專利名稱：聯(lián)合治療癌癥的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及聯(lián)合給予組蛋白脫乙酰酶(HDAC)抑制劑和抗癌藥物的治療癌癥的方法。第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。
背景技術(shù)：
癌癥是其中細(xì)胞群體在不同程度上對(duì)正常決定增殖和分化的控制機(jī)制不產(chǎn)生應(yīng)答的病癥。
用于臨床癌癥治療的治療藥物可分為6類烷化劑、抗生素藥、抗代謝藥、生物制劑、激素藥物和植物來源藥物。
還嘗試通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的終末分化治療癌癥(M.B.，Roberts，A.B.和Driscoll，J.S.(1985)，CancerPrinciples and Practice of Oncology，Hellman，S.，Rosenberg，S.A.和DeVita，V.T.，Jr.編輯，笫2版，(J.B.Lippincott，Philadelphia)；第49頁)。據(jù)報(bào)道，在細(xì)胞培養(yǎng)模型中，通過使細(xì)胞暴露于各種刺激包括環(huán)AMP和維甲酸(Breitman，T.R.，Selonick，S.E.和Collins，S.J.(1980)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 772936-2940；Olsson，I.L.和Breitman，T.R.(1982)Cancer Res.423924-3927)、阿柔比星和其它蒽環(huán)霉素(Schwartz，E.L.和Sartorelli，A.C.(1982)Cancer Res.422651-2655)進(jìn)行分化。有大量證據(jù)表明瘤轉(zhuǎn)化不需要破壞癌細(xì)胞分化的潛力(Sporn等；Marks，P.A.，Sheffery，M.和Rifkind，R.A.(1987)Cancer Res.47659；Sachs，L.(1978)Nature(Lond.)274535)。
有很多腫瘤細(xì)胞對(duì)正常增殖調(diào)節(jié)劑不產(chǎn)生反應(yīng)的實(shí)例，顯然是其分化程序的表達(dá)被阻斷，因而可誘導(dǎo)分化和終止復(fù)制。多種藥物可誘導(dǎo)各種轉(zhuǎn)化細(xì)胞系和初級(jí)人腫瘤移植物以表達(dá)更多的分化特征。這些藥物包括a)極性化合物(Marks等(1987)；Friend，C.，Scher，W.，Holland，J.W.和Sato，T.(1971)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)68378-382；Tanaka，M.，Levy，J.，Terada，M.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.和Marks，P.A.(1975)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)721003-1006；Reuben，R.C.，Wife，R.L.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.和Marks，P.A.(1976)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)73862-866)；b)維生素D和維甲酸的衍生物(Abe，E.，Miyaura，C.，Sakagami，H.，Takeda，M.，Konno，K.，Yamazaki，T.，Yoshika，S.和Suda，T.(1981)Proc.Natl，Acad，Sci.(USA)784990-4994；Schwartz，E.L.，Snoddy，J.R.，Kreutter，D.，Rasmussen，H.和Sartorelli，A.C.(1983)Proc.Am.Assoc.Cancer Res.2418；Tanenaga，K.，Hozumi，M.和Sakagami，Y.(1980)Cancer Res.40914-919)；c)類固醇激素(Lotem，J.和Sachs，L.(1975)Int.J.Cancer 15731-740)；d)生長因子(Sachs，L.(1978)Nature(Lond.)274535，Metcalf，D.(1985)Science，22916-22)；e)蛋白酶(Scher，W.，Scher，B.M.和Waxman，S.(1983)Exp.Hematol.11490-498；Scher，W.，Scher，B.M.和Waxman，S.(1982)Biochem.& Biophys.Res.Comm.109348-354)；f)腫瘤啟動(dòng)子(Huberman，E.和Callaham，M.F.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)761293-1297；Lottem，J.和Sachs，L.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)765158-5162)；和g)DNA或RNA合成抑制劑(Schwartz，E.L.和Sartorelli，A.C.(1982)Cancer Res.422651-2655，Terada，M.，Epner，E.，Nudel，U.，Salmon，J.，F(xiàn)ibach，E.，Rifkind，R.A.和Marks，P.A.(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)752795-2799；Morin，M.J.和Sartorelli，A.C.(1984)Cancer Res.442807-2812；Schwartz，E.L.，Brown，B.J.，Nierenberg，M.，Marsh，J.C.和Sartorelli，A.C.(1983)Cancer Res.432725-2730；Sugano，H.，F(xiàn)urusawa，M.，Kawaguchi，T.和Ikawa，Y.(1973)Bibl.Hematol.39943-954；Ebert，P.S.，Wars，I.和Buell，D.N.(1976)CancerRes.361809-1813；Hayashi，M.，Okabe，J.和Hozumi，M.(1979)Gann70235-238)。
組蛋白脫乙酰酶抑制劑例如辛二酰苯胺異羥肟酸(suberoylanilidehydroxamide acid)(SAHA)屬于該類藥物，它們具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞生長停止、分化和/或調(diào)亡能力(Richon，V.M.，Webb，Y.，Merger，R.等(1996)PNAS 935705-8)。這些化合物靶向成為惡性腫瘤細(xì)胞能力的內(nèi)在機(jī)制，因?yàn)樗鼈冊(cè)谟行б种苿?dòng)物腫瘤生長的劑量下未出現(xiàn)毒性(Cohen，L.A.，Amin，S.，Marks，P.A.，Rifkind，R.A.，Desai，D.和Richon，V.M.(1999)Anticancer Research 194999-5006)。有多個(gè)證據(jù)表明組蛋白乙酰化和脫乙?；菣C(jī)理，通過此類機(jī)理在細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)(Grunstein，M.(1997)Nature 389349-52)。據(jù)認(rèn)為，通過改變組蛋白與核小體中螺旋DNA親合力；通過染色質(zhì)結(jié)構(gòu)中的變化發(fā)生這些作用。已鑒定出5種組蛋白(稱為H1、H2A、H2B、H3和H4)。在核小體中發(fā)現(xiàn)組蛋白H2A、H2B、H3和H4，且H1是位于核小體之間的連接體。每個(gè)核小體在其核內(nèi)含有兩種組蛋白，單獨(dú)存在于核小體結(jié)構(gòu)的外層部分的H1除外。據(jù)認(rèn)為，當(dāng)組蛋白乙?；蜁r(shí)，組蛋白與磷酸DNA骨架結(jié)合的親合力更大。該親合力造成DNA與組蛋白緊密結(jié)合，致使DNA難以轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)元件和機(jī)器。通過兩個(gè)酶復(fù)合物組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白脫乙酰酶(HDAC)之間的活性平衡發(fā)生調(diào)節(jié)乙?；癄顟B(tài)。據(jù)認(rèn)為，低乙酰化狀態(tài)抑制有關(guān)DNA的轉(zhuǎn)錄。該低乙?；癄顟B(tài)由包括HDAC酶的大多蛋白復(fù)合體催化。HDACs尤其表現(xiàn)出催化除去染色質(zhì)核組蛋白的乙酰基。
據(jù)認(rèn)為，經(jīng)X-射線晶體分析法研究證實(shí)，通過與酶的催化部位直接相互作用發(fā)生SAHA抑制HDAC(Finnin，M.S.，Donigian，J.R.，Cohen，A.等(1999)Nature 401188-193)。據(jù)認(rèn)為，抑制HDAC的結(jié)果對(duì)基因組無普遍性作用，而是僅影響基因組的小子集(Van Lint，C.，Emiliani，S.，Verdin，E.(1996)Gene Expression 5245-53)。用與HDAC抑制劑一起培養(yǎng)的惡性腫瘤細(xì)胞系的DNA微排序(microarrays)提供的證據(jù)表明有其產(chǎn)物改變的有限數(shù)量(1-2％)的基因。例如，在培養(yǎng)基中用HDAC抑制劑處理細(xì)胞出現(xiàn)連續(xù)誘導(dǎo)依賴細(xì)胞周期蛋白的激酶抑制劑p21(Archer，S.Shufen，M.Shei，A.，Hodin，R.(1998)PNAS 956791-96)。該蛋白在抑制細(xì)胞周期中起重要作用。據(jù)認(rèn)為，HDAC抑制劑通過在p21基因區(qū)域中蔓延組蛋白的高乙?；癄顟B(tài)增加p21轉(zhuǎn)錄率，因而使基因可以轉(zhuǎn)錄機(jī)器。其表達(dá)不受HDAC抑制劑影響的基因在區(qū)域關(guān)聯(lián)組蛋白的乙?；袥]有變化(Dressel，U.，Renkawitz，R.，Baniahmad，A.(2000)Anticancer Research 20(2A)1017-22)。
在幾個(gè)實(shí)例中表明，破壞HAT或HDAC活性涉及惡性腫瘤表型的發(fā)展。例如，在急性早幼粒細(xì)胞白血病中，由PML和RARα融合產(chǎn)生的瘤蛋白質(zhì)似乎通過募集HDACs抑制特異性基因轉(zhuǎn)錄(Lin，R.J.，Nagy，L.，Inoue，S.等(1998)Nature 391811-14)。按該方式，腫瘤細(xì)胞不能完成分化，導(dǎo)致白血病細(xì)胞系過度增殖。
授予某些本發(fā)明人的美國專利號(hào)5,369,108、5,932,616、5,700,811、6,087,367和6,511,990公開可用于選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞終末分化的化合物，這些化合物具有被亞甲基柔性鏈或被剛性苯基分隔的兩個(gè)極性端基，其中極性端基的一個(gè)或兩個(gè)是大疏水基團(tuán)。在酶測(cè)定中，某些化合物在分子的同一末端還有與第一個(gè)疏水基團(tuán)相同的大疏水基團(tuán)，該基團(tuán)進(jìn)一步增加分化活性約100倍，且在細(xì)胞分化測(cè)定中增加約50倍。用于本發(fā)明方法和藥用組合物的合成化合物的方法已在前述專利中充分描述，其全部內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
已知目前的腫瘤治療由用大于一種的抗腫瘤治療劑聯(lián)合治療患者組成。實(shí)例有將放射治療和化療和/或細(xì)胞毒劑一起聯(lián)合使用，更新的是將免疫治療例如使用腫瘤細(xì)胞特異性治療抗體與放射治療聯(lián)合。但是，將各治療相互聯(lián)合以鑒別此類聯(lián)合比單獨(dú)的各方法更有效的可能性需要大量的臨床前和臨床試驗(yàn)，且沒有這種實(shí)驗(yàn)就不可能預(yù)測(cè)何種聯(lián)合顯示加和效應(yīng)或甚至協(xié)同作用。
除了增加治療效能目的外，聯(lián)合治療的另一個(gè)目的是在得到的組合中可能減少各成分的劑量，以減少由大劑量的各成分引起的不需要或有害的副作用。
迫切需要發(fā)現(xiàn)治療癌癥的合適方法，包括導(dǎo)致副作用減少和有效治療和控制惡性腫瘤的聯(lián)合治療。
發(fā)明概述本發(fā)明基于組蛋白脫乙酰酶(HDAC)抑制劑例如辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)可用于與一種或多種抗癌藥聯(lián)合使用的發(fā)現(xiàn)，提供治療有效的抗癌作用。
意外地發(fā)現(xiàn)，包括給予本文所述的HDAC抑制劑的第一治療方案(procedure)和用本文中所述的一種或多種抗癌藥的第二治療方案的組合可提供治療有效抗癌作用。每種治療(給予HDAC抑制劑和給予抗癌藥)使用與其它治療聯(lián)合提供治療有效治療的量或劑量。
聯(lián)合療法可通過誘導(dǎo)癌細(xì)胞分化、細(xì)胞生長停止和/或調(diào)亡起作用。此外，HDAC抑制劑和抗癌藥的作用可以是加和或協(xié)同作用。聯(lián)合療法尤其有利，因?yàn)榕c單一藥物療法相比，在聯(lián)合療法中每個(gè)藥物的劑量可減少，同時(shí)仍然獲得整體的抗腫瘤作用。
因此，本發(fā)明涉及在有需要的患者中治療癌癥的方法，該方法通過在第一治療方案中給予有需要的患者第一個(gè)量的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物，和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥物，其中第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。
本文中使用的治療癌癥是指部分或完全抑制、延遲或預(yù)防哺乳動(dòng)物例如人的癌癥發(fā)展包括癌轉(zhuǎn)移；抑制、延遲或預(yù)防癌癥復(fù)發(fā)包括癌轉(zhuǎn)移；或預(yù)防癌癥發(fā)作或發(fā)展(化學(xué)預(yù)防)。
本發(fā)明方法用于治療多種癌癥，包括但不限于實(shí)體瘤(例如肺、乳腺、結(jié)腸、前列腺、膀胱、直腸、腦或子宮內(nèi)膜瘤)、血液惡性腫瘤(例如白血病、淋巴瘤、骨髓瘤)、癌(例如膀胱癌、腎癌、乳腺癌、結(jié)腸直腸癌)、成神經(jīng)細(xì)胞瘤或黑素瘤。這些癌癥的非限定性實(shí)例包括皮膚T細(xì)胞淋巴瘤(CTCL)、非皮膚周圍T細(xì)胞淋巴瘤、與人嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)有關(guān)的淋巴瘤、成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤(ATLL)、急性淋巴細(xì)胞白血病、急性非淋巴細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、慢性骨髓性白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、間皮瘤；兒童實(shí)體瘤例如腦成神經(jīng)細(xì)胞瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、維爾姆斯瘤、骨癌和軟組織肉瘤；成人普通實(shí)體瘤例如頭和頸癌(例如口、喉和食管癌)、泌尿生殖癌(例如前列腺、膀胱、腎、子宮、卵巢、睪丸、直腸和結(jié)腸癌)、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、黑素瘤和其它皮膚癌；胃癌、腦癌、肝癌、腎上腺癌、腎癌、甲狀腺癌、基底細(xì)胞癌、潰瘍性和乳頭狀鱗狀細(xì)胞癌、轉(zhuǎn)移性皮膚癌、髓樣癌、骨樣肉瘤、尤因氏肉瘤、veticulum細(xì)胞肉瘤、卡波西肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤和成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤。
該方法包括用第一治療方案給予有需要的患者第一個(gè)量的HDAC抑制劑例如SAHA，和用第二治療方案給予第二個(gè)量的抗癌藥。第一和第二治療一起構(gòu)成治療有效量。
本發(fā)明還涉及用于治療癌癥的藥物組合。該藥物組合包括第一個(gè)量的HDAC抑制劑例如SAHA和第二個(gè)量的抗癌藥。第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。
本發(fā)明還涉及第一個(gè)量的HDAC抑制劑和第二個(gè)量的抗癌藥在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。
在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑和抗癌藥的組合是加和性的，即聯(lián)合治療方案產(chǎn)生各個(gè)成分單獨(dú)給藥時(shí)的加和效應(yīng)結(jié)果。根據(jù)該實(shí)施方案，HDAC抑制劑的量和抗癌藥的量一起構(gòu)成治療癌癥的有效量。
在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，據(jù)認(rèn)為，當(dāng)聯(lián)合治療方案產(chǎn)生的抗癌結(jié)果(例如細(xì)胞生長停止、調(diào)亡、誘導(dǎo)分化、細(xì)胞死亡)比各個(gè)成分單獨(dú)以治療劑量給藥時(shí)的加和效應(yīng)明顯更好時(shí)，HDAC抑制劑和抗癌藥的組合是治療協(xié)同性的。當(dāng)結(jié)果明顯更好時(shí)，可用標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)分析測(cè)定。例如，可采用Mann-Whitney檢驗(yàn)或某些其它一般公認(rèn)的統(tǒng)計(jì)分析。
治療方案可按任何順序序貫、同時(shí)或其組合進(jìn)行。例如，給予HDAC抑制劑的第一治療方案可在第二治療方案即抗癌藥之前、抗癌藥的第二治療方案之后、與抗癌藥的第二治療方案同時(shí)或其組合進(jìn)行。例如，可決定HDAC抑制劑的總療程?？稍陂_始用HDAC抑制劑治療前或用HDAC抑制劑治療之后給予抗癌藥。另外，在給予HDAC抑制劑期間，可給予抗癌藥治療，但不需要在整個(gè)HDAC抑制劑治療期間發(fā)生。同樣，在給予抗癌藥期間，可給予HDAC抑制劑治療，但不需要在整個(gè)抗癌藥治療期間發(fā)生。在另一個(gè)實(shí)施方案中，治療方案包括用HDAC抑制劑或抗癌藥的一種藥物預(yù)治療，隨后在治療期間加入第二種藥物。
在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案中，可將HDAC抑制劑與任何一種或多種其它HDAC抑制劑、烷化劑、抗生素、抗代謝藥、激素藥、植物來源藥、抗血管形成藥、分化誘導(dǎo)劑、細(xì)胞生長停止誘導(dǎo)劑、細(xì)胞調(diào)亡誘導(dǎo)劑、細(xì)胞毒藥物、生物藥、基因治療藥或其任何組合聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑是辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)，它可與任何一種或多種另外的HDAC抑制劑、烷化劑、抗生素、抗代謝藥、激素藥、植物來源藥、抗血管形成藥、分化誘導(dǎo)劑、細(xì)胞生長停止誘導(dǎo)劑、細(xì)胞調(diào)亡誘導(dǎo)劑、細(xì)胞毒藥物、生物藥、基因治療藥或其任何組合聯(lián)合給藥。
適用于本發(fā)明的HDAC抑制劑包括但不限于本文中定義的異羥肟酸衍生物、短鏈脂肪酸(SCFAs)、環(huán)四肽、苯甲酰胺衍生物或親電性酮衍生物。適用于本發(fā)明方法的HDAC抑制劑的具體非限定性實(shí)例有A)選自以下的異羥肟酸衍生物SAHA、Pyroxamide、CBHA、曲古抑菌素A(TSA)、曲古抑菌素C、水楊酰基二異羥肟酸、壬二異羥肟酸(Azelaic Bishydroxamic Acid)(ABHA)、壬二酸-1-異羥肟酸酯-9-酰苯胺(Azelaic-1-Hydroxamate-9-Anilide)(AAHA)、6-(3-氯苯基脲基)己異羥肟酸(carpoic Hydroxamic Acid)(3C1-UCHA)、Oxamflatin、A-161906、Scriptaid、PXD-101、LAQ-824、CHAP、MW2796和MW2996；B)選自以下的環(huán)四肽Trapoxin A、FR901228(FK 228或酯肽)、FR225497、Apicidin、CHAP、HC-毒素、WF27082和Chlamydocin；C)選自以下的短鏈脂肪酸(SCFAs)丁酸鈉、異戊酸鹽(酯)、戊酸鹽(酯)、4-苯基丁酸鹽(酯)(4-PBA)、苯基丁酸鹽(酯)(PB)、丙酸鹽(酯)、丁酰胺、異丁酰胺、苯基乙酸鹽(酯)、3-溴丙酸鹽(酯)、三丁精、丙戊酸和丙戊酸鹽(酯)；D)選自以下的苯甲酰胺衍生物CI-994、MS-27-275(MS-275)和MS-27-275的3′-氨基衍生物；E)選自以下的親電性酮衍生物三氟甲基酮和α-酮酰胺例如N-甲基-α-酮酰胺；和F)包括天然產(chǎn)物、psammaplins和Depudecin的各種HDAC抑制劑。
具體的HDAC抑制劑包括由以下結(jié)構(gòu)式代表的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)
由以下結(jié)構(gòu)式代表的Pyroxamide 由以下結(jié)構(gòu)式代表的間羧基肉桂酸二羥酰胺(m-Carboxycinnamicacid bishydroxamate)(CBHA) 適用于本發(fā)明方法的HDAC抑制劑的其它非限定性實(shí)例有由以下結(jié)構(gòu)代表的化合物 其中R3和R4獨(dú)立為取代或未取代的以下基團(tuán)支鏈或非支鏈的烷基、烯基、環(huán)烷基、芳基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基；環(huán)烷基、芳基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基，或R3和R4結(jié)合在一起形成哌啶基；R2為羥氨基；且n為5-8的整數(shù)。
由以下結(jié)構(gòu)代表的化合物 其中R為取代或未取代的以下基團(tuán)苯基、哌啶、噻唑、2-吡啶、3-吡啶或4-吡啶，且n為4-8的整數(shù)。
由以下結(jié)構(gòu)代表的化合物 其中A為酰胺部分，R1和R2各自選自取代或未取代的芳基、芳基烷基、萘基、吡啶氨基、9-嘌呤-6-氨基、噻唑氨基、芳氧基、芳基烷氧基、吡啶基、喹啉基或異喹啉基；R4為氫、鹵素、苯基或環(huán)烷基部分，且n為3-10的整數(shù)。
適用于本發(fā)明的烷化劑包括但不限于二氯乙胺類(氮芥例如苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、氮芥、美法侖、烏拉莫司汀)、吖丙啶(例如塞替派)、烷基酮磺酸酯(例如白消安)、亞硝基脲(例如卡莫司汀、洛莫司汀、鏈佐星)、非經(jīng)典烷化劑(六甲蜜胺、達(dá)卡巴嗪和丙卡巴肼)、鉑化合物(卡鉑和順鉑)。
適用于本發(fā)明的抗生素為蒽環(huán)霉素(例如多柔比星、柔紅霉素、表柔比星、伊達(dá)比星和蒽二酮)、絲裂霉素C、博來霉素、放線菌素D、plicatomycin。
適用于本發(fā)明的抗代謝藥包括但不限于氟尿苷、氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、亞葉酸、羥基脲、硫鳥嘌呤、巰嘌呤、阿糖胞苷、噴司他丁、磷酸氟達(dá)拉濱、克拉曲濱、天冬酰胺酶和吉西他濱。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，抗代謝藥為吉西他濱。
適用于本發(fā)明的激素藥包括但不限于雌激素、孕激素、抗雌激素藥、雄激素、抗雄激素藥、LHRH類似物、芳化酶抑制劑、己烯雌酚、他莫昔芬、托瑞米芬、fluoxymesterol、雷洛昔芬、比卡魯胺、尼魯米特、氟他胺、氨魯米特、四唑、酮康唑、醋酸戈舍瑞林、亮丙立德、醋酸甲地孕酮和米非司酮。
適用于本發(fā)明的植物來源藥物包括但不限于長春新堿、長春堿、長春酰胺、長春利定、長春瑞濱、依托泊苷、替尼泊苷、紫杉醇和多西他賽。
適用于本發(fā)明的生物藥包括但不限于免疫調(diào)節(jié)蛋白、抗腫瘤抗原的單克隆抗體、腫瘤抑制基因和癌疫苗。例如，免疫調(diào)節(jié)蛋白可以為白介素2、白介素4、白介素12、干擾素E1、干擾素D、α干擾素、紅細(xì)胞生成素、粒細(xì)胞-CSF；粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞-CSF；芽孢桿菌Cahnette-Guerin、左旋咪唑或奧曲肽。此外，腫瘤抑制基因可以為DPC-4、NF-1、NF-2、RB、p53、WT1、BRCA或BRCA2。
可通過任何本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的給藥方法給予HDAC抑制劑(例如SAHA)和抗癌藥。給藥途徑的實(shí)例包括但不限于口服、腸胃外、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、透皮、舌下、肌內(nèi)、直腸、經(jīng)口頰、鼻內(nèi)、脂質(zhì)體；通過吸入、陰道、眼內(nèi)；通過導(dǎo)管或印模(stent)局部釋放、皮下、脂肪內(nèi)、關(guān)節(jié)腔內(nèi)、鞘內(nèi)或緩釋劑型。
當(dāng)然，SAHA或其它HDAC抑制劑中任何一種的給藥途徑獨(dú)立于抗癌藥的給藥途徑。目前優(yōu)選的SAHA的給藥途徑為口服給藥。因此，按照該實(shí)施方案，經(jīng)口給予SAHA，可經(jīng)口、腸胃外、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、透皮、舌下、肌內(nèi)、直腸、經(jīng)口頰、鼻內(nèi)、脂質(zhì)體；通過吸入、陰道、眼內(nèi)；通過導(dǎo)管或印模局部釋放、皮下、脂肪內(nèi)、關(guān)節(jié)腔內(nèi)、鞘內(nèi)或以緩釋劑型給予第二種藥物(抗癌藥)。
可按照任何劑量和給藥方案給予SAHA或任何一種HDAC抑制劑，與抗癌藥的作用一起達(dá)到有效治療癌癥的劑量。例如，給予的SAHA或任何一種HDAC抑制劑的總?cè)談┝靠勺罡哌_(dá)800mg，優(yōu)選口服，每日一次、兩次和三次，連續(xù)(每日)或間斷(例如3-5日/周)。
因此，本發(fā)明涉及在有需要的患者中治療癌癥的方法，該方法通過在第一治療方案中給予有需要的患者總?cè)談┝孔罡哌_(dá)800mg的第一個(gè)量的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物，和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥，其中第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。
