專利名稱：一種郁金凍干粉針劑及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于中藥制藥技術領域，具體涉及一種郁金凍干粉針劑及其制備方法。
背景技術：
郁金來源于姜科植物郁金，藥用部位為其干燥塊根，具活血止痛，清心解郁，涼血止血，利膽退黃功效，主治胸腹脅肋諸痛，婦女痛經、經閉，癥瘕結塊，熱病神昏，癲狂，驚癇，血熱妄行之吐血、衄血，血淋，砂淋，黃疸等癥?，F(xiàn)代研究證明郁金在保肝利膽、抗腫瘤、降血脂方面具有有突出作用，還有保護消化系統(tǒng)、抑制中樞系統(tǒng)、抗輻射損傷、抗自由機損傷等作用。文獻報道由郁金單味藥組成的制劑有郁金注射液、溫郁金1號注射液、溫郁金2號注射液，以上制劑都是由郁金提取揮發(fā)油制成的制劑，主要用于急性黃疸型肝炎。研究表明郁金的主要有效成分包括揮發(fā)油和姜黃素兩類成分，其中姜黃素在治療肝炎和抗腫瘤方面具有重要的作用，而且具有抗氧化、抗感染、抗誘變、抗HIV等作用，而以上制劑的制劑工藝都沒有保留另一重要活性成分姜黃素類成分。
專利(申請?zhí)?2117218)“溫郁金提取物注射劑及其制備方法和用途”公開了一種郁金提取物注射液的制備方法，本發(fā)明涉及的溫郁金提取物的新劑型為納米脂質體劑型，前體脂質體劑型，長循環(huán)脂質體劑型，長循環(huán)納米脂質體劑型，納米微乳劑型，靜脈乳劑型，脂質納米球劑型和脂肪乳劑型。
專利檢索未發(fā)現(xiàn)任何有關郁金凍干粉針劑的專利。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是公開一種富含有效成分、穩(wěn)定性好、療效確切的郁金凍干粉針制劑。
本發(fā)明的另一個目的是提供上述凍干粉針制劑的制備方法。
本發(fā)明通過以下技術方案實現(xiàn)的。
一.工藝制法(1)原料藥郁金；(2)取郁金，用超臨界二氧化碳萃取法提取，萃取溫度45℃，壓力30MPa，解析溫度55℃，壓力20MPa，平均流量40kg/h，萃取1-2h，得郁金揮發(fā)油，備用；(3)郁金藥渣加4-8倍量pH5-6的85％乙醇滲漉提取，合并滲漉液，減壓回收乙醇并濃縮至1g生藥/ml，高速離心，上清液上已處理好的大孔吸附樹脂柱吸附，用4倍柱體積的水洗脫后，再用3-5倍柱體積80％-90％乙醇溶液洗脫，取乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到總姜黃素；(4)取郁金揮發(fā)油、總姜黃素，采用飽和水溶液法用HP-β-CD進行包合，總姜黃素用乙醇溶解，得總姜黃素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加熱溶解，冷至室溫，按照郁金揮發(fā)油和總姜黃素HP-β-CD＝1∶15-20的比例(v/g)加入郁金揮發(fā)油、總姜黃素溶液，攪拌180分鐘，取出冷藏24小時，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時，得到包合物；(5)本發(fā)明的制劑的處方為包合物4-10重量份，藥用輔料10-16重量份；(6)取上述包合物和藥用輔料混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得。
超臨界二氧化碳萃取技術是一項新型萃取、分離和提純技術，與傳統(tǒng)水蒸氣蒸餾法比較具有提取效率高、提取溫度低、操作方便、節(jié)約溶劑等特點，本發(fā)明采用超臨界二氧化碳萃取技術提取郁金揮發(fā)油成分，提取條件溫和、效率高且可以有效避免揮發(fā)油類成分受熱分解和氧化。本發(fā)明采取乙醇滲漉提取、離心、大孔樹脂分離純化工藝得到總姜黃素，使得采用本發(fā)明制備的總姜黃素以姜黃素計含量達到90％-95％，且用大孔樹脂純化的方法顯著提高了有效成分的轉移率。姜黃素成分性質不穩(wěn)定，不耐熱、不耐光照、不溶于水。因此本發(fā)明將揮發(fā)油、總姜黃素用HP-β-CD進行了包合，HP-β-CD為水溶性的包合物，用其包合的揮發(fā)油、總姜黃素制成粉針劑在溶液中溶解性好，注射時吸收好，生物利用度高，患者痛感小，易于被患者愉快的接受；而且用HP-β-CD對揮發(fā)油、總姜黃素進行包合，使其在制備、貯藏、運輸?shù)倪^程中不易被空氣氧化或因分解而變質，增加了揮發(fā)油、總姜黃素的穩(wěn)定性，提高了療效。本發(fā)明制得的凍干粉有效成分含量高且具有較好的溶解性、穩(wěn)定性。藥理實驗表明本發(fā)明的郁金凍干粉針劑具有更好的藥理作用。
