專利名稱：活性發(fā)泡體的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及活性發(fā)泡體，其是用天然或者合成橡膠或者合成樹脂制成的，其能夠促進(jìn)血液循環(huán)、改善體質(zhì)、促進(jìn)癌癥等疾病的治愈。
背景技術(shù)：
前列腺癌是在高齡男性中具有代表性的癌癥，由于人口的高齡化、生活方式的西化，前列腺癌在日本也不斷增加。而且，通過用腫瘤標(biāo)記物(前列腺特異抗原PSAprostate specific antigen)的血液檢查的發(fā)展，診察的普及，確認(rèn)了前列腺癌的增加趨勢。看一下日本前列腺癌的年齡校正患病率(對10萬人)，1956年為3.5，1990年為8.5，2015年在推測統(tǒng)計學(xué)上預(yù)測達(dá)到20.3。
在北美前列腺癌的患病率明顯高，在1990年為92.4，美國的日本血統(tǒng)第3代的前列腺癌患病率與北美白人的患病率近似?；谠撌聦?shí)，說包含脂肪過多的飲食的生活方式西化，與在日本前列腺癌的增加有關(guān)并不過分。因此，預(yù)測在2015年有8～10萬人成為前列腺癌的治療對象。
根據(jù)國立癌研究所(NCINational Cancer Institute)的統(tǒng)計，看一下美國在1998～2002年的癌的年齡校正患病率(對10萬人)，全部為469.7。其中，前列腺癌為76.0，位居第一。接著是乳腺癌(73.3)，肺癌以及支氣管癌(61.0)，結(jié)腸癌(38.3)，淋巴瘤(21.8)進(jìn)入前5位。前列腺癌因男性荷爾蒙而增殖，具有去除男性荷爾蒙就能抑制其增殖的特征。因此，在抑制前列腺癌的增殖方面，很多采用通過手術(shù)摘除精巢或者是用藥物抑制精巢功能的抗雄激素治療方法。但是，用抗雄激素治療方法，可以抑制前列腺癌在某一定期間(通常1～3年)的臨床發(fā)展，但都復(fù)發(fā)。對于向遠(yuǎn)隔臟器轉(zhuǎn)移(向骨轉(zhuǎn)移的較多)的情況，用荷爾蒙療法的10年生存率為10％或更小。
對于限定局部的前列腺癌，根治前列腺全摘除術(shù)(包括骨盆內(nèi)范圍的淋巴結(jié)廓清)如字面意義成為根治的治療法。不只是手術(shù)療法，根據(jù)前列腺癌的惡性程度和發(fā)展程度以及有無轉(zhuǎn)移，還有從荷爾蒙療法到包括重粒子線照射或者將針狀的放射性物質(zhì)直接刺入前列腺的方法的放射線療法、用抗癌劑的化學(xué)療法的廣泛選擇。

發(fā)明內(nèi)容
然而，在任一種的治療法中都有并發(fā)癥、副作用，而且避免不了復(fù)發(fā)的例子也不少。因此，現(xiàn)在要求開發(fā)沒有副作用的有效治療法。另外，根本上是要求前列腺癌的預(yù)防治療，美國最近報告了根據(jù)大量臨床治療經(jīng)驗(yàn)，服用維生素E對抑制前列腺癌的發(fā)生有效。實(shí)際上，對因別的原因死亡的人的前列腺剖驗(yàn)進(jìn)行組織學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)有前列腺癌的情況很多，這表現(xiàn)為潛伏癌。潛伏癌的頻率高，如果也包括在組織學(xué)上顯示浸潤圖像的癌，則雖根據(jù)報告其頻率之高有差異，發(fā)現(xiàn)50歲或更高齡的人占約30％。80歲或更高齡的有60％～70％的人被確認(rèn)為前列腺癌。開發(fā)使這種潛伏癌在臨床上不發(fā)展成癌的預(yù)防方法是迫切的問題。
鑒于上述課題，本發(fā)明的目的在于提供無副作用、能夠促進(jìn)血液循環(huán)、改善體質(zhì)、促進(jìn)癌癥等疾病的治愈的活性發(fā)泡體。
