專利名稱：用于施用水難溶性藥物的自納米乳化油性制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物賦形劑制劑，更具體而言，涉及包含自納米乳化油性制劑(SNEOF)的藥物賦形劑組合物，所述自納米乳化油性制劑增強(qiáng)水難溶性藥物的吸收，特別是增強(qiáng)紫杉烷類(taxoid)藥物和細(xì)胞毒素劑的口服吸收，其基于對(duì)藥物的溶解和吸收的改善；以及提供一種藥物的劑量-AUC線性藥物代謝動(dòng)力學(xué)。
一些藥物只有在開(kāi)發(fā)出將其遞送至其在人體內(nèi)的治療靶點(diǎn)的特定藥物遞送系統(tǒng)時(shí)，才可能應(yīng)用于臨床。這個(gè)問(wèn)題對(duì)于那些直接注射會(huì)是不可能的或是存在問(wèn)題的水不溶性或水難溶性的化合物是特別關(guān)鍵的。
下面是水難溶性治療物質(zhì)的一些例子棕櫚酰根霉素、本可麥定(Penclomedine)、維生素A及其衍生物(維甲酸、異維甲酸等)、他莫昔芬、依托泊苷、喜樹(shù)堿(campothecin)、諾維本、丙戊酸、他克莫司、西羅莫司(雷帕霉素)、環(huán)孢霉素A、克拉霉素(Clarithromicin)、睪酮、雌二醇、黃體酮、環(huán)丙氟哌酸(Ciprofloxacine)、非諾貝特、苯扎貝特、阿齊霉素(Azithromicine)、伊曲康唑、咪康唑、異丙酚、溴莫尼定、拉坦前列素和紫杉醇。
眾所周知，紫杉醇是最熟知的紫杉烷類藥物的一種，能夠破壞微管蛋白的動(dòng)力學(xué)。它對(duì)于類型廣泛的各種腫瘤都具有顯著的臨床活性，包括胸、肺、頭和頸、膀胱、及鉑類難治卵巢癌(E.K.Rowinsky.The development and clinical utility of the taxoidclass of antimicrotubule chemotherapy agents.Annu Rev Med.48353-74(1997))。然而，紫杉醇具有低的治療指數(shù)。它是一種復(fù)雜的二萜類化合物產(chǎn)品，具有龐大的、伸展開(kāi)的稠環(huán)體系和許多疏水性取代基，因此它水溶性差(1μg/ml)，在制備藥劑時(shí)存在嚴(yán)重的問(wèn)題(R.T.Liggins，W.L.Hunter，H.M.Burt.Solid-state characterization ofpaclitaxel.J Pharm Sci.861458-63(1997))。紫杉醇高度疏液，在親脂溶劑例如大豆油中的溶解度很低，并且使得不可能考慮使用簡(jiǎn)單的水包油乳劑來(lái)制備制劑。當(dāng)前商業(yè)可得的產(chǎn)品Taxol是由乙醇和聚氧乙基化蓖麻油(Cremophor EL)的混合物制備成的全身給藥制劑；聚氧乙基化蓖麻油，而不是藥物本身，是引起藥物相關(guān)的超敏反應(yīng)的主要原因(R.E.Gregory，A.F.De Lisa.Paclitaxela new antineoplastic agent forrefractory ovarian cancer.Clin Pharm.12401-15(1993))。此外，聚氧乙基化蓖麻油也會(huì)引起紫杉醇的非線性藥物代謝動(dòng)力學(xué)行為(A.Sparreboom，O.van Tellingen，W.J.Nooijen，J.H.Beijnen.Nonlinear pharmacokinetics of paclitaxel in mice resultsfrom the pharmaceutical vehicle Cremophor EL.Cancer Res.562112-5(1996)；O.van Tellingen，M.T.Huizing，V.R.Panday，J.H.Schellens，W.J.Nooijen，J.H.Beijnen.Cremophor EL causes(pseudo-)non-linear pharmacokinetics of paclitaxel inpatients.Br J Cancer 81330-5(1999))。
當(dāng)前用于減小實(shí)際商業(yè)產(chǎn)品副作用的方法主要是集中于開(kāi)發(fā)不含聚氧乙基化蓖麻油的制劑。已經(jīng)進(jìn)行了一些用替代系統(tǒng)來(lái)遞送紫杉醇的嘗試，例如納米顆粒(R.Cavalli，O.Caputo，M.R.Gasco.Preparation and characterization of solid lipidnanospheres containing paclitaxel.Eur J Pharm Sci.10305-9(2000)；S.S.Feng，G.F.Huang，L.Mu.Nanospheres of biodegradable polymersa system for clinicaladministration of an anticancer drug paclitaxel(Taxol).[In Process Citation].AnnAcad Med Singapore.29633-9(2000))、脂質(zhì)體(P.Crosasso，M.Ceruti，P.Brusa，S.Arpicco，E.Dosio，L.Cattel.Preparation，characterization and properties of stericallystabilized paclitaxel-containing liposomes.J Controlled Release.6319-30(2000)；A.Sharma，R.M.Straubinger.Novel taxol formulationspreparation andcharacterization of taxol-containing liposomes.Pharm Res.11889-96(1994))、水溶性前體藥物(J.M.Terwogt，B.Nuijen，W.W.T.B.Huinink，J.H.Beijnen.Alternativeformulations of paclitaxel.Cancer Treat Rev.2387-95(1997)；A.Pendri，C.D.Conover，R.B.Greenwald.Antitumor activity of paclitaxel-2′-glycinate conjugated topoly(ethylene glycol)a water-soluble prodrug.Anticancer Drug Des.13387-95(1998))、乳劑(P.P.Constantinides，K.J.Lambert，A.K.Tustian，B.Schneider，S.Lalji，W.Ma，B.Wentzel，D.Kessler，D.Worah，and S.C.Quay.Formulationdevelopment and antitumor activity of a filter-sterilizable emulsion of paclitaxel.Pharm Res.17175-82(2000)；B.B.Lundberg.A submicron lipid emulsion coatedwith amphipathic polyethylene glycol for parenteral administration of paclitaxel(Taxol).J Pharm Pharmacol.4916-21(1997)；P.Kan，Z.B.Chen，C.J.Lee，I.M.Chu.Development of nonionic surfactant/phospholipid o/w emulsion as a paclitaxeldelivery system.J Controlled Release.58271-8(1999)，P.Simamora，R.M.Dannenfelser，S.E.Tabibi，S.H.Yalkowsky.Emulsion