專利名稱：：含有磷?；喾拥木植渴┯媒M合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于施加到皮膚上的組合物。特別地，本發(fā)明涉及含有穩(wěn)定化多酚化合物的局部施用組合物。
背景技術(shù)：
：被稱為多酚的一組化合物顯示出多種多樣的生物活性，且廣泛用于治療皮膚的局部配方內(nèi)。許多多酚的特別廣泛利用的一種功能是作為抗氧化劑。在這一角色下，這些化合物可起到兩個作用它們可保護它們在其內(nèi)被輸送的組合物以免受氧化降解，以及提供對它們所施加到其上的皮膚的保護以免受自由基破壞。然而，令人啼笑皆非的是，這些保護分子本身易于受到外部來源的損壞。這些多用途化合物對通過暴露于熱或光下的降解是高度敏感的，常常導(dǎo)致它們所包含在其內(nèi)的組合物的變色，以及減少其當(dāng)施加到皮膚上時的效力。由于這一弱點，其可利用性的真正范圍尚未被完全實現(xiàn)。含有未保護的多酚的組合物不可能發(fā)揮其全部的生物潛力，且提供保存其活性所需的保護性包裝或特殊操作在成本上太高，以致于在商業(yè)上大規(guī)模的情況下是不可行的。因此，繼續(xù)需要具有改進(jìn)的穩(wěn)定性和保留的生物活性的含有多酚的組合物。
發(fā)明內(nèi)容發(fā)明概述本發(fā)明提供含有至少一種磷酰化多酚和局部施用可接受的載體的局部施用組合物；與未改性的多酚相比，這些組合物提供更大的生物活性穩(wěn)定性以及可實現(xiàn)組成的完整性。本發(fā)明的組合物尤其可用于清除皮膚上的自由基，和治療和減少皮膚上的老化癥狀的方法中。本發(fā)明還提供在皮膚上延緩釋放多酚的方法，該方法包括將含有至少一種磷?；喾雍途植渴┯每山邮艿妮d體的組合物施加到皮膚上。本發(fā)明還提供使不溶性多酚變?yōu)樗苄缘姆椒?，該方法包括將不溶性多酚磷?；阶阋允沟枚喾幼優(yōu)樗苄缘某潭?。附圖簡述圖1在上部圖表中是白藜蘆醇未磷?；钠鹗疾牧系腍PLC分析，和在下部圖表中是高度磷?；陌邹继J醇的HPLC分析。圖2是當(dāng)用來自麥胚的酸性磷酸酶培育時，來自磷?；邹继J醇的白藜蘆醇形成的時間函數(shù)關(guān)系。圖3是當(dāng)用人類SCD-鱗屑(squame)膠帶剝離物(tapestripping)中的可提取級分培育時，來自磷?；邹继J醇的白藜蘆醇形成的時間函數(shù)關(guān)系。圖4是用增加濃度的來自麥胚的酸性磷酸酶培育時，磷?；邹继J醇的體外抗氧化活性的恢復(fù)。發(fā)明詳述本發(fā)明的組合物利用多酚的磷酸酯作為活性組分。該活性組分是已通過將分子上的一個或多個羥基磷?；€(wěn)定化的多酚分子。盡管分子的磷?；瘜?dǎo)致對降解敏感度的下降，但當(dāng)除去磷酸酯基時，改性的化合物保持未改性多酚分子固有的生物活性。在一個實施方案中，本發(fā)明的組合物包含由式ROP(O)(OH)2、ROP(O)(OH)OP(O)(OH)2或ROP(O)(OH)OP(O)(OH)OP(O)(OH)2表示的多酚的磷酸酯，和/或這些之一的金屬鹽，其中R表示有機多酚分子，所述有機多酚分子可被改性為含有一個或多個磷酸酯基。在組合物中使用的多酚可以是化妝品或者藥物上可接受的用于局部施用到哺乳動物皮膚上的任何多酚?！盎瘖y品或者藥物上可接受的”是指可在哺乳動物皮膚、毛發(fā)或指甲上，優(yōu)選在人類皮膚、毛發(fā)或指甲上以安全和有效量使用的化合物。生物活性的多酚是廣泛已知的，且容易在天然來源，例如從各種植物提取物中發(fā)現(xiàn)?？捎糜诒景l(fā)明組合物中的多酚應(yīng)理解為包括天然存在的多酚，多酚的合成衍生物，以及含有至少一種多酚類組分的植物提取物。在本發(fā)明的一個實施方案中，待磷?；亩喾訛榫哂幸粋€帶至少一個羥基的芳環(huán)的簡單化合物形式。這類化合物具有下述通式其中R1、R2、R3、R4、R5彼此獨立地各自表示氫、氫氧根(hydroxide)、羧基、Z、OZ或COOZ，優(yōu)選其中取代基R1、R2、R3、R4、R5中的至少一個是羥基或羧基，Z是由1-10個碳原子組成的烷基鏈，或者是CHCHCOOY，其中Y＝氫或1-4個碳原子的烷基鏈。優(yōu)選，多于一個R取代基是羥基。這一組中典型的化合物包括具有兩個羥基的兒茶酚、連苯三酚、愈創(chuàng)木酚和間苯二酚；具有三個羥基的連苯三酚和羥基酸及其酯，例如沒食子酸、沒食子酸甲酯、沒食子酸乙酯、沒食子酸丙酯和沒食子酸辛酯；具有一個羥基和一個羧基的水楊酸；和羥基肉桂酸與酯，其中一個R基是乙烯基類酸或酯，例如對香豆酸、咖啡酸、阿魏酸、芥子酸(sinapticacid)、綠原酸、姜黃和其中羧酸基用具有1-10個碳原子的簡單醇酯化的類似物。然而，在優(yōu)選的實施方案中，待磷?；目删植渴褂玫亩喾邮沁x自通常稱為單寧的化合物中的更加復(fù)雜的分子。單寧包括兩個主要的類別，縮合單寧和可水解單寧。本發(fā)明的磷酰化單寧可一般地用下述通式表示ArOP(O)(OH)2產(chǎn)品、ArOP(O)(OH)OP(O)(OH)2或ArOP(O)(OH)OP(O)(OH)OP(O)(OH)2產(chǎn)品和/或這些之一的金屬鹽；其中Ar表示縮合或可水解單寧。在E.Haslam為編者的標(biāo)準(zhǔn)著作“Chemistryofvegetabletannins(植物單寧化學(xué))”，AcademicPress，倫敦，1966中充分公開了可水解和縮合單寧二者及其實例，其內(nèi)容在此通過參考引入。縮合單寧由下述酚衍生物組成，所述酚衍生物是具有至少兩個芳環(huán)的較大結(jié)構(gòu)的一部分，且不能完全被水解，因為至少一個酚環(huán)通過至少一個碳碳鍵(單鍵或雙鍵)或醚鍵連接到該分子的另一部分上?？s合單寧可以是用下述通式表示或者對應(yīng)于下述通式的縮合單寧其中-A和B是通過單鍵或雙鍵連接的碳原子，-D是氫，氫氧根，或者用沒食子酸或鞣花酸酯化的氫氧根，-E是氫、氫氧根、O-葡萄糖或?qū)?yīng)于式(I)或(II)的另一縮合單寧，-R是氫、氫氧根、O-葡萄糖、含有1-3個碳原子的O-烷基，或選自O(shè)P(O)(OH)2、OP(O)(OH)OP(O)(OH)2、OP(O)(OH)OP(O)(OH)OP(O)(OH)2和這些磷酸酯基的金屬鹽的磷酸酯基，其中至少一個R是磷酸酯基。典型的產(chǎn)品種類是類黃酮、芪和間苯三酚，其中每一類都含有可局部使用的多酚。在一個優(yōu)選的實施方案中，縮合單寧是類黃酮。