二.制劑的檢測分析1.儀器與試藥Waters高效液相色譜儀器(600泵，2487檢測器)，Millinium32色譜處理軟件；本發(fā)明郁金凍干粉針劑(廣東天之驕藥物開發(fā)有限公司實驗室提供)；姜黃素對照品(中國藥品生物制品檢定所)。
2.色譜條件Diamonsil C18(4.6×250mm，5μm)色譜柱；流動相甲醇∶異丙醇∶0.5％醋酸溶液(19∶25∶56)；流速0.6ml/min；檢測波長420nm；柱溫35℃。
3.實驗方法取姜黃素對照品用甲醇制成0.10mg/ml的對照品溶液，將本發(fā)明凍干粉針劑用注射用水溶解成與郁金注射液含生藥量相同的溶液(1g生藥/ml)，取樣品溶液1ml至5ml容量瓶中，加甲醇稀釋定容至刻度，過濾得供試品溶液，分別取對照品溶液和供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，按照外標法計算，結果見表2。
表1 本發(fā)明制劑的姜黃素含量本發(fā)明凍干粉針劑別 姜黃素(mg/支)1 0.502 0.483 0.47結論郁金注射液工藝只采用了水蒸氣蒸餾法提取有效成分，基本不含姜黃素成分，因此本發(fā)明郁金凍干粉針劑的有效成分更加全面，制法更加科學合理。三.總姜黃素的檢測分析1.實驗藥物總姜黃素(按本發(fā)明制備工藝制備，廣東天之驕藥物開發(fā)有限公司實驗室提供)2.實驗方法取姜黃素對照品2.5mg置50ml棕色容量瓶中，加甲醇稀釋定容至刻度，搖勻即得。稱取總姜黃素10mg，置10ml棕色容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml置100ml棕色容量瓶中，搖勻，用甲醇稀釋至刻度，搖勻即得。取對照品溶液和樣品溶液，照分光光度法在420nm處測定吸收度并計算，結果見表3。
表3總姜黃素的含量測定(以姜黃素計)組別1 2 3總姜黃素百分含量(％)93.1 93.6 94.5結論通過上述檢測分析實驗我們可以得知本發(fā)明總姜黃素的含量(以姜黃素計)可以達到90％-95％，說明本發(fā)明工藝能除去大部分雜質。具有較好的純化效果，且適合工藝化生產。
四.制劑穩(wěn)定性比較將本發(fā)明凍干粉針劑進行了長期穩(wěn)定性試驗，按制劑中姜黃素的含量測定方法分別測定0月、6月、12月、18月、24月制劑中的姜黃素含量，結果見表4。
表4 長期穩(wěn)定性實驗姜黃素含量組別0月 6月 12月18月24月本發(fā)明凍干粉針劑1(mg/支)0.500.510.490.480.49由以上實驗結果可知，采用本發(fā)明制備的凍干粉由于將姜黃素類成分進行了包合，穩(wěn)定性明顯提高，長期穩(wěn)定性實驗24個月姜黃素含量基本無變化，而有文獻報道(潭俊等.姜黃素制劑穩(wěn)定性實驗研究，中藥材，25(8)，2002)含姜黃素成分的制劑姜黃素注射液在常溫下半衰期為1.35年，有效期為0.2年。充分說明本發(fā)明工藝更加科學合理。
五.藥理實施例1.對小鼠CCl4肝損傷的保肝作用1.1試藥與動物本發(fā)明郁金凍干粉針劑(廣東天之驕藥物開發(fā)有限公司實驗室提供)；郁金注射液(按《吉林醫(yī)科大學學報》，1977；377-78，方法制備)；CCl4，上海試劑四廠；谷丙轉氨酶(ALT)試劑盒，谷草轉氨酸(AST)試劑盒，北京中生生物工程高技術公司出品昆明種小白鼠，體重20±2g。
1.2實驗方法取小鼠40只，隨機分為4組，每組10只，分設正常組、CCl4模型組、郁金注射液組和本發(fā)明凍干粉組，本發(fā)明凍干粉針劑稀釋成與郁金注射液濃度含生藥量相同的藥液，給藥組每日腹腔注射藥液相當于1g生藥/kg，連續(xù)4天，正常組、CCl4模型組給予等劑量生理鹽水，最后一次給藥后1h，給小鼠(正常組除外)1％CCl4腹腔注射1％CCl4油溶液0.2ml/20g，20h后由眼眶靜脈叢取血，取血前禁食12h，分離血清，測血清ALT、AST，結果見表3。
