專利名稱：用作丙型肝炎病毒ns3絲氨酸蛋白酶抑制劑的酰基磺酰胺化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的丙型肝炎病毒(“HCV”)蛋白酶抑制劑、含有一種或多種所述抑制劑的藥物組合物、制備所述抑制劑的方法以及應(yīng)用所述抑制劑治療丙型肝炎和相關(guān)疾病的方法。本發(fā)明還公開了作為HCV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶抑制劑的含有酰基磺酰胺P1′部分的新化合物。本申請要求2004年8月27日申請的美國臨時專利申請60/605,234的優(yōu)先權(quán)。
背景技術(shù)：
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)是一種(+)-有義單鏈RNA病毒，它是非甲非乙型肝炎(NANBH)、尤其是血液相關(guān)性NANBH(BB-NANBH)的主要病原體(參見國際專利申請公布號WO 89/04669和歐洲專利申請公布號EP 381 216)。NANBH既不同于其它類型的病毒誘導(dǎo)性肝疾病，例如甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丁型(δ)肝炎病毒(HDV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)和埃-巴二氏病毒(EBV)，也不同于其它形式的肝病，例如酒精中毒性肝病和原發(fā)性膽汁性肝硬化。
最近，已經(jīng)鑒定、克隆并表達了多肽加工和病毒復(fù)制所必需的HCV蛋白酶(參見例如美國專利5,712,145)。這種約3000個氨基酸的多蛋白從氨基端至羧基端包含核殼蛋白(C)、包膜蛋白(E1和E2)以及幾種非結(jié)構(gòu)蛋白(NS1、NS2、NS3、NS4a、NS5a和NS5b)。NS3為約68kda的蛋白，由HCV基因組的約1893個核苷酸編碼，并且具有2個不同的結(jié)構(gòu)域(a)由約200個N端氨基酸組成的絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域；(b)蛋白C端RNA依賴性ATP酶結(jié)構(gòu)域。由于蛋白質(zhì)序列、整體三維結(jié)構(gòu)和催化機制的相似性，NS3蛋白酶被認(rèn)為是胰凝乳蛋白酶家族的一個成員。其它類胰凝乳蛋白酶有彈性蛋白酶、因子Xa、凝血酶、胰蛋白酶、纖溶酶、尿激酶、tPA和PSA。HCV NS3絲氨酸蛋白酶與所述多肽(多蛋白)于NS3/NS4a、NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接點水解有關(guān)，因此在病毒復(fù)制期間負(fù)責(zé)生成四種病毒蛋白。這使HCV NS3絲氨酸蛋白酶成為抗病毒化學(xué)治療的富有吸引力的靶。本發(fā)明化合物可以抑制這類蛋白酶。它們也可以調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。
已經(jīng)確定約6kda多肽的NS4a蛋白是NS3絲氨酸蛋白酶活性的輔因子。NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶對NS3/NS4a接點的自動切割在分子內(nèi)(即順式)進行，而其它的切割位點加工在分子間(即反式)進行。
對HCV蛋白酶的天然切割位點的分析揭示，P1存在半胱氨酸，而P1’存在絲氨酸，并且這些殘基在NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接點中是嚴(yán)格保守的。NS3/NS4a接點包含P1的蘇氨酸和P1’的絲氨酸。NS3/NS4a上的Cys→Thr取代被認(rèn)為是該接點需要順式而不是反式加工的原因。參見例如Pizzi等(1994)Proc.Natl.Acad.Sci(USA)91888-892，F(xiàn)ailla等(1996)Folding & Design135-42。NS3/NS4a切割位點也比其它位點更耐受誘變。參見例如Kollykhalov等(1994)J.Virol.687525-7533。還發(fā)現(xiàn)，切割位點上游區(qū)的酸性殘基是有效切割所需要的。參見例如Komoda等(1994)J.Virol.687351-7357。
已報道的HCV蛋白酶抑制劑包括抗氧化劑(參見國際專利申請公布號WO 98/14181)、某些肽類和肽類似物(參見國際專利申請公布號WO 98/17679，Landro等(1997)Biochem.369340-9348，Ingallinella等(1998)Biochem.378906-8914，Llinàs-Brunet等(1998)Bioorg.Med.Chem.Lett.81713-1718)、基于70個氨基酸的多肽水蛭蛋白酶抑制劑c的抑制劑(Martin等(1998)Biochem.3711459-11468)、選自人胰腺分泌型胰蛋白酶抑制劑(hPSTI-C3)和微型抗體庫(minibodyrepertoire)(MBip)的抑制劑親和性(Dimasi等(1997)J.Virol.，717461-7469)、cVHE2(“camelized”可變區(qū)抗體片段)(Martin等(1997)Protein Eng.10607-614)和α1-抗胰凝乳蛋白酶(ACT)(Elzouki等)(1997)J.Hepat.2742-28)。最近公開了設(shè)計用來選擇性破壞丙型肝炎病毒RNA的核酶(參見Bio World Today9(217)4(1998年11月10日))。
另外，參見1998年4月30日公開的PCT公布號WO 98/17679(Vertex Pharmaceuticals Incorporated)；1998年5月28日公開的WO98/22496(F.Hoffmann-La Roche AG)；1999年2月18日公開的WO99/07734(Boehringer Ingelheim Canada Ltd.)。
HCV與肝硬化有關(guān)，而且誘發(fā)肝細(xì)胞癌。目前HCV感染者的預(yù)后很差。由于缺乏免疫力或者與HCV感染有關(guān)的豁免性(remission)，HCV感染比起其它形式的肝炎更難以治療。目前的資料表明，肝硬化診斷后四年的存活率低于50％。診斷為患有局灶性可切除性肝細(xì)胞癌的患者的五年存活率為10-30％，而局灶性不可切除性肝細(xì)胞癌的患者的五年存活率低于1％。
參見WO 00/59929(US 6,608,027，受讓人Boehringer Ingelheim(Canada)Ltd.；2000年10月12日公布)，它公開了下式的肽衍生物
參見A.Marchetti等，Synlett，S1，1000-1002(1999)，它介紹了HCV NS3蛋白酶抑制劑的雙環(huán)類似物的合成方法。其中公開了具有下式結(jié)構(gòu)的化合物 參見W.Han等，Bioorganic & Medicinal Chem.Lett，(2000)10，711-713，它介紹某些含烯丙基和乙基官能團的α-酮酰胺類、α-酮酯類和α-二酮類的制備方法。
參見WO 00/09558(受讓人Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日公布)，它公開了下式的肽衍生物 各個變量在該文獻中定義。下面是該系列化合物的一個實例
參見WO 00/09543(受讓人Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日公布)，它公開了下式的肽衍生物 各個變量在該文獻中定義。下面是該系列化合物的一個實例
參見WO 02/060926(Bristol-Myers Squibb Company；2002年8月8日公布)，它公開了下式的化合物 下面是WO 02/060926的一個示例性化合物
參見A.Johansson等，Bioorg.and Med.Chem.，3915-3922(2002)和A.Johansson等，Bioorg.and Med.Chem.，2551-2568(2003)，它們公開了某些?；酋０泛退碾?。
參見U.S.6,608,027(Boehringer Ingelheim，加拿大)，它公開了以下類型的NS3蛋白酶抑制劑 各個變量在該文獻中定義。
丙型肝炎的當(dāng)前療法包括干擾素-α(INFα)以及使用利巴韋林和干擾素的聯(lián)合療法。參見例如Beremguer等(1998)Proc.Assoc.Am.Physicians110(2)98-112。這些療法存在低持續(xù)應(yīng)答率并時常發(fā)生副作用的缺陷。參見例如Hoofnagle等(1997)N.Engl.J.Med.336347。目前，對于HCV感染沒有疫苗可用。
參見2001年10月11日公布的WO 01/74768(受讓人VertexPharmaceuticals Inc)，它公開了作為丙型肝炎病毒NS3-絲氨酸蛋白酶抑制劑的部分具有下列通式的化合物(R如該文獻中定義) 上述WO 01/74768公開的一個具體化合物具有下列結(jié)構(gòu)式 PCT公布號WO 01/77113、WO 01/081325、WO 02/08198、WO02/08256、WO 02/08187、WO 02/08244、WO 02/48172、WO 02/08251以及2002年1月18日申請的等待批準(zhǔn)的美國專利申請10/052,386公開了各種類型的作為丙型肝炎病毒NS-3絲氨酸蛋白酶抑制劑的肽和/或其它化合物。這些申請公開的內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
對于HCV感染需要新的治療方法。需要可用于治療、預(yù)防或改善丙型肝炎的一種或多種癥狀的化合物。
需要治療、預(yù)防或改善丙型肝炎的一種或多種癥狀的方法。
需要用本文提供的化合物調(diào)節(jié)絲氨酸蛋白酶活性、尤其是HCVNS3/NS4a絲氨酸蛋白酶活性的方法。
需要用本文提供的化合物調(diào)節(jié)HCV多肽加工的方法。
發(fā)明概述在許多實施方案中，本發(fā)明提供一類新的HCV蛋白酶抑制劑、包含一種或多種所述化合物的藥物組合物、包含一種或多種所述化合物的藥物制劑的制備方法以及使用一種或多種所述化合物或者一種或多種所述制劑治療或預(yù)防HCV或者改善丙型肝炎的一種或多種癥狀的方法。還提供調(diào)節(jié)HCV多肽與HCV蛋白酶相互作用的方法。本發(fā)明提供的化合物中，優(yōu)選抑制HCV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶活性的化合物。本發(fā)明公開了具有以下通式I結(jié)構(gòu)的化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯 式I其中R8選自烷基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、雜環(huán)基-、芳基烷基-、雜芳基烷基-和雜環(huán)基烷基；R9選自H、烷基、烯基、炔基、芳基和環(huán)烷基；A和M可以相同或不同，并且各自獨立選自R、OR、N(H)R、N(RR′)、SR、S(O2)R和鹵素；或者A和M相互連接(換句話說，A-E-L-M結(jié)合在一起)，這樣上式I中的以下部分
形成3、4、5、6、7或8元環(huán)烷基、4-8元雜環(huán)基、6-10元芳基或5-10元雜芳基；E為C(H)或C(R)；L為C(H)、C(R)、CH2C(R)或C(R)CH2；R和R′可以相同或不同，并且各自獨立選自H、烷基-、烯基-、炔基-、環(huán)烷基-、雜烷基-、雜環(huán)基-、芳基-、雜芳基-、(環(huán)烷基)烷基-、(雜環(huán)基)烷基-、芳基-烷基-和雜芳基-烷基-；或者，NRR′中的R和R′相互連接，這樣NRR′形成4-8元雜環(huán)基；R2和R3可以相同或不同，并且各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、螺接環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基；Y選自下列部分
其中G為NH或O；R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24和R25可以相同或不同，并且各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，或者(i)R17和R18獨立地相互連接，形成3-8元環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)R15和R19也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iii)R15和R16也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iv)R15和R20也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；其中所述的各個烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基、螺接環(huán)烷基和雜環(huán)基可以是未取代的或者任選獨立地被一個或多個部分取代，所述部分獨立地選自羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺?；?、芳基磺酰基、亞磺酰氨基、烷基、烯基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、酮基、羧基、烷氧羰基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
以上表述“A和M相互連接，這樣上式I中的以下部分 形成3、4、5、6、7或8元環(huán)烷基、4-8元雜環(huán)基、6-10元芳基或5-10元雜芳基”可以如下非限制性地圖示說明。因此，例如，當(dāng)A和M相互連接，使得上式I中的以下部分 形成6元環(huán)烷基(環(huán)己基)時，則式I可以圖示如下 本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能夠理解的是，當(dāng)以下部分中的A和M(即M-L-E-A結(jié)合在一起)連接