在一個(gè)實(shí)施方案中，以藥用組合物給予HDAC抑制劑例如SAHA，優(yōu)選適合口服給藥。在目前優(yōu)選的實(shí)施方案中，用明膠膠囊口服給予SAHA，該膠囊可含有賦形劑例如微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和硬脂酸鎂。
可按總?cè)談┝亢筒煌瑒┝糠桨附o予HDAC抑制劑，該總?cè)談┝靠呻S不同患者改變。口服的合適劑量為總?cè)談┝考s25-4000mg/m2，每日一次、每日兩次或三次，連續(xù)(每日)或間斷(例如3-5日/周)。此外，可按周期給予組合物，在各周期之間有停藥期(例如治療2-8周，在治療之間有最高達(dá)1周停藥期)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，按約200-600mg劑量給予組合物，每日一次。在另一個(gè)實(shí)施方案中，按約200-400mg劑量給予組合物，每日二次。在另一個(gè)實(shí)施方案中，按約200-400mg劑量間斷例如每周三、四或五天給予組合物，每日二次。在一個(gè)實(shí)施方案中，日劑量為200mg，可每日一次、二次或三次給予。在一個(gè)實(shí)施方案中，日劑量為300mg，可每日一次、二次或三次給予。在一個(gè)實(shí)施方案中，日劑量為400mg，可每日一次、二次或三次給予。
HDAC抑制劑的任何一種或多種具體劑量和劑量方案對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言為顯而易見的，也適用于聯(lián)合治療中使用的任何一種或多種抗癌藥。此外，還可以改變抗癌藥的具體劑量和劑量方案，最佳的劑量、給藥方案和給藥途徑將根據(jù)具體用的抗癌藥而定。
本發(fā)明還通過在第一治療方案中給予患者第一個(gè)量的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物，和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥，提供選擇性誘導(dǎo)瘤細(xì)胞終末分化、細(xì)胞生長停止和/或調(diào)亡因而抑制患者的此類細(xì)胞增殖的方法，其中第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成有效誘導(dǎo)細(xì)胞終末分化、細(xì)胞生長停止、細(xì)胞調(diào)亡的量。
本發(fā)明還通過使細(xì)胞與第一個(gè)量的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和第二個(gè)量的抗癌藥接觸，提供選擇性誘導(dǎo)瘤細(xì)胞終末分化、細(xì)胞生長停止和/或調(diào)亡從而抑制此類細(xì)胞增殖的體外方法，其中第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成有效誘導(dǎo)細(xì)胞終末分化、細(xì)胞生長停止、細(xì)胞調(diào)亡的量。
鑒于兩種治療形式有關(guān)的差別毒性，聯(lián)合療法可提供治療優(yōu)勢(shì)。例如，用HDAC抑制劑治療可導(dǎo)致抗癌藥中未出現(xiàn)的特殊毒性，反之亦然。因此，該差別毒性可允許每種治療在所述毒性不存在或最小的劑量下給予，以便聯(lián)合療法一起提供治療劑量，同時(shí)避免聯(lián)合藥物中各個(gè)成分的毒性。而且，當(dāng)由于聯(lián)合治療增強(qiáng)或協(xié)同而達(dá)到療效時(shí)，例如明顯優(yōu)于加和療效，每個(gè)藥物的劑量甚至還可減少，因而更大程度降低有關(guān)的毒性。
附圖簡述通過以下本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案的更具體描述，本發(fā)明的前述和其它目的、特征和優(yōu)點(diǎn)將顯而易見，如附圖所舉例說明，其中相似的對(duì)照特征是指不同角度的相同部分。這些圖無需標(biāo)度，強(qiáng)調(diào)而非闡述本發(fā)明原理。


圖1SAHA和吉西他濱組合在T24細(xì)胞系中的作用。如實(shí)驗(yàn)部分所述，在指定時(shí)間點(diǎn)，細(xì)胞未處理(□)，用2nM吉西他濱處理(◇)，用5μM SAHA處理(○)，或用2nM吉西他濱和5μM SAHA組合處理(△)。圖1A表示細(xì)胞增殖，圖1B表示細(xì)胞生存力。
圖2SAHA和吉西他濱組合在LnCaP細(xì)胞系中的作用。如實(shí)驗(yàn)部分所述，在指定時(shí)間點(diǎn)，(□)表示未處理細(xì)胞，(◇)表示用2nM吉西他濱處理，(○)表示用5μM SAHA處理，或(△)表示用2nM吉西他濱和5μM SAHA組合處理。圖2A表示細(xì)胞增殖，圖2B表示細(xì)胞生存力。
圖3SAHA和5-氮雜胞苷組合在T24細(xì)胞系中的作用。如實(shí)驗(yàn)部分所述，在指定時(shí)間點(diǎn)，(□)表示未處理細(xì)胞，(◇)表示用200nM5-氮雜胞苷(AZ)處理，(○)表示用5μM SAHA處理，或(△)表示用200nM5-氮雜胞苷和5μM SAHA組合處理。圖3A表示細(xì)胞增殖，圖3B表示細(xì)胞生存力。星號(hào)(*)表示加入SAHA的時(shí)間點(diǎn)。
圖4SAHA組合對(duì)MDA-231細(xì)胞增殖的作用。圖4A細(xì)胞用指定濃度SAHA預(yù)處理4小時(shí)，洗滌，然后加入第二種藥物保持48小時(shí)。圖4B細(xì)胞用指定濃度SAHA預(yù)處理48小時(shí)，加入第二種藥物保持4小時(shí)，然后沖洗細(xì)胞。48小時(shí)后，用MTS定量測(cè)定細(xì)胞生長。
圖5SAHA組合對(duì)DU145細(xì)胞增殖的作用。細(xì)胞用指定濃度SAHA預(yù)處理48小時(shí)，加入第二種藥物保持4小時(shí)，然后沖洗細(xì)胞。48小時(shí)后，用MTS定量測(cè)定細(xì)胞生長。
圖6SAHA組合對(duì)DU145細(xì)胞克隆發(fā)生的作用。細(xì)胞用SAHA處理48小時(shí)，然后加入第二種藥物保持4小時(shí)，然后沖洗細(xì)胞。2-3周后評(píng)價(jià)集落形成。
圖7SAHA組合對(duì)MDA-231細(xì)胞克隆發(fā)生的作用。細(xì)胞用SAHA處理48小時(shí)，加入第二種藥物保持4小時(shí)，然后沖洗細(xì)胞。2-3周后評(píng)價(jià)集落形成。
圖8SAHA組合對(duì)U118細(xì)胞克隆發(fā)生的作用。細(xì)胞用SAHA處理48小時(shí)，加入第二種藥物保持4小時(shí)，然后沖洗細(xì)胞。2-3周后評(píng)價(jià)集落形成。
圖9用SAHA和伊立替康處理LnCap細(xì)胞的抑制百分率。細(xì)胞與指定濃度的單獨(dú)SAHA溫育；與單獨(dú)伊立替康溫育；以及與SAHA和伊立替康組合溫育。每個(gè)實(shí)驗(yàn)右手邊柱狀圖代表加和相互作用的計(jì)算效果。
圖10用SAHA和5-氟尿嘧啶(5-FU)處理LnCap細(xì)胞的抑制百分率。細(xì)胞與指定濃度的單獨(dú)SAHA溫育；與單獨(dú)5-FU溫育；以及與SAHA和5-FU組合溫育。每個(gè)實(shí)驗(yàn)右手邊柱狀圖代表加和相互作用的計(jì)算效果。
圖11用SAHA和多西他賽處理LnCap細(xì)胞的抑制百分率。細(xì)胞與指定濃度的單獨(dú)SAHA溫育；與單獨(dú)多西他賽溫育；以及與SAHA和多西他賽組合溫育。每個(gè)實(shí)驗(yàn)右手邊柱狀圖代表加和相互作用的計(jì)算效果。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及通過在第一治療方案中給予有需要的患者第一個(gè)量的HDAC抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥，在有需要的患者中治療癌癥的方法，其中第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。HDAC抑制劑和抗癌藥的作用可以是加和性或協(xié)同的。
本發(fā)明還涉及通過在第一治療方案中給予有需要的患者第一個(gè)量的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥，在有需要的患者中治療癌癥的方法，其中第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。SAHA和抗癌藥的作用可以是加和性或協(xié)同的。
與本發(fā)明有關(guān)的術(shù)語“治療”的各種語法形式是指預(yù)防(即化學(xué)預(yù)防)、治愈、逆轉(zhuǎn)、減輕、緩解、最小化、抑制或停止疾病狀態(tài)、疾病發(fā)展、疾病病原體(例如細(xì)菌或病毒)或其它異常病癥的有害作用。例如，治療可涉及緩解疾病癥狀(即不一定是全部癥狀)或減緩疾病發(fā)展。因?yàn)槟承┍景l(fā)明方法涉及物理去除病原體，技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到，在暴露于病原體前或同時(shí)給予本發(fā)明化合物(預(yù)防治療)和暴露于病原體后(甚至康復(fù)后)給予本發(fā)明化合物的情形中，它們同等有效。
本文中所用的癌癥治療是指部分或完全抑制、延遲或預(yù)防癌癥包括癌轉(zhuǎn)移的進(jìn)程；抑制、延遲或預(yù)防包括癌轉(zhuǎn)移的癌的復(fù)發(fā)；或預(yù)防(化學(xué)預(yù)防)哺乳動(dòng)物例如人的癌癥發(fā)作或發(fā)展。另外，本發(fā)明方法將用于化學(xué)預(yù)防治療人癌癥患者。但是，本發(fā)明方法也可能有效治療其它哺乳動(dòng)物的癌癥。
本文中使用的術(shù)語“治療有效量”是指聯(lián)合療法中第一和第二治療的組合量有效。該組合量實(shí)現(xiàn)需要的生物反應(yīng)。在本發(fā)明中，需要的生物反應(yīng)為部分或完全抑制、延遲或預(yù)防癌癥包括癌轉(zhuǎn)移的進(jìn)程；抑制、延遲或預(yù)防癌癥包括癌轉(zhuǎn)移的復(fù)發(fā)；或預(yù)防(化學(xué)預(yù)防)哺乳動(dòng)物例如人的癌癥發(fā)作或發(fā)展。
本文中可互換使用的術(shù)語“組合治療”、“聯(lián)合療法”、“聯(lián)合治療”是指用至少兩種不同的治療藥物治療個(gè)體。根據(jù)本發(fā)明，個(gè)體用第一種治療藥物，優(yōu)選SAHA或另一種本文所述的HDAC抑制劑治療。第二種治療藥物可以是另一種HDAC抑制劑，或可以是本文定義的任何臨床上確定的抗癌藥。聯(lián)合治療可包括第三種或甚至更多的治療藥物。
該方法包括在第一治療方案中給予有需要的患者第一個(gè)量的組蛋白脫乙酰酶抑制劑如SAHA，和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥。第一和第二治療一起構(gòu)成治療有效量。
本發(fā)明還涉及用于治療癌癥的藥物組合。該藥物組合包含第一個(gè)量的HDAC抑制劑如SAHA和第二個(gè)量的抗癌藥。第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。
本發(fā)明還涉及第一個(gè)量的HDAC抑制劑和第二個(gè)量的抗癌藥在制備治療癌癥藥物中的用途。
在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑和抗癌藥組合為加和性的，即聯(lián)合治療方案產(chǎn)生各個(gè)成分單獨(dú)給藥的加和效應(yīng)結(jié)果。根據(jù)該實(shí)施方案，HDAC抑制劑的量和抗癌藥的量一起構(gòu)成治療癌癥的有效量。
在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，當(dāng)聯(lián)合治療方案產(chǎn)生比各個(gè)組分以治療劑量單獨(dú)給藥的加和效應(yīng)明顯更好的抗癌結(jié)果時(shí)(例如細(xì)胞生長停止、調(diào)亡、誘導(dǎo)分化、細(xì)胞死亡)，可認(rèn)為HDAC抑制劑和抗癌藥組合為治療協(xié)同的。當(dāng)結(jié)果明顯更好時(shí)，可用標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)分析確定。例如可用Mann-Whitney檢驗(yàn)或某些其他一般公認(rèn)的統(tǒng)計(jì)分析。
治療方案可按任何順序序貫、同時(shí)或其組合進(jìn)行。例如，可在第二治療方案即抗癌藥之前、在抗癌藥的第二種治療之后、與抗癌藥的第二種治療同時(shí)或其組合，給予第一治療方案的HDAC抑制劑。例如，可確定HDAC抑制劑的總療程。可在用HDAC抑制劑治療開始前或用HDAC抑制劑治療后給予抗癌藥。另外，在給予HDAC抑制劑期間，可給予抗癌藥治療，但不需要在整個(gè)HDAC抑制劑治療期間發(fā)生。在另一個(gè)實(shí)施方案中，治療方案包括用HDAC抑制劑或抗癌藥的一種藥物預(yù)治療，隨后加入第二種藥物。
本發(fā)明方法用于治療多種癌癥，包括但不限于實(shí)體瘤(例如肺、乳腺、結(jié)腸、前列腺、膀胱、直腸、腦或子宮內(nèi)膜的腫瘤)；血液惡性腫瘤(例如白血病、淋巴瘤、骨髓瘤)、癌(例如膀胱癌、腎癌、乳腺癌、結(jié)腸直腸癌)、成神經(jīng)細(xì)胞瘤或黑素瘤。這些癌的非限定性實(shí)例包括皮膚T細(xì)胞淋巴瘤(CTCL)、非皮膚周圍T細(xì)胞淋巴瘤、與人嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)有關(guān)的淋巴瘤、成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤(ATLL)、急性淋巴細(xì)胞白血病、急性非淋巴細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、慢性骨髓性白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、間皮瘤；兒童實(shí)體瘤例如腦成神經(jīng)細(xì)胞瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、維爾姆斯瘤、骨癌和軟組織肉瘤；成人普通實(shí)體瘤例如頭和頸癌(例如口、喉和食管)、泌尿生殖癌(例如前列腺、膀胱、腎、子宮、卵巢、睪丸、直腸和結(jié)腸癌)、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、黑素瘤和其它皮膚癌；胃癌、腦癌、肝癌、腎上腺癌、腎癌、甲狀腺癌、基底細(xì)胞癌、潰瘍性和乳頭狀鱗狀細(xì)胞癌、轉(zhuǎn)移性皮膚癌、髓樣癌、骨樣肉瘤、尤因氏肉瘤、veticulum細(xì)胞肉瘤、卡波西肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤和成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤。
在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與另外的HDAC抑制劑聯(lián)合給藥。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與烷化劑聯(lián)合給藥。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與抗生素藥物聯(lián)合給藥。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與抗代謝藥聯(lián)合給藥。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與激素藥聯(lián)合給藥。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與植物來源藥聯(lián)合給藥。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與抗血管形成藥聯(lián)合給藥。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與分化誘導(dǎo)劑聯(lián)合給藥。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與細(xì)胞生長停止誘導(dǎo)劑聯(lián)合給藥。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與細(xì)胞調(diào)亡誘導(dǎo)劑聯(lián)合給藥。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與細(xì)胞毒藥物聯(lián)合給藥。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與生物藥聯(lián)合給藥。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑可與另外的HDAC抑制劑、烷化劑、抗生素、抗代謝藥、激素藥、植物來源藥、抗血管形成藥、分化誘導(dǎo)劑、細(xì)胞生長停止誘導(dǎo)劑、細(xì)胞調(diào)亡誘導(dǎo)劑、細(xì)胞毒藥物或生物藥的任何組合聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案中，HDAC抑制劑為SAHA，它可與任何一種或多種其它HDAC抑制劑、烷化劑、抗生素、抗代謝藥物、激素藥物、植物來源藥、抗血管形成藥、分化誘導(dǎo)劑、細(xì)胞生長停止誘導(dǎo)劑、細(xì)胞調(diào)亡誘導(dǎo)劑、細(xì)胞毒藥物、生物藥物、基因治療藥物或其任何組合聯(lián)合給藥。
鑒于與兩種治療形式有關(guān)的差別毒性，聯(lián)合療法可提供治療優(yōu)勢(shì)。例如，用HDAC抑制劑治療可導(dǎo)致用抗癌藥時(shí)未出現(xiàn)的特殊毒性，反之亦然。因此，該差別毒性可允許每種治療在所述毒性不存在或最小的劑量下給予，以便聯(lián)合療法一起提供治療劑量，同時(shí)避免聯(lián)合藥物中各個(gè)成分的毒性。而且，當(dāng)由于聯(lián)合治療增強(qiáng)或協(xié)同而獲得療效時(shí)，例如明顯優(yōu)于加和療效，每個(gè)藥物的劑量甚至還可進(jìn)一步減少，因而更大程度降低有關(guān)的毒性。
組蛋白脫乙酰酶和組蛋白脫乙酰酶抑制劑本文中使用的術(shù)語組蛋白脫乙酰酶(HDACs)是催化除去核小體核組蛋白氨基末尾上的賴氨酸殘基中的乙?；拿浮Ｒ虼?，HDACs與組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶(HATs)一起調(diào)節(jié)組蛋白的乙酰化狀態(tài)。組蛋白乙酰化影響基因表達(dá)，且HDACs抑制劑例如基于異羥肟酸的雜化極性化合物辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)體外誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長停止、分化和/或凋亡，體內(nèi)抑制腫瘤生長。根據(jù)結(jié)構(gòu)同源性，HDACs可分為三類。第I類HDACs(HDACs 1、2、3和8)具有酵母RPD3蛋白相似性，位于細(xì)胞核內(nèi)，在與轉(zhuǎn)錄輔阻遏物相關(guān)的復(fù)合物中發(fā)現(xiàn)。第II類HDACs(HDACs 4、5、6、7和9)與酵母HDA1蛋白相似，并且具有核和胞質(zhì)亞細(xì)胞定位?；诋惲u肟酸的HDAC抑制劑例如SAHA抑制第I和II類HDACs。第III類HDACs形成結(jié)構(gòu)不相近類NAD依賴性酶，它們與酵母SIR2蛋白相關(guān)，不受基于異羥肟酸的HDAC抑制劑的抑制。
本文中使用的術(shù)語組蛋白脫乙酰酶抑制劑或HDAC抑制劑是體內(nèi)、體外或兩者能夠抑制組蛋白脫乙?；幕衔?。因此，HDAC抑制劑抑制至少一種組蛋白脫乙酰酶的活性。由于抑制至少一種組蛋白脫乙?；?，出現(xiàn)乙酰化組蛋白增加且乙?；M蛋白蓄積是評(píng)價(jià)HDAC抑制劑活性的合適生物標(biāo)記。因此，可測(cè)定乙?；M蛋白蓄積的方法可用于測(cè)定目的化合物的HDAC抑制活性。應(yīng)理解可抑制組蛋白脫乙酰酶活性的化合物也可與其它底物結(jié)合，因此可抑制其它生物活性分子例如酶。還應(yīng)理解本發(fā)明化合物能抑制以上闡述的任何組蛋白脫乙酰酶或任何其它組蛋白脫乙酰酶。
例如，在接受HDAC抑制劑的患者中，可用適當(dāng)對(duì)照測(cè)定在用HDAC抑制劑處理的外周單核細(xì)胞和組織中的乙酰化組蛋白蓄積。
可用例如顯示抑制至少一種組蛋白脫乙酰酶的酶試驗(yàn)體外測(cè)定具體化合物的HDAC抑制活性。另外，測(cè)定在用具體組合物處理的細(xì)胞中乙?；M蛋白的蓄積可測(cè)定化合物的HDAC抑制活性。
測(cè)定乙?；M蛋白蓄積的方法在文獻(xiàn)中已熟知。參見，例如Marks，P.A.等，J.Natl.Cancer Inst.921210-1215，2000，Butler，L.M.等，Cancer Res.605165-5170(2000)；Richon，V.M.等，Proc.Natl.Acad.Sci.，USA，953003-3007，1998和Yoshida，M.等，J.Biol.Chem.，26517174-17179，1990。
例如，測(cè)定HDAC抑制劑化合物活性的酶測(cè)定可進(jìn)行如下。簡單地說，可通過在冰上，無底物存在下，將酶制劑與設(shè)定量的抑制劑化合物溫育約20分鐘，測(cè)定HDAC抑制劑化合物對(duì)純化的人已附加表位的(旗型)HDAC1親合力的影響?？杉尤氲孜?[3H]乙?；鶚?biāo)記的源自鼠紅白血病細(xì)胞的組蛋白)，可將樣品在37℃下，在總體積30μL中溫育20分鐘。然后可終止反應(yīng)，可萃取釋放出的乙酸酯，通過閃爍計(jì)數(shù)測(cè)定釋放的放射量。另一個(gè)用于測(cè)定HDAC抑制劑化合物活性的測(cè)定方法是來自BIOMOLResearch Laboratories，Inc.，Plymouth Meeting，PA的″HDAC熒光活性測(cè)定；藥物發(fā)現(xiàn)試劑盒(DrugDiscovery Kit)-AK-500″。
可如下進(jìn)行體內(nèi)研究。可給動(dòng)物例如小鼠腹膜內(nèi)注射HDAC抑制劑化合物。給藥后，可在預(yù)定時(shí)間分離選擇的組織例如腦、脾、肝等?？蓮幕旧贤琘oshida等，J.Biol.Chem.26517174-17179，1990所述的組織中分離組蛋白。可在15％SDS-聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行等量組蛋白(約1μg)電泳，然后可轉(zhuǎn)移至Hybond-P濾器(得自Amersham)。濾器可用3％乳阻塞，可用兔純化多克隆抗乙酰化組蛋白H4抗體(α-Ac-H4)和抗乙?；M蛋白H3抗體(α-Ac-H3)(Upstate Biotechnology，Inc.)探測(cè)。可用軛合辣根過氧化物酶的山羊抗兔抗體(1∶5000)和SuperSignal化學(xué)發(fā)光底物(Pierce)目測(cè)檢查乙酰化組蛋白水平。作為組蛋白的載樣對(duì)照，可進(jìn)行平行凝膠電泳，然后用考馬斯藍(lán)(CB)染色。
此外，已表明基于異羥肟酸的HDAC抑制劑上調(diào)p21WAF1基因表達(dá)。用標(biāo)準(zhǔn)方法使多種轉(zhuǎn)化細(xì)胞與HDAC抑制劑一起培養(yǎng)，2小時(shí)內(nèi)誘導(dǎo)出p21WAF1蛋白。p21WAF1基因誘導(dǎo)與在該基因的染色質(zhì)區(qū)域中乙?；M蛋白蓄積有關(guān)。因此，可認(rèn)為p21WAF1誘導(dǎo)涉及由HDAC抑制劑導(dǎo)致的轉(zhuǎn)化細(xì)胞中G1細(xì)胞周期停止。
HDAC抑制劑有效治療較寬范圍的特征為瘤細(xì)胞增殖的疾病，例如上文中所述的任一癌癥。但是，HDAC抑制劑的治療用途不限于治療癌癥。已發(fā)現(xiàn)HDAC抑制劑可用于很多種疾病。
例如，發(fā)現(xiàn)HDAC抑制劑尤其是SAHA用于治療各種急性和慢性炎性疾病、自身免疫疾病、變應(yīng)性疾病、與氧化應(yīng)激性有關(guān)的疾病和特征為細(xì)胞過度增殖的疾病。非限定性實(shí)例有關(guān)節(jié)炎癥包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)和銀屑病性關(guān)節(jié)炎；炎性腸病例如節(jié)段性回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎；脊錐關(guān)節(jié)??；硬皮病；銀屑病(包括T細(xì)胞介導(dǎo)的銀屑病)和炎性皮膚病例如皮炎、濕疹、特應(yīng)性皮炎、過敏性接觸性皮炎、蕁麻疹；脈管炎(例如壞死性、皮膚和過敏性脈管炎)；嗜酸性肌炎、嗜酸性筋膜炎；伴有皮膚或器官白細(xì)胞浸潤的癌癥、局部缺血性損傷包括腦缺血(例如創(chuàng)傷所致腦損傷、癲癇、出血或中風(fēng)，其中每種情形可導(dǎo)致神經(jīng)變性)；HIV、心力衰竭；慢性、急性或惡性肝病、自身免疫性甲狀腺炎；全身性紅斑狼瘡、斯耶格倫(Sjorgren’s)綜合征、肺病(例如ARDS)；急性胰腺炎；肌萎縮性側(cè)索硬化癥(ALS)；早老性癡呆；惡病質(zhì)/厭食癥；哮喘；動(dòng)脈粥樣硬化；慢性疲勞綜合征、發(fā)燒；糖尿病(例如胰島素糖尿病或青少年糖尿病)；腎小球腎炎；移植物對(duì)宿主排斥(例如在移植手術(shù)中)；出血性休克；痛覺過敏；炎性腸?。欢喟l(fā)性硬化癥；肌病(例如肌蛋白代謝，尤其在膿毒癥中)；骨質(zhì)疏松癥；帕金森?。惶弁?；早產(chǎn)；銀屑病；再灌注損傷；細(xì)胞因子引起的毒性(例如膿毒性休克、內(nèi)毒性休克)；放療所致副作用、顳的下頜骨關(guān)節(jié)病、腫瘤轉(zhuǎn)移；或勞損、扭傷、軟骨損傷、創(chuàng)傷例如灼傷、矯形手術(shù)、感染或其它疾病過程導(dǎo)致的炎癥。變應(yīng)性疾病和病癥包括但不限于呼吸變應(yīng)性疾病例如哮喘、過敏性鼻炎、過敏性肺病、過敏性肺炎、嗜酸性肺炎(例如呂弗勒(Loeffler’s)綜合征、慢性嗜酸性肺炎)、遲發(fā)型超敏反應(yīng)、間質(zhì)性肺病(ILD)(例如特發(fā)性肺纖維變性或與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡、關(guān)節(jié)強(qiáng)硬性脊椎炎、全身性硬化癥、斯耶格倫綜合征、多肌炎或皮肌炎有關(guān)的ILD)；全身性過敏反應(yīng)或超敏反應(yīng)、藥物過敏(例如對(duì)青霉素、頭孢菌素類)、昆蟲叮咬過敏等。
例如，發(fā)現(xiàn)HDAC抑制劑尤其是SAHA可用于治療各種神經(jīng)變性疾病，其非窮盡性列舉如下I.特征在于無其它顯著神經(jīng)病學(xué)體征的進(jìn)行性癡呆的病癥，例如早老性癡呆；阿爾茨海默病型老年性癡呆和皮克(Pick’s)病(腦葉萎縮)。