formulations for intravenousadministration of paclitaxel.PDA J Pharm Sci Technol.52170-2(1998))和微球(R.T.Liggins，S.D′Amours，J.S.Demetrick，L.S.Machan，H.M.Burt.Paclitaxel loadedpoly(L-lactic acid)microspheres for the prevention of intraperitoneal carcinomatosisafter a surgical repair and tumor cell spill[In Process Citation].Biomaterials.211959-69(2000)；Y.M.Wang，H.Sato，I.Adachi，I.Horikoshi.Preparation andcharacterization of poly(lactic-co-glycolic acid)microspheres for targeted delivery ofa novel anticancer agent，taxol.Chem Pharm Bull(Tokyo).441935-40(1996))。然而，目前上述方法的成功性仍然有限。這些替代系統(tǒng)都還沒(méi)有達(dá)到在臨床應(yīng)用中替代聚氧乙基化蓖麻油基載體的階段。
其他克服由聚氧乙基化蓖麻油導(dǎo)致的超敏反應(yīng)的方法可以是設(shè)計(jì)紫杉醇的口服制劑(J.M.M.Terwogt，M.M.Malingre，J.H.Beijnen，W.W.B.Huinink，H.Rosing，F(xiàn).J.Koopman，O.van Tellingen，M.Swart，and J.H.M.Schellens.Coadministrationof oral cyclosporin A enables oral therapy with paclitaxel.Clin Cancer Res.53379-84(1999))。這樣，紫杉醇的口服給藥將會(huì)避免由載體物質(zhì)聚氧乙基化蓖麻油所引起的不良反應(yīng)，并提供優(yōu)于靜脈注射的其他優(yōu)點(diǎn)，包括不需要門(mén)診患者頻繁去診所就診和更易于長(zhǎng)期給藥(R.T.Dorr.Pharmacology and toxicology of Cremophor EL diluent.Ann Pharmacother.28S11-4(1994)；A.J.ten Tije，J.Verweij，W.J.Loos，and A.Sparreboom.Pharmacological effects of formulation vehiclesimplications for cancerchemotherapy.Clin Pharmacokinet 42665-85(2003))。然而，臨床前研究表明，紫杉醇口服給藥后吸收不顯著；紫杉醇口服給藥后在人體內(nèi)的全身生物利用度低于6％(J.M.M.Terwogt，M.M.Malingre，J.H.Beijnen，W.W.B.Huinink，H.Rosing，F(xiàn).J.Koopman，O.van Tellingcn，M.Swart，and J.H.M.Schellens.Coadministration oforal cyclosporin A enables oral therapy with paclitaxel.Clin Cancer Rcs.53379-84(1999))。對(duì)紫杉醇的口服生物利用度差的解釋是多因素的。最可能的解釋是它對(duì)膜結(jié)合藥物流出泵P-糖蛋白(P-gp)具有親和力，通過(guò)細(xì)胞色素P450(2C8和3A4)產(chǎn)生的代謝作用和它差的水溶性(R.T.Liggins，W.L.Hunter，H.M.Burt.Solid-statecharacterization of paclitaxel.J Pharm Sci.861458-63(1997)；J.van Asperen，O.vanTellingen，A.Sparreboom，A.H.Schinkel，P.Borst，W.J.Nooijen，and J.H.Beijnen.Enhanced oral bioavailability of paclitaxel in mice treated with the P-glycoproteinblocker SDZ PSC 833.Br J Cancer.761181-3(1997)；C.D.Britten，S.D.Baker，L.J.Denis，T.Johnson，R.Drengler，L.L.Siu，K.Duchin，J.Kuhn，and E.K.Rowinsky.Oral paclitaxel and concurrent cyclosporin Atargeting clinically relevant systemicexposure to paclitaxel.Clin Cancer Res.63459-68(2000))。然而，有證據(jù)表明聚氧乙基化蓖麻油(Cremophor EL)是Taxol口服給藥生物利用度低和藥物代謝動(dòng)力學(xué)線性差的部分原因(H.A.Bardelmeijer，M.Ouwehand，M.M.Malingre，J.H.Schellens，J.H.Beijnen，and O.van Tellingen.Entrapment by Cremophor EL decreases theabsorption of paclitaxel from the gut.Cancer Chemother Pharmacol 49119-125(2002)；M.M.Malingre，J.H.Schellens，O.Van Tellingen，M.Ouwehand，H.A.Bardelmeijer，H.Rosing，F(xiàn).J.Koopman，M.E.Schot，W.W.Ten Bokkel Huinink，andJ.H.Beijnen.The co-solvent Cremophor EL limits absorption of orally administeredpaclitaxel in cancer patients.Br J Cancer 851472-1477(2001))。
已經(jīng)在動(dòng)物和患者中進(jìn)行了大量研究，以驗(yàn)證當(dāng)藥物與P-gp或者細(xì)胞色素P450抑制劑一起施用時(shí)，是否可以改善紫杉醇的口服生物利用度(R.T.Dorr.Pharmacology and toxicology of Cremophor EL diluent.Ann Pharmacother.28S11-4(1994)；J.van Asperen，O.van Tellingen，A.Sparreboom，A.H.Schinkel，P.Borst，W.J.Nooijen，and J.H.Beijnen.Enhanced oral bioavailability of paclitaxel in micetreated with the P-glycoprotein blocker SDZ PSC 833.Br J Cancer.761181-3(1997)；C.D.Britten，S.D.Baker，L.J.Denis，T.Johnson，R.Drengler，L.L.Siu，K.Duchin，J.Kuhn，and E.K.Rowinsky.Oral paclitaxel and concurrent cyclosporin Atargetingclinically relevant systemic exposure to paclitaxel.Clin Cancer Res.63459-68(2000))。