形成3、4、5、7或8元環(huán)烷基、4-8元雜環(huán)基、6-10元芳基或5-10元雜芳基時，可以類似地圖示。
本發(fā)明還公開了具有以下通式II結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯 其中R8選自烷基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、雜環(huán)基-、芳基烷基-、雜芳基烷基-、螺接環(huán)烷基和雜環(huán)基烷基；R9選自H、烷基、烯基、炔基、芳基和環(huán)烷基；X為S(O)或S(O2)；R2選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、非螺接環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基；R3選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、螺接環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基；Y選自下列部分 其中G為NH或O；R15、R16、R17、R18、R19、R20和R21可以相同或不同，并且各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，或者(i)R17和R18獨立地相互連接，形成3-8元環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)R15和R19也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iii)R15和R16也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iv)R15和R20也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；
其中所述各個烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的或者任選獨立地被一個或多個選自以下的部分取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺?；?、芳基磺?；?、亞磺酰氨基、烷基、烯基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、酮基、羧基、烷氧羰基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
在上述定義中，優(yōu)選1-10個碳原子的烷基，優(yōu)選2-10個碳原子的烯基或炔基，優(yōu)選3-8個碳原子的環(huán)烷基，優(yōu)選具有1-6個氧、氮、硫或磷原子的雜烷基、雜芳基或雜環(huán)烷基(雜環(huán)基)。螺接環(huán)烷基優(yōu)選螺接環(huán)丙基。
式I或式II化合物本身或者聯(lián)合一種或多種本文公開的其它合適藥物，可用于治療多種疾病，例如HCV、HIV、AIDS(獲得性免疫缺陷綜合征)以及相關(guān)疾病，還可用于調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性、預(yù)防HCV、或者改善丙型肝炎的一種或多種癥狀。既可以用本發(fā)明化合物，也可以用包含這類化合物的藥物組合物或制劑完成所述調(diào)節(jié)、治療、預(yù)防或改善。盡管不局限于理論，但是相信HCV蛋白酶可能是NS3或NS4a蛋白酶。本發(fā)明化合物可以抑制這類蛋白酶。它們還可以調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。
發(fā)明詳述在一個實施方案中，本發(fā)明公開了結(jié)構(gòu)式I或式II表示的化合物或者它們的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯，其中各個部分如上定義。
本發(fā)明的其它實施方案在下文中分三部分詳細(xì)描述第一部分所列的其它實施方案適用于式I和式II表示的化合物，第二部分所列的其它實施方案僅適用于式I表示的化合物，第三部分所列的其它實施方案僅適用于式II表示的化合物。
1.以下實施方案適用于式I化合物和式II化合物在另一個實施方案中，R8選自烷基-、芳基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、芳基烷基-和雜芳基烷基-。
在另一個實施方案中，R8為芳基或環(huán)烷基。
在另一個實施方案中，R8為苯基或環(huán)丙基。
在另一個實施方案中，R9為H、烷基或環(huán)烷基。
在另一個實施方案中，R9為H、甲基或環(huán)丙基。
在另一個實施方案中，R2選自下列部分
在另一個實施方案中，R3選自下列基團

其中R31為OH或O-烷基；R32為H、C(O)CH3、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。
在另一個實施方案中，R3選自下列部分
在另一個實施方案中，G為NH。
在另一個實施方案中，Y選自下列部分
其中R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24和R25各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，或者(i)R17和R18獨立地相互連接，形成3-8元環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)R15和R19也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iii)R15和R16也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iv)R15和R20也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；其中所述各個烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的或者任選獨立地被一個或多個選自以下的部分取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺?；?、芳基磺?；喕酋０被?、烷基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、酮基、羧基、烷氧羰基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
在另一個實施方案中，以下部分 選自下列基團 其中Y32選自下列基團
在另一個實施方案中，Y選自
2.以下實施方案明確僅適用于式I化合物在另一個實施方案中，R2除了前面定義的實施方案外，還選自下列基團 在另一個實施方案中，R2選自下列基團 在另一個實施方案中，R8為苯基或環(huán)丙基。
在另一個實施方案中，以下部分 選自下列結(jié)構(gòu)

在另一個實施方案中，以下部分
選自下列結(jié)構(gòu)
在另一個實施方案中，以下部分 選自下列結(jié)構(gòu) 在另一個實施方案中，R8為苯基或環(huán)丙基；R9為H或甲基；R2選自下列部分

R3選自下列部分 以下部分
為 Y選自

3.以下實施方案明確僅適用于式II化合物在另一個實施方案中，R8為苯基或環(huán)丙基；R9為H或甲基；R2選自下列部分
R3選自下列部分
Y選自

本發(fā)明另一實施方案公開了表1所示的化合物。
表1

下列術(shù)語在說明書上下文中使用時，除非另有說明，否則應(yīng)當(dāng)理解具有下述含義“患者”包括人和動物。
“哺乳動物”是指人和其它哺乳動物。
“烷基”是指可以為直鏈或支鏈的脂族烴基，并且鏈中包含約1個至約20個碳原子。優(yōu)選的烷基在鏈中包含約1個至約12個碳原子。更優(yōu)選的烷基在鏈中包含約1個至約6個碳原子。支鏈?zhǔn)侵敢粋€或多個低級烷基(例如甲基、乙基或丙基)連接到線性烷基鏈?！暗图壨榛笔侵告溨芯哂屑s1個至約6個碳原子的直鏈或支鏈基團?！巴榛笨梢允俏慈〈?，或者任選被一個或多個相同或不同的取代基取代，各個取代基獨立選自鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、羥基、烷氧基、烷硫基、氨基、-NH(烷基)、-NH(環(huán)烷基)、-N(烷基)2、羧基和-C(O)O-烷基。合適烷基的非限制性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基和叔丁基。
“烯基”是指含有至少一個碳碳雙鍵的脂族烴基，它可以是直鏈或支鏈并且在鏈中含有約2個至約15個碳原子。優(yōu)選的烯基在鏈中含有約2個至約12個碳原子；更優(yōu)選在鏈中含有約2個至約6個碳原子。支鏈?zhǔn)侵敢粋€或多個低級烷基(例如甲基、乙基或丙基)連接到線性烯基鏈?！暗图壪┗笔侵告溨泻屑s2個至約6個碳原于的直鏈或支鏈烯基?！跋┗笨梢允俏慈〈?，或者任選被一個或多個相同或不同的取代基取代，各個取代基獨立選自鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、烷氧基和-S(烷基)。合適烯基的非限制性實例包括乙烯基、丙烯基、正丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、正戊烯基、辛烯基和癸烯基。
“亞烷基”是指通過從以上定義的烷基上脫去一個氫原子而獲得的二價基團(difunctional group)。亞烷基的非限制性實例包括亞甲基、亞乙基和亞丙基。
“炔基”是指含有至少一個碳碳三鍵的脂族烴基，它可以是直鏈或支鏈并且在鏈中含有約2個至約15個碳原子。優(yōu)選的炔基在鏈中含有約2個至約12個碳原子，更優(yōu)選在鏈中含有約2個至約4個碳原子。支鏈?zhǔn)侵敢粋€或多個低級烷基(例如甲基、乙基或丙基)連接到線性炔基鏈。“低級炔基”是指鏈中含有約2個至約6個碳原子的直鏈或支鏈炔基。合適炔基的非限制性實例包括乙炔基、丙炔基、2-丁炔基和3-甲基丁炔基。“炔基”可以是未取代的，或者任選被一個或多個相同或不同的取代基取代，各個取代基獨立選自烷基、芳基和環(huán)烷基。
“芳基”是指含有約6個至約14個碳原子、優(yōu)選約6個至約10個碳原子的芳族單環(huán)或多環(huán)環(huán)系。芳基可以任選被一個或多個相同或不同的“環(huán)系取代基”取代，環(huán)系取代基如本文中定義。合適芳基的非限制性實例包括苯基和萘基。
“雜芳基”是指含有約5個至約14個環(huán)原子、優(yōu)選約5個至約10個環(huán)原子的芳族單環(huán)或多環(huán)環(huán)系，其中一個或多個環(huán)原子不是碳原子，而是例如單獨的氮、氧、硫原子或它們的組合。優(yōu)選的雜芳基包含約5個至約6個環(huán)原子?！半s芳基”可以任選被一個或多個相同或不同的“環(huán)系取代基”取代，環(huán)系取代基如本文中定義。雜芳基根名稱前的前綴氮雜、氧雜或硫雜分別是指至少一個氮、氧或硫原子為環(huán)原子。雜芳基的氮原子可以任選被氧化為相應(yīng)的N氧化物。合適雜芳基的非限制性實例包括吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、吡啶酮(包括N取代的吡啶酮)、異唑基、異噻唑基、唑基、噻唑基、吡唑基、呋咱基、吡咯基、吡唑基、三唑基、1，2，4-噻二唑基、吡嗪基、噠嗪基、喹喔啉基、2，3-二氮雜萘基、羥吲哚基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、苯并呋咱基、吲哚基、氮雜吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、異喹啉基、苯并氮雜吲哚基、1，2，4-三嗪基、苯并噻唑基等。術(shù)語“雜芳基”也指部分飽和的雜芳基部分，例如四氫異喹啉基、四氫喹啉基等。
“芳烷基”或“芳基烷基”是指芳基-烷基-，其中芳基和烷基如上定義。優(yōu)選的芳烷基包含低級烷基。合適芳烷基的非限制性實例包括芐基、2-苯乙基和萘基甲基。通過烷基連接至母體部分。
“烷基芳基”是指烷基-芳基-，其中烷基和芳基如上定義。優(yōu)選的烷基芳基包含低級烷基。合適烷基芳基的非限制性實例為甲苯基。通過芳基連接至母體部分。
“環(huán)烷基”是指非芳族的單環(huán)或多環(huán)環(huán)系，包含約3個至約10個碳原子，優(yōu)選約5個至約10個碳原子。優(yōu)選的環(huán)烷基環(huán)包含約5個至約7個環(huán)原子。環(huán)烷基可以任選被一個或多個相同或不同的“環(huán)系取代基”取代，環(huán)系取代基如本文中定義。合適單環(huán)環(huán)烷基的非限制性實例包括環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。合適多環(huán)環(huán)烷基的非限制性實例包括1-十氫萘基、降冰片烷基、金剛烷基等。
“環(huán)烷基烷基”是指經(jīng)由烷基(定義同上)連接至母核的以上定義的環(huán)烷基。合適環(huán)烷基烷基的非限制性實例包括環(huán)己基甲基、金剛烷基甲基等。
“環(huán)烯基”是指含有至少一個碳碳雙鍵的非芳族單環(huán)或多環(huán)環(huán)系，包含約3個至約10個碳原子，優(yōu)選約5個至約10個碳原子。優(yōu)選的環(huán)烯基環(huán)包含約5個至約7個環(huán)原子。環(huán)烯基可以任選被一個或多個相同或不同的“環(huán)系取代基”取代，環(huán)系取代基如本文中定義。合適單環(huán)環(huán)烯基的非限制性實例包括環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)庚-1，3-二烯基等。合適多環(huán)環(huán)烯基的非限制性實例為降冰片烯基。
“環(huán)烯基烷基”是指經(jīng)由烷基(定義同上)連接至母核的以上定義的環(huán)烯基。合適環(huán)烯基烷基的非限制性實例包括環(huán)戊烯基甲基、環(huán)己烯基甲基等。