II.合并進(jìn)行性癡呆與其它明顯神經(jīng)異常的綜合征，例如A)主要在成人中出現(xiàn)的綜合征(例如亨廷頓舞蹈病、合并癡呆與運(yùn)動(dòng)失調(diào)和/或帕金森病、進(jìn)行性核上麻痹(Steel-Richardson-Olszewski)、彌散性雷維小體病和皮質(zhì)齒狀核(corticodentatonigral)變性表現(xiàn)的多系統(tǒng)萎縮)；和B)主要出現(xiàn)在兒童或青年成人中的綜合征(例如哈-施(Hallervorden-Spatz)病和進(jìn)行性家族性肌陣攣性癲癇)。
III.體態(tài)和運(yùn)動(dòng)逐漸發(fā)展異常的綜合征，例如震顫性麻痹(帕金森病)、紋狀體黑質(zhì)變性、進(jìn)行性核上麻痹、扭轉(zhuǎn)性肌張力障礙(扭轉(zhuǎn)性痙攣；畸形性肌張力障礙)、痙攣性斜頸和其它運(yùn)動(dòng)障礙、家族性震顫和圖雷特(Gilles de la Tourette)綜合征。
IV.進(jìn)行性運(yùn)動(dòng)失調(diào)的綜合征，例如小腦退化(例如小腦皮質(zhì)變性和橄欖體腦橋小腦萎縮(OPCA))；和脊髓小腦退化(弗里德賴希(Friedreich’s)共濟(jì)失調(diào)及有關(guān)病癥)。
V.中樞自主神經(jīng)系統(tǒng)衰竭綜合征(夏-德雷格(Shy-Drager)綜合征)。
VI.無感覺改變的肌無力和消瘦的綜合征(運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元疾病例如肌萎縮性側(cè)索硬化、脊髓性肌萎縮(例如嬰兒脊髓性肌萎縮(Werdnig-Hoffman)、青少年脊髓性肌萎縮(Wohlfart-Kugelberg-Welander)和其它形式的家族性脊髓性肌萎縮)、原發(fā)性側(cè)索硬化和遺傳性痙攣性截癱。
VII.合并有感覺改變的肌無力和消瘦的綜合征(進(jìn)行性神經(jīng)性肌萎縮；慢性家族性多神經(jīng)病)，例如腓肌型肌萎縮(Charcot-Marie-Tooth)、肥大間質(zhì)性多神經(jīng)病(Dejerine-Sottas)和各種形式的慢性進(jìn)行性神經(jīng)病。
VIII.進(jìn)行性視覺缺失的綜合征，例如視網(wǎng)膜色素變性(色素性視網(wǎng)膜炎)和遺傳性視神經(jīng)萎縮(勒伯爾(Leber’s)病)。
通常，HDAC抑制劑一般分為5類1)異羥肟酸衍生物；2)短鏈脂肪酸(SCFAs)；3)環(huán)四肽；4)苯甲酰胺和5)親電性酮。
因此，本發(fā)明在其廣義范圍內(nèi)包括含HDAC抑制劑和/或能抑制組蛋白脫乙酰酶的任何其它類化合物的組合物，HDAC抑制劑是1)異羥肟酸衍生物；2)短鏈脂肪酸(SCFAs)；3)環(huán)四肽；4)苯甲酰胺；5)親電性酮；用于抑制組蛋白脫乙酰酶，誘導(dǎo)瘤細(xì)胞終末分化、細(xì)胞生長停止和/或凋亡，和/或誘導(dǎo)腫瘤瘤細(xì)胞分化、細(xì)胞生長停止和/或凋亡。
此類HDAC抑制劑的非限定性實(shí)例列舉如下。應(yīng)理解本發(fā)明包括本文中所述HDAC抑制劑的任何鹽、晶體結(jié)構(gòu)、無定形結(jié)構(gòu)、水合物、衍生物、代謝物、立體異構(gòu)體、結(jié)構(gòu)異構(gòu)體和前藥。
A.異羥肟酸衍生物，例如辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)(Richon等，Proc.Natl.Acad. Sci.USA 95，3003-3007(1998))；間羧基肉桂酸二羥酰胺(CBHA)(Richon等，同上)；pyroxamide；曲古抑菌素類似物例如曲古抑菌素A(TSA)和曲古抑菌素C(Koghe等1998.Biochem.Pharmacol.561359-1364)；水楊?；惲u肟酸(Andrews等，International J.Parasitology 30，761-768(2000))；辛二酰二異羥肟酸(SBHA)(美國專利號(hào)5,608,108)；壬二異羥肟酸(ABHA)(Andrews等，同上)；壬二酸-1-異羥肟酸酯-9-酰苯胺(AAHA)(Qiu等，Mol.Biol.Cell11，2069-2083(2000))；6-(3-氯苯基脲基)己異羥肟酸(3C1-UCHA)；oxamflatin[(2E)-5-[3-[(苯磺?；?氨基苯基]-戊-2-烯-4-炔酰異羥肟酸(ynohydroxamic acid)](Kim等Oncogene，182461 2470(1999))；A-161906、Scriptaid(Su等2000 Cancer Research，603137-3142)；PXD-101(Prolifix)；LAQ-824；CHAP；MW2796(Andrews等，同上)；MW2996(Andrews等，同上)；或美國專利號(hào)5,369,108、5,932,616、5,700,811、6,087,367和6,511,990中公開的任何異羥肟酸。
B.環(huán)四肽，例如trapoxin A(TPX)-環(huán)四肽(環(huán)-(L-苯丙氨?；?L-苯丙氨?；?D-(2-甲基)哌啶基-L-2-氨基-8-氧代-9，10-表氧癸酰基))(Kijima等，J Biol.Chem.268，22429-22435(1993))；FR901228(FK228，酯肽)(Nakajima等，Ex.Cell Res.241，126-133(1998))；FR225497環(huán)四肽(H.Mori等，PCT申請(qǐng)WO 00/08048(2000年2月17日))；apicidin環(huán)四肽[環(huán)(N-O-甲基-L-色氨?；?L-異亮氨?；?D-(2-甲基)哌啶基-L-2-氨基-8-氧代癸酰基)](Darkin-Rattray等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93,1314313147(1996))；apicidin Ia、apicidin Ib、apicidin Ic、apicidinIIa和apicidin IIb(P.Dulski等，PCT申請(qǐng)WO 97/11366)；CHAP、HC-毒素環(huán)四肽(Bosch等，Plant Cell 7，1941-1950(1995))；WF27082環(huán)四肽(PCT申請(qǐng)WO98/48825)；和chlamydocin(Bosch等，同上)。
C.短鏈脂肪酸(SCFA)衍生物，例如丁酸鈉(Cousens等，J.Biol.Chem.254，1716-1723(1979))；異戊酸鹽(酯)(McBain等，Biochem.Pharm.531357-1368(1997))；戊酸鹽(酯)(McBain等，同上)；4-苯基丁酸鹽(酯)(4-PBA)(Lea和Tulsyan，Anticancer Research，15，879-873(1995))；苯基丁酸鹽(酯)(PB)(Wang等，Cancer Research，59，2766-2799(1999))；丙酸鹽(酯)(McBain等，同上)；丁酰胺(Lea和Tulsyan，同上)；異丁酰胺(Lea和Tulsyan，同上)；苯基乙酸鹽(酯)(Lea和Tulsyan，同上)；3-溴丙酸鹽(酯)(Lea和Tulsyan，同上)；三丁精(Guan等，CancerResearch，60，749-755(2000))；丙戊酸、丙戊酸鹽(酯)和PivanexTM。
D.苯甲酰胺衍生物，例如CI-994；MS-275[N-(2-氨基苯基)-4-[N-(吡啶-3-基甲氧基羰基)氨基甲基]苯甲酰胺](Saito等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 96，4592-4597(1999))；和MS-275的3′-氨基衍生物(Saito等，同上)。
E.親電性酮衍生物，例如三氟甲基酮(Frey等，Bioorganic & Med.Chem.Lett.(2002)，12，3443-3447；U.S.6,511,990)和α-酮酰胺例如N-甲基-α-酮酰胺。
F.其它HDAC抑制劑，例如天然產(chǎn)物、psammaplins和Depudecin(Kwon等1998.PNAS 953356-3361)。
優(yōu)選的基于異羥肟酸的HDAC抑制劑是辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)、間羧基肉桂酸二羥酰胺(CBHA)和pyroxamide。SAHA表明直接結(jié)合在組蛋白脫乙酰酶的催化袋中。SAHA誘導(dǎo)培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)化細(xì)胞細(xì)胞周期停止、分化和/或凋亡，且抑制嚙齒動(dòng)物腫瘤生長。SAHA在實(shí)體瘤和血癌中有效誘導(dǎo)這些作用。SAHA表明有效抑制動(dòng)物中的腫瘤生長，且對(duì)動(dòng)物無毒性。SAHA誘導(dǎo)抑制腫瘤生長與乙酰化組蛋白在腫瘤中蓄積有關(guān)。SAHA有效抑制致癌物(N-甲基亞硝基脲)誘導(dǎo)的大鼠中乳房瘤的發(fā)展和繼續(xù)生長。在130天的研究中，給予大鼠含SAHA的飼料。因此，SAHA是無毒、口服活性抗腫瘤藥，其作用機(jī)理涉及抑制組蛋白脫乙酰酶活性。
優(yōu)選的HDAC抑制劑是在授予某些本發(fā)明人的美國專利號(hào)5,369,108、5,932,616、5,700,811、6,087,367和6,511,990中公開的那些化合物，其全部內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中，其非限定性實(shí)例闡述如下
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式1結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中R1和R2可以相同或不同；當(dāng)R1和R2相同時(shí)，各自為取代或未取代的芳基氨基、環(huán)烷基氨基、吡啶氨基、哌啶子基、9-嘌呤-6-胺或噻唑氨基；當(dāng)R1和R2不同時(shí)，R1＝R3-N-R4，其中R3和R4各自獨(dú)立，彼此相同或不同，并為氫原子、羥基、取代或未取代的支鏈或非支鏈烷基、烯基、環(huán)烷基、芳基烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基，或R3和R4結(jié)合在一起形成哌啶基，R2為羥氨基、羥基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基或烷氧基，且n為約4至約8的整數(shù)。
在式1的具體實(shí)施方案中，R1和R2相同，為取代或未取代的噻唑氨基；且n為約4至約8的整數(shù)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式2結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中R3和R4各自獨(dú)立，彼此相同或不同，并為氫原子、羥基、取代或未取代支鏈或非支鏈的烷基、烯基、環(huán)烷基、芳基烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基，或R3和R4結(jié)合在一起形成哌啶基，R2為羥氨基、羥基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基或烷氧基，且n為約4至約8的整數(shù)。
在式2的一個(gè)具體實(shí)施方案中，R3和R4各自獨(dú)立，彼此相同或不同，并為氫原子、羥基、取代或未取代支鏈或非支鏈的烷基、烯基、環(huán)烷基、芳基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基，或R3和R4結(jié)合在一起形成哌啶基；R2為羥氨基、羥基、氨基、烷基氨基或烷氧基；n為5-7的整數(shù)；R3-N-R4和R2不同。
在式2的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，n為6。在式2的還另一個(gè)實(shí)施方案中，R4為氫原子，R3為取代或未取代的苯基，且n為6。在式2的還另一個(gè)實(shí)施方案中，R4為氫原子，R3為取代的苯基，且n為6，其中苯基的取代基選自甲基、氰基、硝基、三氟甲基、氨基、氨基羰基、甲基氰基、氯、氟、溴、碘、2，3-二氟基、2，4-二氟基、2，5-二氟基、3，4-二氟基、3，5-二氟基、2，6-二氟基、1，2，3-三氟基、2，3，6-三氟基、2，4，6-三氟基、3，4，5-三氟基、2，3，5，6-四氟基、2，3，4，5，6-五氟基、疊氮基、己基、叔丁基、苯基、羧基、羥基、甲氧基、苯氧基、芐氧基、苯氨基氧基、苯基氨基羰基、甲氧基羰基、甲基氨基羰基、二甲氨基、二甲氨基羰基或羥氨基羰基。
在式2的另一個(gè)實(shí)施方案中，n為6，R4為氫原子，且R3為環(huán)己基。在式2的另一個(gè)實(shí)施方案中，n為6，R4為氫原子，且R3為甲氧基。在式2的另一個(gè)實(shí)施方案中，n為6，且R3和R4結(jié)合在一起形成哌啶基。在式2的另一個(gè)實(shí)施方案中，n為6，R4為氫原子，且R3為芐氧基。在式2的另一個(gè)實(shí)施方案中，R4為氫原子，且R3為γ-吡比啶基。在式2的另一個(gè)實(shí)施方案中，R4為氫原子，且R3為β-吡啶基。在式2的另一個(gè)實(shí)施方案中，R4為氫原予，且R3為α-吡啶基。在式2的另一個(gè)實(shí)施方案中，n為6，且R3和R4都為甲基。在式2的另一個(gè)實(shí)施方案中，n為6，R4為甲基，且R3為苯基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式3結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物，和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中n為5至約8的整數(shù)。
在式3的優(yōu)選實(shí)施方案中，n為6。按照該實(shí)施方案，HDAC抑制劑為SAHA(4)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。SAHA可由以下結(jié)構(gòu)式代表 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式5結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式6結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑(pyroxamide)，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式7結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式8結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式9結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式10結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中R3為氫，且R4為環(huán)烷基、芳基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基，或R3和R4結(jié)合在一起形成哌啶基；R2為羥氨基；且n為5至約8的整數(shù)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式11結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中R3和R4獨(dú)立為取代或未取代的以下基團(tuán)支鏈或非支鏈的烷基、烯基、環(huán)烷基、芳基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基；環(huán)烷基、芳基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基，或R3和R4結(jié)合在一起形成哌啶基；R2為羥氨基；且n為5至約8的整數(shù)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式12結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中X和Y各自獨(dú)立，彼此相同或不同，并為羥基、氨基或羥氨基、取代或未取代的烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基氨基、烷氧基氨基、芳氧基氨基、烷氧基烷基氨基或芳氧基烷基氨基；R為氫原子、羥基、基團(tuán)、取代或未取代的烷基、芳基烷氧基或芳氧基；m和n各自獨(dú)立，彼此相同或不同，各自為約0至約8的整數(shù)。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，HDAC抑制劑為式12化合物，其中X、Y和R各自為羥基，且m和n均為5。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式13結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中X和Y各自獨(dú)立，彼此相同或不同，并為羥基、氨基或羥氨基、取代或未取代的烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基氨基、烷氧基氨基、芳氧基氨基、烷氧基烷基氨基或芳氧基烷基氨基；R1和R2各自獨(dú)立，彼此相同或不同，為氫原子、羥基、取代或未取代的烷基、芳基、烷氧基或芳氧基；m、n和o各自獨(dú)立，彼此相同或不同，各自為約0至約8的整數(shù)。
在式13的一個(gè)具體實(shí)施方案中，X和Y各自為羥基，且R1和R2各自為甲基。在式13的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，X和Y各自為羥基，R1和R2各自為甲基，n和o各自為6，且m為2。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式14結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中X和Y各自獨(dú)立，彼此相同或不同，為羥基、氨基或羥氨基、取代或未取代的烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基氨基、烷氧基氨基、芳氧基氨基、烷氧基烷基氨基或芳氧基烷基氨基；R1和R2各自獨(dú)立，彼此相同或不同，為氫原子、羥基、取代或未取代的烷基、芳基、烷氧基或芳氧基；m和n各自獨(dú)立，彼此相同或不同，各自為約0至約8的整數(shù)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式15結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中X和Y各自獨(dú)立，彼此相同或不同，為羥基、氨基或羥氨基、取代或未取代的烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基氨基、烷氧基氨基、芳氧基氨基、烷氧基烷基氨基或芳氧基烷基氨基；m和n各自獨(dú)立，彼此相同或不同，各自為約0至約8的整數(shù)。
在式15的一個(gè)具體實(shí)施方案中，X和Y各自為羥基，且m和n各自為5。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式16結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中X和Y各自獨(dú)立，彼此相同或不同，為羥基、氨基或羥氨基、取代或未取代的烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基氨基、烷氧基氨基、芳氧基氨基、烷氧基烷基氨基或芳氧基烷基氨基；R1和R2彼此獨(dú)立，相同或不同，并為氫原子、羥基、取代或未取代的烷基、芳基烷氧基或芳氧基；m和n各自獨(dú)立，彼此相同或不同，各自為約0至約8的整數(shù)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式17結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中X和Y各自獨(dú)立，彼此相同或不同，為羥基、氨基或羥氨基、取代或未取代的烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基氨基或芳氧基烷基氨基；且n為約0至約8的整數(shù)。
在式17的一個(gè)具體實(shí)施方案中，X和Y各自為羥氨基；R1為甲基，R2為氫原子；m和n各自為2。在式17的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，X和Y各自為羥氨基；R1為羰基羥基氨基，R2為氫原子；m和n各自為5。在式17的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，X和Y各自為羥氨基；R1和R2各自為氟基；m和n各自為2。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式18結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中X和Y各自獨(dú)立，彼此相同或不同，為羥基、氨基或羥氨基、取代或未取代的烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基氨基、烷氧基氨基、芳氧基氨基、烷氧基烷基氨基或芳氧基烷基氨基；R1和R2各自獨(dú)立，彼此相同或不同，為氫原子、羥基、取代或未取代的烷基、芳基、烷氧基、芳氧基、羰基羥基氨基或氟基；m和n各自獨(dú)立，彼此相同或不同，各自為約0至約8的整數(shù)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式19結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中R1和R2各自獨(dú)立，彼此相同或不同，為羥基、烷氧基、氨基、羥基氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基氨基、烷氧基氨基、芳氧基氨基、烷氧基烷基氨基或芳氧基烷基氨基。在具體的實(shí)施方案中，HDAC抑制劑為結(jié)構(gòu)式19化合物，其中R1和R2都為羥氨基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式20結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中R1和R2各自獨(dú)立，彼此相同或不同，為羥基、烷氧基、氨基、羥基氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基氨基、烷氧基氨基、芳氧基氨基、烷氧基烷基氨基或芳氧基烷基氨基。在具體的實(shí)施方案中，HDAC抑制劑為結(jié)構(gòu)式20化合物，其中R1和R2都為羥氨基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式21結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中R1和R2各自獨(dú)立，彼此相同或不同，為羥基、烷氧基、氨基、羥基氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基氨基、烷氧基氨基、芳氧基氨基、烷氧基烷基氨基或芳氧基烷基氨基。
在具體的實(shí)施方案中，HDAC抑制劑為結(jié)構(gòu)式21化合物，其中R1和R2都為羥氨基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式22結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。

其中R為被以下基團(tuán)取代的苯氨基氰基、甲基氰基、硝基、羧基、氨基羰基、甲基氨基羰基、二甲氨基羰基、三氟甲基、羥基氨基羰基、N-羥氨基羰基、甲氧基羰基、氯、氟、甲基、甲氧基、2，3-二氟基、2，4-二氟基、2，5-二氟基、2，6-二氟基、3，5-二氟基、2，3，6-三氟基、2，4，6-三氟基、1，2，3-三氟基、3，4，5-三氟基、2，3，4，5-四氟基或2，3，4，5，6-五氟基；且n為4-8的整數(shù)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式23結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑(間羧基肉桂酸二羥酰胺-CBHA)，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式24結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用式25結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。

其中R為以下取代或未取代的基團(tuán)苯基、哌啶、噻唑、2-吡啶、3-吡啶或4-吡啶，且n為約4至約8的整數(shù)。
在式25的一個(gè)具體實(shí)施方案中，R為取代的苯基。在式25的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，R為取代的苯基，其中取代基選自甲基、氰基、硝基、硫基(thio)、三氟甲基、氨基、氨基羰基、甲基氰基、氯、氟、溴、碘、2，3-二氟基、2，4-二氟基、2，5-二氟基、3，4-二氟基、3，5-二氟基、2，6-二氟基、1，2，3-三氟基、2，3，6-三氟基、2，4，6-三氟基、3，4，5-三氟基、2，3，5，6-四氟基、2，3，4，5，6-五氟基、疊氮基、己基、叔丁基、苯基、羧基、羥基、甲氧基、苯氧基、芐氧基、苯氨基氧基、苯基氨基羰基、甲氧基羰基、甲基氨基羰基、二甲氨基、二甲氨基羰基或羥氨基羰基。
在式25的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，R為取代或未取代的2-吡啶、3-吡啶或4-吡啶的基團(tuán)，且n為約4至約8的整數(shù)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式26結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中R為取代或未取代的苯基、吡啶、哌啶或噻唑基團(tuán)，且n為約4至約8的整數(shù)，或其藥學(xué)上可接受的鹽。
在式26的一個(gè)具體實(shí)施方案中，R為取代的苯基。在式26的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，R為取代的苯基，其中取代基選自甲基、氰基、硝基、硫基、三氟甲基、氨基、氨基羰基、甲基氰基、氯、氟、溴、碘、2，3-二氟基、2，4-二氟基、2，5-二氟基、3，4-二氟基、3，5-二氟基、2，6-二氟基、1，2，3-三氟基、2，3，6-三氟基、2，4，6-三氟基、3，4，5-三氟基、2，3，5，6-四氟基、2，3，4，5，6-五氟基、疊氮基、己基、叔丁基、苯基、羧基、羥基、甲氧基、苯氧基、芐氧基、苯基氨基氧基、苯基氨基羰基、甲氧基羰基、甲基氨基羰基、二甲氨基、二甲氨基羰基或羥氨基羰基。
