專利名稱：一種治療骨折的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療骨折的藥物組合物，該藥物組合物的有效組分為從淫羊藿或其它淫羊藿屬植物藥中提取的總黃酮和從三七中提取的三七總皂苷。
背景技術(shù)：
骨折是一種由外傷所致的以骨折病變?yōu)橹鞯募膊?。近十多年來發(fā)病率上升很快，尤其是骨質(zhì)疏松性骨折愈合困難，甚至不愈合，目前各種療法效果均不確切，因此如何促進衰老骨的修復(fù)重建關(guān)系到老年人的生活質(zhì)量和壽命。目前，國外及國內(nèi)西醫(yī)臨床治療骨折的主要方法是使用普通活血化瘀、通絡(luò)止痛劑、或提供外援性固定等。
中藥促進骨折愈合的機理主要是改善血液循環(huán)，糾正血液流動狀態(tài)及抗凝的過程，其作用有三(1)防止較大的血腫形成，及時預(yù)防和消除血凝塊，縮小無菌性炎癥范圍，從而縮小軟骨內(nèi)化骨的范圍。(2)改善血管壁的通透性，從而有利于離子交換，提高骨折局部微量元素的含量以及促進骨折部位鈣鹽的沉積。(3)刺激骨折局部骨基質(zhì)膠原的合成以及骨生長因子的分泌與合成。
骨折愈合過程是一個復(fù)雜的組織學(xué)、生物學(xué)、內(nèi)分泌學(xué)及生物力學(xué)的動態(tài)過程。臨床上，各種原因所致的骨折延遲愈合和骨折不愈合是常見病，又是骨傷科當前一大難題。利用生物力學(xué)，組織學(xué)、免疫組化和分子生物學(xué)等方法，特別是應(yīng)用免疫組化和原位雜交技術(shù)來研究中藥對各種細胞因子及膠原的影響，有助于進一步探討中藥促進骨折愈合的作用機制。
骨不愈合及延遲愈合的最佳治療方法是自體骨移植。然而，合適的移植骨是有限的，且移植后會增加供骨部位的發(fā)病率。目前，骨不愈合或延遲愈合的治療原則已有進步，目標是提供無損傷、并發(fā)癥少及安全的治療.骨折愈合是一個極其復(fù)雜的生物學(xué)修復(fù)過程，約有5％-10％的骨折因各種原因發(fā)生骨延遲愈合或不愈合，而需進一步手術(shù)治療。具有傳導(dǎo)成骨和誘導(dǎo)成骨的自體骨移植雖能促進骨折愈合，但存在著供骨量有限和供骨區(qū)并發(fā)癥等缺點。為避免手術(shù)并發(fā)癥，促進骨折愈合，許多新的中醫(yī)藥治療方法已被廣泛應(yīng)用于臨床，且取得了較好的療效。近年來國內(nèi)臨床用中醫(yī)藥治療該病的治愈率遠遠高于西藥療法。但目前絕大部分為傳統(tǒng)口服或外用制劑，如接骨續(xù)筋片，正骨水，跌打紅藥片等，缺乏劑型先進、起效快，療效好的中藥制劑。如何促進骨折愈合而縮短其愈合時間，減少并發(fā)癥的發(fā)生，一直是大家所關(guān)心并亟待解決的問題，也是骨科界近年來研究的熱點之一。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的就是提供一種治療骨折的藥物組合物。
本發(fā)明在有效成分和藥理作用研究的基礎(chǔ)上，將從淫羊藿或其它淫羊藿屬植物藥中提取的總黃酮與從三七中提取的總皂苷配伍，發(fā)現(xiàn)該組合物具有優(yōu)良的活血化瘀，通絡(luò)止痛，補腎壯骨和接骨續(xù)筋功效，從而完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的藥物組合物包含從淫羊藿或其它同屬植物藥中提取的總黃酮和從三七中提取的三七總皂苷。其中，淫羊藿總黃酮含有淫羊藿苷，朝藿定B，朝藿定c等黃酮類化合物，三七總皂苷包含人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1和三七皂苷R)等皂苷類成分。