類黃酮可定義為具有下述通式(I)或(II)的結(jié)構(gòu)的化合物其中-A和B是通過單鍵或雙鍵連接的碳原子，-D是氫，氫氧根，或者用沒食子酸或鞣花酸酯化的氫氧根，-E是氫、氫氧根、O-葡萄糖或?qū)?yīng)于式(I)或(II)的另一磷?；慄S酮，-R是氫、氫氧根、O-葡萄糖、含有1-3個碳原子的O-烷基，或選自O(shè)P(O)(OH)2、OP(O)(OH)OP(O)(OH)2、OP(O)(OH)OP(O)(OH)OP(O)(OH)2和這些磷酸酯基的金屬鹽的磷酸酯基，其中至少一個R是磷酸酯基。黃烷醇、黃酮醇、黃酮、黃烷酮、異黃烷、異黃烷酮全部屬于以上定義的類黃酮種類。這些術(shù)語是本領(lǐng)域的技術(shù)人員公知的(參見，例如Peterson等人，(1998)，JAmDietAssoc98682-5)，且在局部施用中具有寬范圍的可應(yīng)用性。這種類黃酮可在天然產(chǎn)物，例如植物提取物內(nèi)，作為更復(fù)雜得多的結(jié)構(gòu)形式，例如作為以上定義的通式結(jié)構(gòu)的二聚體或者低聚物形式，或者作為甚至更加復(fù)雜的其衍生物形式存在。在磷?；s合單寧類別中的一些優(yōu)選的化合物是根據(jù)式(III)的化合物其中-R1是氫、氫氧根O-葡萄糖、含有1-3個碳原子的O-烷基，或選自O(shè)P(O)(OH)2、OP(O)(OH)OP(O)(OH)2、OP(O)(OH)OP(O)(OH)OP(O)(OH)2和這些磷酸酯基的金屬鹽中的磷酸酯基，其中至少一個R1是磷酸酯基-D是氫氧根，O-葡萄糖，或者具有0-3個的如對于R1所定義的磷酸酯基的沒食子?；?R2是氫或另一式(III)組分。根據(jù)這一化學(xué)式的典型產(chǎn)物種類是黃烷醇和黃烷-3，4-二醇。以下提供了可用于磷?；亩喾拥母娴牧信e。簡而言之，黃烷醇的典型實例是兒茶酸(catechine)、表兒茶酸、兒茶酸或表兒茶酸的二聚體，兒茶酸或表兒茶酸的低聚物和聚合物，其中單體借助C-C鍵連接。該低聚物被稱為原花色素(proanthocyanidine)，該聚合物被稱為縮合單寧。屬于這一類別的另外的化合物組是花青素、花色素和原花青素(procyanidin)。黃酮醇的典型實例是櫟精、莰非醇或楊梅黃酮。另一組具有局部可應(yīng)用性的含有縮合單寧的化合物是具有酚羥基官能團的芪衍生物。其典型實例是白藜蘆醇的異構(gòu)體。再另一組縮合單寧是間苯三酚，其由連苯三酚二聚體、低聚物和聚合物組成，其中連苯三酚結(jié)構(gòu)部分借助醚鍵或者借助兩個芳族碳原子之間的C-C鍵相連。定義為縮合單寧的所有這些化合物可進(jìn)一步用酸，例如鞣花酸或沒食子酸酯化。鞣花酸本身也可被視為縮合單寧。含有一類或多類縮合單寧的天然提取物的實例包括從諸如桉樹(Eucalyptus)種、金合歡屬(Acacia)種、破斧木屬(Schinopsis)種(白堅木)、栗屬(Castanea)種、槲屬(Quercus)種、紅樹屬(Rhizophora)種、云杉屬(Picea)種、松屬(Pinus)種或落葉松屬(Larix)種之類的樹中，或者從其它植物來源，例如葡萄種子提取物、綠茶提取物、紅茶提取物、白茶、可可提取物中提取的單寧提取物，葡萄酒多酚，來自水果或蔬菜的單寧，例如柿子或亞洲柿樹單寧，來自葡萄、石榴、漿果、柑桔類水果或大豆的單寧，或者來自草本植物和香料，例如迷迭香的單寧。也可通過酚類化合物之間的偶聯(lián)反應(yīng)合成制備縮合單寧。這些化合物以通用名合成鞣劑(Syntans)而被公知。本發(fā)明的局部施用組合物可含有一種或多種可以全部或者部分磷?；目s合單寧。可水解的單寧是在天然產(chǎn)物內(nèi)存在的復(fù)雜分子，它由向分子的中心核上酯化或者向該分子的芳族羥基官能團上酯化的具有羥基苯甲酸或羥基肉桂酸酯的中心核組成。這后一類化學(xué)鍵更公知被稱為縮酚酸鍵。含有一個或兩個縮酚酸鍵的產(chǎn)品的實例是雙沒食子酸和三沒食子酸。這些羥基苯甲酸的實例是沒食子酸和鞣花酸。羥基肉桂酸的實例是咖啡酸、阿魏酸或芥子酸?？伤獾奶烊淮嬖诘膯螌幦亢性谄咸烟巧?、在甘油上、在奎尼酸上、在莽草酸上、在碳水化合物或者一般指糖上酯化的這類酸或這些酸的混合物。最豐富的中心核是葡萄糖，例如在來自中國沒食子和阿勒頗(Aleppo)堅果的單寧內(nèi)，和奎尼酸，例如在刺云實單寧內(nèi)。向這些中心核上酯化的最豐富的有機酸是沒食子酸和/或鞣花酸。由鞣花酸組成的可水解的單寧被稱為鞣花單寧?；谄咸烟呛蜎]食子酸的可水解單寧典型地由沒食子酸及其低聚物、單沒食子酰基葡萄糖、二-、三-、四-、五-、六-、七-、八-、九-、十-、十一-和十二-沒食子酰基葡萄糖，和較少量的鞣花單寧組成。也可出現(xiàn)較高的取代度，但很少見。它們是以基本上取決于植物來源的比例的所提及化合物的混合物。典型地通過提取植物材料，例如中國沒食子、紫鉚(BengalKino)、阿勒頗堅果、漆葉單寧、土耳其子單寧、刺云實單寧、槭葉單寧，獲得可水解單寧?？伤鈫螌幋嬖谟谒兄参飪?nèi)，且因此也可從其它植物來源中提取。局部施用可接受的可水解單寧提取物可廣泛地商購。另選，可水解單寧也可由羥基苯甲酸的二聚體和低聚物，例如雙沒食子酸、鞣花酸、三沒食子酸的二聚酯，和高級低聚物組成?？伤鈫螌幰部捎沙洚?dāng)中心核的縮合單寧組成，在該中心核上沒食子酸或鞣花酸被酯化?？墒褂镁哂胁煌阅艿膯螌幍慕M合，以改進(jìn)產(chǎn)物的工作性能。天然存在的其它衍生物包括沒食子酸和/或鞣花酸與簡單醇例如甲醇或乙醇形成的酯與醚。這些也可以與以上所述相同的方式結(jié)合成更加復(fù)雜的結(jié)構(gòu)。磷酰化縮合或可水解單寧也可以是二聚或三聚磷酸酯，它由具有連接到其上的2或3個酚化合物的一個中心磷酸酯基組成。它們也可以是含有鍵合到彼此上的2或3個磷酸酯基的二磷酸酯或三磷酸酯。應(yīng)理解的是，本文中在說明書和權(quán)利要求兩者中所使用的術(shù)語“磷酰化多酚”或“磷?；瘑螌帯被蛘咛岬饺魏螁蝹€的化合物的表述，不僅包括以上所述的磷酰化基礎(chǔ)化合物，而且包括任何磷?；苌锛捌漕愃莆铮浠旌衔?，以及任何磷酰化的植物提取物或其混合物。可通過使用無機堿，在含水介質(zhì)中，使磷酰氯與多酚反應(yīng)的步驟制備本發(fā)明中可使用的磷?；喾?。在優(yōu)選的實施方案中，這一含水介質(zhì)是水。無機堿可以是金屬氫氧化物、碳酸鹽、磷酸鹽和/或氨。最優(yōu)選是氫氧化鈉。可在添加磷?；瘎丛撛噭┲昂?或期間添加堿。使用堿來增加反應(yīng)混合物的pH到5至13的數(shù)值，這取決于羥基官能團的酸度。優(yōu)選地，反應(yīng)混合物的pH保持在7至12。