在式26的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，R為苯基，且n為5。在另一個(gè)實(shí)施方案中，n為5，且R為3-氯苯基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式27結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中R1和R2各自直接連接或通過連接基團(tuán)連接，而且為取代或未取代的下列基團(tuán)芳基(例如苯基)、芳基烷基(例如芐基)、萘基、環(huán)烷基、環(huán)烷基氨基、吡啶氨基、哌啶子基、9-嘌呤-6-氨基、噻唑氨基、羥基、支鏈或非支鏈的烷基、烯基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、吡啶基或喹啉基或異喹啉基；n為約3至約10的整數(shù)，且R3為異羥肟酸、羥氨基、羥基、氨基、烷基氨基或烷氧基的基團(tuán)。連接基團(tuán)例如可以為酰胺部分、O-、-S-、-NH-、NR5、-CH2-、(CH2)m-、-(CH＝CH)-、亞苯基、亞環(huán)烷基或其任何組合，其中R5為取代或未取代的C1-C5烷基。
在式27的某些實(shí)施方案中，R1為-NH-R4，其中R4為取代或未取代的下列基團(tuán)芳基(例如苯基)、芳基烷基(例如芐基)、萘基、環(huán)烷基、環(huán)烷基氨基、吡啶氨基、哌啶子基、9-嘌呤-6-氨基、噻唑氨基、羥基、支鏈或非支鏈的烷基、烯基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、吡啶基、喹啉基或異喹啉基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明方法使用由式28結(jié)構(gòu)代表的HDAC抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
其中R1和R2各自為取代或未取代的下列基團(tuán)芳基(例如苯基)、芳基烷基(例如芐基)、萘基、環(huán)烷基、環(huán)烷基氨基、吡啶氨基、哌啶子基、9-嘌呤-6-氨基、噻唑氨基、羥基、支鏈或非支鏈的烷基、烯基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、吡啶基、喹啉基或異喹啉基；R3為異羥肟酸、羥氨基、羥基、氨基、烷基氨基或烷氧基的基團(tuán)；R4為氫、鹵素、苯基或環(huán)烷基部分；A可以相同或不同，代表酰胺部分、O-、-S-、-NH-、NR5、-CH2-、-(CH2)m-、-(CH＝CH)-、亞苯基、亞環(huán)烷基或其任何組合，其中R5為取代或未取代的C1-C5烷基；且n和m各自為3-10的整數(shù)。
在再一個(gè)具體實(shí)施方案中，在化合物27或28范圍內(nèi)具有更特殊結(jié)構(gòu)的化合物有在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本發(fā)明方法的HDAC抑制劑由式29結(jié)構(gòu)代表 其中A為酰胺部分，R1和R2各自選自取代或未取代的芳基(例如苯基)、芳基烷基(例如芐基)、萘基、吡啶氨基、9-嘌呤-6-氨基、噻唑氨基、芳氧基、芳基烷氧基、吡啶基、喹啉基或異喹啉基；且n為3-10的整數(shù)。
例如，式29化合物可具有結(jié)構(gòu)30或31 其中R1、R2和n具有式29的含義。
在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本發(fā)明方法的HDAC抑制劑由式32結(jié)構(gòu)代表 其中R7選自取代或未取代的芳基(例如苯基)、芳基烷基(例如芐基)、萘基、吡啶氨基、9-嘌呤-6-氨基、噻唑氨基、芳氧基、芳基烷氧基、吡啶基、喹啉基或異喹啉基；n為3-10的整數(shù)，且Y選自
在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本發(fā)明方法的HDAC抑制劑由式33結(jié)構(gòu)代表 其中n為3-10的整數(shù)，Y選自 且R7′選自
在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本發(fā)明方法的HDAC抑制劑由式34結(jié)構(gòu)代表 芳基(例如苯基)、芳基烷基(例如芐基)、萘基、吡啶氨基、9-嘌呤-6-氨基、噻唑氨基、芳氧基、芳基烷氧基、吡啶基、喹啉基或異喹啉基；n為3-10的整數(shù)，且R7′選自 在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本發(fā)明方法的HDAC抑制劑由式35結(jié)構(gòu)代表 其中A為酰胺部分，R1和R2各自選自取代或未取代的芳基(例如苯基)、芳基烷基(例如芐基)、萘基、吡啶氨基、9-嘌呤-6-氨基、噻唑氨基、芳氧基、芳基烷氧基、吡啶基、喹啉基或異喹啉基；R4為氫、鹵素、苯基或環(huán)烷基部分，且n為3-10的整數(shù)。
例如，式35化合物可具有結(jié)構(gòu)36或37 其中R1、R2、R4和n具有式35的含義。
在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本發(fā)明方法的HDAC抑制劑由式38結(jié)構(gòu)代表 其中L為選自以下的連接基團(tuán)酰胺部分、O-、-S-、-NH-、NR5、-CH2-、-(CH2)m-、-(CH＝CH)-、亞苯基、亞環(huán)烷基或其任何組合，其中R5為取代或未取代的C1-C5烷基；和其中R7和R8各自獨(dú)立為取代或未取代的芳基(例如苯基)、芳基烷基(例如芐基)、萘基、吡啶氨基、9-嘌呤-6-氨基、噻唑氨基、芳氧基、芳基烷氧基、吡啶基、喹啉基或異喹啉基；n為3-10的整數(shù)，且m為0-10的整數(shù)。
例如，式38化合物可由式(39)結(jié)構(gòu)代表
適用于本發(fā)明方法的其它HDAC抑制劑包括以下更具體式中所示的那些抑制劑結(jié)構(gòu)(40)代表的化合物或其對(duì)映體 其中n為3-10的整數(shù)。在式40的一個(gè)具體實(shí)施方案中，n＝5。結(jié)構(gòu)(41)代表的化合物或其對(duì)映體 其中n為3-10的整數(shù)。在式41的一個(gè)具體實(shí)施方案中，n＝5。
結(jié)構(gòu)(42)代表的化合物或其對(duì)映體 其中n為3-10的整數(shù)。在式42的一個(gè)具體實(shí)施方案中，n＝5。結(jié)構(gòu)(43)代表的化合物或其對(duì)映體 其中n為3-10的整數(shù)。在式43的一個(gè)具體實(shí)施方案中，n＝5。
結(jié)構(gòu)(44)代表的化合物或其對(duì)映體 其中n為3-1，0的整數(shù)。在式44的一個(gè)具體實(shí)施方案中，n＝5。結(jié)構(gòu)(45)代表的化合物或其對(duì)映體 其中n為3-10的整數(shù)。在式45的一個(gè)具體實(shí)施方案中，n＝5。結(jié)構(gòu)(46)代表的化合物或其對(duì)映體
其中n為3-10的整數(shù)。在式46的一個(gè)具體實(shí)施方案中，n＝5。結(jié)構(gòu)(47)代表的化合物或其對(duì)映體 其中n為3-10的整數(shù)。在式47的一個(gè)具體實(shí)施方案中，n＝5。結(jié)構(gòu)(48)代表的化合物或其對(duì)映體 其中n為3-10的整數(shù)。在式48的一個(gè)具體實(shí)施方案中，n＝5。
結(jié)構(gòu)(49)代表的化合物或其對(duì)映體 其中n為3-10的整數(shù)。在式49的一個(gè)具體實(shí)施方案中，n＝5。結(jié)構(gòu)(50)代表的化合物或其對(duì)映體 其中n為3-10的整數(shù)。在式50的一個(gè)具體實(shí)施方案中，n＝5。結(jié)構(gòu)(51)代表的化合物或其對(duì)映體 其中n為3-10的整數(shù)。在式51的一個(gè)具體實(shí)施方案中，n＝5。
此類化合物和其它HDAC抑制劑的其它實(shí)例可在以下文獻(xiàn)中發(fā)現(xiàn)全部授予Breslow等的1994年11月29日頒發(fā)的美國專利號(hào)5,369,108、1997年12月23日頒發(fā)的美國專利號(hào)5,700,811、1998年6月30日頒發(fā)的美國專利號(hào)5,773,474、1999年8月3日頒發(fā)的美國專利號(hào)5,932,616和2003年1月28日頒發(fā)的美國專利號(hào)6,511,990；全部授予Marks等的1991年10月8日頒發(fā)的美國專利號(hào)5,055,608、1992年12月29日頒發(fā)的美國專利號(hào)5,175,191和1997年3月4日頒發(fā)的美國專利號(hào)5,608,108；和Yoshida，M.等，Bioassays 17，423-430(1995)；Saito，A.等，PNAS USA 96，4592-4597，(1999)；Furamai R.等，PNAS USA 98(1)，87-92(2001)；Komatsu，Y.等，Cancer Res.61(11)，4459-4466(2001)；Su，G.H.等，Cancer Res.60，3137-3142(2000)；Lee，B.I.等，Cancer Res.61(3)，931-934；Suzuki，T.等，J.Med.Chem.42(15)，3001-3003(1999)；2001年3月15日公布的Sloan-Kettering Institute forCancer Research and The Trustees of Columbia University的PCT申請(qǐng)WO 01/18171；公布的Hoffmann-La Roche的PCT申請(qǐng)WO02/246144；公布的Novartis的PCT申請(qǐng)WO 02/22577；公布的Prolifix的PCT申請(qǐng)WO 02/30879；公布的Methylgene，Inc.的PCT申請(qǐng)WO01/38322(2001年5月31日公布)、WO 01/70675(2001年9月27日公布)和WO 00/71703(2000年11月30日公布)；FujisawaPharmaceutical Co.，Ltd.的1999年10月8日公布的PCT中請(qǐng)WO00/21979；Beacon Laboratories，L.L.C.的1998年3月11日公布的PCT申請(qǐng)WO 98/40080；和Curtin M.(Current patent status of HDACinhibitors(HDAC抑制劑目前的專利狀態(tài))Expert Opin.Ther.Patents(2002)12(9)1375-1384和其中引用的參考文獻(xiàn))。
可按照實(shí)驗(yàn)部分描述的方法，或按照美國專利號(hào)5,369,108、5,700,811、5,932,616和6,511,990中闡述的方法(這些專利的內(nèi)容通過引用整體結(jié)合到本文中)，或按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其它方法合成SAHA或任何其它HDACs。
HDAC抑制劑的具體非限定性實(shí)例在下表中提供。應(yīng)當(dāng)注意，本發(fā)明包括與以下所代表化合物結(jié)構(gòu)相似的任何化合物，且它們能抑制組蛋白脫乙酰酶。

化學(xué)定義“脂族基團(tuán)”為非芳族基團(tuán)，僅由碳和氫組成，可任選含有一個(gè)或多個(gè)不飽和單位，例如雙鍵和/或三鍵。脂族基團(tuán)可以為直鏈、支鏈或環(huán)。當(dāng)為直鏈或支鏈時(shí)，脂族基團(tuán)通常含約1至約12個(gè)碳原子，更通常含約1至約6個(gè)碳原子。當(dāng)為環(huán)時(shí)，脂族基團(tuán)通常含約3至約10個(gè)碳原子，更通常含約3至約7個(gè)碳原子。優(yōu)選脂族基團(tuán)為C1-C12直鏈或支鏈烷基(即完全飽和脂族基團(tuán))，更優(yōu)選C1-C6直鏈或支鏈烷基。實(shí)例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基和叔丁基。
本文中使用的“芳族基團(tuán)”(又稱為“芳基”)包括本文中定義的碳環(huán)芳基、雜環(huán)芳基(又稱為“雜芳基”)和稠合的多環(huán)芳環(huán)系統(tǒng)。
“碳環(huán)芳基”為5-14個(gè)碳原子的芳環(huán)，包括與5元或6元環(huán)烷基例如茚滿稠合的碳環(huán)芳基。碳環(huán)芳基的實(shí)例包括但不限于苯基、萘基例如1-萘基和2-萘基；蒽基例如1-蒽基、2-蒽基；菲基；芴酮基例如9-芴酮基、茚滿基等。任選碳環(huán)芳基被指定數(shù)目的下述取代基取代。
“雜環(huán)芳基”(或“雜芳基”)為5-14個(gè)環(huán)碳原子和1-4個(gè)選自O(shè)、N或S的雜原子的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)芳環(huán)。雜芳基的實(shí)例包括但不限于吡啶基例如2-吡啶基(又稱為α-吡啶基)、3-吡啶基(又稱為β-吡啶基)和4-吡啶基(又稱為γ-吡啶基)；噻吩基例如2-噻吩基和3-噻吩基；呋喃基例如2-呋喃基和3-呋喃基；嘧啶基例如2-嘧啶基和4-嘧啶基；咪唑基例如2-咪唑基；吡喃基例如2-吡喃基和3-吡喃基；吡唑基例如4-吡唑基和5-吡唑基；噻唑基例如2-噻唑基、4-噻唑基和5-噻唑基；噻二唑基；異噻唑基；唑基例如2-唑基、4-唑基和5-唑基；異唑基；吡咯基；噠嗪基；吡嗪基等?？扇芜x以上定義的雜環(huán)芳基(或雜芳基)被指定數(shù)目的下述芳基的取代基取代。
“稠合多環(huán)芳族”環(huán)系統(tǒng)為與一個(gè)或多個(gè)其它雜芳基或非芳族雜環(huán)稠合的碳環(huán)芳基或雜芳基。實(shí)例包括喹啉基和異喹啉基，例如2-喹啉基、3-喹啉基、4-喹啉基、5-喹啉基、6-喹啉基、7-喹啉基和8-喹啉基、1-異喹啉基、3-喹啉基、4-異喹啉基、5-異喹啉基、6-異喹啉基、7-異喹啉基和8-異喹啉基；苯并呋喃基例如2-苯并呋喃基和3-苯并呋喃基；二苯并呋喃基，例如2，3-二氫苯并呋喃基；二苯并噻吩基；苯并噻吩基，例如2-苯并噻吩基和3-苯并噻吩基；吲哚基，例如2-吲哚基和3-吲哚基；苯并噻唑基例如2-苯并噻唑基；苯并唑基例如2-苯并唑基；苯并咪唑基例如2-苯并咪唑基；異吲哚基例如1-異吲哚基和3-異吲哚基；苯并三唑基；嘌呤基；硫茚基等?？扇芜x稠合的多環(huán)芳環(huán)系統(tǒng)被指定數(shù)目的本文中所述的取代基取代。
“芳烷基”(芳基烷基)為被芳基優(yōu)選苯基取代的烷基。優(yōu)選的芳烷基為芐基。本文描述了合適的芳基和合適的烷基。本文描述了芳烷基的合適取代基。
“芳氧基”為通過氧與化合物連接的芳基(例如苯氧基)。
本文中使用的“烷氧基”(烷基氧基)為通過氧原子與化合物連接的直鏈或支鏈C1-C12烷基或環(huán)狀C3-C12烷基。烷氧基的實(shí)例包括但不限于甲氧基、乙氧基和丙氧基。
“芳基烷氧基”(芳基烷基氧基)為通過芳基烷基的烷基部分上的氧與化合物連接的芳基烷基(例如苯基甲氧基)。
本文中使用的“芳基氨基”為通過氮與化合物連接的芳基。
本文中使用的“芳基烷基氨基”為通過芳基烷基的烷基部分上的氮與化合物連接的芳基烷基。
本文中使用的許多部分或基團(tuán)被稱為“取代或未取代”。當(dāng)部分被稱為取代時(shí)，它表示本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的該部分可被取代的任何部分可被取代。例如，可取代的基團(tuán)可以為被不為氫的基團(tuán)(即取代基)置換的氫原子?？纱嬖诙鄠€(gè)取代基。當(dāng)存在多個(gè)取代基時(shí)，取代基可以相同或不同，可在任何可取代的位置發(fā)生取代。在本領(lǐng)域中熟知此類取代方式。為例證目的(無意限定本發(fā)明范圍)，為取代基的某些基團(tuán)實(shí)例有烷基(其也可被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，例如CF3)、烷氧基(其可被取代，例如OCF3)、鹵素或鹵基(F、Cl、Br、I)、羥基、硝基、氧代基、-CN、-COH、-COOH、氨基、疊氮基、N-烷基氨基或N，N-二烷基氨基(其中烷基也可被取代)、酯基(-C(O)-OR，其中R可以為例如烷基、芳基等基團(tuán)，其可被取代)、芳基(最優(yōu)選苯基，它可被取代)、芳基烷基(它可被取代)和芳氧基。
立體化學(xué)許多有機(jī)化合物存在具有使平面偏振光的平面旋轉(zhuǎn)能力的旋光形式。在描述旋光性化合物時(shí)，用前綴D和L或R和S表示關(guān)于其手性中心的分子絕對(duì)構(gòu)型。用前綴d和1或(+)和(-)代表化合物使平面偏振光旋轉(zhuǎn)的符號(hào)，用(-)或表示該化合物是左旋的。具有前綴(+)或d的化合物是右旋的。對(duì)于確定的化學(xué)結(jié)構(gòu)，除它們是彼此的非疊加鏡像之外，被稱作立體異構(gòu)體的這些化合物是相同的。一種特殊的立體異構(gòu)體又可稱為對(duì)映體，此類異構(gòu)體的混合物通常稱為對(duì)映體混合物。50∶50的對(duì)映體混合物稱為外消旋混合物。本文中所述的多種化合物可具有一個(gè)或多個(gè)手性中心，因此可存在不同的對(duì)映體。如果需要可用星號(hào)(*)表示手性碳。當(dāng)在本發(fā)明式中，手性碳的鍵繪成直線時(shí)，應(yīng)理解為手性碳的(R)和(S)兩種構(gòu)型，因此該式包括對(duì)映體及其混合物兩者。與本領(lǐng)域用法相同，當(dāng)需要指定手性碳的絕對(duì)構(gòu)型時(shí)，可將手性碳的一個(gè)鍵繪成楔形(與平面以上的原子連接)，且另一個(gè)可繪成虛線或短平行線的楔形(與平面以下的原子連接)?？捎肅ahn-Inglod-Prelog系統(tǒng)表示手性碳的(R)或(S)構(gòu)型。
當(dāng)本發(fā)明的HDAC抑制劑含有一個(gè)手性中心時(shí)，這些化合物存在兩種對(duì)映體形式，且本發(fā)明包括對(duì)映體和對(duì)映體的混合物兩者，例如稱為外消旋混合物的特殊的50∶50混合物。可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法例如通過形成可分離的非對(duì)映體鹽；例如通過結(jié)晶(參見CRC Handbook of Optical Resolutions via Diastereomeric SaltFormation by David Kozma(CRC Press，2001))；形成可分離的非對(duì)映體衍生物或絡(luò)合物，例如通過結(jié)晶、氣相-液相或液相色譜；使一種對(duì)映體與對(duì)映體特異性試劑選擇性反應(yīng)例如酶促酯化；或在手性環(huán)境中進(jìn)行氣相-液相或液相色譜，例如在手性載體例如鍵合手性配體的硅膠上，或在手性溶劑存在下，拆分這些對(duì)映體。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，當(dāng)通過上述分離方法之一將需要的對(duì)映體轉(zhuǎn)化為另一種化學(xué)實(shí)體時(shí)，需要進(jìn)一步釋出需要對(duì)映體的步驟。或者，可用旋光性試劑、底物、催化劑或溶劑，通過不對(duì)稱合成或通過不對(duì)稱轉(zhuǎn)化，將一種對(duì)映體轉(zhuǎn)化為另一種對(duì)映體，合成具體的對(duì)映體。
本發(fā)明化合物手性碳的具體絕對(duì)構(gòu)型的符號(hào)應(yīng)理解為表示該化合物的指定對(duì)映體形式為對(duì)映體過量(ee)，或換言之基本上不含另一種對(duì)映體。例如，″S″形式化合物中基本上不含″R″形式化合物，因此是″S″形式對(duì)映體過量。相反，″R″形式化合物中基本上不含″S″形式化合物，因此是″R″形式對(duì)映體過量。本文中使用的對(duì)映體過量是某種對(duì)映體存在大于50％。例如，對(duì)映體過量可為約60％或更多，例如約70％或更多，例如約80％或更多，例如約90％或更多。在特殊的實(shí)施方案中，當(dāng)指明具體的絕對(duì)構(gòu)型時(shí)，所述化合物的對(duì)映體過量至少約90％。在更具體的實(shí)施方案中，化合物的對(duì)映體過量至少約95％，例如至少約97.5％，例如至少99％對(duì)映體過量。
當(dāng)本發(fā)明化合物有兩個(gè)或多個(gè)手性碳時(shí)，它可具有大于兩個(gè)的旋光異構(gòu)體，且存在非對(duì)映體。例如，當(dāng)有兩個(gè)手性碳時(shí)，化合物可具有最高達(dá)4個(gè)旋光異構(gòu)體和兩對(duì)對(duì)映體((S，S)/(R，R)和(R，S)/(S，R))。對(duì)映體對(duì)(例如(S，S)/(R，R))互為鏡像立體異構(gòu)體。不為鏡像的立體異構(gòu)體(例如(S，S)和(R，S))是非對(duì)映體。非對(duì)映體對(duì)可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法例如色譜或結(jié)晶分離，且每對(duì)中的各對(duì)映體可按上述方法分離。本發(fā)明包括此類化合物的每個(gè)非對(duì)映體及其混合物。
除本文另有明確規(guī)定外，本文中使用的表達(dá)形式和定冠詞“該”包括單數(shù)和復(fù)數(shù)指示物。因此，例如“活性藥物”或“藥理活性藥物”包括一個(gè)活性藥物和組合的兩個(gè)或多個(gè)不同的活性藥物，“載體”包括兩種或多種載體的混合物和一種載體等。
本發(fā)明還包括本文公開的HDAC抑制劑的前藥?？捎檬熘乃幬飳W(xué)技術(shù)制備此類化合物的任何前藥。
除以上列舉的化合物外，本發(fā)明還包括此類化合物的同系物和類似物的用途。在本文中，同系物是具有基本上與上述化合物結(jié)構(gòu)相似的分子，類似物是具有基本上生物相似性的分子，而無論結(jié)構(gòu)是否相似。
烷化劑烷化劑與親核性殘基例如在生成DNA的核苷酸前體上的化學(xué)實(shí)體反應(yīng)。它們通過使這些核苷酸烷基化并阻止其裝配到DNA中，影響細(xì)胞分裂過程。
烷化劑的實(shí)例包括但不限于雙氯乙胺(氮芥例如苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、氮芥、美法侖、烏拉莫司汀)、吖丙啶(例如塞替派)、烷基酮磺酸酯(例如白消安)、亞硝基脲(例如卡莫司汀、洛莫司汀、鏈佐星)、非典型烷化劑(六甲蜜胺、達(dá)卡巴嗪和丙卡巴肼)、鉑化合物(卡鉑和順鉑)。這些化合物與磷酸酯、氨基、羥基、巰基(sulfihydryl)、羧基和咪唑基反應(yīng)。
在生理?xiàng)l件下，這些藥物離子化，產(chǎn)生與核酸和蛋白質(zhì)連接的帶正電荷的離子，導(dǎo)致細(xì)胞周期抑制和/或細(xì)胞死亡。烷化劑是細(xì)胞周期期非特異性(phasenonspecific)藥物，因?yàn)樗鼈儶?dú)立于細(xì)胞周期的具體期而發(fā)揮它們的活性。氮芥和烷基酮磺酸酯在G1或M期對(duì)細(xì)胞最有效。亞硝基脲、氮芥和吖丙啶影響由G1和S期到M期的發(fā)展。Chabner和Collins編輯(1990)″Cancer ChemotherapyPrinciples andPractice″，PhiladelphiaJB Lippincott。
烷化劑對(duì)多種瘤疾病有活性，治療白血病和淋巴瘤以及實(shí)體瘤具有顯著的活性。在臨床上，此類藥物通常用于治療急性和慢性白血??；霍奇金病；非霍奇金淋巴瘤；多發(fā)性骨髓瘤；原發(fā)性腦瘤；乳腺、卵巢、睪丸、肺、膀胱、子宮頸、頭和頸的癌和惡性黑素瘤。
常見烷化劑的主要毒性是骨髓抑制。此外，一般出現(xiàn)各種程度的腸胃道不良效應(yīng)，且各種器官毒性與具體化合物有關(guān)。Black和Livingston(1990)Drugs 39489-501；和39652-673。
抗生素抗生素(例如細(xì)胞毒抗生素)通過直接抑制DNA或RNA合成起作用，因而在整個(gè)細(xì)胞周期中有效?？股厮幬锏膶?shí)例包括蒽環(huán)霉素(例如多柔比星、柔紅霉素、表柔比星、伊達(dá)比星和蒽二酮)、絲裂霉素C、博來霉素、放線菌素D、plicatomycin。這些抗生素通過靶向不同的細(xì)胞成分而干擾細(xì)胞生長。例如，通常認(rèn)為蒽環(huán)霉素在轉(zhuǎn)錄活性DNA的區(qū)域中干擾DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II的作用，導(dǎo)致DNA解鏈。
通常認(rèn)為博來霉素螯合鐵，且形成活化絡(luò)合物，然后它與DNA的堿基結(jié)合，導(dǎo)致解鏈和細(xì)胞死亡。
抗生素藥物已用作多種瘤疾病的治療藥物，包括乳腺、肺、胃和甲狀腺的癌、淋巴瘤、骨髓性白血病、骨髓瘤和肉瘤。在該類中的蒽環(huán)霉素的主要毒性是骨髓抑制，尤其是粒細(xì)胞減少。粘膜炎通常伴隨粒細(xì)胞減少，且嚴(yán)重程度與骨髓抑制程度有關(guān)。還有與大劑量給予蒽環(huán)霉素有關(guān)的明顯心臟毒性。
抗代謝藥抗代謝藥(即抗代謝物)是一類干擾對(duì)癌細(xì)胞的增殖和生理機(jī)能至關(guān)重要的代謝過程的藥物。增殖活躍的癌細(xì)胞需要不斷合成大量核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和其它重要的細(xì)胞成分。
許多抗代謝物抑制嘌呤或嘧啶核苷合成或抑制DNA復(fù)制的酶。某些抗代謝物還干擾核糖核苷和RNA合成和/或氨基酸代謝和蛋白質(zhì)合成。通過干擾重要的細(xì)胞成分合成，抗代謝物可延遲或抑制癌細(xì)胞生長?？勾x藥物的實(shí)例包括但不限于氟尿嘧啶(5-FU)、氟尿苷(5-FUdR)、甲氨蝶呤、亞葉酸、羥基脲、硫鳥嘌呤(6-TG)、巰嘌呤(6-MP)、阿糖胞苷、噴司他丁、磷酸氟達(dá)拉濱、克拉曲濱(2-CDA)、天冬酰胺酶和吉西他濱。
抗代謝藥物已廣泛用于治療若干常見種類的癌癥，包括結(jié)腸、直腸、乳腺、肝、胃和胰腺的癌、惡性黑素瘤、急性和慢性白血病、毛細(xì)胞性白血病。在有絲分裂積極組織例如骨髓或胃腸粘膜中抑制細(xì)胞增殖導(dǎo)致抗代謝物治療的多種不良反應(yīng)。用這些藥物治療的患者一般經(jīng)歷骨髓抑制、口腔炎、腹瀉和脫發(fā)。Chen和Grem(1992)Curr.Opin.Oncol.41089-1098。
激素藥物激素藥物是調(diào)節(jié)其靶器官生長和發(fā)育的一類藥物。大多數(shù)激素藥物是性類固醇及其衍生物和類似物，例如雌激素、孕激素、抗雌激素藥、雄激素、抗雄激素藥和孕酮。這些激素藥物可作為性類固醇受體的拮抗劑，下調(diào)受體表達(dá)和重要基因轉(zhuǎn)錄。此類激素藥物的實(shí)例有合成雌激素(例如己烯雌酚)、抗雌激素藥(例如他莫昔芬、托瑞米芬、fluoxymesterol和雷洛昔芬)、抗雄激素藥(比卡魯胺、尼魯米特、氟他胺)、芳化酶抑制劑(例如氨魯米特、阿那曲唑和四唑)、促黃體激素釋放激素(LHRH)類似物、酮康唑、醋酸戈舍瑞林、亮丙立德、醋酸甲地孕酮和米非司酮。
