專利名稱：用于hcv治療的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物化學領(lǐng)域，特別是非免疫抑制性環(huán)孢素(cyclosporin)以及丙型肝炎感染的聯(lián)合治療。
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及非免疫抑制性環(huán)孢素的新用途。
環(huán)孢素包括一類結(jié)構(gòu)上獨特的環(huán)狀聚N-甲基化的十一肽，通常具有藥理學活性特別是免疫抑制活性或抗炎活性。最早分離的環(huán)孢素為天然存在的真菌代謝物環(huán)孢菌素(Ciclosporin)或者說環(huán)孢霉素(Cyclosporine)，也稱之為環(huán)孢素A。
已充分確定環(huán)孢素A通過干擾T細胞活化過程阻斷IL-2的轉(zhuǎn)錄起始而發(fā)揮作用。已表明環(huán)孢素A與命名為親環(huán)蛋白的17kD胞漿蛋白質(zhì)形成復合物，親環(huán)蛋白存在于許多細胞類型中，并已表明與參與蛋白質(zhì)折疊的肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶完全相同。
然而，發(fā)現(xiàn)環(huán)孢素A與親環(huán)蛋白的結(jié)合僅僅是免疫抑制活性的必要但非充分條件。環(huán)孢素A/親環(huán)蛋白復合物還能夠與屬于磷酸酶超家族的鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CN)締合。此結(jié)合消除了鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶的磷酸酶活性，導致轉(zhuǎn)錄因子NF-AT的沉默。對CN/NF-AT通路的抑制是環(huán)孢素A介導的免疫抑制的本質(zhì)機制。
已經(jīng)鑒定到與親環(huán)蛋白強結(jié)合但并非免疫抑制性的環(huán)孢素。若在混合淋巴細胞反應(MLR)中某環(huán)孢素具有至多環(huán)孢素A活性的5％、優(yōu)選至多2％的活性，則認為其是非免疫抑制性的?；旌狭馨图毎磻蒚.Meo描述于《免疫學方法》(“Immunological Methods”)，L.Lefkovits和B.Peris編輯，Academic Press，N.Y.第227-239頁(1979)中。將來自Balb/c小鼠(雌性，8～10周)的脾細胞(0.5×106)與來自CBA小鼠(雌性，8～10周)的0.5×106輻照(2000拉德)或絲裂霉素C處理的脾細胞共孵育5天。輻照的同種異體細胞誘導Balb/c脾細胞的增殖反應，這可以通過摻入到DNA中的標記前體測量。刺激細胞由于經(jīng)過輻照(或絲裂霉素C處理)，它們對Balb/c細胞不發(fā)生增殖反應，但保留其抗原性。將測得的測試化合物的IC50與平行實驗中環(huán)孢素A的IC50相比較。此外，非免疫抑制性環(huán)孢素缺乏抑制CN及下游NF-AT通路的能力。
EP 0 484 281 A1公開了非免疫抑制性環(huán)孢素在治療AIDS或AIDS相關(guān)紊亂中的用途。正如申請EP 2004/009804中所公開的那樣，還發(fā)現(xiàn)與親環(huán)蛋白結(jié)合的非免疫抑制性環(huán)孢素對丙型肝炎病毒(HCV)具有抑制作用。
附圖的簡短說明

圖1圖解說明了利用本發(fā)明的環(huán)孢素(NIM811)與(A)α干擾素、(B)BILN2061、(C)LCQ971或(D)NM107聯(lián)合處理的效果。
圖2圖解說明了用NIM811單獨處理或與(A)α干擾素或(B)BILN2061聯(lián)合處理后細胞復制減少的比較。
圖3圖解說明了NIM811與BILN2061聯(lián)合對病毒RNA的抑制作用。
發(fā)明概述已經(jīng)發(fā)現(xiàn)非免疫抑制性環(huán)孢素提供對抗黃病毒科特別是丙型肝炎病毒的卓越效果?；诖税l(fā)現(xiàn)，我們提供了治療丙型肝炎感染的組合物、方法和用途，包括施用有效量的非免疫抑制性環(huán)孢素，聯(lián)合一種或多種助劑、其鹽、酯、前藥或衍生物。
發(fā)明詳述所有文中引述的公開內(nèi)容以其整體并入作為參考。
現(xiàn)已令人驚訝地發(fā)現(xiàn)與親環(huán)蛋白結(jié)合的非免疫抑制性環(huán)孢素對于丙型肝炎病毒(HCV)具有抑制效果，并且當與其他抗病毒藥劑聯(lián)用時，這樣的組合尤其有效。
HCV已被鑒定為非A非B型肝炎的主要致因，HCV的持續(xù)感染已被認為與肝病如慢性肝炎、肝硬化或肝細胞癌密切相關(guān)。這些肝病的發(fā)展是主要的公眾健康問題。有效的抗HCV療法局限于使用α干擾素或α干擾素與利巴韋林聯(lián)合的療法。然而，由于用這些已知藥物治療的HCV患者中大約有半數(shù)患者的病毒并不能消除，仍然急需替代的抗HCV治療。相應地，本發(fā)明提供了非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素與其他治療劑聯(lián)合使用在預防或治療丙型肝炎病毒或HCV誘導的紊亂中的用途。例如，丙型肝炎病毒或HCV誘導的紊亂有慢性肝炎、肝硬化或肝癌如肝細胞癌。非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素及其與其他治療劑的聯(lián)合也可用于預防性治療，例如HCV感染母親所產(chǎn)新生兒、接觸此病毒的衛(wèi)生保健工作者或移植受體如肝移植受體的預防性治療，以消除移植后可能復發(fā)的HCV感染。
如果在由Quesniaux于Eur.J.Immunol.1987 171359-1365中描述的競爭性ELISA試驗中，某環(huán)孢素與人重組親環(huán)蛋白的結(jié)合至少為環(huán)孢素A的五分之一，則認為此環(huán)孢素與親環(huán)蛋白結(jié)合。在此試驗中，在親環(huán)蛋白與包被的BSA-環(huán)孢素A孵育期間加入待測環(huán)孢素，并計算實現(xiàn)無競爭劑對照反應的50％抑制時所需的濃度(IC50)。結(jié)果表達為結(jié)合率(BR)，即測試化合物IC50與同步試驗中環(huán)孢素A本身IC50之比的以10為底的對數(shù)。從而1.0的BR表明測試化合物與人親環(huán)蛋白的結(jié)合比環(huán)孢素A低10倍，而負值表明比環(huán)孢素A更強的結(jié)合。具有抗HCV活性的環(huán)孢素BR低于0.7，如等于或低于0。