“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。優(yōu)選氟、氯和溴。
“環(huán)系取代基”是指連接至芳族或非芳族環(huán)系的取代基，例如，它可置換所述環(huán)系上的有效氫。各環(huán)系取代基可以相同或不同，并且各自獨立選自下列基團烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、芳烷基、烷基芳基、雜芳烷基、雜芳基烯基、雜芳基炔基、烷基雜芳基、羥基、羥基烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、?；?、芳?；?、鹵素、硝基、氰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、烷基磺?；⒎蓟酋；㈦s芳基磺?；⑼榱蚧?、芳硫基、雜芳硫基、芳烷基硫基、雜芳烷基硫基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、-C(＝N-CN)-NH2、-C(＝NH)-NH2、-C(＝NH)-NH(烷基)、Y1Y2N-、Y1Y2N-烷基-、Y1Y2NC(O)-、Y1Y2NSO2-和-SO2NY1Y2，其中Y1和Y2可以相同或不同，并且獨立選自氫、烷基、芳基、環(huán)烷基和芳烷基?！碍h(huán)系取代基”也可指同時置換環(huán)系上兩個相鄰碳原子的兩個有效氫(每個碳上一個H)的一個部分。這類環(huán)系取代基的實例有亞甲二氧基、亞乙二氧基、-C(CH3)2-等，它們構(gòu)成例如以下的部分 “雜芳基烷基”是指經(jīng)由烷基(定義同上)連接至母核的以上定義的雜芳基。合適雜芳基的非限制性實例包括2-吡啶基甲基、喹啉基甲基等。
“雜環(huán)基”是指非芳族的單環(huán)或多環(huán)飽和環(huán)系，包含約3個至約10個環(huán)原子，優(yōu)選約5個至約10個環(huán)原子，其中一個或多個環(huán)原子不是碳原子，而是例如單獨的氮、氧、硫原子或它們的組合。環(huán)系中沒有相鄰的氧和/或硫原子。優(yōu)選的雜環(huán)基包含約5個至約6個環(huán)原子。雜環(huán)基根名稱前的前綴氮雜、氧雜或硫雜分別是指至少一個氮、氧或硫原子為環(huán)原子。雜環(huán)基環(huán)中任何-NH可以是被保護形式，例如-N(Boc)、-N(CBz)、-N(Tos)等；這樣的保護也被認(rèn)為是本發(fā)明的組成部分。雜環(huán)基可以任選被一個或多個相同或不同的“環(huán)系取代基”取代，環(huán)系取代基如本文中定義。雜環(huán)基的氮或硫原子可以任選被氧化為相應(yīng)的N-氧化物、S-氧化物或S，S-二氧化物。合適單環(huán)雜環(huán)基的非限制性實例包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、噻唑烷基、1，4-二烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、內(nèi)酰胺、內(nèi)酯等。
“雜環(huán)基烷基”是指經(jīng)由烷基(定義同上)連接至母核的以上定義的雜環(huán)基。合適雜環(huán)基烷基的非限制性實例包括哌啶基甲基、哌嗪基甲基等。
“雜環(huán)烯基”是指含有至少一個碳碳雙鍵或碳氮雙鍵的非芳族單環(huán)或多環(huán)環(huán)系，包含約3個至約10個環(huán)原子，優(yōu)選約5個至約10個環(huán)原子，其中一個或多個環(huán)原子不是碳原子，而是例如單獨的氮、氧、硫原子或它們的組合。環(huán)系中沒有相鄰的氧和/或硫原子。優(yōu)選的雜環(huán)烯基包含約5個至約6個環(huán)原子。雜環(huán)烯基根名稱前的前綴氮雜、氧雜或硫雜分別是指至少一個氮、氧或硫原子為環(huán)原子。雜環(huán)烯基可以任選被一個或多個“環(huán)系取代基”取代，“環(huán)系取代基”如上定義。雜環(huán)烯基的氮或硫原子可以任選被氧化為相應(yīng)的N-氧化物、S-氧化物或S，S-二氧化物。合適雜環(huán)烯基的非限制性實例包括1，2，3，4-四氫吡啶、1，2-二氫吡啶基、1，4-二氫吡啶基、1，2，3，6-四氫吡啶、1，4，5，6-四氫嘧啶、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、2-咪唑啉基、2-吡唑啉基、二氫咪唑、二氫唑、二氫二唑、二氫噻唑、3，4-二氫-2H-吡喃、二氫呋喃基、氟二氫呋喃基、7-氧雜雙環(huán)[2.2.1]庚烯基、二氫噻吩基、二氫噻喃基等。
“雜環(huán)烯基烷基”是指經(jīng)由烷基(定義同上)連接至母核的以上定義的雜環(huán)烯基。
應(yīng)當(dāng)注意的是，在本發(fā)明含雜原子的環(huán)系中，在與N、O或S相鄰的碳原子上沒有羥基，在與另一個雜原子相鄰的碳原子上也沒有N或S基團。因此，在例如以下環(huán)中 沒有-OH直接連接在2位和5位的碳原子上。
還應(yīng)當(dāng)注意的是，互變異構(gòu)體形式，例如下列部分 在本發(fā)明某些實施方案中被認(rèn)為它們是等同的。
“炔基烷基”是指炔基-烷基-，其中炔基和烷基如上定義。優(yōu)選的炔基烷基包含低級炔基和低級烷基。通過烷基連接至母體部分。合適炔基烷基的非限制性實例包括炔丙基甲基。
“雜芳烷基”是指雜芳基-烷基-，其中雜芳基和烷基如上定義。優(yōu)選的雜芳烷基包含低級烷基。合適芳烷基的非限制性實例包括吡啶基甲基和喹啉-3-基甲基。通過烷基連接至母體部分。
“羥基烷基”是指HO-烷基-，其中烷基如上定義。優(yōu)選的羥基烷基包含低級烷基。合適羥基烷基的非限制性實例包括羥基甲基和2-羥基乙基。
“?；笔侵窰-C(O)-、烷基-C(O)-或環(huán)烷基-C(O)-，烷基和環(huán)烷基如上定義。通過羰基連接至母體部分。優(yōu)選的?；图壨榛?。合適?；姆窍拗菩詫嵗柞；⒁阴；捅；?。
“芳酰基”是指芳基-C(O)-，其中芳基如上定義。通過羰基連接至母體部分。合適芳?；姆窍拗菩詫嵗ū郊柞；?-萘甲?；?。
“烷氧基”是指烷基-O-，其中烷基如上定義。合適烷氧基的非限制性實例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基和正丁氧基。通過醚氧連接至母體部分。
“芳氧基”是指芳基-O-，其中芳基如上定義。合適芳氧基的非限制性實例包括苯氧基和萘氧基。通過醚氧連接至母體部分。
“芳烷基氧基”是指芳烷基-O-，其中芳烷基如上定義。合適芳烷基氧基的非限制性實例包括芐氧基和1-萘甲氧基或2-萘甲氧基。通過醚氧連接至母體部分。
“烷硫基”是指烷基-S-，其中烷基如上定義。合適烷硫基的非限制性實例包括甲硫基和乙硫基。通過硫連接至母體部分。
“芳硫基”是指芳基-S-，其中芳基如上定義。合適芳硫基的非限制性實例包括苯硫基和萘硫基。通過硫連接至母體部分。
“芳烷基硫基”是指芳烷基-S-，其中芳烷基如上定義。合適芳烷基硫基的非限制性實例為芐硫基。通過硫連接至母體部分。
“烷氧基羰基”是指烷基-O-CO-。合適烷氧基羰基的非限制性實例包括甲氧基羰基和乙氧基羰基。通過羰基連接至母體部分。
“芳氧基羰基”是指芳基-O-C(O)-。合適芳氧基羰基的非限制性實例包括苯氧基羰基和萘氧基羰基。通過羰基連接至母體部分。
“芳烷氧基羰基”是指芳烷基-O-C(O)-。合適芳烷氧基羰基的非限制性實例為芐氧基羰基。通過羰基連接至母體部分。
“烷基磺酰基”是指烷基-S(O2)-。優(yōu)選的烷基磺?；型榛堑图壨榛?。通過磺酰基連接至母體部分。
“芳基磺?；笔侵阜蓟?S(O2)-。通過磺?；B接至母體部分。
術(shù)語“取代(的)”是指在指定原子上的一個或多個氫被所選的指定基團取代，前提條件是不超過現(xiàn)有情況下指定原子的正?；蟽r，并且這種取代得到穩(wěn)定化合物。取代基和/或變量的組合只有在這種組合得到穩(wěn)定化合物的情況下才被允許。“穩(wěn)定化合物”或“穩(wěn)定結(jié)構(gòu)”是指化合物足夠穩(wěn)固，能夠從反應(yīng)混合物中分離達到可實用的純凈度，并可配制為有效的治療藥物。
術(shù)語“任選取代的”是指任選被指定基團或部分取代。
有關(guān)化合物的術(shù)語“純化(的)”、“純化形式(的)”或“分離純化形式”是指所述化合物從合成過程、天然來源或這兩種情況下分離后的物理狀態(tài)。因此，有關(guān)化合物的術(shù)語“純化(的)”、“純化形式(的)”或“分離純化形式”是指所述化合物經(jīng)過本文描述的或本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一個或多個純化過程獲得的物理狀態(tài)，并且具有足夠的純度，以便通過本文描述的或本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的標(biāo)準(zhǔn)分析技術(shù)來表征。
還應(yīng)當(dāng)注意的是，在本申請正文、流程、實施例和表格中不滿足化合價的任何碳原子和雜原子由氫原子來滿足化合價。
當(dāng)化合物中某個官能團是“保護的”基團時，這是指該基團為修飾形式，從而在化合物進行反應(yīng)時，防止在被保護位置發(fā)生不需要的副發(fā)應(yīng)。合適的保護基是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的，也可參考標(biāo)準(zhǔn)教科書，例如T.W.Greene等，Protective Groups in organicSynthesis(1991)，Wiley，New York。
任何變量(例如芳基、雜環(huán)、R2等)在任何成分或式I中出現(xiàn)不止一次時，在各個位置的變量的定義獨立于所有其它位置的變量的定義。
本文所用術(shù)語“組合物”包括含有規(guī)定量規(guī)定成分的產(chǎn)品以及由規(guī)定量規(guī)定成分組合而直接或間接獲得的的任何產(chǎn)品。
在用于命名本發(fā)明化合物時，本文所用的名稱“P1’、P1、P2、P3、P4”等表示相對于天然肽切割底物結(jié)合點，蛋白酶抑制劑氨基酸殘基的相對結(jié)合位置。天然底物中的切割發(fā)生在P1和P1’之間，其中非主要位置指定從肽天然切割位點C端開始至N端的氨基酸；而主要位置從切割位點名稱的N端開始，延伸至C端。例如，P1’是指遠(yuǎn)離C端切割位點的右邊第一個氨基酸殘基(即N端第一個氨基酸殘基)；而P1從C端切割位點左邊開始編號，P2C端的第二個氨基酸殘基，等等。參見A.Berger等，Transactions of the Royal SocietyLondon Series，B250，249-264(1970)。
本發(fā)明化合物的前藥和溶劑合物也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。前藥的闡述參見T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs as Novel DeliverySystems(1987)，A.C.S.Symposium Series，第14卷；BioreversibleCarriers in Drug Design，(1987)Edward B.Roche編輯，AmericanPharmaceutical Association and Pergamon Press。術(shù)語“前藥”是指可在體內(nèi)轉(zhuǎn)化而得到式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或溶劑合物的化合物(例如藥物前體)。所述轉(zhuǎn)化可以通過不同的機制(例如代謝或化學(xué)過程)實現(xiàn)，例如通過在血液中水解而轉(zhuǎn)化。有關(guān)應(yīng)用前藥的闡述參見T.Higuchi和W.Stella，“Pro-drugs as Novel DeliverySystems”，A.C.S.Symposium Series，第14卷；Bioreversible Carriersin Drug Design，Edward B.Roche(編輯)，American PharmaceuticalAssociation and Pergamon Press，1987。
例如，如果式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或溶劑合物含有羧酸官能團，前藥可以包括酯，酯可通過用例如以下基團置換酸基團的氫原子而形成(C1-C8)烷基、(C2-C12)烷酰氧基甲基、具有4-9個碳原子的1-(烷酰氧基)乙基、具有5-10個碳原子的1-甲基-1-(烷酰氧基)-乙基、具有3-6個碳原子的烷氧基羰氧基甲基、具有4-7個碳原子的1-(烷氧基羰氧基)乙基、具有5-8個碳原子的1-甲基-1-(烷氧基羰氧基)乙基、具有3-9個碳原子的N-(烷氧基羰基)氨基甲基、具有4-10個碳原子的1-(N-(烷氧基羰基)氨基)乙基、3-酞基、4-巴豆酸內(nèi)酯基、γ-丁內(nèi)酯-4-基、N，N-二(C1-C2)烷基氨基(C2-C3)烷基(例如β-二甲基氨基乙基)、氨甲?；?(C1-C2)烷基、N，N-二(C1-C2)烷基氨甲?；?(C1-C2)烷基和哌啶子基-、吡咯烷基-或嗎啉代(C2-C3)烷基等。
類似地，如果式(I)化合物含有醇官能團，前藥可以通過用例如以下基團置換醇基團的氫原子而形成(C1-C6)烷酰氧基甲基、1-((C1-C6)烷酰氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷酰氧基)乙基、(C1-C6)烷氧基羰氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧基羰基氨基甲基、丁二酸單?；?succinoyl)、(C1-C6)烷?；ⅵ?氨基(C1-C4)烷?；?alkanyl)、芳基?；?、α-氨基?；ⅵ?氨基?；?α-氨基?；?其中各個α-氨基?；毩⑦x自天然L-氨基酸)、P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-C6)烷基)2或糖基(從糖類半縮醛形式脫去羥基而得到的基團)等。