激素藥物用于治療乳腺癌、前列腺癌、黑素瘤和腦膜瘤。因?yàn)榧に氐闹饕饔猛ㄟ^類固醇受體介導(dǎo)，所以60％受體-陽性乳腺癌對(duì)一線激素治療產(chǎn)生反應(yīng)；且小于10％受體-陰性腫瘤產(chǎn)生反應(yīng)。與激素藥物有關(guān)的主要副作用是潮紅。多發(fā)的表現(xiàn)形式是骨痛、皮膚損害周圍紅斑突然增加以及誘發(fā)高鈣血癥。
孕激素尤其用于治療子宮內(nèi)膜癌，因?yàn)檫@些癌癥發(fā)生在暴露于孕激素不能拮抗的高水平雌激素的婦女中。
抗雄激素藥主要用于治療前列腺癌，它是激素依賴性的。它們用于降低睪酮水平，因而抑制腫瘤生長。
激素治療乳腺癌涉及在乳腺瘤細(xì)胞中降低依賴激活雌激素受體的雌激素水平。抗雌激素藥通過與雌激素受體結(jié)合并防止募集輔激活物因而抑制雌激素信號(hào)起作用。
LHRH類似物用于治療前列腺癌，降低睪酮水平從而使腫瘤生長減少。
芳化酶抑制劑通過抑制合成激素所需的酶起作用。在絕經(jīng)后的婦女中，雌激素的主要來源是通過芳化酶轉(zhuǎn)化雄烯二酮。
植物來源藥物植物來源藥物是來源于植物的藥物或在這些藥物的分子結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上修飾的一類藥物。它們通過阻止對(duì)細(xì)胞分裂至關(guān)重要的細(xì)胞成分裝配來抑制細(xì)胞復(fù)制。
植物來源藥物的實(shí)例包括長春花生物堿(例如長春新堿、長春堿、長春酰胺、長春利定和長春瑞濱)、鬼臼毒素(例如依托泊苷(VP-16)和替尼泊苷(VM-26))、紫杉烷類(例如紫杉醇和多西他賽)。這些植物來源藥物通常與抗有絲分裂藥物的作用相同，它們與微管蛋白結(jié)合而抑制有絲分裂。據(jù)認(rèn)為，鬼臼毒素例如依托泊苷通過與拓?fù)洚悩?gòu)酶II相互作用，導(dǎo)致DNA解鏈干擾DNA合成。
植物來源藥用于治療多種癌癥。例如，長春新堿用于治療白血病、霍奇金和非霍奇金淋巴瘤和兒童腫瘤成神經(jīng)細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤和維爾姆斯瘤。長春堿用于抗淋巴瘤、睪丸癌、腎細(xì)胞癌、蕈樣真菌病和卡波西肉瘤。已證實(shí)多西他賽有望具有抗晚期乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)和卵巢癌的活性。
依托泊苷具有抗多種瘤的活性，其中小細(xì)胞肺癌、睪丸癌有反應(yīng)，且NSCLC最敏感。
植物來源藥物在接受治療的患者中引起明顯的副作用。長春花生物堿表現(xiàn)為不同的臨床毒性。長春花生物堿的副作用包括神經(jīng)毒性、血小板功能改變、骨髓抑制和白細(xì)胞減少。紫杉醇引起劑量限定性中性白細(xì)胞減少和相對(duì)缺乏其它造血細(xì)胞系。鬼臼毒素的主要毒性是血液毒性(中性白細(xì)胞減少和血小板減少)。
其它副作用包括瞬時(shí)性肝酶異常、脫發(fā)、過敏反應(yīng)和外周神經(jīng)病。
生物藥生物藥是單獨(dú)使用或與化療和/或放療聯(lián)合使用時(shí)引起癌癥/腫瘤消褪的一類生物分子。生物藥的實(shí)例包括免疫調(diào)節(jié)蛋白，例如細(xì)胞因子、抗腫瘤抗原的單克隆抗體、腫瘤抑制基因和癌疫苗。
細(xì)胞因子具有極強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)活性。某些細(xì)胞因子例如白介素-2(IL-2，阿地白介素)和α-干擾素(IFN-a)證實(shí)抗腫瘤活性，已批準(zhǔn)用于治療患有轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌和轉(zhuǎn)移性惡性黑素瘤的患者。IL-2是對(duì)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)很重要的T細(xì)胞生長因子。據(jù)認(rèn)為，IL-2對(duì)某些患者的選擇性抗腫瘤作用是細(xì)胞介導(dǎo)的自我和非自我之間有區(qū)別免疫反應(yīng)的結(jié)果。
α-干擾素包括具有疊加活性的大于23個(gè)的有關(guān)亞型。IFN-α證實(shí)具有抗多種實(shí)體瘤和血液惡性腫瘤的活性，后者似乎尤其敏感。
干擾素的實(shí)例包括α-干擾素、β-干擾素(成纖維細(xì)胞干擾素)和γ-干擾素(成纖維細(xì)胞干擾素)。其它細(xì)胞因子的實(shí)例包括紅細(xì)胞生成素(α-紅細(xì)胞生成素)、粒細(xì)胞-CSF(非格司亭)和粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞-CSF(沙格司亭)。其它非細(xì)胞因子免疫調(diào)節(jié)劑包括芽孢桿菌Calmette-Guerin、左旋咪唑和奧曲肽，作用類似天然產(chǎn)生的激素生長抑素的長效八肽。
此外，抗癌治療可包括使用抗體和腫瘤接種疫苗方法使用的試劑的免疫療法的治療。此類療法中的主要藥物是單獨(dú)或攜帶例如毒素或化療藥物/對(duì)癌細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞毒的藥物的抗體。抗腫瘤抗原的單克隆抗體是引起抗腫瘤表達(dá)抗原的抗體，優(yōu)選腫瘤特異性抗原。例如，提出用單克隆抗體HERCEPTIN(曲妥單抗)抗在某些乳腺腫瘤中過度表達(dá)的人表皮生長因子受體2(HER2)，包括轉(zhuǎn)移性乳腺癌。HER2蛋白過度表達(dá)與更具攻擊性疾病和臨床預(yù)后較差有關(guān)。HERCEPTIN單獨(dú)用于治療患有腫瘤過度表達(dá)HER2蛋白的轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者。
抗腫瘤抗原的單克隆抗體的另一個(gè)實(shí)例為RITUXAN(利妥昔單抗)，提出其抗淋巴瘤細(xì)胞上的CD20和選擇性減少正常和惡性CD20+前B細(xì)胞和成熟B細(xì)胞。
RITUXAN單獨(dú)用于治療患有復(fù)發(fā)或頑固性低級(jí)別或?yàn)V泡性、CD20+B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤的患者。MYELOTARG(吉姆單抗奧佐米星)和CAMPATH(阿侖單抗)是可使用的抗腫瘤抗原的單克隆抗體的又一個(gè)實(shí)例。
腫瘤抑制基因是作用為抑制細(xì)胞生長和分裂周期的基因，因而阻止瘤發(fā)展。腫瘤抑制基因突變導(dǎo)致細(xì)胞忽略一種或多種抑制信號(hào)網(wǎng)絡(luò)成分，克服細(xì)胞周期關(guān)卡，且導(dǎo)致控制細(xì)胞更高速度的生長-癌。腫瘤抑制基因的實(shí)例包括Duc-4、NF-1、NF-2、RB、p53、WT1、BRCA1和BRCA2。
DPC4涉及胰腺癌，并參與抑制細(xì)胞分裂的胞質(zhì)途徑。NF-1編碼抑制Ras的蛋白，它是胞質(zhì)抑制蛋白。NF-1涉及神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)纖維瘤和嗜鉻細(xì)胞瘤和骨髓性白血病。NF-2編碼涉及神經(jīng)系統(tǒng)的腦膜瘤、神經(jīng)鞘瘤和室管膜細(xì)胞瘤的核蛋白。RB編碼pRB蛋白，它是細(xì)胞周期的主要抑制劑核蛋白。RB涉及成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤和骨、膀胱、小細(xì)胞肺和乳腺癌。P53編碼調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂的p53蛋白，并可誘導(dǎo)調(diào)亡。發(fā)現(xiàn)在多種癌中p53突變和/或失活。WTI涉及腎維爾姆斯瘤。BRCA1涉及乳腺和卵巢癌，BRCA2涉及乳腺癌。腫瘤抑制基因可轉(zhuǎn)移到其中可發(fā)揮其腫瘤抑制功能的腫瘤細(xì)胞中。
癌疫苗是誘導(dǎo)身體對(duì)腫瘤產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)的一類藥物。處于研究、開發(fā)和臨床試驗(yàn)中的大多數(shù)癌疫苗是腫瘤相關(guān)抗原(TAAs)。TAAs是存在于腫瘤細(xì)胞上，且在正常細(xì)胞上相對(duì)不存在或減少的結(jié)構(gòu)(即蛋白、酶或碳水化合物)。由于對(duì)腫瘤細(xì)胞相當(dāng)獨(dú)特，TAAs為免疫系統(tǒng)識(shí)別提供靶，并導(dǎo)致它們的破壞。TAAs的實(shí)例包括神經(jīng)節(jié)苷脂(GM2)、前列腺特異性抗原(PSA)、甲胎球蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)(由結(jié)腸癌和其它腺癌例如乳腺、肺、胃和胰腺癌產(chǎn)生)、黑素瘤有關(guān)的抗原(MART-1、gap100、MAGE 1，3酪氨酸酶)、乳頭瘤病毒E6和E7片斷、自體腫瘤細(xì)胞和異源腫瘤細(xì)胞的全細(xì)胞或部分/溶胞產(chǎn)物。
其它療法除周傳統(tǒng)的細(xì)胞毒和激素療法治療癌癥外，還引入新近發(fā)展的治療癌癥的其它療法。
例如，多種形式的基因療法正在進(jìn)行臨床前或臨床試驗(yàn)。
此外，目前在開發(fā)基于腫瘤血管形成(血管發(fā)生)抑制的方法。該概念的目的是切斷由新形成的腫瘤血管系統(tǒng)提供的腫瘤營養(yǎng)和氧供給。
此外，還嘗試通過誘導(dǎo)瘤細(xì)胞終末分化的癌療法。合適的分化劑包括在以下任何一篇或多篇參考文獻(xiàn)中公開的化合物，這些文獻(xiàn)的內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
a)極性化合物(Marks等(1987)；Friend，C.，Scher，W.，Holland，J.W.和Sato，T.(1971)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)68378-382；Tanaka，M.，Levy，J.，Terada，M.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.和Marks，P.A.(1975)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)721003-1006；Reuben，R.C.，Wife，R.L.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.和Marks，P.A.(1976)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)73862-866)；b)維生素D和維甲酸的衍生物(Abe，E.，Miyaura，C.，Sakagami，H.，Takeda，M.，Konno，K.，Yamazaki，T.，Yoshika，S.和Suda，T.(1981)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)784990-4994；Schwartz，E.L.，Snoddy，J.R.，Kreutter，D.，Rasmussen，H.，and Sartorelli，A.C.(1983)Proc.Am.Assoc.Cancer Res.2418；Tanenaga，K.，Hozumi，M.和Sakagami，Y.(1980)Cancer Res.40914-919)；c)類固醇激素(Lotem，J.和Sachs，L.(1975)Int.J.Cancer 15731-740)；
d)生長因子(Sachs，L.(1978)Nature(Lond.)274535，Metcalf，D.(1985)Science，22916-22)；e)蛋白酶(Scher，W.，Scher，B.M.和Waxman，S.(1983)Exp.Hematol.11490-498；Scher，W.，Scher，B.M.和Waxman，S.(1982)Biochem.& Biophys.Res.Comm.109348-354)；f)腫瘤啟動(dòng)子(Huberman，E.和Callaham，M.F.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)761293-1297；Lottem，J.和Sachs，L.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)765158-5162)；和g)DNA或RNA合成抑制劑(Schwartz，E.L.和Sartorelli，A.C.(1982)Cancer Res.422651-2655，Terada，M.，Epner，E.，Nudel，U.，Salmon，J.，F(xiàn)ibach，E.，Rifkind，R.A.和Marks，P.A.(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)752795-2799；Morin，M.J.和Sartorelli，A.C.(1984)Cancer Res.442807-2812；Schwartz，E.L.，Brown，B.J.，Nierenberg，M.，Marsh，J.C.和Sartorelli，A.C.(1983)Cancer Res.432725-2730；Sugano，H.，F(xiàn)urusawa，M.，Kawaguchi，T.和Ikawa，Y.(1973)Bibl.Hematol.39943-954；Ebert，P.S.，Wars，I.和Buell，D.N.(1976)CancerRes.361809-1813；Hayashi，M.，Okabe，J.和Hozumi，M.(1979)Gann70235-238)，所有這些方法與HDAC抑制劑例如SAHA聯(lián)合使用的用途在本發(fā)明范圍內(nèi)。
給藥模式和劑量本發(fā)明方法包括在第一治療方案中給予有需要的患者第一個(gè)量的HDAC抑制劑例如SAHA，和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥。第一和第二治療一起構(gòu)成治療有效量。
本文中使用的術(shù)語“患者”是指治療接受者。包括哺乳動(dòng)物和非哺乳動(dòng)物患者。在特殊實(shí)施方案中，患者為哺乳動(dòng)物，例如人、犬科動(dòng)物、鼠科動(dòng)物、貓科動(dòng)物、牛、羊、豬或山羊。在具體實(shí)施方案中，患者是人。
HDAC抑制劑給藥給藥途徑可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何給藥方法給予HDAC抑制劑(例如SAHA)。給藥途徑的實(shí)例包括但不限于口服、腸胃外、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、透皮、舌下、肌內(nèi)、直腸、經(jīng)口頰、鼻內(nèi)、脂質(zhì)體；通過吸入、陰道、眼內(nèi)；通過導(dǎo)管或印模局部釋放、皮下、脂肪內(nèi)、關(guān)節(jié)腔內(nèi)、鞘內(nèi)或緩釋劑型。
例如，本發(fā)明HDAC抑制劑可用這樣的口服形式如片劑、膠囊劑(其中各自包括緩釋或定時(shí)釋放制劑)、丸劑、散劑、顆粒劑、酏劑、酊劑、混懸劑、糖漿和乳劑給藥。同樣，可以靜脈內(nèi)(一次性大容量濃注或輸注)、腹膜內(nèi)、皮下或肌內(nèi)形式給予HDAC抑制劑，均使用制藥領(lǐng)域中普通技術(shù)人員熟知的形式。目前優(yōu)選的HDAC抑制劑的給藥形式是口服給藥。
也可以長效注射制劑或植入制劑的形式給予HDAC抑制劑，可按允許緩慢釋放活性成分的方法配制此類制劑形式。可將活性成分壓縮成微丸或小圓柱體，作為長效注射劑或植入物皮下或肌內(nèi)植入。植入物可采用惰性材料例如可生物降解的聚合物或合成硅酮，例如硅橡膠、硅酮橡膠或Dow-Corning Corporation生產(chǎn)的其它聚合物。
也可按脂質(zhì)體釋放系統(tǒng)例如小單層脂質(zhì)體(small unilamellarvesicles)、大單層脂質(zhì)體(large umilamellar vesicles)和多層脂質(zhì)體(multilamellar vesicles)給予HDAC抑制劑。可用各種磷脂例如膽固醇、硬脂胺或卵磷脂形成脂質(zhì)體。
也可用與化合物分子結(jié)合的單克隆抗體作獨(dú)立載體釋放HDAC抑制劑。
HDAC抑制劑也可用可溶性聚合物作為靶向藥物載體制備。此類聚合物包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥基-丙基-甲基丙烯酰胺-酚、聚羥乙基-天冬酰胺-酚或被棕櫚酰殘基取代的聚環(huán)氧乙烷-多熔素。此外，可用可生物降解的聚合物制備HDAC抑制劑，用于實(shí)現(xiàn)控制釋放藥物，例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚ε-己內(nèi)酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝膠的交聯(lián)或兩親性嵌段共聚物。
在當(dāng)前優(yōu)選的實(shí)施方案中，用明膠膠囊經(jīng)口給予HDAC抑制劑例如SAHA，該明膠膠囊可含有賦形劑例如微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和硬脂酸鎂。進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案是含有200mg固體SAHA和89.5mg微晶纖維素、9mg交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和1.5mg硬脂酸鎂的明膠膠囊。
劑量和劑量方案使用HDAC抑制劑的劑量方案可根據(jù)多種因素選擇，包括種類、物種、年齡、體重、性別和所治療癌癥類型；所治療癌癥的嚴(yán)重程度(即期)；給藥途徑；患者的腎和肝功能；和使用的具體化合物或其鹽。普通醫(yī)師或獸醫(yī)可容易確定和處方治療例如預(yù)防、抑制(完全或部分)或使該疾病發(fā)展停止所需有效量的藥物。
例如，可按最高達(dá)800mg總?cè)談┝拷o予SAHA或任何一種HDAC抑制劑?？梢蝗找淮?QD)給予HDAC抑制劑，或分為多個(gè)日劑量，例如一日兩次(BID)和一日三次(TID)?？砂醋罡哌_(dá)800mg例如200mg、300mg、400mg、600mg或800mg總?cè)談┝拷o予HDAC抑制劑，該劑量可按一日一次或可分為上述多個(gè)日劑量給予。優(yōu)選口服給藥。
此外，可連續(xù)即每日或間斷給藥。本文中使用的術(shù)語“間斷”表示在固定或不固定間隔停止和開始。例如，可每周1-6天間斷給予HDAC抑制劑，或它可表示按周期給藥(例如連續(xù)2-8周每日給藥，然后停藥期最高達(dá)1周)或它可表示隔日給藥。
可按25-4000mg/m2總?cè)談┝拷o予患者SAHA或任何HDAC抑制劑。目前優(yōu)選的治療方案包括連續(xù)每日一次、兩次或三次給予總?cè)談┝考s200mg至約600mg。
另一個(gè)目前優(yōu)選的治療方案包括每周3-5日，每日一次、兩次或三次間斷給予總?cè)談┝考s200mg至約600mg。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，按400mg劑量每日一次，或200mg劑量每日兩次連續(xù)給予HDAC抑制劑。
在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，按400mg劑量，每日一次，或按200mg劑量每日兩次，每周三天間斷給予HDAC抑制劑。
在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，按400mg劑量，每日一次，或按200mg劑量每日兩次，每周四天間斷給予HDAC抑制劑。
在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，按400mg劑量，每日一次，或按200mg劑量每日兩次，每周五天間斷給予HDAC抑制劑。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，按600mg劑量每日一次、按300mg劑量每日兩次或按200mg劑量每日三次，連續(xù)給予HDAC抑制劑。
在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，按600mg劑量每日一次，按300mg劑量每日兩次或按200mg劑量每日三次，每周三天間斷給予HDAC抑制劑。
在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，按600mg劑量每日一次、按300mg劑量每日兩次或按200mg劑量每日三次，每周四天間斷給予HDAC抑制劑。
在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，按600mg劑量每日一次、按300mg劑量每日兩次或按200mg劑量每日三次，每周五天間斷給予HDAC抑制劑。
此外，可按照上述任何方案，連續(xù)幾周給予HDAC抑制劑，隨后進(jìn)入停藥期。例如，可按照上述任一方案，給予HDAC抑制劑2-8周，隨后進(jìn)入一周停藥期，或按300mg劑量，每日兩次一周3-5天給藥。在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，連續(xù)兩周，每日三次給予HDAC抑制劑，隨后停藥一周。
患者經(jīng)靜脈內(nèi)或皮下接受足以釋放約3-1500mg/m2/日，例如約3、30、60、90、180、300、600、900、1200或1500mg/m2/日量的HDAC抑制劑?？捎枚喾N合適的方式給予這樣的量，例如在一段延長的時(shí)間內(nèi)或一日一次或幾次給予大體積低濃度的HDAC抑制劑?？擅恐?7日期)一個(gè)或多個(gè)連續(xù)天、間斷天或其組合給予這些量?；蛘?，在短期內(nèi)例如每周(7日期)連續(xù)、間斷或其組合的一天或多天，一日一次給予小體積高濃度的HDAC抑制劑。例如，每次治療可連續(xù)5日按300mg/m2/日劑量給予共1500mg/m2。在另一個(gè)給藥方案中，連續(xù)天數(shù)也可以是5天，治療持續(xù)連續(xù)2或3周，總治療給予3000mg/m2和4500mg/m2。
通常，可制備靜脈內(nèi)制劑，該制劑含HDAC抑制劑的濃度為約1.0mg/mL至約10mg/mL，例如2.0mg/mL、3.0mg/mL、4.0mg/mL、5.0mg/mL、6.0mg/mL、7.0mg/mL、8.0mg/mL、9.0mg/mL和10mg/mL，和按達(dá)到上述劑量的量給藥。在一個(gè)實(shí)例中，一天可給予患者足夠體積的靜脈內(nèi)制劑，以便該日總劑量為約300至約1500mg/m2。
優(yōu)選按本領(lǐng)域中熟知的方法，在pH約5至約12制備皮下制劑，皮下制劑還包括合適的下述緩沖劑和等滲劑?？蓪⑺鼈兣渲瞥赏ㄟ^每日一次或多次例如每日一次、兩次或三次皮下給藥，釋放日劑量的HDAC抑制劑。
也可通過局部使用合適的鼻內(nèi)溶媒或通過透皮途徑，用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的透皮貼劑給予HDAC抑制劑。為按透皮釋放系統(tǒng)的形式給藥，在整個(gè)劑量方案中，給藥劑量自然是連續(xù)的而非間斷的。
本文中所述的各種給藥模式、劑量和給藥方案僅描述具體的實(shí)施方案，無意限定本發(fā)明的廣義范圍，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。劑量和給藥方案的任何排列、變化和組合均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
抗癌藥的給藥HDAC抑制劑的任何一種或多種具體劑量和劑量方案也適用于用于聯(lián)合治療的任何一種或多種抗癌藥。
此外，抗癌藥的具體劑量和劑量方案還可改變，且最佳劑量、給藥方案和給藥途徑根據(jù)具體使用的抗癌藥而定。
自然，SAHA或任一其它HDAC抑制劑的給藥途徑獨(dú)立于抗癌藥的給藥途徑。目前優(yōu)選的SAHA的給藥途徑是口服給藥。因此，按照該實(shí)施方案，經(jīng)口給予SAHA，且第二種藥物(抗癌藥)可經(jīng)口、腸胃外、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、透皮、舌下、肌內(nèi)、直腸、經(jīng)口頰、鼻內(nèi)、脂質(zhì)體；通過吸入、陰道、眼內(nèi)；通過導(dǎo)管或印模局部釋放、皮下、脂肪內(nèi)、關(guān)節(jié)腔內(nèi)、鞘內(nèi)或以緩釋劑型給藥。
此外，可通過相同的給藥模式給予HDAC抑制劑和抗癌藥，即例如口服、IV給予兩種藥物。但是，通過一種給藥模式例如口服給予HDAC抑制劑，且通過另一種給藥模式例如IV或上述任何一種或多種其它給藥模式給予抗癌藥也在本發(fā)明范圍內(nèi)。
通常給予的常用抗癌藥和日劑量包括但不限于抗代謝物1.甲氨蝶呤20-40mg/m2i.v.
4-6mg/m2p.o.
12000mg/m2大劑量療法2.6-巰嘌呤100mg/m23.6-硫鳥嘌呤 1-2×80mg/m2p.o.
4.噴司他丁4mg/m2i.v.
5.磷酸氟達(dá)拉濱25mg/m2i.v.
6.克拉曲濱0.14mg/kg體重 i.v.
7.5-氟尿嘧啶 500-2600mg/m2i.v.
8.卡培他濱1250mg/m2p.o.
9.阿糖胞苷200mg/m2i.v.
3000mg/m2i.v.大劑量療法10.吉西他濱 800-1250mg/m2i.v.
11.羥基脲 800-4000mg/m2p.o.
抗生素12.放線菌素D0.6mg/m2i.v.
13.柔紅霉素 45-6.0mg/m2i.v.
14.多柔比星 45-60mg/m2i.v.
15.表柔比星 60-80mg/m2i.v.
16.伊達(dá)比星 10-12mg/m2i.v.
35-50mg/m2p.o.
17.米托蒽醌 10-12mg/m2i.v.
18.博來霉素 10-15mg/m2i.v.，i.m.，s.c.
19.絲裂霉素C10-20mg/2i.v.
20.伊立替康 350mg/m2i.v.
(CPT-11)21.托泊替康 1.5mg/m2i.v.
烷化劑22.氮芥 6mg/m2i.v.
23.磷酸雌莫司汀 150-200mg/m2i.v.
480-550mg/m2p.o.
24.美法侖 8-10mg/m2i.v.
15mg/m2i.v.
25.苯丁酸氮芥 3-6mg/m2i.v.
26.潑尼莫司汀 40-100mg/m2p.o.
27.環(huán)磷酰胺 750-1200mg/m2i.v.
50-100mg/m2p.o.
28.異環(huán)磷酰胺 1500-2000mg/m2i.v.
29.曲磷胺 25-200mg/m2p.o.
30.白消安 2-6mg/m2p.o.
31.曲奧舒凡 5000-8000mg/m2i.v.
750-1500mg/m2p.o.
32.塞替派 12-16mg/m2i.v.
33.卡莫司汀(BCNU) 100mg/m2i.v.
34.洛莫司汀(CCNU) 100-130mg/m2p.o.
35.尼莫司汀(ACNU) 90-100mg/m2i.v.
36.達(dá)卡巴嗪(OTIC) 100-375mg/m2i.v.
37.丙卡巴肼 100mg/m2p.o.
38.順鉑 20-120mg/m2i.v.
39.卡鉑 300-400mg/m2i.v.
抗有絲分裂藥 40.長春新堿 1.5-2mg/m2i.v.
41.長春堿4-8mg/m2i.v.