為了達(dá)到上述目的，精心研究之后，完成了本發(fā)明。即，本發(fā)明提供一種活性發(fā)泡體，其特征為其是由含有鋯化合物以及/或者鍺化合物的天然或者合成橡膠或者合成樹脂制成的，具有獨(dú)立氣泡結(jié)構(gòu)，在給與藥物時，使其與人體直接或者間接接觸來使用。
本活性發(fā)泡體是使其與人體直接或者間接接觸來使用的，如果進(jìn)一步在活性發(fā)泡體與人體之間發(fā)生摩擦，則更有效果。本活性發(fā)泡體促進(jìn)血液循環(huán)、改善體質(zhì)、促進(jìn)疾病的治愈，但是其機(jī)理沒有被闡明。
鋯化合物以及鍺化合物在活性氣泡體內(nèi)收集來自于太陽等的紅外線。于是紅外線在活性發(fā)泡體內(nèi)部的多個氣泡壁上碰撞，反復(fù)進(jìn)行漫反射和匯集，由此向活性氣泡體外產(chǎn)生對人體有好處的波長在4～25微米的紅外線。推測由于該紅外線與人體波長發(fā)生共振，使身體中的水分子及蛋白質(zhì)分子活化，由于代謝促進(jìn)作用而增進(jìn)人本身具有的自然治愈力。所以，推測促進(jìn)癌、高血壓、糖尿病、心臟病、肩膀酸痛、腰痛、過敏性疾病等疾病的治愈或者防止衰老、促進(jìn)育毛等的體質(zhì)改善。另外，本活性發(fā)泡體可以反復(fù)使用。
本活性發(fā)泡體在給與藥物時，如果使其與人體直接或者間接接觸來使用，則可以提高其藥物制劑的效果。另外，即使是如果大量使用就有副作用的藥物制劑，只要與本活性發(fā)泡體并用，則用少量即可，所以可以抑制副作用。
作為藥物制劑的種類，例如，可以舉出注射用劑、皮膚外用劑、經(jīng)粘膜皮膚用劑、經(jīng)鼻腔用劑或者經(jīng)口用劑等，但不限定于這些種類。還可以具體舉出抗癌劑、抗生素等，但不限定于這些種類。另外，藥物制劑優(yōu)選為來自于人的物質(zhì)。來自于人是指人本身體內(nèi)具有的物質(zhì)。來自于人的物質(zhì)可以是從人體提取得到的物質(zhì)，也可以是人工合成得到的物質(zhì)。
即使在來自于人的物質(zhì)中，使用毒性無限小的物質(zhì)，優(yōu)選在平常量下使用時沒有副作用的物質(zhì)。作為其例子，例如，可以舉出存在于人腸管內(nèi)的丁酸鈉(sodium butyrate，以下稱為SB)、丁酸酯鈉。這些物質(zhì)是使染色質(zhì)不活化的組蛋白脫乙?；敢种苿?histone deacetylase inhibitor，HDACI或者簡稱為HDi，以下稱為HDACI)，具有活化染色質(zhì)、啟動抑癌基因、停止癌細(xì)胞的細(xì)胞周期(分裂周期，細(xì)胞分裂結(jié)束后到下一個細(xì)胞分裂為止的細(xì)胞生活周期)的作用，即，具有作為抗腫瘤劑的作用。即使是合成的SB、丁酸酯鈉衍生物，如果毒性小也是有用的。如果將這些物質(zhì)的服用與本活性發(fā)泡體的使用組合起來，則可以抑制癌基因的作用，提高癌抑制效果。
另外，作為來自于人的物質(zhì)，也可以是在HDACI起作用時，起到共益作用的各種核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子(DNA活化因子或者抑制因子)或染色質(zhì)重塑物質(zhì)。即，為了使抑癌基因活化，只要是在其DNA的啟動子區(qū)域內(nèi)起作用的物質(zhì)就可以。通過將這些物質(zhì)與本活性發(fā)泡體組合，可以抑制癌基因的作用，提高癌抑制效果。
在內(nèi)部含有的氣泡優(yōu)選形成20～30個/mm2。這樣，通過在內(nèi)部高密度地含有多個獨(dú)立氣泡，可以產(chǎn)生對人體有益的紅外線。
作為活性發(fā)泡體的形式，例如，可以制成容易攜帶搬運(yùn)的小型三角形狀的便攜型，鋪的褥子、蓋的被子等寢具狀形式，用于衣服等一部分或者全部的形式，只要是能與人體直接或者間接接觸的形式，就沒有限定。另外，想要將活性發(fā)泡體局部集中到人體的一部分來給與疾病治療等效果時，可以做成厚度約8mm～5cm的片狀。還有，在作為衣服原材料的情況下，如果做成厚度約0.3～5mm的片狀，就容易制作衣服。