磷酰氯優(yōu)選用下述通式表示RnPOX3-n(IV)或RvPXw(V)其中n＝0、1或2，v+w＝3或5，x是氯、溴或碘，和R是具有1-8個碳原子的烷基鏈的烷氧化物，或O-苯基或O-芐基。在本發(fā)明的實施方案中，磷酰氯是三氯氧化磷(POCl3)。以每mol酚羥基化合物計，優(yōu)選以從0.5當(dāng)量變化到超過25當(dāng)量的比例采用用作磷?；瘎┑牧柞Ｂ?，這取決于酚類抗氧化劑的結(jié)構(gòu)，和更具體地取決于存在該分子內(nèi)的羥基含量?？衫缡褂酶邏荷V控制磷?；?。在磷?；襟E之后，可將反應(yīng)混合物酸化。優(yōu)選地，通過添加無機酸獲得約2-約7的pH。優(yōu)選地，構(gòu)成起始材料的酚類化合物是比較復(fù)雜的多酚化合物，例如縮合和/或可水解的單寧。在水溶液中獲得的產(chǎn)物可原樣使用，可通過蒸餾或者本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它方式濃縮，和/或可干燥。本發(fā)明的磷?；a(chǎn)物可原樣或者以或多或少純化的形式存在。從以上所指定的寬范圍的組中，一些具體類型的多酚尤其優(yōu)選作為磷?；钠鹗疾牧?，這是因為它們的公認(rèn)的生物活性和對皮膚、毛發(fā)和/或指甲的益處。一般來說，與單芳族化合物，例如連苯三酚或沒食子酸相比，優(yōu)選更加復(fù)雜的多芳族多酚。類黃酮化合物尤其廣泛用于局部應(yīng)用中，且賦予寬范圍的已知益處。在一個實施方案中，在本發(fā)明的組合物中使用的優(yōu)選類型的類黃酮包括，但不限于，單獨或者組合使用的磷酰化黃烷酮、查耳酮、黃酮、異黃酮、黃酮醇、黃烷醇、香豆素、色酮、3，3′-亞甲基-4-雙羥香豆素、苯并二氫吡喃-4-酮或苯并二氫吡喃醇。在另一實施方案中，在本發(fā)明組合物中非常有用的其它化合物是同樣具有寬范圍活性的磷?；u基芪，例如白藜蘆醇，其異構(gòu)體和衍生物?？稍诒景l(fā)明的組合物中使用的具體化合物或化合物組不受限制地為下述化合物的磷?；问絻翰璺蛹捌溲苌?，例如DL-3，4-二羥基苯基丙氨酸或DL-DOPA；兒茶酚胺，例如3-羥基酪胺或多巴胺；間苯三酚；酚酸，例如咖啡酸、二氫咖啡酸、阿魏酸、原兒茶酸、綠原酸、異綠原酸、2，5-二羥基苯甲酸、尿黑酸、沒食子酸、六羥基聯(lián)苯甲酸、鞣花酸、迷迭香酸或紫草酸，及其衍生物，例如酯或其葡萄糖苷；姜黃、水楊酸、多羥基化香豆素、多羥基化木酚素或新木酚素；水飛薊素、apigenol、luteolol、五羥黃酮、quercetagin、六羥黃酮、柯因、楊梅黃酮、鼠李亭、染料木黃酮、桑色素、棉子皮亭、莰非醇、蕓香苷、柚苷、4，5′，7-三羥黃烷酮、橙皮素、橙皮苷、地奧司明(diosmin)、diosmoside、3′，8″-雙-4′，5，7-三羥基黃酮、非瑟酮、牧荊葡基黃酮、異甘草素、橙皮苷甲基查耳酮、黃杉素(taxifoliol)、水飛薊素、水飛薊亭、水飛薊寧、兒茶酸、表兒茶酸、棓兒茶酸、兒茶酸沒食子酸酯、棓兒茶酸沒食子酸酯、表兒茶酸沒食子酸酯、表棓兒茶酸沒食子酸酯和表棓兒茶酸；葡糖棓苷；原花色素；沒食子酸丙酯、沒食子酸異戊基辛酯和沒食子酸十二烷酯；五-O-沒食子?；咸烟?；單寧酸；各種單寧，例如棓單寧、鞣花單寧、莽草酸和白藜蘆醇(3，4′，5′-三羥基芪)；和前述化合物的任何衍生物或類似物。將公認(rèn)的是，這些磷?；问降拿糠N可單獨或者與另一磷?；喾踊蛭戳柞；亩喾咏Y(jié)合使用。也將公識的是，可以顯著純的形式，即純度大于或等于80％使用有用的化合物或化合物組，或者它們可以以植物提取物的一部分的形式提供。幾乎每一植物含有某種形式的多酚，但有一些植物或植物提取物，其被公認(rèn)為尤其富含的多酚來源?？僧a(chǎn)生在組合物中可用的提取物的植物的實例包括下述屬的植物銀杏(Gingko)、胡枝子屬(Lespedeza)、西番蓮(Passiflora)、水飛薊屬(Silybum)、柑桔屬(Citrus)、金縷梅(Hamamelis)、百里香屬(Thymus)、果香菊屬(Chamaemelum)、蓍屬(Achillea)、木賊屬(Equisetum)、槐屬(Sophora)、蕎麥屬(Fagopyrum)、桉樹(Eucalyptus)、接骨木花(Sambucus)、樺屬(Betula)、葡萄屬(Vitis)、松屬(Pinus)、山楂屬(Crataegus)、槲屬(Quercus)、拉坦尼根(Ratanhia)、千屈菜屬(Lythrum)、金合歡屬(Acacia)、柏木屬(Cupressus)、越橘屬(Vaccinium)、茶藨子屬(Ribes)、矢車菊屬(Centaurea)、薔薇屬(Rosa)、木槿屬(Hibiscus)、山茶屬(Camellia)、錦葵(MalvA)、鬼臼根(Podophyllum)、五味子(Schizandra)、Gaiacum、可可屬(Theobroma)、熊果屬(Arctostaphylos)、紫藤(Glyeine)、菜薊(Cynara)、迷迭香屬(Rosmarinus)、雞腳參屬(Orthosiphon)、一枝黃花(Solidago)、紫草(Lithospermum)、姜黃屬(Curcuma)、七葉樹屬(Aesculus)、草木犀(Melilotus)、阿密屬(Ammi)、山柳菊(Hieracium)、當(dāng)歸(Angelica)和車葉草(Asperula)。特別地，公知尤其富含的多酚來源包括紅葡萄酒、葡萄汁、葡萄皮、葡萄種子、篤斯越桔、柿子、桉樹、可可、綠茶、紅茶、白茶、石榴和中國沒食子。因此，當(dāng)在本發(fā)明的說明書和權(quán)利要求中提及磷?；喾訒r，這一術(shù)語意于不僅覆蓋已被磷?；姆蛛x的化合物，而且覆蓋含有多酚的植物材料的提取物，所述提取物也進(jìn)行過磷?；ば?，從而使其內(nèi)包含的多酚磷?；?。如實施例5所示，如此生產(chǎn)的磷?；衔锵鄬τ谄湮锤男缘膶?yīng)物，在化妝品配方中顯示出增強的穩(wěn)定性。該化合物也可用于實現(xiàn)在待治療的局部皮膚上延緩釋放活性多酚分子。常常優(yōu)選在一段時間內(nèi)將局部施用組合物的活性延長，以便延長有益效果，且還可在單一的劑量內(nèi)輸送較大量的活性組分。如實施例6所示，磷酰化化合物可通過在皮膚中存在的磷酸酶而脫磷?；?，和脫磷?；幕衔镉谑侵饾u釋放到皮膚內(nèi)，而不是象相同分子的非磷?；凅w典型地那樣，立即獲得。因此，本發(fā)明的組合物提供雙重潛在的益處包含在其內(nèi)的活性化合物不容易降解，因此可在配制時刻和施加時刻之間保持更多的活性，且向治療的表面上的活性成分的延緩釋放允許更有效地輸送該化合物。