例如，非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素的實例包括式I的化合物
其中，W為MeBmt、二氫-MeBmt或8’-羥基-MeBmt；X為αAbu、Val、Thr、Nva或O-甲基蘇氨酸(MeOThr)；R為Sar、(D)-MeSer、(D)-MeAla或(D)-MeSer(O乙酰基)；Y為MeLeu、γ-羥基-MeLeu、MeIle、MeVal、MeThr、MeAla、MeaIle或MeaThr；N-乙基Val、N-乙基Ile、N-乙基Thr、N-乙基Phe、N-乙基Tyr或N-乙基Thr(O乙?；?；Z為Val、Leu、MeVal或MeLeu；且Q為MeLeu、γ-羥基-MeLeu或MeAla。
基團W、X、Y、Z、Q和R獨立地具有如下優(yōu)選的意義W優(yōu)選為W’，其中W’為MeBmt或二氫-MeBmt；X優(yōu)選為X’，其中X’為αAbu或Nva，更優(yōu)選為X”，其中X”為αAbu；R優(yōu)選為R’，其中R’為Sar；Y優(yōu)選為Y’，其中Y’為γ-羥基-MeLeu、MeVal、MeThr、MeaIle、N-乙基Ile或N-乙基Val；Z優(yōu)選為Z’，其中Z’為Val或MeVal；且Q優(yōu)選為Q’，其中Q’為MeLeu；優(yōu)選的一組式I的化合物為其中W為W’，X為X’，Y為Y’，Z為Z’、Q為Q’而R為R’。
例如，優(yōu)選的式I的化合物的實例有a)[二氫-MeBmt]1-[γ-羥基-MeLeu]4-環(huán)孢菌素；BR*＝0.1；IR＜1％b)[MeVal]4-環(huán)孢菌素；BR＝0.1；IR＜1％c)[MeIle]4-環(huán)孢菌素；BR＝-0.2；IR＜1％d)[MeThr]4-環(huán)孢菌素；e)[γ-羥基-MeLeu]4-環(huán)孢菌素；BR＝0.4；IR＜1％f)[乙基-Ile]4-環(huán)孢菌素；BR＝0.1；IR＜2％g)[乙基-Val]4-環(huán)孢菌素；BR＝0；IR＜2％
h)[Nva]2-[γ-羥基-MeLeu]4-環(huán)孢菌素；i)[γ-羥基-MeLeu]4-[γ-羥基-MeLeu]6-環(huán)孢菌素；j)[MeVal]5-環(huán)孢菌素；BR＝0.4；IR＝5.3％k)[MeOThr]2-[(D)MeAla]3-[MeVal]5-環(huán)孢菌素；j)[8’-羥基-MeBmt]1-環(huán)孢菌素；BR＝0.35；IR＝1.8％k)[MeAla]6-環(huán)孢菌素；BR＝-0.4；IR＝3.2l)[γ-羥基-MeLeu]9-環(huán)孢菌素；BR＝0.15；IR＝2.9IR＝免疫抑制率，表達為相對于環(huán)孢素A的活性百分比。
非免疫抑制性環(huán)孢素的更多實例為WO 98/28330、WO 98/28329和WO 98/28328中所公開的化合物(其內(nèi)容在此并入作為參考)，例如式II的化合物或其可藥用鹽 其中，Wa為 其中Ra為式Ic或Id的殘基-CH2-CH＝CH-CH2-R4Ic-CH2-SH-R′4Id或其中R4為C1-4烷基硫基、氨基C1-4烷基硫基、C1-4烷基氨基C1-4烷基硫基、二C1-4烷基氨基-C1-4烷基硫基、嘧啶基硫基、噻唑基硫基、N-C1-4烷基咪唑基硫基、羥基C1-4烷基苯基硫基、羥基C1-4烷基苯氧基、硝基苯基氨基或2-氧代嘧啶-1-基，而R’4為C1-4烷基，
Xa為Abu；Ra為-NMe-CH(Rb)-CO-，其中Rb為H或-S-Alk-R0，其中Alk-R0為甲基；或者Alk為直鏈或支鏈的C2-6亞烷基或C3-6環(huán)亞烷基而R0為H；OH；COOH；C2-5烷氧基-羰基；NR1R2，其中R1和R2彼此獨立地選自H、C1-4烷基、C2-4鏈烯基，C3-6環(huán)烷基和苯基(分別任選地由鹵素、C1-4烷氧基、C2-5烷氧基羰基、氨基、C1-4烷基氨基和/或二C1-4烷基-氨基取代)以及含有5或6個環(huán)原子及1到3個雜原子的飽和或不飽和的苯甲基和雜環(huán)基，或者其中R1和R2與它們所連的氮原子一起形成4到6元的雜環(huán)，所述雜環(huán)可以含有選自氮、氧或硫的其它雜原子并任選地由C1-4烷基、苯基或苯甲基取代；或者R1和R2彼此獨立地為式Ib的原子團 其中R1和R2如上定義，R3為H或C1-4烷基，且n為從2到4的整數(shù)；Ya為MeLeu或γ-羥基-MeLeu；Za為Val；且Qa為MeLeu，條件是當Ya為MeLeu時，Rb不為H。
在式II中，當R1和/或R2為雜環(huán)殘基時，其可以是吡啶基、四氫吡啶基、哌啶基、咪唑基、唑基或噻唑基。當R1和R2與它們所連的氮原子一起形成雜環(huán)殘基時，作為舉例說明，雜環(huán)殘基可以選自氮雜環(huán)丁烷基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基-哌嗪基、N-苯基哌嗪基、N-苯甲基哌嗪基、吡啶基、咪唑基、嗎啉代、硫代嗎啉代、四氫吡啶基、甲基四氫吡啶基(例如4-甲基-四氫吡啶基)或苯基四氫吡啶基(例如4-苯基四氫吡啶基)。
式I、Ia或II的化合物可以通過多種方法獲得，可以歸類為1)發(fā)酵
2)生物轉(zhuǎn)化3)衍生4)半合成5)全合成如在例如EP 0 484 281 A1、WO 00/01715、WO 98/28330、WO 98/28329或WO 98/28328中所公開的那樣，其內(nèi)容在此并入作為參考。
在一系列更多具體或可選的實施方案中，本發(fā)明還提供了1.1在需要的受試者中預防或治療丙型肝炎感染或HCV誘導的紊亂的方法，包括向所述受試者施用治療有效量的非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素(如式I的化合物)聯(lián)合一種或多種助劑的組合。
1.2抑制基質(zhì)中HCV復制的方法，包括向此基質(zhì)中施加有效量的非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素(如式I的化合物)聯(lián)合一種或多種助劑。
1.3在需要的患者中抑制HCV復制的方法，包括向此受試者施用治療有效量的非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素(如式I的化合物)聯(lián)合一種或多種助劑。