在本發(fā)明的藥物組合物中，淫羊藿總黃酮與三七總皂苷的重量比為1∶1-8或1-8∶1，重量比的優(yōu)選范圍為1-2∶1-3；其重量比的最佳值為1∶1。
在本發(fā)明的藥物組合物中，淫羊藿總黃酮可采用水或醇溶劑，乙醇-大孔樹脂或正丁醇等常規(guī)的黃酮提取純化方法從淫羊藿或其它同屬植物藥中提取得到；三七總皂苷可采用醇-大孔樹脂或正丁醇等常規(guī)的皂苷提取純化方法從三七中提取得到。詳細提取純化工藝可參考《中藥化學(xué)成分提取分離手冊》(楊云主編，中國中醫(yī)藥出版社，1998年第一版)。
本發(fā)明的藥物組合物可通過臨床上常用的各種給藥途徑給藥，如口服給藥，注射給藥，皮膚給藥。
本發(fā)明的藥物組合物可選用藥學(xué)上可接受的各種附加劑，包括填充劑，濕潤劑，粘合劑，崩解劑，表面活性劑，稀釋劑，潤滑劑等。
本發(fā)明的藥物組合物以淫羊藿總黃酮與三七總皂苷之比為1∶1-8或1-8∶1為主，再根據(jù)不同的給藥途徑配有不同的輔劑制成不同的劑型，例如加入一定量經(jīng)丙纖維素等制成片劑；加入一定量微粉硅膠等制成膠囊劑；制成針劑采用加適量吐溫80，再加注射用水，等等。采用本領(lǐng)域常規(guī)制劑技術(shù)即可把本發(fā)明藥物組合物制成藥學(xué)上的各種制劑，包括普通制劑和緩(控)釋制劑，如片劑、透皮吸收劑，膠囊劑、顆粒劑、口服液、滴九、緩釋微丸、注射液、注射用凍干和粉針劑等。
方解淫羊藿與骨折根據(jù)中醫(yī)“腎主骨”的理論，用補腎中藥淫羊羹可以促進骨折愈合；證明中醫(yī)“腎主骨”理論有其一定的組織形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。補腎中藥有調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-性腺軸的功能，淫羊羹具有性激素祥作用，而性激素能使骨的生長速度顯著增快，所以淫羊藿是通過調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)來促進骨折愈合的。
淫羊藿具有如下作用(1)促進骨痂生長淫羊童組前期的礦化骨痂面積及其均寬明顯大于對照組，P＜0.01，說明在骨折愈合早期淫羊藿能促進骨痂生長，結(jié)合同期動態(tài)參數(shù)可見，骨形成率(面積、體積和BMU水平)都大于對照組，P＜0.05，而骨再建周期卻明顯小于對照組，P＜0.05。因此可以認為，淫羊羹促進骨痂生長使其數(shù)量增加的關(guān)健在于促進了基本多細胞單位(BMU)水平上的骨形成，同時縮短了骨再建單位(BRU)的轉(zhuǎn)換周期，加快了骨痂的再建，使骨痂代謝(吸收與形成)出現(xiàn)正平衡，結(jié)果使骨痂量增多。而大量礦化骨痂的出現(xiàn)使骨折端得到良好的固定。有實驗表明，淫羊羹能通過促進雞胚股骨蛋白多糖的合成活性而促進試管內(nèi)雞胚股骨的生長。(2)提高成骨細胞的活性骨折后期淫羊藿組成骨細胞活性明顯大于對照組(P＜0.05)，而且其骨形成率(BMU)也顯著高于同期對照組，P＜0.05，說明淫羊藿在骨折愈合后期能提高成骨細胞的活性，并在BMU水平上產(chǎn)生新的有效骨痂。產(chǎn)生這樣的效果的原因，可能與淫羊藿含有豐富的錳、鋅等微量元素有關(guān)。因為錳、鋅等是膠原超氧化歧化酶的重要輔酶，對成骨細胞的活動起著積極的調(diào)節(jié)作用。鋅對骨的生長發(fā)育極為重要，能促進骨折愈合。(3)促進基質(zhì)的鈣化骨痂的鈣化是骨折愈合過程中關(guān)鍵的一環(huán)，也是最終目的，它影響著骨痂的質(zhì)量。