn)行分離，或者通過(guò)化學(xué)或重組合成，只要其包括如上限定的A-B-C-D-E序歹'j。位于中心序列兩側(cè)的序列可為任何序歹'J。然而，<尤選;也為asl(59-79)[1],P(1-25)[2],as2(46-70)[3]和as2(1-21)[4]中的那些兩側(cè)序列。所述兩側(cè)序列任選地通過(guò)刪除、增加或保守取代一個(gè)或多個(gè)殘基進(jìn)行修飾。所述兩側(cè)區(qū)域的氨基酸組成和序列并非關(guān)鍵。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述PP是一種或多種選自asl(59-79)[1],P(l-25)[2],as2(46-70)[3]和as2(1-21)[4]的酪蛋白磷酸肽。排除任何理論或作用模式的束縛，人們認(rèn)為PP結(jié)合ACP或ACFP束產(chǎn)生存在于溶液中的亞穩(wěn)態(tài)復(fù)合物。這種結(jié)合被認(rèn)為阻止了ACP或ACFP長(zhǎng)大到引起磷酸4丐的成核和沉淀的尺寸。這樣，4丐和其他離子如氟離子可被定位，例如在牙齒的表面以預(yù)防去礦化并預(yù)防齲齒的形成。因此，人們認(rèn)為這樣提供了一種以可生物利用形式輸送能再礦化牙齒的無(wú)定形磷酸4丐的機(jī)制。在另外一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明提供一種如上所述的穩(wěn)定的ACFP復(fù)合物或穩(wěn)定的ACP復(fù)合物，該復(fù)合物作為運(yùn)輸載體，所述運(yùn)輸載體在靶位點(diǎn)共定位離子，所述離子包括，但不限于4丐、氟和磷酸根離子。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述復(fù)合物包括以無(wú)定形形式的磷酸釣，其提供較好的防齲齒、防侵蝕/腐蝕、防結(jié)石和防牙過(guò)敏功效。所述耙位點(diǎn)優(yōu)選地為牙齒或骨骼。本發(fā)明的另一方面提供一種磷酸肽穩(wěn)定的無(wú)定形磷酸4丐(ACP)或無(wú)定形氟鈣(ACFP)復(fù)合物，其中所述復(fù)合物在pH7.0或更低形成，且其中所述ACP或ACFP主要為堿性形式。為了避免疑問(wèn)，本發(fā)明所述磷酸肽穩(wěn)定的ACP或ACFP復(fù)合物排除如WO98/40406中所述的pH7.0以上形成的復(fù)合物。優(yōu)選地，除了鈣、磷酸根、氟和氫氧根離子以外所述復(fù)合物基本不含其他離子，盡管其確實(shí)含水分子。所述復(fù)合物還優(yōu)選地以PP進(jìn)行配制以使得其在水中可溶解。在本
發(fā)明內(nèi)容中，術(shù)語(yǔ)"可溶解的，，還包括所述復(fù)合物被描述為膠體分散體的情況。在一個(gè)實(shí)施例中，所述ACP復(fù)合物基本由PP、4丐、磷酸根和氬氧根離子和水組成。在一個(gè)實(shí)施例中，所述ACFP復(fù)合物基本由PP、鉤、磷酸根、氟和氫氧根離子和水組成。在另一方面，本發(fā)明還提供一種制造如上所述ACP穩(wěn)定復(fù)合物的方法，包括下列步驟(i)獲得包括至少一種磷酸肽的溶液，以及(ii)混合包括鈣離子、磷酸根離子和氫氧根離子的溶液，同時(shí)保持pH約7.0或更低。在本發(fā)明這個(gè)方面的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述氬氧根離子用滴定法加入至溶液中以保持所述磷酸肽溶液在基本恒定的pH。在更優(yōu)選的實(shí)施例中，所述4丐和磷酸根離子伴隨不斷的攪拌并以避免在所述磷酸肽溶液中形成磷酸鈣沉淀的速度用滴定法加入至所述磷酸肽溶液中。在另一方面，本發(fā)明還提供一種制造如上所述ACFP穩(wěn)定復(fù)合物的方法，包括下列步驟(i)獲得包括至少一種磷酸肽的溶液，以及(ii)混合包括鈣離子、磷酸根離子、氫氧根離子和氟離子的溶液，同時(shí)保持pH約7.0或更低。在本發(fā)明這個(gè)方面的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述氫氧4艮用滴定法加入至溶液中以保持所述磷酸肽溶液在基本恒定的pH。在更優(yōu)選的實(shí)施例中，所述釣、磷酸根和氟離子伴隨不斷的攪拌并以避免在所述磷酸肽溶液中形成磷酸釣沉淀的速度用滴定法加入至所述磷酸肽溶液中。所述pH可依需要通過(guò)加入氫離子(酸)或氫氧根離子(堿)調(diào)節(jié)。任何生理上相容或可接受的且不影響所述復(fù)合物本身的酸可用作氫離子的來(lái)源。典型地，可使用氫氯酸。任何生理上可接受的堿，例如NaOH,可用作氫氧根的來(lái)源以調(diào)節(jié)pH或者"l是供所述復(fù)合物形成所需的氫氧根離子。使用的精確的酸堿并不認(rèn)為嚴(yán)格限于上述。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，將高濃度的釣離子和磷酸根離子(例如，3M鈣離子和1M磷酸根離子)滴入根據(jù)本發(fā)明的制造穩(wěn)定ACP復(fù)合物的方法或制造穩(wěn)定ACFP復(fù)合物的方法中使用的磷酸肽溶液中。優(yōu)選地，以充分?jǐn)嚢璺浅＞徛氐确旨尤脞}離子和磷酸根離子溶液(例如每分鐘約1體積％加量)。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，在加入一等份鈣離子溶液之前，加入一等份磷酸根離子溶液。優(yōu)選地連續(xù)加入氫氧根離子。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，在每次加入鈣離子之后，加入所述氫氧根離子。本發(fā)明的另一方面提供一種制造磷酸肽穩(wěn)定的無(wú)定形磷酸鈣(ACP)復(fù)合物的方法，包括如下步驟(i)獲得包括至少一種磷酸肽的溶液，以及(ii)混合包括4丐離子、磷酸根離子和氫氧根離子的溶液，同時(shí)保持pH約7.0或更低。本發(fā)明的另一方面提供一種制造磷酸肽穩(wěn)定的無(wú)定形氟磷酸鈣(ACFP)復(fù)合物的方法，包括如下步驟(i)獲得包括至少一種磷酸肽的溶液，以及(ii)混合包括釣離子、磷酸根離子和氫氧根離子的溶液，同時(shí)保持pH約7.0或更低。本發(fā)明的另一方面提供一種包括磷酸肽穩(wěn)定的ACP或ACFP復(fù)合物的配方，其中所述配方的pH低于7.0。