如實施例6所示，用磷酸酶脫磷?；瘜?dǎo)致恢復(fù)生物活性。額外的預(yù)料不到的優(yōu)點是，一些多酚的磷?；蓪?dǎo)致其水溶解度增加。這已尤其采用白藜蘆醇而證實，白藜蘆醇在其未磷?；问较率窍鄬λ蝗苄缘?。在分子上添加相對極性的磷酸酯基增加其極性，因此增加其在水和極性溶劑中的溶解度，正如實施例2所示。在水中缺少溶解度可能是配方的嚴(yán)重局限，因此，在配制局部施用的組合物中，磷酰化多酚可比其未磷?；膶?yīng)物更加有用?？蓪⒘柞；衔锱c局部可接受的載體結(jié)合配制到組合物中，配制方式與其未磷酰化的對應(yīng)物相同。載體是藥學(xué)上或者化妝品上可接受的那些，亦即用于藥物或者化妝品用途的意于施加到外部身體表面，例如皮膚、毛發(fā)或指甲上的賦形劑，當(dāng)施加到意于被治療的表面上時，所述賦形劑輸送活性組分到所意于的目標(biāo)上且不引起對一般的人類或者其它接受體有機體的損害。此處所使用的“藥物”或“化妝品”要理解為包括人類和動物二者，優(yōu)選哺乳動物的藥物或化妝品，其中活性組分可與之相容，例如凝膠、乳霜、洗劑、膏、摩絲、噴劑、固體棒狀物、粉劑、懸浮液、分散體和類似物。配制各類賦形劑的技術(shù)是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，且可例如發(fā)現(xiàn)于ChemistryandTechnologyoftheCosmeticsandToiletriesIndustry，(化妝品與盥洗用品工業(yè)的化學(xué)與技術(shù))Williams和Schmitt，編者，BlackieAcademicandProfessional，第2版，1996，Harry′sCosmeticology，第8版，M.Reiger，編者(2000)，和RemingtonTheScienceandPracticeofPharmacy(藥學(xué)科學(xué)與實踐)，第20版，A.Gennaro，編者，(2003)中，這些中的每一篇的內(nèi)容在此通過參考引入。載體的化學(xué)組成可根據(jù)活性成分的個性，和所打算的最后用途而變化。然而，可使用可用于局部輸送的任何典型的組合物，例如含水分散體，液體、固體或粉末形式的無水組合物，乳液(油或水包硅酮、油或硅酮包水、多重乳液、微乳液、納米乳液)，條件是各組分與所選的活性成分相容?？膳渲平M合物以供施加到皮膚上，例如皮膚護理產(chǎn)品，例如防曬劑、自動曬黑劑(self-tanner)、皮膚保濕劑和調(diào)理劑、剝落劑、抗痤瘡組合物、抗老化組合物和類似物；或者彩色化妝品，例如唇膏、透明高光亮唇膏、粉底、眼影、胭脂或眼線筆；用于施加到毛發(fā)、睫毛和/或頭皮上，例如睫毛油、睫毛底涂油或涂覆產(chǎn)品、頭發(fā)生長延遲組合物、頭發(fā)生長促進(jìn)組合物、香波或調(diào)理劑；或用于施加到指甲上，例如指甲漆、面漆、底涂層、紋脈(ridge)填料和指甲調(diào)理劑。由于這些多酚的許多未磷?；男问揭郧氨慌渲朴糜诰植坑猛?，因此本領(lǐng)域技術(shù)人員公知確定所研究特定磷酰化多酚的合適配方。摻入到載體內(nèi)的磷?；喾拥挠昧繉⑷Q于多酚的個性和所打算的結(jié)果而變化，但在組合物內(nèi)多酚的用量范圍通常為組合物的約0.0001-約99wt％，優(yōu)選約0.001-約50wt％，更優(yōu)選約0.01-約30％，和最優(yōu)選約0.05-約10％。當(dāng)使用含有多酚的提取物而不是分離的化合物時，摻入的用量取決于提取物內(nèi)多酚的濃度，且可從以上對于多酚本身的指導(dǎo)值外推。該組合物也可含有可提高或者補充組合物活性的其它局部可用的組分。在組合物內(nèi)附帶成分的選擇也取決于組合物所打算的應(yīng)用。標(biāo)準(zhǔn)的局部可用的成分可例如發(fā)現(xiàn)于TheInternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第10版，2004中，其內(nèi)容在此通過參考引入?？膳c磷酰化酚類結(jié)合的可用種類的局部可接受的成分的實例包括，但不限于，香料或精油；顏料或著色劑；配制助劑，例如抗結(jié)塊劑、消泡劑、填料和增量劑(bulkingagent)、增稠劑、膠凝劑、結(jié)構(gòu)化劑和乳液穩(wěn)定劑；表面活性劑和乳化劑；成膜劑，以提高在所打算的目標(biāo)上的粘合性和保留率；推進(jìn)劑、防腐劑和pH調(diào)節(jié)劑和中和劑。尤其優(yōu)選用于加入到磷?；喾又械氖菍M合物將施加到其上的角質(zhì)表面提供額外益處的那些成分，下文稱為“皮膚益處劑”。這種皮膚益處劑的實例包括，但不限于，收斂劑，例如丁子香油、薄荷醇、樟腦、桉葉油、丁子香酚、乳酸蓋酯、金縷梅餾出物；抗氧化劑或自由基清除劑，例如抗壞血酸、其脂肪酸酯和磷酸酯，生育酚及其衍生物，N-乙酰基半胱氨酸、山梨酸和硫辛酸；抗痤瘡劑，例如水楊酸和過氧化苯甲酰；抗微生物或抗真菌劑，例如辛?；?、三氯生、苯氧基乙醇、紅霉素、發(fā)癬退、制霉菌素或克霉唑(clortrimazole)；螯合劑，例如EDTA；局部止痛藥，例如苯坐卡因、利度卡因或普魯卡因；抗老化/抗皺紋劑，例如類視黃醇或羥基酸；亮膚劑，例如甘草、抗壞血酸基磷酸酯、氫醌或曲酸；皮膚調(diào)理劑(例如，保濕劑，包括miscellaneous(混雜型)和occlusive(包藏型))，抗刺激劑，例如可樂茶素(cola)、紅沒藥醇、蘆薈或泛醇，消炎藥，例如氫化可的松、氯倍他索、地塞米松、潑尼松、乙酰基水楊酸、甘草酸或甘草次酸；抗脂肪團劑，例如咖啡因和其它黃嘌呤；保濕劑，例如亞烷基多元醇或透明質(zhì)酸；潤膚劑，例如油狀酯或礦脂；防曬劑(有機或無機)，例如avobenzone、羥基苯酮、甲氧基肉桂酸辛基酯、二氧化鈦或氧化鋅；剝落劑(化學(xué)或物理)，例如N-乙?；咸前?、甘露糖磷酸酯、羥基酸、乳糖酸、桃仁或海鹽；自動曬黑劑，例如二羥基丙酮；和生物活性肽，例如棕櫚?；咫幕騛rgireline(抗皺多肽)。這些補充的皮膚益處劑以當(dāng)用于所意于的目的時通常已知對于該活性成分有效的用量來使用。本發(fā)明的組合物具有許多用途。如前所述，多酚作為一組形式擁有多種生物活性，且據(jù)報道，許多類型的多酚擁有多于一種的活性。