研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿組前后期的礦化表面百分比都明顯多于同期對照組，P＜0.05，說明淫羊藿能促進骨痂的礦化，增加骨痂的鈣鹽沉積，產(chǎn)生大量的骨性骨痂。淫羊羹組后期的礦化延遲時間明顯短于對照組P＜0.05，則又說明淫羊藿組的成骨細胞分泌合成類骨質(zhì)后在較短的時間內(nèi)即開始鈣化，而同期對照組則需較長的時間才開始鈣化。證明淫羊藿能加速骨痂的鈣化，有利于骨折愈合。另外，淫羊藿組后期的類骨質(zhì)面積及均寬都明顯少于對照組P＜0.05，亦說明淫羊藿能促進類骨質(zhì)鈣化，結(jié)果導(dǎo)致類骨質(zhì)比對照組少。(4)提高破骨細胞的活性及數(shù)量，加速骨痂的改建破骨細胞的功能大小及數(shù)量的多少，直接影響著骨折的愈合。在骨折愈合早期，它能吸收清除血腫、組織碎片及壞死骨碎片，為骨折修復(fù)鋪平道路；到后期，破骨細胞能吸收掉老或無用的骨痂，對骨痂進行改建，使髓腔再通。淫羊藿組前期吸收性陷窩百分比、骨吸收率(BMU)及破骨細胞活性，后期吸收性陷窩百分比、活性吸收面百分比及破骨細胞指數(shù)都明顯大于對照組(P＜0.05)；說明淫羊藿能提高破骨細胞活性，增加破骨細胞數(shù)量，加速血腫吸收和骨痂的改建，使髓腔較對照組提前再通，促進骨折的愈合。
三七與骨折中醫(yī)認為，三七具有活血、止痛、止血、散瘀消腫等功效。三七總苷是三七的主要成分，具有抗炎效應(yīng)，其藥理作用的研究已有許多報道。研究表明在治療心腦血管疾病方面有很好的作用，有抗心律失常、舒張血管、抗血栓、增加冠狀流量、改善血流變和微循環(huán)、降血脂及抗動脈粥樣硬化等作用。三七是骨傷科最為常用的藥物之一。有研究表明三七總甙可降低TNF-amRNA的表達。TNF可刺激破骨細胞形成和促進骨吸收，抑制成骨細胞ALP生成并減少細胞內(nèi)鈣含量，抑制骨形成和鈣化。TNF-a是強有力的骨吸收誘導(dǎo)劑，且必須在成骨細胞存在時發(fā)揮作用。同時三七總皂苷(total Panax notoginsengsaponins，tPNS)能特異性地阻斷受體操縱性的鈣離子通道，具有活血祛瘀，通脈止血，保護脊髓、視神經(jīng)及心腦缺血性損傷等作用。有實驗提示三七總皂苷可抑制鈣離子內(nèi)流，減輕脊髓和視神經(jīng)損傷過程中由于鈣離子內(nèi)流所引起的損傷，對神經(jīng)元有保護和促進修復(fù)作用作用，使骨折部位提前愈合，并且使其達到或接近骨折前的功能。
本發(fā)明配制的藥物組合物采用常規(guī)的藥效及毒性試驗經(jīng)試驗結(jié)果如下一、對家兔骨折模型的影響動物分組取家免42只，隨機分為三組，每組14只，分別為模型組(等體積生理鹽水)，試驗組大劑量組(61.6mg/kg，相當于3.20g生藥/kg)，小劑量組(15.4mg/kg，相當于0.80g生藥/kg)。
骨折模型的制作適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，家兔用3％戊巴比妥鈉溶液按1ml/kg劑量靜脈麻醉后，兩側(cè)前肢剪毛，75％酒精消毒，在無菌條件下用醫(yī)用手術(shù)牙科鉆在兩側(cè)撓骨中上段1/3交界處橫形鉆成寬約為3mm，深入骨髓腔形成骨損傷，縫合皮膚，手術(shù)后次日開始給藥，連續(xù)給藥，給藥后第14、28天取各組家兔中的7只，測定各項指標。
骨密度測定分別于14、28天截取兩側(cè)撓骨，其長度包括骨損傷及上、下各正常段骨質(zhì)，用美國LUNAR公司Piximusbonedensito-meter測定儀測定骨密度，觀察骨折愈合情況。
血生化測定用全自動生化分析僅測定血清中的鈣、磷，堿性磷酸酶等指標。