在一個(gè)實(shí)施例中，所述配方的pH在約pH5.0至低于pH7.0之間。優(yōu)選地，所述配方的pH在約pH5.0至約pH6.0之間。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述配方的pH約5.5。因此，所述磷酸肽穩(wěn)定的ACP或ACFP復(fù)合物可在約7.0及更低的pH下形成，隨后置于不同pH的環(huán)境中，優(yōu)選地為4至10之間的pH。在一個(gè)實(shí)施例中，所述pH在4.5和6.5之間，更優(yōu)選地在5和6之間，最優(yōu)選地約5.5。對(duì)于需要刺激骨骼生長(zhǎng)的患者，例如經(jīng)受骨折》務(wù)復(fù)、關(guān)節(jié)復(fù)位、骨移植或顱面外科的治療者，本發(fā)明的復(fù)合物有效用作鈣補(bǔ)充劑。對(duì)于出于任何原因，例如飲食不耐受、過(guò)敏或者宗教或文化因素不能或不愿意食用足量乳制品以供應(yīng)其日常釣需求的對(duì)象，這些復(fù)合物還可有效用作飲食補(bǔ)充劑。下面描述本發(fā)明的實(shí)施例，其中所述復(fù)合物的外在條件可為用于特殊目的的配方，如下面的例子。假設(shè)形成的復(fù)合物穩(wěn)定，為了獲得最佳效果可以如上所述調(diào)節(jié)該外在條件的pH，不考慮所述復(fù)合物最初形成的pH。在一個(gè)實(shí)施例中，4是供了一種再礦化牙齒的方法，包括向牙齒施用如上所述的復(fù)合物，理想地在藥學(xué)上可接受的載體中。所述復(fù)合物可含ACP,ACFP或兩者。該方法優(yōu)選地應(yīng)用于需要治療的對(duì)象。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述穩(wěn)定的ACFP或ACP復(fù)合物被摻入至口腔組合物中，如牙膏、漱口水或幫助預(yù)防和/或治療齲齒或蛀牙的口腔配方。所述ACFP或ACP復(fù)合物可占組合物0.01-50重量％,優(yōu)選地1.0-50重量％。對(duì)于口用的組合物，優(yōu)選地，所述PP-ACP和/或PP-ACFP的給藥量為組合物的0.01-50重量％,優(yōu)選地1.0%-50重量％。在特別優(yōu)選地實(shí)施例中，本發(fā)明的口用組合物含約2%PP-ACP,PP-ACFP或兩者混合物。含上述制劑的本發(fā)明的口用組合物可以可應(yīng)用于口腔的各種形式進(jìn)行制備和使用，如包括牙膏、牙粉和牙粉和液體潔牙劑的潔牙劑、漱口水、片劑、口香糖、牙軟膏、牙齦按摩膏、漱口片、奶制品和其他食品。取決于特定口用組合物的類型和形式，根據(jù)本發(fā)明的口用組合物還可包括其它已知的成分。在本發(fā)明某些優(yōu)選的形式中，所述口用組合物本質(zhì)上可基本為液體，如漱口水和漱洗水。在這樣的制劑中，載體通常為理想地包括如下所述保濕劑的水醇混合物。通常地，水對(duì)醇的重量比在約1:1至約20:1的范圍內(nèi)。在這種制劑中水醇混合物的總量通常在所述制劑的約70至約99.9重量％范圍內(nèi)。所述醇通常為乙醇或異丙醇。優(yōu)選為乙醇。本發(fā)明的這些液體和其他制劑的pH通常在約5至約9的范圍內(nèi)，典型地從約5.0至7.0。所述pH可以用酸(例如，4寧檬酸和苯甲酸)或堿(例如，氫氧化鈉)或緩沖化(如以檸檬酸鈉、安息香酸鹽、碳酸鹽或碳酸氫鹽、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉等)進(jìn)行控制。在一個(gè)實(shí)施例中，根據(jù)本發(fā)明的口用組合物pH為約5.5且含穩(wěn)定的ACP或ACFP。在本發(fā)明的其它合乎需要的形式中，所述口用組合物本質(zhì)上基本為固體或膏狀，如牙粉、牙片或牙膏(牙乳膏)或凝膠牙粉。這些固體或膏狀口用制劑的載體通常含牙齒可接受的磨光材料。磨光材料的例子為水不可溶的偏磷酸鈉、偏磷酸鉀、磷酸三4丐，二水磷酸釣、無(wú)水碌酸二鈣，焦磷酸鈣、正磷酸鎂、磷酸三鎂、碳酸鈣、水合氧化鋁、煅燒氧化鋁、硅酸鋁、硅酸鋯、二氧化硅、皂土，及其混合物。其他適合的磨光材料包括熱硬化樹(shù)脂微粒，如三聚氰胺-、苯酚-,和尿素-曱醛，以及交聯(lián)的聚環(huán)氧化物和聚酯。優(yōu)選的拋光材料包括」徵粒尺寸達(dá)約5微米、平均微粒尺寸達(dá)約1.1微米以及表面積達(dá)約50，000cm2/g的結(jié)晶氧化硅，硅膠或膠體氧化硅，以及復(fù)合無(wú)定形石咸金屬鋁矽酸鹽。當(dāng)使用視覺(jué)透明的凝膠時(shí)，膠體氧化硅的磨光劑，如商標(biāo)SYLOID下作為Syloid72和Syloid74，或商標(biāo)SANTOCEL下作為Santocel100銷售的這些，堿金屬鋁矽酸鹽復(fù)合物尤其有用，因?yàn)樗鼈兊恼凵渎式咏ǔＴ跐嵮绖┦褂玫哪z劑-液體(包括水和/或保濕劑)系統(tǒng)的折射率。許多被稱為"水不溶的"磨光材料為陰離子，并且還包括少量的可溶材料。同樣地，不溶解的偏磷酸鈉可以任何適當(dāng)方式形成，例如在Thorpe'sDictionaryofAppliedChemistry,9巻，第四版，第510-511頁(yè)中所舉例的。#:稱為馬得洛鹽(Madrell，ssalt)和庫(kù)諾鹽(Kurrol，ssalt)的不溶形式的偏磷酸鈉為適合材料的另外例子。這些偏磷酸鹽在水中僅表現(xiàn)出極小的溶解度，因此通常被稱為不溶解的偏磷酸鹽(IMP)。其中存在少量作為雜質(zhì)的可溶磷酸鹽物質(zhì)，通常為幾個(gè)百分比如達(dá)4重量％。如果需要，通過(guò)用水清洗可降低或消除可溶磷酸鹽物質(zhì)，在不溶的偏磷酸鹽的情況下，它被認(rèn)為包括可溶的三偏磷酸鈉。所述不溶的堿金屬鋁矽酸鹽通常以使得不超過(guò)1%的材料大于37微米的微粒尺寸的粉末形式使用。所述磨光材料通常以約10%至約99%的重量濃度存在于固體或膏狀組合物中。優(yōu)選地，在牙膏中存在的量從約10%至約75%,牙粉中從約70%至約99%。在牙膏中，當(dāng)磨光材料為硅物質(zhì)時(shí)，通常存在的量為約10-30重量％。其他磨光材料通常存在的量為約30-75重量％。在牙膏中，所述液體載體可包括水和保濕劑，其含量通常在制劑的約10重量％至約80重量％的范圍內(nèi)。甘油、丙二醇、山梨糖醇和聚丙二醇作為適合的保濕劑/載體的例子。水、甘油和山梨糖醇的液體混合物也有優(yōu)勢(shì)。