環(huán)孢霉素A(CsA)是一種眾所周知的免疫抑制劑，被示為能夠促進(jìn)紫杉醇口服吸收的最有希望的P-gp抑制劑之一(J.M.M.Terwogt，M.M.Malingre，J.H.Beijnen，W.W.B.Huinink，H.Rosing，F(xiàn).J.Koopman，O.van Tellingen，M.Swart，and J.H.M.Schellens.Coadministration of oral cyclosporin A enables oral therapywith paclitaxel.Clin Cancer Res.53379-84(1999)；C.D.Britten，S.D.Baker，L.J.Denis，T.Johnson，R.Drengler，L.L.Siu，K.Duchin，J.Kuhn，and E.K.Rowinsky.Oral paclitaxel and concurrent cyclosporin Atargeting clinically relevant systemicexposure to paclitaxel.Clin Cancer Res.63459-68(2000))。CsA是一種已注冊(cè)的藥物，因此可以更方便地用于臨床研究。在口服Taxol時(shí)聯(lián)合施用環(huán)孢霉素A可以使紫杉醇的AUC增加(生物利用度為20％)。然而，只有在小劑量下才實(shí)現(xiàn)該AUC增加。相反，在嚙齒類動(dòng)物和人中，較高劑量給藥都顯示出非線性的藥物代謝動(dòng)力學(xué)。在人體中，劑量增加5倍(從60增加到300mg/m2)僅使血漿AUC增加2倍(M.M.Malingre，J.M.Terwogt，J.H.Beijnen，H.Rosing，F(xiàn).J.Koopman，O.van Tellingen，K.Duchin，W.W.Huinink，M.Swart，J.Lieverst，and J.H.Schellens.Phase I andpharmacokinetic study of oral paclitaxel.J Clin Oncol 182468-2475.(2000))。該非線性的劑量-AUC關(guān)系是口服Taxol應(yīng)用的一個(gè)顯著障礙。此外，口服Taxol在患者中顯示出差的耐受性，并且引起急性胃腸道疾病，例如惡心和嘔吐。制劑包含大量乙醇(50％)，高的臨床所需劑量導(dǎo)致攝入顯著量的乙醇。此外，由于包含聚氧乙基化蓖麻油，制劑非?？?。最后，由于攝取后耐受性差，Taxol的口服受到了極大的限制。非線性藥物代謝動(dòng)力學(xué)使臨床醫(yī)生研究高劑量的Taxol(＞300mg/m2紫杉醇)(M.M.Malingre，J.M.Terwogt，J.H.Beijnen，H.Rosing，F(xiàn).J.Koopman，O.vanTellingen，K.Duchin，W.W.Huinink，M.Swart，J.Lieverst，and J.H.Schellens.Phase I and pharmacokinetic study of oral paclitaxel.J Clin Oncol 182468-2475.(2000))。在對(duì)早期非小細(xì)胞肺癌患者中每周一次施用口服紫杉醇加環(huán)孢霉素A的Il相實(shí)驗(yàn)中，患者間差異在40到45％之間，個(gè)體內(nèi)差異為15％(C.M.Kruiitzer，J.H.Schellens，J.Mezger，M.E.Scheulen，U.Keilholz，J.H.Beijnen，H.Rosing，R.A.Mathot，S.Marcus，H.van Tinteren，and P.Baas.Phase II and pharmacologic studyof weekly oral paclitaxel plus cyclosporine in patients with advanced non-small-celllung cancer.J Clin Oncol 204508-16(2002))。這些也顯示出在口服紫杉醇治療中Taxol的重大局限性。
近來(lái)，報(bào)道了由油和表面活性劑的各向同性混合物組成的自乳化油性制劑(SEOF)可以顯著改善吸收差、疏水和/或親脂藥物的口服有效性(T.Gershanik，S.Benita.Self-dispersing lipid formulations for improving oral absorption of lipophilicdrugs.Eur J Pharm Biopharm.50179-88(2000))。SEOF由天然或者合成油、表面活性劑及一種或多種親水溶劑和助溶劑組成。SEOF的主要特征是其經(jīng)水相稀釋之后在溫和攪拌下形成微細(xì)的水包油乳液或微乳液的能力。這些制劑可以分散在胃腸內(nèi)腔，從而在被胃腸液稀釋時(shí)形成微乳液或微細(xì)乳液。在對(duì)非空腹的狗進(jìn)行的體內(nèi)吸收研究中，SEOF的親脂萘衍生物的Cmax和AUC比藥物其他任何的劑型都高至少3倍(N.H.Shah，M.T.Carvajal，C.I.Patel，M.H.Infeld，A.W.Malick.Self-emulsifying drugdelivery systems(SEDDS)with polyglycolyzed glycerides for improving in vitrodissolution and oral absorption of lipophilic drugs.Int J Pharm.10615-23(1994))。所有脂質(zhì)基制劑均顯著增強(qiáng)昂唑司特在大鼠體內(nèi)的吸收(D.J.Hauss，S.E.Fogal，J.V.Ficorilli，C.A.Price，T.Roy，A.A.Jayaraj，and J.J.Kierns.Lipid-based deliverysystems for improving the bioavailability and lymphatic transport of a poorlywater-soluble LTB4 inhibitor.J Pharm Sci.87164-9(1998))。微乳液已經(jīng)成功地用于改善包含CsA的吸收性較差藥物的增溶/溶解和/或腸吸收(P.P.Constantinides.Lipidmicroemulsions for improving drug dissolution and oral absorptionphysical andbiopharmaceutical aspects.Pharm Res.121561-72(1995)；S.Tenjarla.Microemulsionsan overview and pharmaceutical applications.Crit Rev Ther DrugCarrier Syst.16461-521(1999))。
已知一般表面活性劑留住疏液藥物。例如，在制備口服藥物的制劑時(shí)加入Cremophor EL導(dǎo)致顯著減少藥物的攝取和降低循環(huán)濃度。由于藥物制劑中存在Cremophor EL或Tween 80而產(chǎn)生的缺點(diǎn)，人們不得不深入研究以開(kāi)發(fā)替代的遞送形式。當(dāng)前開(kāi)發(fā)不含Tween 80和Cremophor EL的紫杉萜和紫杉醇制劑的幾種策略正在研究中，其基于藥學(xué)、化學(xué)或生物學(xué)策略(A.J.ten Tije，J.Verweij，W.J.Loos，and A.Sparreboom.Pharmacological effects of formulation vehiclesimplications forcancer chemotherapy.Clin Pharmacokinet 42665-85(2003)；H.A.Bardelmeijer，M.Ouwehand，M.M.Malingre，J.H.Schellens，J.H.Beijnen，and O.van Tellingen.Entrapment by Cremophor EL decreases the absorption of paclitaxel from the gut.Cancer Chemother Pharmacol 49119-125(2002))。
