專利名稱：亮葉十大功勞提取物、提取方法和含該提取物的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及亮葉十大功勞(Mahonia Aquifolium)提取物，使用新提取方法獲得濃縮形式提取物的方法和包含該提取物的藥物組合物。該藥物組合物對(duì)牛皮癬、濕疹、皮炎及其他干燥皮膚狀況的治療特別有效。
背景技術(shù)：
牛皮癬是一種慢性皮膚病，其特征為皮膚鱗屑和炎癥。當(dāng)皮膚外層中的細(xì)胞比正常增殖快并在皮膚表面堆積時(shí)，出現(xiàn)鱗屑。牛皮癬影響約1.5％-2％的北美人口。其發(fā)生在所有年齡組中并同樣地影響男子和女子。受牛皮癬影響的人遭受不舒適、受限的關(guān)節(jié)活動(dòng)和情緒刺激。約10％得了牛皮癬的人患有關(guān)節(jié)炎癥，其產(chǎn)生類似于關(guān)節(jié)炎的癥狀。
當(dāng)牛皮癬產(chǎn)生時(shí)，皮膚斑紋變厚、發(fā)紅并且變成由銀白鱗屑所覆蓋。這些斑通常稱為斑塊(plaque)。該斑塊通常是發(fā)癢的并且可有灼傷感。牛皮癬最常發(fā)生在肘、膝、頭皮、腰部、面部、手掌和足底。
近年來(lái)已經(jīng)使用了各種治療和方法，包括局部施用皮質(zhì)類固醇、卡泊三烯、煤焦油等。浴液和普通的保濕劑已經(jīng)被一些患者使用。還使用了日光和紫外光治療。在有些情況下，需要使用內(nèi)服處方藥物的系統(tǒng)治療。內(nèi)服藥包括類維生素A、氨甲蝶呤、羥脲和抗生素。
這些治療各有利弊。在許多情況下，患者產(chǎn)生治療耐受性而使治療變得越發(fā)缺乏效果。本發(fā)明人已尋找出一種適于多種患者的治療方法，該方法克服了上述缺點(diǎn)。
亮葉十大功勞最初發(fā)現(xiàn)于太平洋西北和不列顛哥侖比亞省(thePacific Northwest and British Columbia)，許多世紀(jì)以來(lái)，其已被北美原住民(Native North Americans)用來(lái)治療牛皮癬和濕疹。它是一種屬于小檗科的常綠灌木。
亮葉十大功勞植物的根和莖皮已知包含異喹啉生物堿，其包括小檗堿、巴馬亭、小檗胺、尖刺堿、藥根堿、bervulcine、玉蘭堿和非洲防己堿。這些生物堿被認(rèn)為是植物中的活性組分，因?yàn)樗鼈冎械脑S多已經(jīng)顯示出強(qiáng)的體外抗微生物和抗真菌活性。
在治療和處理牛皮癬及其他炎癥狀況中，亮葉十大功勞可具有幾種作用機(jī)理。小檗堿和如上所述的相關(guān)生物堿可逆地嵌入DNA中，阻礙復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。十大功勞提取物包含如上所述的異喹啉生物堿。異喹啉已經(jīng)被確定為一種煤焦油組分，其引起小鼠尾表皮中的半角化(parakeratotic)角質(zhì)層的濾泡內(nèi)區(qū)域變得正角化(orthokeratotic)，并伴隨產(chǎn)生顆粒層。在這方面，異喹啉表現(xiàn)類似于煤焦油，并且該異喹啉類可有助于煤焦油的抗牛皮癬活性。從本提取物分離的生物堿證明對(duì)角化細(xì)胞具有抗增殖活性。角化細(xì)胞的高度增殖是牛皮癬的主要癥狀，因此控制此活性將助于治療牛皮癬。脂肪氧合酶抑制與原小蘗堿生物堿的脂質(zhì)抗氧效力非常有關(guān)，可能通過(guò)減少脂質(zhì)氫過(guò)氧化物底物的累積。十大功勞是LTB-4(被認(rèn)為是調(diào)節(jié)炎癥的一種白細(xì)胞三烯)和5-羥基-二十碳四烯酸(5-HETE)的適當(dāng)抑制劑，具有與地蒽酚同樣數(shù)量級(jí)的IC-50。IC-50是指50％抑制產(chǎn)生時(shí)的濃度。