1.4在需要的移植受體中預防HCV感染復發(fā)的方法，包括向所述受體施用治療有效量的非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素(如式I的化合物)聯(lián)合一種或多種助劑。
2.非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素(如式I的化合物)與一種或多種助劑的組合在制備用于上述任一方法的藥物組合物中的用途。
3.用于上述任一方法的藥物組合物，包括非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素(如式I的化合物)與一種或多種助劑，以及一種或多種可藥用稀釋劑或載體。
另一方面，可用于聯(lián)合治療或替代治療的適宜助劑包括但不限于(1)干擾素或干擾素綴合物如(a)Intron-A，α-2b干擾素(Schering Corporation，Kenilworth，NJ)，(b)PEG-Intron，PEG化的α-2b干擾素(Schering Corporation，Kenilworth，NJ)，
(c)Roferon，重組α-2a干擾素(Hoffmann-La Roche，Nutley，NJ)，(d)Pegasys，PEG化的α-2a干擾素(Hoffmann-La Roche，Nutley，NJ)，(e)Berefor，可利用的α2干擾素(Boehringer IngelheimPharmaceutical，Inc.，Ridgefield，CT)，(f)Sumiferon，純天然α干擾素混合物(Sumitomo，Japan)，(g)Wellferon，淋巴母細胞樣αn1干擾素(GlaxoSmithKline)，(h)Infergen，共有序列α干擾素(InterMune Pharmaceuticals，Inc.，Brisbane，CA及Amgen，Inc.，Newbury Park，CA)，(i)Alferon，天然α干擾素混合物(Interferon Sciences以及PurdueFrederick Co.，CT)，(j)Viraferon；(k)綴合的干擾素，包括例如與人白蛋白綴合的Albuferon(HumanGenome Science)。與水溶性聚合物或聚氧乙烯均聚物如聚乙二醇(PEG)或聚丙二醇、聚氧乙烯多元醇、它們的共聚物以及嵌段共聚物綴合的干擾素。除了基于聚氧乙烯的聚合物之外，還可以使用有效的非抗原性材料如葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酰胺、聚乙烯醇、基于糖類的聚合物等等。干擾素-聚合物綴合物在US 4766106、US 4917888、EPA 0 236 987、EPA 0510 356和WO 95/13090中有描述。由于聚合修飾足以降低抗原反應，外來干擾素不需要完全是自體的。用于制備聚合物綴合物的干擾素可以由哺乳動物提取物制備，如人、反芻動物或牛干擾素，或者可以重組生產(chǎn)。
其他形式的干擾素包括β、γ、τ和ω干擾素，如Serono公司的Rebif(β1a干擾素)、Viragen公司的Omniferon(天然干擾素)或BoehringerIngelheim公司的ω干擾素；口服干擾素如Amarillo Biosciences公司的口服α干擾素；另一方面，其他的干擾素實例包括PEG化的α干擾素，例如PEG化的α-2a干擾素、PEG化的α-2b干擾素、PEG化的共有序列干擾素或PEG化的純α干擾素產(chǎn)品。PEG化的α-2a干擾素在歐洲專利593,868(在此整體并入作為參考)中有描述，并可例如以商品名PEGASYS(Hoffmann-LaRoche)商購獲得。PEG化的α-2b干擾素在例如歐洲專利975,369(在此整體并入作為參考)中有描述，并可例如以商品名PEG-INTRON A(Schering Plough)商購獲得。PEG化的共有序列干擾素在中WO 96/11953(在此整體并入作為參考)有描述。
(2)抗病毒劑抗病毒劑可以是有效抑制病毒在哺乳動物中形成和/或復制的化合物或生物制品。這包括干擾病毒在哺乳動物中形成和/或復制所必需的宿主或病毒機制的物質(zhì)，如來自Valeant Pharmaceuticals，Inc.，Costa Mesa，CA的利巴韋林(1-β-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三氮唑-3-羧酰胺)、來自Schering-Plough Corporation，Kenilworth，NJ的Rebetol以及來自Hoffmann-La Roche，Nutley，NJ的Copegus，開發(fā)中的利巴韋林類似物如Valeant公司的左旋韋林(Levovirin)和Viramidine(利巴韋林前藥)，以及單磷酸咪唑立賓(Mizoribine Monophosphate)；(3)蛋白酶抑制劑HCV NS3-4A絲氨酸蛋白酶抑制劑如基于底物的蛋白酶抑制劑(Attwood等人，Antiviral peptide derivatives，PCT WO98/22496，1998；Attwood等人，Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1999，10，259-273；Attwood等人，Preparation and use of amino acid derivatives as anti-viralagents，German Patent Pub.DE 19914474；Tung等人Inhibitors of serineproteases，particularly hepatitis C virus NS3 protease；PCT WO 98/17679)包括α酮酰胺和肼基脲(hydrazinoureas)，以及末端為親電子試劑如硼酸或膦酸的抑制劑(Llinas-Brunet等人Hepatitis C inhibitor peptide analogues，PCT WO99/07734)；用于治療HCV的蛋白酶抑制劑在美國專利中有公開，例如授予Spruce等人的美國專利No.6,004,933公開了抑制HCV內(nèi)肽酶2的一類半胱氨酸蛋白酶抑制劑；授予Zhang等人的美國專利No.5,990,276公開了丙型肝炎病毒NS3蛋白酶的合成抑制劑；授予Reyes等人的美國專利No.5,538,865；作為HCV NS3絲氨酸蛋白酶抑制劑的肽在Corvas International，Inc.的WO02/008251以及Schering Corporation的WO02/08187和WO02/008256中公開；HCV三肽抑制劑在授予Boehringer Ingelheim的美國專利No.6,534,523、6,410,531和6,420,380以及Bristol Myers Squibb的WO02/060926中公開(在此以其整體并入作為參考)；作為HCV NS3絲氨酸蛋白酶抑制劑的二芳基肽在Schering Corporation的WO02/48172中公開；作為HCV NS3絲氨酸蛋白酶抑制劑的咪唑啉酮(imidazoleidinone)在ScheringCorporation的WO02/18198和Bristol Myers Squibb的WO02/48157中公開(在此以其整體并入作為參考)；Vertex Pharmaceuticals的WO98/17679和Bristol Myers Squibb的WO02/48116也公開了HCV蛋白酶抑制劑(在此以其整體并入作為參考)。