用于口服紫杉醇給藥的自乳化油性制劑的基本原理是改善紫杉醇的溶解和吸收，并同時(shí)減小生物利用度差異。
因此仍然需要紫杉烷(taxane)組合物和制劑，其提供更有效施用紫杉烷類藥物的方法，而不導(dǎo)致不希望的副作用并具有改善的穩(wěn)定性和較長(zhǎng)的貯存期限。
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種無(wú)水的自納米乳化油性制劑形式的藥物組合物，包含-一種或幾種在水中溶解度低或水不溶性的治療劑，-維生素E，-一種助溶劑，選自丙二醇和乙醇及其混合物，-一種表面活性劑，選自泰洛沙泊及泰洛沙泊和TPGS的混合物，和任選的-生物增強(qiáng)劑。
在本發(fā)明一個(gè)具體方面，可以降低組合物的pH以進(jìn)一步改善治療劑的穩(wěn)定性。在一些實(shí)施方案中，這可以通過(guò)加入酸性pH調(diào)節(jié)劑來(lái)實(shí)現(xiàn)，所述酸性pH調(diào)節(jié)劑選自抗壞血酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、草酸、蟻酸、苯磺酸、苯甲酸、馬來(lái)酸、谷氨酸、琥珀酸、天冬氨酸、泛影酸及乙酸。酸化劑也可以是無(wú)機(jī)酸，包括但不限于鹽酸、硫酸、磷酸和硝酸。優(yōu)選可將無(wú)水有機(jī)酸，如無(wú)水檸檬酸，用于上述組合物。
在藥物組合物另一具體實(shí)施方案中，維生素E在最終組合物中占2至6％(w/w)。
根據(jù)本發(fā)明，一種或多種治療劑選自抗真菌藥、抗病毒藥、抗生素藥物、消炎藥、抗癌藥、鎮(zhèn)痛藥、抗抑郁藥、抗精神病藥、激素類、抗酸藥、冠脈擴(kuò)張藥、腦血管擴(kuò)張藥、精神治療藥、抗腫瘤藥、興奮藥、抗組胺藥、血管擴(kuò)張藥、抗心律失常藥、抗高血壓藥、血管收縮藥、抗偏頭痛藥、抗凝血藥和抗血栓形成藥、解熱藥、安眠藥、鎮(zhèn)靜藥、抗驚厥藥、抗癲癇藥、神經(jīng)肌肉藥物、作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥物、促血糖增高藥和降血糖藥、利尿藥、抗肥胖藥、合成代謝藥、抗尿酸藥(anti-uricemic drug)及它們的組合。
在一個(gè)具體實(shí)施方案中，抗腫瘤藥是紫杉烷類藥物，優(yōu)選選自紫杉醇、紫杉萜，它們的衍生物、類似物及前體藥物。
當(dāng)紫杉烷類藥物為紫杉醇時(shí)，它在最終組合物中的相對(duì)比例是0.5至4％(w/w)，優(yōu)選1.5至3％(w/w)。
根據(jù)本發(fā)明一個(gè)具體實(shí)施方案，優(yōu)選用于口服的藥物組合物包括乳劑，該乳劑含有維生素E、D-α-生育酚聚乙二醇丁二酸酯1000(TPGS)、泰洛沙泊及至少一種治療劑。
維生素E、TPGS和泰洛沙泊在最終組合物中的相對(duì)比例可以分別是2-6、0-60和5-70(w/w)，優(yōu)選在最終組合物中分別是2-6、5-60和5-70(w/w)，更優(yōu)選分別是3-5、20-40和20-40％。
當(dāng)組合物用于靜脈內(nèi)途徑時(shí)，它不包含TPGS。
根據(jù)本發(fā)明另一個(gè)具體實(shí)施方案，丙二醇在最終組合物中的相對(duì)比例是0-50％(w/w)，優(yōu)選等于20％(w/w)，而乙醇在最終組合物的相對(duì)比例是5-50％(w/w)，優(yōu)選等于30％(w/w)。
根據(jù)本發(fā)明，所述增強(qiáng)劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的。其有利地選自細(xì)胞色素P4502C8抑制劑、細(xì)胞色素P4503A4抑制劑、多藥耐藥抑制劑、PgP抑制劑或者非特異性抑制劑。
在一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述增強(qiáng)劑選自環(huán)孢霉素A、它的類似物及衍生物。
根據(jù)本發(fā)明的組合物可以與任何藥學(xué)賦形劑聯(lián)用形成劑型，該劑型可以經(jīng)由血管內(nèi)、口腔、肌內(nèi)、皮膚和皮下途徑施用于動(dòng)物或人。特別地，根據(jù)本發(fā)明的乳劑可以由下列途徑中的任一途徑給藥腹內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、囊內(nèi)、頸內(nèi)、顱內(nèi)、導(dǎo)管內(nèi)、硬膜內(nèi)、損害部?jī)?nèi)、眼內(nèi)、小房?jī)?nèi)(intra-locular)、腰髓內(nèi)、壁層腹膜內(nèi)、手術(shù)中、頂骨內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸膜內(nèi)(intra-plural)、肺內(nèi)、脊柱內(nèi)、胸腔內(nèi)、氣管內(nèi)、鼓室內(nèi)、子宮內(nèi)、心室內(nèi)、靜脈內(nèi)或經(jīng)皮給藥或用適宜的氣霧噴射劑噴射給藥。
自乳化系統(tǒng)在水介質(zhì)中稀釋時(shí)形成乳劑。在乳劑小滴中(而不存在于膠束中)的油性核能夠溶解較多量的藥物并提供穩(wěn)定化的包封作用。油性核(小滴而不是膠束)的存在使得與傳統(tǒng)膠束形成體系例如Taxol相比，能夠在SNEOF內(nèi)負(fù)載更大量的藥物(例如紫杉醇)。此外，在相同的藥物濃度下，與膠束相比，乳劑可以給紫杉醇提供更好的穩(wěn)定性(降解和/或沉淀)。自納米乳化油性制劑可以提供小滴尺寸小于或等于10納米的納米乳劑。在SNEOF中引入藥物例如紫杉醇或環(huán)孢霉素A不會(huì)顯著改變?nèi)橐撼叽绾图{米自乳化過(guò)程。用于藥物釋放和吸收的表面是巨大的，1ml SNEOF的表面積超過(guò)600m2。
根據(jù)本發(fā)明的組合物是經(jīng)過(guò)特殊設(shè)計(jì)的，以確保組合物具有自納米乳化作用(粘度，HLB)，并提供最好的藥物溶解性。此外，應(yīng)當(dāng)根據(jù)藥物釋放能力選擇表面活性劑，以確?？诜o藥后的線性藥物代謝動(dòng)力學(xué)。
對(duì)于本發(fā)明而言，當(dāng)藥物代謝動(dòng)力學(xué)是線性時(shí)，治療劑的劑量與所需治療劑的血漿水平成正比。
因此，與油性載體一起使用兩種新的聚合物表面活性劑泰洛沙泊(氧乙烯化叔辛基苯酚甲醛聚合體)和D-α-泰洛沙泊聚乙二醇1000丁二酸酯(TPGS)。它們?cè)赟NEOF中的獨(dú)特組合能夠確保疏液藥物的線性釋放，以及甚至高劑量下的線性藥物代謝動(dòng)力學(xué)。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是用TPGS和泰洛沙泊制備無(wú)水自納米乳化油性制劑形式的藥物組合物，該自納米乳化油性制劑甚至在高劑量口服給藥后仍具有線性藥物代謝動(dòng)力學(xué)。
本發(fā)明的另一方面是提供一種治療對(duì)紫杉烷類藥物敏感的疾病的方法，其中將根據(jù)本發(fā)明的有效量組合物施用于需要該組合物的患者。
經(jīng)口腔施用Taxol的根據(jù)本發(fā)明的紫杉醇SNEOF的優(yōu)點(diǎn)是-不含Cremophor EL，-味道較好，苦味較少，-紫杉醇的含量高2.5至5倍，
-等劑量時(shí)乙醇少4至8倍和-攝入體積少1.25至2.5倍。