亮葉十大功勞提取物也是一種對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化作用很有效的抑制劑。從該提取物分離的個(gè)體生物堿通過(guò)抑制脂肪氧合酶作用顯示了消炎活性。已知產(chǎn)生于脂肪氧合酶作用的氧化產(chǎn)物在其它生物系統(tǒng)中是炎癥介質(zhì)。亮葉十大功勞對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化作用的抑制效果與略微刺激脂質(zhì)過(guò)氧化作用的地蒽酚形成對(duì)照。這個(gè)差異可說(shuō)明亮葉十大功勞提取物減少刺激的原因。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的亮葉十大功勞提取物是使用以下詳述的提取方法以高濃度形式獲得的。在本提取方法中所用的反應(yīng)物是水、醇和天然的干燥亮葉十大功勞。
天然的干燥亮葉十大功勞由亮葉十大功勞(小檗科)植物的干燥莖皮和枝條獲得。這種植物包括小檗科植物，例如Oregonhollygrape。
將反應(yīng)物裝入不銹鋼反應(yīng)器容器中。夾緊關(guān)閉容器。對(duì)反應(yīng)器容器施加3-6psi的壓力(取決于體積)，反應(yīng)物混合物被加熱到溫度不高于50℃，優(yōu)選約40℃，同時(shí)用內(nèi)反轉(zhuǎn)攪拌混合器混合內(nèi)容物。當(dāng)混合物到達(dá)40℃時(shí)，使用內(nèi)研磨混合器并且與內(nèi)反轉(zhuǎn)混合器結(jié)合以約3000rpm(每分鐘轉(zhuǎn)數(shù))的速度處理該混合物達(dá)3小時(shí)。在3-6psi的壓力下將混合物留在反應(yīng)器中，并使其冷卻不少于24小時(shí)。
在過(guò)了24小時(shí)以后，再次使用內(nèi)研磨混合器并且與內(nèi)反轉(zhuǎn)混合器結(jié)合以約3000rpm的速度處理該混合物達(dá)3小時(shí)。在約3-6psi的壓力下將混合物留在反應(yīng)器中不少于24小時(shí)。
在第二個(gè)24小時(shí)后，再次使用內(nèi)研磨混合器并且與內(nèi)反轉(zhuǎn)混合器結(jié)合以約3000rpm的速度處理該混合物達(dá)3小時(shí)。然后，在約3-6psi的壓力下將混合物留在反應(yīng)器中至少24小時(shí)。
在第三個(gè)24小時(shí)階段之后，釋放反應(yīng)器中壓力，通過(guò)粗篩網(wǎng)過(guò)濾器然后通過(guò)5微米過(guò)濾器過(guò)濾反應(yīng)物混合物。該混合物然后被置于真空下并被加熱到最低40℃但不超過(guò)50℃并同時(shí)攪拌以減少和除去溶劑直到混合物為其原始體積的約6％。通過(guò)1微米過(guò)濾器再過(guò)濾獲得的產(chǎn)物。
