專利名稱：：治療胃腸病的方法和組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于治療各種病癥包括胃腸病、肥胖癥、充血性心力衰竭及良性前列腺肥大的方法和組合物。現(xiàn)有技術(shù)過敏性腸綜合征是一種常見的腸道慢性病，僅在美國就影響了2千萬-6千萬人(LehmanBrother，GlobalHealthcare-Irritablebowelsyndromeindustryupdate，September1999)。IBS是胃腸專家所診斷的病癥中最常見的(占被檢查患者的28％)，并且占就診于初級(jí)醫(yī)師的12％(Camilleri2001，Gastroenterology120652-668)。在美國，由于治療的直接花費(fèi)和曠工的間接花費(fèi)，IBS對(duì)經(jīng)濟(jì)的影響估計(jì)每年在250億美元(Talleyi995，Gastroenterology1091736-1741)。IBS患者有三次以上曠工并報(bào)告降低了生活質(zhì)量?；疾≌卟荒芑虿辉敢鈪⒓由鐣?huì)活動(dòng)、堅(jiān)持工作或者甚至短途旅行(Drossman1993，DigDisSci381569-1580)。由于沒有幾種用于治療IBS的藥方可供選擇，在這一人群中有巨大的未滿足的藥物需求?；加蠭BS的患者遭受腹痛和紊亂的腸狀態(tài)。IBS患者的三個(gè)亞群以主要的腸習(xí)性為基礎(chǔ)定義便秘為主的(c-IBS)、腹瀉為主的(d-IBS)或二者交替出現(xiàn)的(a-IBS)?；加衏-IBS的個(gè)體的估計(jì)占IBS患者的20-50％，經(jīng)常引用的數(shù)字是30％。和其他兩種具有相似的性別比的亞群相反，c-IBS在女性中更為常見(比率為3∶1)(Talley等1995，AmJEpidemiol14276-83)。IBS的定義和診斷標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)在“RomeCriteria”中成為書面形式(Drossman等1999，Gut45supplII1-81)，已經(jīng)在臨床應(yīng)用中被廣泛接受。然而，癥狀的復(fù)雜性尚未被解剖學(xué)的異?；虼x的改變所揭示。這導(dǎo)致了IBS作為一種功能性胃腸病的分類，其診斷以Rome準(zhǔn)則為基礎(chǔ)并且其評(píng)價(jià)局限于排除器官疾病(Ringel等2001，AnnuRevMed52319-338)。IBS被認(rèn)為是一種由三個(gè)相互作用的機(jī)制聯(lián)合導(dǎo)致的“生物社會(huì)心理性”疾病腸蠕動(dòng)改變、腸或結(jié)腸對(duì)疼痛刺激的敏感性增加(內(nèi)臟敏感性)和社會(huì)心理因素(Camilleri2001，Gastroenterology120652-668)。最近，關(guān)于炎癥在IBS病因?qū)W中的作用的證據(jù)越來越多。研究表明IBS患者的群體存在結(jié)腸炎和肥大細(xì)胞很小的但是很明顯的增加、可誘導(dǎo)的一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(iNOS)的增加及炎癥因子表達(dá)的改變(見Talley2000，MedscapeCoverageofDDWweek)。發(fā)明概述本發(fā)明的特征在于組合物和相關(guān)方法，所述的組合物和相關(guān)方法用于治療IBS和其他胃腸障礙和病癥，例如胃腸蠕動(dòng)紊亂、功能性胃腸病、胃食管返流疾病(GERD)、節(jié)段性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、腸炎、功能性胃灼熱、消化不良(包括功能性消化不良或非潰瘍性消化不良)、胃病、慢性假性腸梗塞(或結(jié)腸假性腸梗塞)及合并便秘的機(jī)能障礙和病癥，例如使用鎮(zhèn)痛劑相關(guān)的便秘、術(shù)后便秘、與神經(jīng)失調(diào)以及其他病癥和機(jī)能障礙相關(guān)的便秘。所述的組合物特征在于激活鳥苷酸環(huán)化酶C(GC-C)受體的肽。本發(fā)明也涉及用于治療肥胖、充血性心力衰竭及良性前列腺肥大(BPH)的組合物和相關(guān)方法。不受限于任何特定的理論，在IBS和其他胃腸病的情況下，肽很有用，因?yàn)槠淠茉黾游改c的蠕動(dòng)。不受限于任何特定的理論，在IBS和其他胃腸失調(diào)的情況下，肽很有用，部分因?yàn)槠淠軠p少炎癥。不受限于任何特定的理論，在1BS和其他胃腸失調(diào)的情況下，肽很有用，因?yàn)槟軠p少胃腸的疼痛或內(nèi)臟的疼痛。本發(fā)明特征在于藥物組合物，所述的組合物包含一些能激活鳥苷酸環(huán)化酶C(GC-C)受體的肽。在本發(fā)明的范圍內(nèi)包括含本發(fā)明的肽的藥物組合物，以及包括本發(fā)明的肽和第二種治療藥物的聯(lián)合使用的組合物，所述的第二種治療藥物例如治療便秘的藥物(例如，SPI-0211；SucampoPharmaceuticals，Inc.；Bethesda，MD)或者治療一些其他胃腸病的藥物。第二種治療藥物的例子包括抑酸劑如質(zhì)子泵抑制劑及H2受體阻斷劑、促蠕動(dòng)劑如5HT受體激動(dòng)劑(例如Zelnorm)、抗炎劑、抗痙攣劑、抗抑郁劑、中樞鎮(zhèn)痛劑如阿片受體激動(dòng)劑、阿片受體拮抗劑、腸炎疾病治療藥、用于治療胃腸或內(nèi)臟疼痛的節(jié)段性回腸炎和潰瘍性腸炎藥物(例如Traficet-ENTM(ChemoCentryx，Inc.；SanCarlos，CA)和cGMP磷酸化抑制劑(莫他匹酮、扎普司特及suldinacsulfone)。例如，藥物組合物可包含選自下述的鎮(zhèn)痛劑鈣通道阻滯劑(例如齊考諾肽)、5HT受體拮抗劑(例如5HT3、5HT4及5HT1受體拮抗劑)、阿片受體激動(dòng)劑(例如，洛哌丁胺、非多托秦、芬太尼、納洛酮、納屈酮、methylnalozone、納美芬、cypridime、betafunaltrexamine、納洛肼、naltrindole、norbinaltorphimine、嗎啡、diphenyloxylate、腦啡肽和曲美布汀)、NK1受體拮抗劑(例如依洛匹坦和SR-14033)、CCK受體激動(dòng)劑(如氯谷胺)、NK1受體拮抗劑、NK3受體拮抗劑(如他奈坦、奧沙奈坦(SR-142801))、去甲腎上腺素-5-羥色胺重?cái)z取抑制劑(NSRI；如米那普侖)、香草酸及cannabanoid受體激動(dòng)劑(例如arvanil)、sialorphin、包含氨基酸序列QHNPR(SEQIDNO)的sialorphin相關(guān)肽，例如VQHNPR(SEQIDNO)；VRQHNPR(SEQIDNO)；VRGQHNPR(SEQIDNO)；VRGPQHNPR(SEQIDNO)；VRGPRQHNPR(SEQIDNO)；VRGPRRQHNPR(SEQIDNO)；和RQHNPR(SEQIDNO)、為中性溶酶抑制劑的化合物或肽類、氟雷法胺H-Tyr-D-Ala-Phe(F)-Phe-NH2；WO01/019849A1)、洛哌丁胺、Tyr-Arg京都啡肽、CCK受體激動(dòng)劑(蛙皮素)、芋螺毒素肽、胸腺素肽、氯谷胺、右氯谷胺(氯谷胺的R-異構(gòu)體)(WO88/05774)以及能和本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接到本發(fā)明肽的其他鎮(zhèn)痛作用的肽和化合物。本發(fā)明包括通過給予能起部分或完全的GC-C受體激動(dòng)劑作用的肽治療各種胃腸病的方法。所述的肽包括至少6個(gè)能形成二硫鍵的半胱氨酸。在一些實(shí)施方案中，二硫鍵被其他的共價(jià)交叉連接所代替，而且在一些情況下，半胱氨酸被以提供可替換的共價(jià)交叉連接的其他殘基代替。所述肽包括至少一個(gè)胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)及/或羧基端鎮(zhèn)痛作用的肽或小分子，例如，AspPhe或幾種其他鎮(zhèn)痛作用的肽。當(dāng)存在于肽中時(shí)，胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)位于鎮(zhèn)痛作用的肽或小分子之前以使鎮(zhèn)痛作用的肽或小分子釋放。本發(fā)明的肽及方法也可用于治療與多種疾病包括胃腸病的有關(guān)的疼痛和炎癥。一些肽包括功能性的胰島素或胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)，以便切割使肽失活。一些含有功能性切割位點(diǎn)肽的發(fā)生切割并在消化道中逐漸失活，在一些情況下這是所需要的。在一些肽中，功能性的胰蛋白酶位點(diǎn)被改變，以增加肽在體內(nèi)的穩(wěn)定性。本發(fā)明包括治療其他病癥如充血性心力衰竭及良性前列腺肥大的方法，例如通過給予能起GC-C受體激動(dòng)劑作用的肽或小分子(非腸道或口服)。這些藥物可與鈉尿肽(例如，心房肽、腦鈉尿肽或C-型鈉尿肽)、利尿劑或血管緊張素抑制劑聯(lián)用。本發(fā)明涉及增加腸蠕動(dòng)的方法和組合物。腸蠕動(dòng)涉及自發(fā)協(xié)調(diào)的胃、腸、結(jié)腸和直腸不一致(dissention)以及收縮以便在消化過程中通過消化道運(yùn)送食物。在一些實(shí)施方案中，所述的肽在羧基端含有一個(gè)或二個(gè)或更多個(gè)相鄰的帶負(fù)電的氨基酸(例如，Asp或Glu)；或者一個(gè)或二個(gè)或更多個(gè)相鄰的帶正電的氨基酸(例如，Lys或Arg)；或者一個(gè)或二個(gè)或更多個(gè)相鄰的帶正電或負(fù)電的氨基酸。在這些實(shí)施方案中，所有在羧基端一側(cè)的氨基酸都帶有正電或負(fù)電。在另外的實(shí)施方案中，在羧基端帶電的氨基酸之前為L(zhǎng)eu。例如，以下的氨基酸序列可以被加到肽的羧基端Asp；AspLys；LysLysLysLysLysLys；AspLysLysLysLysLysLys；LeuLysLys；和LeuAsp。也可能簡(jiǎn)單地在羧基端加入Leu。第一方面，本發(fā)明特征在于一種肽，包含下述氨基酸序列(I)、由下列氨基酸序列(I)組成或基本上由下述氨基酸序列(I)組成Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr或缺失或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失。在一些實(shí)施方案中，Xaa8、Xaa9、Xaa12、Xaa13、Xaa14、Xaa17和Xaa19可為任意氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Xaa5為Asn、Trp、Tyr、Asp或Phe。在其他實(shí)施方案中，Xaa5也可以是Thr或Ile。在其他的實(shí)施方案中，Xaa5為Tyr、Asp或Trp。在一些實(shí)施方案中，Xaa8為Glu、Asp、Gln、Gly或Pro。在其他實(shí)施方案中，Xaa8為Glu；在一些實(shí)施方案中，Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Ala、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe。在一些實(shí)施方案中，Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe。在一些實(shí)施方案中，氨基酸能被非天然存在的氨基酸或天然的或非天然存在的氨基酸類似物所代替。例如，氨基酸能被3，4-二羥基-L-苯丙氨酸、3-碘-L-酪氨酸、三碘甲腺原氨酸、L-甲狀腺素、苯基甘氨酸(Phg)或正-酪氨酸(正Tyr)替代。Phg及正Tyr和其他氨基酸包括Phe和Tyr能被例如鹵素、-CH3、-OH、-CH2NH3、-C(O)H、-CH2CH3、-CN、-CH2CH2CH3、-SH或其他基團(tuán)取代。在一些實(shí)施方案中，Xaa12為Asn、Tyr、Asp或Ala。在其他實(shí)施方案中，Xaa12為Asn。在一些實(shí)施方案中，Xaa13為Ala、Pro或Gly，而在其他實(shí)施方案中，其為Pro。在一些實(shí)施方案中，Xaa14為Ala、Leu、Ser、Gly、Val、Glu、Gln、Ile、Leu、Lys、Arg或Asp，且在其他實(shí)施方案中，其為Ala或Gly，在另外一些實(shí)施方案中，其為Ala。在一些實(shí)施方案中，Xaa16為Thr、Ala、Asn、Iys、Arg、Trp；Xaa17為Gly、Pro或Ala；Xaa19選自Trp、Tyr、Phe、Asn和Leu或Xaa19選自Trp、Tyr和Phe或Xaa19選自Leu、Ile和Val；或Xaa19為His或Xaa19選自Trp、Tyr、Phe、Asn、Ile、Val、His和Leu；且Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失，或者Xaa20為Asn或Glu且Xaa21缺失或Xaa19Xaa20Xaa21缺失。本發(fā)明也涉及通過給予包含前面提到的肽的組合物治療胃腸疾病(例如，胃腸蠕動(dòng)紊亂、過敏性腸綜合征、慢性便秘、功能性胃腸病、胃食管返流疾病、功能性胃灼熱、消化不良、功能性消化不良、無潰瘍性消化不良、胃輕癱、慢性假性腸梗塞、假性結(jié)腸梗塞)、肥胖癥、充血性心力衰竭或良性前列腺增生的方法。當(dāng)Xaa9為Trp、Tyr或Phe或者當(dāng)Xaa16為Trp的時(shí)候，所述的肽含有潛在的功能性胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)，在此位點(diǎn)切割將使和肽結(jié)合的GC-C受體失活。當(dāng)Xaa9為L(zhǎng)ys或Arg或者當(dāng)Xaa16為L(zhǎng)ys或Arg的時(shí)候，所述肽含有潛在的功能性胰蛋白酶切割位點(diǎn)，在此位點(diǎn)切割能使和肽結(jié)合的GC-C受體失活。當(dāng)Xaa19為Trp、Tyr或Phe的時(shí)候，肽含有胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)，在此位點(diǎn)切割將釋放肽的羧基端到Xaa19的部分。當(dāng)Xaa19為L(zhǎng)eu、Ile或Val的時(shí)候，肽含有胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)，在此位點(diǎn)切割將釋放肽的氨基端到Xaa19的部分。在pH相對(duì)較高的情況下，當(dāng)Xaa19為His時(shí)可見相同的結(jié)果。當(dāng)Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg的時(shí)候，該肽含有胰蛋白酶切割位點(diǎn)，在此位點(diǎn)切割將釋放肽的羧基端到Xaa19的部分。因此，如果該肽包含羧基端至Xaa19的鎮(zhèn)痛作用的肽，該肽接觸到適當(dāng)?shù)牡鞍酌笗r(shí)候?qū)⑨尫诺较乐?。在這些鎮(zhèn)痛作用的肽中可包括的有AspPhe(如Xaa20Xaa21)、內(nèi)嗎啡肽-1、內(nèi)嗎啡肽-2、nocistatin、達(dá)拉根、醋酸亮丙瑞林及P物質(zhì)和其他在此所述的鎮(zhèn)痛作用的肽。這些肽，例如能用于替換Xaa20Xaa21。當(dāng)Xaa1或者本發(fā)明的肽的氨基端氨基酸(例如Xaa2或Xaa3)為Trp、Tyr或Phe，該肽含有胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)，在此位點(diǎn)切割將連同Xaa1、Xaa2或Xaa3釋放肽的氨基端釋放至Xaa1(或Xaa2或Xaa3)的部分。當(dāng)Xaa1或者本發(fā)明的肽的氨基端氨基酸(例如Xaa2或Xaa3)為L(zhǎng)ys或Arg的時(shí)候，該肽含有胰蛋白酶切割位點(diǎn)，在此位點(diǎn)切割能將連同Xaa1(或Xaa2或Xaa3)釋放肽的氨基端至Xaa1(或Xaa2或Xaa3)的部分。當(dāng)Xaa1或者本發(fā)明的肽的氨基端氨基酸為L(zhǎng)eu、Ile或Val的時(shí)候，該肽含有胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)，在此位點(diǎn)切割將釋放肽的氨基端至Xaa1的部分。在pH相對(duì)較高的情況下，當(dāng)Xaa1為His時(shí)可見相同的結(jié)果。因此，例如，如果該肽包含氨基端至Xaa1的鎮(zhèn)痛作用的肽，該肽接觸到適當(dāng)?shù)牡鞍酌笇⒈会尫诺较乐?，這些鎮(zhèn)痛作用的肽中可包括有內(nèi)嗎啡肽-1、內(nèi)嗎啡肽-2、nocistatin、達(dá)拉根、醋酸亮丙瑞林及P物質(zhì)和其他在此所述的鎮(zhèn)痛作用的肽。當(dāng)充分折疊的時(shí)候，二硫鍵出現(xiàn)在Cys6和Cys11；Cys7和Cys15；以及Cys10和Cys18之間。本發(fā)明肽帶有一些和ST肽相似的序列。然而，其中包括改善功能的氨基酸的改變和/或增加。這些改變能夠，例如，增加或降低活性(例如，增加或降低肽刺激腸蠕動(dòng)的能力)，改變肽正確折疊的能力、肽的穩(wěn)定性、肽與GC-C受體結(jié)合的和/或降低毒性的能力。在一些情況下，該肽比野生型ST肽作用更理想。例如，其能減少副作用，如腹瀉和脫水。在一些實(shí)施方案中，一個(gè)或更多對(duì)通常能形成二硫鍵的Cys殘基中的一個(gè)或兩個(gè)基團(tuán)能被高半胱氨酸、3-巰基脯氨酸(Kolodziej等1996IntJPeptProteinRes48274)；β-二甲基半胱氨酸(Hunt等1993IntJPeptProteinRes42249)或二氨基丙酸(Smith等1978JMedChem21117)替代，以便在通常二硫鍵的位點(diǎn)形成代替的內(nèi)部交聯(lián)。另外，一個(gè)或多個(gè)二硫鍵能夠被替代性的共價(jià)交叉連接所代替，如酰胺鍵、酯連接、烷基連接、硫酯連接、內(nèi)酰胺橋、氨基甲?；B接、脲連接、硫脲連接、磷酸酯連接、烷基連接、烯鍵連接、醚、硫醚連接或氨基連接。例如，Ledu等(ProceedingsNat′1Acad.Sci.10011263-78，2003)描述了用以制備內(nèi)酰胺和酰胺連接的方法。Schafmeister等(J.Am.Chem.Soc.1225891，2000)描述了所有的穩(wěn)定的碳交叉連接。在一些情況下，這些替代性連接的產(chǎn)生需要用其他的殘基如Lys或Glu或非天然存在的氨基酸代替Cys殘基。在包含序列(I)的肽的情況下，序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失和/或序列Xaa19Xaa20Xaa21缺失，該肽仍能包含附加羧基端或氨基端的氨基酸或兩者都含有。例如，該肽能包括一種促進(jìn)該肽重組的產(chǎn)生并能在患者給藥前斷開的氨基端序列。該肽也能包含其他的氨基端或羧基端的氨基酸。在一些情況下，附加的氨基酸保護(hù)肽、穩(wěn)定肽或改變肽的活性。在一些情況下，一些或所有這些附加的氨基酸對(duì)患者給予肽之前除去。肽在其氨基端或羧基端或兩端能包含1、2、3、4、5、10、15、20、25、30、40、50、60、70、80、90、100或更多的氨基酸。兩側(cè)氨基酸數(shù)不需要一樣。例如，在氨基端有10個(gè)附加的氨基酸，而在羧基端沒有。在一個(gè)實(shí)施方案中，該肽包括氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失；Xaa8為Glu；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn；Xaa13為Pro；Xaa14為Ala；Xaa16為Thr、Ala、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly；Xaa19為Tyr或Leu；以及Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失。