作為橡膠成分，天然橡膠或者合成橡膠都可以。作為合成橡膠，可以舉出氯丁二烯橡膠(CR)、苯乙烯-丁二烯橡膠(SBR)、丙烯腈-丁二烯橡膠(NBR)、丁腈橡膠(NRP)、丁二烯橡膠(BR)、異戊橡膠(IR)等橡膠類高分子，或者將它們數(shù)種混合得到的物質(zhì)，并不限于這些物質(zhì)。
另外，作為合成樹脂成分，可以舉出聚氯乙烯樹脂(PVC)、聚丙烯(PP)、聚乙烯(PE)等，并不限于這些物質(zhì)。
作為發(fā)泡劑，可以使用公知的發(fā)泡劑，優(yōu)選Celogen OTI(UNIROYAL社制，美國)或者Unicel(ドンジン社制，韓國)。
可以是使鋯化合物以及鍺化合物兩方都含有的形式，也可以是只含有任意一方的形式。在癌治療中，如果使鋯化合物以及鍺化合物兩方都含有，則對癌的治療有促進(jìn)效果，所以優(yōu)選。
作為鋯化合物，優(yōu)選使用鋯配位化合物。作為鋯配位化合物，可以舉出鋯和氟等的配位化合物，具體可以舉出六氟鋯酸鉀(K2ZrF6)或者八氟鋯酸鉀(K2ZrF8)，并不限于此。相對于橡膠成分100重量份，鋯化合物的含量優(yōu)選使其含有10～80重量份。任何一種比下限值小的情況，都是效果欠乏，即使比上限值多，因?yàn)槲匆娦Ч酗@著差異，所以從經(jīng)濟(jì)性方面考慮不優(yōu)選。
另外，作為鍺化合物，優(yōu)選使用鍺礦物或者鍺配位化合物。作為鍺礦物，可以舉出硫鍺銀礦(Ag8GeS9，Argyrodite)及硫砷銅鐵鋅鍺礦(レニェル礦)((Cu，Zn)11Fe4(Ge，As)2S16，Renierite)等，并不限于此。另外，作為鍺配位化合物，可以舉出鍺和二羧酸或者胺等的配位化合物，并不限于此。相對于橡膠成分100重量份，鍺化合物的含量優(yōu)選使其含有5～10重量份。任何一種比下限值小的情況，都是效果欠乏，即使比上限值多，因?yàn)槲匆娦Ч酗@著差異，所以從經(jīng)濟(jì)性方面考慮不優(yōu)選。
在上述構(gòu)成的基礎(chǔ)上，本活性發(fā)泡體還優(yōu)選使其含有碳。通過含有碳，提高活性發(fā)泡體的強(qiáng)度，而且可以更多地收集來自于太陽等的紅外線。作為碳，例如有炭黑，可以使用粉粒體的物質(zhì)，并不限于此。
通過本發(fā)明，本活性發(fā)泡體在給與藥物時，如果使其與人體直接或者間接接觸來使用，可以提高其藥物制劑的效果。另外，即使是如果大量使用就有副作用的藥物制劑，只要與本活性發(fā)泡體并用，則少量即可，所以可以抑制副作用。


本實(shí)施方式的活性發(fā)泡體的縱向剖面圖[圖2]表示血流量(ml/min/100g)變化的圖[圖3]表示血液量變化的圖[圖4]表示血流速度變化的圖[圖5]表示體壓(hPa)變化的圖[圖6]細(xì)胞的電子顯微鏡照片(a)實(shí)驗(yàn)組(b)對照組[圖7]Du145(人前列腺癌細(xì)胞)的活細(xì)胞的cDNA微陣列的結(jié)果[圖8]是表示Du145(人前列腺癌細(xì)胞)的活細(xì)胞數(shù)的推移的表以及圖，(+)表示使用本活性發(fā)泡體的實(shí)驗(yàn)組，(-)表示對照組[圖9]是表示LNCap(人前列腺癌細(xì)胞)的活細(xì)胞數(shù)的推移的表以及圖，(+)表示使用本活性發(fā)泡體的實(shí)驗(yàn)組，(-)表示對照組[圖10]是表示PC3(人前列腺癌細(xì)胞)的活細(xì)胞數(shù)的推移的表以及圖，(+)表示使用本活性發(fā)泡體的實(shí)驗(yàn)組，(-)表示對照組符號說明1氣泡片2覆蓋片具體實(shí)施方式