即使口服60或90mg/m2的低劑量紫杉醇Taxol，也會(huì)導(dǎo)致病人耐受性差(惡心、嘔吐)(C.M.Kruijtzer，H.Boot，J.H.Beijnen，H.L.Lochs，F(xiàn).X.Parnis，A.S.Planting，J.M.Pelgrims，R.Williams，R.A.Mathot，H.Rosing，M.E.Schot，H.VanTinteren，and J.H.Schellens.Weekly oral paclitaxel as first-line treatment in patientswith advanced gastric cancer.Ann Oncol 14197-204(2003))。顯著降低乙醇含量和減少苦味會(huì)使攝取后耐受性更好。此外，所選擇的賦形劑(TPGS、泰洛沙泊)與Cremophor EL相比，嚙齒動(dòng)物在口服后的DL50更低。用量減小和總毒性降低將允許給患者施用比口服Taxol制劑劑量更高的紫杉醇，而據(jù)評(píng)估，口服Taxol制劑的最大耐受劑量(MTD)是360mg/m2(M.M.Malingre，J.M.Terwogt，J.H.Beijnen，H.Rosing，F(xiàn).J.Koopman，O.van Tellingen，K.Duchin，W.W.Huinink，M.Swart，J.Lieverst，and J.H.Schellens.Phase I and pharmacokinetic study of oral paclitaxel.JClin Oncol 182468-2475.(2000))。此外，口服Taxol的劑量-AUC的非線性和藥物代謝動(dòng)力學(xué)差異性構(gòu)成了對(duì)口服臨床實(shí)踐和安全性的主要限制(M.M.Malingre，J.H.Beijnen，H.Rosing，F(xiàn).J.Koopman，O.van Tellingen，K.Duchin，W.W.Ten BokkelHuinink，M.Swart，J.Lieverst，and J.H.Schellens.A phase I and pharmacokineticstudy ofbi-daily dosing of oral paclitaxel in combination with cyclosporin A.CancerChemother Pharmacol 47347-54(2001))。
根據(jù)本發(fā)明的自納米乳化組合物可以用于治療不同疾病，如癌癥、腫瘤、卡波西肉瘤、惡性腫瘤、組織損害后的非控制型組織或細(xì)胞增生、及任何其他對(duì)紫杉烷類藥物敏感的疾病，所述紫杉烷類藥物是例如紫杉醇和紫杉萜，和/或它們的前體藥物和衍生物?？梢圆捎每诜仙即肌⒆仙驾?、其他紫杉烷類藥物和它們的前體藥物和衍生物而得到特別有效治療的腫瘤類型是肝細(xì)胞癌和肝轉(zhuǎn)移，胃腸道、胰腺、前列腺和肺癌，及卡波西肉瘤?？梢钥诜鶕?jù)本發(fā)明的上述活性藥物而得到有效治療的非癌疾病的例子是組織損害后的非控制型組織或細(xì)胞增生、多囊性腎病、炎性疾病(如關(guān)節(jié)炎)及瘧疾。
可以用任何已知的藥學(xué)口服劑型施用上述新型組合物。例如，制劑可以包裹在軟或硬膠囊中，或者以液體油性制劑的形式施用。各種劑型除了組合物的主要成分外，包括常規(guī)的藥學(xué)賦形劑、稀釋劑、甜味劑、調(diào)味劑、著色劑及常包含在口服劑型中的任何其他惰性成分(見(jiàn)例如Remington′s Pharmaceutical Sciences，17th Ed.，1985)。
包含在口服劑型中的每種靶向藥物的精確量取決于患者的年齡、體重、疾病和生理狀況。
雖然本發(fā)明的某些口服制劑在單獨(dú)施用時(shí)可以提供紫杉烷類活性成分的治療血漿水平，但本發(fā)明用于治療患有對(duì)紫杉烷類藥物敏感的疾病的哺乳動(dòng)物患者(尤其是人患者)的有利方法是將包含紫杉烷類藥物靶向劑的口服制劑和至少一劑量的口服生物利用度增強(qiáng)劑聯(lián)合施用。該生物增強(qiáng)劑可以與SNEOF聯(lián)合配制或者單獨(dú)施用。本發(fā)明用于治療哺乳動(dòng)物患者的另一有利方法是將包含紫杉烷類藥物靶向劑的口服制劑與其他抗腫瘤劑例如碳鉑等聯(lián)合或分別施用。
本發(fā)明用于將紫杉醇、其衍生物、類似物和前體藥物及其他紫杉烷類藥物口服施用于人的方法的優(yōu)選實(shí)施方案，包括讓患者在口服藥物的同時(shí)、或之前、或在同時(shí)和之前都口服施用口服吸收劑或生物利用度增強(qiáng)劑，以增加吸收到血液中的整個(gè)靶向劑的量。
結(jié)合以下附圖、表格和實(shí)施例將很容易地理解本發(fā)明的不同優(yōu)點(diǎn)。


圖1示出在有或沒(méi)有口服施用10mg/kg環(huán)孢霉素A預(yù)治療的情況下，靜脈施用10mg/kg紫杉醇的藥物代謝圖。
圖2示出在有或沒(méi)有口服施用10mg/kg環(huán)孢霉素A預(yù)治療的情況下，口服施用10mg/kg的根據(jù)本發(fā)明的紫杉醇制劑和單獨(dú)施用紫杉醇進(jìn)行比較的藥物代謝圖。
圖3示出在破壞P-gp的小鼠中，在沒(méi)有口服10mg/kg環(huán)孢霉素A預(yù)治療的情況下，口服10、30和60mg/kg的根據(jù)本發(fā)明的紫杉醇制劑的藥物代謝圖。
圖4示出在野生型小鼠中，在口服10mg/kg環(huán)孢霉素A預(yù)治療的情況下，口服10、30和60mg/kg的根據(jù)本發(fā)明的紫杉醇制劑藥物代謝圖。
實(shí)施例1用水對(duì)SNEOF進(jìn)行1∶10的稀釋后，紫杉醇乳劑的表征
1.材料和方法1.1.材料購(gòu)自Farmachem(Lugano，Switzerland)的99.34％(w/w)純度(HPLC)的紫杉醇(MW 853)。購(gòu)自Sigma(St.Louis，MO，USA)的維生素E和泰洛沙泊。由EastmanChemical(Kingsport，TN，USA)贈(zèng)送的D-α-泰洛沙泊聚乙二醇丁二酸酯1000(TPGS)。購(gòu)自SDS(Peypin，F(xiàn)rance)的乙醇。所有溶劑都是HPLC級(jí)的。
1.2.方法制備紫杉醇SNEOF首先通過(guò)連續(xù)添加和混合每種賦形劑來(lái)制備SNEOF。當(dāng)油性載體澄清和均質(zhì)時(shí)，加入紫杉醇并在輕微攪拌下快速溶解。對(duì)于組合制劑，最后加入環(huán)孢霉素A并在輕微攪拌下快速溶解在SNEOF中。用相同的方法，通過(guò)在已經(jīng)制備好的包含紫杉醇的SNEOF中加入0.01或0.02％的無(wú)水檸檬酸得到pH降低的制劑。其溶解緩慢并且需要攪拌。
可通過(guò)用蒸餾水稀釋SNEOF來(lái)形成紫杉醇乳劑。
紫杉醇SNEOF的實(shí)施例根據(jù)上述公開(kāi)的方法制備了下列組合物。

組合制劑的實(shí)施例根據(jù)上述公開(kāi)的方法制備了下列組合物。

pH降低的制劑的實(shí)施例根據(jù)上述公開(kāi)的方法制備了下列組合物。
小滴尺寸用蒸餾水對(duì)紫杉醇SNEOF進(jìn)行1∶10的稀釋后，得到乳劑。所得乳劑的小滴尺寸可以用Nanosizer(Malvern，UK)通過(guò)PCS法測(cè)定。
穩(wěn)定性試驗(yàn)制備包含1.5和3％(w/w)紫杉醇的SNEOF。還制備1.5％紫杉醇和1.5％環(huán)孢霉素A的組合制劑。用HPLC分析法監(jiān)測(cè)SNEOF中紫杉醇的化學(xué)穩(wěn)定性(M.Andreeva，P.D.ledmann，L.Binder，V.W.Armstrong，H.Meden，M.Binder，M.Oellerich.A simple and reliable reversed-phase high-performance liquidchromatographic procedure for determination of paclitaxel(taxol)in human serum.Ther Drug Monit.19327-32(1997)；A.Sharma，W.D.Conway，R.M.Straubinger.Reversed-phase high-performance liquid chromatographic determination of taxol inmouse plasma.J Chromatogr B Biomed Appl.655315-9(1994))。