表5 對CCl4所致肝損傷小鼠的影響組別ALT/u.L-1ALT/u.L-1正常組30.88±21.92 63.80±24.82CCl4模型組294.03±119.87△354.49±137.37△郁金注射液202.15±105.23*256.88±124.31*本發(fā)明凍干粉 178.91±74.13**209.14±108.45**與正常組比較，△p＜0.01，與模型組比較，**p＜0.01*p＜0.05結論上述藥理實驗表明本發(fā)明的郁金凍干粉針劑能顯著抑制CCl4所致小鼠血清ALT、AST的升高，具有較好的保護CCl4所致肝損傷的作用，且比郁金注射液的作用更強。
2.利膽作用2.1試藥與動物本發(fā)明郁金凍干粉針劑(廣東天之驕藥物開發(fā)有限公司實驗室提供)；郁金注射液(按《吉林醫(yī)科大學學報》，1977；377-78，方法制備)；去氫膽酸，上海九福藥業(yè)公司；Wistar大鼠，體重200±20g，雌雄兼有。
2.2實驗方法取Wistar大鼠40只，隨機分為4組，每組10只，分別為生理鹽水組，去氫膽酸組、郁金注射液組和本發(fā)明凍干粉組，本發(fā)明凍干粉針劑稀釋成與郁金注射液濃度含生藥量相同的藥液，給藥組靜脈注射藥液相當于0.7g生藥/kg，各組大鼠用3％戊巴比妥鈉1.5ml/kg，ip麻醉后剖腹，將塑料管插入膽總管引流膽汁，穩(wěn)定0.5h后，收集給藥前1h，給藥后1、2、3、4、5h的膽汁量，并根據(jù)膽汁分泌增加率計算分析，結果見表6。
膽汁分泌增加率(％)＝(D-C)/C×100％D＝給藥組給藥后膽汁分泌量/給藥組給藥前膽汁分泌量C＝對照組給藥后膽汁分泌量/對照組給藥前膽汁分泌量表6 對大鼠膽汁分泌量的影響給藥前1h 給藥后(h)組 別1 23 4 5生理鹽水組 2.66±0.83 2.64±0.822.40±0.57 2.38±0.73 2.33±0.81 2.25±0.67去氫膽酸組 2.73±0.75 3.69±0.91**2.75±0.68 2.50±0.74 2.45±0.55 2.44±0.60郁金注射液組2.83±0.87 3.09±0.91*2.78±0.71 2.68±0.59 2.51±0.48 2.47±0.54本發(fā)明凍干粉針劑組 2.69±0.79 3.38±0.87**3.10±0.85*2.70±0.73 2.43±0.64 2.39±0.45與生理鹽水組比，**p＜0.01，*p＜0.05結論以上藥理實驗結果表明本發(fā)明凍干粉針劑具有良好的促進膽汁分泌作用，與去氫膽酸比雖強度稍弱，但持續(xù)時間更長，與郁金注射液比，作用更強且持續(xù)時間比郁金注射液更長。
六、制備實施例實施例1(1)原料藥郁金1000g；(2)取郁金，用超臨界二氧化碳萃取法提取，萃取溫度45℃，壓力30MPa，解析溫度55℃，壓力20MPa，平均流量40kg/h，萃取1.5h，得郁金揮發(fā)油，備用；(3)郁金藥渣加8倍量pH5的85％乙醇滲漉提取，合并滲漉液，減壓回收乙醇并濃縮至1g生藥/ml，高速離心，上清液上已處理好的XAD-4型大孔吸附樹脂柱吸附，用4倍柱體積的水洗脫后，再用4倍柱體積85％乙醇溶液洗脫，取乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到總姜黃素；(4)取郁金揮發(fā)油、總姜黃素，采用飽和水溶液法用HP-β-CD進行包合，總姜黃素用乙醇溶解，得總姜黃素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加熱溶解，冷至室溫，按照郁金揮發(fā)油和總姜黃素HP-β-CD＝1∶15的比例(v/g)加入郁金揮發(fā)油、總姜黃素溶液，攪拌180分鐘，取出冷藏24小時，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時，得到包合物64g；(5)本發(fā)明的制劑的處方為
包合物64g，甘露醇136g；(6)取上述包合物和甘露醇混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得。