以下，根據(jù)附圖對本發(fā)明的實(shí)施方式進(jìn)行說明。圖1是本實(shí)施方式的活性發(fā)泡體的縱向剖面圖。如圖1所示，本實(shí)施方式的活性發(fā)泡體是在橡膠制氣泡片1的表面和背面層疊有橡膠制覆蓋片2的層疊體。另外，在本實(shí)施方式中，雖然制成在橡膠片1的表面和背面都層疊有覆蓋片2的形式，但是可以制成在表面和背面的任意一面上層疊覆蓋片2的形式，也可以制成不層疊覆蓋片2而只是氣泡片1的形式。
氣泡片1是以橡膠或者是合成樹脂作為主成分的，含有鋯化合物以及/或者鍺化合物和碳的、具有獨(dú)立氣泡結(jié)構(gòu)的發(fā)泡體。獨(dú)立氣泡是通過發(fā)泡劑使其發(fā)泡而形成的。氣泡片1的剖面形狀形成有大量微細(xì)的氣泡。另外，氣泡片1的厚度為約1cm，但并不限于此。
表面和背面的覆蓋片2是通過粘附在氣泡片1的表面和背面而固定的，只要能夠?qū)盈B在氣泡片1上，也可以采用別的方法進(jìn)行固定。另外，覆蓋片2的材料是以氯丁二烯橡膠(CR)為主成分的橡膠片，不含有氣泡，但也可以是使其含有氣泡的形式。還有，覆蓋片2的材料不限定為氯丁二烯橡膠，也可以是別的合成橡膠、天然橡膠或者氯磺化聚乙烯等的合成樹脂。
實(shí)施例以下用實(shí)施例對本發(fā)明的具體實(shí)施方式
進(jìn)行更詳細(xì)的說明，但是本發(fā)明并不限定于以下的實(shí)施例，當(dāng)然可以在本發(fā)明的范圍內(nèi)在實(shí)施例上增加更多的修改以及變更。
首先，做成氣泡片1。以橡膠或者樹脂為基材，根據(jù)表1的配方進(jìn)行配合，在輥筒中混煉。將材料混合的方法沒有特別的限制，可以采用對于一般的橡膠或者合成樹脂的配合物使用的混合方法。接著，將得到的混煉物通過擠壓機(jī)成形為片狀。將該片在加熱空氣下硫化以及發(fā)泡(硫化工序)。該硫化工序分為1次和2次的2個階段來進(jìn)行。通過在2個階段中硫化，氣泡在氣泡片整體中被均勻形成。通過以上的工序，氣泡片1被制造出來。
然后，在氣泡片1的表面和背面上用橡膠類或者合成樹脂類的粘合劑粘合覆蓋片2。接著，在作為表面的一側(cè)施加高電壓。施加電壓的條件為電流為1萬安培～80萬安培，電壓為200～3300V，時間為0.1～0.3秒。另外，優(yōu)選電流越高越好?；钚园l(fā)泡體產(chǎn)生紅外線等電磁波。雖然機(jī)理沒有被闡明，但是推測通過在活性發(fā)泡體的一面施加高電壓，電磁波的方向顯示為指向施加電壓的面。所以，如果將那一面與人體接觸，則可以接觸到在那一面所集中的電磁波，能夠更好地提高疾病的治愈效果。通過以上的工序，完成本活性發(fā)泡體。


(單位重量份)在上述實(shí)施例中的Celogen OTI是P，P′-氧代雙苯磺酰肼(UNIROYAL公司制，美國)，是發(fā)泡劑。鋯石是指通常作為硅酸鹽存在的物質(zhì)(ZrSiO4)。另外，硫化促進(jìn)劑DM指二硫化二苯并噻唑。硬度使用橡膠硬度計C型。
<實(shí)驗(yàn)1>
接著，對于采用活性發(fā)泡體，其給人的體壓以及血流帶來的影響進(jìn)行測定實(shí)驗(yàn)。首先，說明體壓以及血流測定的實(shí)驗(yàn)方法。
<實(shí)驗(yàn)對象>
將1名50多歲的女性作為被實(shí)驗(yàn)者。
<實(shí)驗(yàn)方法>
使用血流以及體壓測定機(jī)器(AMI3037-2，株式會社AMI TECHNO制)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。體壓以及血流傳感器安置在大腿上部，在室溫23℃，濕度55％RH的環(huán)境下，在下述2種條件下進(jìn)行了測定。條件1在椅子上墊上活性發(fā)泡體，在其上面靜坐30分鐘后，對血流量(blood flow)、血液量(blood volume)、血流速度(blood velocity)、以及體壓(body surface contactpressure)進(jìn)行10分鐘測定。條件2作為對照例，在不墊活性發(fā)泡體的椅子上靜坐30分鐘后，對血流量等進(jìn)行10分鐘測定。將其結(jié)果示于表2、圖2～圖5中。表2示出10分鐘的血流量等測定值的平均值。圖2～圖5表示10分鐘的血流量等的測定值的推移。血流量是100g人體組織在1分鐘流動的血流量，通過從毛細(xì)血管中的紅血球反射的光量來測量。血液量是100g人體組織的單位斷面積的血液量，有血液量和血流速度的乘積大致等于血流量的關(guān)系。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表2