例如，各種單寧，尤其類黃酮，據(jù)報道在活動減退或反應(yīng)過度的皮膚病癥的治療中，例如特異反應(yīng)性皮炎、濕疹、牛皮癬、毛囊炎、酒渣鼻和痤瘡中具有活性(美國專利No.6180662)；作為自由基清除劑和抗氧化劑可用于防止衰老跡象(US4698360和6437004)；和作為氧化一氮和細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑、抗腫瘤劑和氧化性DNA損壞的抑制劑(美國專利No.6696495)。類似地，芪，和特別是白藜蘆醇，據(jù)說具有抑制皮膚蛋白質(zhì)的糖化方面的活性(EP1058864)；刺激膠原合成或成纖維細(xì)胞增殖(US6147121)；抑制微生物生長(EP953345)；皮膚增亮(US6132740)；預(yù)防和/或治療皮膚癌、曬傷、濕疹、皮炎或牛皮癬(WO01/30336)；用于頭發(fā)著色(EP1013260)；和用作植物雌激素(WO99/04747)。所有前述專利文獻(xiàn)的公開內(nèi)容在此通過參考全文引入。因此，顯然大量的多酚在調(diào)節(jié)角蛋白組織，尤其皮膚的狀況中具有顯著的可用性。本發(fā)明因此提供調(diào)節(jié)角蛋白組織，例如皮膚、毛發(fā)或指甲的狀況的方法，該方法包括將含有效量的磷?；喾拥慕M合物施加到該組織上。有效量的磷?；喾邮悄軐崿F(xiàn)所預(yù)計的治療效果的多酚量。它典型地在對于未磷?；喾佣运褂玫挠昧糠秶鷥?nèi)，無論如何，容易從已知化合物的范圍外推得到。在本發(fā)明的特別應(yīng)用中，所研究的活性是調(diào)節(jié)皮膚狀況的能力。以上所述的引證，以及許多其它引證，說明了磷?；喾涌稍谄つw上具有的效果的多樣性。應(yīng)理解的是，此處所使用的術(shù)語“調(diào)節(jié)”皮膚狀況是指治療和預(yù)防皮膚病，尤其代表病理學(xué)的那些病況，以及盡管較不嚴(yán)重，但可引起不舒適或者存在不吸引人或者較不有感染力的外觀的那些病況。可治療、緩和、減輕或預(yù)防的皮膚病的實例包括，但不限于，濕疹、皮脂溢、牛皮癬、干燥病、腫瘤生長、皮炎、毛囊炎、酒渣鼻和痤瘡。在優(yōu)選的實施方案中，待調(diào)節(jié)的皮膚病是可統(tǒng)稱為皮膚老化跡象的病況中的一種或多種。皮膚的外觀通常隨著年齡而變化，這是由于與時間有關(guān)的許多內(nèi)部因素導(dǎo)致的。然而，皮膚也可因過度暴露于環(huán)境因素，例如太陽、污染或香煙煙霧下而過早地老化。此處所使用的調(diào)節(jié)因老化導(dǎo)致的皮膚病的過程意于包括隨時間老化以及光或環(huán)境誘導(dǎo)的老化兩者的跡象。老化過程的現(xiàn)象有許多，和可以是外部(即，立即可見的)或者內(nèi)部(即，不是肉眼立即可見的)的。本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易意識到老化跡象的許多實例。這些實例包括，但不限于，細(xì)紋和皺紋、深的皺紋、凹坑和隆起部分、增加的孔尺寸、角化病、皮膚易剝落或粗糙、皮膚色調(diào)的不均勻或斑化、皮膚變黃、暗的眼袋陰影或眼圈，皮膚彈性的喪失，下垂(包括眼睛區(qū)域和面頰的浮腫)，彈性組織病變、皮膚堅固度或結(jié)實度的喪失、色素沉著過多、老年斑和雀斑、變態(tài)分化、角化過度、膠原分解、蜘蛛狀靜脈或毛細(xì)管擴張。在調(diào)節(jié)皮膚病中觀察到的部分活性可以是其作為自由基清除劑或抗氧化劑的公知活性。現(xiàn)代人類常規(guī)地暴露于其下的許多環(huán)境試劑，例如各種飲食元素、殺蟲劑、太陽光、香煙煙霧、空氣污染物、麻醉劑和芳烴，以及各種內(nèi)源性需氧反應(yīng)，可產(chǎn)生高度反應(yīng)性的氧物種，例如超氧化物陰離子自由基、過氧化氫和羥基離子，以及單線態(tài)氧(不嚴(yán)格來說是自由基，但此處為了方便起見，作為自由基形式被包括在內(nèi))。這些反應(yīng)性氧物種已牽涉入可引起對細(xì)胞組分嚴(yán)重?fù)p壞的許多反應(yīng)中，例如，氧化性自由基可進(jìn)攻DNA的堿和糖分子，改變分子結(jié)構(gòu)，于是干擾生物功能。它們也可與細(xì)胞膜內(nèi)的不飽和脂肪酸相互作用，引起類脂過氧化，這不僅導(dǎo)致膜中蛋白質(zhì)類脂相互作用的改變，而且產(chǎn)生分解產(chǎn)物，所述分解產(chǎn)物可引起許多非所需的效果，例如抑制DNA合成、腺苷酸環(huán)化酶和葡萄糖-6-磷酸酯，增加毛細(xì)管滲透力并抑制血小板凝集。存在大量證據(jù)，未檢測到的自由基反應(yīng)在許多疾病狀態(tài)中，例如氣腫、炎癥、癌癥、動脈粥樣硬化和白內(nèi)障中具有一些牽連，如果不是主要起因的話。自由基反應(yīng)還被廣泛地視為對以上所述的自然老化過程具有主要的貢獻(xiàn)性影響。由于許多多酚作為自由基清除劑和抗氧化劑的公知的活性，磷?；喾幼鳛槠渖锏葍r物，被預(yù)期具有相同的可用性。因此，本發(fā)明還提供減少或預(yù)防自由基損壞的方法，該方法包括施加自由基清除有效量的至少一種磷酰化多酚到處于自由基損壞危險下的細(xì)胞上。這一方法應(yīng)理解為包括治療或預(yù)防其中貢獻(xiàn)因素是反應(yīng)性氧物種的負(fù)面作用的病理疾病。按照類似的方式，磷酰化多酚可方便地在食品、化妝品、藥物和類似物中用作防腐的抗氧化劑。對破壞敏感是一些類型配方，尤其類脂含量可能高的那些配方的性質(zhì)，這是因為氧物種在其內(nèi)容物上作用導(dǎo)致的。一種或多種磷?；喾涌杉尤氲竭@種配方中，以便保持其組分防止氧損壞，并防止酸敗。類似地，由于其抗微生物活性，因此，在預(yù)防或降低因微生物活性導(dǎo)致的污染中它們可提供附加的防腐效果。施加本發(fā)明的局部施用組合物的方法可隨磷酰化多酚的個性和該組合物所打算的最終用途而變化。一般地，為了調(diào)節(jié)各種皮膚病，或者為了預(yù)防或治療與氧自由基有關(guān)的病況，可或者在事先暴露于潛在有害的因素(例如太陽光)下之前，或者在暴露之后，施加組合物以減輕因暴露導(dǎo)致可能發(fā)生的損壞。只要對有毒刺激的暴露繼續(xù)，就可繼續(xù)施加，或者當(dāng)獲得緩和時，可間歇施加。當(dāng)用于治療、減輕或預(yù)防比較持久的病況，例如每天暴露于太陽或環(huán)境損壞下，或者治療或預(yù)防與隨時間老化有關(guān)的跡象時，優(yōu)選長期施加組合物，以預(yù)防病況的發(fā)生或再發(fā)生。