在一些實(shí)施方案中，在Xaa20Xaa21和/或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失時(shí)，可能有附加的側(cè)翼(flanking)氨基酸。第二方面，本發(fā)明也以一種治療或預(yù)防的方法為特征，包括給予包含氨基酸序列(I)的肽Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr或缺失，或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失以及Xaa5為Asn、Trp、Tyr、Asp、Ile、Thr或Phe；Xaa8為Glu、Asp、Gln、Gly或Pro；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Ala、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn、Tyr、Asp或Ala；Xaa13為Pro或Gly；Xaa14為Ala、Leu、Ser、Gly、Val、Glu、Gln、Ile、Leu、Lys、Arg和Asp；Xaa16為Thr、Ala、Asn、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gli、Pro或Ala；Xaa19為Trp、Tyr、Phe或Leu；以及Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失，或Xaa20為Asn或Glu以及Xaa21缺失或Xaa19Xaa20Xaa21缺失。在一些治療或預(yù)防方法的實(shí)施方案中，該肽包括氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失；Xaa8為Glu；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn；Xaa13為Pro；Xaa14為Ala；Xaa16為Thr、Ala、Lys、Arg、Trp或Xaa16為任意氨基酸或Xaa16為Thr、Ala、Lys、Arg、Trp或Xaa16是任意的非芳香性的氨基酸；Xaa17為Gly；Xaa19為Tyr或Leu；以及Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明以一種純化的多肽為特征，包含氨基酸序列(II)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Asn12Pro13Ala14Cys15Xaa16Gly17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中XXaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr或缺失，或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失以及Xaa5為Asn；Xaa8為Glu或Asp；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Trp、Tyr或Phe；Xaa16為Thr、Ala、Trp；Xaa19為Trp、Tyr、Phe或Leu或缺失；Xaa20Xaa21為AspPhe。在多種優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明以一種純化多肽為特征，包括氨基酸序列(II)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Asn12Pro13Ala14Cys15Xaa16Gly17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile或Val，且Xaa16為Trp、Tyr或Phe；Xaa9為Trp、Tyr或Phe和Xaa16為Thr或Ala；Xaa19為Trp、Tyr、Phe而且Xaa20Xaa21為AspPhe；以及Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失和Xaa5為Asn；該肽包括少于50、40、30或25個(gè)氨基酸；在Cys6之前少于5個(gè)氨基酸。所述肽能與包括鎮(zhèn)痛作用的肽或鎮(zhèn)痛劑的其他肽中的任意一種聯(lián)合給藥或進(jìn)行連接，例如，共價(jià)連接。例如，本發(fā)明的治療肽能連接到選自以下的鎮(zhèn)痛劑Ca通道阻滯劑(例如齊考諾肽)、完全的或部分的5HT受體拮抗劑(例如，5HT3、5HT4和5HT1受體拮抗劑)、完全的或部分的5HT受體激動(dòng)劑包括5HT3、5HT4(例如，替加色羅、莫沙必利和倫扎必利)和5HT1受體激動(dòng)劑、CRF受體激動(dòng)(NBI-34041)、β-3腎上腺素受體受體激動(dòng)劑、阿片樣受體激動(dòng)劑(例如，氯苯哌酰胺、非多托嗪、芬太尼、納洛酮、納曲酮、methylnalozone、納美芬、cypridime、betafunaltrexamine、納洛肼、naltrindole、norbinaltorphimine、嗎啡、diphenyloxylate、腦腓肽、五肽、阿西馬多林和曲美布汀)、NK1受體激動(dòng)劑(例如依洛匹坦和SR-14033)，CCK受體激動(dòng)劑(例如氯谷胺)、NK1受體拮抗劑、NK3受體激動(dòng)劑(例如，他奈坦、奧沙奈坦(SR-142801))、去甲腎上腺素-5-羥色胺重?cái)z取抑制劑(NSRI；例如米那普侖)、香草酸受體和cannabanoid受體激動(dòng)劑(例如aryanil)、sialorphin、包含氨基酸序列QHNPR(SEQIDNO)的sialorphin相關(guān)肽，例如VQHNPR(SEQIDNO)；VRQHNPR(SEQIDNO)；VRGQHNPR(SEQIDNO)；VRGPQHNPR(SEQIDNO)；VRGPRQHNPR(SEQIDNO)；VRGPRRQHNPR(SEQIDNO)；和RQHNPR(SEQIDNO)、為中性溶酶抑制劑的化合物或肽類、氟雷法胺(H-Tyr-D-Ala-Phe(F)-Phe-NH2；WO01/019849Al)、洛哌丁胺、Tyr-Arg(京都啡肽)、CCK受體激動(dòng)劑(蛙皮素)、芋螺毒素肽、胸腺素的肽類似物、氯谷胺、右氯谷胺(氯谷胺的R-異構(gòu)體)(WO88/05774)以及能和本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接到本發(fā)明肽的其他鎮(zhèn)痛作用的肽和化合物。氨基酸、非氨基酸、肽和非肽間隔區(qū)能插入到作為GC-C受體激動(dòng)劑的肽和具有其他生物學(xué)功能的肽之間，例如鎮(zhèn)痛作用的肽或用于治療肥胖癥的肽。連接基團(tuán)可以是在體內(nèi)從側(cè)翼肽切斷的，或是體內(nèi)保留與側(cè)翼肽連接。例如，甘氨酸、β-丙氨酸、甘氨酰甘氨酸、甘氨酰β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、6-氨基己酸、L-苯丙氨酸、L-色氨酸、甘氨酸-L-纈氨酰-L-苯丙氨酸可作為間隔區(qū)(Chaltin等2003HelveticaChimicaActa86533-547；Caliceti等1993FARMCO48919-32)，象聚乙二醇(Butterworth等1987J.Med.Chem301295-302)和馬來酰亞胺衍生物一樣(King等2002TetrahedronLett.431987-1990)。各種其他的連接基團(tuán)如文獻(xiàn)所述(Nestler1996MolecularDiversity235-42；Finn等1984Biochemistry232554-8；Cook等1994TetrahedronLett.356777-80；Brokx等2002JournalofControlledRelease78115-123；Griffin等2003J.Am.Chem.Soc.1256517-6531；Robinson等1998Proc.Natl.Acad.Sci.USA955929-5934)。所述肽包含通常存在于脊椎動(dòng)物(例如哺乳動(dòng)物)物種或細(xì)菌物種中的肽的氨基酸序列。另外，所述肽可以是部分或完全的非天然存在的肽。本發(fā)明還包含與本發(fā)明肽相應(yīng)的模擬肽(peptidomimetics)。在多種實(shí)施方案中，患者患有胃腸??；患者患有選自如下的疾病胃腸蠕動(dòng)紊亂、過敏性腸綜合征、慢性便秘、功能性胃腸病、胃食管返流疾病、功能性胃灼熱、消化不良、功能性消化不良、無潰瘍性消化不良、胃輕癱、慢性假性腸梗塞、節(jié)段性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、過敏性腸綜合征、假性結(jié)腸梗塞、肥胖癥、充血性心力衰竭或良性前列腺增生；組合物口服給藥；該肽包括30個(gè)或更少的氨基酸，該肽包括20個(gè)或更少的氨基酸，在Cys6之前不多于5個(gè)氨基酸；該肽包括150、140、130、120、110、100、90、80、70、60、50、40或30或更少的氨基酸。在其他實(shí)施方案中，該肽包括20或更少的氨基酸。在其他實(shí)施方案中，在Cys18之后該肽包括不超過20、15、10或5個(gè)肽結(jié)構(gòu)。在一些實(shí)施方案中，Xaa19為胰凝乳蛋白酶或胰蛋白酶切割位點(diǎn)，鎮(zhèn)痛作用的肽緊跟著Xaa19出現(xiàn)。第三方面，本發(fā)明涉及治療患有便秘的患者的方法。臨床公認(rèn)的定義便秘的標(biāo)準(zhǔn)是以腸運(yùn)動(dòng)的頻率、排泄物的粘度和腸運(yùn)動(dòng)的輕松度進(jìn)行定義。便秘的一個(gè)共同定義為每周少于三次腸運(yùn)動(dòng)。其他的定義包括不規(guī)則的堅(jiān)硬的大便或者過度用力排便(Schiller2001，AlimentPharmacolTher15749-763)。便秘可以是原發(fā)性的(功能性便秘或慢通過性便秘)或繼發(fā)于包括神經(jīng)系統(tǒng)、代謝或內(nèi)分泌失調(diào)的其他因素。這些病癥包括糖尿病、甲狀腺功能減退、甲狀腺功能亢進(jìn)、低鈣血癥、多發(fā)性硬化癥、帕金森病、脊索損害、多發(fā)性神經(jīng)纖維瘤、自主神經(jīng)病、查加斯病、先天性巨結(jié)腸病和囊性纖維病。便秘也可能是由于手術(shù)的原因(手術(shù)后的腸梗阻)或由于使用如鎮(zhèn)痛藥(如鴉片)、抗高血壓藥、抗驚厥劑、抗抑郁藥、解痙藥、抗精神病藥導(dǎo)致的。所述的方法包括給予包含純化多肽的組合物，包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr或缺失或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失以及Xaa5為Asn、Trp、Tyr、Asp、Ile、Thr或Phe；Xaa8為Glu、Asp、Gln、Gly或Pro；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Ala、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn、Tyr、Asp或Ala；Xaa13為Pro或Gly；Xaa14為Ala、Leu、Ser、Gly、Val、Glu、Gln、Ile、Leu、Lys、Arg和Asp；Xaa16為Thr、Ala、Asn、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly、Pro或Ala；Xaa19為Trp、Tyr、Phe或Leu；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失，或Xaa20為Asn或Glu并且Xaa21缺失，或Xaa19Xaa20Xaa21缺失。在所述方法的一個(gè)實(shí)施方案中，該肽包括氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失；Xaa8為Glu；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn；Xaa13為Pro；Xaa14為Ala；Xaa16為Thr、Ala、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly；Xaa19為Tyr或Leu；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失。在多種優(yōu)選的實(shí)施方案中，便秘和治療藥物的使用有關(guān)；便秘和神經(jīng)失調(diào)有關(guān)；便秘是術(shù)后便秘(手術(shù)后腸梗阻)；并且便秘和胃腸病有關(guān)；便秘是原發(fā)性的(功能性便秘或慢通過性便秘)；便秘與神經(jīng)系統(tǒng)、代謝或內(nèi)分泌失調(diào)有關(guān)(例如，糖尿病、甲狀腺功能減退、甲狀腺功能亢進(jìn)、低鈣血癥、多發(fā)性硬化癥、帕金森病、脊索損害、多發(fā)性神經(jīng)纖維瘤、自主神經(jīng)病、查加斯病、先天性巨結(jié)腸病和囊性纖維病)。便秘也可能是由于手術(shù)的原因(手術(shù)后的腸梗阻)或由于使用如鎮(zhèn)痛藥(如鴉片)、抗高血壓藥、抗驚厥劑、抗抑郁藥、解痙藥、抗精神病藥導(dǎo)致的。第四方面，本發(fā)明是以一種治療患有胃腸病的患者的方法為特征的，所述的方法包括給予患者一種包含純化多肽的組合物，所述的純化多肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr或缺失或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失以及Xaa5為Asn、Trp、Tyr、Asp、Ile、Thr或Phe；Xaa8為Glu、Asp、Gln、Gly或Pro；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Ala、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn、Tyr、Asp或Ala；Xaa13為Pro或Gly；Xaa14為Ala、Leu、Ser、Gly、Val、Glu、Gln、Ile、Leu、Lys、Arg和Asp；Xaa16為Thr、Ala、Asn、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly、Pro或Ala；Xaa19為Trp、Tyr、Phe或Leu；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失或Xaa20為Asn或Glu和Xaa21缺失或Xaa19Xaa20Xaa21缺失。在所述方法的一個(gè)實(shí)施方案中，所述的肽包括氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失；Xaa8為Glu；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn；Xaa13為Pro；Xaa14為Ala；Xaa16為Thr、Ala、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly；Xaa19為Tyr或Leu；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失。在多種實(shí)施方案中，患者患有胃腸病癥；患者患有選自如下疾病的病癥胃腸蠕動(dòng)紊亂、過敏性腸綜合征、慢性便秘、功能性胃腸病、胃食管返流疾病、功能性胃灼熱、消化不良、功能性消化不良、無潰瘍性消化不良、胃輕癱、慢性假性腸梗塞、節(jié)段性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、腸應(yīng)激綜合癥、假性結(jié)腸梗塞、肥胖癥、充血性心力衰竭或良性前列腺增生。在多種實(shí)施方案中，Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile或Val以及Xaa16為Trp、Tyr或Phe；Xaa9為Trp、Tyr或Phe以及Xaa16為Thr或Ala；Xaa19為Trp、Tyr、Phe；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe；Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失和Xaa5為Asn。第五方面，本發(fā)明以增加患者的胃腸蠕動(dòng)的方法為特征，該方法包括給予患者包含一種純化多肽的組合物，所述的純化多肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr或缺失，或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失及Xaa5為Asn、Trp、Tyr、Asp、Ile、Thr或Phe；Xaa8為Glu、Asp、Gln、Gly或Pro；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Ala、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn、Tyr、Asp或Ala；Xaa13為Pro或Gly；Xaa14為Ala、Leu、Ser、Gly、Val、Glu、Gln、Ile、Leu、Lys、Arg和Asp；Xaa16為Thr、Ala、Asn、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly、Pro或Ala；Xaa18為Trp、Tyr、Phe.或Leu；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失或Xaa20為Asn或Glu和Xaa21缺失或Xaa19Xaa20Xaa21缺失。在一個(gè)實(shí)施方案中，該肽包括氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失；Xaa8為Glu；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn；Xaa13為Pro；Xaa14為Ala；Xaa16為Thr、Ala、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly；Xaa19為Tyr或Leu；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失.第六方面，本發(fā)明以增加患者的腸的鳥苷酸環(huán)化酶(GC-C)受體的活性為特征，該方法包括給予患者包含一種純化多肽的組合物，所述的純化多肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr或缺失，或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失，且Xaa5為Asn、Trp、Tyr、Asp、Ile、Thr或Phe；Xaa8為Glu、Asp、Gln、Gly或Pro；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Ala、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn、Tyr、Asp或Ala；Xaa13為Pro或Gly；Xaa14為Ala、Leu、Ser、Gly、Val、Glu、Gln、Ile、Leu、Lys、Arg和Asp；Xaa16為Thr、Ala、Asn、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly、Pro或Ala；Xaa19為Trp、Tyr、Phe或Leu；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失或Xaa20為Asn或Glu和Xaa21缺失或Xaa19Xaa20Xaa21缺失。在一個(gè)實(shí)施方案中，該肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失；Xaa8為Glu；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn；Xaa13為Pro；Xaa14為Ala；Xaa16為Thr、Ala、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly；Xaa19為Tyr或Leu；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失。