本提取方法產(chǎn)出濃度為約1.5mg/ml小檗堿生物堿的成品亮葉十大功勞提取物。典型的醇基提取方法會(huì)產(chǎn)出濃度為約0.09mg/ml小檗堿生物堿的成品亮葉十大功勞提取物。
由本提取方法獲得的產(chǎn)物然后被用于制備用于治療牛皮癬及其他皮膚不適和疾病的藥物組合物。
通過(guò)使亮葉十大功勞提取物結(jié)合在脂質(zhì)體輸送系統(tǒng)中而制備藥物組合物以供使用。
脂質(zhì)體是當(dāng)磷脂水合時(shí)形成的顯微球形泡。最近，脂質(zhì)體已經(jīng)被用作和評(píng)為藥物、維生素和化妝品材料的輸送系統(tǒng)。通過(guò)改變脂質(zhì)含量、大小、表面電荷和制備方法，它們可被定制設(shè)計(jì)用于幾乎任何用途。因?yàn)橹|(zhì)體壁在生理學(xué)上非常類似于細(xì)胞膜材料，所以它們特別適于輸送應(yīng)用于皮膚的產(chǎn)品。當(dāng)含脂質(zhì)體的藥物或化妝品被施用于皮膚時(shí)，脂質(zhì)體沉積在皮膚上并且開始與細(xì)胞膜結(jié)合。脂質(zhì)體將活性物質(zhì)釋放入細(xì)胞，結(jié)果活性物質(zhì)的輸送是非常特效的。脂質(zhì)體輸送系統(tǒng)可被設(shè)計(jì)以在各種條件下釋放活性物質(zhì)，例如緩慢釋放、快速釋放、雙層組合物、溫度依賴釋放、pH-依賴釋放等。
優(yōu)選的用于本發(fā)明藥物組合物的脂質(zhì)體輸送系統(tǒng)是Novasome技術(shù)。Novasome脂質(zhì)泡由既具有親水性又具有疏水性的分子(即兩性分子)組成。Novasome泡由一個(gè)或多個(gè)環(huán)繞較大核心的脂質(zhì)膜或雙層組成(通常為5-7個(gè))。各膜由雙層排列的兩性分子組成。
核心占泡體積的大部分，提供高的對(duì)水溶性和水不混溶性物質(zhì)的承載能力。Novasome雙層不在理想的排列中且包含空位(通道)，被封裝的組分可通過(guò)該空位(通道)移動(dòng)。通過(guò)一系列引起雙層中的空位橫向運(yùn)動(dòng)的隨機(jī)跳動(dòng)，被封裝的組分可在各雙層內(nèi)和各雙層之間移動(dòng)。核心中含有活性成分，并且該活性成分可從核心通過(guò)雙層傳遞。Novasome泡結(jié)構(gòu)提供了持續(xù)的釋放機(jī)制，所以可以實(shí)現(xiàn)活性成分連續(xù)且受控的釋放。由于在使用前以更受保護(hù)的方式將活性成分包埋在核心中，所以改善了儲(chǔ)存穩(wěn)定性和活性成分的穩(wěn)定性。這提供了更有效率和效果的活性成分的輸送。
通過(guò)在脂質(zhì)體輸送系統(tǒng)中結(jié)合濃度為總組合物的約5-20wt％的亮葉十大功勞提取物而制備藥物組合物。以上剛剛詳述的脂質(zhì)體輸送系統(tǒng)是一個(gè)優(yōu)選的輸送系統(tǒng)。優(yōu)選的組合物的亮葉十大功勞濃度為總組合物的5-10wt％。此將提供具有最少0.712％小檗堿的組合物。
該組合物的其余部分包括典型的藥物可接受組分，例如稀釋劑、輔劑等。
該組合物以局部施用的形式使用并且直接施用于受感染的區(qū)域。該組合物可以是洗液或乳劑的形式。
三個(gè)典型的制劑詳述如下。各組分所述的重量百分?jǐn)?shù)是總組合物的重量百分?jǐn)?shù)。亮葉十大功勞提取物在脂質(zhì)體輸送系統(tǒng)中。