在反射率為重要考慮因素的透明凝膠中，優(yōu)選地使用約2.5-30%w/w的水，O至約70%w/w的甘油以及約20-80%w/w的山梨4唐醇。牙膏、霜?jiǎng)┖湍z通常含約0.1至約10比例，優(yōu)選地約0.5至約5%w/w的天然或合成的增稠劑或凝膠劑。適合的增稠劑為合成的鋰蒙脫石、可商業(yè)獲得的合成的膠體鎂堿金屬硅酸鹽復(fù)合物粘土如由Laporte工業(yè)有卩艮7>司上市的Laponite(例如，CP,SP2002,D)。LaponiteD含有58.00重量o/。Si02,25.40重量o/oMgO，3.05f*%Na2O,0.98重量％1^20,以及一些水和痕量金屬。其真比重為2.53，在8%濕度時(shí)表觀總體密度為1.0g/ml。其他適合的增稠劑包括愛(ài)爾蘭苔蘚、iota-角叉菜、黃蓍膠、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、羥乙基丙基纖維素、羥丁基甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素(例如，可商業(yè)獲得的Natrosol)、羧曱基纖維素鈉、以及硅膠如細(xì)磨的Syloid(如244)。促溶劑也包括這些保濕的多元醇，如丙二醇、二丙二醇和己二醇，溶纖劑如甲基溶纖劑和乙基溶纖劑，直鏈上含至少約12個(gè)碳原子的植物油和蠟如橄欖油、蓖麻油以及礦脂和酯如乙酸戊酯、乙酸乙酯和苯甲酸節(jié)酯。應(yīng)當(dāng)理解的是，按照慣例，口用制劑以適當(dāng)?shù)臉?biāo)簽包裝進(jìn)行銷售或者分配。因此，口腔漱洗液的罐體具有標(biāo)簽，大體描述其作為口腔漱洗液或漱口水及使用說(shuō)明；牙膏，霜?jiǎng)┗蚰z通常在可漲縮的管中，通常為鋁的、襯鉛的或塑料的，或其他擠壓、抽吸或加壓的計(jì)量排出內(nèi)容物的分配器，其具有標(biāo)簽，大體描述其作為牙膏，凝月交或牙用霜?jiǎng)?。有才幾表面活性劑可用于本發(fā)明的組合物中以達(dá)到增加的預(yù)防作用，有助于達(dá)到活性劑在口腔中的完全分散，并使速溶組合物為更加化妝品上可接受的。所述有機(jī)表面活性材料優(yōu)選地為陰離子的，非離子的或兩性的，且優(yōu)選地不與活性劑相互作用。優(yōu)選地，z使用賦予組合物清潔和起泡性質(zhì)的清潔材料作為表面活性劑。陰離子表面活性劑的適當(dāng)例子為高級(jí)脂肪酸單甘油酯單硫酸鹽的水溶性鹽，如氫化椰子油脂肪酸的單甘油酯單硫酸鈉鹽，高級(jí)烷基硫酸鹽如月桂硫酸鈉，烷芳基磺酸鹽如十二烷基苯磺酸鈉，高級(jí)烷基磺基醋酸鹽，1,2-二羥基丙烷磺酸鹽的高級(jí)脂肪酸酯，以及低級(jí)脂肪族氨基羧酸化合物的基本飽和的高級(jí)脂肪酸酰胺，如脂肪酸、烷基或?；芯哂?2至16個(gè)碳原子的那些，及其類似物。最后提到的酰胺的例子有N-月桂酰肌氨酸，以及基本不含皂或類似高級(jí)脂肪酸物質(zhì)的N-月桂酰、N-肉豆蔻酰，或N-棕櫚酰肌氨酸的鈉、鉀和乙醇胺鹽。在本發(fā)明的口用組合物中使用這些肌氨酸化合物特別有利，因?yàn)槌档脱例X釉質(zhì)在酸溶液中的溶解度之外，在抑制口腔中由于碳水化合物分解而導(dǎo)致的酸形成中，這些物質(zhì)還表現(xiàn)了延長(zhǎng)的顯著效果。適于使用的水溶性非離子表面活性劑的例子為氧乙烯和與之反應(yīng)的具有長(zhǎng)疏水鏈(例如，約12至20個(gè)碳原子的脂肪鏈)的各種活性含氫化合物的縮合產(chǎn)物，其中縮合產(chǎn)物("氧乙烯聚合物(ethoxamers)，，)含親水的聚氧乙烯單體，如聚(氧乙烯)與脂肪酸、脂肪醇、脂肪酰胺、多羥基醇(例如，單硬脂酸山梨糖醇酐酯)的縮合產(chǎn)物，以及聚環(huán)氧丙烷(例如，Pluronic材料)。表面活性劑通常存在的量為約0.1-5重量％。顯著地，所述表面活性劑可有助于本發(fā)明活性劑的溶解，因而減少了所需的促溶保濕劑的量。在本發(fā)明的口用制劑中可摻入各種其他材料，諸如增白劑、防腐劑、硅酮、葉綠素化合物和/或含氨的材料如尿素、磷酸氫二銨，及其混合物。當(dāng)存在時(shí)，這些輔料以基本不會(huì)損害所需性質(zhì)和特性的量被摻入到所述制劑中。還可使用任何合適的香料或甜味材料。適合的香料組分的例子為香料油，如荷蘭薄荷、胡椒薄荷、鹿蹄草、檫木、丁香、鼠尾草、桉樹(shù)、馬郁蘭、肉桂、檸檬、橙的油和水楊酸曱酯。適合的甜味劑包括蔗糖、乳糖、麥芽糖、山梨糖醇、木糖醇、環(huán)己基氨基磺酸鈉、紫蘇亭、AMP(天冬氨酰苯丙氨酸甲酯)、糖精，及其類似物。合適地，香料和甜味劑各自或共同占所述制劑的約0.1%至5%。本發(fā)明還提供上述組合物的應(yīng)用。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)踐中，根據(jù)本發(fā)明的口用組合物，如含本發(fā)明的組合物的漱口水或潔牙劑，優(yōu)選地以酸性pH,優(yōu)選約4.5至約7.0，有規(guī)J聿地應(yīng)用于齒齦和牙齒，如每天、或者每?jī)商旎蛉臁⒒蛘邇?yōu)選一天1至3次，持續(xù)至少2星期至8星期或終身使用。在一個(gè)實(shí)施例中，所述口用組合物的pH約5.0、5.5、6.0、6.5或7.0。本發(fā)明的組合物還可摻入到錠劑，或者口香糖，或者其他產(chǎn)品中，例如，通過(guò)攪拌入熱膠基或涂覆膠基的外表面，例子有明膠、膠乳、乙烯基樹(shù)脂等等，理想地還加有常規(guī)的增塑劑或軟化劑、糖、或者其他甜味劑、或者如葡萄糖、山梨糖醇等等。在另一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明的復(fù)合物被配制成飲食補(bǔ)充劑，優(yōu)選地包括食物的0.1-100%w/w,更優(yōu)選地1-50%w/w,最優(yōu)選地1-10%w/w以及尤其2%w/w。所述復(fù)合物還可摻入到食品中。在另一方面，本發(fā)明提供包括藥物組合物的組合物，所述組合物包含上述任何ACFP和/或ACP復(fù)合物和制藥上可接受的載體。這些組合物可選自牙科抗齲齒組合物、治療組合物和飲食補(bǔ)充劑。牙科組合物或治療組合物可以凝膠、液體、固體、粉末、霜?jiǎng)┗?定劑的形式。治療組合物還可以片劑或膠嚢的形式。在一個(gè)實(shí)施例中，所述ACP和/或ACFP復(fù)合物基本是該組合物的唯一再礦化活性成分。