由表2、圖2～圖5可知如果使用本活性發(fā)泡體，血液循環(huán)變好，體壓降低。
<實(shí)驗(yàn)2>
<實(shí)驗(yàn)對象>
使用來自于人的培養(yǎng)前列腺癌細(xì)胞(Du145，PC3，LNCap)。LNCap是荷爾蒙依存性的前列腺癌細(xì)胞，Du145和PC3是荷爾蒙非依存性的前列腺癌細(xì)胞。
<實(shí)驗(yàn)方法>
在加入有培養(yǎng)液15ml的直徑10cm的培養(yǎng)皿中，以105細(xì)胞/皿將各前列腺癌細(xì)胞(Du145，LNCap，PC3)分別撒布于皿中，在37℃、5％CO2的條件下，培養(yǎng)7～10日后(準(zhǔn)備期間)，開始實(shí)驗(yàn)。在1個培養(yǎng)皿中撒布1種前列腺癌細(xì)胞。另外，在該準(zhǔn)備期間，不使用活性發(fā)泡體。
然后，實(shí)驗(yàn)開始后，實(shí)驗(yàn)組在用活性發(fā)泡體將各培養(yǎng)皿的上下夾著的狀態(tài)下培養(yǎng)。對照組在沒有活性發(fā)泡體的狀態(tài)下培養(yǎng)。培養(yǎng)液平均3日換1次，各細(xì)胞在達(dá)到飽和狀態(tài)前轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中進(jìn)行繼代培養(yǎng)。繼代培養(yǎng)日因各細(xì)胞而異，但對于各種細(xì)胞的對照組與實(shí)驗(yàn)組而言，繼代培養(yǎng)日相同。
將實(shí)驗(yàn)即將開始前作為0日，在開始后的第1，2，3周回收細(xì)胞，將培養(yǎng)第3周的細(xì)胞固定后用電子顯微鏡觀察(a)。
另外，從將培養(yǎng)第3周的細(xì)胞中提取mRNA(messenger ribonucleicacid，信使核糖核酸)。提取的mRNA雜交到human 1.2K cDNA microarray(Clontech)中，其結(jié)果用GeneSpider(基因解析軟件Silicon Genetics，Redwood，CA，U.S.A)解析。關(guān)于細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá)，用ANOVA聚類分析(b)。
<實(shí)驗(yàn)結(jié)果>
在實(shí)驗(yàn)組中確認(rèn)了如下各前列腺癌細(xì)胞的增殖特征。
(a)在實(shí)驗(yàn)組與對照組的第3周電子顯微鏡像中，確認(rèn)了形態(tài)的差異。即，在與活性發(fā)泡體接觸3周的各癌細(xì)胞中，與對照組(圖6(b))相比，細(xì)胞質(zhì)的液泡多，產(chǎn)生線粒體的內(nèi)部結(jié)構(gòu)的不鮮明化、核膜的不清晰化(圖6(a))。即，明確了在使用了活性發(fā)泡體的細(xì)胞中，產(chǎn)生細(xì)胞凋亡(apoptosis)。
另外，細(xì)胞凋亡是指基因上被程序化的細(xì)胞死亡，即細(xì)胞的自殺。這種細(xì)胞凋亡系統(tǒng)紊亂、持續(xù)增殖的細(xì)胞就是癌細(xì)胞。