病理形態(tài)截取兩側(cè)撓骨，其長度包括骨損傷及上下各正常段骨質(zhì)，置于10％福爾馬林內(nèi)固定，經(jīng)脫鈣后常規(guī)石蠟包埋，切片厚4～5um，HE染色，根據(jù)損傷處結(jié)締組織、軟骨、骨增生修復(fù)的程度，分為五級，以骨組織占所有增生組織(包括結(jié)締組織、軟骨、骨組織)的比例記分，骨組織占1/5者記為1分，骨組織占2/5者記為2分，依此類推，損傷處完全由骨組織取代者(骨組織占5/5)記為5分，并依據(jù)修復(fù)程度分為+骨組織修復(fù)輕度，++中度，+++重度，++++基本修復(fù)，+++++完全修復(fù)。分值越高，提示療效越好。
表1對家兔骨折模型骨密度的影響(X±SD)
注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.01以上實驗結(jié)果表明連續(xù)給藥14天后，大劑量組的骨密度增加，與模型組比較有顯著性差異P＜0.01，小劑量組也有顯著差異P＜0.05。給藥28天后可見大劑量組與模型組比較有差異P＜0.01。并且28天的骨密度比14天的增大，結(jié)果表明該藥可以加快骨礦沉積速率，提高骨密度，促進家兔骨損傷部位愈合。
表2對家兔骨折后血清ALP、磷、鈣的影響(14dX±SD)
表3對家免骨折后血清ALP、磷、鈣的影響(28dX±SD)
注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.01以上實驗結(jié)果表明給藥14、28天后，該藥物大劑量組能顯著升高血清中的ALP，鈣，磷含量。
表4對骨損傷14天后家兔病理形態(tài)的影響
表5對骨損傷28天后家兔病理形態(tài)的影響
骨折后修復(fù)早期表現(xiàn)為纖維組織增生，以后出現(xiàn)軟骨化生，類骨基質(zhì)形成，最后形成骨組織。損傷后14天顯示模型組修復(fù)狀況較其他各組差，而該藥高劑量組損傷后修復(fù)較小劑量組好。損傷后28天高劑量組修復(fù)最好，多數(shù)兔(6/7例)骨創(chuàng)傷處已全為骨小梁修復(fù)。模型組修復(fù)狀況最差，明顯低于實驗組。
二、本發(fā)明藥物組合物的毒性試驗注試驗方法參考《中藥新藥研究的技術(shù)要求》取昆明種小鼠140只，雌雄各半，隨機分成7組，分別口服和腹腔注射本發(fā)明藥物組合物，連續(xù)觀察7天，記錄動物毒性反應(yīng)、體重變化及死亡情況，用Bliss計算小鼠的半數(shù)致死量(LD50)，結(jié)果為口服8023mg/kg，腹腔注射62lmg/kg，毒性極低。
本藥品具有如下優(yōu)點(1)改善血液循環(huán)，促進血腫的吸收和機化 骨折愈合需要新生血管參與，成骨細胞的生長機能也要依賴血供狀態(tài)。三七和淫羊藿具有較明顯的改善外周循環(huán)作用，并認為通過這種作用，使血腫逐漸吸收機化。
(2)促進骨折部位骨基質(zhì)鈣鹽沉積 在骨折愈合過程中，鈣鹽沉積是一個突出的關(guān)鍵步驟，骨組織的修復(fù)必須經(jīng)過基質(zhì)的鈣化過程，才能趨于完成。實驗研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿能促進骨痂的鈣化，增加骨痂的鈣鹽沉積。實驗證實三七通過其促進再吸收作用能把骨折臨近部位的鈣更多地動員出來沉積到骨折部位，以利骨折愈合。
(3)提高骨痂的質(zhì)量和生物力學(xué)性能 新骨組織的機械強度與基質(zhì)鈣化的程度密切相關(guān)，骨的無機鹽含量高，其內(nèi)在強度大，即骨鈣狀況與骨的力學(xué)性能存在顯著的相關(guān)性。有實驗表明三七和淫羊藿可促進骨痂的鈣化程度，說明應(yīng)用本制劑后對骨骼強度的增加有明顯影響。