本發(fā)明還包括一種如上所述的與其使用說(shuō)明一起提供的配方以治療或預(yù)防任何一種或多種的齲齒或蛀牙、牙侵蝕/腐蝕、牙過(guò)敏和牙結(jié)石。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種牙科修復(fù)的組合物，包括加有根據(jù)本發(fā)明的ACFP和/或ACP復(fù)合物的牙科修復(fù)材料。所述牙科修復(fù)材料的基質(zhì)可為玻璃離子粘固劑，一復(fù)合材料或可相容的任何其他修復(fù)材料。優(yōu)選地，包含在所述牙科修復(fù)材料中的CPP-ACP復(fù)合物或CPP-ACFP復(fù)合物的量為0.01-80重量％,優(yōu)選地0.5-10重量％及更優(yōu)選地1-5重量％。含上述藥劑的本發(fā)明的牙科修復(fù)材沖牛可以可應(yīng)用于牙科治療的各種形式進(jìn)行制備和使用。根據(jù)這個(gè)實(shí)施例的牙科修復(fù)材料還可包括其他離子，例如，抗菌離子Zn2+,Ag+等，或取決于特定牙科修復(fù)材料的類型和形式的其他另外的成分。根據(jù)這個(gè)實(shí)施例的牙科修復(fù)材料的優(yōu)選地pH在2-10之間，更優(yōu)選地5-9及還更優(yōu)選地5-7。含所述CPP-ACP復(fù)合物或ACFP復(fù)合物的所述牙科修復(fù)材剩-的pH優(yōu)選地在約2至10范圍內(nèi)，更加優(yōu)選地在約5至9的范圍內(nèi)及還更優(yōu)選地在約5至7的范圍內(nèi)。本發(fā)明還涉及一種制造修復(fù)組合物的方法。優(yōu)選地，所述方法包括向基礎(chǔ)牙科修復(fù)材料添加如上所述的ACP和/或ACFP復(fù)合物。本發(fā)明還涉及如上所述修復(fù)組合物在齲齒治療和/或預(yù)防上的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及一套組件，包括(a)牙科修復(fù)材料和(b)CPP-ACP復(fù)合物或CPP-ACFP復(fù)合物以及包括如上所述用于牙科^修復(fù)的復(fù)合物的組合物制劑的^f吏用說(shuō)明書(shū)。本發(fā)明還涉及一套組件，包括(a)牙科修復(fù)材料(b)酪蛋白磷酸肽(c)鈣離子和(d)磷酸根離子，和(e)氬氧根離子以及可選地氟離子，以及牙科修復(fù)的組合物制劑的使用說(shuō)明。在另一方面，提供一種治療或預(yù)防一種或多種齲齒或蛀牙、牙侵蝕/腐蝕、牙過(guò)敏和牙結(jié)石的方法，包括向患者，優(yōu)選地為需要這種治療的患者的牙齒或齒齦施用本發(fā)明的復(fù)合物或組合物的步驟。所述復(fù)合物的局部給藥是優(yōu)選的。所述方法優(yōu)選地包括以如上所述配方的形式給藥所述復(fù)合物。本發(fā)明還提供一種治療和/或預(yù)防動(dòng)物的齲齒、牙侵蝕/腐蝕、牙過(guò)敏和牙結(jié)石的方法，包括提供根據(jù)本發(fā)明的或依據(jù)本發(fā)明制造的所述牙科修復(fù)組合物，以及應(yīng)用于需要治療和/或預(yù)防的動(dòng)物的牙齒。在另一方面，本發(fā)明涉及治療一種或多種與從身體中，尤其從骨骼中流失鈣相關(guān)的疾病、4丐缺乏、4丐吸收不良或類似疾病的方法。這種疾病的例子包括，但不限于骨質(zhì)疏松癥和骨軟化。通常，可通過(guò)增加鈣的生物利用度改善的任何疾病都可考慮。應(yīng)當(dāng)理解的是，盡管本說(shuō)明書(shū)明確涉及在人體中的應(yīng)用，本發(fā)明還有用于獸醫(yī)用途。因而，本發(fā)明的所有方面都有用于家畜如牛、羊、馬和家禽；有用于寵物如貓和狗；以及有用于動(dòng)物園動(dòng)物。具體實(shí)施例方式現(xiàn)在，將參考下面非限制性的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行描述。實(shí)施例1CPP-ACFP和CPP-ACP溶液的配制將3.25MCaCl2，1.25MNa2HP04,1MNaOH和1MNaF的儲(chǔ)備溶液以約30等4分加入至10-15%w/v(重量體積比)的酪蛋白的胰蛋白酶消化物中直至所獲最終濃度約78mMCa2+,48mM磷酸鹽和12mM氟化物。所述溶液被緩慢加入(即，低于約1體積％加入量每分鐘)。先加入一等份的磷酸鹽溶液，然后加入一等份的鉤溶液。用NaOH通過(guò)混合將pH保持在7.0，6.5,6.0，5.5和5.0。氬氧化鈉溶液由恒pH滴定^f義自動(dòng)添加，-使在每次添加4丐離子后加入氬氧離子。在加入鈣離子、磷酸離子、氫氧離子和氟離子之后，將該溶液通過(guò)O.l微米的過(guò)濾器過(guò)濾以濃縮l-2倍。如果需要，可將濾渣用水清洗以除去鹽或無(wú)活性(及苦味)肽。如上所述，不加入氟制成CPP-ACP溶液。在完成各滴定和過(guò)濾后，收集各濾渣的樣品，使用3000分子量截止點(diǎn)的Centriprep3超濾膜，收集的濾液量低于10%。將含樣品的離心管(Centriprep)在使用JA10.5轉(zhuǎn)子的Beckman公司J2-21型離心才幾上以1000g離心15min。對(duì)Centriprep離心前的原才羊品和離心后的濾液樣品進(jìn)行鈣、磷酸根和氟的濃度分析。原樣品的分析給出4丐、磷酸根和氟的總濃度，濾液的分析給出自由(未結(jié)合)的4丐、磷酸根和氟的濃度?？倽舛群臀唇Y(jié)合濃度之差為被CPP結(jié)合的Ca、Pi和F的濃度，見(jiàn)表1和表2。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的第一例證中，測(cè)量在酸性pH下制備的復(fù)合物中2%CPP-ACFP的結(jié)合鈣、磷酸根和氟濃度，如表1所示。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的第二例證中，測(cè)量在酸性pH下制備的復(fù)合物中2%CPP-ACP的結(jié)合釣、磷酸根和氟濃度，如表2所示。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>這個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果說(shuō)明，由酪蛋白磷酸肽(CPP)穩(wěn)定的無(wú)定形磷酸4丐和無(wú)定形氟磷酸釣的納米復(fù)合物或納米蔟在酸性pH下形成，因?yàn)槠溆捎诟邼舛燃鄱谶^(guò)濾步驟之后被保留。