第七方面，本發(fā)明以包含編碼一種多肽的分離的核酸分子為特征，所述的多肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr或缺失，或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失和Xaa5為Asn、Trp、Tyr、Asp、Ile、Thr或Phe；Xaa8為Glu、Asp、Gln、Gly或Pro；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Ala、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn、Tyr、Asp或Ala；Xaa13為Pro或Gly；Xaa14為Ala、Leu、Ser、Gly、Val、Glu、Gln、Ile、Leu、Lys、Arg和Asp；Xaa16為Thr、Ala、Asn、Lys、Arg、Trp；Xaal為Gly、Pro或Ala；Xaa19為Trp、Tyr、Phe或Leu；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺或Xaa20為Asn或Glu和Xaa21缺失或Xaa19Xaa20Xaa21缺失。在一個(gè)實(shí)施方案中，該肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失；Xaa8為Glu；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn；Xaa13為Pro；Xaa14為Ala；Xaa16為Thr、Ala、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly；Xaa19為Tyr或Leu；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失。第八方面，本發(fā)明以治療便秘的方法為特征，所述的方法包括給予腸鳥苷酸環(huán)化酶(GC-C)受體激動(dòng)劑。在多種實(shí)施方案中，激動(dòng)劑是一種肽，該肽包含形成二個(gè)二硫鍵的四個(gè)Cys，該肽包含形成三個(gè)二硫鍵的六個(gè)Cys。第九方面，本發(fā)明以一種治療胃腸病、胃腸蠕動(dòng)紊亂、過敏性腸綜合征、慢性便秘、功能性胃腸病、胃食管返流疾病、功能性胃灼熱、消化不良、功能性消化不良、無潰瘍性消化不良、胃輕癱、慢性假性腸梗塞、節(jié)段性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、腸炎、肥胖癥，充血性心力衰竭或良性前列腺增生的方法為特征，所述的方法包括口服、使用直腸栓劑或非經(jīng)腸地給予鳥苷酸環(huán)化酶(GC-C)受體激動(dòng)劑。在多種實(shí)施方案中，該激動(dòng)劑為一種肽，該肽包含四個(gè)形成二個(gè)二硫鍵的Cys，和該肽包含六個(gè)形成三個(gè)二硫鍵的Cys。第十方面，本發(fā)明以治療胃腸病癥的方法為特征，所述的胃腸病癥選自胃腸蠕動(dòng)紊亂、過敏性腸綜合征、慢性便秘、功能性胃腸病、胃食管返流疾病、功能性胃灼熱、消化不良、功能性消化不良、無潰瘍性消化不良、胃輕癱、慢性假性腸梗塞、節(jié)段性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、腸炎，所述的方法包括給予鳥苷酸環(huán)化酶受體激動(dòng)劑。在多種實(shí)施方案中，口服給予組合物，該肽包含30個(gè)或更少的氨基酸，該肽包含20個(gè)或更少的氨基酸，該肽Cys5之前包含不超過5個(gè)氨基酸。在多種實(shí)施方案中，所述的激動(dòng)劑為一種肽，該肽包含四個(gè)形成二個(gè)二硫鍵的Cys，和該肽包含六個(gè)形成三個(gè)二硫鍵的Cys。第十一方面，本發(fā)明以治療肥胖癥的方法為特征，所述的方法包括給予腸鳥苷酸環(huán)化酶受體激動(dòng)劑。在多種實(shí)施方案中，所述的激動(dòng)劑為一種肽，該肽包含四個(gè)形成二個(gè)二硫鍵的Cys，和該肽包含六個(gè)形成三個(gè)二硫鍵的Cys。第十二方面，本發(fā)明以治療肥胖癥的方法為特征，所述的方法包括給予多肽，所述的多肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr或缺失，或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失以及Xaa5為Asn、Trp、Tyr、Asp、Ile、Thr或Phe；Xaa8為Glu、Asp、Gln、Gly或Pro；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Ala、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn、Tyr、Asp或Ala；Xaa13為Pro或Gly；Xaa14為Ala、Leu、Ser、Gly、Val、Glu、Gln、Ile、Leu、Lys、Arg和Asp；Xaa16為Thr、Ala、Asn、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly、Pro或Ala；Xaa19為Trp、Tyr、Phe或Leu；以及Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失，或Xaa20為Asn或Glu和Xaa21缺失，或者Xaa19Xaa20Xaa21缺失。該肽可以單獨(dú)給藥或者和另外的治療肥胖的藥物聯(lián)用，例如，西布曲明或另外的藥物，如在此所述的藥物。在一個(gè)實(shí)施方案中，該肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失；Xaa8為Glu；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn；Xaa13為Pro；Xaa14為Ala；Xaa16為Thr、Ala、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly；Xaa19為Tyr或Leu；以及Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失。第十三方面，本發(fā)明特征在于包含在此所述的多肽的藥物組合物。第十四方面，本發(fā)明以治療充血性心力衰竭的方法為特征，所述的方法包括給予患者包含純化多肽的組合物，所述的純化多肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr或缺失，或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失，且Xaa5為Asn、Trp、Tyr、Asp、Ile、Thr或Phe；Xaa8為Glu、Asp、Gln、Gly或Pro；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Ala、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn、Tyr、Asp或Ala；Xaa13為Pro或Gly；Xaa14為Ala、Leu、Ser、Gly、Val、Glu、Gln、Ile、Leu、Lys、Arg和Asp；Xaa16為Thr、Ala、Asn、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly、Pro或Ala；Xaa19為Trp、Tyr、Phe或Leu；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失或Xaa20為Asn或Glu且Xaa21缺失或Xaa19Xaa20Xaa21缺失。該肽可以和另外的治療充血性心力衰竭的藥物聯(lián)合給藥，例如鈉尿肽，如心房肽、腦鈉尿肽或C-型鈉尿肽、利尿劑或血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，該肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失；Xaa8為Glu；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn；Xaa13為Pro；Xaa14為Ala；Xaa16為Thr、Ala、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly；Xaa19為Tyr或Leu；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失。第十五方面，本發(fā)明以一種治療良性前列腺增生的方法為特征，所述的方法包括給予患者包含純化多肽的組合物，所述的純化多肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr或缺失或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失和Xaa5為Asn、Trp、Tyr、Asp、Ile、Thr或Phe；Xaa8為Glu、Asp、Gln、Gly或Pro；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Ala、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn、Tyr、Asp或Ala；Xaa13為Pro或Gly；Xaa14為Ala、Leu、Ser、Gly、Val、Glu、Gln、Ile、Leu、Lys、Arg和Asp；Xaa16為Thr、Ala、Asn、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly、Pro或Ala；Xaa19為Trp、Tyr、Phe或Leu；Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失或Xaa20為Asn或Glu和Xaa21缺失或Xaa19Xaa20Xaa21缺失。該肽可以和另外的治療BPH的藥物聯(lián)合給藥，例如5-α還原酶抑制劑(例如非那司提)或α腎上腺素能拮抗劑(例如doxazosine)。在一個(gè)實(shí)施方案中，該肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失；Xaa8為Glu；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn；Xaa13為Pro；Xaa14為Ala；Xaa16為Thr、Ala、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly；Xaa；為Tyr或Leu；Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失。第十六方面，本發(fā)明以治療或減少疼痛的方法為特征，所述的疼痛包括內(nèi)臟痛和胃腸病癥有關(guān)的疼痛或與其他一些病癥有關(guān)的疼痛，該方法包括給予患者含有純化多肽的組合物，所述的純化多肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，例如，含有在此所述的氨基酸序列的純化多肽。第十七方面，本發(fā)明以治療炎癥的方法為特征，所述的炎癥包括胃腸道炎癥，例如與胃腸病癥或感染或一些其他病癥有關(guān)的炎癥，所述的方法包括給予患者含有純化多肽的組合物，所述的純化多肽包含氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，例如，含有在此所述的氨基酸序列的純化多肽。在一些實(shí)施方案中，該肽包括或由下列氨基酸序列組成，Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5CysCysGluXaa9CysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrXaa20Xaa21(II)(SEQIDNO_)，其中，Xaa9為任意氨基酸，其中Xaa9為除Leu之外的任意氨基酸，其中Xaa9選自Phe、Trp和Tyr；其中Xaa9選自其他任意的天然或非天然芳香族氨基酸，其中Xaa9為Tyr；其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr；其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4和Xaa5缺失；其中Xaa1Xaa2Xaa3和Xaa4缺失；其中Xaa1、Xaa2和Xaa3缺失；其中Xaa1和Xaa2缺失；其中Xaa1缺失；其中Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失，或Xaa20為Asn或Glu并且Xaa21缺失或Xaa19Xaa20Xaa21缺失。關(guān)于包含以下序列(I)的肽Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失和/或序列Xaa19Xaa20Xaa21缺失，該肽仍能包含帶有羧基端或氨基端的氨基酸或二者均有。其中含有或由下列氨基酸序列組成，或基本上由下列氨基酸序列組成Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5CysCysGluXaa9CysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrXaa20Xaa21(II)(SEQIDNO---)有用的肽為下列肽GlnSerSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)AsnThrSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)AsnLeuSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)AsnIleSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)AsnSerSerGlnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)SerSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)GlnSerSerGlnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)SerSerGlnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)。AsnSerSerAsnTyrCysCysGluAlaCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluArgCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluAsnCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluAspCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluCysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluGlnCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluGluCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluGlyCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluHisCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluIleCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluMetCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluPheCysCysAspProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQID10NO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluProCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluSerCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluThrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluTrpCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluValCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluAlaCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluArgCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluAsnCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluAspCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluCysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluGlnCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluGluCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluGlyCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluHisCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluIleCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysGysGluLysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluMetCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluPheCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluProCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluSerCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluThrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluTrpCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)CysCysGluValCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)第十八方面，本發(fā)明以一種治療充血性心力衰竭的方法為特征，所述的方法包括給予腸鳥苷酸環(huán)化酶(GC-C)受體完全或部分激動(dòng)劑。該激動(dòng)劑可以和另外的治療充血性心力衰竭的藥物聯(lián)合給藥，例如鈉尿肽，如心房肽、腦鈉尿肽或C-型鈉尿肽、利尿劑或血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑。第十九方面，本發(fā)明以治療BPH的方法為特征，所述的方法包括給予腸鳥苷酸環(huán)化酶(GC-C)受體完全或部分激動(dòng)劑。該激動(dòng)劑可以和另外的治療BPH的藥物聯(lián)合給藥，例如5-α還原酶抑制劑(例如非那司提)或α腎上腺素能拮抗劑(例如doxazosine)。