(b)還有，關(guān)于cDNA微陣列的第3周的結(jié)果，將作為代表例的DU145的結(jié)果示于圖7中。與對照組相比，mRNA表達(dá)亢進(jìn)，即基因活化的用黑色表示；與對照組相比，mRNA表達(dá)低下，即基因活動低下的用格子圖形表示；與對照組相比，mRNA表達(dá)沒有變化的用灰色表示。
對于Du145而言，實(shí)驗(yàn)組與對照組相比，確認(rèn)增加(up-regution)到FasL(2.3倍)、Fas(1.4倍)、TRADD(1.4倍)、CASP1，4，10(1.7，1.2，1.7倍)、DFF40(1.7倍)。對于PC3而言，實(shí)驗(yàn)組與對照組相比，確認(rèn)增加到CD40(1.4倍)、TNF(1.4倍)。對于LNCap而言，實(shí)驗(yàn)組與對照組相比，確認(rèn)增加到Fas(1.6倍)、CASP8(1.6倍)、CASP3(1.3倍)。另外，F(xiàn)asL，F(xiàn)as，TRADD，CASP1、4、10，DFF40，CD40，TNF是啟動細(xì)胞凋亡途徑的基因群。由上述可知，使用了活性發(fā)泡體的實(shí)驗(yàn)組與對照組相比，細(xì)胞凋亡被促進(jìn)。
<考察>
從以上的實(shí)驗(yàn)可以得知，活性發(fā)泡體啟動癌細(xì)胞的細(xì)胞凋亡途徑，促進(jìn)癌細(xì)胞的活動減弱作用。
<實(shí)驗(yàn)3>
對于人前列腺癌細(xì)胞，使用由活性發(fā)泡體和作為HDACI的SB，進(jìn)行了癌細(xì)胞增殖抑制實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)具體顯示革命性的前列腺癌的治療方法、預(yù)防方法，而且從原理上暗示著對所有癌都有效的可能性。在此，對HDACI進(jìn)行詳細(xì)的說明。HAT(組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶histone acetyl transferase)如果將組蛋白的賴氨酸(lysine)乙?；?，則染色質(zhì)在核內(nèi)被活化。如果染色質(zhì)被活化，則核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子在DNA啟動子(promoter)區(qū)域與激活因子(activator)結(jié)合在一起，啟動結(jié)構(gòu)基因。另外，HDAC(histone deacetylase)引起賴氨酸的脫乙?；谷旧|(zhì)再次不活化。
以SB為代表的HDACI，防止該HDAC的脫乙?；话l(fā)生染色質(zhì)的不活化。因此，HDACI使作用減弱的抑癌基因等活化，起到了抑制癌細(xì)胞增殖的作用。
<實(shí)驗(yàn)對象>
使用來自于人的培養(yǎng)前列腺癌細(xì)胞(Du145，PC3，LNCap)。LNCap荷爾蒙依存性的前列腺癌細(xì)胞，Du145和PC3是荷爾蒙非依存性的前列腺癌細(xì)胞。
<實(shí)驗(yàn)方法>
將各個103細(xì)胞/100μl濃度的各前列腺癌細(xì)胞(Du145，LNCap，PC3)在96孔培養(yǎng)板(96well plate)中培養(yǎng)。在用活性發(fā)泡體的實(shí)驗(yàn)組中，在板中添加6μl的0、1、2、3mM的SB，用活性發(fā)泡體將板上下夾著。該加入SB的培養(yǎng)液，每兩天換一次培養(yǎng)液。在對照組中，不使用活性發(fā)泡體培養(yǎng)，添加6μl的0、1、2、3mM的SB。在0mM的SB中，添加等量(6μl)的PBS(Phosphate buffer saline，磷酸緩沖食鹽水)。上述實(shí)驗(yàn)在各濃度下進(jìn)行4系列。