如果式(I)化合物含有胺官能團，前藥可以通過用例如以下基團置換胺基團的氫原子而形成R-羰基、RO-羰基、NRR′-羰基，其中R和R′各自獨立為(C1-C10)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、芐基或R-羰基為天然α-氨基?；蛱烊沪?氨基?；?、-C(OH)C(O)OY1(其中Y1為H、(C1-C6)烷基或芐基)、-C(OY2)Y3(其中Y2為(C1-C4)烷基和，Y3為(C1-C6)烷基、羧基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C4)烷基、N-(C1-C6)烷基氨基烷基或N，N-二(C1-C6)烷基氨基烷基)、C(Y4)Y5(其中Y4為H或甲基，Y5為N-(C1-C6)烷基氨基或N，N-二(C1-C6)烷基氨基)、嗎啉代、哌啶-1-基或吡咯烷-1-基等。
一種或多種本發(fā)明化合物既可以非溶劑合物形式存在，又可以溶劑合物形式(與藥學(xué)上可接受的溶劑如水、乙醇等形成)存在，本發(fā)明包括溶劑合物形式和非溶劑合物形式?！叭軇┖衔铩笔侵概c一種或多種溶劑分子物理結(jié)合的本發(fā)明化合物。這種物理結(jié)合涉及不同程度的離子鍵結(jié)合和共價鍵結(jié)合，包括氫鍵結(jié)合。在某些情況下，溶劑合物能夠被分離，例如當(dāng)一個或多個溶劑分子結(jié)合到結(jié)晶固體的晶格時?！叭軇┖衔铩卑ㄈ芤合嗪涂煞蛛x的溶劑合物。合適溶劑合物的非限制性實例包括乙醇合物、甲醇合物等?！八衔铩笔侨軇┓肿訛镠2O的溶劑合物。
一種或多種本發(fā)明化合物可任選被轉(zhuǎn)化為溶劑合物。溶劑合物的制備方法通常是已知的。因此，例如M.Caira等，J.PharmaceuticalSci.，93(3)，601-611(2004)介紹了用乙酸乙酯以及用水制備抗真菌的氟康唑溶劑合物的方法。E.C.van Tonder等，AAPS PharmSciTech.，5(1)，第12節(jié)(2004)；A.L.Bingham等，Chem.Commun.，603-604(2001)介紹了溶劑合物、半溶劑合物、水合物等的類似制備方法。一種典型非限制性方法涉及，在高于室溫下，將本發(fā)明化合物溶于需要量的所需溶劑(有機溶劑、水或它們的混合物)，接著以足以形成結(jié)晶的速率冷卻溶液，然后通過標(biāo)準(zhǔn)方法分離結(jié)晶。分析技術(shù)(例如例如I.R.光譜法)顯示作為溶劑合物(或水合物)的結(jié)晶中存在溶劑(或水)。
“有效量”或“治療有效量”是指本發(fā)明化合物或組合物的用量可有效抑制上述疾病，并由此產(chǎn)生所需的治療、改善、抑制或預(yù)防效果。
式I或式II化合物可以形成也屬于本發(fā)明范圍的鹽。除非另有說明，否則提及式I或式II化合物時，應(yīng)當(dāng)理解為包括它的鹽。本文所用術(shù)語“鹽”是指與無機酸和/或有機酸形成的酸式鹽以及與無機堿和/或有機堿形成的堿式鹽。此外，當(dāng)式I或式II化合物既包含堿性部分(例如但不限于吡啶或咪唑)又包含酸性部分(例如但不限于羧酸)時，可以形成兩性離子(“內(nèi)鹽”)，兩性離子也包括在本文所用術(shù)語“鹽”內(nèi)。盡管其它鹽也是有用的，但是優(yōu)選藥學(xué)上可接受的(即無毒、生理上可接受的)鹽。式I或式II化合物的鹽可以通過例如以下方式生成使式I或式II化合物與適量的酸或堿(例如1當(dāng)量)反應(yīng)，介質(zhì)使用例如所述鹽在其中沉淀的介質(zhì)，或者使用水溶液介質(zhì)并且隨后冷凍干燥。
示例性的酸加成鹽包括包括醋酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽等。此外，通常認(rèn)為適合與堿性藥用化合物生成藥用鹽的酸在例如以下的文獻中有闡述P.Stahl等，Camille G.(編輯)Handbook ofPharmaceutical Salts.Properties，Selection and Use.(2002)ZurichWiley-VCH；S.Berge等，Journal of Pharmaceutical Sciences(1977)66(1)1-19；P.Gould，International J.of Pharmaceutics(1986)33201-217；Anderson等，The Practice of Medicinal Chemistry(1996)，AcademicPress，New York；The Orange Book(在Food & Drug Administration，Washington，D.C.的網(wǎng)站上)。上述文獻的公開內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
示例性堿式鹽包括銨鹽、堿金屬鹽(例如鈉鹽、鋰鹽和鉀鹽)、堿土金屬鹽(例如鈣鹽和鎂鹽)、與有機堿(例如有機胺，例如二環(huán)己基胺、叔丁胺)形成的鹽、以及與氨基酸(例如精氨酸、賴氨酸等)形成的鹽。堿性含氮基團可以用例如以下試劑季銨化低級烷基鹵(例如甲基、乙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、硫酸二烷基酯(例如硫酸二甲酯、硫酸二乙脂和硫酸二丁酯)、長鏈鹵化物(例如癸基、十二烷基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基鹵(例如芐基溴和苯乙基溴)以及用其它試劑季銨化。
所有這樣的酸式鹽和堿式鹽都是本發(fā)明范圍內(nèi)的藥學(xué)上可接受的鹽，并且認(rèn)為對于本發(fā)明目的來講，所有酸式鹽和堿式鹽都等同于相應(yīng)化合物的游離形式。
本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的酯包括以下的酯(1)通過酯化羥基而獲得的羧酸酯，所述酯中羧酸部分的非羰基選自直鏈或支鏈烷基(例如乙?；?、正丙基、叔丁基或正丁基)、烷氧基烷基(例如甲氧基甲基)、芳烷基(例如芐基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)、芳基(例如苯基，任選被例如鹵素、C1-4烷基、C1-4烷氧基或氨基取代)；(2)磺酸酯，例如烷基-或芳烷基磺?；?例如甲磺酰基)；(3)氨基酸酯(例如L-纈氨酰基或L-異亮氨?；?；(4)膦酸酯和(5)單磷酸酯、二磷酸酯或三磷酸酯。磷酸酯可以被例如C1-20醇或其反應(yīng)性衍生物，或者2，3-二(C6-24)?；视瓦M一步酯化。
式I或式II化合物及其鹽、溶劑合物、酯和前藥可以它們的互變異構(gòu)體形式存在(例如為酰胺或亞氨醚)。所有這類互變異構(gòu)體形式都是本發(fā)明的組成部分。
式I或式II化合物可能包含不對稱中心或手性中心，因此，可能以不同的立體異構(gòu)體形式存在。式I或式II化合物的所有立體異構(gòu)體以及它們的混合物(包括外消旋混合物)構(gòu)成本發(fā)明的組成部分。另外，本發(fā)明包括所有幾何異構(gòu)體和位置異構(gòu)體。例如，如果式I或式II化合物含有雙鍵或稠合環(huán)，這些化合物的順式和反式形式及它們的混合物也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
根據(jù)各非對映異構(gòu)體的物理化學(xué)差異，可以通過本領(lǐng)域公知的方法將非對映異構(gòu)體混合物分離為它們的各非對映異構(gòu)體，例如通過色譜法和/或分步結(jié)晶來分離。可以如下分離對映異構(gòu)體將對映異構(gòu)體混合物與適當(dāng)旋光性化合物(例如手性輔基，如手性醇或Mosher酰氯)反應(yīng)，使其轉(zhuǎn)化為非對映異構(gòu)體混合物，分離各非對映異構(gòu)體，然后將各非對映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化(例如水解)為相應(yīng)的純對映異構(gòu)體。此外，部分式I或式II化合物可能是阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(例如取代的聯(lián)芳基)，也被認(rèn)為是本發(fā)明的組成部分。也可以利用手性HPLC柱分離對映異構(gòu)體。
式I或式II化合物也可能以不同的互變異構(gòu)體形式存在，所有這類形式都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明還包括例如所述化合物的所有酮-烯醇和亞胺-烯胺形式。
本發(fā)明化合物(包括本發(fā)明化合物的鹽、溶劑合物、酯和前藥以及所述前藥的鹽、溶劑合物和酯)的所有立體異構(gòu)體(例如幾何異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體等)包括在本發(fā)明范圍內(nèi)，例如由于不同取代基的不對稱碳而存在的立體異構(gòu)體，包括對映異構(gòu)體形式(甚至沒有不對稱碳也可能存在)、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體形式、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體形式，還包括位置異構(gòu)體(例如4-吡啶基和3-吡啶基)。本發(fā)明化合物的各立體異構(gòu)體可以是例如基本沒有其它異構(gòu)體的形式，或者可以混合為例如外消旋物，或者與所有其它立體異構(gòu)體或所選的其它立體異構(gòu)體混合。本發(fā)明的手性中心可具有IUPAC 1974 Recommendations定義的S或R構(gòu)型。在使用“鹽”、“溶劑合物”、“酯”、“前藥”等術(shù)語時，同樣適用于本發(fā)明化合物的對映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、位置異構(gòu)體、外消旋體或前藥的鹽、溶劑合物、酯和前藥。
本發(fā)明還包括同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物，它們等同于上述的那些化合物，但是一個或多個原子被原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同于自然界中通常發(fā)現(xiàn)的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的原子置換。本發(fā)明化合物中可包含的同位素實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如分別為2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。
某些同位素標(biāo)記的式(I)化合物(例如用3H和14C標(biāo)記的式(I)化合物)可用于化合物和/或底物組織分布測定。特別優(yōu)選氚(即3H)和碳-14(即14C)同位素，因為它們?nèi)菀字苽浜蜋z測。此外，被更重的同位素例如氘(即2H)取代，由于更大的代謝穩(wěn)定性(例如增加體內(nèi)半衰期或減少所需劑量)，可以獲得某些治療上的益處，因此，在部分情況下是優(yōu)選的。通常，同位素標(biāo)記的式(I)化合物可以通過類似于以下流程和/或?qū)嵤├泄_的方法來制備，并用適當(dāng)?shù)耐凰貥?biāo)記的試劑替代非同位素標(biāo)記的試劑。
本發(fā)明還包括式I或式II化合物及其鹽、溶劑合物、酯和前藥的多晶型物。
本發(fā)明化合物具有藥理學(xué)性質(zhì)；特別是式I或式II化合物，可用作HCV蛋白酶抑制劑，各個化合物本身或者一種或多種式I或式II化合物可以與一種或多種選自式I或式II的化合物組合。本發(fā)明化合物可用于治療多種疾病，例如HCV、HIV(AIDS，獲得性免疫缺陷綜合征)以及相關(guān)疾病，也可調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性、預(yù)防HCV或者改善丙型肝炎的一種或多種癥狀。
式I或式II化合物可用于制備用于治療HCV蛋白酶相關(guān)疾病的藥物，例如所述制備方法包括使式I或式II化合物和藥學(xué)上可接受的載體緊密接觸。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供藥物組合物，該組合物包含作為活性成分的一種或多種本發(fā)明化合物。通常，藥物組合物還包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體稀釋劑、賦形劑或載體(本發(fā)明統(tǒng)稱為載體材料)。因為這類藥物組合物具有HCV抑制活性，所以它們可用于治療丙型肝炎和相關(guān)疾病。
在另一實施方案中，本發(fā)明公開了制備包含本發(fā)明化合物作為活性成分的藥物組合物的方法。在本發(fā)明的藥物組合物和方法中，活性成分通常在與合適的載體材料混合后給藥，根據(jù)需要的給藥形式適當(dāng)?shù)剡x擇載體材料，即口服片劑、膠囊劑(固體填充、半固體填充或液體填充)、重配用散劑、口服凝膠劑、酏劑、可分散顆粒劑、糖漿劑、混懸劑等，并且符合常規(guī)藥學(xué)實踐。舉例來說，對于以片劑或膠囊劑形式口服給藥，活性藥物成分可與任何口服無毒的藥學(xué)上可接受的惰性載體混合，例如乳糖、淀粉、蔗糖、纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、滑石粉、甘露糖醇、乙醇(液態(tài)形式)等。此外，當(dāng)要求或者需要時，也可將合適的粘合劑、潤滑劑、崩解劑和著色劑摻和到混合物中。散劑和片劑可包含約5％至約95％的本發(fā)明活性成分。
合適的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖、玉米甜味劑、天然及合成樹膠(如阿拉伯樹膠)、藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇和蠟?？捎糜谏鲜鰟┬偷臐櫥瑒┌ㄅ鹚?、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括淀粉、甲基纖維素、瓜爾膠等。
在適當(dāng)?shù)那闆r下，也可包含甜味劑、矯味劑和防腐劑。在下文更詳細(xì)地說明上述部分術(shù)語，即崩解劑、稀釋劑、潤滑劑、粘合劑等。