第二十方面，本發(fā)明以治療肥胖的方法為特征，所述的方法包括給予鳥苷酸環(huán)化酶(GC-C)受體完全或部分激動(dòng)劑。激動(dòng)劑可以和另外的治療肥胖的藥物聯(lián)合給藥，例如，胃腸激素片段肽YY3-36(PYY3-36)(N.Engl.J.Med.349941，2003；ikpeapgedaspeelnryyaslrhylnlvtrqry)、glp-1(胰高血糖素樣肽-1)、毒蜥外泌肽-4(glp-1抑制劑)、西布曲明、苯丁胺、苯甲曲秦、鹽酸芐非他明(Didrex)、奧利斯特(Xenical)、鹽酸安非潑拉酮(Tenuate)、氟西汀(Prozac)、丁氨苯丙酮、麻黃、鉻、柬埔寨藤黃(garciniacambogia)、苯佐卡因、墨角藻(用于囊切開術(shù))、殼聚糖、nomameherba、山羊豆(Goat′sRue，F(xiàn)renchLilac)、共軛亞油酸、L-肉堿、纖維(歐車前、車前屬、guarfier)、咖啡因、脫氫表雄酮、石蠶屬植物(teucriumchamaedrys)、β-羥基-甲基丁酸酯或丙酮酸酯。用于治療肥胖癥的肽能作為一個(gè)獨(dú)立的分子或作為本發(fā)明肽融合的蛋白的一部分和本發(fā)明肽聯(lián)合治療。例如，PYY3-36能融合到本發(fā)明的肽的羧基端或氨基端。這樣的融合蛋白包括胰凝乳蛋白酶或胰蛋白酶切割位點(diǎn)，在此能切割分離為兩段肽。該肽和腸鳥苷酸環(huán)化酶(GC-C)受體激動(dòng)劑能用于治療便秘或腸運(yùn)動(dòng)降低、消化減慢或胃排空減慢。該肽能用于緩解一種或多種下述癥狀I(lǐng)BS(胃氣脹、疼痛、便秘)、GERD(酸反流到食管中)、機(jī)能性消化不良或胃輕癱(惡心、嘔吐、胃氣脹、胃排空延遲)和在此所述的其他病癥的癥狀。本發(fā)明的一個(gè)或更多的實(shí)施方案的詳細(xì)資料在所附說明書中闡述。所有的公開、專利和專利申請(qǐng)列入此處作為參考。附圖簡(jiǎn)述圖la描述了重組MM-416776肽和MD-915肽的LCMS分析結(jié)果。圖lb和c描述合成的MD-1100肽和空白對(duì)照的LCMS分析結(jié)果。圖2描述合成的MM-416776肽、MD-915肽和兩種不同的MD-1100肽的腸GC-C受體活性分析結(jié)果。圖3a描述重組MM-416776肽和Zelnorm在鼠科胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)模型中的作用。圖3b描述合成的MD-1100肽和Zelnorm在急性鼠科胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)模型中的作用。圖4a和4b描述肽MD-915、MD-1100和MM-416776在急性鼠科胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)模型中的作用。圖4c描述MD-1100肽在慢性鼠科胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)模型中的作用。圖5a描述MM-416776肽和Zelnorm在乳鼠胃腸道分泌模型中的作用。圖5b描述MD-1100和Zelnorm在小鼠胃腸道分泌模型中的作用。圖6a和6b描述MM416776、MD-1100和MD-915肽在小鼠胃腸道分泌模型中的作用。圖7顯示了試驗(yàn)結(jié)果，其中分析了MD-1100在TNBS結(jié)腸擴(kuò)張模型中的活性。圖8a和8b顯示了不同劑量的MD-915和MD-1100在PBQ扭體測(cè)定試驗(yàn)(writhingassay)中的結(jié)果。圖9顯示了使用MD-1100的Kd檢測(cè)分析的結(jié)果，采用競(jìng)爭(zhēng)性放射性配體結(jié)合分析法。圖10a和10b顯示了IV和口服給藥MD-1100的生物利用度結(jié)果，采用ELISA分析和LCMS方法。發(fā)明詳述本發(fā)明肽與腸鳥苷酸環(huán)化酶(GC-C)受體結(jié)合，后者是腸中液體和電解質(zhì)平衡的重要調(diào)節(jié)劑。當(dāng)受到刺激，位于腸上皮表面頂膜的該受體導(dǎo)致腸內(nèi)膜環(huán)磷鳥苷(cGMP)的增加。cGMP的增加被認(rèn)為引起了水和鈉吸收的減少、氯和鉀離子分泌增加，這樣導(dǎo)致腸液和電解質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的改變和腸能動(dòng)性增強(qiáng)。腸內(nèi)GC-C受體具有細(xì)胞外的配體結(jié)合部位、跨膜部位、細(xì)胞內(nèi)蛋白激酶樣部位和環(huán)化酶催化區(qū)。GC-C受體提議的功能為液體和電解質(zhì)平衡作用、調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡(Shalubhai2002CurrOpinDrugDisDevel5261-268)。除在腸中被胃腸上皮細(xì)胞表達(dá)外，GC-C在腸外的組織包括腎、肺、胰腺、腦垂體、腎上腺、發(fā)育的肝(參考Vaandrager2002，MolCellBiochem23073-83)及雄性和雌性的生殖系統(tǒng)組織中表達(dá)(參考Vaandrager2002MolCellBiochem23073-83)。這提示GC-C受體激動(dòng)劑能用于治療胃腸道以外的病癥，例如充血性心力衰竭和良性前列腺增生。由胃分泌的激素肽Ghrelin，是一種重要的人的食欲調(diào)節(jié)劑。禁食和胃排空調(diào)節(jié)Ghrelin的表達(dá)水平(Kim等，2003，Neuroreprt141317-20；Gualillo等，2003，F(xiàn)EBSLetts552105-9)。因此，GC-C受體激動(dòng)劑通過增加胃腸蠕動(dòng)也許也能用于調(diào)節(jié)肥胖。人的GC-C受體被鳥苷蛋白(Gn)(U.S.Patent5,96,097)、uroguanylin(Ugn)(U.S.5,140,102)和lymphoguanylin(Forte等，1999，Endocrinology1401800-1806)激活。有趣的，這些藥物的效價(jià)比一種稱為ST的細(xì)菌的衍生的肽低10-100倍(見Gianella1995JLabClinMed125173-181的評(píng)論)。ST肽被認(rèn)為是高級(jí)GC-C受體激動(dòng)劑，并很好地抵抗蛋白水解的降解。ST肽能刺激腸的神經(jīng)系統(tǒng)(Rolfe等，1994，JPhysiolo475531-537；Rolfe等，1999，Gut44615-619；Nzegwu等，1996，ExpPhysiol81313-315)。在多種疼痛動(dòng)物模型中，cGMP已被報(bào)道有抗感受傷害的作用(LazaroIbanez等，2001，EurJPharmacol42639-44；Soares等，2001，BritishJPharmacol134127-131；Jain等，2001，BrainRes909170-178；Amarante等，2002，EurJPharmacol45419-23)。因此，GC-C激動(dòng)劑可具有抗炎作用以及鎮(zhèn)痛作用。細(xì)菌的ST肽來源于一種通常至少含有70個(gè)氨基酸的前原蛋白。前(序列)區(qū)和原(序列)區(qū)作為分泌過程的部分被切割，得到的通常含有少于20個(gè)氨基酸的成熟蛋白具有生物活性。已知的細(xì)菌ST肽有E.coliSTIb(Moseley等(1983)Infect.Immun.391167)，其具有成熟的氨基酸序列AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO_)；E.coliSTIa(So和McCarthy(1980)Proc.Natl.Acad.Sci.USA774011)，其具有成熟的氨基酸序列AsnThrPheTyrCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysAlaGlyCysTyr(SEQIDNONO_)；E.coliSTI*(Chan和Gialnnella(1981)J.Biol.Chem.2567744)，其具有成熟的氨基酸序列AsnThrPheTyrCysCysGluLeuCysCysTyrProAlaCysAlaGlyCysAsn(SEQIDNONO_)；C.freundiiST肽(Guarino等(1989)Infect.Immun.57649)，其具有成熟的氨基酸序列AsnThrPheTyrCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysAlaGlyCysTyr(SEQIDNONO_)；結(jié)腸耶氏菌ST肽、Y-ST(Y-STa)、Y-STb和Y-STc(參考Huang等(1997)Microb.Pathog2289的評(píng)論)，其具有以下原型氨基酸序列GlnAlaCysAspProProSerProProAlaGluValSerSerAspTrpAspCysCysAspValCysCysAsnProAlaCysAlaGlyCys(SEQIDNONO)(以及Y-STa的Ser-7至Leu-7的變體(SEQIDNONO)，(Takao等(1985)Eur.J.Biochem.152199))；LysAlaCysAspThrGlnThrProSerProSerGluGluAsnAspAspTrpCysCysGluValCysCysAsnProAlaCysAlaGlyCys(SEQIDNO_)；GlnGluThrAlaSerGlyGlnValGlyAspValSerSerSerThrIleAlaThrGluValSerGluAlaGluCysGlyThrGlnSerAlaThrThrGlnGlyGluAsnAspTrpAspTrpCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysPheGlyCys(SEQIDNO_)，分別地；YkristenseniiST肽，具有成熟的氨基酸序列SerAspTrpCysCysGluValCysCysAsnProAlaCysAlaGlyCys(SEQIDNO_)；V.choleraenon-01ST肽(Takao等(1985)FEBSlett.193250)，具有成熟的氨基酸序列IleAspCysCysGluIleCysCysAsnProAlaCysPheGlyCysLeuAsn(SEQIDNO)；V.mimicusST肽(Arita(1991)等FEMSMicrobiol.Lett79105)，具有成熟的氨基酸序列IleAspCysCysGluIleCysCysAsnProAlaCysPheGlyCysLeuAsn(SEQIDNO)。下表提供了許多成熟ST肽的所有或一部分序列。E.coliST-1A(ST-P)蛋白的未成熟型(包括前(序列)區(qū)和原(序列)區(qū))含有的序列mkklmlaifisvlsfpsfsqstesldsskekitletkkcdvvknnsekksenmnntfyccelccnpacagcy(SEQIDNO_)；見GenBankAccessionNo.P01559(gi123711)。前序列從aa1-19延伸。前序列從aa20-54延伸。成熟蛋白從55-72延伸。E.coliST-1B(ST-H)蛋白的未成熟型(包括前(序列)區(qū)和原(序列))含有序列mkksilfiflsvlsfspfaqdakpvesskelcitleskkcniakksnksgpesmnssnyccelccnpactgcy(SEQIDNO_)；見GenBankAccessionNo.P07965(gi3915589)。Y.enterocoliticaST蛋白未成熟型(包括前(序列)區(qū)和原(序列))含有的序列mkkivfvlvlmlssfgafgqetvsgqfsdalstpitaevykqacdpplppaevssdwdccdvccnpacagc(SEQIDNO_)；見GenBankAccessionNo.S25659(gi282047)。本發(fā)明的肽，象細(xì)菌ST肽一樣含有六個(gè)Cys殘基。這六個(gè)Cys殘基在成熟型和激活型肽上形成三個(gè)二硫鍵。如果六個(gè)Cys殘基從所述肽的氨基端到羧基端，定義為A、B、C、D、E、F，那么二硫鍵形成如下A-D、B-E和C-F。這些鍵的形成對(duì)于GC-C受體結(jié)合很重要。本發(fā)明的一些肽，包含潛在的功能性的胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)，例如，位于CysB和CysD之間或CysE和CysF之間的Trp、Tyr或Phe。在任一胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)切割，減弱少或消除該肽與GC-C受體結(jié)合的能力。在人體內(nèi)，胰凝乳蛋白酶的非活性形式胰凝乳蛋白酶原是在胰腺中產(chǎn)生的。當(dāng)這種非活性酶到達(dá)小腸，通過切除兩個(gè)二肽轉(zhuǎn)化為活性胰凝乳蛋白酶?；钚砸饶榈鞍酌改軐rp、Tyr或Phe羧基端側(cè)的肽鍵切斷肽。消化道中活性胰蛋白酶的存在，能具有合適的功能性胰蛋白酶的切割位點(diǎn)的本發(fā)明的肽的切割。當(dāng)具有合適的胰蛋白酶切割位點(diǎn)的本發(fā)明的肽經(jīng)過消化道時(shí)，預(yù)期胰凝乳蛋白酶的切割將緩和其作用。胰蛋白酶原，與胰凝乳蛋白酶一樣，是一種在胰腺產(chǎn)生并存在于消化道中的絲氨酸蛋白酶。其活性形式，胰蛋白酶將切割含有Lys或Arg的肽。消化道中活性胰蛋白酶的存在，能導(dǎo)致一種具有合適的功能性胰蛋白酶的切割位點(diǎn)的本發(fā)明的肽的切割。當(dāng)具有合適的胰蛋白酶切割位點(diǎn)的本發(fā)明的肽經(jīng)過消化道時(shí)，預(yù)期胰凝乳蛋白酶的切割將緩和其作用。包括IBS的很多胃腸病癥伴隨腹痛或內(nèi)臟痛。本發(fā)明的一些肽含有止痛或抗感覺傷害標(biāo)記，例如羧基端序列緊接著能產(chǎn)生功能性胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)的Trp、Tyr或Phe，或能產(chǎn)生功能性胰蛋白酶切割位點(diǎn)的Lys或Arg。消化道中的胰凝乳蛋白酶可能能切割羧基端緊連Trp、Phe或Tyr殘基的肽，釋放出AspPhe二肽。這二肽在動(dòng)物模型上已經(jīng)顯示出鎮(zhèn)痛活性(Abdikkahi等2001，F(xiàn)undamClinPharmacol15117-23；Nikfar等1997，29583-6；Edmundson等1998，ClinPharmacolTher63580-93)。在這種方法中，該肽能治療疼痛和炎癥。其他的鎮(zhèn)痛作用的肽存在于該肽(功能性切割位點(diǎn)之后)的羧基端，包括內(nèi)嗎啡肽-1、內(nèi)嗎啡肽-2、nocistatin、達(dá)拉根、醋酸亮丙瑞林和P物質(zhì)。大量的有用的肽以核心序列為基礎(chǔ)CysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr。為了產(chǎn)生具有能夠使肽失活的、潛在的功能性的胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)的變異體，下劃線的Leu或Thr能被Trp、Phe或Tyr替代，或Leu和Thr兩者都能單獨(dú)地被Trp、Phe或Tyr替代。為了產(chǎn)生含有止痛的二肽的變異體，核心序列之后接著為AspPhe。核心序列的羧基端Tyr能允許AspPhe二肽在消化道通過胰凝乳蛋白酶被釋放。核心序列之前任選為AsnSerSerAsnTyr或Asn。因此，以核心序列為基礎(chǔ)的有用的變異體序列包括AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO--；MM-416776)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysTrpGlyCysTyr(SEQIDNO---)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---；MD-915)CysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO--；MM416774)CysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysTrpGlyCysTyr(SEQIDNO---)CysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO--；MD-1100)AsnCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)AsnCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysTrpGlyCysTyr(SEQIDNO---)AsnCysCysGluPheCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)AsnCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)AsnCysCysGluTrpCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)AsnCysCysGluArgCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)AsnCysCysGluLysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysTrpGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluPheCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluTrpCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluArgCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)CysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)CysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysTrpGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)CysCysGluPheCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)CysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)CysCysGluTrpCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)CysCysGluArgCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)CysCysGluLysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysTrpGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnCysCysGluPheCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnCysCysGluTrpCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnCysCysGluArgCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)AsnCysCysGluLysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)在一些情況下，本發(fā)明肽以前原蛋白產(chǎn)生的，含有氨基端引導(dǎo)序列mkksilfiflsvlsfspfaqdakpvesskekitleskkcniakksnksgpesmn。