2.結(jié)果2.1.物理化學(xué)性質(zhì)小滴尺寸用蒸餾水以1∶10稀釋紫杉醇SNEOF(1.5％和3％w/w)后，所得納米乳劑的小滴尺寸平均為10±4.0nm，并且多分散指數(shù)低(＜0.15)。
2.2.穩(wěn)定性試驗(yàn)初步的化學(xué)穩(wěn)定性研究表明，SNEOF中的紫杉醇在4、25和40℃是穩(wěn)定的。在4、25和40℃下，SNEOF中的紫杉醇含量經(jīng)三個(gè)月而不發(fā)生變化。
實(shí)施例2口服環(huán)孢霉素A預(yù)治療后口服紫杉醇乳劑的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究1.材料和方法1.1.材料1.1.1.動(dòng)物品種FVB野生型小鼠來(lái)源由Netherlands Kancer Institute(NKI)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室培育年齡8-14周體重18-30克性別雌性居住條件NKI動(dòng)物部1.1.2.藥物口服制劑環(huán)孢霉素A(Sandimmun)來(lái)源Novartis載體Cremophor EL∶乙醇(65∶35，v/v)濃度50mg/mL途徑口服(p.o.)劑量10mg/kg口服紫杉醇紫杉醇(Taxol)來(lái)源Bristol-Myers Squibb載體Cremophor EL∶乙醇(1∶1；v/v)濃度6mg/mL，用注射用水(WFI)進(jìn)行1∶3的稀釋后為2mg/mL途徑口服(p.o.)劑量10mg/kg
口服制劑1紫杉醇SNEOF來(lái)源Novagali SAS載體泰洛沙泊/TPGS/乙醇/維生素E濃度SEOF為15mg/mL，用WFI以1∶10稀釋后為1.5mg/mL途徑口服(p.o)劑量10mg/kg根據(jù)本發(fā)明的口服制劑1組合物
根據(jù)本發(fā)明的口服制劑2紫杉醇/環(huán)孢霉素A SNEOF來(lái)源Novagali SAS載體泰洛沙泊/TPGS/乙醇/維生素E濃度紫杉醇SEOF為15mg/mL，用WFI以1∶10稀釋后為1.5mg/mL環(huán)孢霉素ASEOF為15mg/mL，以1∶10稀釋后為1.5mg/mL途徑口服(p.o)劑量10mg/kg紫杉醇和10mg/kg環(huán)孢霉素A
口服制劑2組合物I.V.制劑紫杉醇來(lái)源由Novagali提供的紫杉醇(純化合物)載體聚山梨酯80∶乙醇(1∶1，v/v)濃度6mg/mL，用鹽水進(jìn)行1∶4的稀釋后為1.5mg/ml途徑靜脈注射(i.v.)劑量10mg/kg1.1.3.制備用于口服的藥物溶液將環(huán)孢霉素A(Sandimmun)以1∶25稀釋于注射用水中，使得最終濃度為2mg/ml。將該制劑按5μl/g體重的量施用于動(dòng)物，以使環(huán)孢霉素A的劑量為10mg/kg。
紫杉醇自納米乳化油性制劑(SNEOF)n°1和2按照1∶10的比例稀釋于WFI中得到微乳液。將該微乳液按6.67μl/g(體重)的量施用于動(dòng)物，以使紫杉醇的劑量為10mg/kg。
用注射用水稀釋Cremophor EL∶乙醇中的紫杉醇(Taxol)，使其最終濃度為1.5mg/ml(1∶4稀釋)。將該制劑按6.67pl/g(體重)的量施用，以使紫杉醇的劑量水平為10mg/kg。
1.1.4.制備用于靜脈注射的藥物溶液將聚山梨酯80∶乙醇(1∶1；v/v)中的紫杉醇儲(chǔ)備液按照1∶4的比例用鹽水稀釋，使其最終濃度為1.5mg/mL。將藥物按6.67μl/g(體重)的量施用于動(dòng)物，以使紫杉醇的劑量水平為10mg/kg。
1.2.試驗(yàn)安排
組1-3中每組都由20只野生型小鼠和群組組成。
組1接受的是在Cremophor EL和乙醇常規(guī)制劑中的紫杉醇，劑量為10mg/kg。
組2接受的是根據(jù)本發(fā)明的紫杉醇微乳液制劑，紫杉醇劑量為10mg/kg。
組1和2都是在施用紫杉醇前30分鐘，先接受10mg/kg環(huán)孢霉素A的預(yù)治療。
組3接受的是環(huán)孢霉素A和根據(jù)本發(fā)明的微乳液制劑中的紫杉醇，劑量水平為紫杉醇10mg/kg和環(huán)孢霉素A 10mg/kg。
組4和5是用于計(jì)算生物利用度的參照組，每組由24只動(dòng)物組成。它們?cè)诳诜h(huán)孢霉素A或者環(huán)孢霉素A載體之后，按10mg/kg的劑量尾部靜脈注射紫杉醇。
施用口服藥物可以利用玻璃注射器(250μlHamilton luer tip)或一次性聚丙烯注射器(1ml)通過(guò)不銹鋼強(qiáng)飼法完成。強(qiáng)飼中可以通過(guò)食管插入到胃里。環(huán)孢霉素A在口服紫杉醇之前18±2分鐘口服給藥。在口服紫杉醇后1、2、4和8小時(shí)處，用甲氧氟烷(metofane)麻醉動(dòng)物(每組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)n＝5)并用心臟穿刺法采集血液樣品。
可以用具有固定29g針頭的一次性聚丙烯注射器(300ml)把靜脈注射藥物注射到尾部靜脈中。環(huán)孢霉素A在靜脈注射紫杉醇前30±5分鐘給藥。在靜脈注射紫杉醇后5、30分鐘，1、2、4和8小時(shí)處，用甲氧氟烷麻醉動(dòng)物(每組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)n＝4)并用心臟穿刺法采集血液樣品。
1.2.1.樣品收集、處理和貯存在上述的特定時(shí)間，用甲氧氟烷麻醉動(dòng)物。固定它們的背部后，用安裝有25g針頭的1mL聚丙烯注射器通過(guò)心臟穿刺法從處于直立位的動(dòng)物的胸腔位置進(jìn)行血液收集。然后立即把血液輸送到包含EDTA鉀作為抗凝血?jiǎng)┑膶?dǎo)管中并且反轉(zhuǎn)混合。將血液樣品置于小瓶中，在4000g下離心5分鐘。上清液血漿組分輸送到貼有適當(dāng)標(biāo)簽的潔凈導(dǎo)管中并在分析前一直貯存于-20℃下。
1.2.2.動(dòng)物/樣品的數(shù)量根據(jù)前述試驗(yàn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只動(dòng)物就可以足夠精確地確定在口服劑量后的血漿濃度-時(shí)間曲線的AUC，而每個(gè)時(shí)間點(diǎn)4只動(dòng)物對(duì)于靜脈劑量組也是足夠的。獲得所有動(dòng)物的血液樣品。
1.2.3.分析方法可以用有效的HPLC-UV法分析血漿樣品中的紫杉醇水平(Sparreboom，A.，vauTellingen，O.，Nooijen，W.J.，and Beijnen，J.H.Determination of paclitaxel andmetabolites in mouse plasma，tissues，urine and faeces by semi-automatedreversed-phase high-performance liquid chromatography.J Chromatogr B BiomedAppl，664383-391，1995.)。
1.2.4.性能控制試驗(yàn)分析每個(gè)待分析批次中每一實(shí)驗(yàn)樣品中的紫杉醇，所述分析批次由一組校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)和QC樣品組成。重復(fù)分析表明，每個(gè)系列的40個(gè)實(shí)驗(yàn)樣品中有至少3個(gè)QC樣品其紫杉醇濃度超出了預(yù)期的范圍。如果滿足下列條件，批次分析的結(jié)果就是可以接受的-校準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)(r)高于0.98。