(4)非底物為基礎(chǔ)的NS3蛋白酶抑制劑如2，4，6-三羥基-3-硝基-苯甲酰胺衍生物(Sudo K.等人，Biochemiscal and Biophysical ResearchCommunications，1997，238 643-647；Sudo K.等人Antiviral Chemistry andChemotherapy，1998，9，186)，包括RD3-4082和RD3-4078；(5)從鏈霉菌發(fā)酵培養(yǎng)液中分離的Sch 68631在SDS-PAGE和放射自顯影測定中具有抗蛋白酶的菲醌活性(Chu M.等人，Tetrahedron Letters，1996，37，7229-7232)，(Chu M等人，Tetrahedron Letters 377229-7232，1996)；分離自真菌Penicillium grieofulvum的Sch 351633(Chu M.等人，Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 91949-1952)；基于高分子水蛭抑制劑(eglin c.)設計的選擇性抑制劑，eglin c.從水蛭中分離，并為若干絲氨酸蛋白酶如灰色鏈霉菌(S.griseus)蛋白酶A和B、-胰凝乳蛋白酶、胃促胰酶(chymase)及枯草桿菌蛋白酶的強抑制劑(Qasim M.A.等人，Biochemistry 361598-1607，1997)。
(6)Kakiuchi N.等人J.FEBS Letters 421，217-220、Takeshita N.等人Analytical Biochemistry，1997，247，242-246中所鑒定的噻唑烷和苯甲酰苯胺。噻唑烷衍生物在反相HPLC測定中顯示出與NS3/4A融合蛋白質(zhì)和NS5A/5B底物相關(guān)的抑制(Sudo K.等人，Antiviral Research，1996，32，9-18)。特別地為具有為長烷基鏈所取代的融合肉桂?；糠值幕衔颮D-16250，RD4 6205和RD4 6193。
(7)HCV NS3-4A絲氨酸蛋白酶抑制劑包括Boehringer Ingelheim生產(chǎn)的BILN 2061，Vertex生產(chǎn)的VX-950，Schering-Plough生產(chǎn)的SCH-6、SCH-7和SCH-351633，以及由GlaxoSmithKline、Bristol Myers Squibb、Abbot、Roche、Merck、Pfizer和Gilead研發(fā)的其他臨床前以及臨床HCV蛋白酶抑制劑；(8)核苷類似物Idenix生產(chǎn)的替比夫定(Telbivudine)(US6444652、US6596700和WO0196353)。
HCV NS5B RNA依賴性RNA聚合酶的核苷或非核苷抑制劑，如在WO 2004/002422中公開的2′-C-甲基-3′-O-L-纈氨酸酯呋喃核苷胞嘧啶(NM283，Idenix)。
由Idenix Pharmaceuticals在國際公開號WO 01/90121和WO01/92282(在此以其整體并入作為參考)中公開的支鏈核苷用于治療黃病毒屬(包括HCV)和瘟病毒屬。具體地，所述Idenix出版物中公開了治療人及其他宿主動物丙型肝炎感染(以及黃病毒屬和瘟病毒屬)的方法，包括施用有效量生物活性的1’、2’、3’或4’支鏈的B-D或B-L核苷或其可藥用鹽或前藥，單獨施用或者與其他抗病毒劑聯(lián)合施用，任選地在可藥用載體中施用。
其他專利申請中公開的用于治療丙型肝炎病毒的核苷類似物包括BioChem Pharma，Inc.(現(xiàn)Shire Biochem，Inc.)遞交的PCTCA00/01316(WO01/32153；2000年11月3日遞交)和PCT/CA01/00197(WO01/60315；2001年2月19日遞交)；Merck & Co.，Inc.遞交的PCT/US02/01531(WO02/057425；2002年1月18日遞交)和PCT/US02/03086(WO02/057287；2002年1月18日遞交)；Roche遞交的PCT/EP01/09633(WO02/18404；2001年8月21日公開)以及Pharmasset，Ltd.的PCT公開號WO01/79246(2001年4月13日遞交)、WO02/32920(2001年10月18日遞交)和WO02/48165(在此將其公開內(nèi)容整體并入作為參考)。
Emory University發(fā)明名稱為“2’-氟代核苷”的PCT公開號WO99/43691(在此以其整體并入作為參考)中公開的2’-氟代核苷。
由Eldrup等人(Oral Session V，Hepatitis C Virus，F(xiàn)laviviridae；16thInternational Conference on Antiviral Research(2003年4月27日，Savannah，GA))公開的2’-修飾核苷；Bhat等人(Oral Session V，Hepatitis C Virus，F(xiàn)laviviridae，2003(OralSession V，Hepatitis C Virus，F(xiàn)laviviridae；16thInternational conference onAntiviral Research(2003年4月27日，Savannah，Ga)；p A75)公開的核苷類似物和2’-修飾核苷；Olsen等人(Oral Session V，Hepatitis C Virus，F(xiàn)laviviridae；16thInternational Conference on Antiviral Research(2003年4月27日，Savannah，Ga)p A76)公開的2’-修飾核苷；臨床前化合物包括R803(Rigel)、JTK-003(Japan Tabacco)、HCV-086(ViroPharma/Wyeth)、R-1479(Roche)；(9)核苷酸聚合酶抑制劑和膠霉毒素(Ferrari R.等人Journal ofVirology，1999，73，1649-1654)以及天然產(chǎn)物淺藍菌素(Lohmann V.等人Virology，1998，249，108-118)；(10)HCV NS3解旋酶抑制劑，如ViroPhama生產(chǎn)的VP_50406以及來自Vertex的化合物，其他解旋酶抑制劑在中美國專利No.5,633,388和PCT WO 97/36554公開；(11)針對HCV基因組或病毒復制所需的任何細胞組分的反義分子。