其中肽由一種細(xì)菌細(xì)胞如E.coli產(chǎn)生，切割前述的引導(dǎo)序列，細(xì)菌細(xì)胞將有效地分泌成熟肽。美國專利5,395,490描述了載體、表達(dá)體系、從細(xì)菌細(xì)胞有效產(chǎn)生ST肽的方法以及有效獲得成熟ST肽分泌的方法。美國專利5,395,490所述載體、表達(dá)體系和方法可用于生產(chǎn)本發(fā)明的ST肽和ST肽變異體。變異肽本發(fā)明包括變異肽，其可包含一、二、三、四、五、六、七、八、九或十(在一些實(shí)施方案中，少于5或少于3或2或者更少的)個(gè)氨基酸取代，與SEQIDNOs到相比。該取代可以為保守的或非保守的。天然存在的氨基酸能被任意氨基酸、非天然的氨基酸和其他基團(tuán)的D-異構(gòu)體所取代。保守的氨基酸置換導(dǎo)致了氨基酸轉(zhuǎn)換為具有相似作用的氨基酸，或具有類似電荷、極性、疏水性的氨基酸。在一些位置，即便保守氨基酸的置換也能降低肽的活性。在天然存在的氨基酸置換中通常認(rèn)為是保守的有在一些情況下，希望用與腸GC-C受體結(jié)合并激活受體但活性低于非變異體形式的變異肽治療患者。這種降低的活性可由對(duì)受體的親和力降低或一旦結(jié)合激活受體的能力下降或肽的穩(wěn)定性下降引起。在一些肽的通常形成二硫鍵的Cys殘基對(duì)中，一個(gè)或配對(duì)的二者能被高半胱氨酸、3-巰基脯氨酸(Kolodziej等1996IntJPeptProteinRes48274)、β，β-二甲基半胱氨酸(Hunt等1993IntJPeptProteinRes42249)或二氨基丙酸(Smith等1978JMedChem21117)所替代，在通常二硫鍵的位置形成可替代的內(nèi)部的交聯(lián)。肽的制備有用的肽可以用細(xì)菌，包括但不限于E.coli或其他肽或蛋白產(chǎn)物的產(chǎn)生體系生產(chǎn)(例如，枯草桿菌，使用DrosophilaSf9細(xì)胞的桿狀病毒表達(dá)體系、酵母或絲狀的真菌表達(dá)體系，哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)體系)，或可以化學(xué)合成。如果肽或變異肽是用細(xì)菌生產(chǎn)的，例如E.coli，編碼肽的核苷酸分子將優(yōu)選地也編碼一個(gè)允許成熟肽從細(xì)胞分泌的引導(dǎo)序列。因此，編碼該肽的序列能包括例如天然存在的細(xì)菌ST肽前序列和序列。分泌的成熟肽能通過培養(yǎng)基純化。本發(fā)明的編碼肽的序列優(yōu)選地被插入能在細(xì)菌細(xì)胞中轉(zhuǎn)運(yùn)和保留核苷酸分子的載體中。DNA分子可被插入到自主地復(fù)制的載體中(適當(dāng)?shù)妮d體包括例如pGEM3Z、pcDNA3及其衍生物)。載體核苷酸可以是細(xì)菌或噬菌體DNA，例如λ噬菌體或M13及其衍生物。構(gòu)建一種包含所述核酸的載體然后轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞如細(xì)菌。合適的細(xì)菌宿主包括但不限于E.coli、B.subtilis、Pseudomonas、Salmonella。遺傳構(gòu)建也包括除編碼核苷酸分子以外允許表達(dá)的元件，例如啟動(dòng)因子和調(diào)控序列。表達(dá)載體可能包含控制轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)的轉(zhuǎn)錄控制序列，例如啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、操縱子和阻抑物序列。許多轉(zhuǎn)錄控制序列是本領(lǐng)域熟知的。表達(dá)載體也包括翻譯調(diào)控序列(例如，非翻譯的5′序列，非翻譯的3′序列或內(nèi)核糖體進(jìn)入位點(diǎn))。載體能自主復(fù)制或整合到宿主DNA以便在肽產(chǎn)生過程中確保穩(wěn)定性。為了便于純化，包括本發(fā)明肽的蛋白編碼序列也能和編碼多肽親和標(biāo)記物的核苷酸融合，例如谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)、麥芽糖E結(jié)合蛋白、蛋白A、FLAG標(biāo)記物、六-組氨酸、myc標(biāo)記物或流行性感冒HA標(biāo)記物。親和標(biāo)記物或報(bào)告融合物將相關(guān)肽的讀碼框連接到編碼親和標(biāo)志基因的讀碼框以產(chǎn)生翻譯融合。融合基因的表達(dá)導(dǎo)致了單個(gè)多肽的翻譯，包括興趣肽和親和標(biāo)記物二者。在一些使用親和標(biāo)記物的情況下，編碼了蛋白酶識(shí)別位點(diǎn)的DNA序列將融合于親和標(biāo)記物的讀碼框和興趣肽之間。適合于制備非成熟型和成熟型本發(fā)明肽和變異體的遺傳構(gòu)建和方法，除細(xì)菌以外的蛋白表達(dá)體系，并且是本領(lǐng)域熟知的技術(shù)，也能在生物體系中用于制備肽。成熟的肽和其變異體能通過固相的方法使用自動(dòng)肽合成儀合成。例如，使用雙偶合程序在Cyc(4-CH2Bxl)-OCH2-4-(甲氧基)-苯乙酰胺基甲基樹脂上合成該肽。必須使用合適的保護(hù)基來產(chǎn)生正確的二硫鍵結(jié)構(gòu)。例如，可利用下列保護(hù)基叔丁氧羰基(α-氨基)；乙酰氨基甲基(Cys殘基B和E的巰基)；4-甲基芐基(Cys殘基C和F的巰基)；芐基(谷氨酸的y-羧基和蘇氨酸的羥基，如果存在)；和溴代芐基(酪氨酸的酚基，如果存在)。利用叔丁氧基羰基氨基酸的對(duì)稱酐或羥基苯并三唑酯進(jìn)行偶聯(lián)(天(門)冬酰胺或谷氨酰胺殘基)，該肽被去保護(hù)和從載體上裂解，在氟化氫、二甲基硫化物、茴香醚和p-硫甲酚比例為8/1/l/0.5(v/v/v/w)在0℃處理60分鐘。通過減壓除去氟化氫和二甲基硫化物，通過乙醚和乙酸乙酯連續(xù)萃取的方法除去茴香醚和p-硫甲酚，粗肽用0.5M的磷酸鈉緩沖液(pH8.0)和N，N-二甲基甲酰胺采用1/1的比例(v/v)萃取。Cys殘基B和E的二硫鍵是用二甲基亞砜形成的(Tam等(1991)J.Am.Chem.Soc.1136657-62)。所得到的肽經(jīng)反向色譜純化。Cys殘基C和F之間的二硫鍵首先通過用50％的乙酸水溶液溶解該肽形成。加入飽和的碘的冰醋酸溶液(1ml碘溶液/100ml溶液)。室溫下在密封的玻璃容器中孵育2天，溶液用去離子水稀釋5倍并用乙醚萃取4次以除去未反應(yīng)的碘。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去殘余的乙醚后，用粗品溶液凍干并連續(xù)經(jīng)反相色譜純化。腸GC-C受體結(jié)合測(cè)定肽和其他藥物與腸GC-C受體結(jié)合的能力可如下測(cè)定。T84人結(jié)腸癌細(xì)胞系細(xì)胞(AmericanTypeCultureCollection(Bethesda，Md.)，在24孔培養(yǎng)板上生長(zhǎng)至融合，培養(yǎng)基為Ham’sF12培養(yǎng)基與Dulbecco’smodifiedEagle’smedium(DMEM)培養(yǎng)基以1∶1混合，添加5％胎牛血清。測(cè)定中所用的細(xì)胞典型地位于54-60傳代之間。簡(jiǎn)要地，用1ml結(jié)合緩沖液(含有0.05％牛血清白蛋白和25mMHEPES的DMEM，pH7.2)沖洗24孔板上的T84單層細(xì)胞2次，然后與成熟的放射性標(biāo)記E.coliST肽和不同濃度的試驗(yàn)物質(zhì)在37℃孵育30分鐘。然后用1ml的DMEM沖洗細(xì)胞4次并用0.5ml/孔1NNaOH溶解。溶解物的放射性強(qiáng)度水平用標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定。實(shí)施例1變異型ST肽和野生型ST肽的制備1a重組變異型ST肽和野生型ST肽的制備變異型ST肽，指的是MD-915，被重組產(chǎn)生并在動(dòng)物模型上進(jìn)行試驗(yàn)。MD-915含有序列AsnSerSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)。也制備了含有野生型ST肽序列的肽(MM-416776)。MD-915和MM-416776肽使用如下生產(chǎn)的載體，作為前原蛋白被產(chǎn)生。編碼熱穩(wěn)定的腸毒素前-原序列的序列從pGK51/pGSK51(ATCC67728)擴(kuò)增出來，利用寡核苷酸MO3514(5′CACACCATATGAAGAAATCAATATTATTTATTTTTCTTTCTG3′(SEGIDNO))和寡核苷酸酶M03515(5′CACACCTCGAGTTAGGTCTCCATGCTTTCAGGACCACTTTTATTAC3′(SEQIDNO_))。擴(kuò)增產(chǎn)物片段用NdeI/XhoI消化并連接到用NdeI/XhoI消化的T7表達(dá)載體，pET26b(+)(Novagen)從而構(gòu)造質(zhì)粒MB3976。測(cè)序編碼前原蛋白的區(qū)域并找到，并發(fā)現(xiàn)編碼氨基酸序列mkksilfiflsvlsfspfaqdakpagsskekitleskkcnivkksnksgpesm(SEQIDNO_)，其與熱穩(wěn)定的腸毒素前體a2(sta2；mkksilfiflsvlsfspfaqdakpagsskekitleskkcnivkknnesspesm(SEQIDNO_)；GenBankAccessionNo.Q47185，GI3913876)的氨基酸序列在羧基端附近的三個(gè)位置(下畫線和粗體表示)不同。為了用pre-pro序列產(chǎn)生表達(dá)載體，為每個(gè)ST肽變異型或野生型ST肽編碼的互補(bǔ)寡核苷酸被退火并克隆到MB3976表達(dá)載體中。為產(chǎn)生MB3984(編碼MM-416776肽的全長(zhǎng)和野生型ST肽作為前原蛋白)，其包含融合前-原序列下游的氨基酸序列NSSNYCCELCCNPACTGCY(SEQIDNO_)，MB3976用Bsal/XhoI消化并連接到退火的寡核苷酸MO3621(5′GCATGAATAGTAGCAATTACTGCTGTGAATTGTGTTGTAATCCTGCTTGTACCGGGTGCTATTAATAAC3′(SEQIDNO_)和MO3622(5′TCGAGTTATTAATAGCACCCGGTACAAGCAGGATTACAACACAATTCACAGCAGTAATTGCTACTATTC3′(SEQIDNO_)。為產(chǎn)生MB3985(編碼MD-915作為前原蛋白)，其包含融合前-原序列下游的下列氨基酸序列NSSNYCCEYCCNPACTGCY，MB3976用BsaI/XhoI消化并連接到退火的寡核苷酸MO3529(5′GCATGAATAGTAGCAATTACTGCTGTGAATATTGTTGTAATCCTGCTTGTACCGGGTGCTATTAATAAC3′(SEQIDNO_))和MO3530(5′TCGAGTTATTAATAGCACCCGGTACAAGCAGGATTACAACAATATTCACAGCAGTAATTGCTACTATTC3′(SEQIDNO_)。MD-915肽和MM-416776肽制備如下。表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到E.coli細(xì)菌宿主BL21λDE3(Invitrogen)上。單克隆接種并在30℃在L肉湯+25mg/l卡那霉素中震搖過夜培養(yǎng)。將過夜的培養(yǎng)物加到3.2L的批培養(yǎng)基中(葡萄糖25g/l，CaseaminoAcids5g/l，酵母提取物5g/l，KH2PO413.3g/l，(NH4)2HPO44g/l，MgSO4-7H2O1.2g/l，檸檬酸1.7g/l，EDTA8.4mg/l，CoCl2-6H2O2.5mg/l，MnCl2-4H2O15mg/l，CuCl2-4H2O1.5mg/l，H3BO33mg/l，Na2MoO4-2H2O2.5mg/l，醋酸鋅-2H2O13mg/l，檸檬酸鐵100mg/l，卡那霉素25mg/l，消泡劑DF2O41ml/l)，并使用下列方法參數(shù)發(fā)酵只用堿控制(28％NH40H)，pH6.7，30C，通氣5L/分鐘。在葡萄糖開始被消耗后(以監(jiān)測(cè)溶解氧(DO)的水平)，加入1.5L營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基(葡萄糖700g/l，CaseaminoAcids10g/l，酵母提取液10g/l，MgSO4-7H2O4g/l，EDTA13mg/l，CoCl2-6H204mg/l，MnCl2-4H2O23.5mg/l，CuCl2-4H2O2.5mg/l，H3BO35mg/l，Na2MoO4-2H2O4mg/l，醋酸鋅-2H2O16mg/l，檸檬酸鐵40mg/l，消泡劑DF2O41ml/l)，給料速率控制在維持20％DO。在開始給料2小時(shí)后加入IPTG至0.2mM。整個(gè)進(jìn)行時(shí)間大約為40-45小時(shí)(直到養(yǎng)料耗盡)。在5,000g離心10分鐘收集細(xì)胞。棄去細(xì)胞沉淀，上清液通過50Kd超濾單元。50Kd濾液(0.6升)負(fù)載到110ml的Q-瓊脂糖快速流動(dòng)柱(AmershamPharmacia，用20mMTris-HCl調(diào)節(jié)平衡，pH7.5)中，流速為400ml/小時(shí)。用6體積的20mMTris-HCl(pH7.5)沖洗柱子，蛋白用50mM的乙酸洗脫下來，收集50ml流份。含有ST肽變異型或野生型ST肽的流份被混合，溶劑通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去。干燥的蛋白用10ml的8％乙酸和0.1％三氟醋酸重懸并負(fù)載到VarianPolarisC18-A柱(250×21.2mm10μm，利用相同的緩沖液平衡)上，流速為20ml/分鐘。柱子用100ml的8％甲醇和0.1％TFA沖洗，并用300ml的24-28％甲醇和0.1％TFA梯度沖洗，收集5ml流份。含有肽的流份被混合，溶劑通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去。該肽溶解在0.1％TFA并凍干。使用標(biāo)準(zhǔn)LCMS和HPLC分析MD-915肽和MM-416776肽流份。LCMS分析顯示MD-915比MM-416776更同質(zhì)。(見圖1a；指出肽MD-915顯示比MM-416776(PanelA)較少的峰(PanelB))。1b合成的變異型ST肽和野生型ST肽的制備肽通過商品化肽合成公司化學(xué)合成。獲得肽的收率依賴于化學(xué)合成的效率。因此，四種肽，按照收率的降序排列為CysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO--；MD-1100)，產(chǎn)率為10-20％；CysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO--；MM416774)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDN0--；MD-915)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO--MM-416776)，產(chǎn)率＜5％。因此引入肽中的特定的氨基酸變化能提高產(chǎn)率。圖1b顯示了合成的IM-1100全部離子色譜圖。圖1c顯示了空白對(duì)照的全部離子色譜圖。在樣品MD-1100有一個(gè)主峰出現(xiàn)，在對(duì)照樣品中沒有出現(xiàn)。定量分析表明MD-1100的純度大于＞98％。實(shí)施例2變異型ST肽和ST肽對(duì)腸GC-C受體的激活作用MD-915、MM-416776和MD-1100激活腸GC-C受體的能力采用T84人結(jié)腸癌細(xì)胞系(AmericanTypeCultureCollection(Bethesda，Md.)測(cè)定來評(píng)價(jià)。為了測(cè)定，細(xì)胞在24孔板上生長(zhǎng)至融合，培養(yǎng)基為Ham’sF12培養(yǎng)基與DMEM培養(yǎng)基的1∶1混合物，添加5％胎牛血清，在54-60傳代之間使用。簡(jiǎn)要地，將24孔板上的T84細(xì)胞單層用1ml/孔DMEM沖洗2次，然后與含有1mM異丁基甲基黃嘌呤(IBMX)的0.45mlDMEM在37℃孵育10分鐘，IBMX為一種環(huán)核苷酸磷酸二酯酶抑制劑。然后加入被檢肽(50μl)并在37℃孵育30分鐘。吹打培養(yǎng)基，加入冰冷的0.5ml的0.1NHCl中止反應(yīng)。樣品在冰上放置20分鐘，然后使用加熱槍或真空離心蒸發(fā)干燥。干燥的樣品使用CaymanChemicalCyclicGMPEIA試劑盒(CaymanChemical，AnnArbor，MI)中提供的0.5ml磷酸緩沖液重懸。按照CaymanChemicalCyclicGMPEIA試劑盒描述的方法，用EIA法測(cè)定環(huán)磷鳥苷。圖2表示的是化學(xué)合成肽變異體在GC-C受體活性分析中的活性。在此分析中，MM-416776和兩種不同的D-1100肽(MD-1100(a)和MD-1100(b)，通過兩種不同的方法合成的)有與MM-416776相當(dāng)?shù)幕钚?。肽MD-915和MM-416776都是用與合成MD-1100(b)相同的方法合成。實(shí)施例3MD-915和MM-416776增加小鼠的腸轉(zhuǎn)運(yùn)為了測(cè)定肽是否增加了胃腸運(yùn)輸率，使用鼠科腸轉(zhuǎn)運(yùn)(GIT)測(cè)定法檢測(cè)該肽和對(duì)照物(Moon等InfectionandImmunity25127，1979)。在這個(gè)試驗(yàn)中，在給予小鼠被檢化合物以后，給予小鼠可以在胃腸道中明顯地顯現(xiàn)的炭。測(cè)量炭移動(dòng)的距離并表示為結(jié)腸總長(zhǎng)度的百分比。在用肽或?qū)φ站彌_液治療前，小鼠被禁食12到16小時(shí)，自由飲水。在給予口服劑量5％活性碳(Aldrich242276-250G)7分鐘以前，口服給予1μg/kg-1mg/kg肽的緩沖液(20mMTris，pH7.5)。在給予活性碳劑量以前，對(duì)照小鼠只給予緩沖液。15分鐘以后處死小鼠，解剖從胃到盲腸那段腸。測(cè)量每只動(dòng)物的腸的總長(zhǎng)以及從胃到炭前端的移動(dòng)距離，結(jié)果表示為炭經(jīng)過腸占總長(zhǎng)度百分比。所有的結(jié)果以10只小鼠的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。使用Student'st檢驗(yàn)，比較給予肽的小鼠和只給予溶媒的小鼠的炭移動(dòng)距離，P＜0.05認(rèn)為統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異顯著。P值利用假定不等方差的雙邊T-檢驗(yàn)計(jì)算。如圖3a所示，野生型ST肽(MM-416776，(Sigma-Aldrich，StLouis，MO；0.1mg/kg)、合成MD-1100及Zelnorm(0.1mg/kg)，一種被批準(zhǔn)用于IBS的5-羥色胺受體5HT4激動(dòng)劑，在這個(gè)模型中能增加胃腸的轉(zhuǎn)運(yùn)率。圖4a顯示研究結(jié)果表明，隨著重組合成的MM-416776或MD-915劑量的增加腸的轉(zhuǎn)運(yùn)率增加。圖4b顯示的研究結(jié)果表明，化學(xué)合成的MM-416776或MD-1100肽兩者都比單獨(dú)的Tris緩沖液或相當(dāng)劑量的Zelnorn更能增加腸轉(zhuǎn)運(yùn)率。進(jìn)行同樣的實(shí)驗(yàn)以確定MD-1100長(zhǎng)期定量給藥治療法是否有效。簡(jiǎn)要地，8周CD1雌性小鼠口服給藥MD1100(0.06mg/kg或0.25mg/kg，溶于20mMTris，pH7.5)或只給予緩沖液(20mMTrispH7.5)，一天一次，給藥5天。在第5天，除了給予200μl10％炭溶液外，和上面同樣的進(jìn)行GIT試驗(yàn)。圖4c顯示的結(jié)果表明，在小鼠胃腸蠕動(dòng)性試驗(yàn)中，長(zhǎng)期給藥(每天給藥，共5天)，化學(xué)合成的MD-1100或Zelnorm兩者均有效。