另外，本發(fā)明的組合物可配制成持續(xù)釋放形式，從而控制任何一種或者多種成分或活性成分的釋放速率以達到最佳的治療效果，即HCV抑制活性等。持續(xù)釋放的合適劑型包括多層片劑，它包含多個不同崩解速率的層或者控釋聚合物基質(zhì)，活性成分浸漬在聚合物基質(zhì)中，加工成片劑形式，或者包含所述浸漬或包裹多孔聚合物基質(zhì)的膠囊劑。
液體制劑包括溶液劑、混懸劑和乳劑。例如用于腸胃外注射的水溶液劑或者水-丙二醇溶液劑或者加入甜味劑和遮光劑(pacifier)的口服溶液劑、混懸劑和乳劑。液體制劑還可包括鼻內(nèi)給藥用溶液劑。
適于吸入的氣霧劑可包含溶液和粉末形式的固體，它們可以與藥學(xué)上可接受的載體例如惰性壓縮氣體(如氮氣)聯(lián)合應(yīng)用。
制備栓劑時，首先熔融低熔點的蠟，例如脂肪酸甘油酯(如可可油)的混合物，并且通過攪拌或者類似的混合方法使活性成分均勻分散于其中。然后將熔融的均勻混合物倒入適當(dāng)大小的模具中，使之冷卻，由此固化。
也包括用于在臨用前配制成口服或腸胃外給藥的液體制劑的固體制劑。所述液體制劑包括溶液劑、混懸劑和乳劑。
本發(fā)明化合物也可透皮給藥。透皮給藥用組合物可采用乳膏劑、洗劑、氣霧劑和/或乳劑形式，所述組合物可包含在骨架型或者貯庫型貼劑中，這是本領(lǐng)域中用于此目的常規(guī)技術(shù)。
本發(fā)明化合物還可口服、靜脈內(nèi)、鼻內(nèi)或皮下給藥。
本發(fā)明化合物還包括單位劑型的制劑。在這類劑型中，制劑被細(xì)分為包含適量(例如達到所需目的的有效量)活性成分的適當(dāng)大小的單位劑量。
根據(jù)具體的應(yīng)用，單位劑量制劑中本發(fā)明活性成分的劑量通常是可以調(diào)整的，約1.0毫克至約1,000毫克，優(yōu)選約1.0毫克至約950毫克，更優(yōu)選約1.0毫克至約500毫克，典型劑量為約1毫克至約250毫克。實際使用劑量可根據(jù)患者的年齡、性別、體重以及所治療的病情嚴(yán)重程度而變化。這種技術(shù)是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的。
通常，含有活性成分的人用口服劑型可以每天給予1次或2次。給藥量和給藥頻率需要根據(jù)主治醫(yī)師的判斷加以調(diào)整。口服給藥的一般推薦日劑量范圍從約1.0毫克/天到1,000毫克/天，可以一次或多次給藥。
一些有用的術(shù)語說明如下膠囊劑，是指特殊容器或者包封物，它們由甲基纖維素、聚乙烯醇、或者變性的明膠或淀粉制成，用于保留或容納含有活性成分的組合物。硬殼膠囊一般由相對高強度的明膠骨架和豬皮明膠的摻合物制成。膠囊本身可包含少量染料、不透明劑、增塑劑和防腐劑。
片劑，是指包含活性成分以及合適稀釋劑的壓制或模制固體劑型。通過壓縮混合物或經(jīng)濕法制粒、干法制?；驂嚎s獲得的顆粒制備片劑。
口服凝膠劑，是指活性成分分散于或溶于親水性半固體基質(zhì)中。
重配用散劑，是指包含活性成分和合適稀釋劑的粉末摻合物，它可以懸浮于水或果汁中。
稀釋劑，是指通常構(gòu)成組合物或者劑型主要部分的物質(zhì)。合適的稀釋劑包括糖類，例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇和山梨醇；用小麥、玉米、大米和馬鈴薯獲得的淀粉；纖維素，例如微晶纖維素。組合物中稀釋劑含量占組合物總重量的約10％至約90％，優(yōu)選約25％至約75％，更優(yōu)選約30％至約60％，甚至更優(yōu)選約12％至約60％。
崩解劑，是指加入到組合物中以便促使其分開(崩解)并釋放出藥物的物質(zhì)。合適的崩解劑包括淀粉；“冷水可溶性”改性淀粉，例如羧甲基淀粉鈉；天然和合成樹膠，例如槐樹豆膠、梧桐膠、瓜爾膠、西黃蓍膠和瓊脂；纖維素衍生物，例如甲基纖維素和羧甲基纖維素鈉；微晶纖維素和交聯(lián)微晶纖維素，例如交聯(lián)羧甲基纖維素鈉；藻酸鹽，例如藻酸和藻酸鈉；粘土，例如膨潤土；以及泡騰混合物。組合物中崩解劑含量占組合物重量的約2％至約15％，更優(yōu)選約4％至約10％。
粘合劑，是指將粉末粘合或者“膠著”在一起并使它們粘聚形成顆粒的物質(zhì)，因此在配制中用作“膠粘劑”。粘合劑增加稀釋劑或增量劑已有的粘性強度。合適的粘合劑包括糖類如蔗糖；用小麥、玉米、大米和馬鈴薯獲得的淀粉；天然樹膠，例如阿拉伯樹膠、明膠和西黃蓍膠；海藻衍生物，例如藻酸、藻酸鈉和藻酸鈣銨；纖維素材料，例如甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和羥丙基甲基纖維素；聚乙烯吡咯烷酮；以及無機物例如硅酸鋁鎂。組合物中粘合劑含量可占組合物重量的約2％至約20％，更優(yōu)選約3％至約10％，甚至更優(yōu)選約3％至約6％。
潤滑劑，是指加入到片劑、顆粒劑等劑型中，以便在壓制后通過減少摩擦或磨損使制劑從模具或者沖模中脫出的物質(zhì)。合適的潤滑劑包括金屬硬脂酸鹽，例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鉀；硬脂酸；高熔點蠟；以及水溶性潤滑劑，例如氯化鈉、苯甲酸鈉、乙酸鈉、油酸鈉、聚乙二醇和d’l-亮氨酸。潤滑劑通常在壓制前的最后步驟加入，因為它們必須存在于顆粒的表面并介于顆粒與壓片機組件之間。組合物中潤滑劑含量可占組合物重量的約0.2％至約5％，優(yōu)選約0.5％至約2％，更優(yōu)選約0.3％至約1.5％。
助流劑(glident)，防止結(jié)塊并改善顆粒的流動性，使流動平滑均勻的物質(zhì)。合適的助流劑包括二氧化硅和滑石粉。組合物中助流劑含量可占組合物總重量的約0.1％至約5％，優(yōu)選約0.5％至約2％。
著色劑，使組合物或劑型著色的賦形劑。這類賦形劑可包括食品級染料和吸附到合適吸附劑(例如粘土或氧化鋁)上的食品級染料。著色劑含量可占組合物重量的約0.1％至約5％，優(yōu)選約0.1％至約1％。
生物利用度，是指與標(biāo)準(zhǔn)物或?qū)φ瘴锵啾?，所給予劑型的活性藥物成分或者治療部分吸收進入體循環(huán)的速率和程度。
片劑的常規(guī)制備方法是人們已知的。這類方法包括干法(例如直接壓制和壓制通過壓縮產(chǎn)生的顆粒)、濕法或其它特殊方法。其它給藥劑型(例如膠囊劑、栓劑等)的常規(guī)制備方法也是人們熟知的。
本發(fā)明的另一個實施方案公開了上文公開的本發(fā)明化合物或藥物組合物在治療疾病(例如丙型肝炎等)中的用途。該方法包括給予患有一種或多種所述疾病并需要這種治療的患者治療有效量的本發(fā)明化合物或藥物組合物。
在另一實施方案中，本發(fā)明化合物可以用于治療人類HCV，其治療方式可以是單一療法或聯(lián)合療法(例如雙重聯(lián)合、三重聯(lián)合等)，例如聯(lián)合應(yīng)用抗病毒藥和/或免疫調(diào)節(jié)藥。這類抗病毒藥和/或免疫調(diào)節(jié)藥的實例包括利巴韋林(Schering-Plough Corporation，Madison，NewJersey)和LevovirinTM(ICN Pharmaceuticals，Costa Mesa，California)、VP 50406TM(Viropharma，Incorporated，Exton，Pennsylvania)、ISIS14803TM(ISIS Pharmaceuticals，Carlsbad，California)、HeptazymeTM(Ribozyme Pharmaceuticals，Boulder，Colorado)、VX 497TM(VertexPharmaceuticals，Cambridge，Massachusetts)、ThymosinTM(SciClonePharmaceuticals，San Mateo，California)、MaxamineTM(MaximPharmaceuticals，San Diego，California)、麥考酚酸嗎乙酯(Hoffman-LaRoche，Nutley，New Jersey)、干擾素(例如干擾素α、PEG-干擾素α綴合物)等?！癙EG-干擾素α綴合物”為共價連結(jié)PEG分子的干擾素α分子。PEG-干擾素α綴合物的實例包括加入聚乙二醇的干擾素α-2a形式(例如以商品名PegasysTM出售)的干擾素α-2a(RoferonTM，HoffmanLa-Roche，Nutley，New Jersey)、加入聚乙二醇的干擾素α-2b形式(例如以商品名PEG-IntronTM出售)的干擾素α-2b(IntronTM，Schering-Plough Corporation)、干擾素α-2c(Berofor AlphaTM，BoehringerIngelheim，Ingelheim，Germany)或通過測定天然干擾素α的共有序列定義的共有干擾素(InfergenTM，Amgen，Thousand Oaks，California)。
對需要的患者進行聯(lián)合治療時，聯(lián)合療法中的各治療藥物或含有治療藥物的藥物組合物或組合物，可以任何順序給藥，例如序貫、同期(concurrently)、同時給藥。這類聯(lián)合療法中的不同活性成分用量可以是不同或相同的劑量。術(shù)語“藥物組合物”包括散裝組合物以及單獨的劑型單元，它們含有一種以上(例如兩種)的藥物活性成分(例如本發(fā)明化合物和選自本文所述的其它藥物)以及任何藥學(xué)惰性賦形劑。散裝組合物和各單獨的劑型單元可以含有固定量的前述“一種以上的藥物活性成分”。散裝組合物是還沒有加工成形為單獨的劑型單元的材料。一種示例性的劑型單元為口服劑型單元，例如片劑、丸劑等。同樣地，本文所述的通過給予本發(fā)明藥物組合物治療患者的方法，也包括給予前述的散裝組合物和單獨的劑型單元。因此，舉例來講，式I化合物和抗病毒藥可以固定劑量存在于單一劑量單元(例如膠囊劑、片劑等)中。一個含有固定劑量的兩種不同活性化合物的單一劑量單元的商業(yè)實例是VYTORIN(Merck Schering-PloughPharmaceuticals，Kenilworth，New Jersey)。
如上所述，本發(fā)明也包括本發(fā)明化合物的互變異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、對映異構(gòu)體和其它立體異構(gòu)體。因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解的是，本發(fā)明部分化合物可能以適當(dāng)?shù)漠悩?gòu)體形式存在。這樣的變化形式也屬于本發(fā)明范圍。
本發(fā)明另一個實施方案公開了本發(fā)明化合物的制備方法。所述化合物可通過本領(lǐng)域已知的多種技術(shù)制備。以下反應(yīng)流程概要說明了示例性方法。這些示例說明不應(yīng)該解釋為對所附權(quán)利要求書限定的本發(fā)明范圍的限制。其它機制的途徑和類似結(jié)構(gòu)對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，是顯而易見的。
應(yīng)當(dāng)理解的是，雖然下面的示例性流程描述了少量本發(fā)明代表性化合物的制備方法，但是適當(dāng)替換任何天然及非天然氨基酸，將會形成基于所述替換的所需化合物。這類變化也落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
縮寫詞在以下流程、制備例和實施例的描述中使用如下的縮寫詞
THF 四氫呋喃DMF N，N-二甲基甲酰胺EtOAc 乙酸乙酯AcOH 乙酸HOOBt 3-羥基-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮EDCI 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽NMM N-甲基嗎啉ADDP 1，1’-(偶氮二羰基(azodicarbobyl))二哌啶DEAD 偶氮二甲酸二乙酯MeOH 甲醇EtOH 乙醇Et2O 乙醚DMSO 二甲亞砜HOBt N-羥基苯并三唑PyBrOP六氟磷酸溴-三吡咯烷基DCM 二氯甲烷DCC 1，3-二環(huán)己基碳二亞胺TEMPO 2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧自由基Phg 苯基甘氨酸Chg 環(huán)己基甘氨酸Bn芐基Bzl 芐基Et乙基Ph苯基iBoc 異丁氧基羰基iPr 異丙基tBu或But叔丁基Boc 叔丁氧基羰基
Cbz 芐氧基羰基Cp 環(huán)戊二烯基Ts 對甲苯磺酰基Me 甲基HATU六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲DMAP4-N，N-二甲基氨基吡啶BOP 苯并三唑-1-基-氧-三(二甲基氨基)六氟磷酸鹽PCC 氯鉻酸吡啶KHMDS 六甲基二硅基氮烷鉀或雙(三甲基硅基)氨基鉀NaHMDS 六甲基二硅基氮烷鈉或雙(三甲基硅基)氨基鈉LiHMDS 六甲基二硅基氮烷鋰或雙(三甲基硅基)氨基鋰10％Pd/C10％披鈀碳(以重量計)。
TG 硫代甘油實施例中間體1.01的制備 按照R.Zhang和J.S.Madalengoitia(J.Org.Chem.1999，64，330)介紹的方法，制備氨基酯1.01，只是Boc的裂解通過Boc保護的氨基酸與HCl的甲醇溶液(4M HCl的二烷也用于脫保護反應(yīng))反應(yīng)。
(注意在所述報道合成法的變化形式中，锍內(nèi)鹽用相應(yīng)的內(nèi)鹽替代)。
中間體1.04的制備步驟1 將Boc-tert-Leu 1.02(Fluka，5.0g，21.6mmol)的無水CH2Cl2/DMF(50ml，1∶1)溶液冷卻至0℃，用胺鹽1.02(5.3g，25.7mmol)、NMM(6.5g，64.8mmol)和BOP試劑(11.6g，25.7mmol)處理。將反應(yīng)物在室溫下攪拌24小時，用HCl水溶液(1M)稀釋，用CH2Cl2萃取。合并的有機層用HCl(水溶液，1M)、飽和NaHCO3、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮，用色譜法純化(SiO2，丙酮/己烷(1∶5))，得到1.03(無色固體)。
步驟2 甲基酯1.03(4.0g，10.05mmol)的THF/H2O(1∶1)溶液用LiOH·H2O(429mg，10.05mmol)處理，在室溫下攪拌3小時。反應(yīng)混合物用HCl水溶液酸化，真空濃縮，得到所需中間體游離酸1.04。