表l和2中的結(jié)合釣和磷酸根和氟的比率說(shuō)明所形成的復(fù)合物含堿性無(wú)定形磷酸釣和堿性無(wú)定形氟磷酸釣(ACPP)。所述堿性ACP相為[Ca3(P04)2]x[Ca2(P04)(OH)]，其中對(duì)所有pH值x=1-2。所述堿性ACFP相為[Ca3(P04)2]x[Ca2(P04)F〗y(tǒng),其中x=1和y=1-2(pH5.0),以及y=1和x-1-2(pH5.5-7.0)。還可以看出，酸性pH下結(jié)合的4丐離子和磷酸根離子量保持相對(duì)較高，直到形成物的pH降至約5.0區(qū)域。在不祐:任何理^侖或作用方式束縛下，人們認(rèn)為，在酸性pH下通過(guò)平穩(wěn)加入OH陰離子，如加入NaOH，優(yōu)選伴有攪拌，以使得OH陰離子與鈣離子和磷酸根(P043_)離子充分形成堿性ACP,其被CPP穩(wěn)定，當(dāng)進(jìn)一步添加OH時(shí)這驅(qū)動(dòng)反應(yīng)形成更多的ACP，,人而實(shí)現(xiàn)復(fù)合物的形成。然而，在ACFP的情況中，F(xiàn)離子允許更低的pH環(huán)境用于復(fù)合物形成，且可從表l看出，在給定的酸性pH下ACFP復(fù)合物中結(jié)合的鈣量高于相同pH下的ACP。實(shí)施例2體外酸性pH下CPP-ACP和CPP-ACFP對(duì)牙釉質(zhì)表面下?lián)p傷再礦化的比較取出的人第三臼齒的拋光釉質(zhì)表面被鋸成厚片(8x4mm2)并覆蓋有抗酸指甲油以形成lmm間隔的半咬合面、半齒齦的近中遠(yuǎn)窗口(1x7mm2)。比較所用的實(shí)驗(yàn)方法描述于雷諾(Reynolds)(1997)酪蛋白磷酸肽穩(wěn)定的磷酸4丐溶液對(duì)釉質(zhì)表面下?lián)p傷的再礦化，牙科研咒雜志(Remineralizationofenamelsubsurfacelesionsbycaseinphosphopetide-stabilizedcalciumphosphatesolutions./Z)ewf)76:1587-1595，這為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員/>知，且其內(nèi)容通過(guò)引用成為本"i兌明書(shū)的一部分。用懷特(White)的Carbopol方法，在這些窗口上產(chǎn)生表面下釉質(zhì)損傷(Reynolds描述，1997)。釉質(zhì)厚片被對(duì)半鋸成4x4mm2的塊體。在一塊體上的半齒齦損傷和另一塊體上的半咬合面損傷用指甲油密封以產(chǎn)生去礦化的對(duì)照。在37。C、無(wú)攪拌，將該釉質(zhì)半損傷體曝露于不同的再礦化溶液中10天。再礦化溶液為在pH7.0、6.5、6.0、5.5和5.0下制備并保存在具有形成物的相應(yīng)pH的溶液中的2%CPP-ACP或2%CPP-ACFP。再礦化后，各對(duì)塊體在乙醇中進(jìn)行脫水并包埋在甲基丙烯酸甲酯樹(shù)脂(Paladur,Kulzer，德國(guó))中。與損傷表面垂直地切下三個(gè)200-30(Vm的片段，部分重疊80士5pm疊放，并在10x14pm厚的增量的鋁制梯級(jí)旁進(jìn)行放射成像，如在先的描述(Shen等人，2001,J.Dent.Res.80:2066-2070),其全部?jī)?nèi)容通過(guò)引用成為本說(shuō)明書(shū)一部分。經(jīng)由Dilux22顯微鏡(ErnstLeitzWetzlar，德國(guó))，通過(guò)發(fā)射光觀察損傷的放射成像圖像。該圖像由攝像機(jī)(索尼DXC930P)獲得并在成像軟件(Optimas6.2)的控制下被數(shù)字化(Scion圖像公司，colourgrabber7)。該損傷、對(duì)照物和鋁制梯級(jí)如Shen等人(2001)所述進(jìn)行掃描。測(cè)定釉質(zhì)片段厚度，并使用如Shen等人(2001)所述的Angmar等式(1963)測(cè)定體積百分比礦物數(shù)據(jù)。還通過(guò)Shen等人前述的方法計(jì)算再礦化的百分比(％R)。<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>表3的結(jié)果說(shuō)明2%CPP-ACP和CPP-ACFP溶液以顯著水平再礦化釉質(zhì)表面下?lián)p傷，雖然在酸性pH值下。CPP-ACP和CPP-ACFP在pH5.5產(chǎn)生最佳的再礦化作用。即使在常規(guī)釉質(zhì)去礦化發(fā)生的pH5.0,2%CPP-ACP引起18%的再礦化，2%CPP-ACFP引起40%的再礦化，說(shuō)明酸性溶液中的CPP-ACFP的優(yōu)越性能。實(shí)施例3CPP-ACP在pH7.0和5.5下產(chǎn)生的原位釉質(zhì)再礦化的比較本實(shí)驗(yàn)是雙盲交叉設(shè)計(jì)，以評(píng)估與含在pH7.0下制備和保存的0.5%w/vCPP-ACP的漱口水相比，含在pH5.5下制備和保存的0.5%w/vCPP-ACP的漱口水在口腔內(nèi)模型中提高釉質(zhì)再礦化的能力。本研究得到墨爾本大學(xué)人類研究倫理委員會(huì)和墨爾本皇家牙科醫(yī)院臨床研究倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。四個(gè)健康成人受試者(2名男性和2名女性)從牙科科學(xué)學(xué)院的工作人員和研究生(年齡從21至47歲)中征募。所有的受試者最少有22顆天然齒，并無(wú)齲齒、牙周疾病或其他口腔病狀。沒(méi)有受試者使用抗生素或可能影響唾液流速的藥物。各受試者的非刺激唾液流速超過(guò)0.2ml/min。通過(guò)指示受試者向下傾斜地探出頭部，允許唾液流入預(yù)稱重的離心管中正好2min,測(cè)量非刺激唾液流速。通過(guò)指示受試者食用無(wú)糖咀嚼口香糖正好2min,同時(shí)使產(chǎn)生的全部唾液流入預(yù)稱重的離心管中，測(cè)量刺激唾液流速。如以前的描述(Shen等人，2001),為各受試者制作覆蓋第一前臼齒至齒弓上最后一顆牙齒的可移除中腭丙烯酸器具。取出的人第三顆臼齒從墨爾本皇家牙科醫(yī)院獲得。除去任何被取出的軟組織并將牙齒保存在18%v/v福爾馬林醋酸溶液中。