其結(jié)果和快速給藥(1天)相似。實(shí)施例4MD-915肽和MM-416776肽增加乳鼠的腸分泌(SuMi試驗(yàn))使用腸分泌乳鼠模型檢測(cè)MD-915肽和MM-416776肽增加腸分泌的能力。在這個(gè)模型中，將被檢測(cè)混合物給予7-9天的乳鼠。在小鼠被處死后，解剖從胃到盲腸的胃腸道(“腸子”)。稱重剩余部分(“屠體”)和腸子，計(jì)算腸子占體重的比例。如果比率超過0.09，可以推斷此混合物增加腸分泌。圖5a顯示了在這個(gè)模型中的野生型ST肽(MM-416776)的劑量反應(yīng)曲線。圖5b顯示了在這個(gè)模型中的肽MD-1100的劑量反應(yīng)曲線。這些數(shù)據(jù)表明野生型ST肽(購于TDT公司，WestChester，PA)和MD-1100肽增加腸分泌。Zelnorm的作用也進(jìn)行了研究。從圖5可以看到，在這個(gè)模型中，0.2mg/kg的Zelnorm不能增加腸分泌。圖6a顯示如上所述的重組MM-416776肽和重組MD-915肽的劑量反應(yīng)曲線。圖6a中從可以看出，兩種肽均增加這個(gè)模型中的腸分泌。相似地，圖6b顯示了化學(xué)合成的MD915、MD-1100、MM416776以及野生型ST肽(購自Sigma-Aldrich，StLouis，MO)的劑量反應(yīng)曲線。結(jié)腸痛覺過敏動(dòng)物模型對(duì)結(jié)腸直腸的擴(kuò)張的超敏性在患有IBS的患者中很常見，而且可能是造成大部分疼痛癥狀的主要原因。對(duì)擴(kuò)張-內(nèi)臟痛覺過敏的炎性的和非炎性動(dòng)物模型已經(jīng)用于研究化合物對(duì)IBS中內(nèi)臟疼痛的影響。I.三硝基苯磺酸(TNBS)誘導(dǎo)的直腸的異常性疼痛模型雄性Wistar大鼠(220-250g)經(jīng)腹腔注射(IP)預(yù)先給藥乙酰丙嗪0.5mg/kg，并肌注100mg/kg的氯胺酮進(jìn)行麻醉。將一對(duì)鎳鉻絲電極(60cm長(zhǎng)，直徑為80μm)埋入腹部橫紋肌，腹白線旁開2cm處。電極的自由端在頸后部從腹中外置，并由塑料管包裹附著于皮膚上。在手術(shù)5天后開始記錄肌電圖(EMG)。腹部的橫紋肌電活動(dòng)用腦電圖儀(MiniVIIIAlvar，Paris，F(xiàn)rance)記錄，用很短的恒定的時(shí)間(0.03秒)消除低頻信號(hào)(＜3Hz)。手術(shù)后10天，給予三硝基苯磺酸(TNBS)來誘發(fā)直腸炎。在輕度的乙醚麻醉下，在距肛門3cm處，通過硅橡膠導(dǎo)管的導(dǎo)入進(jìn)行經(jīng)直腸給藥TNBS(80mgkg-1，溶于0.3ml50％乙醇中)，如(Morteau等1994DigDisSci391239)中所述。在給藥TNBS后，將大鼠放置于塑料管中，在結(jié)腸直腸的擴(kuò)張以前嚴(yán)格限制其活動(dòng)。CRD之前，給予實(shí)驗(yàn)化合物，在肛門1cm，用乳膠避孕套制成的4厘米長(zhǎng)的氣球插入直腸造成CRD(Gue等，1997NeurogastroenterolMotil.9271)。氣球固定在從栓子切除術(shù)的探針上(Fogarty)取下的硬導(dǎo)管上。連接氣球的導(dǎo)管固定在尾巴根部。氣球連接到氣壓計(jì)上，以每次15mmHg漸進(jìn)地從0到60mmHg加壓，每次持續(xù)5分鐘。直腸滴注給藥TNBS之前(1-2天)或之后(3天)，用肌電圖測(cè)定評(píng)價(jià)直腸的敏感性。每隔5分鐘測(cè)定相應(yīng)于腹部收縮的峰電位爆發(fā)數(shù)。腹部收縮數(shù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析和劑量效應(yīng)關(guān)系的評(píng)價(jià)是通過方差分析方法(ANOVA)繼之后設(shè)驗(yàn)證(Student或Dunnett檢驗(yàn))進(jìn)行的，如果合適可進(jìn)行ED50的回歸分析。圖7顯示了在TNBS結(jié)腸直腸模型中MD-1100活性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。0.3μg/kg和3μg/kg的MD-1100的腹反應(yīng)明顯減少。這些結(jié)果表明MD-1100減少了這個(gè)動(dòng)物模型中的結(jié)腸擴(kuò)張有關(guān)的疼痛。II.應(yīng)激誘導(dǎo)的痛覺過敏模型如TNBS一樣，模型雄性wistar大鼠(200-250g)通過手術(shù)植入鎳鉻絲電極。外科植入手術(shù)10天后，進(jìn)行如Williams等所述的局部的約束應(yīng)力(PRS)2小時(shí)(Williams等1988Gastroenterology64611)。簡(jiǎn)要地，在輕微乙醚麻醉下，肩膀前、前肢和胸部軀干上面用紙帶的約束帶包上，但不妨礙身體移動(dòng)。假應(yīng)激對(duì)照組動(dòng)物被麻醉但不包裹。在PRS期結(jié)束前30分鐘給與測(cè)試混合物或溶媒。在完成PRS30分鐘到1小時(shí)后，如TNBS模型所述，用氣壓計(jì)在15、30、45和60mmHg壓力下進(jìn)行CRD擴(kuò)張。爆發(fā)次數(shù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析測(cè)定和分析如同上面的TNBS模型。苯基苯醌誘導(dǎo)的扭體模型PBQ誘導(dǎo)的扭體模型可用于評(píng)定本發(fā)明的肽和GC-C受體激動(dòng)劑的止痛活性。這個(gè)模型由Siegmund等所描述(1957Proc.Soc.Exp.Bio.Med.95729-731)。簡(jiǎn)要地，口服給藥實(shí)驗(yàn)混合物后1小時(shí)，例如肽、嗎啡或溶媒，給小鼠腹腔注射0.02％的苯基苯醌(PBQ)溶液(12.5mL/kg)kg。在給藥PBQ后第5到第10分鐘記錄伸展和扭體的次數(shù)，并且還可以計(jì)算第35到第40分鐘和第60到第65分鐘的次數(shù)以進(jìn)行動(dòng)態(tài)分析。結(jié)果表示為伸展和扭體的次數(shù)(平均數(shù)±SEM)以及由溶媒治療組的平均值計(jì)算的感受傷害閾的變化的百分比。治療組和對(duì)照組的統(tǒng)計(jì)學(xué)的顯著性差異的統(tǒng)計(jì)使用SigmaStat軟件進(jìn)行方差分析后(P＜0.05)，使用剩余方差的Dunnett′stest進(jìn)行檢測(cè)。圖8a和8b顯示不同劑量的MD-915和MD-1100在PBQ扭體實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。消炎痛，一種已知的有抑制疼痛活性NSAID(非甾體抗炎藥)，在試驗(yàn)中被用做陽性對(duì)照。與溶媒對(duì)照組比較，可見MD-915(劑量1mg/kg)和MD-1100(劑量2.5mg/kg)的扭體明顯減少。實(shí)驗(yàn)的高劑量沒有作用，這在其他的化合物(如5HT-3拮抗劑)的類似的試驗(yàn)中也可觀察到。研究結(jié)果表明MD-915和MD-1100在這個(gè)內(nèi)臟疼痛模型上都具有和消炎痛中劑量相當(dāng)?shù)逆?zhèn)痛作用。實(shí)施例5MD-1100Kd的測(cè)定為了測(cè)定MD-1100對(duì)大鼠腸粘膜上的GC-C受體的親合力，使用大鼠的腸上皮細(xì)胞進(jìn)行了競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合實(shí)驗(yàn)。來源于大鼠小腸的上皮細(xì)胞如Kessler等所述方法(J.Biol.Che7n.2455281-5288(1970))制備。簡(jiǎn)要地，處死動(dòng)物暴露它們的腹腔。用300ml冰冷的生理鹽水或PBS漂洗小腸。距離幽門10厘米處的10厘米的小腸被切除并切成1英寸的節(jié)段。在一塊薄膜和P-1000移液管頂端之間用溫和的壓力從腸中擠壓出腸粘膜。將腸上皮細(xì)胞置于2mlPBS中，用5毫升移液管上下地吹打制成細(xì)胞懸液。使用Bradford的方法測(cè)定懸液的蛋白濃度((Anal.Biochem.72248-254(1976))。以Giannella等的方法為基礎(chǔ)在[125I]標(biāo)記的MM-416776和MD-1100之間進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合試驗(yàn)(Am.JPhysiol.245G492-G498)。實(shí)驗(yàn)混合物包含0.5ml的DME，含有20mMHEPES-KOH(pH7.0)，0.9mg的上述細(xì)胞懸液，21.4fmol[125I]-MM-416776(42.8pM)和不同濃度的競(jìng)爭(zhēng)劑MD-1100(0.01到1000nM)。混合物在室溫下孵育1小時(shí)，并通過將混合物加到GF/B玻璃纖維過濾器(Whatman)中終止反應(yīng)。用5ml冰冷的PBS沖洗過濾器并測(cè)定放射性。圖9顯示在這個(gè)試驗(yàn)中MD-1100的Kd是4.5nm。％B/Bo是各樣品(B)與沒有加冷的競(jìng)爭(zhēng)劑的對(duì)照樣品(Bo)相比捕獲的放射性比值的百分比。Giannella等(AmJ.Physiol.245G492-G498)觀察到在前述的試驗(yàn)中野生型ST肽的Kd大約為13nm。實(shí)施例6MD-1100的藥代動(dòng)力學(xué)特征為研究MD1100的藥代動(dòng)力學(xué)特征，通過給8周大的CD1小鼠尾靜脈注射或口服灌胃MD1100來研究其吸收。收集各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的動(dòng)物的血清，采用競(jìng)爭(zhēng)性的酶聯(lián)免疫吸收法(OxoidSTEIAkit，Cat#TD0700)檢測(cè)MD-1100的量。實(shí)驗(yàn)使用抗ST肽的單克隆抗體(抗體由Oxoidkit提供)和合成制備的MD-1100。圖10a顯示的是用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定的靜脈或口服給藥MD1100的吸收值。MD-1100呈現(xiàn)最低限度地全身吸收并且生物利用度＜2.2％。進(jìn)行了相對(duì)生物利用度研究，其中使用LCMS而不是ELISA檢測(cè)MD-1100。首先，從治療組和對(duì)照組小鼠全血中提取血清樣品，然后不用進(jìn)一步處理，直接地注入(10mL)到串聯(lián)的固相萃取(SPE)柱(WatersOasisHLB25mm柱，2.0×15mm直接連接)。SPE柱上的樣品用5％甲醇、95％dH2O溶液(2.1mL/分鐘，1.0分鐘)沖洗，然后裝入使用開關(guān)閥的分析柱，開關(guān)操縱SPE柱于反向流程至分析柱(WatersXterraMSC85mmIS柱，2.1×20mm)。樣品從分析柱用反相梯度洗脫(流動(dòng)相A10mM氫氧化銨的dH2O溶液，流動(dòng)相B10mM氫氧化銨的80％乙腈溶液和20％甲醇；第一個(gè)3分鐘用20％B，然后用4分鐘跳到95％B，保留2分鐘，所有的流速為0.4mL/分鐘)。在9.1分鐘，梯度回到20％B的初始的條件下1分鐘。在1.45分鐘MD-1100從分析柱上洗脫，三-四極桿質(zhì)譜(MRM，764+2電荷狀態(tài))＞182(+1電荷狀態(tài))Da；錐體電壓(conevoltage)＝30V；碰撞(collision)＝20eV；基峰的母分辨率(parentresolution)＝2Da；基峰的子分辨率＝2Da)。通過與采用同樣步驟制備和注入小鼠血清的、已知量的化學(xué)合成MD-1100的標(biāo)準(zhǔn)曲線相比，設(shè)備的感應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)闈舛葐挝?。圖10b顯示由LCMS檢測(cè)的靜脈注射和口服給藥MD-1100的吸收值。在這個(gè)試驗(yàn)中，MD-1100呈現(xiàn)類似的最低限度的全身吸收而且生物利用度＜0.11％。肽和GC-C受體激動(dòng)劑的給藥為了治療胃腸病，本發(fā)明的肽和激動(dòng)劑優(yōu)選地口服給藥，例如以片劑、凝膠、糊劑、膏劑、液體劑、粉劑或以其他劑型?？诜o藥的組合物包括，粘合劑、調(diào)味劑和潤(rùn)濕劑。肽和激動(dòng)劑可以和其他治療胃腸病癥的藥物聯(lián)用，包括但不限于抑酸劑，如組胺-2受體激動(dòng)劑(H2As)和質(zhì)子泵抑制劑(PPIs)。肽和激動(dòng)劑也可以直腸栓劑給藥。對(duì)于治療胃腸道以外的病癥如充血性心力衰竭和良性前列腺肥大，肽和激動(dòng)劑優(yōu)選地非經(jīng)腸地或口服給藥。這里描述的肽可以單獨(dú)使用或和其他藥物聯(lián)用。例如，該肽可以和鎮(zhèn)痛作用的肽或化合物一起給藥。鎮(zhèn)痛作用的肽或化合物可以共價(jià)結(jié)合到所述肽上，或可作為單獨(dú)的藥物和所述肽一起或先后地給藥進(jìn)行聯(lián)合治療。聯(lián)合治療可以通過給予兩種或更多種的藥來實(shí)現(xiàn)，例如，這里描述的肽和鎮(zhèn)痛作用的肽或化合物，每一種都分別配方和給藥或?qū)煞N或多種藥制成一個(gè)制劑。其他組合也包含在聯(lián)合治療中。例如，兩種藥物可以一起制成一個(gè)制劑并和包含第三種藥物的單獨(dú)制劑聯(lián)合給藥。盡管聯(lián)合治療的兩種或更多種藥能同時(shí)給藥，但不是必須如此。例如，第一種藥物(或組合藥物)可以在第二種藥物(或組合藥物)之前幾分鐘、幾小時(shí)、幾天或幾周給藥。因此，兩種或更多種藥物能在相互幾分鐘內(nèi)或相互1、2、3、6、9、12、15、18或24小時(shí)內(nèi)或相互1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14天內(nèi)或相互2、3、4、5、6、7、8、9或10周內(nèi)給藥。一些情況下甚至可能是更長(zhǎng)的時(shí)間間隔。盡管在許多條件下，聯(lián)合治療使用的兩種或更多種藥物可同時(shí)存在于患者的身體中，但不是必須這樣。聯(lián)合治療也包括一種或更多種聯(lián)合使用的藥物兩次或更多次的給藥。例如藥物X和藥物Y聯(lián)合使用，在任何組合中，一種藥物可以一次或更多次的給藥，例如按照X-Y-X、X-X-Y、Y-X-Y、Y-Y-X、X-X-Y-Y等順序。單獨(dú)使用或聯(lián)合使用的藥物能和任何可藥用的載體或介質(zhì)結(jié)合。因此，當(dāng)對(duì)患者給藥時(shí)，這些藥物可以和不產(chǎn)生副作用、過敏或其他不良反應(yīng)的物質(zhì)結(jié)合。這些載體和介質(zhì)包括溶劑、分散劑、涂覆劑、促吸收劑和控釋劑等。藥物無論是游離形式或是鹽都能和聚合物結(jié)合來制備緩釋劑型，例如聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)、聚-(I)-乳酸-羥基乙酸-酒石酸(P(I)LGT)(WO01/12233)、聚乙醇酸(U.S.3,773，919)、聚乳酸(U.S.4,767，628)；聚(ε-己內(nèi)酯)。這樣的制劑可用于埋植劑，取決于聚合物、聚合物粒子的大小和植入物的大小能釋放肽或其他藥物超過幾天、幾周或幾個(gè)月(例見U.S.6,620,422)。其他緩釋制劑如EP0467389A2、WO93/241150、U.S.5,612,052；WO97/40085、WO94/155587、U-S.5,672,659、U.S.5,893,985、U.S.5,134,122、U.S.5,192,741、U.S.5,192,741和U.S.5,445,832中所述。在這種緩釋制劑中，肽的微粒和聚合物的微粒結(jié)合。一個(gè)或更多的緩釋植入劑可放置在大腸、小腸或兩者都放。藥物可通過例如靜脈注射、肌內(nèi)注射、皮下注射或其他途徑給藥。藥物可通過口服例如以片劑、凝膠、糊劑、膏劑、液體劑、粉劑或以其他劑型給藥?？诜o藥的組合物包括，粘合劑、調(diào)味劑和潤(rùn)濕劑。藥物可含在牙膏或漱口劑中。因此，口腔劑可包含磨粉和發(fā)泡劑。藥物也可以經(jīng)皮給藥或栓劑給藥。藥物可以是游離酸、堿或其可藥用的鹽。在給藥之前或更早，固體要被溶解或分散。在一些情況下，制劑含有抑制微生物的生長(zhǎng)的防腐劑?？伤幱玫淖⑸鋭┌o菌水、有機(jī)溶液或分散劑，包括例如水、乙醇、有機(jī)溶劑、油或其他溶劑和分散劑(例如，甘油、丙二醇、聚乙二醇和植物油)。藥物可通過濾過除菌或其他合適的方法滅菌。本發(fā)明的合適的藥物組合物通常包含帶有可藥用的稀釋劑和賦形劑如無菌水的一定量的活性化合物，例如根據(jù)預(yù)定的用途以調(diào)節(jié)終濃度范圍。制備技術(shù)通常是在這個(gè)領(lǐng)域熟知的，例示Remington′sPharmaceuticalSciences(18thEdition，MackPublishingCompany，1995)。所述藥物和聯(lián)合治療藥物可以包裝成一個(gè)試劑盒，其中包括兩種或更多種藥物的單劑量或多劑量，分別包裝或制劑，或者兩種或更多種藥物的單劑量或多劑量包裝成制劑或者聯(lián)用。因此，一種或更多種藥物存在于第一個(gè)容器中，并且試劑盒可在第二個(gè)容器中任選地含有一或多種藥物。容器或多個(gè)容器放置在包裝中，包裝中任選地含有藥物服用方法和劑量說明書。試劑盒可含有附加部件如注射器，或其他給藥工具和稀釋劑，及其他制劑工具。鎮(zhèn)痛劑這里描述的肽可用于與鎮(zhèn)痛劑的聯(lián)合治療，例如鎮(zhèn)痛化合物或鎮(zhèn)痛作用的肽。鎮(zhèn)痛劑可任選地共價(jià)結(jié)合到所述肽上。其中有用的鎮(zhèn)痛作用的肽有Ca通道阻滯劑、5HT受體拮抗劑(例如5HT3、5HT4和5HT1受體拮抗劑)、阿片樣受體激動(dòng)劑(洛哌丁胺、非多托秦和芬太尼)、NE1受體拮抗劑、CCK受體激動(dòng)劑(例如氯谷胺)、NK1受體拮抗劑、NK3受體拮抗劑、去甲腎上腺素-5-羥色胺重?cái)z取抑制劑(NSRI)、香草酸和cannabanoid受體激動(dòng)劑和sialorphin。各種類型鎮(zhèn)痛劑如文獻(xiàn)所述。Sialorophin相關(guān)肽是有用的鎮(zhèn)痛作用的肽之一，包括那些含有氨基酸序列QHNPR(SEQIDNO)的肽，包括VQHNPR(SEQIDNO)；VRQHNPR(SEQIDNO)；VRGQHNPR(SEQIDNO)；VRGPQHNPR(SEQIDNO)；VRGPRQHNPR(SEQIDNO)；VRGPRRQHNPR(SEQIDNO)；和RQHNPR(SEQIDNO)。Sialorphin相關(guān)肽和中性溶酶結(jié)合并抑制由中性溶酶介導(dǎo)的P物質(zhì)和甲硫啡肽的降解。因此，為中性溶酶抑制劑的化合物或肽是有用的鎮(zhèn)痛劑，可以和本發(fā)明肽聯(lián)合治療或連接到本發(fā)明肽上，例如通過共價(jià)鍵。Sialophin和相關(guān)肽如US6,589,750；US20030078200A1；和WO02/051435A2所述。阿片類受體拮抗劑和激動(dòng)劑能和本發(fā)明肽聯(lián)合治療給藥或結(jié)合到本發(fā)明肽上，例如通過共價(jià)鍵。例如阿片類受體拮抗劑，如納洛酮、納曲酮、甲基納洛酮、納美芬、cypridime、β-funaltrexamine、納洛肼、naltrindole及nor-binaltorphimine被認(rèn)為可用于治療IBS。制成能夠延遲和持續(xù)釋放劑型的阿片類受體拮抗劑是有用的，這樣在小腸和/或升結(jié)腸的中部和末端開始釋放拮抗劑。這些拮抗劑如WO01/32180A2所述。腦啡肽五肽(HOE825；Tyr-D-Lys-Gly-Phe-L-同型絲氨酸)是一種mu和delta阿片受體激動(dòng)劑，被認(rèn)為有益于增加腸蠕動(dòng)性(Eur.J.Pharn.219445，1992)，而且這種肽可和本發(fā)明肽聯(lián)合使用。曲關(guān)布汀也有同樣的作用，曲美布汀被認(rèn)為可以和mu/delta/kappa阿片受體結(jié)合并促進(jìn)促胃動(dòng)素的釋放和調(diào)節(jié)胃泌激素、血管緊張素肽、胃泌激素和胰高血糖素的釋放。