42.長春酰胺 2-3mg/m2i.v.
43.依托泊苷(VP16)100-200mg/m2i.v.
100mg p.o.
44.替尼泊苷(VM26)20-30mg/m2i.v.
45.紫杉醇(泰素) 175-250mg/m2i.v.
46.多西他賽(泰索帝) 100-150mg/m2i.v.
激素、細(xì)胞因子和維生素 47.α-干擾素 2-10×106IU/m248.潑尼松40-100mg/m2p.o.
49.地塞米松 8-24mg p.o.
50.G-CSF 5-20μg/kg體重 s.c.
51.aI/-反式維甲酸45mg/m252.白介素-2 18×106IU/m253.GM-CSF250mg/m254.紅細(xì)胞生成素 150IU/kg tiw聯(lián)合給藥給予HDAC抑制劑的第一治療方案可在第二治療方案即抗癌藥之前、用抗癌藥治療之后、在抗癌藥治療同時(shí)或其組合進(jìn)行。例如，可確定HDAC抑制劑的總療程?？稍谟迷撘种苿┲委熼_始前或用該抑制劑治療后給予抗癌藥。此外，可在給予抑制劑期間給予抗癌藥物治療，但無需在整個(gè)抑制劑治療期間發(fā)生。
可按照任何劑量和給藥方案給予SAHA或任一HDAC抑制劑，結(jié)合抗癌藥物作用達(dá)到有效治療癌癥的劑量。
藥用組合物如上所述，可將含HDAC抑制劑和/或抗癌藥物的組合物配制成適用于以下途徑給藥的任何劑型口服、腸胃外、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、透皮、舌下、肌內(nèi)、直腸、經(jīng)口頰、鼻內(nèi)、脂質(zhì)體；通過吸入、陰道或眼內(nèi)給藥；通過導(dǎo)管或印模局部釋放給藥，或用于皮下、脂肪內(nèi)、關(guān)節(jié)腔內(nèi)、鞘內(nèi)給藥，或以緩釋劑型給藥。
可將HDAC抑制劑和抗癌藥配制在用于同時(shí)給藥的同一個(gè)劑型中，或可將它們配制成兩個(gè)獨(dú)立的劑型，可按上述同時(shí)或序貫給藥。
本發(fā)明還包括含HDAC抑制劑的藥學(xué)上可接受的鹽和/或抗癌藥的藥用組合物。本文中所述化合物的合適和適用于本發(fā)明方法的藥學(xué)上可接受的鹽可包括堿或酸加成鹽例如無機(jī)堿鹽的鹽，例如堿金屬鹽(例如鋰鹽、鈉鹽、鉀鹽等)、堿土金屬鹽(例如鈣鹽、鎂鹽等)、銨鹽；有機(jī)堿鹽，例如有機(jī)胺鹽(例如三乙胺鹽、吡啶鹽、甲基吡啶鹽、乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、二環(huán)己胺鹽、N，N′-二芐基乙二胺鹽等)等；無機(jī)酸加成鹽(例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽等)；有機(jī)羧酸或磺酸加成鹽(例如甲酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽等)；堿性或酸性氨基酸(例如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等)的鹽等。
本發(fā)明還包括含HDAC抑制劑的水合物和/或抗癌藥的藥用組合物。術(shù)語“水合物”包括但不限于半水合物、一水合物、二水合物、三水合物等。
此外，本發(fā)明還包括含任何固體或液體物理形式的SAHA或任何其它HDAC抑制劑的藥用組合物。例如，HDAC抑制劑可以是晶體形式、無定形并具有任何粒度。HDAC抑制劑顆?？蔀槲⒎刍蚩蔀槌蓤F(tuán)、粉碎顆粒、粉末、油、油懸浮液或固體或液體物理形式的任何其它形式。
對(duì)于口服給藥，藥用組合物可以是液體或固體。合適的固體口服制劑包括片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、微丸等。合適的液體口服制劑包括溶液、混懸液、分散體、乳液、油等。
常用作載體或稀釋劑的任何惰性賦形劑，例如膠、淀粉、糖、纖維素物質(zhì)、丙烯酸酯或其混合物可用于本發(fā)明制劑。組合物還可含崩解劑和潤滑劑，此外，可含一種或多種選自以下的添加劑粘合劑、緩沖劑、蛋白酶抑制劑、表面活性劑、增溶劑、增塑劑、乳化劑、穩(wěn)定劑、增粘劑、甜味劑、成膜劑或其任何組合。此外，本發(fā)明組合物可以是控釋或即釋制劑。
HDAC抑制劑作為活性成分可與根據(jù)預(yù)定給藥形式適當(dāng)選擇的合適藥用稀釋劑、賦形劑或載體(本文中統(tǒng)稱為“載體”物質(zhì)或“藥學(xué)上可接受的載體”)混合在一起給藥。本文中使用的“藥學(xué)上可接受的載體”包括與藥物給藥相容的任何和所有溶劑、分散介質(zhì)、包衣劑、抗細(xì)菌和抗真菌劑、等滲劑和延遲吸收劑等。
合適的載體在本領(lǐng)域中的標(biāo)準(zhǔn)參考教材最新版Remington′sPharmaceutical Sciences中有描述，其通過引用結(jié)合到本文中。
對(duì)于液體制劑，藥學(xué)上可接受的載體可以是水或非水溶液、混懸液、乳液或油。非水溶劑的實(shí)例有丙二醇、聚乙二醇和注射有機(jī)酯例如油酸乙酯。水性載體包括水、醇/水溶液、乳液或混懸液，包括鹽水和緩沖介質(zhì)。油的實(shí)例有石油、動(dòng)物、植物或合成來源的那些油，例如花生油、大豆油、礦物油、橄欖油、葵花油和魚肝油。溶液或混懸液還可包括以下組分無菌稀釋劑例如注射用水、鹽水溶液、不揮發(fā)油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗細(xì)菌劑例如苯甲醇或尼泊金甲酯；抗氧化劑例如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；螯合劑例如乙二胺四乙酸(EDTA)；緩沖劑例如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽和調(diào)節(jié)張度的試劑例如氯化鈉或葡萄糖?？捎盟峄驂A例如鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH。
也可使用脂質(zhì)體和非水溶媒例如不揮發(fā)油。本領(lǐng)域中熟知用于藥物活性物質(zhì)的此類介質(zhì)和試劑的用途。除與活性化合物不配伍的任何常用介質(zhì)或試劑外，其在組合物中的用途是可期的。還可將輔助活性化合物加入組合物中。
固體載體/稀釋劑包括但不限于膠、淀粉(例如玉米淀粉、預(yù)膠化淀粉)、糖(例如乳糖、甘露醇、蔗糖、葡萄糖)、纖維素物質(zhì)(例如微晶纖維素)、丙烯酸酯(例如聚甲基丙烯酸酯)、碳酸碳、氧化鎂、滑石粉或其混合物。
此外，組合物還可含粘合劑(例如阿拉伯膠、玉米淀粉、明膠、卡波姆、乙基纖維素、瓜爾膠、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮)、崩解劑(例如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、藻酸、二氧化硅、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓜爾膠、淀粉羥乙酸鈉、羧甲基淀粉鈉(Primogel))，各種pH和離子強(qiáng)度的緩沖劑(例如tris-HCl、乙酸鹽、磷酸鹽)、阻止表面吸附的添加劑例如白蛋白或明膠、清潔劑(例如吐溫20、吐溫80、泊洛沙姆F68、膽酸鹽)、蛋白酶抑制劑、表面活性劑(例如十二烷基硫酸鈉)、滲透促進(jìn)劑、增溶劑(例如甘油、聚乙二醇)、助流劑(例如膠體二氧化硅)、抗氧化劑(例如抗壞血酸、焦亞硫酸鈉、丁基化羥基苯甲醚)、穩(wěn)定劑(例如羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素)、增粘劑(例如卡波姆、膠體二氧化硅、乙基纖維素、瓜爾膠)、甜味劑(例如蔗糖、阿司帕坦、檸檬酸)、矯味劑(例如薄荷、水楊酸甲酯或橙味香精)、防腐劑(例如硫柳汞、苯甲醇、尼泊金酯)、潤滑劑(例如硬脂酸、硬脂酸鎂、聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉)、助流劑(例如膠體二氧化硅)、增塑劑(例如酞酸二乙酯、枸櫞酸三乙酯)、乳化劑(例如卡波姆、羥丙基纖維素、十二烷基硫酸鈉)、聚合物包衣劑(例如泊洛沙姆或其乙二胺衍生物(poloxamines))、包衣劑和成膜劑(例如乙基纖維素、丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯)和/或助劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，使活性化合物和防止化合物從體內(nèi)快速消除的載體一起制備，例如控釋制劑包括植入物和微囊釋藥系統(tǒng)?？墒褂蒙锝到?、生物相容聚合物，例如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、膠原、聚原酸酯和聚乳酸。制備此類制劑的方法對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見。也可從Alza Corporation和NovaPharmaceuticals，Inc購買原料。也可用脂質(zhì)體混懸液(包括用病毒抗原的單克隆抗體靶向感染細(xì)胞的脂質(zhì)體)作藥學(xué)上可接受的載體。這些可按本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法例如按美國專利號(hào)4,522,811中所述方法制備。
配制便于給藥和劑量均勻的劑量單位形式的口服組合物尤其最好。本文中所用的劑量單位形式是指適用于治療患者的單位劑量的物理不連續(xù)單位；每單位含預(yù)計(jì)產(chǎn)生需要療效的預(yù)定量活性化合物和組合應(yīng)用的需要藥用載體。本發(fā)明劑量單位形式的規(guī)格由活性化合物的獨(dú)特特征、欲達(dá)到的具體療效和用于治療個(gè)體的組合此類活性化合物技術(shù)的內(nèi)在限制所決定并直接取決于這些因素。
可將藥用組合物和用藥說明書一起包括在容器、包裝或分配器中。
在本領(lǐng)域中容易理解含活性成分的藥用組合物的制備，例如通過混合、制?；蚱瑒┬纬煞椒ā；钚灾委煶煞滞ǔＥc藥學(xué)上可接受和與活性成分配伍的賦形劑混合。用于口服給藥的活性藥物與通常用于該目的的添加劑例如溶媒、穩(wěn)定劑或惰性稀釋劑混合，通過常用方法轉(zhuǎn)化為合適的給藥形式，例如以上詳述的片劑、包衣片劑、硬或軟明膠膠囊劑；水、醇或油溶液等。
給予患者的化合物量小于患者中毒量。在某些實(shí)施方案中，給予患者的化合物量小于導(dǎo)致患者血漿中化合物濃度等于或超過該化合物毒性水平的量。優(yōu)選，使患者血漿中化合物的濃度保持在約10nM。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使患者血漿中化合物的濃度保持在約25nM。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使患者血漿中化合物的濃度保持在約50nM。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使患者血漿中化合物的濃度保持在約100nM。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使患者血漿中化合物的濃度保持在約500nM。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使患者血漿中化合物的濃度保持在約1000nM。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使患者血漿中化合物的濃度保持在約2500nM。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使患者血漿中化合物的濃度保持在約5000nM。用HMBA發(fā)現(xiàn)，給予化合物的量在約5g/m2/日至約30g/m2/日，尤其約20g/m2/日有效而不在患者中產(chǎn)生毒性。在實(shí)施本發(fā)明中，應(yīng)給予患者的最佳化合物量取決于具體使用的化合物和所治療癌癥的類型。
制劑中活性成分和各種賦形劑的百分比可以改變。例如，組合物可含20-90％，優(yōu)選50-70％(重量)活性藥物。
對(duì)于IV給藥，可用葡萄糖醛酸、L-乳酸、乙酸、檸檬酸或在靜脈內(nèi)給藥可接受的pH范圍內(nèi)的具有適度緩沖能力的任何藥學(xué)上可接受的酸/共軛堿作為緩沖劑。也可使用其中已用酸或堿例如鹽酸或氫氧化鈉將pH調(diào)至需要范圍內(nèi)的氯化鈉溶液。通常，靜脈內(nèi)給藥制劑的pH范圍可為約5至約12。含HDAC抑制劑(其中HDAC抑制劑具有異羥肟酸部分)的靜脈內(nèi)給藥制劑的優(yōu)選pH范圍可為約9至約12。
優(yōu)選按本領(lǐng)域中熟知的方法，在pH約5至約12的范圍內(nèi)制備皮下制劑，該制劑也包含合適的緩沖劑和等滲劑?？蓪⑺鼈兣渲瞥擅咳找淮位蚨啻纹は陆o藥釋放日劑量的活性藥物。選擇制劑的合適緩沖劑和pH取決于給予HDAC抑制劑的溶解性，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員容易作出選擇。在皮下制劑中也可使用其中已用酸或堿例如鹽酸或氫氧化鈉將pH調(diào)至需要范圍內(nèi)的氯化鈉溶液。通常，皮下制劑的pH范圍可為約5至約12。具有異羥肟酸部分的HDAC抑制劑的皮下制劑的優(yōu)選pH范圍可為約9至約12。
也可通過局部使用合適的鼻內(nèi)溶媒，以鼻內(nèi)形式給予本發(fā)明組合物，或通過透皮途徑，用該領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的透皮貼劑的那些形式給藥。為以透皮釋放系統(tǒng)形式給藥，在整個(gè)給藥方案中，給藥劑量自然是連續(xù)而非間斷。
本發(fā)明還通過使細(xì)胞與第一個(gè)量的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物和第二個(gè)量的抗癌藥接觸，提供體外選擇性誘導(dǎo)瘤細(xì)胞終末分化、細(xì)胞生長停止和/或調(diào)亡的方法，因而抑制此類細(xì)胞的增殖，其中第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成有效誘導(dǎo)細(xì)胞終末分化、細(xì)胞生長停止、細(xì)胞調(diào)亡的量。
盡管本發(fā)明方法可體外實(shí)施，但預(yù)期選擇性誘導(dǎo)瘤細(xì)胞終末分化、細(xì)胞生長停止和/或調(diào)亡的方法的優(yōu)選實(shí)施方案將包括體內(nèi)接觸細(xì)胞，即通過給予需要治療的有潛伏瘤細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞的患者這些化合物。
因此，本發(fā)明還通過在第一治療方案中給予患者第一個(gè)量的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物，和在第二治療方案中給予笫二個(gè)量的抗癌藥，提供選擇性誘導(dǎo)瘤細(xì)胞終末分化、細(xì)胞生長停止和/或調(diào)亡的方法，因而在患者中抑制此類細(xì)胞增殖，其中第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成有效誘導(dǎo)細(xì)胞終末分化、細(xì)胞生長停止、細(xì)胞調(diào)亡的量。
在隨后的實(shí)驗(yàn)詳述部分，用實(shí)施例說明本發(fā)明。描述該部分以幫助理解本發(fā)明，但不會(huì)也無意以任何方式限定權(quán)利要求書中描述的本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)詳述部分實(shí)施例1合成SAHA可按下述方法，或美國專利5,369,108(其通過引用整體結(jié)合到本文中)描述的方法或按任何其它方法合成SAHA。
合成SAHA步驟1-合成辛二酸單酰苯胺(Suberanilic acid) 在22L燒瓶中，加入3,500g(20.09mol)辛二酸，將該酸加熱融化。升溫至175℃，然后加入2,040g(21.92mol)苯胺。升溫至190℃，在該溫度下保持20分鐘。將融化物傾入含有4,017g氫氧化鉀50L水溶液的Nalgene罐中。將混合物攪拌20分鐘，隨后加入融化物。按相同規(guī)模重復(fù)進(jìn)行該反應(yīng)，將第二批融化物傾入相同氫氧化鉀溶液中。將混合物充分?jǐn)嚢韬螅P(guān)閉攪拌器，使混合物沉降。然后使混合物通過硅藻土墊(4,200g)過濾(過濾產(chǎn)物除去中性副產(chǎn)物(由苯胺在辛二酸的兩端發(fā)生化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生)。濾液含有產(chǎn)物的鹽和未反應(yīng)辛二酸的鹽。使混合物沉降，因?yàn)檫^濾非常緩慢，需要幾天)。將濾液用5L濃鹽酸酸化；將混合物攪拌1小時(shí)，然后使其沉降過夜。將產(chǎn)物過濾，收集，在漏斗上用去離子水洗滌(4×5L)。將濕濾餅放入含有44L去離子水的72L燒瓶中，將混合物加熱至50℃，將固體通過熱過濾分離(需要的產(chǎn)物混雜有在熱水中溶解度大的多的辛二酸。熱研磨幾次，除去辛二酸。用NMR [D6DMSO]檢查產(chǎn)物，以監(jiān)控辛二酸的除去)。在50℃下，用44L水重復(fù)進(jìn)行熱研磨。將產(chǎn)物再次通過過濾分離，用4L熱水沖洗。在真空干燥箱中，用Nash泵作真空源(Nash泵是液體(水)環(huán)泵，抽真空度達(dá)約29英寸汞柱。間斷充入氬氣，以用于幫助輸送水)，在65℃下干燥過周末；得到4,182.8g辛二酸單酰苯胺。
產(chǎn)物仍含少量辛二酸；因此，在65℃下，一次用約300g產(chǎn)物分批進(jìn)行熱研磨。將每一部分過濾，再用熱水(總共約6L)徹底沖洗。重復(fù)該過程以純化整批產(chǎn)物。這樣就完全除去產(chǎn)物中的辛二酸。在燒瓶中合并固體產(chǎn)物，與6L甲醇/水(1∶2)一起攪拌，然后過濾分離，在濾器上晾干過周末。將其置于盤中，在用Nash泵和氬氣流的真空干燥箱中，在65℃下干燥45小時(shí)。終產(chǎn)物的重量為3,278.4g(32.7％收率)。
步驟2-合成辛二酸-酰苯胺甲酯(Methyl Suberanilate) 向裝有機(jī)械攪拌器和冷凝器的50L燒瓶中加入3,229g來自前步的辛二酸單酰苯胺、20L甲醇和398.7g Dowex 50WX2-400樹脂。將混合物加熱至回流，保持回流18小時(shí)。將混合物過濾，除去樹脂珠，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，將濾液蒸發(fā)至殘?jiān)?br> 將旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中的殘?jiān)D(zhuǎn)移至裝有機(jī)械攪拌器和冷凝器的50L燒瓶中。向該燒瓶中加入6L甲醇，將混合物加熱，得到溶液。然后加入2L去離子水，停止加熱。攪拌下，使混合物冷卻，然后將燒瓶置于冰浴中，使混合物冷卻。將固體產(chǎn)物過濾分離，濾餅用4L冷甲醇/水(1∶1)沖洗。在使用Nash泵的真空干燥箱中，在45℃下，將產(chǎn)物干燥總共64小時(shí)，得到2,850.2g(84％收率)辛二酸-酰苯胺甲酯，CSL批號(hào)98-794-92-31。
步驟3-合成粗SAHA 向配有機(jī)械攪拌器、熱電偶和惰性氣體插管的50L燒瓶中加入1,451.9g鹽酸羥胺、19L無水甲醇和3.93L 30％甲醇鈉的甲醇溶液。然后向燒瓶中加入2,748.0g辛二酸-酰苯胺甲酯，隨后加入1.9L 30％甲醇鈉的甲醇溶液。將混合物攪拌16小時(shí)又10分鐘。將反應(yīng)燒瓶(燒瓶1)中的約一半反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移至裝有機(jī)械攪拌器的50L燒瓶(燒瓶2)中。然后將27L去離子水加入燒瓶1，將混合物攪拌10分鐘。用pH計(jì)測(cè)定pH；pH為11.56。通過加入100ml 30％甲醇鈉的甲醇溶液將混合物的pH調(diào)節(jié)至12.02；得到澄清溶液(此時(shí)反應(yīng)混合物含有少量固體。調(diào)節(jié)pH，得到澄清溶液，從中沉淀出產(chǎn)物)。按相同方法將燒瓶2中的反應(yīng)混合物稀釋；加入27L去離子水，向混合物中加入100ml 30％甲醇鈉溶液調(diào)節(jié)pH，得到pH12.01(澄清溶液)。
通過加入冰醋酸將各燒瓶中的反應(yīng)混合物酸化，沉淀產(chǎn)物。燒瓶1的終pH為8.98，且燒瓶2的終pH為8.70。將兩個(gè)燒瓶中的產(chǎn)物用布氏漏斗和濾布過濾分離。用15L去離子水洗滌濾餅，掩蓋漏斗，在真空下，將漏斗上的產(chǎn)物部分干燥15.5h。移去產(chǎn)物，將產(chǎn)物置于5只玻璃盤中。將這些盤放入真空干燥箱中，將產(chǎn)物干燥至恒重。第一干燥期為22小時(shí)，在60℃下，用Nash泵作真空源和用氬氣流。從真空干燥箱中取出盤，稱重。將盤放回干燥箱，再用油泵作真空源不用氬氣流，干燥產(chǎn)物4h又10分鐘。將該物質(zhì)包裝在雙層4-mill聚乙烯袋中，放入塑料外殼容器中。取樣后，終重量為2633.4g(95.6％)。
步驟4-重結(jié)晶粗SAHA使粗SAHA在甲醇/水中重結(jié)晶。配有機(jī)械攪拌器、熱電偶、冷凝器和惰性氣體插管的50L燒瓶中加入待結(jié)晶的粗SAHA(2,525.7g)，隨后加入2,625ml去離子水和15,755ml甲醇。將物料加熱至回流，得到溶液。然后將5,250ml去離子水加入反應(yīng)混合物中。停止加熱，使混合物冷卻。當(dāng)混合物足夠冷(28℃)以致可安全處理燒瓶時(shí)，從加熱套移去燒瓶，放入用作冷浴的浴盆中。將冰/水加入該浴盆，使混合物冷卻至-5℃。將混合物在該溫度以下保持2小時(shí)。將產(chǎn)物過濾分離，濾餅用1.5L冷甲醇/水(2∶1)洗滌。掩蓋漏斗，在真空下，將產(chǎn)物部分干燥1.75h。從漏斗上移去產(chǎn)物，并置于6只玻璃盤中。將這些盤放入真空干燥箱中，在60℃下，用Nash泵作真空源和用氬氣流，將產(chǎn)物干燥64.75h。取出盤，稱重，然后放回干燥箱，再在60℃下干燥4h，得到恒重。第二干燥期的真空源是油泵，不使用氬氣流。將物質(zhì)包裝在雙層4-mill聚乙烯袋中，放入塑料外殼容器中。取樣后，終重量為2,540.9g(92.5％)。
實(shí)施例2-SAHA和吉西他濱組合在T24細(xì)胞系中的作用SAHA與吉西他濱聯(lián)合使用，導(dǎo)致觀測(cè)到大于通過單獨(dú)使用各藥物所獲得加和效應(yīng)的聯(lián)合協(xié)同作用。
材料和方法將細(xì)胞按1.25×104細(xì)胞/ml密度接種在含10％FCS的MEMα培養(yǎng)基中，任其附著在孔上。
將吉西他濱溶于MEMα培養(yǎng)基中，用1N NaOH將pH調(diào)節(jié)至7。通過用完全培養(yǎng)基系列稀釋吉西他濱制備各濃度吉西他濱。由1mM儲(chǔ)備液制備各濃度SAHA。
細(xì)胞不處理，通過吸出孔和再加入指定濃度的相關(guān)培養(yǎng)基單獨(dú)用SAHA處理、單獨(dú)用吉西他濱處理或用SAHA和吉西他濱的組合同時(shí)處理。然后將細(xì)胞用含化合物或各化合物組合的培養(yǎng)基培養(yǎng)。
為測(cè)定增殖和生存力，收獲一式三份細(xì)胞樣品，在確定時(shí)間點(diǎn)統(tǒng)計(jì)增殖和生存力。為收獲細(xì)胞，用0.5ml胰蛋白酶除去各孔中內(nèi)容物，轉(zhuǎn)移至15ml試管中，將細(xì)胞離心，再懸浮在1ml培養(yǎng)基中。在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上統(tǒng)計(jì)收獲的細(xì)胞用于增殖。通過錐蟲藍(lán)排除測(cè)定生存力。
結(jié)果將T24細(xì)胞培養(yǎng)在完全培養(yǎng)基中(對(duì)照)，與2nM吉西他濱一起、與5μM SAHA一起或與2nM吉西他濱和5μM SAHA的組合一起培養(yǎng)96小時(shí)。
結(jié)果繪制在圖1A(顯示細(xì)胞增殖)和圖1B(顯示細(xì)胞生存力)中。如圖1所示，用SAHA和吉西他濱組合處理的細(xì)胞明顯比單獨(dú)的SAHA或吉西他濱抑制更多的細(xì)胞增殖。
吉西他濱和SAHA的組合產(chǎn)生比各成分單獨(dú)給藥時(shí)的加和效應(yīng)明顯更好的結(jié)果-即協(xié)同反應(yīng)，提供超過加和反應(yīng)的增加優(yōu)勢(shì)。
實(shí)施例3-SAHA和吉西他濱組合在LnCap細(xì)胞系中的作用材料和方法將細(xì)胞按2.5×104細(xì)胞/ml密度接種在含10％FCS的RMPI培養(yǎng)基中，任其附著在孔上。
將吉西他濱溶于培養(yǎng)基中，用1N NaOH將pH調(diào)節(jié)至7。通過用完全培養(yǎng)基系列稀釋吉西他濱制備各濃度的吉西他濱。由1mM儲(chǔ)備液制備各濃度的SAHA。
細(xì)胞不處理，通過吸出孔和再加入指定濃度的相關(guān)培養(yǎng)基單獨(dú)用SAHA處理、單獨(dú)用吉西他濱處理或用SAHA和吉西他濱的組合同時(shí)處理。然后將細(xì)胞用含化合物或各化合物組合的培養(yǎng)基培養(yǎng)。
為測(cè)定增殖和生存力，按以上實(shí)施例2中所述收獲一式三份細(xì)胞樣品，在指定時(shí)間點(diǎn)統(tǒng)計(jì)增殖和生存力。
結(jié)果將LnCap細(xì)胞培養(yǎng)在完全培養(yǎng)基中(對(duì)照)，與2nM吉西他濱一起、與5μM SAHA一起或與2nM吉西他濱和5μM SAHA的組合一起培養(yǎng)72小時(shí)。
結(jié)果繪制在圖2A(顯示細(xì)胞增殖)和圖2B(顯示細(xì)胞生存力)中。如圖2所示，單獨(dú)用吉西他濱處理細(xì)胞對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生小的作用，而用SAHA處理明顯抑制增殖。用SAHA和吉西他濱組合處理產(chǎn)生加和效應(yīng)。