洗液組分 wt％去離子水 51.04十大功勞提取物10.00乙二醇單乙基醚(transcutol)8.00二月桂酸甘油酯8.00單硬脂酸甘油酯4.5096％甘油 3.41己二酸二異丙酯3.00環(huán)甲基硅氧烷 2.50聚二甲基硅氧烷2.00棕櫚酸辛酯1.40乳酸C12-15醇酯1.00
春黃菊提取物1.00硬脂酰氧基聚二甲基硅氧烷0.70膽固醇 0.50聚山梨酸酯80TM0.50鯨蠟硬脂基葡糖苷(cetearyl glucoside)0.50鯨蠟醇 0.50綠茶提取物 0.50苯氧基乙醇 0.40對(duì)羥基苯甲酸甲酯TM0.20黃原膠 0.15EDTA二鈉0.10維生素E醋酸酯 0.10乳劑組分wt％去離子水44.95十大功勞提取物 10.00乙二醇單乙基醚 10.00二月桂酸甘油酯 8.00單硬脂酸甘油酯 4.5096％甘油3.41環(huán)甲基硅氧烷3.00聚二甲基硅氧烷 2.50鯨蠟硬脂基葡糖苷1.50PEG-150單硬脂酸酯 1.50己二酸二異丙酯 1.50硬脂酰氧基聚二甲基硅氧烷1.00乳酸C12-15醇酯 1.00油酸乙酯1.00癸二酸二異丙酯 1.00鯨蠟醇 1.00春黃菊提取物1.00Sepigel 305TM1.00
綠茶提取物 0.50膽固醇 0.50苯氧基乙醇 0.40黃原膠 0.30對(duì)羥基苯甲酸甲酯0.20EDTA二鈉0.10α-生育酚乙酸酯 0.10檸檬酸 0.04頭皮治療組合物組分 wt％去離子水67.34十大功勞提取物 10.00單硬脂酸甘油酯 4.50春黃菊提取物3.00丙二醇 2.50不能皂化的鱷梨 2.00Quaterium 22TM2.00環(huán)甲基硅氧烷1.40山萮基三甲基銨(behentrimonium)硫酸二甲酯1.00鯨蠟硬脂醇(cetearyl alcohol)1.00庫(kù)拉索蘆薈粉1.00綠茶提取物 1.00小麥胚油1.00十八醇 0.70三乙醇胺0.66Quaterium 26TM0.50對(duì)羥基苯甲酸甲酯0.20DMDM乙內(nèi)酰脲0.20在如下詳述的臨床研究和試驗(yàn)中，注意到本發(fā)明組合物的有益效果。
在一個(gè)試驗(yàn)中，患有輕度到中度牛皮癬的牛皮癬患者將本發(fā)明組合物施用于其一半的受感染區(qū)域。對(duì)受感染區(qū)域的另一側(cè)患者施用普通賦形劑乳劑(用于制備本發(fā)明組合物的乳劑)。該組合物每天兩次施用四周。全部11名病人都遵守并且完成了歷經(jīng)四周的研究。九位患者有所改善，一位在整個(gè)治療期間保持原樣但是騷癢減輕，而一位僅在普通賦形劑乳劑側(cè)得到改善。在九位有所改善的患者中，一位患者的兩側(cè)都得到清除，一位患者在兩側(cè)得到同樣的改善，一位患者在使用本發(fā)明組合物的一側(cè)得到輕微改善，而六位患者明確地在使用本發(fā)明組合物的一側(cè)得到改善。
在另一研究中，乳劑基中低濃度的亮葉十大功勞提取物證明當(dāng)施用于牛皮癬斑塊時(shí)該制劑是安全且極耐受的。啟動(dòng)第二次研究以在33位患有各種類型的牛皮癬患者和八位濕疹患者中檢查較高濃度亮葉十大功勞提取物的安全性、耐受性和效力。該研究是觀察性研究。
患者群包括多個(gè)年齡組并且包括男女。在開始施用亮葉十大功勞提取物前的治療包括未經(jīng)治療到局部皮質(zhì)類固醇、DovonexTM、紫外光和氨甲蝶呤。