(4)提高成骨細胞的活性及指數(shù) 實驗研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿在骨折愈合過程中的早期是通過提高成骨細胞的數(shù)量來大量合成類骨質(zhì)的，而后期則是通過提高成骨細胞的活性來促進骨痂的生長。體外實驗表明，淫羊藿提取液對可抑制骨髓細胞誘導(dǎo)破骨細胞的形成以減少破骨細胞的產(chǎn)生。研究證明三七有促進骨原細胞增殖，使細胞內(nèi)DNA合成加速，成骨細胞機能活躍。
(5)刺激骨生長因子的分泌與合成 該藥無能夠刺激骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)的合成，BMP的主要生物學(xué)作用是作用于未分化的有成骨潛能的間充質(zhì)細胞表面受體，在一定環(huán)境下，誘導(dǎo)間充質(zhì)細胞分化成軟骨細胞和骨細胞，進而產(chǎn)生新骨。用免疫組化技術(shù)進行圖像定量分析，結(jié)果表明該藥劑能促進骨折修復(fù)細胞的增殖，增加成骨細胞的活性，誘導(dǎo)BMP合成，加速骨折愈合。
(6)加速骨質(zhì)疏松性骨折愈合 研究證實，淫羊藿可以促進成纖維細胞成骨表型表達并促進細胞增殖，與三七合并應(yīng)用治療復(fù)雜骨質(zhì)疏松性骨折或骨折伴巨大骨缺損者也獲得了滿意的療效。
(7)對陳舊性骨折延遲愈合和骨折不愈合的治療效果明顯 雖然外科治療骨折不愈合或延遲愈合及陳舊性骨折療效確切，但是存在很多嚴重并發(fā)癥。為避免手術(shù)并發(fā)癥，促進骨折愈合。臨床上5％-10％的骨折發(fā)展為延遲愈合或不愈合。因此，采用本制劑以加速并促進骨折愈合，不僅可提高骨折治療和骨科手術(shù)的成功率，又可縮短療程，迅速恢復(fù)功能。
(8)充分利用中醫(yī)“腎主骨”的理論 補腎中藥有調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-性腺軸的功能，淫羊藿具有性激素祥作用，而性激素能使骨的生長速度顯著增快，所以淫羊藿是通過調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)來促進骨折愈合的。用補腎中藥淫羊藿可以促進骨折愈合。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步闡述，但不對其有任何限制。
實施例一選用下列用量的藥物組合物與附加劑
淫羊藿總黃酮100g，三七總皂苷100g，徑丙纖維素130g，微粉硅膠30g，預(yù)膠化淀粉20g，硬脂酸鎂適量，制成1000片。
將上述藥物組合物與附加劑混合均勻，用10％預(yù)膠化淀粉漿作為粘合劑，濕法制粒，烘干，加入適量硬脂酸鎂混合，壓制成片劑。
實施例二選用下列用量的藥物組合物與附加劑淫羊藿總黃酮150g，三七總皂苷100g，經(jīng)丙纖維素60g，微粉硅膠30g，乙醇適量，硬脂酸鎂適量，制成1000粒。
將上述藥物組合物與經(jīng)丙纖維素及微粉硅膠混合，用適量70％乙醇做濕潤劑，濕法制粒，過40目篩制成顆粒，烘干，加入硬脂酸鎂，混合，裝入硬膠囊。
實施例三選用下列用量的藥物組合物與附加劑淫羊藿總黃酮100g、三七總皂苷150g、乳糖20g、羥丙纖維素30g、聚乙烯吡咯烷酮(PVPK30)適量、羧甲級纖維素適量，制成1000片。
將上述藥物組合物與經(jīng)丙甲纖維素、乳糖及徑丙纖維素混合均勻，加入10％PVP乙醇溶液作粘合劑，濕法制粒，烘干，加硬脂酸鎂，混勻，壓制成片。
實施例四選用下列用量的藥物組合物與附加劑淫羊藿總黃酮150g、三七總皂苷50g、聚乙二醇6000350g、硬脂酸5％、制成1000粒。