為此，作為實例，建議從每周約一次到每天約4或5次，優(yōu)選從約每周3次到每天約3次，最優(yōu)選每天約1或2次，進(jìn)行局部施加該組合物，其用量為約0.1mg/cm2-2mg/cm2待治療的角質(zhì)表面?！伴L期”施加在此是指局部施加的時間段可以是使用者的生命周期內(nèi)，優(yōu)選至少約1個月，更優(yōu)選約3個月-約20年，更優(yōu)選約6個月-約10年，更優(yōu)選約1年-約5年，從而導(dǎo)致治療、緩和、減輕或預(yù)防所研究的病況。在閱讀本說明書的基礎(chǔ)上，磷?；喾拥钠渌猛臼侨菀滓庾R到的。通過下述非限制性實施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明。具體實施例方式實施例實施例1葡萄種子單寧的磷?；谑覝叵?，在氮氣氣氛中，將100.0g葡萄種子單寧(TANFOS167-134)溶解在300ml水中。用29％NaOH使溶液的pH達(dá)到9，并在1.5小時的時間段內(nèi)向該溶液中添加26.6ml三氯氧化磷。在這一添加過程中，添加更多29％的NaOH，以維持pH在9。在添加之后，攪拌反應(yīng)混合物過夜，并通過HPLC分析。然后用25％HCl酸化產(chǎn)物到pH3.1，并借助噴霧干燥分離，獲得粉紅色粉末。實施例2白藜蘆醇的磷?；环Q為白藜蘆醇(3，4，5-三羥基芪)的化合物的結(jié)構(gòu)如下所示可例如通過Pettit等人，J.Med.Chem.2002，45，2534-2542中所公開的操作步驟實現(xiàn)磷?；?。在氮氣下將白藜蘆醇(25mmol，5.7g)和二甲基氨基吡啶(7.5mmol，0.93g)在100ml乙腈內(nèi)的溶液冷卻到-10℃。在10分鐘之后，將CC14(375mmol，36.2ml)和DIEA(159mmol，27.7ml)和該混合物維持在攪拌下30分鐘。添加二芐基亞磷酸酯(113mmol，25.0ml)，并在室溫下攪拌該混合物額外12小時。通過TLC(SilicaF254，洗脫劑乙酸乙酯/正己烷80/20v/v)監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。添加1升0.5MKH2PO4，然后用乙酸乙酯萃取該混合物。通過在硅膠上過濾而純化所得產(chǎn)物三(二芐基磷酸酯基)白藜蘆醇，首先用乙酸乙酯/正己烷(80/20v/v)的混合物洗滌，以除去任何殘留的未反應(yīng)的白藜蘆醇，然后用甲醇洗滌，以獲得黃色油狀物。向在0℃下的200ml無水DCM內(nèi)的三(二芐基磷酸酯基)白藜蘆醇(12.5mmol)中添加溴甲基硅烷(79mmol，10.4ml)。在2小時之后，添加300ml水，并攪拌該反應(yīng)混合物1小時。再次用乙酸乙酯洗滌水相，然后凍干，得到橙色油狀物。向在400ml乙醇內(nèi)增溶的以上獲得的產(chǎn)物中添加CH3ONa(37mmol，2.03g)，并在室溫下攪拌反應(yīng)12小時。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸發(fā)乙醇，并將殘余物在水中增溶。用乙酸乙酯洗滌水相并凍干。由此所得白色固體的質(zhì)譜表明，存在白藜蘆醇三磷酸酯(PM＝468.1)，且相對于白藜蘆醇計總產(chǎn)率＞90％。實施例3白藜蘆醇三磷酸酯的溶解度在pH7下，在1mM的磷酸鉀緩沖液中，在室溫下，測試白藜蘆醇的水中溶解度。將10mg白藜蘆醇(M.W.228.24)懸浮在10ml緩沖液中。在旋轉(zhuǎn)搖動器內(nèi)，在25℃下，在暗處攪動這一懸浮液(相當(dāng)于1g/l或4.38mM的濃度)24小時。在14000rpm下離心分離該樣品5分鐘，并在305nm波長處測定到OD為6.26，在305nm波長處白藜蘆醇的εmM的數(shù)值為28.1。假設(shè)白藜蘆醇完全溶解，則應(yīng)當(dāng)獲得的OD為123.1(4.38×28.1)。在觀察到的OD為6.26下，溶解的白藜蘆醇的百分?jǐn)?shù)為5.1％(6.26×100/123.1)或5.1mg/l。相對照地，在相同的條件下，在范圍為4-9的不同pH的水中，在室溫下測試白藜蘆醇三磷酸酯的溶解度和穩(wěn)定性。觀察到白藜蘆醇三磷酸酯的溶解度為＞30％w/v，表明與未改性的白藜蘆醇相比，溶解度增加。另外，白藜蘆醇三磷酸酯在固體和水溶液形式中均穩(wěn)定超過1年的時間段。實施例4體外白藜蘆醇三磷酸酯的脫磷酰化評價磷?；陌邹继J醇，和此處被稱為白藜蘆醇Pi，以確定是否可使該分子脫磷?；?，返回到其活性的脫磷酰化狀態(tài)。A.白藜蘆醇和白藜蘆醇Pi的HPLC分析白藜蘆醇的HPLC分析的實驗條件如下所述技術(shù)HPLC-UV柱子Alltech，AlltimaC185μ(250×4.6mm)柱溫30℃流動相A0.085％o-磷酸溶液B乙腈注射柱10μl流速1ml/minλ檢測310nm保留時間白藜蘆醇8.2分鐘白藜蘆醇Pi40.7分鐘梯度在圖1的上部圖表中示出了未磷?；邹继J醇的色譜圖。這是起始材料的HPLC曲線，所述起始材料是用于磷?；钠鹗疾牧?。非磷酰化的白藜蘆醇在約40.7分鐘時遷移，且?guī)缀跏羌兊模哂?8％的面積百分?jǐn)?shù)。在圖1的下部圖表中示出了高度磷酰化的白藜蘆醇。在8.2分鐘時的主峰是其中磷酸酯基取代所有三個羥基官能團時的完全磷?；陌邹继J醇。這一取代引起極性顯著增加，這通過保留時間急劇下降得到反映?？蓹z測到兩種“雜質(zhì)”二磷酰化白藜蘆醇的兩種異構(gòu)體(tm約14.6和16.7分鐘)和單磷?；邹继J醇(tm約23.3和26.7分鐘)。檢測到僅僅非常小量的未磷?；邹继J醇。B.白藜蘆醇Pi的酶法脫磷酰化在0.147M(NH4)2SO4/0.81mMMgCl2pH5.5中在來自麥胚的酸性磷酸酶(Sigma，P3627lot081K7071)存在下，培育磷?；邹继J醇。白藜蘆醇Pi和酸性磷酸酶的濃度分別為1.6mg/ml和0.056U/ml。在不同的時間間隔處取等分試樣，并通過HPLC(參見以上的條件)分析。圖2示出了結(jié)果。用酸性磷酸酶處理白藜蘆醇Pi導(dǎo)致依賴于時間的白藜蘆醇形成，同時三磷酰化白藜蘆醇(完全磷?；?逐漸減少。通過保留行為和UV光譜確證了峰的識別。白藜蘆醇二磷酸酯的含量最初上升，在用酸性磷酸酶培育約85分鐘的時間處達(dá)到最大值，然后逐漸下降。在用酶培育的起始時刻，較大部分的白藜蘆醇完全被磷?；虼藦娜蕉柞；邹继J醇的轉(zhuǎn)化占主導(dǎo)。