選擇無(wú)裂縫、污斑和氟中毒(在解剖顯微鏡下觀察)的健全的、相對(duì)平的頰面和舌面，并用Milli-Q純凈水沖洗三次。取下外層釉質(zhì)表面并用慢速牙鉆機(jī)彎?rùn)C(jī)頭上的Soflex(3M)磨盤濕法拋光成鏡面。隨后，使用水冷卻的金鋼石刀片鋸，以約8x4mm厚片從牙齒上鋸下各拋光表面，并且除了兩個(gè)相互間隔lmm的(咬合面的和齒齦的)近中遠(yuǎn)窗口(1x7mm)，整個(gè)厚片覆蓋了抗酸性的指甲油。通過(guò)將各厚片裝配在3x4cm黃色牙科粘蠟棒的末端并浸沒(méi)在40ml不攪拌的去礦化緩沖液中在37。C保持4天，在釉質(zhì)窗口中產(chǎn)生損傷，所述去礦化緩沖液包括20g/lCarbopol907TM(聚羧乙烯，BFGoodrich,克利夫蘭，俄亥俄州)，500mg/l羥磷灰石(Bio-GelHTP，Bio-RadLaboratories,里士滿，加利福尼亞)，以及0.1mo1/1pH4.8的乳酸(AjaxChemicals,奧本，新南威爾士)。2天后替換溶液，替換時(shí)將厚片從溶液中取出，用Milli-Q純凈水沖洗三次，吸干水份并置于新鮮的去礦化緩沖液中。類似地，去礦化作用四天后將厚片沖洗和干燥。由人工損傷片段的X射線顯微照相進(jìn)行評(píng)估，這個(gè)去礦化步驟造成約80-100jum深度(LDd)的一致表面下?lián)p傷，表面層完好無(wú)缺。去礦化后，各釉質(zhì)厚片通過(guò)各窗口的中心線被鋸成兩個(gè)4x4mm的半厚片并使各半厚片的切面覆蓋上指曱油。各對(duì)半厚片之一保留為去礦化對(duì)照物并保存在含一滴Milli-Q純凈水的帶標(biāo)記的1.5ml微型離心管中，從而制造一個(gè)潮濕的環(huán)境。將各對(duì)的另一個(gè)釉質(zhì)半厚片插入到口腔內(nèi)器具中，并用再礦化方案的牙科蠟保持。小心使窗口無(wú)蠟。將四個(gè)釉質(zhì)半厚片插入到各器具內(nèi)，雙邊槽體的各邊兩個(gè)(Shen等人，2001)。試驗(yàn)的漱口水含0.5。/。w/v如實(shí)施例1中描述在pH5.5或pH7.0下制備的CPP-ACP。產(chǎn)品以編號(hào)產(chǎn)品提供。該編號(hào)保密直至獲得所有的數(shù)據(jù)。這個(gè)實(shí)驗(yàn)以兩種處理使用了雙盲交叉設(shè)計(jì)(0含0.5%(w/v)pH7.0下的CPP-ACP的漱口水，以及(ii)含0.5%(w/v)pH5.5下的cpp-acp的漱口水。受試者#:隨4幾分配每一種漱口水。在實(shí)驗(yàn)的開(kāi)始，向全體受試者提供足夠供應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)氟化物潔牙劑，并指示他們?cè)趯?shí)驗(yàn)期間使用。指示受試者清晨和就寢時(shí)用氟化物潔牙劑刷牙。還指示他們?cè)诓迦肟谇粌?nèi)器具之前用水沖洗口腔。受試者戴上含亞表去礦化損傷的四個(gè)人釉質(zhì)半厚片插入物的可拆卸的顎部器具。一旦將器具插入口腔后，各受試者被指示用5ml漱口水沖洗60秒。受試者繼續(xù)戴用該器具另外40分鐘。這樣做一天4次，連續(xù)10天，在以下時(shí)刻上午10:00;上午11:30;下午2:00和3:30。當(dāng)戴上該器具的期間，告訴受試者不能吃或飲用任何東西。IO天的實(shí)驗(yàn)期之后，有一個(gè)星期的沖洗期。然后，受試者轉(zhuǎn)至其它處理。當(dāng)從口腔中移出該器具時(shí)，用Milli-Q純凈水簡(jiǎn)單沖洗并保持在密封的潮濕塑料袋中，在室溫保存。告知受試者不刷洗含釉質(zhì)塊的區(qū)域。受試者每日記錄產(chǎn)品使用和器具佩戴次數(shù)。在實(shí)驗(yàn)期間，不改變受試者的飲食或口腔衛(wèi)生方式。各治療期后，移出釉質(zhì)半厚片，與各自的去礦化對(duì)照釉質(zhì)半厚片配對(duì)，包埋、切片，進(jìn)行X射線顯微照相和計(jì)算機(jī)輔助密度圖像分析以測(cè)定再礦化的水平。每一處理后，釉質(zhì)半厚片與其各自對(duì)照的半厚片配對(duì)，隨后在無(wú)水乙醇中脫水。如Shen等人(2001)的描述，將各對(duì)半厚片包埋、切片，并進(jìn)行X射線顯微照相和計(jì)算機(jī)輔助密度圖像分析。用提供0至256之間的灰度值讀數(shù)的程序的線亮度功能，掃描損傷和健康釉質(zhì)的附近區(qū)域的X射線圖像。通過(guò)無(wú)人工制品和裂縫的區(qū)域?qū)⒏鲹p傷掃描6次。各次掃描包括從損傷至健康釉質(zhì)的牙齒表面得到的200個(gè)讀數(shù)。掃描每一膠片(slide)上的鋁制梯級(jí)圖像，繪制平均梯級(jí)灰度值讀數(shù)與鋁厚度的圖。牙齒截面圖像的讀數(shù)位于梯級(jí)曲線的線性部分，線性回歸用于將灰度值數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為同等厚度的鋁的值。測(cè)量截面的厚度，并用Angmar等人的等式以及鋁，有機(jī)物質(zhì)加水和磷灰石礦物的線性吸收系數(shù)(分別為131.5,11.3和260.5)計(jì)算vol%(體積百分比)礦物數(shù)據(jù)。將兩損傷間的中間帶的圖像進(jìn)行6次掃描并取平均值以給出健康釉質(zhì)的對(duì)照密度曲線。中間帶的牙齦面和咬合面的損傷圖像(治療窗口和去礦化對(duì)照窗口)類似地盡可能接近中間帶但避免任何常在損傷邊緣出現(xiàn)的不規(guī)則態(tài)進(jìn)行掃描，計(jì)算％礦物曲線。各釉質(zhì)半厚片的去礦化和處理過(guò)的損傷的vol。/。礦物曲線與相同截面的中間健康釉質(zhì)vol%礦物曲線進(jìn)行比較。去礦化對(duì)照損傷和中間健康釉質(zhì)的密度曲線下面積的差由梯形積分法計(jì)算，表示為AZd。處理過(guò)的損傷和中間健康釉質(zhì)的密度曲線下面積的差由梯形積分法計(jì)算，表示為AZr。隨后，這些參數(shù)轉(zhuǎn)化成處理后的％變化值，同樣地，％礦物變化(％MC)表示AZ值的。/。變化=-xlOO.巡使用隨機(jī)完全區(qū)組設(shè)計(jì)(NorusisM.1993)的方差分析(ANOVA)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)3種處理的數(shù)據(jù)。