在培養(yǎng)的第2、5、8日，通過細(xì)胞增殖試劑盒(Cell Proliferation Kit II(XTTRoche，Manheim，Germany))，用光學(xué)密度(O.D.optical density)450nm對活細(xì)胞進(jìn)行測定(減去空白的650)。
另外，Cell Proliferation Kit II是測定由XTT標(biāo)準(zhǔn)混合液和線粒體脫氫酶活性而生成的甲臜(フオルマザン)色素，從而定量細(xì)胞生存率。其中，XTT是脫氫酶的基質(zhì)，利用通過脫氫酶將XTT還原成甲臜的性質(zhì)。因此，甲臜量與活細(xì)胞數(shù)相對應(yīng)。
<實(shí)驗(yàn)結(jié)果>
如果使用活性發(fā)泡體，不管各人前列腺癌細(xì)胞是否有荷爾蒙依存性，在使用活性發(fā)泡體的組中即使SB濃度低(1mM)，與沒有使用活性發(fā)泡體的高濃度(3mM)SB或更高的組相比，其有意義地抑制了前列腺癌細(xì)胞的增殖(圖8～10)。即，活性發(fā)泡體與SB共同作用，明確地抑制了人前列腺癌細(xì)胞的增殖。
<考察>
由上述實(shí)驗(yàn)可以得出如下結(jié)論。根據(jù)圖8～10，通過同時使用活性發(fā)泡體與HDACI，活性發(fā)泡體能夠促進(jìn)HDACI的抑制人前列腺癌細(xì)胞的增殖效果。從原理上看，可以認(rèn)為該方法是對所有癌都有效的治療法。另外，SB本來是人體內(nèi)存在于腸管內(nèi)的物質(zhì)，是不發(fā)生過敏反應(yīng)等的物質(zhì)。所以，在本實(shí)驗(yàn)中，在被證明有效性的1mM濃度下，對于生物體的毒性非常少，沒有過敏等副作用。
另外，過剩的HDAC與染色質(zhì)重塑因子(chromatin remodeling factor)等共同作用，使胞嘧啶(cytosine)甲基化，在抑制癌細(xì)胞的增殖方面起作用。
工業(yè)上的可利用性本活性發(fā)泡體，在給與藥物時，如果使其與人體直接或者間接接觸來使用，可以提高藥物制劑的效果。另外，即使是如果大量使用就有副作用的藥物制劑，只要與本活性發(fā)泡體并用，則少量即可，所以可以抑制副作用。
權(quán)利要求
1.一種活性發(fā)泡體，其特征為其是由含有鋯化合物以及/或者鍺化合物的天然或者合成橡膠或者合成樹脂制成的，具有獨(dú)立氣泡結(jié)構(gòu)，在給與藥物時，使其與人體直接或者間接接觸來使用。
2.一種活性發(fā)泡體，其特征為其是由含有鋯化合物以及/或者鍺化合物和碳的天然或者合成橡膠或者合成樹脂制成的，具有獨(dú)立氣泡結(jié)構(gòu)，在給與藥物時，使其與人體直接或者間接接觸來使用。
3.如權(quán)利要求1或者2所述的活性發(fā)泡體，其特征為所述藥物制劑為抗癌劑。
4.如權(quán)利要求3所述的活性發(fā)泡體，其特征為所述藥物制劑為來自于人的具有抗癌效果的物質(zhì)。
5.如權(quán)利要求4所述的活性發(fā)泡體，其特征為所述來自于人的具有抗癌效果的物質(zhì)是組蛋白脫乙?；敢种苿?。
6.如權(quán)利要求1～5中的任一項(xiàng)所述的活性發(fā)泡體，其特征為所述氣泡形成20～30個/mm2。
全文摘要
本發(fā)明提供一種活性發(fā)泡體，其特征為其是由含有鋯化合物以及/或者鍺化合物的天然或者合成橡膠或者合成樹脂制成的，具有獨(dú)立氣泡結(jié)構(gòu)，在給與藥物時，使其與人體直接或者間接接觸來使用。通過使本活性發(fā)泡體與人體直接或者間接接觸，能夠促進(jìn)血液循環(huán)、改善體質(zhì)、促進(jìn)疾病的治愈。而且沒有副作用。
文檔編號A61K35/00GK1953758SQ20058000186
公開日2007年4月25日 申請日期2005年5月16日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月29日
發(fā)明者山本富造 申請人:山本富造, 島博基