與病毒5′非編碼區(qū)(NCR)(Alt M.等人，Hepatology，1995，22，707-717)、或者含有NCR 3′端的核苷酸326-348以及位于HCV RNA核心編碼區(qū)的核苷酸371-388(Alt M.等人，Archives of Virology，1997，142，589-599；Galderisi U.等人，Journal of Cellular Physiology，199，181，251-257)中的序列鏈互補的寡聚硫代磷酸脫氧核苷酸(S-ODN)；例如Isis Pharm/Elan生產(chǎn)的ISIS 14803，Hybridon、AVI bioPharma和Chugai生產(chǎn)的反義寡核苷酸，AVI-4065(AVI BioPharma)，提高治療效力的與HCV基因組任何部分互補的反義序列；(12)IRES依賴性翻譯的抑制劑(Ikeda N等人，Agent for theprevention and treatment of hepatitis C，Japanese Patent Pub.JP-08268890；Kai Y等人Prevention and treatment of viral diseases，Japanese Patent Pub.JP-10101591)；例如Isis Pharm/Elan生產(chǎn)的ISIS 14803，PTC Therapeutics、Anadys、Immusol、RiboTargets和SomaGenics生產(chǎn)的IRES抑制劑；(13)核酶，如核酸酶抗性核酶(Maccjak，D.J.等人，Hepatology 1999，30，abstract 995)，和授予Barber等人的美國專利No.6,043,077以及授予Draper等人的美國專利No.5,869,253和5,610,054(在此以其整體并入作為參考)中公開的那些核酶。例如，RPI和Sirna Therapeutics Inc.生產(chǎn)的HEPTAZYME；(14)HCV生活周期包括病毒進入、裝配和成熟中其他靶標的抑制劑，如Celgosivir(MBI 3253)，一種由Migenix生產(chǎn)的糖蛋白加工抑制劑；Trimeris生產(chǎn)的融合抑制劑；Achillion生產(chǎn)的ACH-0137171；(15)免疫調(diào)節(jié)劑受體激動劑如toll樣受體(TLR)激動劑，包括Anadys生產(chǎn)的ANA245、ANA971、ANA975(US 5041426，4880784)；CpG-10101，一種TLR-9激動劑(Coley Pharmaceuticals)；IMPDH抑制劑，霉酚酸、其鹽及前藥，霉酚酸鈉或霉酚酸酯(Merimebodib)(VX-497，Vertex生產(chǎn))；胸腺肽α-1(日達仙(Zadaxin)或其組合，SciClone生產(chǎn))；SCV-07(SciClone)，Belerofon(由Nautilus生產(chǎn)的改良IFN-α)；NABI生產(chǎn)的CIVACIR(丙型肝炎免疫球蛋白)；或S1P受體激動劑，如FTY720或其類似物，任選地被磷酸化，例如如在EP627406A1、EP778263A1、EP1002792A1、WO02/18395、WO02/76995、WO02/06268、JP2002316985、WO03/29184、WO03/29205、WO03/62252和WO03/62248中所公開的那樣，在此將其公開內(nèi)容以其整體并入作為參考；3M Pharmaceuticals生產(chǎn)的雷西莫特(Resiquimod)[VML600]，一種咪喹莫特(imiquimod)類似物，為α干擾素及其他細胞因子的強誘導劑；(16)抗纖維化藥物，如N-苯基-2-嘧啶-胺衍生物，伊馬替尼(imatinib)(Gleevac)，Indevus生產(chǎn)的IP-501，以及來自InterMune的干擾素γ1b，Intermune、Marnac、Shionogi生產(chǎn)的Pirfenidone(MultipleTGFβ激動劑，F(xiàn)GF拮抗劑，PDGF拮抗劑)；(17)Intercell(治療性肽疫苗IC41 HCV)、Epimmune/Genecor、Merix公司的治療性疫苗，Tripep(Chiron-VacC)，Avant公司的免疫療法(Therapore)，CellExSys公司的T細胞療法，STL公司的單克隆抗體XTL-002，Anadys公司的ANA 246和ANA 246，Innogenetics公司針對E2的治療性疫苗，XTL Bio公司針對E2包膜蛋白的mAb，GI-5005(GlobeImmune Inc)，InnoVac-C(WO 9967285，Innogenetics)，IC-41(Intercell)，干擾素α-n3(Interferon Sciences)，Engerix B(SmithKlineBeecham)；(18)其他化合物，包括Ursodiol(EP00269516，Axcan Pharma)，HE-2000(一種DHEA類似物，Colthurst Ltd)，EHC-18(一種免疫調(diào)節(jié)劑，Enzo biochem)，組胺二鹽酸鹽(一種H2激動劑，WO09104037，Estero-Anstalt)，1-氨基-烷基環(huán)己烷(美國專利No.6,034,134)，烷基化脂類(美國專利No.5,922,757)，維生素E及其他抗氧化劑(美國專利No.5,922,757)，膽汁酸(美國專利No.5,846,99964)，N-(磷酸乙酰)-L-天冬氨酸)美國專利No.5,830,905)，苯二甲酰胺(美國專利No.5,633,388)，多聚腺苷酸衍生物(美國專利No.5,496,546)，2’3’-雙脫氧肌苷(美國專利No.5,026,687)，苯并咪唑(美國專利No.5,891,874)，植物提取物(美國專利No.5,837,257、美國專利No.5,725,859和美國專利No.6,056,961)和哌啶類(美國專利No.5,830,905)；N-(磷酸乙酰)-L-天冬氨酸，苯二甲酰胺，多聚腺苷酸衍生物，糖基化抑制劑以及阻斷因病毒感染所致的細胞損傷的非特異性細胞保護劑；(19)目前處于臨床前或臨床開發(fā)中的用于治療HCV的任何其他化合物，包括白介素-10(Schering-Plough)，Endo