用Levene's檢驗(yàn)確定方差的均勻性，用正態(tài)概率圖和Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)確定數(shù)據(jù)的正態(tài)性。所有的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析用SPSSversion11.0軟件(NorusisM.1993)進(jìn)行。一旦獲得釉質(zhì)再礦化值的全部數(shù)據(jù)，揭開(kāi)編號(hào)并對(duì)去編號(hào)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。表4中的結(jié)果表示4位受試者的平均^MC值，各受試者的數(shù)據(jù)是從各器具中的四個(gè)釉質(zhì)半厚片的各片段進(jìn)行的12次掃描獲得(牙齦和咬合面的損傷各6次)。使用含0.5%(w/v)pH5.5的CPP-ACP的漱口水產(chǎn)生14.16±1.90%釉質(zhì)表面下?lián)p傷的再礦化，而使用含0.5%(w/v)pH7.0的CPP-ACP的漱口水^f又造成10.31±2.28%釉質(zhì)亞表表面的再礦化。該差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(;O.Ol)。這些數(shù)據(jù)顯示在pH5.5形成的CPP-ACP比在pH7.0形成的CPP-ACP具有高37%的原位釉質(zhì)再礦化效率，從而驗(yàn)證了實(shí)施例3獲得的體外結(jié)果。表4含0.5%(w/v)pH7.0或pH5.5的CPP曙ACP的漱口水的原位釉質(zhì)表面下?lián)p傷的再礦化作用<table>complextableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>a.高出pH7.0漱口水的增加的再礦化百分比實(shí)施例4在這個(gè)實(shí)施例中，提供了許多配方以舉例說(shuō)明本發(fā)明的復(fù)合物可配成前面一般描述的不同目的的組合物的方式。這些僅是使用各種本發(fā)明的實(shí)施例提供的配方類型的例子。含CPP-ACP或CPP-ACFP的牙骨配方配方1成分%w/v山梨糖醇22.0愛(ài)爾蘭苔蘚1.0Gantrez19.0純凈水余量單氟磷酸鈉0.76糖精鈉0.3焦磷酸鹽2.0水合氧化鋁47.0香料0.95CPP-ACP(pH5.5下制備)2.0十二烷基》克酸鈉2.0以NaOH調(diào)pH至5.5配方2成分％w/v二水碌酸二鈣50.0山梨糖醇10.0甘油10.0羧甲基纖維素鈉1.0十二烷基硫酸鈉1.5十二烷基肌氨酸鈉0.5(Sodiumlaurylsarconisate)香料1.0糖精鈉0.1單氟磷酸鈉0.3葡萄糖酸氯己定0.01葡聚糖酶0.01CPP-ACP(pH5.5下制備)2.0純凈水余量以磷酸調(diào)pH至5.5配方3成分%w/v山梨糖醇22.0愛(ài)爾蘭苔蘚1.0Gantrez19.0純凈水余量糖精鈉0.3焦磷酸鹽2.0水合氧化鋁48.0香料0.95CPP畫(huà)ACP(pH5.5下制備)2.0十二烷基硫酸鈉2.0以NaOH調(diào)pH至5.5配方4成分%w/v二水磷酸二鈣50.0山梨糖醇10.0甘油10.0羧甲基纖維素鈉1.0十二烷基碌u酸鈉1.5十二烷基肌氨酸鈉0.5香料1.0糖精鈉0.1葡萄4唐酸氯己定0.01葡聚糖酶0.01CPP-ACP(pH5.5下制備)2.0純凈水余量以磷酸調(diào)pH至5.5配方5成分%w/v12山梨#唐醇58.058.0二氧化硅(Zeodent119)20.020.0純凈水余量余量十二烷基》克酸鈉4.04.0CPP-ACP(pH5.5下制備)2.0一CPP-ACFP(pH5.5下制備)—2.0磷酸二氫鈉1.451.45香料1.01.0羧甲基纖維素鈉0.750.75二氧化鈦(金紅石)0.5250.525黃原膠0.4750.475糖精鈉0.3500.350氟化鈉0.243-以磷酸/NaOH調(diào)節(jié)pH5.55.5配方6成分%w/v12山梨糖醇(70%溶液)31.031.0純凈水余量余量二氧化硅22.022.0甘油8.08.0十二烷基碌u酸鈉4.04.0聚乙二醇3001.01.0氟化鈉0.243—二氧化鈦(金紅石)0.5250.525黃原膠0.4750.475羧曱基纖維素鈉0.50.5糖精鈉0.2860.286酸式焦磷酸鈉2.42.4焦石癢酸四鈉2.22.2香料1.01.0CPP-ACP(pH5.5下制備)2.0-CPP-ACFP(pH5.5下制備)—2.0pH5.55.5以磷Si/NaOH調(diào)節(jié)pH5.55.5漱口水配方配方1成分%w/v乙醇10.0香料1.0糖精鈉0.1單氟磷酸鈉0.3葡萄糖酸氯己定0.01十二烷酰二乙醇胺0.3CPP-ACP(pH5.5下準(zhǔn)備)0.5水余量以磷酸/NaOH調(diào)節(jié)至pH5.5配方2成分%w/vGantrezS-972.5甘油10.0香料油0.4葡萄糖酸氯己定0.01十二烷酰二乙醇胺0.2CPP-ACP(pH5.5下準(zhǔn)備)0.5水余量以磷酸/NaOH調(diào)節(jié)至pH5.5錠劑配方成分%w/v糖/糖醇75-80玉米糖漿1-20香料油1-2CPP-AFCP(pH5.5下準(zhǔn)備)0.5-2.0硬脂酸鎂l國(guó)5水余量以磷酸/NaOH調(diào)節(jié)至pH5.5口香糖配方成分%w/v膠基30碳酸釣2.0結(jié)晶山梨糖醇53.0甘油0.5香料油0.1CPP-AFP(pH5.5下準(zhǔn)備)1.0水余量以磷酸/NaOH調(diào)節(jié)至pH5.5應(yīng)當(dāng)理解的是在本說(shuō)明書(shū)中公開(kāi)和限定的發(fā)明覆蓋一個(gè)或多個(gè)正文或附圖提及或示出的單獨(dú)技術(shù)特征的結(jié)合。所有這些不同的結(jié)合構(gòu)成本發(fā)明各種可選擇的方案。權(quán)利要求1.一種磷酸肽穩(wěn)定的無(wú)定形磷酸鈣(ACP)或無(wú)定形氟鈣(ACFP)復(fù)合物，其中所述復(fù)合物在pH7.0或更低形成，以及其中所述ACP或ACFP主要以堿性形式。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合物，其特征在于，所述磷酸肽包括序列A-B-C-D-E,其中A，B,C,D和E獨(dú)立地為磷酸絲氨酸，磷酸蘇氨酸，磷酸酪氨酸，磷酸組氨酸，谷氨酸或天冬氨酸。