Kappa阿片類受體激動(dòng)劑例如非多托嗪、酮基環(huán)唑新和WO03/097051A2中所述的化合物可以和本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接至本發(fā)明的肽上。另外，可以使用mu阿片類受體激動(dòng)劑例如嗎啡、diphenyloxylate、氟雷法胺(H-Tyr-D-Ala-Phe(F)-Phe-NH2；WO01/019849Al)和洛哌丁胺。Tyr-Arg(京都啡肽)是一種二肽，通過刺激甲硫啡肽的釋放誘導(dǎo)止痛效應(yīng)而起作用(J.Biol.Chem2628165，1987)。京都啡肽可與本發(fā)明肽一起聯(lián)合使用或連接至本發(fā)明的肽上。CCK受體激動(dòng)劑，例如來源于兩棲類和其他物種的蛙皮素，是可與本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接至本發(fā)明的肽上的有用的鎮(zhèn)痛劑。芋螺毒素肽代表一類作用于電壓門控式鈣通道、NMDA受體或煙堿受體的鎮(zhèn)痛作用的肽。這些肽可與本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接至本發(fā)明的肽上。胸腺素的肽類似物(FR申請(qǐng)2830451)具有鎮(zhèn)痛活性，可與本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接至本發(fā)明的肽上。CCK(CCKa或CCKb)受體拮抗劑，包括氯谷胺和右氯谷胺(氯谷胺的R-異構(gòu)體)(WO88/05774)具有鎮(zhèn)痛活性，可與本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接至本發(fā)明的肽上。其他有用的鎮(zhèn)痛劑包括5-HT4激動(dòng)劑如替加色羅/Zelnorm和利沙必利。這些激動(dòng)劑如EP1321142A1，WO03/053432A1，EP505322A1，EP505322BI，US5,510,353，EP507672A1，EP507672B1和US5,273,983中所述。鈣通道阻滯劑如齊考諾肽和相關(guān)化合物，例如在EP625162B1，US5,364,842，US5,587,454，US5,824,645，US5,859,186，US5,994,305，US6,087,091，US6,136,786，WO93/13128A1，EP1336409A1，EP835126A1，EP835126B1，US5,795,864，US5,891,849，US6,054,429，WO97/01351A1中，可與本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接至本發(fā)明的肽上。NK-1、NK-2和NK-3受體的多種拮抗劑(見Giardina等2003Drugs6758)可與本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接至本發(fā)明的肽上。NK1拮抗劑如阿瑞吡坦(Merck&CoInc)、沃氟匹坦、依洛匹坦(Pfizer，Inc.)、R-673(HofEnann-LaRocheLtd)、SR-14033和例如在EP873753A1、US20010006972A1、US20030109417A1和WO01/52844A1中所述相關(guān)化合物，可與本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接至本發(fā)明的肽上。NK-2受體拮抗劑如奈帕坦特(MenariniRicercheSpA)、沙瑞度坦(Sanofi-Synthelabo)、SR-144190(Sanofi-Synthelabo)和UK-290795(PfizerInc)可與本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接至本發(fā)明的肽上。NK3受體拮抗劑如奧沙奈坦(Sanofi-Synthelabo)、他奈坦和例如在WO02/094187A2，EP876347A1，WO97/21680A1，US6,277,862，WO98/11090，WO95/28418，WO97/19927和Boden等(JMedChem.391664-75，1996)中所述的相關(guān)化合物，可與本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接至本發(fā)明的肽上。去甲腎上腺素-5-羥色胺重?cái)z取抑制劑如米那普侖和在WO03/077897A1中所述化合物可與本發(fā)明肽聯(lián)合使用或連接至本發(fā)明的肽上。香草酸受體拮抗劑如arvanil和在WO01/64212A1中所述的化合物與本發(fā)明肽一起使用或連接至本發(fā)明的肽上。當(dāng)鎮(zhèn)痛劑是一種肽并和所述肽共價(jià)連接的時(shí)候，所得到的肽也可包含至少一個(gè)胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶切割位點(diǎn)。當(dāng)存在于肽內(nèi)，鎮(zhèn)痛作用的肽可能位于能釋放鎮(zhèn)痛作用的肽的胰凝乳蛋白酶或胰蛋白酶切割位點(diǎn)之前(如果在羧基端)或之后(如果是在氨基端)。除sialorphin相關(guān)肽以外，鎮(zhèn)痛作用的肽包括AspPhe、內(nèi)嗎啡肽-1、內(nèi)嗎啡肽-2、nocistatin、達(dá)拉根、醋酸亮丙瑞林、齊考諾肽和P物質(zhì)。治療方法本發(fā)明肽可用于治療或預(yù)防癌癥、前期癌變或轉(zhuǎn)移癌。例如，可用于預(yù)防或治療結(jié)腸直腸/局部轉(zhuǎn)移結(jié)腸直腸癌、胃腸道癌、肺癌、上皮細(xì)胞癌或前期癌變或轉(zhuǎn)移、息肉、乳腺、結(jié)腸直腸、肺、卵巢、胰臟、前列腺、腎臟、胃、膀胱、肝、食管和睪丸的轉(zhuǎn)移癌，癌(例如，基底細(xì)胞癌、basosquamous、Brown-Pearce、導(dǎo)管癌、Ehrlich腫瘤、Krebs癌、Merkel細(xì)胞癌、小或非小細(xì)胞肺癌、燕麥形細(xì)胞癌、乳頭狀癌、細(xì)支氣管癌、鱗狀上皮細(xì)胞癌、移行細(xì)胞癌、Walker癌)、非白血性白血病(例如，B細(xì)胞、T-細(xì)胞、HTLV、急性或慢性淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞、脊髓)、組織細(xì)胞增多癥(histiocytonia)、組織細(xì)胞增多病、何杰金(氏)病、非何杰金(氏)淋巴瘤、漿細(xì)胞瘤、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖、腺瘤、腺癌、腺纖維瘤、腺淋巴瘤、造釉細(xì)胞瘤、血管角質(zhì)瘤、嗜曙紅細(xì)胞增多性血管淋巴樣增生、硬化性血管瘤、多發(fā)性血管瘤、胺前體攝取脫羧(化)細(xì)胞瘤、branchionia、惡性類癌綜合征、類癌瘤心臟病、癌肉瘤、牙骨質(zhì)瘤、膽管細(xì)胞癌、膽脂瘤、軟骨肉瘤、成軟骨細(xì)胞瘤、軟骨肉瘤、脊索瘤、迷芽瘤、顱咽管瘤、chrondroma、圓柱瘤、囊腺癌、囊腺瘤、cystosarconiaphyllodes、無性細(xì)胞瘤、室管膜瘤、尤因肉瘤、纖維瘤、纖維肉瘤、巨細(xì)胞瘤、神經(jīng)節(jié)瘤、惡性膠質(zhì)瘤、血管球瘤、粒層細(xì)胞瘤、兩性胚細(xì)胞瘤、錯(cuò)構(gòu)瘤血管內(nèi)皮瘤、血管瘤、血管外皮細(xì)胞瘤、血管肉瘤、肝癌、島細(xì)胞癌、卡波西肉瘤、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、白血病性肉瘤、間質(zhì)細(xì)胞瘤、脂(肪)瘤、脂肉瘤、lymphaugioma、淋巴管肌瘤、淋巴管肉瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、腦(脊)膜瘤、間葉瘤、中腎瘤、間皮瘤、成肌細(xì)胞瘤、肌瘤、肌肉瘤、粘液瘤、粘液肉瘤、神經(jīng)鞘瘤、神經(jīng)瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、神經(jīng)上皮瘤、神經(jīng)纖維瘤、多發(fā)性神經(jīng)纖維瘤、牙瘤、骨瘤、骨肉瘤、絨毛狀瘤、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤、副神經(jīng)節(jié)非嗜鉻的、松果體瘤、橫紋肌瘤、橫紋肌肉瘤、塞托利細(xì)胞瘤、畸胎瘤、膜細(xì)胞瘤和其他細(xì)胞發(fā)育異常、細(xì)胞永生或細(xì)胞轉(zhuǎn)化的疾病。本發(fā)明肽可用于治療或預(yù)防先發(fā)于結(jié)腸癌、遺傳非息肉結(jié)腸直腸癌(HNPCC)和遺傳常染色體顯性綜合征的家族性腺瘤性息肉病(FAP)(常染色體顯性綜合征)。為治療或預(yù)防癌癥、前期癌變或轉(zhuǎn)移癌，本發(fā)明的肽能和放療或cGMP依賴磷酸二酯酶抑制劑或選擇性的環(huán)氧化酶-2抑制劑的化療藥物聯(lián)合治療(許多的環(huán)氧化酶-2抑制劑如WO02062369中所述，作為參考列入此處)。所述肽能用于治療或預(yù)防炎癥。因此可以單獨(dú)使用或與cGMP依賴磷酸二酯酶抑制劑或選擇性的環(huán)氧化酶-2抑制劑聯(lián)用治療用于治療器官炎癥、IBD(例如節(jié)段性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎)、哮喘、腎炎、肝炎、胰腺炎、支氣管炎、囊性纖維化、缺血性腸疾病、腸炎/變態(tài)反應(yīng)、腹部疾病、直腸炎、eosnophilic胃腸炎、肥大細(xì)胞增生病和其他炎癥。所述肽也能用于治療或預(yù)防胰島素相關(guān)疾病，例如II型糖尿病、高血糖癥、肥胖癥和葡萄糖紊亂或電解質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和細(xì)胞胰島素分泌內(nèi)分泌病癥或內(nèi)分泌病癥相關(guān)的疾病。該藥也可以用于胰島素耐受性治療和術(shù)后和非術(shù)后胰島素應(yīng)答下降。所述肽能用于預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)病癥，包括吸入、通氣和粘液分泌疾病、肺動(dòng)脈高壓、氣管和氣道慢性梗阻和氣管和支氣管不可逆的阻塞。所述肽能用于和磷酸二酯酶抑制劑的聯(lián)合治療(這種抑制劑的例子可見US6,333,354，作為參考列入此處)。所述肽也能用于預(yù)防或治療視網(wǎng)膜病、腎病、糖尿病性血管病和水腫形成。所述肽也能用于預(yù)防或治療神經(jīng)障礙，例如頭痛、焦慮、運(yùn)動(dòng)障礙、攻擊、精神病、癲癇發(fā)作、恐慌發(fā)作、癔病、睡眠障礙、抑郁、情感分裂性精神障礙、睡眠性呼吸暫停、注意力缺陷綜合癥、記憶喪失和嗜睡。所述肽也能用于鎮(zhèn)靜。所述和可檢測(cè)的標(biāo)記肽能用作標(biāo)記來鑒別、檢查、進(jìn)展或診斷小腸疾病和狀態(tài)，包括節(jié)段性回腸炎、大腸炎、腸炎、腫瘤、良性腫瘤、例如良性間質(zhì)瘤、腺瘤、血管瘤、腺瘤的(具柄的和無柄的)息肉、惡性的、類癌瘤、內(nèi)分泌細(xì)胞瘤、淋巴瘤、腺癌、前腸、中腸和后腸癌、胃腸基質(zhì)癌(GIST)、例如平滑肌瘤、細(xì)胞平滑肌瘤、成平滑肌瘤和平滑肌肉瘤、胃腸植物性神經(jīng)瘤、malabsorptionsyndromes、乳糜瀉、憩室病、Meckel′s憩室病、結(jié)腸憩室、巨結(jié)腸、先天性巨結(jié)腸疾病、過敏性腸綜合征腸系膜缺血、缺血性結(jié)腸炎、結(jié)腸直腸癌、結(jié)腸息肉、息肉綜合征、腸腺癌、利德爾綜合征、Brody肌病(Brodymyopathy)、嬰兒驚厥和舞蹈徐動(dòng)癥。所述肽能和另外的分子(例如診斷和治療分子)偶聯(lián)，以靶向帶有GCC受體的細(xì)胞，例如囊性纖維化損害和內(nèi)襯于腸道的特定細(xì)胞。因此，所述肽能將放射性的部分和治療部分靶向腸，有助于成像和診斷或治療結(jié)腸直腸/轉(zhuǎn)移或局部結(jié)腸直腸癌并能將抑癌基因p53正常拷貝輸送到腸道中。所述肽能用于單獨(dú)治療或聯(lián)合治療以治療勃起機(jī)能障礙。所述肽能用于單獨(dú)治療或聯(lián)合治療內(nèi)耳疾病，例如治療Meniere′s疾病，包括疾病的癥狀如眩暈、聽覺缺失、耳鳴、耳充滿感和保持內(nèi)耳體液內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。所述肽能用于單獨(dú)或聯(lián)合治療與體液及鈉滯留有關(guān)的疾病，例如腎臟、消化道和泌尿生殖系統(tǒng)、充血性心力衰竭、高血壓、低血壓、肝硬變和腎病綜合征的電解質(zhì)-水/電解質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)體系疾病。另外，所述肽能利尿和控制腸液。所述肽能用于單獨(dú)或聯(lián)合治療與碳酸氫鹽分泌有關(guān)的疾病，例如囊性纖維化。所述肽能用于單獨(dú)或聯(lián)合治療與肝細(xì)胞再生相關(guān)的疾病。權(quán)利要求1.一種純化肽，包括氨基酸序列(I)Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5Cys6Cys7Xaa8Xaa9Cys10Cys11Xaa12Xaa13Xaa14Cys15Xaa16Xaa17Cys18Xaa19Xaa20Xaa21，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5為AsnSerSerAsnTyr或缺失，或Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4缺失。2.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa5為Asn、Trp、Tyr、Asp或Phe。3.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa5為Thr或Ile。4.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa5為Tyr、Asp或Trp。5.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa8為Glu、Asp、Gln、Gly或Pro。6.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Ala、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe。7.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Val、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe。8.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa12為Asn、Tyr、Asp或Ala。9.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa13為Ala、Pro或Gly。10.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa14為Ala、Leu、Ser、Gly、Val、Glu、Gln、Ile、Leu、Lys、Arg或Asp。11.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa16為Thr、Ala、Asn、Lys、Arg、Trp。12.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa17為Gly、Pro或Ala。13.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa19為Trp、Tyr、Phe、Asn或Leu。14.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa19為L(zhǎng)ys或Arg。15.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa20Xaa21為AspPhe或Xaa20為Asn或Glu和Xaa21缺失。16.一種純化肽，包含氨基酸序列AsnSerSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---；MD-915)。17.一種純化肽，包含氨基酸序列CysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO--；MD-1100)。18.一種純化肽，氨基酸序列組成AsnSerSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---；MD-915)。19.一種純化肽，氨基酸序列組成CysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO--；MD-1100)。20.一種治療患者的胃腸道疾病的方法，包括給予一種純化肽，含有氨基酸序列AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO-；MM-416776)。21.一種治療患者的胃腸道疾病的方法，包括給予一種純化肽，含有氨基酸序列AsnSerSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---；MD-915)。22.一種治療患者的胃腸道疾病的方法，包括給予一種純化肽，含有氨基酸序列CysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO--；MM416774)。23.一種治療患者的胃腸道疾病的方法，包括給予一種純化肽，含有氨基酸序列CysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO--；MD-1100)。24.