Labs Solvay公司的AMANTADINE(Symmetrel)，Idun Pharma公司的胱冬酶(caspase)抑制劑IDN-6556，Chiron公司的HCV/MF59，Maxim公司的CEPLENE(組胺二鹽酸鹽)，Idun PHARM公司的IDN-6556，Tularik公司的T67，一種β微管蛋白抑制劑，F(xiàn)ujisawa Healthcare公司的FK788，IdB1016(Siliphos，口服水飛薊賓磷脂酰膽堿復合物(silybin-phosphatidyl cholinephytosome))，Immtech公司的Dication，Aethlon Medical公司的hemopurifier，United Therapeutics公司的UT 231B；Bayer公司的HepeX-C SM1，PPVO-Bay55-8800(綿羊副粘病毒(Parapoxvirus ovis))；Angion公司的Refanalin(HGF mimetic)，R803(Rigel)，JTK-003，JTK-002及JTK-109(均來自Japan Tobacco)，HCV-086(ViroPharma/Wyeth)，ISIS-14803(ISIS Pharmaceuticals)，GS-9132(Achillion Pharmaceuticals公司的一種聚合酶抑制劑)，HCV-793(Pharmasset和Roche)，R1626(Roche)。
本領(lǐng)域技術(shù)人員通過例如搜索因特網(wǎng)上的臨床試驗信息以及相應公司的新聞發(fā)布信息，能夠容易地鑒定臨床前開發(fā)中的化合物或藥物。
(20)提高聯(lián)合療法效力的化合物，包括抗葉酸制劑，5-氟嘧啶(包括5-氟尿嘧啶)，胞嘧啶類似物如β-L-1，3-二氧戊環(huán)胞嘧啶或β-L-1，3-二氧戊環(huán)5-氟胞嘧啶，抗代謝物(包括嘌呤抗代謝物，阿糖胞苷，fudarabine，氟尿嘧啶，6-巰基嘌呤，甲氨蝶呤和6-硫代鳥嘌呤)，羥基脲，有絲分裂抑制劑(包括CPT-11，鬼臼乙叉甙(VP-21)，紫杉醇以及長春花生物堿如長春新堿和長春花堿，烷化劑(包括但不限于白消安，苯丁酸氮芥，環(huán)磷酰胺，異環(huán)磷酰胺(ifofamide)，氮芥，美法侖和噻替派)，非經(jīng)典烷化劑，含鉑化合物，博來霉素，抗腫瘤抗生素，蒽環(huán)類抗生素如阿霉素和柔紅霉素，蒽二酮，拓撲異構(gòu)酶II抑制劑，激素類藥物(包括但不限于糖皮質(zhì)激素(地塞米松，強的松和甲基強的松龍)，雄激素如氟羚甲基睪丸素和甲睪酮，雌激素如己烯雌酚，抗雌激素如它莫西芬，LHRH類似物如亮丙瑞林，抗雄激素如氟他胺，氨魯米特，醋酸甲地孕酮以及甲羥孕酮)，門冬酰胺酶，卡莫司汀，洛莫司汀，六甲嘧胺，達卡巴嗪，米托坦，鏈脲菌素，順鉑，卡鉑，左旋咪唑以及甲酰四氫葉酸。本發(fā)明的化合物也可以與酶治療劑和免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑如白介素、腫瘤壞死因子、巨噬細胞集落刺激因子及集落刺激因子聯(lián)合使用。
非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素(下文稱之為“本發(fā)明的環(huán)孢素”)在治療上文所列疾病和病癥方面的實用性可在標準動物或臨床測試中例如根據(jù)上文所述的方法證明。
實施例實施例1體外測定細胞培養(yǎng)HCV復制子細胞系克隆A獲自Apath，LLC。細胞在Dulbecco’s改良Eagle’s培養(yǎng)基(DMEM，Gibco)中培養(yǎng)，含10％熱滅活的胎牛血清(FBS，Gibco)、2mM L-谷氨酸、1×非必需氨基酸(Gibco)以及1mg/ml G418(Invitrogen，Carlsbad，CA)。
HCV復制子細胞系Huh-Luc/neo-ET獲自ReBlikon GmbH。細胞在Dulbecco’s改良Eagle’s培養(yǎng)基(DMEM，Gibco)中培養(yǎng)，含10％熱滅活的胎牛血清(FBS，Gibco)、2mM L-谷氨酸、1×非必需氨基酸(Gibco)以及0.25mg/ml G418(Invitrogen，Carlsbad，CA)。
基于QRR-PCR的HCV復制子測定為測定化合物的抗病毒效果，在補充了2％FBS和0.5％DMSO的DMEM中用系列稀釋的化合物對HCV復制子細胞克隆A進行48h處理，然后提取胞內(nèi)總RNA，并使用HCV特異性引物(5’-TCT TCA CGC AGA AAG CGT CTA-3’和5’-CTGGCA ATT CCG GTG TAC T-3’(Seq Id No.1)以及探針(5’-6-FAM-TCCTGG AGG CTG CAC GAC ACT CAT A-TAMRA-3’)(Seq Id No.2)通過實時定量RT-PCR(Taqman)測定HCV RNA的水平。對于每種處理，相對于Quant-iT測定(Molecular Probe)確定的提取的總RNA量將HCV RNA的量標準化。每個數(shù)據(jù)點代表細胞培養(yǎng)物中六份重復樣品的平均值。IC50為復制子細胞中HCV RNA水平下降50％時的化合物濃度。為監(jiān)控化合物的細胞毒性效應，利用基于四氮唑化合物(MTS)的測定(CellTiter 96AQueous單溶液細胞增殖分析，Promega，Madison，WI)確定化合物處理48h后復制子細胞的存活力。CC50為細胞存活力下降50％時的化合物濃度。
基于熒光素酶的HCV復制子測定在HCV復制子細胞系Huh-Luc/neo-ET中，熒光素酶的表達處于HCV RNA復制和翻譯的控制之下，所以抗病毒活性可通過測量細胞中熒光素酶活性的下降來確定。在補充了10％FBS和0.5％DMSO的DMEM中用系列稀釋的化合物對HCV復制子細胞(Huh-Luc/neo-ET)進行48h處理。然后利用BrightGlo試劑(Promega)和LmaxII板讀數(shù)器(Molecular Probe)確定熒光素酶活性。利用上述基于四氮唑化合物(MTS)的測定評價化合物的細胞毒性。