-在6個(gè)QC樣品中至少有4個(gè)樣品在各自標(biāo)稱值±20％內(nèi)；6個(gè)QC樣品中的兩個(gè)(二者濃度不一定相同)可以在各自標(biāo)稱值±20％以外。
1.2.5.數(shù)據(jù)處理色譜數(shù)據(jù)的采集和處理用Chromeleon(v.6)色譜數(shù)據(jù)站來(lái)完成。用權(quán)重最小二分法回歸分析，以濃度平方的倒數(shù)作為權(quán)重因子來(lái)確定校準(zhǔn)線。
得到血漿濃度數(shù)據(jù)。利用MEDI\WARE軟件包(3.0版)來(lái)確定血漿濃度與時(shí)間的關(guān)系曲線，并計(jì)算出下列藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)血漿濃度-時(shí)間曲線下方面積(AUC)，最高血漿水平(Cmax)，消除半衰期(t1/2)和生物利用度(F)。
2.結(jié)果上述結(jié)果示于圖1和2以及下表中。
在有或沒(méi)有口服環(huán)孢霉素A預(yù)治療的情況下口服10mg/kg紫杉醇制劑的紫杉醇生物利用度
3.結(jié)論環(huán)孢霉素A是一種已知的口服紫杉烷類生物增強(qiáng)劑。用環(huán)孢霉素A口服預(yù)治療可以顯著增加靜脈注射紫杉醇的AUC，由5961±374增加到14006±725(2.35倍)。用環(huán)孢霉素A口服預(yù)治療也可以顯著增加口服紫杉醇的AUC(數(shù)據(jù)未知)。
以劑量為10mg/kg的紫杉醇和10mg/kg的環(huán)孢霉素A口服給藥于野生型小鼠，SNEOF和Taxol制劑表現(xiàn)出相等的生物利用度，約20％。
含有紫杉醇和環(huán)孢霉素A的SNEOF也使紫杉醇的生物利用度達(dá)到20％。上述制劑闡明了使用藥物和生物增強(qiáng)劑的口服組合劑型(SNEOF)的可能性。
實(shí)施例3在對(duì)野生型小鼠口服環(huán)孢霉素A預(yù)治療后或者對(duì)破壞P-糖蛋白的小鼠不進(jìn)行口服環(huán)孢霉素A預(yù)治療的情況下，口服紫杉醇乳劑的劑量-血漿曲線AUC的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究1.材料和方法1.1.材料1.1.1.動(dòng)物品種Mdrl a/b KO小鼠和FVB野生型小鼠來(lái)源由NKI動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室培育年齡8-14周體重18-30克性別雌性居住條件NKI動(dòng)物部1.1.2.藥物口服制劑紫杉醇SNEOF來(lái)源Novagali Pharma SA載體泰洛沙泊/TPGS/乙醇/維生素E濃度15mg/mL紫杉醇途徑口服(p.o)劑量10、30和60mg/kg
紫杉醇SNEOF組合物I.V.制劑紫杉醇來(lái)源由Novagali提供的紫杉醇(純化合物)載體聚山梨酯80∶乙醇(1∶1，v/v)濃度6mg/mL，用WFI進(jìn)行1∶4的稀釋后為1.5mg/ml途徑靜脈注射(i.v.)劑量10mg/kg1.1.3.制備用于口服和靜脈注射的藥物溶液將紫杉醇自納米乳化油性制劑(SNEOF)按照1∶10在注射用水中稀釋成含有1.5mg/ml紫杉醇的微乳液。將該制劑按6.67μL/g(體重)的量對(duì)動(dòng)物口服給藥，以使紫杉醇的劑量為10mg/kg。
將紫杉醇自納米乳化油性制劑(SNEOF)按照1∶10在WFI中稀釋成含有1.5mg/ml紫杉醇的微乳液。將該制劑按20μL/g(體重)的量對(duì)動(dòng)物口服給藥，以使紫杉醇的劑量為30mg/kg。
將紫杉醇自納米乳化油性制劑(SNEOF)按照1∶10在注射用水中稀釋成含有1.5mg/ml紫杉醇的微乳液。將該制劑按40μL/g(體重)的量對(duì)動(dòng)物口服給藥，以使紫杉醇的劑量為30mg/kg。
將在聚山梨酯80∶乙醇(1∶1，v/v)中的紫杉醇儲(chǔ)備液按照1∶4用鹽水稀釋，使最終濃度為1.5mg/mL。將該制劑按6.67μL/g(體重)的量給動(dòng)物靜脈注射，以使紫杉醇的劑量水平為10mg/kg。
1.2.試驗(yàn)安排1.2.1.血漿藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究組12、13和14中的破壞P-糖蛋白的小鼠接受的是作為單一制劑的SNEOF制劑，其中紫杉醇劑量水平為10、30和60mg/kg，分別研究各組的紫杉醇劑量對(duì)血漿AUC的線性關(guān)系；而組15、16和17中的野生型小鼠接受的是在環(huán)孢霉素A預(yù)治療后施用的SNEOF制劑，其中紫杉醇劑量水平為10、30和60mg/kg，分別研究各組的紫杉醇劑量對(duì)血漿AUC的線性關(guān)系。每組由20只小鼠組成。
1.2.2.樣品收集、處理和貯存血漿藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究在上述的特定時(shí)間，用甲氧氟烷麻醉動(dòng)物。固定它們的背部后，用安裝有25g針頭的1mL聚丙烯注射器通過(guò)心臟穿刺法從處于直立位的動(dòng)物的胸腔位置進(jìn)行血液收集。然后立即把血液輸送到包含EDTA鉀作為抗凝血?jiǎng)┑膶?dǎo)管中并且反轉(zhuǎn)混合。將血液樣品置于小瓶中在4000g下離心5分鐘。上清液血漿組分輸送到貼有適當(dāng)標(biāo)簽的潔凈導(dǎo)管中并在分析前一直貯存于-20℃下。
口服后在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取5只動(dòng)物以確定血漿濃度-時(shí)間曲線的AUC，而靜脈注射組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取4只動(dòng)物。獲得所有動(dòng)物的血漿樣品用于隨后的分析。
1.3.分析方法可以用有效的HPLC-UV法分析血漿樣品中的紫杉醇水平(Sparreboom，A.，van Tellingen，O.，Nooijen，W.J.，and Beijnen，J.H.Determination of paclitaxel andmetabolites in mouse plasma，tissues，urine and faeces by semi-automatedreversed-phase high-performance liquid chromatography.J.Chromatogr B.BiomedAppl.，664383-391，1995)。
1.3.1性能控制試驗(yàn)分析每個(gè)待分析批次中每一實(shí)驗(yàn)樣品中的紫杉醇，所述批次由一組校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)和QC樣品組成。重復(fù)分析表明，每個(gè)系列的60個(gè)實(shí)驗(yàn)樣品中有至少3個(gè)QC樣品其紫杉醇濃度超出了預(yù)期的范圍。如果滿足下列條件，批次分析的結(jié)果就是可以接受的-校準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)(r)高于0.98。
-在6個(gè)QC樣品中至少有4個(gè)樣品各自的標(biāo)稱值在±20％內(nèi)；6個(gè)QC樣品中有兩個(gè)(二者濃度不一定相同)可以在各自的標(biāo)稱值的±20％以外。
1.3.2.數(shù)據(jù)處理色譜數(shù)據(jù)的采集和處理用Chromeleon(v.6)色譜數(shù)據(jù)站來(lái)完成。用權(quán)重最小二分法回歸分析法來(lái)確定校準(zhǔn)線。