一種純化肽，含有以下任何氨基酸序列AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysTrpGlyCysTyr(SEQIDNO--)；CysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysTrpGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysTrpGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluPheCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluTrpCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluArgCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluLysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLeuGysCysAsnProAlaCysTrpGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluPheCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluTrpCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluArgCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；CysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；CysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysTrpGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；CysCysGluPheCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；CysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；CysCysGluTrpCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；CysCysGluArgCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；CysCysGluLysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO--)；AsnCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysTrpGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluPheCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluTrpCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluArgCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；AsnCysCysGluLysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyrAspPhe(SEQIDNO---)；GlnSerSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnThrSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnLeuSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnIleSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnSerSerGlnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；SerSerAsnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；GlnSerSerGlnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；SerSerGlnTyrCysCysGluTyrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO---)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluAlaCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluArgCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluAsnCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluAspCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluCysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluGlnCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluGluCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluGlyCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluHisCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluIleCysCysAsiiProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluMetCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluPheCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluProCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluSerCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluThrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluTrpCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluValCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluAlaCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluArgCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluAsnCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluAspCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluCysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluGlnCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluGluCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluGlyCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluHisCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluIleCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluLysCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluMetCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluPheCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluProCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluSerCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluThrCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluTrpCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；CysCysGluValCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO)；AsnSerSerAsnTyrCysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO--；MM-416776)；和CysCysGluLeuCysCysAsnProAlaCysThrGlyCysTyr(SEQIDNO--；MM416774)。25.一種治療患者的胃腸道疾病的方法，包括給予權(quán)利要求1的肽。26.一種治療患者的胃腸道疾病的方法，包括給予權(quán)利要求24的肽。27.權(quán)利要求20-26中任何一項(xiàng)的方法，其中胃腸疾病為胃腸蠕動(dòng)紊亂。28.權(quán)利要求20-26中任何一項(xiàng)的方法，其中胃腸疾病選自胃腸蠕動(dòng)紊亂、過敏性腸綜合征、慢性便秘、功能性胃腸病、胃食管返流疾病、功能性胃灼熱、消化不良、功能性消化不良、無潰瘍性消化不良、胃輕癱、慢性假性腸梗塞、節(jié)段性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎和腸炎。29.一種治療肥胖癥的方法，包括給予權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽。30.一種治療充血性心力衰竭的方法，包括給予權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽。31.一種治療良性前列腺增生的方法，包括給予權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽。32.權(quán)利要求1、16、17和24中任何一項(xiàng)的純化肽，其中多肽包含與其氨基端或羧基端融合的如下氨基酸序列DF；QHNPR(SEQIDNO)；VQHNPR(SEQIDNO)；VRQHNPR(SEQIDNO)；VRGQHNPR(SEQIDNO)；VRGPQHNPR(SEQIDNO)；VRGPRQHNPR(SEQIDNO)；VRGPRRQHNPR(SEQIDNO)；或RQHNPR(SEQIDNO)。33.權(quán)利要求1、16、17和24中任何一項(xiàng)的純化肽，其中純化多肽包含與其氨基端或羧基端融合的鎮(zhèn)痛作用的肽的氨基酸序列，鎮(zhèn)痛作用的肽選自內(nèi)嗎啡肽-1、內(nèi)嗎啡肽-2、nocistatin、達(dá)拉根、醋酸亮丙瑞林和P物質(zhì)。34.權(quán)利要求1、16、17和24中任何一項(xiàng)的純化肽，其中所述的多肽在其氨基端或羧基端或兩端包含不超過10個(gè)另外的氨基酸，并且其中多肽是一種鳥苷酸環(huán)化酶受體激動(dòng)劑。35.權(quán)利要求1的純化肽，其中Xaa1Xaa2Xaa3Xaa4Xaa5缺失；Xaa8為Glu；Xaa9為L(zhǎng)eu、Ile、Lys、Arg、Trp、Tyr或Phe；Xaa12為Asn；Xaa13為Pro；Xaa14為Ala；Xaa16為Thr、Ala、Lys、Arg、Trp；Xaa17為Gly；Xaa19為Tyr或Leu；而Xaa20Xaa21為AspPhe或缺失。36.一種治療患有便秘的患者的方法，所述的方法包括給予權(quán)利要求1、16-23和28中任何一項(xiàng)的多肽。37.一種增加患者中腸鳥苷酸環(huán)化酶(GC-C)受體活性的方法，所述的方法包括給予權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的多肽。38.一種治療患者胃腸疾病的方法，包括給予GC-C受體激動(dòng)劑。39.權(quán)利要求38的方法，其中胃腸疾病為胃腸蠕動(dòng)紊亂。40.權(quán)利要求38的方法，其中胃腸疾病選自胃腸蠕動(dòng)紊亂、過敏性腸綜合征、慢性便秘、功能性胃腸病、胃食管返流疾病、功能性胃灼熱、消化不良、功能性消化不良、無潰瘍性消化不良、胃輕癱、慢性假性腸梗塞、假性結(jié)腸梗塞、節(jié)段性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎和腸炎。41.一種治療肥胖癥的方法，包括給予GC-C受體激動(dòng)劑。42.一種治療充血性心力衰竭的方法，包括給予GC-C受體激動(dòng)劑。43.一種治療良性前列腺增生的方法，包括給予GC-C受體激動(dòng)劑。44.一種治療內(nèi)臟痛的方法，包括給予GC-C受體激動(dòng)劑。45.一種治療炎癥的方法，包括給予GC-C受體激動(dòng)劑。46.一種治療便秘的方法，包括給予GC-C受體激動(dòng)劑。47.一種治療內(nèi)臟痛的方法，包括給予權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的多肽。48.一種治療炎癥的方法，包括給予權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的多肽。49.一種治療囊性纖維化的方法，包括給予權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的多肽。50.一種治療囊性纖維化的方法，包括給予GC-C受體激動(dòng)劑。51.一種藥用組合物，包括權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽和可藥用的載體。52.一種藥用組合物，包括的權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽的腸溶包衣制劑。53.一種控釋藥用組合物，包括權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽和可生物降解的聚合物基質(zhì)。54.一種藥用組合物，包括權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽、鎮(zhèn)痛劑和可藥用載體。55.一種藥用組合物，包括權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽、磷酸二酯酶抑制劑和可藥用載體。56.一種治療癌癥、呼吸系統(tǒng)病癥、神經(jīng)障礙、與體液及鈉滯留相關(guān)的疾病、與碳酸鹽不平衡相關(guān)的疾病、勃起機(jī)能障礙、胰島素相關(guān)疾病或內(nèi)耳疾病的方法，所述的方法包括給予權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽。57.一種治療癌癥、呼吸系統(tǒng)病癥、神經(jīng)障礙、與體液及鈉滯留相關(guān)的疾病、與碳酸鹽不平衡相關(guān)的疾病、勃起機(jī)能障礙、胰島素相關(guān)疾病或內(nèi)耳疾病的方法，所述的方法包括給予GC-C受體激動(dòng)劑。58.一種制備權(quán)利要求16-19和24中任何一項(xiàng)的肽的方法，包括提供包含編碼所述多肽的核酸分子的細(xì)胞，在肽被表達(dá)的條件下培養(yǎng)細(xì)胞并分離表達(dá)的肽。59.一種制備權(quán)利要求16-19和24中任何一項(xiàng)的肽的方法，包括化學(xué)合成肽并純化合成的肽。60.一種藥用組合物，包括權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽和鈉尿肽如心房肽、腦鈉尿肽、C型鈉尿肽、利尿劑或血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑。61.一種藥用組合物，包括權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽和5-α還原酶抑制劑或α腎上腺素能抑制劑。62.一種藥用組合物，包括權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽和胃腸激素片段肽YY3-36、glp-1(胰高血糖素樣肽-1)、毒蜥外泌肽-4(glp-1抑制劑)、西布曲明、苯丁胺、苯甲曲秦、鹽酸芐非他明(Didrex)、奧利斯特(Xenical)、鹽酸安非潑拉酮(Tenuate)、氟西汀(Prozac)、丁氨苯丙酮、麻黃、鉻、柬埔寨藤黃、苯佐卡因、墨角藻(用于囊切開術(shù))、殼聚糖、nomameherba、山羊豆(Goat′sRue，F(xiàn)renchLilac)、共軛亞油酸、L-肉堿、纖維(歐車前、車前屬、guarfiber)、咖啡因、脫氫表雄酮、石蠶屬植物(teucriumchamaedrys)、β-羥基-β-甲基丁酸酯或丙酮酸酯。63.一種藥用組合物，包括GC-C受體激動(dòng)劑和鈉尿肽如心房肽、腦鈉尿肽、C型鈉尿肽、利尿劑或血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑。64.一種藥用組合物，包括GC-C受體激動(dòng)劑和5-α還原酶抑制劑或α腎上腺素能抑制劑。65.一種藥用組合物，包括GC-C受體激動(dòng)劑和胃腸激素片段肽YY3～36、glp-1(胰高血糖素樣肽-1)、毒蜥外泌肽-4(glp-1抑制劑)、西布曲明、苯丁胺、苯甲曲秦、鹽酸芐非他明(Didrex)、奧利斯特(Xenical)、安非潑拉酮(Tenuate)、氟西汀(Prozac)、丁氨苯丙酮、麻黃、鉻、柬埔寨藤黃、苯佐卡因、墨角藻(用于囊切開術(shù))、殼聚糖、nomameherba、山羊豆(Goat′sRue，F(xiàn)renchLilac)、共軛亞油酸、L-肉堿、纖維(歐車前、車前屬、guarfiber)、咖啡因、脫氫表雄酮、石蠶屬植物(teucriumchamaedrys)、β-羥基-β-甲基丁酸酯或丙酮酸酯。66.一種治療充血性心力衰竭的方法，包括給予權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽和鈉尿肽如心房肽、腦鈉尿肽、C型鈉尿肽、利尿劑或血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑。67.一種治療良性前列腺增生的方法，包括給予權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽和5-α還原酶抑制劑或α腎上腺素能抑制劑。68.一種治療肥胖癥的方法，包括給予權(quán)利要求1、16-19和24中任何一項(xiàng)的肽和胃腸激素片段肽YY3-36、glp-1(胰高血糖素樣肽-1)、毒蜥外泌肽-4(glp-1抑制劑)、西布曲明、苯丁胺、苯甲曲秦、鹽酸芐非他明(Didrex)、奧利斯特(Xenical)、安非潑拉酮(Tenuate)、氟西汀(Prozac)、丁氨苯丙酮、麻黃、鉻、柬埔寨藤黃、苯佐卡因、墨角藻(用于囊切開術(shù))、殼聚糖、nomameherba、山羊豆(Goat′sRue，F(xiàn)renchLilac)、共軛亞油酸、L-肉堿、纖維(歐車前、車前屬、guarfiber)、咖啡因、脫氫表雄酮、石蠶屬植物(teucriumchamaedrys)、β-羥基-β-甲基丁酸酯或丙酮酸酯。69.一種治療充血性心力衰竭的方法，包括給予GC-C受體激動(dòng)劑和鈉尿肽如心房肽、腦鈉尿肽、C型鈉尿肽、利尿劑或血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑。70.一種治療良性前列腺增生的方法，包括給予GC-C受體激動(dòng)劑和5-α還原酶抑制劑或α腎上腺素能抑制劑。71.一種治療肥胖癥的方法，包括給予GC-C受體激動(dòng)劑和胃腸激素片段肽YY3-36、glp-1(胰高血糖素樣肽-1)、毒蜥外泌肽-4(glp-1抑制劑)、西布曲明、苯丁胺、苯甲曲秦、鹽酸芐非他明(Didrex)、奧利斯特(Xenical)、安非潑拉酮(Tenuate)、氟西汀(Prozac)、丁氨苯丙酮、麻黃、鉻、柬埔寨藤黃、苯佐卡因、墨角藻(用于囊切開術(shù))、殼聚糖、nomameherba、山羊豆(Goat′sRue，F(xiàn)renchLilac)、共軛亞油酸、L-肉堿、纖維(歐車前、車前屬、guarfiber)、咖啡因、脫氫表雄酮、石蠶屬植物(teucriumchamaedrys)、β-羥基-β-甲基丁酸酯或丙酮酸酯。全文摘要本發(fā)明涉及組合物以及相關(guān)的方法，所述的組合物以及相關(guān)的方法利用激活鳥苷酸環(huán)化酶受體(GC－C)的肽以及其他的藥物用于治療IBS和其他胃腸障礙及病癥，例如胃腸蠕動(dòng)紊亂、功能性胃腸病、胃食管返流疾病(GERD)、節(jié)段性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、腸炎、功能性胃灼熱、消化不良(包括功能性消化不良或非潰瘍性消化不良)、胃病、慢性假性腸梗塞(或結(jié)腸假性腸梗塞)及合并便秘的機(jī)能障礙和病癥，例如使用鎮(zhèn)痛劑相關(guān)的便秘、術(shù)后便秘、與神經(jīng)失調(diào)以及其他病癥以及機(jī)能障礙相關(guān)的便秘。文檔編號(hào)A61KGK1795007SQ200480008533公開日2006年6月28日申請(qǐng)日期2004年1月28日優(yōu)先權(quán)日2003年1月28日發(fā)明者馬克·G·柯里,沙利那·馬哈詹-米克洛斯,西婭·諾曼,G·托德·米爾恩申請(qǐng)人:米克羅比亞股份有限公司