在治療前和在整個(gè)研究期間對(duì)十大功勞提取物和賦形劑所治療的病變進(jìn)行拍照。目標(biāo)病變按鱗屑、厚度和發(fā)紅情況分級(jí)。在幾乎所有的病例中，鱗屑是第一個(gè)改善的癥狀。在許多病例中，在治療的第一周后觀察到改善。在2-4周內(nèi)，斑塊厚度通常顯著地下降。發(fā)紅情況最漸進(jìn)地改善。這對(duì)于大多數(shù)牛皮癬治療來(lái)說(shuō)是常見的。
在一些病例中，當(dāng)開始施用十大功勞提取物時(shí)，繼續(xù)氨甲蝶呤和/或紫外光治療。十大功勞提取物沒(méi)有引起任何與這些治療相反的相互作用，并且沒(méi)有顯示出光敏性或光毒性。十大功勞乳劑可為一種輔助治療。無(wú)臨床證據(jù)表明乳劑被檢測(cè)為阻礙或干涉紫外光。
全部患者都熱心地接受十大功勞乳劑，并且良好地遵守和堅(jiān)持了試驗(yàn)協(xié)議。在所有的牛皮癬和濕疹的病例中，用十大功勞乳劑治療的一側(cè)與單獨(dú)用賦形劑乳劑治療的一側(cè)效果一樣好或更好。
工業(yè)實(shí)用性由本發(fā)明方法獲得的亮葉十大功勞提取物適用于藥物組合物，該藥物組合物可作為牛皮癬、濕疹、皮炎及其他干燥皮膚狀況的有效治療方法。
權(quán)利要求
1.一種皮膚治療組合物，其包括脂質(zhì)體輸送系統(tǒng)中的亮葉十大功勞提取物。
2.權(quán)利要求1的皮膚治療組合物，其中亮葉十大功勞提取物存在的濃度為總組合物的5-20wt％。
3.權(quán)利要求1的皮膚治療組合物，其中亮葉十大功勞提取物存在的濃度為總組合物的10wt％。
4.一種獲得亮葉十大功勞提取物的方法，其包括以下步驟(a)對(duì)水、醇和天然的干燥亮葉十大功勞施加熱和加壓；(b)攪拌該混合物；(c)以約3000rpm的速度處理該混合物約三小時(shí)；(d)使該混合物在壓力下冷卻至少24小時(shí)；(e)重復(fù)最后兩個(gè)步驟至少再兩次；(f)釋放壓力；(g)在加熱和攪拌下將該混合物置于真空下以減少和除去醇和水而獲得約6vol％的混合物；和(h)過(guò)濾所得混合物以獲得亮葉十大功勞提取物。
5.權(quán)利要求4的方法，其中在步驟(a)中，混合物被加熱到溫度不高于50℃。
6.權(quán)利要求4的方法，其中在步驟(a)中，混合物被加熱到40℃的溫度。
7.權(quán)利要求4的方法，其中壓力為約3-6psi。
8.通過(guò)權(quán)利要求4的方法獲得的亮葉十大功勞提取物。
9.通過(guò)施用權(quán)利要求1的皮膚治療組合物治療牛皮癬、濕疹及其他干燥皮膚狀況的方法。
全文摘要
本發(fā)明提供一種皮膚治療組合物，其包括脂質(zhì)體輸送系統(tǒng)中的亮葉十大功勞提取物。該亮葉十大功勞提取物以總組合物的5－20wt％存在于皮膚治療組合物中。該皮膚治療組合物在治療牛皮癬、濕疹及其他干燥皮膚狀況中特別有效。本發(fā)明進(jìn)一步提供一種用于獲得亮葉十大功勞提取物的方法。
文檔編號(hào)A61K125/00GK1856318SQ200480027794
公開日2006年11月1日 申請(qǐng)日期2004年9月22日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月25日
發(fā)明者R·米爾斯, R·馬圖爾, N·勞倫斯 申請(qǐng)人:普萊姆制藥公司