這引起二磷?；邹继J醇的凈增加。在較長的培育時間下，存在較少的白藜蘆醇三磷酸酯，因此較少地轉(zhuǎn)化成白藜蘆醇二磷酸酯，且從二到單磷?；邹继J醇的轉(zhuǎn)化占主導(dǎo)，這將引起在較長的培育時間(＞85分鐘)下白藜蘆醇二磷酸酯總體減少。白藜蘆醇單磷酸酯依賴于培育時間的濃度曲線類似于二磷酸酯的曲線。這與以上提出的形成/除去機理一致，但在此在更長的培育時間(～300分鐘)下達(dá)到白藜蘆醇單磷酸酯的最大濃度。C.結(jié)論為了增加配制劑中白藜蘆醇的穩(wěn)定性，用磷酸酯基(～白藜蘆醇Pi)替代白藜蘆醇中的反應(yīng)性羥基。磷酰化白藜蘆醇的HPLC分析表明，磷?；确浅８撸@是因為只檢測到非常小量的未磷?；邹继J醇。這一實驗表明，來自麥胚的酸性磷酸酶能通過羥基替代白藜蘆醇Pi中的磷酸酯基，和正因為如此，將磷?；邹继J醇轉(zhuǎn)化成起始含羥基的白藜蘆醇。實施例5含有等摩爾含量白藜蘆醇三磷酸酯或未改性的白藜蘆醇的化妝品配方的目測(顏色)穩(wěn)定性制備三個基礎(chǔ)配方，不含白藜蘆醇的對照物，與該對照物相同但一個含有0.1％未改性的白藜蘆醇和另一個含有0.2％磷?；邹继J醇(白藜蘆醇Pi)的另外兩個配方。對照物基礎(chǔ)成分的顏色為白色，和在添加白藜蘆醇的情況下，它為淺米色。一周一次地觀察每一配方共4周的時間段，以確定在三種不同的環(huán)境條件50℃、4℃和室溫(RT)下顏色變化(指示改變色穩(wěn)定性)的出現(xiàn)。獲得的結(jié)果如下所述1周的穩(wěn)定性賦形劑對照物50-白色/4-白色/RT-白色0.1％白藜蘆醇50-1t(淺)米色/4-1t米色/RT-1t米色0.2％白藜蘆醇Pi50-1t米色/4-1t米色/RT-1t米色2周的穩(wěn)定性賦形劑對照物50-白色/4-白色/RT-白色0.1％白藜蘆醇50-1t米色/4-1t米色/RT-1t米色0.2％白藜蘆醇Pi50-1t米色/4-1t米色/RT-1t米色3周的穩(wěn)定性賦形劑對照物50-白色/4-白色/RT-白色0.1％白藜蘆醇50-1t米色(非常輕微地(vs1)更暗，具有輕微的(s1)頂部氧化)/4-1t米色/RT-1t米色0.2％白藜蘆醇Pi50-1t米色/4-1t米色(與其它情況相比，非常非常輕微地(vvs1)更淺)/RT-1t米色4周的穩(wěn)定性賦形劑對照物50-白色/4-白色/RT-白色0.1％白藜蘆醇50-米色(與RT相比，輕微地更暗，具有頂部氧化)/4-1t米色(與RT相比，輕微更淺的米色)/RT-1t米色/米色0.2％白藜蘆醇Pi50-1t米色/4-1t米色(與其它情況相比，非常非常輕微地更淺)/RT-1t米色這些結(jié)果表明，在四周末，與未改性的白藜蘆醇相比，磷?；邹继J醇顯示出較小的顏色顯現(xiàn)，從而證實磷?；牧系奶岣叩念伾€(wěn)定性。實施例6通過角質(zhì)層細(xì)胞將白藜蘆醇三磷酸酯脫磷酰化A.白藜蘆醇和白藜蘆醇Pi的HPLC分析白藜蘆醇的HPLC分析的實驗條件如以上在實施例4中所述。梯度圖1示出了未磷酰化白藜蘆醇和通過Omnichem制備的高度磷?；邹继J醇的色譜圖。參見以上實施例4中所述的峰值分析。B.白藜蘆醇Pi的酶法脫磷?；谝粋€受實驗者的內(nèi)部下臂上收集D-鱗屑膠帶剝離物。將第13和14層匯集并放入試管內(nèi)，并在室溫下，在輕輕搖動下，用pH為5.6的700微升100mM鄰苯二甲酸(phtallicacid)和0.25％Triton-X100提取90分鐘。將可提取級分轉(zhuǎn)移到另一小瓶內(nèi)，并與白藜蘆醇Pi儲備溶液混合。在培育過程中，白藜蘆醇Pi的濃度為0.22mg/ml或0.47mM。在各種培育時間點下，在25微升10mMo-磷酸(鄰磷酸)和50微升甲醇內(nèi)稀釋25微升的培育混合物等分試樣，并注射到HPLC系統(tǒng)內(nèi)。圖3示出了結(jié)果。用SCD-鱗屑膠帶剝離物的可提取級分培育白藜蘆醇Pi導(dǎo)致依賴于時間的白藜蘆醇形成(r＝0.99，N＝15，p＜1×10-6)，而三磷?；邹继J醇(完全磷酰化)逐漸下降(r＝-0.69，N＝15，p＝0.005)。還觀察到單磷?；邹继J醇形成的時間函數(shù)關(guān)系(r＝0.98，N＝15，p＜1×10-6)。白藜蘆醇的二磷?；问降目偭繘]有作為時間的函數(shù)形式顯著變化(r＝-0.27，N＝15，p＝0.33)，這表明(來自完全磷?；邹继J醇的)二磷?；邹继J醇的形成與從二到單磷酰化白藜蘆醇的轉(zhuǎn)化同樣快。C.結(jié)論本發(fā)明的實驗試圖表明磷?；邹继J醇將被存在于皮膚內(nèi)的酶脫磷酰化。例如通過皮膚內(nèi)的酸性磷酸酶活性使磷?；邹继J醇就地酶法脫磷酰化的過程將重新構(gòu)成起始的白藜蘆醇，并伴隨著生物活性增加。圖3所示的結(jié)果表明，存在于皮膚上并通過D-鱗屑膠帶剝離物取樣的酸性磷酸酶能通過羥基替代白藜蘆醇Pi上的磷酸酯基。這導(dǎo)致依賴于時間的白藜蘆醇形成和白藜蘆醇Pi的相應(yīng)下降，于是支持當(dāng)磷?；喾邮┘拥狡つw上時，通過角質(zhì)層酶的作用延緩釋放活性白藜蘆醇分子，或者任何磷?；喾拥臉?gòu)思。實施例6在白藜蘆醇三磷酸酯脫磷酰化之后的體外抗氧化活性在37℃下，在20mM具有0.05％Triton-X100的pH為5的檸檬酸緩沖液內(nèi)，用各種濃度來自麥胚的酸性磷酸酶培育磷酰化白藜蘆醇(白藜蘆醇Pi)(0.256mM)6小時。酸性磷酸酶的濃度范圍為0.063-63mU/ml。由于磷?；邹继J醇的轉(zhuǎn)化取決于酸性磷酸酶的濃度，因此預(yù)期在較高的酸性磷酸酶濃度下，將存在增加含量的脫磷?；邹继J醇。使用2，2′-偶氮雙(2-脒基丙烷).2HCl(在2mM下的AAPH)作為自由基引發(fā)劑，在含水體系中進(jìn)行測定抗氧化劑效率的實驗。通過在234nm下監(jiān)控通過在30℃下，在pH7.4的50mM磷酸鹽緩沖液的含水體系中將亞油酸(0.16mM)氧化而生成的共軛二烯烴氫過氧化物的生產(chǎn)。通過其猝滅自由基并因此減慢或終止亞油酸氧化的能力，測量抗氧化效率。圖4示出了結(jié)果。在這一圖中，x-軸對應(yīng)于采用固定濃度白藜蘆醇Pi培育的酸性磷酸酶的用量。增加酸性磷酸酶的濃度因此對應(yīng)于增加脫磷?；邹继J醇的含量。這導(dǎo)致抗氧化活性的依賴于劑量的增加。總之，這些數(shù)據(jù)表明，磷酰化白藜蘆醇的酶法脫磷?；瘜?dǎo)致活性恢復(fù)，其作為對AAPH誘導(dǎo)的亞油酸氧化的體外抗氧化活性形式測量。