中間體1.06的制備步驟1
將甲基酯1.03(4.0g，10.46mmol)的溶液溶于HCl(4M二烷溶液)，在室溫下攪拌3小時。真空濃縮反應(yīng)混合物，得到胺鹽酸鹽，無需進一步純化直接用于下一步驟。
將胺鹽酸鹽(397mg，1.24mmol)的CH2Cl2(10mi)溶液冷卻至零下78℃(-78℃)，用異氰酸叔丁酯(250mg，2.5mmol)處理，在室溫下攪拌過夜。真空濃縮反應(yīng)混合物，殘余物用HCl水溶液(1M)稀釋，用CH2Cl2萃取。合并的有機層用HCl水溶液(1M)、飽和NaHCO3和鹽水洗滌。干燥有機層，過濾并真空濃縮，殘余物用色譜法純化(SiO2，丙酮/己烷(1∶4))，得到1.05(無色固體)。
步驟2 將甲基酯1.05(381mg，1.0mmol)的THF/H2O(1∶1，5ml)溶液用LiOH·H2O(62mg，1.5mmol)處理，在室溫下攪拌3小時。反應(yīng)混合物用HCl水溶液酸化，真空濃縮，得到游離酸1.06。
中間體1.09的制備 在0℃，向羧酸1.07(Fluka，1.0g，4.97mmol)的DMF(10.0ml)溶液中，依次加入苯磺酰胺(780.8mg，4.97mmol)、HATU(1.9g，4.97mmol)。在3小時后，反應(yīng)物用1N HCl猝滅，用水洗滌，在用EtOAc稀釋后。濃縮有機層，用4N HCl的二烷溶液處理，得到1.09(200.0mg，0.144mmol)。
中間體1.12的制備 按照用于制備中間體1.09的方法制備中間體1.12，用1.10為原料。可以按照C.Fliche等(Synthetic Communications 1994，24(20)，2873)的方法制備化合物1.10。
中間體1.14的制備 按照Campbell等(WO 2002060926)的方法制備中間體1.13。按照用于制備中間體1.09的方法制備中間體1.14，用1.08為原料。
實施例2式2化合物的制備
向中間體1.04(75.0mg，0.20mmol)、1.09(100.0mg，0.36mmol)和DMF(5.0ml)的冷溶液(0℃)中，依次加入HATU(Aldrich，76.05mg，0.20mmol)、DIPEA(0.102ml，6mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌2天，然后升至室溫，用乙酸乙酯(40.0ml)稀釋，用含5％KH2PO4的0.05倍體積1M H3PO4和鹽水洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，濃縮至干。殘余物經(jīng)硅膠純化(丙酮∶CH2Cl2，1∶9→1∶1)，得到34.0mg式2產(chǎn)物(收率28％)；LCMS(591.1M+1)。
實施例3式3化合物的制備 向中間體1.06(75.0mg，0.2mmol)、1.09(100.0mg，0.36mmol)和DMF(5.0ml)的冷溶液(0℃)中，依次加入HATU(Aldrich，76.05mg，0.20mmol)、DIPEA(0.102ml，6mmol)。攪拌反應(yīng)混合物2天，然后升至室溫，用乙酸乙酯(40.0ml)稀釋，用含5％KH2PO4的0.05倍體積1M H3PO4和鹽水洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，濃縮至干。殘余物經(jīng)硅膠純化(丙酮∶CH2Cl2，1∶9→1∶1)，得到8.0mg式3產(chǎn)物(收率6.5％)；LCMS(590.1)。
實施例4式4化合物的制備步驟1 在0℃，向酰胺4.1(0.5g，1eq)的THF溶液中，加入環(huán)丙基溴化鎂(4eq，7.68mmol)。在15分鐘后將反應(yīng)物升至室溫。將反應(yīng)物在室溫下攪拌5小時，然后通過加入1N HCl猝滅。反應(yīng)物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，用色譜法純化(10％EtOAc/己烷)，得到0.2g產(chǎn)物4.2。收率43.1％。
步驟2 向N-Boc保護的胺4.2(0.2g)中加入4M HCl(二烷溶液)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌50分鐘，TLC表明反應(yīng)已經(jīng)完成。將混合物濃縮至干，得到0.162g產(chǎn)物4.3。
步驟3 在0℃，向光氣的CH2Cl2溶液(2eq，1.65mmol)、NaHCO3(5ml飽和水溶液)中加入4.3。將混合物在室溫下攪拌2.5小時。漏斗分離。
有機層經(jīng)無水硫酸鈉干燥。在冷卻浴下濃縮至一半體積。稀釋至10ml，得到所需異氰酸酯4.4的0.083M二氯甲烷溶液。
步驟4 向胺鹽酸鹽4.5(30.0mg，0.062mmol，將2用4N HCl處理30分鐘而制備)和CH2Cl2(2.0ml)的冷溶液(0℃)中，依次加入4.4(2.5ml，1.25mmol)、DIPEA(3eq.)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1.2小時，用乙酸乙酯(20.0ml)稀釋，用3％檸檬酸、鹽水和飽和NaHCO3洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，濃縮至干。殘余物經(jīng)硅膠純化(丙酮∶CH2Cl2，1∶9→1∶1)，得到17.0mg式4產(chǎn)物(收率40％)；LCMS(658.2M+1)。
實施例5式5化合物的制備 向酸1.04(763mg，3.36mmol)、胺鹽5.1(791.8mg，5.04mmol)和DMF(10.0ml)的冷溶液(0℃)中，依次加入HATU(1.64g，5.6mmol)、DIPEA(2.24ml，12.96mmol)。攪拌反應(yīng)混合物2天，然后升至室溫，用乙酸乙酯(40.0ml)稀釋，用5％H3PO4的KH2PO4溶液(0.05M)、鹽水和NaHCO3洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，濃縮至干。殘余物經(jīng)硅膠純化(丙酮∶CH2Cl2，1∶9→1∶1)，得到134.0mg式5產(chǎn)物(收率6％)；LCMS(617.1M+1)。
實施例6式6化合物的制備步驟1 將胺6.1*(900mg，3.40mmol)的CH2Cl2溶液(0℃)用NMM(511mg，5.10mmol)和噻吩磺酰氯(928mg，5.10mmol)處理，在0℃攪拌12小時。反應(yīng)混合物用CH2Cl2(300ml)稀釋，用過量HCl水溶液(1M，500ml)洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，用色譜法純化(SiO2，己烷/EtOAc，1∶9→1∶1)，得到磺酰胺6.2(1.00g，無色固體)。
*如下獲得Cbz保護tert-Leu-NH-CH3(TCI，Jpn)，然后用BH3·DMS還原。
步驟2 將Cbz-保護的化合物6.2溶液(1.00g，2.118mmol)用TFA(30ml)和二甲基硫(7.78ml)在0℃處理，在室溫下攪拌3小時。真空濃縮反應(yīng)混合物，用NaOH水溶液(100ml)稀釋。胺用二氯甲烷(2×100ml)萃取，合并的有機層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，得到6.3(800mg)，無需進一步純化直接用于下一反應(yīng)。MS(m/z，相對強度)277[(M+H)+，100]，190(50)。
步驟3 將脫保護的胺6.3(800mg，2.9mmol)、CH2Cl2(10ml)和NaHCO3飽和水溶液(10ml)的溶液(0℃)用光氣(5ml，15％甲苯溶液)處理，在0℃攪拌2小時。反應(yīng)混合物用CH2Cl2(50ml)稀釋，有機層用冷的NaHCO3水溶液洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，再用10ml甲苯稀釋，濃縮二氯甲烷層，以6.4的溶液形式使用。
步驟4 向胺鹽酸鹽5(18mg，0.03mmol)和CH2Cl2(2.0ml)的冷溶液(0℃)中，依次加入6.4(0.5ml，0.075mmol)、DIPEA(3eq.)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1.2小時，用乙酸乙酯(20.0ml)稀釋，用3％檸檬酸、鹽水和飽和NaHCO3洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，濃縮至干。殘余物經(jīng)硅膠純化(丙酮∶CH2Cl2，1∶9→1∶1)，得到10.0mg式6產(chǎn)物(收率43％)；LCMS(819.2M+1)。
按照前面描述的通用方法，用式2中間體制備表1中的HCV抑制劑11。
實施例7式7化合物的制備 向化合物5(18mg，0.03mmol)中加入2ml 4N HCl/二烷，攪拌30分鐘，濃縮得到淺黃色固體。向胺鹽酸鹽5和CH2Cl2(2.0ml)的冷溶液(0℃)中，依次加入4.4(0.18ml，0.09mmol)、DIPEA(3eq.)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1.2小時，用乙酸乙酯(20.0ml)稀釋，用3％檸檬酸和飽和NaHCO3洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，濃縮至干。殘余物經(jīng)硅膠純化(丙酮∶CH2Cl2，1∶9→1∶1)，得到8.0mg式7產(chǎn)物(收率37％)；LCMS(684.2M+1)。
實施例8式8化合物的制備
向化合物5的胺鹽酸鹽(18mg，0.03mmol)和CH2Cl2(2.0ml)的冷溶液(0℃)中，依次加入異氰酸叔丁酯(Aldrich，10mg，0.10mmol)、DIPEA(3eq.)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1.2小時，用乙酸乙酯(20.0ml)稀釋，用3％檸檬酸、鹽水和飽和NaHCO3洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，濃縮至干。殘余物經(jīng)硅膠純化(丙酮∶CH2Cl2，1∶9→1∶1)，得到4.0mg式8產(chǎn)物(收率24％)；LCMS(617.1M+1)。
實施例9式9化合物的制備步驟1 將胺6.1*(900mg，3.40mmol)的CH2Cl2溶液(0℃)用NMM(511mg，5.10mmol)和甲磺酰氯(585mg，5.10mmol)處理，在0℃攪拌12小時。反應(yīng)混合物用CH2Cl2(300ml)稀釋，用過量HCl水溶液(1M，500ml)洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮，用色譜法純化(SiO2，己烷/EtOAc，1∶9→1∶1)，得到甲磺酰胺9.1a(1.00g)。
*如下獲得Cbz保護tert-Leu-NH-CH3(TCI，Jpn)，然后用BH3·DMS還原。
步驟2 將甲磺酰胺9.1a(1.0g，2.9mmol)的甲醇(30ml)溶液用鈀(200mg，10％wt/C)處理，在60psi氫化3小時。通過硅藻土墊過濾反應(yīng)混合物，真空濃縮濾液。殘余物無需進一步純化直接用于下一反應(yīng)。
將脫保護的胺和CH2Cl2(10ml)/NaHCO3飽和水溶液(10ml)的溶液(0℃)用光氣(5ml，15％甲苯溶液)處理，在0℃攪拌2小時。反應(yīng)混合物用CH2Cl2(50ml)稀釋，有機層用冷的NaHCO3水溶液洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，進一步用10ml甲苯稀釋，濃縮二氯甲烷層，以9.1b的溶液形式使用。
步驟3 向化合物5(18mg，0.03mmol)中加入2ml 4N HCl/二烷，攪拌30分鐘，濃縮得到淺黃色固體。向胺鹽酸鹽5和CH2Cl2(2.0ml)的冷溶液(0℃)中，依次加入9.1b(0.5ml，0.075mmol)、DIPEA(3eq.)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1.2小時，用乙酸乙酯(20.0ml)稀釋，用3％檸檬酸、鹽水和飽和NaHCO3洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，濃縮至干。殘余物經(jīng)硅膠純化(丙酮∶CH2Cl2，1∶9→1∶1)，得到10.0mg式9產(chǎn)物(收率43％)；LCMS(752.2M+1)。
實施例10式10化合物的制備步驟1
在-78℃、氮氣氛下，將KHMDS(200ml 0.5M甲苯溶液)滴加到環(huán)己烷甲酸甲酯10.1a(11.1g；78mmol)和無水THF(200ml)的攪拌溶液中。在加入完畢后，將反應(yīng)物在此溫度再維持0.5小時，然后加入芐基氯甲基醚(TCI，18.6ml；134mmol)。讓反應(yīng)物升至室溫過夜，加入水(100ml)。進行后處理，得到殘余物，用硅膠柱色譜法純化(EtOAc∶己烷(1∶10)作為洗脫劑)，得到所需不純中間體醚(14.98g，無色油狀物)。
使10％Pd/C(0.5g)、上述粗制醚(4.1g)和MeOH(80ml)黑色懸浮液在室溫下暴露于氮氣氛(氣罐)過夜。通過硅藻土墊過濾反應(yīng)物，將固體用甲醇充分洗滌。減壓濃縮合并的濾液，粗產(chǎn)物用硅膠柱色譜法純化(EtOAc∶己烷1∶5)，得到伯醇(10.1b；0.62g，無色油狀物)。
步驟2 在0℃、氮氣氛下，將甲磺酰氯(0.31ml)和三乙胺(0.75ml)先后加入到伯醇(10.1b；0.62g)的攪拌溶液中。在此溫度下攪拌所得混合物0.5小時。將反應(yīng)混合物萃取到EtOAc中，用1M HCl、NaHCO3飽和水溶液、水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮。得到黃色油狀殘余物(甲磺酸酯10.1c；0.74g)，無需純化直接用于隨后的步驟。
步驟3