實(shí)施例4-SAHA和5-氮雜胞苷組合在T24細(xì)胞系中的作用材料和方法在37℃下，在T-150瓶中，用含10％FCS的RPMI培養(yǎng)細(xì)胞。用完全培養(yǎng)基將細(xì)胞稀釋至5.0×104細(xì)胞/ml密度。將細(xì)胞在37℃下溫育14小時(shí)，然后用5-氮雜胞苷處理，使細(xì)胞附著在孔上。
由1mM儲(chǔ)備液通過系列稀釋制備各濃度的5-氮雜胞苷。在完全培養(yǎng)基中溫育14小時(shí)后，從孔吸出，用1ml指定濃度的5-氮雜胞苷代替培養(yǎng)基。將細(xì)胞在5-氮雜胞苷中預(yù)溫育27.5小時(shí)，然后加入SAHA。
由1mM儲(chǔ)備液制備各濃度的SAHA。
在單獨(dú)培養(yǎng)基中(對(duì)照)或用5-氮雜胞苷預(yù)溫育后，從孔吸出，用1ml單獨(dú)培養(yǎng)基(對(duì)照)、含單獨(dú)5-氮雜胞苷的培養(yǎng)基、含單獨(dú)SAHA的培養(yǎng)基或含5-氮雜胞苷和SAHA組合的培養(yǎng)基代替孔內(nèi)容物。
為測(cè)定增殖和生存力，按以上實(shí)施例2中所述收獲一式三份細(xì)胞樣品，在指定時(shí)間點(diǎn)統(tǒng)計(jì)增殖和生存力。
結(jié)果按上述方法將T24細(xì)胞用完全培養(yǎng)基(對(duì)照)培養(yǎng)，用200nM 5-氮雜胞苷培養(yǎng)、用5μM SAHA培養(yǎng)或用200nM 5-氮雜胞苷和5μMSAHA組合培養(yǎng)。
結(jié)果繪制在圖3A(顯示細(xì)胞增殖)和圖3B(顯示細(xì)胞生存力)中。如圖3所示，單獨(dú)用5-氮雜胞苷或單獨(dú)用SAHA處理細(xì)胞明顯抑制增殖。用SAHA和5-氮雜胞苷組合處理產(chǎn)生加和效應(yīng)，相對(duì)于初始細(xì)胞計(jì)數(shù)獲得基本上完全抑制增殖。
實(shí)施例5-SAHA和依托泊苷、多柔比星、5-氟尿嘧啶、米托蒽醌和奧沙利鉑的組合在乳腺癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤和前列腺癌細(xì)胞系中的作用研究目的這些研究的目的是確定SAHA和表1中列出的治療藥物的組合是否比任一單獨(dú)藥物更有效抑制細(xì)胞生長和集落形成。所有組合藥物均有市售，可從Sigma購買。在這些研究中，對(duì)代表三種普通癌類型的5種不同細(xì)胞系進(jìn)行測(cè)試(表2)。在兩種試驗(yàn)中觀測(cè)到幾種藥物的抗增殖作用，一般觀測(cè)到加和效應(yīng)。
表1.用于與SAHA組合的藥物
表2.用于SAHA組合研究的細(xì)胞系
細(xì)胞生長試驗(yàn)細(xì)胞生長抑制試驗(yàn)使用市售MTS測(cè)定方法，又稱為Cell Titer 96Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay(96孔細(xì)胞滴定板單水溶液細(xì)胞增殖測(cè)定法)。MTS試劑含新四唑化合物[3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑，內(nèi)鹽]和電子偶合試劑(吩嗪硫酸乙酯；PES)。通過將少量MTS試劑直接加入培養(yǎng)孔中，溫育1-4小時(shí)進(jìn)行試驗(yàn)，然后用96孔板閱讀器記錄490nM處吸收度。通過490nM處吸收度測(cè)量的甲產(chǎn)物量直接與培養(yǎng)基中的活細(xì)胞數(shù)目成比例。按兩種不同方法實(shí)施MTS測(cè)定方法的處理方案。在一種方法中，將接種的細(xì)胞用SAHA預(yù)處理4小時(shí)，然后在加入聯(lián)合藥物之前洗滌除去SAHA，剩余物溫育48小時(shí)。另一種方法中，用SAHA處理細(xì)胞48小時(shí)，然后加入第二種藥物，保持4小時(shí)。然后洗滌細(xì)胞，任其生長48小時(shí)。
集落形成試驗(yàn)集落形成試驗(yàn)操作如下。在6cm皿中按200-300細(xì)胞/皿接種細(xì)胞，任其附著24小時(shí)。用SAHA處理細(xì)胞48小時(shí)，然后力加入聯(lián)合藥物，再保持4小時(shí)。然后洗滌細(xì)胞，使集落生長2-3周，然后用2％結(jié)晶紫的甲醇溶液染色。統(tǒng)計(jì)每只皿中具有閾值尺寸(～0.2mm)的所有集落。在每一處理組中，一式兩份統(tǒng)計(jì)皿，集落數(shù)/皿的范圍如誤差線所示。
結(jié)果A.SAHA組合對(duì)MDA-231細(xì)胞增殖的作用(圖4)在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中，用指定濃度的SAHA預(yù)處理MDA-231乳腺癌細(xì)胞4小時(shí)，洗滌，然后加入第二種藥物，保持48小時(shí)。用MTS試驗(yàn)定量細(xì)胞生長。結(jié)果繪制在圖4A。
在另一個(gè)實(shí)驗(yàn)中，用指定濃度的SAHA預(yù)處理細(xì)胞48小時(shí)，加入第二種藥物，保持4小時(shí)，然后洗滌細(xì)胞。48小時(shí)后，用MTS試驗(yàn)定量細(xì)胞生長。結(jié)果繪制在圖4B。
如圖4所示，SAHA和指定濃度的治療藥物依托泊苷、多柔比星、5-氟尿嘧啶、米托蒽醌和奧沙利鉑組合處理比單獨(dú)各藥物處理產(chǎn)生更強(qiáng)的抗增殖作用。該作用顯然是加和性的。
B.SAHA組合對(duì)DU145細(xì)胞增殖的作用(圖5)用指定濃度的SAHA預(yù)處理細(xì)胞48小時(shí)，加入第二種藥物，保持4小時(shí)，然后洗滌細(xì)胞。48小時(shí)后，用MTS試驗(yàn)定量細(xì)胞生長。
如圖5所示，SAHA和指定濃度的治療藥物依托泊苷、多柔比星、5-氟尿嘧啶、米托蒽醌和奧沙利鉑組合處理比單獨(dú)各藥物處理產(chǎn)生更強(qiáng)的抗增殖作用。該作用顯然是加和性的。
C.SAHA組合對(duì)DU145細(xì)胞克隆發(fā)生的作用(圖6)用SAHA處理細(xì)胞48小時(shí)，然后加入第二種藥物，保持4小時(shí)，然后洗滌細(xì)胞。2-3周后，評(píng)價(jià)集落形成。
如圖6所示，SAHA和指定濃度的治療藥物依托泊苷、多柔比星和奧沙利鉑組合處理比單獨(dú)各藥物處理減少的集落數(shù)目程度更大。該作用顯然是加和性的。
D.SAHA組合對(duì)MDA-231細(xì)胞克隆發(fā)生的作用(圖7)用SAHA處理細(xì)胞48小時(shí)，然后加入第二種藥物，保持4小時(shí)，然后洗滌細(xì)胞。2-3周后，評(píng)價(jià)集落形成。
如圖7所示，SAHA和指定濃度的治療藥物依托泊苷、多柔比星、5-氟尿嘧啶和奧沙利鉑組合處理比單獨(dú)各藥物處理減少的集落數(shù)目程度更大。該作用顯然是加和性的。
E.SAHA組合對(duì)U118細(xì)胞克隆發(fā)生的作用(圖8)用SAHA處理細(xì)胞48小時(shí)，然后加入笫二種藥物，保持4小時(shí)，然后洗滌細(xì)胞。2-3周后，評(píng)價(jià)集落形成。
如圖8所示，SAHA和指定濃度的治療藥物依托泊苷、多柔比星、5-氟尿嘧啶和奧沙利鉑組合處理比單獨(dú)各藥物處理減少的集落數(shù)目程度更大。該作用顯然是加和性的。
實(shí)施例6-SAHA和化療藥物伊立替康、5-氟尿嘧啶和多西他賽的聯(lián)合作用研究目的和概述這些研究的目的是當(dāng)體外給予三種臨床使用的抗癌藥伊立替康、5-氟尿嘧啶(5-FU)和多西他賽與SAHA的配對(duì)組合時(shí)，評(píng)價(jià)SAHA對(duì)轉(zhuǎn)化膀胱癌(T24)、前列腺癌(LnCap)、乳腺癌(MCF7)、非霍奇金淋巴瘤(DLCL)和結(jié)腸類癌瘤(LCC18)細(xì)胞系的作用。
用SAHA與這些藥物之一的各種組合處理轉(zhuǎn)化細(xì)胞，以便評(píng)價(jià)每對(duì)(SAHA加藥物)是否能產(chǎn)生加和、協(xié)同或拮抗抗增殖作用。結(jié)果表明SAHA與伊立替康、5-氟尿嘧啶和多西他賽的聯(lián)合作用大多數(shù)是加和性。在某些實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)協(xié)同作用。如下文所述，最明顯的協(xié)同作用發(fā)生在用SAHA和多西他賽組合的LnCap細(xì)胞中。
伊立替康、5-氟尿嘧啶和多西他賽這三種藥物目前各自在臨床上用于癌癥化療，均已廣泛表征。
伊立替康的作用是穩(wěn)定核拓?fù)洚悩?gòu)酶I/DNA復(fù)合物，其導(dǎo)致DNA斷裂的單鏈蓄積，從而導(dǎo)致調(diào)亡。在臨床上，它用于治療包括乳腺、結(jié)腸直腸、子宮頸、卵巢和小細(xì)胞/非小細(xì)胞肺癌的很多種癌癥(Hardman W.E.等(1999)Br J Cancer 81，440-448)。
5-氟尿嘧啶(5-FU)作用同嘧啶拮抗劑，抑制脫氧尿苷酸甲基化為胸苷酸并隨后合成DNA和RNA(http://www.nursespdr.com/members/database/ndrhtml/fluorouracil.html)。該藥物作為化療藥物最近數(shù)十年已廣泛使用，臨床上也與其它抗癌藥包括伊立替康聯(lián)合使用(Awada A.等(2002)Eur J.Cancer 38，773-778)。
多西他賽臨床上用作破壞腫瘤細(xì)胞中微管網(wǎng)絡(luò)的抗腫瘤藥，它可幫助抑制細(xì)胞分裂。通過與游離微管蛋白結(jié)合，它促進(jìn)裝配，且抑制微管解聚(Chou T.等(1991)Synergism and Antagonism inChemotherapy.New YorkAcademic Press)。
材料和方法在5種人癌細(xì)胞系中進(jìn)行藥物組合實(shí)驗(yàn)T24(膀胱癌)、LnCap(前列腺)、MCF7(乳腺)、DLCL(非霍奇金淋巴瘤)和LCC18(結(jié)腸類癌瘤)。在37℃，分別在其需要的以下培養(yǎng)基中培養(yǎng)和溫育各細(xì)胞系MEMα(10％FCS)、RPMI 1640(10％FCS)、DME HG(10％FCS)、增強(qiáng)RPMI(10％FCS)和Hites培養(yǎng)基(5％FCS)。
將貼壁細(xì)胞系(T24、LnCap、MCF7和LCC18)置于96孔板中，保持24小時(shí)，然后用SAHA和抗癌藥處理，時(shí)間可容許細(xì)胞附著在孔底。在實(shí)驗(yàn)的同一天，將DLCL細(xì)胞系懸浮液置于96孔板中。對(duì)于T24、LnCap、DLCL和LCC18，將含2000個(gè)細(xì)胞的200μL接種到各孔中。對(duì)于MCF7，按4000細(xì)胞/孔接種，以用于該細(xì)胞系的慢細(xì)胞周期計(jì)數(shù)。在各SAHA和抗癌藥組合實(shí)驗(yàn)中，將細(xì)胞接種在兩個(gè)96孔板上。
在處理的同一天，用細(xì)胞系特異性培養(yǎng)基制備所有SAHA和組合藥物處理。不接受處理的細(xì)胞用作對(duì)照組。
為給予處理貼壁細(xì)胞系(T24、LnCap、MCF7)，抽出各孔中的培養(yǎng)基，用含需要濃度一種或多種藥物的200μL培養(yǎng)基替換。對(duì)于所有其它細(xì)胞系(OCC18和DLCL)，將含10倍需要濃度的一種或多種藥物的22μL培養(yǎng)基加入各孔中200μL培養(yǎng)基中。
處理后，將細(xì)胞在37℃下溫育4天。在第四天，用20μLalamarBlurTM(一種水性染料)處理各孔，在37℃下溫育4小時(shí)。當(dāng)被細(xì)胞吸附時(shí)，染料在增殖細(xì)胞中的還原大于在非增殖細(xì)胞中的還原，因?yàn)镹ADPH、FADH、FMNH和NADH的濃度增力加。用SpectaMaxGeminiXS分光熒光儀微量滴定孔板閱讀器(Molecular DevicesCorporation，Sunnyvale，CA)，通過熒光測(cè)量該還原。數(shù)據(jù)以熒光發(fā)射強(qiáng)度單位表達(dá)，為溫育時(shí)間的函數(shù)，用SOFTmax PROv.4.0軟件(Molecular Devices Corp.Sunnyvale，CA)分析。為評(píng)價(jià)藥物處理4天后細(xì)胞生長的抑制百分率，使用下式100-(用相同處理的平均強(qiáng)度單位/孔)*100(對(duì)照組的平均強(qiáng)度單位/孔)用以下式計(jì)算各評(píng)價(jià)抑制百分率的標(biāo)準(zhǔn)誤百分率100-(用相同處理的強(qiáng)度單位/孔標(biāo)準(zhǔn)誤)*100(對(duì)照組的強(qiáng)度單位/孔標(biāo)準(zhǔn)誤)使用的每種藥物處理濃度根據(jù)每種藥物抑制50％增殖的劑量。
測(cè)試以下濃度a)50％有效劑量/4；b)50％有效劑量/2；c)50％有效劑量；d)50％有效劑量*2；和e)50％有效劑量*4。在初步實(shí)驗(yàn)中測(cè)定每種藥物抑制50％增殖的劑量，其中用多種濃度的單獨(dú)SAHA和伊立替康、5-FU和單獨(dú)多西他賽處理細(xì)胞。在藥物濃度和用各種濃度的抑制百分率之間定義多項(xiàng)式關(guān)系，用該函數(shù)預(yù)測(cè)抑制50％細(xì)胞增殖所需的每種藥物的濃度。
建立以下標(biāo)準(zhǔn)用于評(píng)價(jià)加和、協(xié)同和拮抗相互作用如果用SAHA加藥物組合處理的細(xì)胞抑制百分率大于單獨(dú)用SAHA或單獨(dú)用抗癌藥處理的細(xì)胞抑制百分率，但小于或等于如果純加和性(即單獨(dú)用SAHA抑制百分率+單獨(dú)用藥物抑制百分率)的藥物組合處理預(yù)期的細(xì)胞抑制百分率，將觀測(cè)到加和性相互作用。
如果用SAHA加藥物組合處理的細(xì)胞抑制百分率大于用如果純加和性(即單獨(dú)用SAHA抑制百分率+單獨(dú)用藥物抑制百分率)藥物組合處理預(yù)期的細(xì)胞抑制百分率，將觀測(cè)到協(xié)同作用。
如果單獨(dú)用SAHA或單獨(dú)用抗癌藥處理的細(xì)胞抑制百分率大于預(yù)期的用藥物組合處理的細(xì)胞抑制百分率，將觀測(cè)到拮抗相互作用。
結(jié)果A.測(cè)定50％細(xì)胞增殖有效劑量分析與增加濃度的SAHA組合的伊立替康、5-FU和多西他賽的50％細(xì)胞增殖有效劑量。結(jié)果列在表3和4中。SAHA和各抗癌藥的組合導(dǎo)致抑制50％細(xì)胞生長所需的藥物濃度降低。幾乎在每個(gè)實(shí)驗(yàn)中，增加SAHA濃度導(dǎo)致達(dá)到該抑制量的所需藥物濃度較低。例如，抑制50％T24膀胱癌細(xì)胞需要單獨(dú)的伊立替康5.1nM；但是，當(dāng)聯(lián)合給予0.625μM SAHA和伊立替康時(shí)，所需藥物濃度減少至4.1nM。例如，當(dāng)SAHA濃度進(jìn)一步增加至2.5μM時(shí)，需要的伊立替康濃度繼續(xù)減少(1.9nM)。
表3T24 50％抑制.代表性組合處理的有效劑量
*所有SAHA濃度均為μM。單獨(dú)SAHA5.0μM
表4LnCap 50％抑制.代表性組合處理的有效劑量
*所有SAHA濃度均為μM。單獨(dú)SAHA1.7μMB.SAHA和伊立替康在以下4種細(xì)胞系中測(cè)試SAHA和伊立替康組合T24、LnCap、DLCL和LCC18。經(jīng)評(píng)價(jià)，在所有4種細(xì)胞系中的相互作用大多數(shù)為加和性。
結(jié)果按每種類型相互作用(加和、協(xié)同和拮抗)占測(cè)試的組合處理總作用(100％)的百分率表示。
表5用SAHA和伊立替康組合處理后，不同細(xì)胞系中觀測(cè)到的相互作用
在T24膀胱癌細(xì)胞中，86％組合處理產(chǎn)生加和相互作用。未報(bào)道協(xié)同作用。14％處理產(chǎn)生拮抗相互作用。加和相互作用發(fā)生在高和低濃度SAHA和伊立替康處理中(SAHA0.625-10μM，伊立替康2.6-10nM)。
在LnCap前列腺細(xì)胞系中，25％組合處理產(chǎn)生協(xié)同作用。59％處理產(chǎn)生加和相互作用，該作用大多數(shù)發(fā)生在中和高濃度SAHA和從低到高濃度的伊立替康中(SAHA0.5-2μM；伊立替康2.6-10nM)。
對(duì)DLCL進(jìn)行組合處理，一半產(chǎn)生加和相互作用，40％是拮抗性的。拮抗作用大多數(shù)發(fā)生在較高濃度。
62％處理的LCC18細(xì)胞表現(xiàn)加和相互作用，同時(shí)19％為協(xié)同相互作用，和相同百分率的拮抗作用。任何濃度范圍的SAHA對(duì)相互作用無特異性，但所有協(xié)同相互作用發(fā)生在低伊立替康濃度(1.9nM)。
表示個(gè)體反應(yīng)的代表性曲線繪制在圖9中(LnCap)。繪制出其它細(xì)胞系的類似曲線(未顯示)。
B.SAHA和5-氟尿嘧啶與伊立替康組合相同，多數(shù)SAHA和5-FU組合處理產(chǎn)生加和相互作用。在4種細(xì)胞系中測(cè)試SAHA和5-FU組合T24、LnCap和LCC18。
結(jié)果按每種類型相互作用(加和、協(xié)同和拮抗)占測(cè)試的組合處理總作用(100％)的百分率表示。
表6用SAHA和5-FU組合處理后，在不同細(xì)胞系中觀測(cè)到的相互作用
在T24膀胱癌細(xì)胞中，80％組合處理產(chǎn)生加和相互作用。這些作用大多數(shù)發(fā)生在中和高濃度SAHA(2.5μM-10μM)。
在LnCap前列腺細(xì)胞系中，33％組合處理產(chǎn)生協(xié)同作用。60％處理產(chǎn)生加和相互作用，它們大多數(shù)發(fā)生在中和高濃度SAHA(1.0-2.0μM)。多數(shù)協(xié)同作用發(fā)生在低SAHA濃度(0.5μM)49％LCC18處理產(chǎn)生加和相互作用。44％LCC18處理產(chǎn)生拮抗作用。相互作用沒有發(fā)生在任何具體濃度范圍內(nèi)。
表示個(gè)體反應(yīng)的代表性曲線繪制在圖10中(LnCap)。繪制出其它細(xì)胞系的類似曲線(未顯示)。
C.SAHA和多西他賽在T24、LnCap和LCC18細(xì)胞上進(jìn)行SAHA和多西他賽組合實(shí)驗(yàn)。
結(jié)果按每種類型相互作用(加和、協(xié)同和拮抗)占測(cè)試的組合處理總作用(100％)的百分率表示。
表7用SAHA和多西他賽組合處理后，在不同細(xì)胞系中觀測(cè)到的相互作用
在T24膀胱癌細(xì)胞中，80％組合處理產(chǎn)生加和相互作用，5％相互作用是協(xié)同的。
最大的協(xié)同作用(56％)發(fā)生在SAHA/多西他賽組合在LnCap細(xì)胞中的實(shí)驗(yàn)中。該協(xié)同作用主要發(fā)生在低和中等SAHA濃度范圍(0.25-1μM)。38％處理在多數(shù)SAHA高濃度(2.0μM)中產(chǎn)生加和相互作用。
組合處理LCC18細(xì)胞，分別產(chǎn)生72％的加和作用和8％協(xié)同作用。
表示個(gè)體反應(yīng)的代表性曲線繪制在圖11中(LnCap)。繪制出其它細(xì)胞系的類似曲線(未顯示)。
總之，這些結(jié)果表明通常SAHA與伊立替康、5-FU和多西他賽相互作用大多數(shù)為加和性。但是，重要的是SAHA和多西他賽在LnCap細(xì)胞中的相互作用大多數(shù)是協(xié)同的。在幾個(gè)測(cè)試濃度中，發(fā)現(xiàn)其它協(xié)同作用，尤其在LnCap細(xì)胞系中。
結(jié)論以上所有組合研究的結(jié)果表明用SAHA和其它抗癌藥組合治療可用于癌癥療法，因?yàn)榕c單一藥物療法相比，可減少聯(lián)合療法中的每種藥物的劑量，同時(shí)仍獲得整體抗腫瘤效果。當(dāng)發(fā)現(xiàn)兩種藥物之間如上所述協(xié)同作用時(shí)，組合治療尤其有用。
雖然結(jié)合其優(yōu)選的實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)行顯示和描述，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解，其中可進(jìn)行形式和內(nèi)容的各種變化，而不背離所述本發(fā)明的含義。本發(fā)明的范圍由權(quán)利要求書定義。
權(quán)利要求
1.一種在有需要的患者中治療癌癥的方法，所述方法包括在第一治療方案中給予所述患者第一個(gè)量的由以下結(jié)構(gòu)代表的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物 和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥的步驟，其中所述第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗癌藥為組蛋白脫乙酰酶(HDAC)抑制劑、烷化劑、抗生素、抗代謝藥、激素藥、植物來源藥、抗血管形成藥、分化誘導(dǎo)劑、細(xì)胞生長停止誘導(dǎo)劑、細(xì)胞調(diào)亡誘導(dǎo)劑、細(xì)胞毒藥物、生物藥、基因治療藥或其任何組合。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗癌化合物為組蛋白脫乙酰酶(HDAC)抑制劑。
4.權(quán)利要求3的方法，其中所述HDAC抑制劑為異羥肟酸衍生物、短鏈脂肪酸(SCFA)、環(huán)四酞、苯甲酰胺衍生物或親電性酮衍生物。
5.權(quán)利要求3的方法，其中所述HDAC抑制劑為選自以下的異羥肟酸衍生物SAHA、Pyroxamide、CBHA、曲古抑菌素A(TSA)、曲古抑菌素C、水楊酰基二異羥肟酸、 壬二異羥肟酸(ABHA)、壬二酸-1-異羥肟酸酯-9-酰苯胺(AAHA)、6-(3-氯苯基脲基)己異羥肟酸(3Cl-UCHA)、Oxamflatin、A-161906、Scriptaid、PXD-101、LAQ-824、CHAP、MW2796和MW2996。
6.權(quán)利要求3的方法，其中所述HDAC抑制劑為選自以下的環(huán)四酞Trapoxin A、FR901228(FK 228或酯肽)、FR225497、Apicidin、CHAP、HC-毒素、WF27082和Chlamydocin。
7.權(quán)利要求3的方法，其中所述HDAC抑制劑為選自以下的短鏈脂肪酸(SCFA)丁酸鈉、異戊酸鹽(酯)、戊酸鹽(酯)、4-苯基丁酸鹽(酯)(4-PBA)、苯基丁酸鹽(酯)(PB)、丙酸鹽(酯)、丁酰胺、異丁酰胺、苯基乙酸鹽(酯)、3-溴丙酸鹽(酯)、三丁精、丙戊酸和丙戊酸鹽(酯)。
8.權(quán)利要求3的方法，其中所述HDAC抑制劑為選自以下的苯甲酰胺衍生物CI-994、MS-27-275(MS-275)和MS-27-275的3′-氨基衍生物。
9.權(quán)利要求3的方法，其中所述HDAC抑制劑為選自三氟甲基酮和α-酮酰胺的親電性酮衍生物。
10.權(quán)利要求3的方法，其中所述HDAC抑制劑為天然產(chǎn)物、psammaplin或Depudecin。
11.權(quán)利要求3的方法，其中所述HDAC抑制劑為以下結(jié)構(gòu)代表的pyroxamide 或其藥學(xué)上可接受的鹽。
12.權(quán)利要求3的方法，其中所述HDAC抑制劑由以下結(jié)構(gòu)代表 其中R3和R4獨(dú)立為取代或未取代的以下基團(tuán)支鏈或非支鏈的烷基、烯基、環(huán)烷基、芳基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基；環(huán)烷基、芳基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基，或R3和R4結(jié)合在一起形成哌啶基；R2為羥氨基；且n為5-8的整數(shù)。
13.權(quán)利要求3的方法，其中所述HDAC抑制劑由以下結(jié)構(gòu)代表 其中R為取代或未取代的以下基團(tuán)苯基、哌啶、噻唑、2-吡啶、3-吡啶或4-吡啶，且n為4-8的整數(shù)。
14.權(quán)利要求3的方法，其中所述HDAC抑制劑由以下結(jié)構(gòu)代表 其中A為酰胺部分，R1和R2各自選自取代或未取代的芳基、芳基烷基、萘基、吡啶氨基、9-嘌呤-6-氨基、噻唑氨基、芳氧基、芳基烷氧基、吡啶基、喹啉基或異喹啉基；R4為氫、鹵素、苯基或環(huán)烷基部分，且n為3-10的整數(shù)。
15.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗癌藥為選自以下的烷化劑雙氯乙胺、吖丙啶、烷基酮磺酸酯、亞硝基脲、非經(jīng)典烷化劑和鉑化合物。
16.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗癌藥為選自以下的抗生素藥多柔比星、柔紅霉素、表柔比星、伊達(dá)比星和蒽二酮、絲裂霉素C、博來霉素、放線菌素D以及plicatomycin。
17.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗癌藥為選自以下的抗代謝藥氟尿苷、氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、亞葉酸、羥基脲、硫鳥嘌呤、巰嘌呤、阿糖胞苷、噴司他丁、磷酸氟達(dá)拉濱、克拉曲濱、天冬酰胺酶和吉西他濱。
18.權(quán)利要求17的方法，其中所述抗代謝藥為吉西他濱。
19.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗癌藥為選自以下的激素藥雌激素、孕激素、抗雌激素藥、雄激素、抗雄激素藥、LHRH類似物、芳化酶抑制劑、己烯雌酚、他莫昔芬、托瑞米芬、fluoxymesterol、雷洛昔芬、比卡魯胺、尼魯米特、氟他胺、氨魯米特、四唑、酮康唑、醋酸戈舍瑞林、亮丙立德、醋酸甲地孕酮和米非司酮。