權(quán)利要求1.施加到角質(zhì)組織上的局部施用組合物，它包括與化妝品或藥學(xué)上可接受的載體結(jié)合的至少一種磷?；喾?。2.權(quán)利要求1的組合物，其中多酚是具有下述化學(xué)式的化合物其中R1、R2、R3、R4、R5彼此獨立地各自表示氫、氫氧根、羧基、Z、OZ或COOZ，條件是取代基R1、R2、R3、R4、R5中的至少一個取代基是羥基或羧基，Z是由1-10個碳原子組成的烷基鏈或者是CHCHCOOY，其中Y＝氫或1-4個碳原子的烷基鏈。3.權(quán)利要求2的組合物，其中該化合物選自兒茶酚、連苯三酚、愈創(chuàng)木酚、間苯二酚和1，4-氫醌；連苯三酚和局部施用可接受的羥基酸及其酯，羥基肉桂酸及其局部施用可接受的酯，其中一個R基是乙烯基酸或其酯；其混合物，含有這些化合物的植物提取物，及其混合物。4.權(quán)利要求3的組合物，其中該化合物選自沒食子酸、沒食子酸甲酯、沒食子酸乙酯、沒食子酸丙酯、沒食子酸辛酯、對香豆酸、咖啡酸、阿魏酸、水楊酸、芥子酸、綠原酸、姜黃和其中羧酸基用C1-C10的醇酯化的類似物，及其混合物。5.權(quán)利要求1的組合物，其中至少一個多酚是磷?；s合單寧。6.權(quán)利要求5的組合物，其中縮合單寧是局部施用可接受的磷酰化類黃酮、茋或間苯三酚。7.權(quán)利要求6的組合物，其中縮合單寧是磷酰化類黃酮或其混合物。8.權(quán)利要求7的組合物，其中類黃酮選自如下化合物的磷?；问近S烷酮、查耳酮、黃酮、異黃酮、黃酮醇、黃烷醇、香豆素、色酮、3，3′-亞甲基-4-雙羥香豆素、苯并二氫吡喃-4-酮和苯并二氫吡喃醇。9.權(quán)利要求5的組合物，其中該化合物是磷?；嚒?0.權(quán)利要求9的組合物，其中所述化合物是磷?；邹继J醇或磷酰化白藜蘆醇衍生物。11.權(quán)利要求1的組合物，其中以磷?；参锾崛∥镄问教峁┒喾?。12.權(quán)利要求11的組合物，其中多酚以選自下述的植物提取物形式提供桉樹、金合歡屬、槲屬、松屬、銀杏、胡枝子屬、西番蓮、水飛薊屬、柑桔、金縷梅、百里香屬、果香菊屬、蓍屬、木賊屬、槐屬、蕎麥屬、接骨木花、樺屬、葡萄屬、山楂屬、拉坦尼根、千屈菜屬、金合歡屬、柏木屬、越橘屬、茶蔗子屬、矢車菊屬、薔薇屬、木槿屬、山茶屬、錦葵屬、鬼臼屬、五味子、Gaiacum、可可屬、熊果屬、紫藤、菜薊、迷迭香屬、雞腳參屬、一枝黃花、石榴、紫草、姜黃屬、七葉樹屬、草木犀、阿密、山柳菊、當(dāng)歸、車葉草、中國沒食子、葡萄種子、葡萄皮、綠茶、紅茶、白茶、石榴、可可粉、紅葡萄酒、柿子、柑桔類水果、大豆及其混合物這些的磷?；崛∥铩?3.權(quán)利要求1的組合物，其中磷?；邮橇柞；目伤鈫螌?。14.權(quán)利要求1的組合物，其中多酚選自下述化合物的磷?；问絻翰璺?、DL-3，4-二羥基苯基丙氨酸、DL-DOPA；兒茶酚胺、3-羥基酪胺、多巴胺、間苯三酚；酚酸、咖啡酸、二氫咖啡酸、阿魏酸、原兒茶酸、綠原酸、異綠原酸、2，5-二羥基苯甲酸、尿黑酸、沒食子酸、六羥基聯(lián)苯甲酸、鞣花酸、迷迭香酸、紫草酸、姜黃；多羥基化香豆素、多羥基化木酚素、新木酚素；水飛薊素、apigenol、luteolol、五羥黃酮、quercetagin、六羥黃酮、柯因、楊梅黃酮、鼠李亭、染料木黃酮、桑色素、棉子皮亭、莰非醇、蕓香苷、柚苷、4，5′，7-三羥黃烷酮、橙皮素、橙皮苷、地奧司明、diosmoside、3′，8″-雙-4′，5，7-三羥基黃酮、非瑟酮、牧荊葡基黃酮、異甘草素、橙皮苷甲基查耳酮、黃杉素、水飛薊素、水飛薊亭、水飛薊寧、兒茶酸、表兒茶酸、棓兒茶酸、兒茶酸沒食子酸酯、棓兒茶酸沒食子酸酯、表兒茶酸沒食子酸酯、表棓兒茶酸沒食子酸酯、表棓兒茶酸；葡糖棓苷；原花色素；沒食子酸丙酯、沒食子酸異戊基辛酯和沒食子酸十二烷酯；五-O-沒食子?；咸烟牵粏螌幩?；棓單寧、鞣花單寧、莽草酸、水楊酸、白藜蘆醇(3，4′，5′-三羥基茋)；含有這些化合物中的一種或多種化合物的植物提取物；及其混合物。15.權(quán)利要求1的組合物，它包括磷酰化白藜蘆醇或磷?；邹继J醇衍生物。16.權(quán)利要求1的組合物，它包括至少一種選自如下的皮膚益處劑收斂劑、抗氧化劑、自由基清除劑、抗痤瘡劑、抗微生物劑、抗真菌劑、螯合劑、抗老化劑、抗皺紋劑、止痛劑、皮膚光亮劑、皮膚調(diào)理劑、抗刺激劑、消炎劑、抗脂肪團劑、保濕劑、潤膚劑、有機防曬劑、無機防太陽劑、化學(xué)剝落劑、物理剝落劑、自動曬黑劑、生物活性肽及其混合物。17.調(diào)節(jié)皮膚病的方法，該方法包括將包含與局部施用可接受的載體結(jié)合的至少一種磷酰化多酚的組合物施加到皮膚上。18.權(quán)利要求17的方法，其中待治療的皮膚病選自濕疹、皮脂溢性皮炎、牛皮癬、干燥病、腫瘤生長、皮炎、毛囊炎、酒渣鼻和痤瘡。19.權(quán)利要求17的方法，其中待治療的皮膚病是一種或多種皮膚老化的跡象。20.權(quán)利要求19的方法，其中多酚選自磷?；慄S酮、茋及其混合物。21.權(quán)利要求20的方法，其中類黃酮選自如下化合物的磷?；问近S烷酮、查耳酮、黃酮、異黃酮、黃酮醇、黃烷醇、香豆素、色酮、3，3′-亞甲基-4-雙羥基香豆素、苯并二氫吡喃-4-酮和苯并二氫吡喃醇。22.權(quán)利要求19的方法，其中多酚是磷?；邹继J醇或磷酰化白藜蘆醇衍生物。23.調(diào)節(jié)反應(yīng)性氧物種對角質(zhì)組織細(xì)胞的作用的方法，該方法包括將包含至少一種磷酰化多酚和局部施用可接受的載體的組合物施加到細(xì)胞上。24.延緩輸送多酚到皮膚上的方法，該方法包括將磷?；问降亩喾邮┘拥狡つw上。25.使得水不溶性多酚變得水溶性的方法，該方法包括將不溶性多酚磷酰化到足以使得多酚水溶性的程度。26.權(quán)利要求25的方法，其中多酚是白藜蘆醇或白藜蘆醇衍生物。全文摘要本發(fā)明提供含與局部施用可接受的載體結(jié)合的磷?；喾拥木植渴┯媒M合物。本發(fā)明的組合物提供延緩輸送多酚到角質(zhì)組織，例如皮膚、頭發(fā)和指甲上的方式，在采用角質(zhì)組織的酶將多酚脫磷?；那闆r下，使它返回到其天然的活性形式。該組合物尤其可用于調(diào)節(jié)皮膚病。文檔編號A61K36/18GK101018554SQ200480043996公開日2007年8月15日申請日期2004年9月14日優(yōu)先權(quán)日2004年9月14日發(fā)明者L·德克萊爾,H·科斯特延斯,D·梅斯,W·范布魯塞爾,G·舍爾肯斯申請人:味之素歐姆尼凱姆股份有限公司,雅詩蘭黛協(xié)調(diào)中心股份有限公司