將二甲基甲酰胺(20ml；無水的；Aldrich)加入到氫化鈉(0.56g；Aldrich)中，在冰浴冷卻及氮氣氛下，將叔丁基硫醇加入到上述懸浮液中。一旦加入完畢后，加入甲磺酸酯(10.1c；用2.00g醇10.1b按照上述方法制備)，在室溫下攪拌所得混合物過夜。反應(yīng)物在EtOAc和水之間分配，分離出有機相，干燥(MgSO4)。硅膠柱色譜法(EtOAc∶己烷2∶98)處理，得到甲酯-硫化物(10.1d；1.75g)。
將EtOAc加入到水相中，加入10％HCl水溶液直到水層pH＝1。分離出有機層，用水洗滌，干燥，減壓濃縮，得到硫化物-甲酸(10.1e；0.747g，白色固體)。
步驟4 向硫化物(10.1e；2.287g)的甲醇(75ml)溶液中，加入過硫酸氫鉀制劑(18.00g；Aldrich)的溶液，在室溫下攪拌所得白色懸浮液過夜。減壓除去揮發(fā)分，白色固體在EtOAc和水之間分配。分離出有機相，干燥，濃縮得到砜(10.1f；2.52g；含部分溶劑)。
步驟5
將酸10.1f(1.61g)的50ml甲苯溶液用DPPA(1eq，1.33ml，d 1.270)和三乙胺(1eq，0.85ml，d 0.726)處理。將混合物加熱至100℃2小時。反應(yīng)混合物用NaHCO3飽和水溶液稀釋，用二氯甲烷(2×100ml)萃取。合并的有機層用NaHCO3飽和水溶液和鹽水洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮直到剩下約20ml溶劑。將產(chǎn)物10.1g的溶液用甲苯調(diào)節(jié)為0.2M異氰酸酯。
步驟6 向化合物5的胺鹽酸鹽(18mg，0.07mmol)和CH2Cl2(2.0ml)的冷溶液(0℃)中，依次加入10.1g(19.7mg，0.076mmol)、DIPEA(3eq.)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1.2小時，用乙酸乙酯(20.0ml)稀釋，用3％檸檬酸、鹽水洗滌，經(jīng)NaHCO3干燥。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，濃縮至干。殘余物經(jīng)硅膠純化(丙酮∶CH2Cl2，1∶9→1∶1)，得到10.0mg式10產(chǎn)物(收率43％)；LCMS(777.2M+1)。
按照前述用于制備化合物5和6的通用方法，用式1.14中間體制備表1中的HCV抑制劑12、13和14。
下表1所示化合物中，A類化合物的Ki＜100nM，B類化合物的Ki＞100nM。
表1


本發(fā)明涉及新的HCV蛋白酶抑制劑。這種效用可通過它們抑制HCV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶的能力加以證明。用于所述證明的通用方法通過以下的體外測定法舉例說明。
HCV蛋白酶抑制活性試驗分光光度測定法按照R.Zhang等(Analytical Biochemistry，270(1999)268-275，其公開內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中)介紹的方法，對本發(fā)明化合物進行HCV絲氨酸蛋白酶的分光光度測定?；诘鞍姿怙@色酯底物的測定適合連續(xù)監(jiān)測HCV NS3蛋白酶活性。底物衍生自NS5A-NS5B連接序列(Ac-DTEDVVX(Nva)，其中X＝A或P)的P側(cè)，其C端羧基被4個不同發(fā)色醇(3-硝基酚、4-硝基酚、7-羥基-4-甲基-香豆素或4-苯基偶氮酚)之一酯化。下面描述這些新的分光光度測定用酯底物的合成、表征和在高通量篩選中的應(yīng)用，并且詳細(xì)描述HCV NS3蛋白酶抑制劑的動力學(xué)評價。
材料與方法材料測定用相關(guān)緩沖液的化學(xué)試劑購自Sigma ChemicalCompany(St.Louis，Missouri)。肽合成試劑購自Aldrich Chemicals、Novabiochem(San Diego，California)、Applied Biosystems(Foster City，California)和Perseptive Biosystems(Framingham，Massachusetts)。人工合成肽，或者用自動ABI 431A型合成儀(Applied Biosystems)合成肽。LAMBDA 12型UV/VIS分光計購自Perkin Elmer(Norwalk，Connecticut)，96孔UV板購自Corning(Corning，New York)。預(yù)熱塊(prewarming block)購自USA Scientific(Ocala，F(xiàn)lorida)，96孔板渦旋器購自Labline Instruments(Melrose Park，Illinois)。Spectramax Plus微量滴定板讀數(shù)儀(帶有單色計)購自Molecular Devices(Sunnyvale，California)。
酶制備使用以前公開的方法(D.L.Sali等，Biochemistry，37(1998)3392-3401)，制備重組HCV NS3/NS4A異源二聚體蛋白酶(菌株1a)。使用預(yù)先通過氨基酸分析定量的重組HCV蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)品，通過Biorad染料方法測定蛋白質(zhì)濃度。開始測定前，采用Biorad Bio-Spin P-6預(yù)填柱，使酶貯存緩沖液(50mM磷酸鈉(pH 8.0)、300mM氯化鈉、10％甘油、0.05％月桂基麥芽糖苷和10mM DTT)交換為測定緩沖液(25mMMOPS(pH 6.5)、300mM氯化鈉、10％甘油、0.05％月桂基麥芽糖苷、5μM EDTA和5μM DTT)。
底物合成與純化根據(jù)R.Zhang等(同上)報道合成底物，合成開始時用標(biāo)準(zhǔn)方法(K.Barlos等，Int.J.Pept.Protein Res.，37(1991)，513-520)，使Fmoc-Nva-OH錨定在2-氯三苯甲基氯樹脂上。隨后或者人工進行或者采用自動ABI 431型肽合成儀，利用Fmoc化學(xué)裝配肽。N-乙?；彝耆Ｗo的肽片段經(jīng)過10％乙酸(HOAC)和10％三氟乙醇(TFE)的二氯甲烷(DCM)溶液處理30分鐘，或者經(jīng)過2％三氟乙酸(TFA)的DCM溶液處理10分鐘后與樹脂斷開。共沸蒸發(fā)合并的濾液和DCM洗滌液(或者重復(fù)用碳酸鈉水溶液萃取)，以除去裂解時使用的酸。DCM相經(jīng)硫酸鈉干燥后蒸發(fā)。
所述酯底物用標(biāo)準(zhǔn)酸-醇偶合方法(K.Holmber等，Acta Chen.Scand.，B33(1979)410-412)進行裝配。肽片段溶解于無水吡啶(30-60mg/ml)，向其中加入10摩爾當(dāng)量發(fā)色團和催化量(0.1eq.)對甲苯磺酸(pTSA)。加入二環(huán)己基碳二亞胺(DCC，3eq.)啟動偶合反應(yīng)。用HPLC監(jiān)測產(chǎn)物形成，證實在室溫下反應(yīng)12-72小時后反應(yīng)完畢。吡啶溶劑通過真空蒸發(fā)除去，進一步與甲苯共沸除去。肽酯用95％TFA的DCM溶液脫保護2小時，用無水乙醚萃取3次以去除過量發(fā)色團。脫保護底物在C3或C8柱上通過反相HPLC純化，用30％-60％乙腈梯度洗脫(用6個柱體積)。HPLC純化后的總收率約為20-30％。電噴霧離子化質(zhì)譜證實分子量。底物以干粉形式防潮保存。
底物及產(chǎn)物的光譜用pH 6.5測定緩沖液獲得底物和相應(yīng)的發(fā)色團產(chǎn)物的光譜。利用多個稀釋度，1cm比色杯，最優(yōu)非高峰波長(3Np和HMC為340nm，PAP為370nm，4-Np為400nm)，測定消光系數(shù)。最優(yōu)非高峰波長的定義為底物和產(chǎn)物之間產(chǎn)生最大吸光度分?jǐn)?shù)差((產(chǎn)物OD-底物OD)/底物OD)的波長。
蛋白酶測定在96孔微量滴定板中，用200μl反應(yīng)混合物，于30℃進行HCV蛋白酶測定。對NS3/NS4A異源二聚體，優(yōu)化測定緩沖條件(25mM MOPS(pH 6.5)、300mM NaCl、10％甘油、0.05％月桂基麥芽糖苷、5μM EDTA和5μM DTT)(D.L.Sali等，出處同上)。通常，將緩沖劑、底物和抑制劑的150μl混合物加入各孔中(DMSO終濃度≤4％v/v)，在30℃預(yù)孵育約3分鐘。然后用50μl在測定緩沖液中的蛋白酶預(yù)熱溶液(12nM，30℃)啟動反應(yīng)(終體積為200μl)。用配備有單色器的Spectromax Plus微量滴定板讀數(shù)儀(采用截止濾光片型板讀數(shù)儀可獲得可接受的結(jié)果)，在合適波長(3Np和HMC為340nm，PAP為370nm，4-Np為400nm)，測定時間(60分鐘)范圍內(nèi)監(jiān)測各板的吸光度變化。相對于作為無酶水解對照的無酶空白，在合適波長監(jiān)測Nva和發(fā)色團之間的酯鍵的蛋白水解。在30倍底物濃度范圍內(nèi)(約6-200μM)評價底物動力學(xué)參數(shù)。用線性回歸求出初速度，采用非線性回歸分析(Mac Curve Fit 1.1，K.Raner)，將實驗數(shù)據(jù)擬合到Michaelis-Menten方程，得出動力學(xué)常數(shù)。計算酶轉(zhuǎn)換率(kcat)，假定酶具有完全活性。
抑制劑和滅活劑的評價對竟?fàn)幮砸种苿〢c-D-(D-Gla)-L-I-(Cha)-C-OH(27)、Ac-DTEDVVA(Nva)-OH和Ac-DTEDVVP(Nva)-OH，根據(jù)用于竟?fàn)幮砸种苿恿W(xué)的重排Michaelis-Menten方程vo/vi＝1+[I]o/(Ki(1+[S]o/Km))，其中vo為未抑制時的初速度，vi為任何已知抑制劑濃度([I]o)抑制劑存在時的初速度，[S]o為所使用的底物濃度；用vo/vi對抑制劑濃度([I]o)作圖，經(jīng)過實驗測定固定濃度的酶和底物的抑制常數(shù)(Ki)。用線性回歸擬合獲得的數(shù)據(jù)，用所得出的斜率1/(Ki(1+[S]o/Km)，計算Ki值。表2中給出了本發(fā)明部分化合物的Ki*值(單位nM)。
表2 盡管結(jié)合上述具體實施方案闡明了本發(fā)明，但是對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說，本發(fā)明的許多替換、修改及其它變化方案是顯而易見的。所有這樣的替換、修改及變化方案均落入本發(fā)明精神和范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種化合物、或者所述化合物的對映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體和外消旋體、或者所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯，所述化合物具有以下通式I的結(jié)構(gòu) 式I其中R8選自烷基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、雜環(huán)基-、芳基烷基-、雜芳基烷基-和雜環(huán)基烷基-；R9選自H、烷基、烯基、炔基、芳基和環(huán)烷基；A和M可以相同或不同，并且各自獨立選自R、OR、N(H)R、N(RR′)、SR、S(O2)R和鹵素；或者A和M相互連接，換句話說，A-E-L-M結(jié)合在一起，這樣上式I中的以下部分 形成3、4、5、6、7或8元環(huán)烷基、4-8元雜環(huán)基、6-10元芳基或5-10元雜芳基；E為C(H)或C(R)；L為C(H)、C(R)、CH2C(R)或C(R)CH2；R和R′可以相同或不同，并且各自獨立選自H、烷基-、烯基-、炔基-、環(huán)烷基-、雜烷基-、雜環(huán)基-、芳基-、雜芳基-、(環(huán)烷基)烷基-、(雜環(huán)基)烷基-、芳基-烷基-和雜芳基-烷基-；或者，N(RR′)中的R和R′相互連接，這樣N(RR′)形成4-8元雜環(huán)基；R2和R3可以相同或不同，并且各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、螺接環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基；Y選自下列部分 其中G為NH或O；R15、R16、R17、R18、R19和R20可以相同或不同，并且各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，或者(i)R17和R18獨立地相互連接，形成3-8元環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)R15和R19也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iii)R15和R16也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iv)R15和R20也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；其中所述的各個烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基、螺接環(huán)烷基和雜環(huán)基可以是未取代的或者任選獨立地被一個或多個部分取代，所述部分獨立地選自羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺?；?、芳基磺?；?、亞磺酰氨基、烷基、烯基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、酮基、羧基、烷氧羰基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R8選自烷基-、芳基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、芳基烷基-和雜芳基烷基-。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R8為芳基或環(huán)烷基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中R8為苯基或環(huán)丙基。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R9為H、烷基、烯基或環(huán)烷基。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中R9為H、甲基、烯丙基或環(huán)丙基。