實施例2聯(lián)合分析利用由Prichard，M.N.和Shipman，C，1999，Antivir.Res.14181-205研發(fā)的三維分析法——Bliss獨立模型來分析藥物-藥物聯(lián)合的效應。在這種模型中，利用如下方程式根據(jù)單個化合物的劑量應答曲線計算理論累加效應Z＝X+Y(1-X)，其中X和Y分別代表藥物1或藥物2單獨產(chǎn)生的抑制作用，而Z代表藥物1和藥物2聯(lián)合產(chǎn)生的效應。從試劑的實驗曲面中減去理論累加曲面，如果聯(lián)合僅僅是累加效應，則得到的曲面將顯示為0％抑制作用的水平面。利用實驗劑量應答曲面的95％置信區(qū)間對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學評價。
聯(lián)合治療效應的分析利用9天病毒RNA減少測定進行研究。在補充了10％FBS和0.2％DMSO的DMEM中用化合物對HCV復制子細胞克隆A進行3天、6天或9天的處理，然后提取胞內(nèi)總RNA，并利用上述的HCV特異性引物和探針通過實時定量RT-PCR(Taqman)確定HCV RNA的水平。對于每種處理，相對于Quant-iT測定(Molecular Probe)確定的提取的總RNA量將HCV RNA的量標準化。通過將化合物處理細胞中的HCV RNA水平與未處理細胞中的進行比較，計算HCV RNA的對數(shù)減少。
NIM811([MeIle]4-環(huán)孢素)與IFN-α聯(lián)合的效應利用上述測定系統(tǒng)和數(shù)學模型進行研究。HCV復制子細胞用多種濃度的NIM811和IFN-α單獨或聯(lián)合處理48h。如圖1A所示，聯(lián)合具有濃度依賴性方式的更強HCV抑制作用。重要的是，使用所測濃度的聯(lián)合沒有顯著增加的細胞毒性。
在另一實施方案中，BILN2061為HCV NS3-4A絲氨酸蛋白酶(Lamarre D，等人2003.Nature 426186)的特異性抑制劑。NIM811與BILN2061聯(lián)合的效應利用上述測定系統(tǒng)和數(shù)學模型進行研究。HCV復制子細胞用多種濃度的NIM811和BILN2061單獨或聯(lián)合處理48h。如圖1B所示，聯(lián)合具有濃度依賴性方式的更強HCV抑制作用。重要的是，使用所測濃度的聯(lián)合沒有顯著增加的細胞毒性。
LCQ971為HCV NS5B RNA依賴性RNA聚合酶的非核苷抑制劑(WO-00185172，WO-02098424，WO-03059356，Dhanak D.等人2002.J.Biol.Chem.27738322-7)。在所述復制子系統(tǒng)中研究了NIM811與LCQ971聯(lián)合的效應，其中細胞用多種濃度的NIM811和LCQ971單獨或聯(lián)合處理48 h。如圖1C所示，當兩種物質(zhì)聯(lián)合使用時具有濃度依賴性方式的更大的HCV抑制作用。利用Bliss獨立模型分析，確定所述聯(lián)合效應為協(xié)同效應。重要的是，使用所測濃度的聯(lián)合沒有顯著增加的細胞毒性。
核苷類似物NM107為HCV NS5B RNA依賴性RNA聚合酶的特異性抑制劑。NM107為NM283的活性代謝物，NM283為當前治療丙型肝炎的II期臨床試驗中的實驗藥物。也在所述復制子系統(tǒng)中研究了NIM811與NM107聯(lián)合的效應，其中細胞用多種濃度的NIM811和NM107單獨或聯(lián)合處理48h。如圖1D所示，當兩種物質(zhì)聯(lián)合使用時具有濃度依賴性方式的更大的HCV抑制作用。利用Bliss獨立模型分析，所述聯(lián)合效應為協(xié)同效應。重要的是，使用所測濃度的聯(lián)合沒有顯著增加的細胞毒性。
如圖2所示，在9天處理后，0.5μM NIM811導致復制子細胞中HCVRNA 1.2的對數(shù)減少，而1μM NIM811導致更大程度超過3的病毒RNA對數(shù)減少。重要的是，0.5μM NIM811和5U/mlIFN-α的聯(lián)合導致HCVRNA 2.7的對少減少，這顯著優(yōu)于單獨的0.5μM NIM811或單獨的5U/mlIFN-α(1.2對數(shù))。而且，0.5μM NIM811和20U/ml IFN-α的聯(lián)合導致HCVRNA 3.7的對少減少，這高于單獨使用的濃度高得多的IFN-α或NIM811。
類似地，如圖2B所示，與單獨使用的濃度高得多的BILN2061或NIM811相比，NIM811與HCV NS3-4A蛋白酶特異性抑制劑BILN2061的聯(lián)合導致更大程度的病毒RNA減少。
實施例3抗性頻率分析用多種濃度的NIM811和BILN2061在1mg/ml G418的存在下單獨或聯(lián)合處理HCV復制子細胞克隆A。在用BILN2061處理細胞2周后，開始形成抗性群落。處理3周后收集的細胞培養(yǎng)物如圖3所示。還顯示了抗性群落數(shù)。與每一種單獨的化合物相比，NIM811和BILN2061聯(lián)合的抗性比率急劇下降。此數(shù)據(jù)提示聯(lián)合療法將有助于抑制抗性的出現(xiàn)。
實施例4臨床試驗作為概念驗證研究，納入總計15～30名丙型肝炎病毒感染患者進行2～12周的研究。每名患者僅口服接受式I化合物如劑量為0.5至20mg/kg/天的[MeIle]4-環(huán)孢素，或聯(lián)合助劑如標準劑量的PEG化IFN-α。確定每名患者處理前和處理前后丙型肝炎病毒的血清水平。本發(fā)明的環(huán)孢素可以作為單獨的成分施用，或者可以聯(lián)合或與其他抗病毒劑交替施用，特別是具有抗HCV活性的物質(zhì)。在聯(lián)合療法中，有效劑量的兩種或多種物質(zhì)一起施用，而在交替或序慣間歇療法中，連續(xù)或序慣施用有效劑量的每一種物質(zhì)。一般而言，聯(lián)合療法通常比交替療法更優(yōu)選，因其誘導對病毒的多重同步脅迫。所給予的劑量將取決于藥物的吸收、失活及排泄速率以及其他因素。應當注意劑量值也將隨著待緩解病癥的嚴重程度而變。還應當理解，對于任何特定的受試者，具體的劑量方案和進度應當根據(jù)個體需要以及管理或指導組合物施用之人的專業(yè)判斷而隨著時間予以調(diào)整。在化合物施用時，通過聯(lián)合第二、以及或許第三抗病毒化合物或者與之交替施用，能夠延長、增強或恢復抗病毒感染藥物的功效，所述第二及第三抗病毒化合物在藥物抗性病毒中誘導與主要藥物所誘導的不同的基因突變?？蛇x地，可通過這樣的聯(lián)合或交替療法改變藥物的藥代動力學、生物分布或其他參數(shù)。