將苫淫羊藿總黃酮和三七總皂苷研細(100目篩)，與聚乙二醇6000和硬脂酸混勻，邊攪拌邊加熱(90-100℃)，持全部熔化后，料液在80-85℃保溫條件下控速滴入甲基硅油冷凝液中，冷凝成丸。
實施例五選用下列用量的藥物組合物與附加劑淫羊藿總黃酮20g、三七總皂苷20g、蔗糖200g、防腐劑適量蒸餾水適量，制成1000ml。
取蒸餾水適量，加入淫羊藿總黃酮和三七總皂苷，邊加熱邊攪拌使溶解，過濾。另將蔗糖和防腐劑用蒸餾水加熱溶解，在攪拌下緩緩加入上述溶液中，加蒸餾水至全量，混勻，冷藏，過濾，灌封，滅菌，制得口服液。
實施例六選用下列用量的藥物組合物與附加劑淫羊藿總黃酮5g、三七總皂苷5g、吐溫80適量、注射用水適量，制成1000ml。
取適量注射用水，加入淫羊藿總黃酮和三七總皂苷，加熱，攪拌使充分溶解，加入4％吐溫80，充分攪勻，過濾，加氫氧化鈉調(diào)pH至6.5，加注射用水至足量，中空纖維超濾，精濾，灌封，滅菌，得注射液。
實施例七選用下列用量的藥物組合物與附加劑淫羊藿總黃酮100g、三七總皂苷100g、吐溫80適量、注射用水適量、制成1000支。
取適量注射用水，加入淫羊藿總黃酮和三七總皂苷，加熱，攪拌使充分溶解，過濾，加氫氧化鈉調(diào)pH至6.5，加注射用水至足量，中空纖維超濾，精濾，灌裝，冷凍干燥，制得注射用凍干制劑。
權(quán)利要求
1.一種治療骨折的藥物組合物，其特征在于它包含的有效組分為淫羊藿和三七，淫羊藿與三七的重量比范圍為1∶1-8或1-8∶1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療骨折的藥物組合物，其特征在于所述的淫羊藿包括淫羊藿藥材，或淫羊藿總黃酮，或淫羊藿總多糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種治療骨折的藥物組合物，其特征在于所述的淫羊藿總黃酮包括含有淫羊藿苷，朝藿定B、朝藿定c基黃酮類化合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療骨折的藥物組合物，其特征在于所述的三七包括三七總皂苷，或多糖類成分。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種治療骨折的藥物組合物，其特征在于所述的三七總皂苷包含人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1和三七皂苷R1皂苷類化合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療骨折的藥物組合物，其特征在于所述的淫羊藿與三七重量比的優(yōu)選范圍為1～2∶1～3。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療骨折的藥物組合物，其特征在于所述的淫羊藿與三七重量比的最佳值為1∶1
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療骨折的藥物組合物，其特征在于可制成的劑型包括片劑，顆粒劑，膠囊劑，滴丸劑，溶液劑，緩控釋劑，注射液，注射用粉針劑和凍干制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療骨折的藥物組合物，該藥物組合物含有一定比例淫羊藿和三七，根據(jù)不同的給藥途徑，配有不同的輔料制成不同的劑型。
文檔編號A61P19/00GK1806814SQ20051004779
公開日2006年7月26日 申請日期2005年11月24日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月24日
發(fā)明者王學(xué)東, 呂志會, 馬占之, 李志強, 曹翠香 申請人:沈陽雙鼎制藥有限公司