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合物，其特征在于，所述復(fù)合物適于牙科應(yīng)用。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的復(fù)合物，其特征在于，所述磷酸肽包括序列Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)-Glu-Glu,其中Ser(P)為磷酸絲氨酸及Glu為谷氨酸。5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一權(quán)利要求所述的復(fù)合物，其特征在于，所述磷酸肽為酪蛋白磷酸肽。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的復(fù)合物，其特征在于，所述酪蛋白磷酸肽從通過(guò)酶或化學(xué)水解的全長(zhǎng)度酪蛋白中分離。7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的復(fù)合物，其特征在于，所述酪蛋白磷酸肽選自asl(59-79)，P(1-25),a82(46國(guó)70)和as2(l-21)。8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一權(quán)利要求所述的復(fù)合物，其特征在于，所述復(fù)合物在pH約5.0至低于7.0的范圍下形成。9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一權(quán)利要求所述的復(fù)合物，其特征在于，所述復(fù)合物在pH約5.0至約6.0的范圍下形成。10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一權(quán)利要求所述的復(fù)合物，其特征在于，所述復(fù)合物在約5.5的pH下形成。11.一種制造磷酸肽穩(wěn)定的無(wú)定形磷酸鈣(ACP)復(fù)合物的方法，包括下列步驟(i)獲得包括至少一種磷酸肽的溶液，以及(ii)混合包括鈣離子、磷酸根離子和氫氧根離子的溶液，同時(shí)保持pH約7.0或更低。12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，所述氫氧根離子用滴定法加入至磷酸肽溶液中以保持基本恒定的pH。13.根據(jù)權(quán)利要求11或12所述的方法，其特征在于，所述4丐和;粦酸根離子伴隨不斷的攪拌和以避免在所述磷酸肽溶液中形成磷酸4丐沉淀的速度用滴定法加入至所述磷酸肽溶液中。14.一種制造磷酸肽穩(wěn)定的無(wú)定形氟磷酸鈣(ACFP)復(fù)合物的方法，包括下列步驟(i)獲得包括至少一種磷酸肽的溶液，以及(ii)混合包括鈣離子、磷酸根離子和氫氧根離子的溶液，同時(shí)保持pH約7.0或更4氐。15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其特征在于，所述氬氧根離子用滴定法加入至磷酸肽溶液中以保持基本恒定的pH。16.根據(jù)權(quán)利要求14或15所述的方法，其特征在于，所述鉤和磷酸根離子伴隨不斷的攪拌并以避免在所述磷酸肽溶液中形成磷酸鉤沉淀的速度用滴定法加入至所述石粦酸肽溶液中。17.根據(jù)權(quán)利要求11至16中任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，所述磷酸肽包括所述序列A-B-C-D-E,其中A,B，C,D和E各自為石粦酸絲氨酸，磷酸蘇氨酸，磷酸酪氨酸，磷酸組氨酸，谷氨酸或天冬氨酸。18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其特征在于，所述磷酸肽包括序列Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)-Glu-Glu,其中Ser(P)為磷酸絲氨酸及Glu為谷氨酸。19.根據(jù)權(quán)利要求11至18中任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，所述磷酸肽為酪蛋白磷酸肽。20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其特征在于，所述酪蛋白磷酸肽通過(guò)酶或化學(xué)水解從全長(zhǎng)度酪蛋白中分離。21.—種治療或預(yù)防齲齒的方法，包括向需要這種治療的患者的牙齒或齒齦施用根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一權(quán)利要求所述的復(fù)合物。22.—種再礦化牙齒釉質(zhì)的方法，包括向需要這種治療的患者的牙齒或齒齦施用根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一權(quán)利要求所述的復(fù)合物。23.—種治療或預(yù)防牙結(jié)石的方法，包括向需要這種治療的患者的牙齒或齒齦施用根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一權(quán)利要求所述的復(fù)合物。24.—種治療或預(yù)防牙過(guò)敏的方法，包括向需要這種治療的患者的牙齒或齒齦施用根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一權(quán)利要求所述的復(fù)合物。25.—種治療或預(yù)防牙侵蝕/腐蝕的方法，包括向需要這種治療的患者的牙齒或齒齦施用根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一權(quán)利要求所述的復(fù)合物。全文摘要本發(fā)明涉及一種磷酸肽穩(wěn)定的無(wú)定形磷酸鈣和/或無(wú)定形氟磷酸鈣復(fù)合物，其中所述復(fù)合物在低于7.0的pH下形成。還提供一種制造這種復(fù)合物的方法。所述復(fù)合物在牙科應(yīng)用中有效，尤其在牙科再礦化方面。文檔編號(hào)A61K38/08GK101098675SQ200580046537公開(kāi)日2008年1月2日申請(qǐng)日期2005年11月24日優(yōu)先權(quán)日2004年11月25日發(fā)明者埃里克·查爾斯·雷諾茲申請(qǐng)人:墨爾本大學(xué)