20.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗癌藥為選自以下的植物來源藥長春新堿、長春堿、長春酰胺、長春利定、長春瑞濱、依托泊苷、替尼泊苷、紫杉醇和多西他賽。
21.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗癌藥為選自以下的生物藥免疫調(diào)節(jié)蛋白、抗腫瘤抗原的單克隆抗體、腫瘤抑制基因和癌疫苗。
22.權(quán)利要求21的方法，其中所述免疫調(diào)節(jié)蛋白選自白介素2、白介素4、白介素12、干擾素E1、干擾素D、α-干擾素、紅細(xì)胞生成素、粒細(xì)胞-CSF；粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞-CSF；芽孢桿菌Cahnette-Guerin、左旋咪唑和奧曲肽。
23.權(quán)利要求21的方法，其中所述腫瘤抑制基因選自DPC-4、NF-1、NF-2、RB、p53、WT1、BRCA和BRCA2。
24.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗癌藥為分化誘導(dǎo)劑。
25.權(quán)利要求1的方法，其中所述SAHA和所述抗癌藥的療效為加和性的。
26.權(quán)利要求1的方法，其中SAHA使所述患者的癌細(xì)胞對(duì)所述抗癌藥敏感。
27.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗癌藥使所述患者的癌細(xì)胞對(duì)SAHA敏感。
28.權(quán)利要求1的方法，其中SAHA和所述抗癌藥同時(shí)給藥。
29.權(quán)利要求1的方法，其中SAHA和所述抗癌藥序貫給藥。
30.權(quán)利要求29的方法，其中SAHA在所述抗癌藥給藥前給藥。
31.權(quán)利要求29的方法，其中SAHA在所述抗癌藥給藥后給藥。
32.權(quán)利要求1的方法，其中SAHA經(jīng)口、腸胃外、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、經(jīng)皮、舌下、肌內(nèi)、直腸、經(jīng)口頰、鼻內(nèi)、脂質(zhì)體；通過吸入、陰道、眼內(nèi)；通過導(dǎo)管或印模局部釋放、皮下、脂肪內(nèi)、關(guān)節(jié)腔內(nèi)、鞘內(nèi)或以緩釋劑型給藥。
33.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗癌藥經(jīng)口、腸胃外、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、經(jīng)皮、舌下、肌內(nèi)、直腸、經(jīng)口頰、鼻內(nèi)、脂質(zhì)體；通過吸入、陰道、眼內(nèi)；通過導(dǎo)管或印模局部釋放、皮下、脂肪內(nèi)、關(guān)節(jié)腔內(nèi)、鞘內(nèi)或以緩釋劑型給藥。
34.權(quán)利要求1的方法，其中SAHA以藥用組合物經(jīng)口給藥，該藥用組合物包含SAHA和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
35.權(quán)利要求34的方法，其中所述SAHA組合物包含在明膠膠囊中。
36.權(quán)利要求35的方法，其中所述載體或稀釋劑為微晶纖維素。
37.權(quán)利要求36的方法，其中所述SAHA組合物還包含交聯(lián)羧甲基纖維素鈉崩解劑。
38.權(quán)利要求37的方法，其中所述SAHA組合物還包含硬脂酸鎂潤滑劑。
39.權(quán)利要求34的方法，其中所述SAHA組合物給予所述患者的總?cè)談┝繛榧s25-4000mg/m2。
40.權(quán)利要求34的方法，其中所述SAHA組合物每日一次、每日兩次或每日三次給藥。
41.權(quán)利要求40的方法，其中所述SAHA組合物按約200-600mg劑量每日一次給藥。
42.權(quán)利要求40的方法，其中所述SAHA組合物按約200-400mg劑量每日兩次給藥。
43.權(quán)利要求40的方法，其中所述SAHA組合物按約200-400mg劑量每日三次給藥。
44.權(quán)利要求40的方法，其中所述SAHA組合物按約200-400mg劑量每日兩次間斷給藥。
45.權(quán)利要求44的方法，其中所述SAHA組合物每周3-5天給藥。
46.權(quán)利要求44的方法，其中所述SAHA組合物每周3天給藥。
47.權(quán)利要求46的方法，其中所述SAHA組合物按約200mg劑量給藥。
48.權(quán)利要求46的方法，其中所述SAHA組合物按約300mg劑量給藥。
49.權(quán)利要求46的方法，其中所述SAHA組合物按約400mg劑量給藥。
50.權(quán)利要求1的方法，其中所述癌癥選自白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、肉瘤、癌、實(shí)體瘤或其任何組合。
51.權(quán)利要求1的方法，其中所述癌癥選自皮膚T細(xì)胞淋巴瘤(CTCL)、非皮膚周圍T細(xì)胞淋巴瘤、與人嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)有關(guān)的淋巴瘤、成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤(ATLL)、急性淋巴細(xì)胞白血病、急性非淋巴細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、慢性骨髓性白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、間皮瘤；兒童實(shí)體瘤例如腦成神經(jīng)細(xì)胞瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、維爾姆斯瘤、骨癌和軟組織肉瘤；成人普通實(shí)體瘤例如頭和頸癌(例如口、喉和食管)、泌尿生殖癌(例如前列腺、膀胱、腎、子宮、卵巢、睪丸、直腸和結(jié)腸癌)、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、黑素瘤和其它皮膚癌；胃癌、腦癌、肝癌、腎上腺癌、腎癌、甲狀腺癌、基底細(xì)胞癌、潰瘍性和乳頭狀鱗狀細(xì)胞癌、轉(zhuǎn)移性皮膚癌、髓樣癌、骨樣肉瘤、尤因氏肉瘤、veticulum細(xì)胞肉瘤、卡波西肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤和成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤。
52.一種在有需要的患者中治療癌癥的方法，所述方法包括在第一治療方案中給予所述患者包含總?cè)談┝孔罡哌_(dá)約800mg的第一個(gè)量的由以下結(jié)構(gòu)代表的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物 和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥的步驟，其中所述第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。
53.權(quán)利要求52的方法，其中所述抗癌藥為組蛋白脫乙酰酶(HDAC)抑制劑、烷化劑、抗生素、抗代謝藥、激素藥、植物來源藥、抗血管形成藥、分化誘導(dǎo)劑、細(xì)胞生長停止誘導(dǎo)劑、細(xì)胞調(diào)亡誘導(dǎo)劑、細(xì)胞毒藥物、生物藥、基因治療藥或其任何組合。
54.權(quán)利要求52的方法，其中所述抗癌化合物為組蛋白脫乙酰酶(HDAC)抑制劑。
55.權(quán)利要求54的方法，其中所述HDAC抑制劑為異羥肟酸衍生物、短鏈脂肪酸(SCFA)、環(huán)四酞、苯甲酰胺衍生物或親電性酮衍生物。
56.權(quán)利要求54的方法，其中所述HDAC抑制劑為選自以下的異羥肟酸衍生物SAHA、Pyroxamide、CBHA、曲古抑菌素A(TSA)、曲古抑菌素C、水楊酰基二異羥肟酸、壬二異羥肟酸(ABHA)、壬二酸-1-異羥肟酸酯-9-酰苯胺(AAHA)、6-(3-氯苯基脲基)己異羥肟酸(3Cl-UCHA)、Oxamflatin、A-161906、Scriptaid、PXD-101、LAQ-824、CHAP、MW2796和MW2996。
57.權(quán)利要求54的方法，其中所述HDAC抑制劑為選自以下的環(huán)四酞Trapoxin A、FR901228(FK 228或酯肽)、FR225497、Apicidin、CHAP、HC-毒素、WF27082和Chlamydocin。
58.權(quán)利要求54的方法，其中所述HDAC抑制劑為選自以下的短鏈脂肪酸(SCFA)丁酸鈉、異戊酸鹽(酯)、戊酸鹽(酯)、4-苯基丁酸鹽(酯)(4-PBA)、苯基丁酸鹽(酯)(PB)、丙酸鹽(酯)、丁酰胺、異丁酰胺、苯基乙酸鹽(酯)、3-溴丙酸鹽(酯)、三丁精、丙戊酸和丙戊酸鹽(酯)。
59.權(quán)利要求54的方法，其中所述HDAC抑制劑為選自以下的苯甲酰胺衍生物CI-994、MS-27-275(MS-275)和MS-27-275的3′-氨基衍生物。
60.權(quán)利要求54的方法，其中所述HDAC抑制劑為選自三氟甲基酮和α-酮酰胺的親電性酮衍生物。
61.權(quán)利要求54的方法，其中所述HDAC抑制劑為天然產(chǎn)物、psammaplin或Depudecin。
62.權(quán)利要求54的方法，其中所述HDAC抑制劑為以下結(jié)構(gòu)代表的pyroxamide 或其藥學(xué)上可接受的鹽。
63.權(quán)利要求54的方法，其中所述HDAC抑制劑由以下結(jié)構(gòu)代表 其中R3和R4獨(dú)立為取代或未取代的以下基團(tuán)支鏈或非支鏈的烷基、烯基、環(huán)烷基、芳基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基；環(huán)烷基、芳基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基，或R3和R4結(jié)合在一起形成哌啶基；R2為羥氨基；且n為5-8的整數(shù)，其中所述HDAC抑制劑。
64.權(quán)利要求54的方法，其中所述HDAC抑制劑由以下結(jié)構(gòu)代表 其中R為取代或未取代的以下基團(tuán)苯基、哌啶、噻唑、2-吡啶、3-吡啶或4-吡啶，且n為4-8的整數(shù)。
65.權(quán)利要求54的方法，其中所述HDAC抑制劑由以下結(jié)構(gòu)代表 其中A為酰胺部分，R1和R2各自選自取代或未取代的芳基、芳基烷基、萘基、吡啶氨基、9-嘌呤-6-氨基、噻唑氨基、芳氧基、芳基烷氧基、吡啶基、喹啉基或異喹啉基；R4為氫、鹵素、苯基或環(huán)烷基部分，且n為3-10的整數(shù)。
66.權(quán)利要求52的方法，其中所述抗癌藥為選自以下的烷化劑雙氯乙胺、吖丙啶、烷基酮磺酸酯、亞硝基脲、非經(jīng)典烷化劑和鉑化合物。
67.權(quán)利要求52的方法，其中所述抗癌藥為選自以下的抗生素多柔比星、柔紅霉素、表柔比星、伊達(dá)比星和蒽二酮、絲裂霉素C、博來霉素、放線菌素D以及plicatomycin。
68.權(quán)利要求52的方法，其中所述抗癌藥為選自以下的抗代謝藥氟尿苷、氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、亞葉酸、羥基脲、硫鳥嘌呤、巰嘌呤、阿糖胞苷、噴司他丁、磷酸氟達(dá)拉濱、克拉曲濱、天冬酰胺酶和吉西他濱。
69.權(quán)利要求68的方法，其中所述抗代謝藥為吉西他濱。
70.權(quán)利要求52的方法，其中所述抗癌藥為選自以下的激素藥雌激素、孕激素、抗雌激素藥、雄激素、抗雄激素藥、LHRH類似物、芳化酶抑制劑、己烯雌酚、他莫昔芬、托瑞米芬、fluoxymesterol、雷洛昔芬、比卡魯胺、尼魯米特、氟他胺、氨魯米特、四唑、酮康唑、醋酸戈舍瑞林、亮丙立德、醋酸甲地孕酮和米非司酮。
71.權(quán)利要求52的方法，其中所述抗癌藥為選自以下的植物來源藥長春新堿、長春堿、長春酰胺、長春利定、長春瑞濱、依托泊苷、替尼泊苷、紫杉醇和多西他賽。
72.權(quán)利要求52的方法，其中所述抗癌藥為選自以下的生物藥免疫調(diào)節(jié)蛋白、抗腫瘤抗原的單克隆抗體、腫瘤抑制基因和癌疫苗。
73.權(quán)利要求21的方法，其中所述免疫調(diào)節(jié)蛋白選自白介素2、白介素4、白介素12、干擾素E1、干擾素D、α-干擾素、紅細(xì)胞生成素、粒細(xì)胞-CSF；粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞-CSF；芽孢桿菌Cahnette-Guerin、左旋咪唑和奧曲肽。
74.權(quán)利要求73的方法，其中所述腫瘤抑制基因選自DPC-4、NF-1、NF-2、RB、p53、WT1、BRCA和BRCA2。
75.權(quán)利要求52的方法，其中所述抗癌藥為分化誘導(dǎo)劑。
76.權(quán)利要求52的方法，其中所述SAHA和所述抗癌藥的療效為加和性的。
77.權(quán)利要求52的方法，其中SAHA使所述患者中的癌細(xì)胞對(duì)所述抗癌藥敏感。
78.權(quán)利要求52的方法，其中所述抗癌藥使所述患者中的癌細(xì)胞對(duì)SAHA敏感。
79.權(quán)利要求52的方法，其中SAHA和所述抗癌藥同時(shí)給藥。
80.權(quán)利要求52的方法，其中SAHA和所述抗癌藥序貫給藥。
81.權(quán)利要求80的方法，其中SAHA在所述抗癌藥給藥前給藥。
82.權(quán)利要求80的方法，其中SAHA在所述抗癌藥給藥后給藥。
83.權(quán)利要求52的方法，其中SAHA經(jīng)口、腸胃外、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、經(jīng)皮、舌下、肌內(nèi)、直腸、經(jīng)口頰、鼻內(nèi)、脂質(zhì)體；通過吸入、陰道、眼內(nèi)；通過導(dǎo)管或印模局部釋放、皮下、脂肪內(nèi)、關(guān)節(jié)腔內(nèi)、鞘內(nèi)或以緩釋劑型給藥。
84.權(quán)利要求52的方法，其中所述抗癌藥經(jīng)口、腸胃外、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、經(jīng)皮、舌下、肌內(nèi)、直腸、經(jīng)口頰、鼻內(nèi)、脂質(zhì)體；通過吸入、陰道、眼內(nèi)；通過導(dǎo)管或印模局部釋放、皮下、脂肪內(nèi)、關(guān)節(jié)腔內(nèi)、鞘內(nèi)或以緩釋劑型給藥。
85.權(quán)利要求52的方法，其中SAHA以藥用組合物經(jīng)口給藥，該藥用組合物包含SAHA和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
86.權(quán)利要求85的方法，其中所述SAHA組合物包含在明膠膠囊中。
87.權(quán)利要求86的方法，其中所述載體或稀釋劑為微晶纖維素。
88.權(quán)利要求87的方法，其中所述SAHA組合物還包含交聯(lián)羧甲基纖維素鈉崩解劑。
89.權(quán)利要求88的方法，其中所述SAHA組合物還包含硬脂酸鎂潤滑劑。
90.權(quán)利要求52的方法，其中所述SAHA組合物每日一次、每日兩次或每日三次給藥。
91.權(quán)利要求90的方法，其中所述SAHA組合物按約200-600mg劑量每日一次給藥。
92.權(quán)利要求90的方法，其中所述SAHA組合物按約200-400mg劑量每日兩次給藥。
93.權(quán)利要求90的方法，其中所述SAHA組合物按約200-400mg劑量每日三次給藥。
94.權(quán)利要求90的方法，其中所述SAHA組合物按約200-400mg劑量每日兩次間斷給藥。
95.權(quán)利要求94的方法，其中所述SAHA組合物每周3-5天給藥。
96.權(quán)利要求94的方法，其中所述SAHA組合物每周3天給藥。
97.權(quán)利要求96的方法，其中所述SAHA組合物按約200mg劑量給藥。
98.權(quán)利要求96的方法，其中所述SAHA組合物按約300mg劑量給藥。
99.權(quán)利要求96的方法，其中所述SAHA組合物按約400mg劑量給藥。
100.權(quán)利要求52的方法，其中所述癌癥選自白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、肉瘤、癌、實(shí)體瘤或其任何組合。
101.權(quán)利要求52的方法，其中所述癌癥選自皮膚T細(xì)胞淋巴瘤(CTCL)、非皮膚周圍T細(xì)胞淋巴瘤、與人嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)有關(guān)的淋巴瘤、成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤(ATLL)、急性淋巴細(xì)胞白血病、急性非淋巴細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、慢性骨髓性白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、間皮瘤；兒童實(shí)體瘤例如腦成神經(jīng)細(xì)胞瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、維爾姆斯瘤、骨癌和軟組織肉瘤；成人普通實(shí)體瘤例如頭和頸癌(例如口、喉和食管癌)、泌尿生殖癌(例如前列腺、膀胱、腎、子宮、卵巢、睪丸、直腸和結(jié)腸癌)、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、黑素瘤和其它皮膚癌；胃癌、腦癌、肝癌、腎上腺癌、腎癌、甲狀腺癌、基底細(xì)胞癌、潰瘍性和乳頭狀鱗狀細(xì)胞癌、轉(zhuǎn)移性皮膚癌、髓樣癌、骨樣肉瘤、尤因氏肉瘤、veticulum細(xì)胞肉瘤、卡波西肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤和成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤。
102.一種在有需要的患者中治療癌癥的方法，所述方法包括在第一治療方案中給予所述患者第一個(gè)量的由以下結(jié)構(gòu)代表的pyroxamide或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物 和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥的步驟，其中所述第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。
103.一種在有需要的患者中治療癌癥的方法，所述方法包括在第一治療方案中給予所述患者第一個(gè)量的由以下結(jié)構(gòu)代表的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物 其中R3和R4獨(dú)立為取代或未取代的以下基團(tuán)支鏈或非支鏈的烷基、烯基、環(huán)烷基、芳基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基；環(huán)烷基、芳基、芳氧基、芳基烷氧基或吡啶基，或R3和R4結(jié)合在一起形成哌啶基；R2為羥氨基；且n為5-8的整數(shù)，和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥的步驟，其中所述第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。
104.一種在有需要的患者中治療癌癥的方法，所述方法包括在第一治療方案中給予所述患者第一個(gè)量的由以下結(jié)構(gòu)代表的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物 其中R為取代或未取代的以下基團(tuán)苯基、哌啶、噻唑、2-吡啶、3-吡啶或4-吡啶，且n為4-8的整數(shù)，和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥的步驟，其中所述第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。
105.一種在有需要的患者中治療癌癥的方法，所述方法包括在第一治療方案中給予所述患者第一個(gè)量的由以下結(jié)構(gòu)代表的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物 其中A為酰胺部分，R1和R2各自選自取代或未取代的芳基、芳基烷基、萘基、吡啶氨基、9-嘌呤-6-氨基、噻唑氨基、芳氧基、芳基烷氧基、吡啶基、喹啉基或異喹啉基；R4為氫、鹵素、苯基或環(huán)烷基部分，且n為3-10的整數(shù)，和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥的步驟，其中所述第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。
106.一種選擇性誘導(dǎo)患者中的瘤細(xì)胞終末分化并因此抑制所述患者中所述細(xì)胞增殖的方法，所述方法包括在第一治療方案中給予所述患者第一個(gè)量的由以下結(jié)構(gòu)代表的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物 和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥的步驟，其中所述第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成有效誘導(dǎo)所述細(xì)胞終末分化的量。
107.一種選擇性誘導(dǎo)患者中的瘤細(xì)胞細(xì)胞生長停止并因此抑制所述患者中所述細(xì)胞增殖的方法，所述方法包括在第一治療方案中給予所述患者第一個(gè)量的由以下結(jié)構(gòu)代表的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物 和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥的步驟，其中所述第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成有效誘導(dǎo)所述細(xì)胞細(xì)胞生長停止的量。
108.一種選擇性誘導(dǎo)患者中的瘤細(xì)胞調(diào)亡并因此抑制所述患者中所述細(xì)胞增殖的方法，所述方法包括在第一治療方案中給予所述患者第一個(gè)量的由以下結(jié)構(gòu)代表的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物 和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥的步驟，其中所述第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成有效誘導(dǎo)所述細(xì)胞調(diào)亡的量。
109.一種體外選擇性誘導(dǎo)瘤細(xì)胞終末分化并因此抑制所述細(xì)胞增殖的方法，所述方法包括使所述細(xì)胞與第一個(gè)量的由以下結(jié)構(gòu)代表的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物 和第二個(gè)量的抗癌藥接觸的步驟，其中所述第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成有效誘導(dǎo)所述細(xì)胞終末分化的量。
110.一種體外選擇性誘導(dǎo)瘤細(xì)胞細(xì)胞生長停止并因此抑制所述細(xì)胞增殖的方法，所述方法包括使所述細(xì)胞與第一個(gè)量的由以下結(jié)構(gòu)代表的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物 和第二個(gè)量的抗癌藥接觸的步驟，其中所述第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成有效誘導(dǎo)所述細(xì)胞細(xì)胞生長停止的量。
111.一種體外選擇性誘導(dǎo)瘤細(xì)胞調(diào)亡并因此抑制所述細(xì)胞增殖的方法，所述方法包括使所述細(xì)胞與第一個(gè)量的由以下結(jié)構(gòu)代表的辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物 和第二個(gè)量的抗癌藥接觸的步驟，其中所述第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成有效誘導(dǎo)所述細(xì)胞調(diào)亡的量。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過在第一治療方案中給予有需要的患者第一個(gè)量的組蛋白脫乙酰酶(HDAC)抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物，和在第二治療方案中給予第二個(gè)量的抗癌藥，在有需要的患者中治療癌癥的方法。第一個(gè)和第二個(gè)量一起構(gòu)成治療有效量。HDAC抑制劑和抗癌藥的作用可能是加和性或協(xié)同的。
文檔編號(hào)A61K31/19GK1964714SQ200480031561
公開日2007年5月16日 申請(qǐng)日期2004年8月12日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月29日
發(fā)明者N·G·巴科波洛斯, J·H·奇奧, P·A·馬克斯, T·A·米勒, C·M·帕拉迪塞, V·M·里奇翁, R·A·里夫金德 申請(qǐng)人:阿托恩藥品公司, 斯隆-凱特林癌癥研究所