7.權(quán)利要求1的化合物，其中R2選自下列部分
8.權(quán)利要求7的化合物，其中R2選自下列基團
9.權(quán)利要求1的化合物，其中R3選自下列基團 其中R31為OH或O-烷基；R32為H、C(O)CH3、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中R3選自下列部分
11.權(quán)利要求1的化合物，其中G為NH。
12.權(quán)利要求1的化合物，其中Y選自下列部分 其中R15、R16、R17、R18、R19和R20可以相同或不同，并且各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，或者(i)R17和R18獨立地相互連接，形成3-8元環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)R15和R19也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iii)R15和R16也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iv)R15和R20也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；其中所述各個烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的或者任選獨立地被一個或多個選自以下的部分取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺?；⒎蓟酋；喕酋０被?、烷基、烯基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、酮基、羧基、烷氧羰基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中以下部分 選自下列基團 其中Y32選自下列基團
14.權(quán)利要求12的化合物，其中Y選自
15.權(quán)利要求1的化合物，其中以下部分 選自下列結(jié)構(gòu)
16.權(quán)利要求15的化合物，其中以下部分 選自下列結(jié)構(gòu)
17.權(quán)利要求16的化合物，其中以下部分 選自下列結(jié)構(gòu)
18.權(quán)利要求1的化合物，其中R8為苯基或環(huán)丙基；R9為H、甲基、烯丙基或環(huán)丙基；R2選自下列部分 R3選自下列部分 以下部分 為 Y選自
19.一種藥物組合物，該組合物包含作為活性成分的至少一種權(quán)利要求1的化合物。
20.權(quán)利要求19的藥物組合物，該組合物還包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體。
21.權(quán)利要求20的藥物組合物，該組合物還包含至少一種抗病毒藥。
22.權(quán)利要求21的藥物組合物，該組合物還包含至少一種干擾素。
23.權(quán)利要求22的藥物組合物，其中所述至少一種抗病毒藥是利巴韋林，所述至少一種干擾素為α干擾素或加入聚乙二醇的干擾素。
24.一種治療HCV相關(guān)疾病的方法，該方法包括對需要這種治療的患者給予含有治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物的藥物組合物。
25.權(quán)利要求24的方法，其中所述給藥是口服給藥或者皮下給藥。
26.一種治療HCV相關(guān)疾病的方法，該方法包括對需要這種治療的患者給予治療有效量至少一種權(quán)利要求1的化合物和治療有效量至少一種抗病毒藥。
27.權(quán)利要求26的方法，其中所述至少一種化合物和所述至少一種抗病毒藥是同時、同期或序貫給藥。
28.權(quán)利要求26的方法，其中所述至少一種化合物和所述至少一種抗病毒藥以不同劑量或固定劑量給藥，所述固定劑量含有固定量的所述至少一種化合物和固定量的所述至少一種抗病毒藥。
29.權(quán)利要求26的方法，其中所述給藥是口服給藥或者皮下給藥。
30.一種具有HCV蛋白酶抑制活性的化合物、或者所述化合物的對映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體和外消旋體、或者所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯，所述化合物選自具有下列結(jié)構(gòu)的化合物
31.一種治療HCV相關(guān)疾病的藥物組合物，該組合物包含治療有效量的一種或多種權(quán)利要求30的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
32.權(quán)利要求31的藥物組合物，該組合物還包含至少一種抗病毒藥。
33.權(quán)利要求32的藥物組合物，該組合物還包含至少一種干擾素或PEG-干擾素α綴合物。
34.權(quán)利要求33的藥物組合物，其中所述至少一種抗病毒藥為利巴韋林，所述至少一種干擾素為α干擾素。
35.一種治療丙型肝炎病毒相關(guān)疾病的方法，該方法包括給予有效量的一種或多種權(quán)利要求30的化合物。
36.一種調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性的方法，該方法包括使HCV蛋白酶與一種或多種權(quán)利要求30的化合物接觸。
37.一種治療、預(yù)防或改善丙型肝炎的一種或多種癥狀的方法，該方法包括給予治療有效量的一種或多種權(quán)利要求30的化合物。
38.權(quán)利要求36的方法，其中所述HCV蛋白酶是NS3/NS4a蛋白酶。
39.權(quán)利要求38的方法，其中所述一種或多種化合物抑制HCVNS3/NS4a蛋白酶。
40.一種調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽加工的方法，該方法包括在加工所述丙型肝炎病毒多肽的條件下，使含有HCV多肽的成分與一種或多種權(quán)利要求30的化合物接觸。
41.分離純化形式的權(quán)利要求1的化合物。
42.一種化合物、或者所述化合物的對映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體和外消旋體、或者所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯，所述化合物具有以下通式II的結(jié)構(gòu) 其中R8選自烷基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、雜環(huán)基-、芳基烷基-、雜芳基烷基-、螺接環(huán)烷基和雜環(huán)基烷基；R9選自H、烷基、烯基、炔基、芳基和環(huán)烷基；X為S(O)或S(O2)；R2選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、非螺接環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基；R3選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、螺接環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基；Y選自下列部分 其中G為NH或O；R15、R16、R17、R18、R19和R20可以相同或不同，并且各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，或者(i)R17和R18獨立地相互連接，形成3-8元環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)R15和R19也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iii)R15和R16也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iv)R15和R20也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；其中所述各個烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的或者任選獨立地被一個或多個選自以下的部分取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、亞磺酰氨基、烷基、烯基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、酮基、羧基、烷氧羰基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
43.權(quán)利要求42的化合物，其中R8選自烷基-、芳基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、芳基烷基-和雜芳基烷基-。
44.權(quán)利要求43的化合物，其中R8為芳基或環(huán)烷基。
45.權(quán)利要求44的化合物，其中R8為苯基或環(huán)丙基。
46.權(quán)利要求42的化合物，其中R9為H、甲基、烯丙基或環(huán)丙基。
47.權(quán)利要求42的化合物，其中R2選自下列基團
48.權(quán)利要求42的化合物，其中R3選自下列基團 其中R31為OH或O-烷基；R32為H、C(O)CH3、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。
49.權(quán)利要求48的化合物，其中R3選自下列部分
50.權(quán)利要求42的化合物，其中G為NH。
51.權(quán)利要求42的化合物，其中Y選自下列部分 其中R15、R16、R17、R18、R19和R20可以相同或不同，并且各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，或者(i)R17和R18獨立地相互連接，形成3-8元環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)R15和R19也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iii)R15和R16也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；(iv)R15和R20也獨立地相互連接，形成4-8元雜環(huán)基；其中所述各個烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的或者任選獨立地被一個或多個選自以下的部分取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺?；?、芳基磺?；喕酋０被?、烷基、烯基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、酮基、羧基、烷氧羰基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
52.權(quán)利要求51的化合物，其中以下部分 選自下列基團 其中Y32選自下列基團
53.權(quán)利要求42的化合物，其中Y選自
54.權(quán)利要求42的化合物，其中X為S(O2)。
55.權(quán)利要求42的化合物，其中R8為苯基或環(huán)丙基；R9為H或甲基；X為S(O2)；R2選自下列部分 R3選自下列部分
56.一種治療HCV相關(guān)疾病的藥物組合物，該組合物包含治療有效量的一種或多種權(quán)利要求42的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
57.權(quán)利要求56的藥物組合物，該組合物還包含至少一種抗病毒藥。
58.權(quán)利要求56的藥物組合物，該組合物還包含至少一種干擾素或PEG-干擾素α綴合物。
59.權(quán)利要求58的藥物組合物，其中所述至少一種抗病毒藥為利巴韋林，所述至少一種干擾素為α干擾素或加入聚乙二醇的干擾素。
60.一種或多種權(quán)利要求42的化合物在制備用于治療丙型肝炎病毒相關(guān)疾病的藥物中的用途，所述治療包括給予有效量的一種或多種所述化合物。
61.一種調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性的方法，該方法包括使HCV蛋白酶與一種或多種權(quán)利要求42的化合物接觸。
62.一種或多種權(quán)利要求42的化合物在制備用于治療、預(yù)防或改善丙型肝炎的一種或多種癥狀的藥物中的用途，所述治療、預(yù)防或改善包括給予治療有效量的一種或多種所述化合物。
63.權(quán)利要求61的方法，其中所述HCV蛋白酶是NS3/NS4a蛋白酶。
64.權(quán)利要求63的方法，其中所述一種或多種化合物抑制HCVNS3/NS4a蛋白酶。
65.一種調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽加工的方法，該方法包括在一定條件下接觸含有HCV多肽的成分，在所述條件下，所述多肽用一種或多種權(quán)利要求42的化合物加工。
66.分離純化形式的權(quán)利要求42的化合物。
全文摘要
本發(fā)明公開了具有HCV蛋白酶抑制活性的新化合物以及制備這類化合物的方法。在另一個實施方案中，本發(fā)明公開了包含這類化合物的藥物組合物以及使用它們治療HCV蛋白酶相關(guān)疾病的方法。
文檔編號A61P31/22GK101068828SQ200580036290
公開日2007年11月7日 申請日期2005年8月25日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月27日
發(fā)明者M·桑尼格拉希, F·G·諾羅吉, V·M·格里亞瓦拉布漢 申請人:先靈公司