得到血漿濃度數(shù)據(jù)?？梢杂肕EDI\WARE軟件包(3.0版)來(lái)確定血漿濃度與時(shí)間關(guān)系的曲線，并計(jì)算出下列藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)血漿濃度-時(shí)間曲線下方面積(AUC)，最高血漿水平(Cmax)，消除半衰期(t1/2)和生物利用度(F)。
2.結(jié)果結(jié)果示于下表以及圖3和4中。破壞PgP小鼠沒(méi)有進(jìn)行環(huán)孢霉素A預(yù)治療和野生型小鼠經(jīng)環(huán)孢霉素A預(yù)治療后口服制劑的紫杉醇AUC和生物利用度
3.結(jié)論由表可見(jiàn)，在破壞P-糖蛋白的小鼠中，SNEOF中紫杉醇的平均口服生物利用度為30.4-38.6％，口服生物利用度在所測(cè)試劑量范圍內(nèi)表現(xiàn)為線性，因?yàn)槠骄诜锢枚戎g也并沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
使用環(huán)孢霉素A的野生型小鼠在施用10mg/kg的紫杉醇后得到的AUC，與破壞P-糖蛋白小鼠接受相同劑量后得到的AUC是相似的。由于同時(shí)施用環(huán)孢霉素A也可以增加i.v.途徑紫杉醇的AUC(例如通過(guò)(代謝)消除的抑制作用)，因此野生型小鼠的口服生物利用度是較低的。此外，野生型動(dòng)物的口服生物利用度不是線性的而是隨劑量顯著降低。在這項(xiàng)研究中，環(huán)孢霉素A的劑量水平保持在10mg/kg不變，因此當(dāng)用較高劑量水平的紫杉醇時(shí)，該競(jìng)爭(zhēng)性P-gp抑制劑的濃度可能會(huì)不足。
到達(dá)血漿峰值的時(shí)間(Tmax)在較高劑量水平時(shí)增加，這表明會(huì)對(duì)小鼠的胃排空和/或腸傳輸速度有影響。
權(quán)利要求
1.一種無(wú)水的自納米乳化油性制劑形式的藥物組合物，包含-一種或多種在水中溶解度低或水不溶性的治療劑，-維生素E，-一種助溶劑，選自丙二醇和乙醇及其混合物，-一種表面活性劑，選自泰洛沙泊及泰洛沙泊和TPGS的混合物，和任選的-生物增強(qiáng)劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，還包含酸性pH調(diào)節(jié)劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中維生素E占最終組合物的2-6％(w/w)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述一種或多種治療劑選自抗真菌藥、抗病毒藥、抗生素藥物、消炎藥、抗癌藥、鎮(zhèn)痛藥、抗抑郁藥、抗精神病藥、激素類、抗酸藥、冠脈擴(kuò)張藥、腦血管擴(kuò)張藥、精神治療藥、抗腫瘤藥、興奮藥、抗組胺藥、血管擴(kuò)張藥、抗心律失常藥、抗高血壓藥、血管收縮藥、抗偏頭痛藥、抗凝血藥和抗血栓形成藥、解熱藥、安眠藥、鎮(zhèn)靜藥、抗驚厥藥、抗癲癇藥、神經(jīng)肌肉藥物、作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥物、促血糖增高藥和降血糖藥、利尿藥、抗肥胖藥、合成代謝藥、抗尿酸藥、免疫抑制藥及其組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述一種或多種治療劑選自抗癌藥、抗腫瘤藥及其組合。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中抗癌藥是紫杉烷類藥物，優(yōu)選選自紫杉醇、紫杉萜以及它們的衍生物、類似物和前體藥物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述紫杉烷類藥物是紫杉醇，其在最終組合物中的相對(duì)比例是0.5-4％(w/w)，優(yōu)選1.5-3％(w/w)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中維生素E、TPGS和泰洛沙泊在最終組合物中的相對(duì)比例分別是2-6、0-60和5-70(w/w)，優(yōu)選在最終組合物中分別占2-6、5-60和5-70(w/w)，更優(yōu)選分別占3-5，20-40和20-40％。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中丙二醇在最終組合物中的相對(duì)比例是0-50％(w/w)，優(yōu)選等于20％(w/w)，乙醇在最終組合物的相對(duì)比例是5-50％(w/w)，優(yōu)選等于30％(w/w)。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述增強(qiáng)劑選自細(xì)胞色素P4502C8抑制劑、細(xì)胞色素P450 3A4抑制劑、多藥耐藥抑制劑、Pgp抑制劑或者非特異性抑制劑。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的藥物組合物，其中所述增強(qiáng)劑是環(huán)孢霉素A及其類似物和衍生物。
12.根據(jù)權(quán)利要求2至11中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中酸性pH調(diào)節(jié)劑是無(wú)水檸檬酸。
13.一種藥物劑型，包含根據(jù)權(quán)利要求1至12中任一項(xiàng)的無(wú)水自納米乳化油性制劑組合物和合適的藥物賦形劑。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的藥物劑型，其適用于口服途徑。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的藥物制劑，其中所述組合物包裹在軟或硬的膠囊中或是液體油性制劑。
16.根據(jù)權(quán)利要求13的藥物劑型，其適用于靜脈注射途徑。
17.根據(jù)權(quán)利要求1至12中任一項(xiàng)的無(wú)水自納米乳化油性制劑的用途，用于制備有效治療紫杉烷敏感疾病的藥物。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的用途，用于施用于同時(shí)、相繼或之前接受生物利用度增強(qiáng)劑和/或其他抗腫瘤藥的患者。
19.根據(jù)權(quán)利要求1至12中任一項(xiàng)的無(wú)水自納米乳化油性制劑的用途，用于制備所施用治療劑的劑量與所需要的治療劑血漿水平成線性比例的藥物。
20.泰洛沙泊與泰洛沙泊和TPGS的混合物的用途，用于制備無(wú)水自納米乳化油性制劑形式的藥物組合物，所述自納米乳化油性制劑適用于制備所施用治療劑的劑量與所需要的治療劑血漿水平成線性比例的藥物。
21.治療對(duì)紫杉烷敏感的疾病的方法，其中將有效量的根據(jù)權(quán)利要求1的組合物施用于需要施用該藥物的患者。
全文摘要
一種無(wú)水自納米乳化油性制劑形式的藥物組合物，包含一種或多種在水中溶解度低或水不溶性的治療劑、維生素E、一種選自丙二醇和乙醇及其混合物的助溶劑、一種選自泰洛沙泊及泰洛沙泊和TPGS的混合物的表面活性劑、以及任選的生物增強(qiáng)劑。
文檔編號(hào)A61K31/337GK1893923SQ200480024960
公開(kāi)日2007年1月10日 申請(qǐng)日期2004年8月27日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月29日
發(fā)明者讓·塞巴斯蒂安·加里格, 格雷戈里·朗貝爾, 阿蘭·拉扎芬德拉特西塔, 西蒙·貝妮塔, 楊世成, 內(nèi)斯利汗·居爾索伊 申請(qǐng)人:諾瓦加利制藥公司, 耶路撒冷希伯來(lái)大學(xué)伊森姆研究發(fā)展公司