實施本發(fā)明方法所需的日劑量將視例如所采用的非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素、宿主、給藥方式、待治療病癥的嚴重程度而變。合適的[MeIle]4-環(huán)孢素患者日劑量為例如0.5至20mg/kg(p.o.或i.v.)的數(shù)量級，優(yōu)選25-75mg/天、75-200mg/天、更優(yōu)選200-400mg/天，連同一種或多種可藥用稀釋劑或載體一起。劑型中助劑的量可有很大變化，如0.00001至1000mg/kg活性成分。
所用助劑的日劑量將視例如所采用的化合物、宿主、給藥方式以及待治療病癥的嚴重程度而變。例如，PEG化干擾素可以腸胃外施用，每周一至三次，如每周一次，每周總劑量可在2至10million IU(百萬酶活單位)、或5至10million IU、或8至10million IU范圍內(nèi)變化。由于可以使用不同類別的助劑，其量可有很大變化，如每天.0001至5,000mg/kg。
當前治療丙型肝炎的護理標準為PEG化α干擾素與利巴偉林的聯(lián)合，其中推薦劑量包括1.5μg/kg/周PEG化α-2b干擾素或180μg/周PEG化α-2a干擾素，外加對基因型I患者而言的每日1,000至1,200mg利巴偉林，計48周，或者對于基因型2/3患者而言的每日800mg利巴偉林，計24周。
本發(fā)明的環(huán)孢素可以通過任何常規(guī)路徑施用，特別是腸內(nèi)施用，如口服，例如，以飲用溶液、片劑或膠囊的形式；或者腸胃外施用，例如，以注射液或混懸液的形式。優(yōu)選的藥物組合物可以式例如基于微乳劑的組合物，如UK 2,222,770 A中所述。
依照前述內(nèi)容，本發(fā)明還提供了其他方面4.藥物組合物，包括a)第一藥物非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素，例如式I的化合物；和b)助劑，如一種或多種如上文所述的助劑。
5.如上文所定義的方法，包括共同施用如相伴或序慣施用治療有效量的非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素，例如式I的化合物，和助劑，如一種或多種如上文所述的助劑。
如本文所用的術(shù)語“共同施用”或“聯(lián)合施用”意在涵蓋向單個患者施用所選的治療劑，并且旨在包括其中藥物不必要以同一路徑或者在同時施用的治療方案。固定組合液落在本發(fā)明的范圍內(nèi)。與僅施用其一種藥物活性成分的單一療法相比，本發(fā)明藥物組合的施用產(chǎn)生有益效果，例如協(xié)同或累加的治療效果。系統(tǒng)組合的實例為非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素與IFN-α的組合。4-環(huán)孢素(NIM811)為根據(jù)本發(fā)明可用的非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素的合適的一個實例。
權(quán)利要求
1.藥物組合物，包括a)第一藥物非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素和b)一種或多種助劑或其可藥用鹽或酯。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素為式I 其中，W為MeBmt、二氫-MeBmt或8’-羥基-MeBmt；X為αAbu、Val、Thr、Nva或O-甲基蘇氨酸(MeOThr)；R為Sar、(D)-MeSer、(D)-MeAla或(D)-MeSer(O乙?；?；Y為MeLeu、γ-羥基-MeLeu、MeIle、MeVal、MeThr、MeAla、MeaIle或MeaThr；N-乙基Val、N-乙基Ile、N-乙基Thr、N-乙基Phe、N-乙基Tyr或N-乙基Thr(O乙酰基)；Z為Val、Leu、MeVal或MeLeu；且Q為MeLeu、γ-羥基-MeLeu或MeAla。
3.權(quán)利要求1的組合物，其中助劑選自干擾素、干擾素綴合物、抗病毒劑、解旋酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、聚合酶抑制劑和核苷類似物。
4.權(quán)利要求1的組合物，其中助劑為HCV NS5B聚合酶抑制劑。
5.權(quán)利要求4的組合物，其中HCV NS5B聚合酶抑制劑為2’-C-甲基呋喃胞嘧啶或其前藥。
6.一種方法，包括共同施用治療有效量的非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素和一種或多種選自干擾素、干擾素綴合物、抗病毒劑、解旋酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、聚合酶抑制劑和核苷類似物的助劑。
7.權(quán)利要求6的方法，其中免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素為式I 其中，W為MeBmt、二氫-MeBmt或8’-羥基-MeBmt；X為αAbu、Val、Thr、Nva或O-甲基蘇氨酸(MeOThr)；R為Sar、(D)-MeSer、(D)-MeAla或(D)-MeSer(O乙酰基)；Y為MeLeu、γ-羥基-MeLeu、MeIle、MeVal、MeThr、MeAla、MeaIle或MeaThr；N-乙基Val、N-乙基Ile、N-乙基Thr、N-乙基Phe、N-乙基Tyr或N-乙基Thr(O乙酰基)；Z為Val、Leu、MeVal或MeLeu；且Q為MeLeu、γ-羥基-MeLeu或MeAla。
8.權(quán)利要求6的方法，其中助劑為干擾素或干擾素綴合物。
9.權(quán)利要求6的方法，其中助劑為HCV NS5B聚合酶抑制劑。
10.權(quán)利要求9的方法，其中HCV NS5B聚合酶抑制劑為2’-C-甲基呋喃胞嘧啶或其前藥。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物組合，包括a)第一藥物非免疫抑制性親環(huán)蛋白結(jié)合環(huán)孢素，例如式I的化合物；和b)助劑。
文檔編號A61P1/16GK101076350SQ200580042440
公開日2007年11月21日 申請日期2005年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月23日
發(fā)明者K·林, B·魏德曼 申請人:諾瓦提斯公司