實施例2(1)原料藥郁金1500g；(2)取郁金，用超臨界二氧化碳萃取法提取，萃取溫度45℃，壓力30MPa，解析溫度55℃，壓力20MPa，平均流量40kg/h，萃取1h，得郁金揮發(fā)油，備用；(3)郁金藥渣加4倍量pH6的85％乙醇滲漉提取，合并滲漉液，減壓回收乙醇并濃縮至1g生藥/ml，高速離心，超濾，超濾液上已處理好的HPD-300型大孔吸附樹脂柱吸附，用4倍柱體積的水洗脫后，再用3倍柱體積80％乙醇溶液洗脫，取乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到總姜黃素；(4)取郁金揮發(fā)油、總姜黃素，采用飽和水溶液法用HP-β-CD進行包合，總姜黃素用乙醇溶解，得總姜黃素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加熱溶解，冷至室溫，按照郁金揮發(fā)油和總姜黃素HP-β-CD＝1∶20的比例(v/g)加入郁金揮發(fā)油、總姜黃素溶液，攪拌180分鐘，取出冷藏24小時，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時，得到包合物97g；(5)本發(fā)明的制劑的處方為包合物97g，乳糖103g；(6)取上述包合物和乳糖混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得。
實施例3(1)原料藥郁金800g；
(2)取郁金，用超臨界二氧化碳萃取法提取，萃取溫度45℃，壓力30MPa，解析溫度55℃，壓力20MPa，平均流量40kg/h，萃取2h，得郁金揮發(fā)油，備用；(3)郁金藥渣加8倍量pH5的85％乙醇滲漉提取，合并滲漉液，減壓回收乙醇并濃縮至1g生藥/ml，高速離心，上清液上已處理好的XAD-4型大孔吸附樹脂柱吸附，用4倍柱體積的水洗脫后，再用5倍柱體積90％乙醇溶液洗脫，取乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到總姜黃素；(4)取郁金揮發(fā)油、總姜黃素，采用飽和水溶液法用HP-β-CD進行包合，總姜黃素用乙醇溶解，得總姜黃素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加熱溶解，冷至室溫，按照郁金揮發(fā)油和總姜黃素HP-β-CD＝1∶15的比例(v/g)加入郁金揮發(fā)油、總姜黃素溶液，攪拌180分鐘，取出冷藏24小時，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時，得到包合物40g；(5)本發(fā)明的制劑的處方為包合物40g，葡聚糖160g；(6)取上述包合物和葡聚糖混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得。
實施例4(1)原料藥郁金1200g；(2)取郁金，用超臨界二氧化碳萃取法提取，萃取溫度45℃，壓力30MPa，解析溫度55℃，壓力20MPa，平均流量40kg/h，萃取2h，得郁金揮發(fā)油，備用；(3)郁金藥渣加6倍量pH6的85％乙醇滲漉提取，合并滲漉液，減壓回收乙醇并濃縮至1g生藥/ml，高速離心，上清液上已處理好的HPD-300型大孔吸附樹脂柱吸附，用4倍柱體積的水洗脫后，再用3倍柱體積85％乙醇溶液洗脫，取乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到總姜黃素；(4)取郁金揮發(fā)油、總姜黃素，采用飽和水溶液法用HP-β-CD進行包合，總姜黃素用乙醇溶解，得總姜黃素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加熱溶解，冷至室溫，按照郁金揮發(fā)油和總姜黃素HP-β-CD＝1∶20的比例(v/g)加入郁金揮發(fā)油、總姜黃素溶液，攪拌180分鐘，取出冷藏24小時，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時，得到包合物78g；(5)本發(fā)明的制劑的處方為包合物78g，甘露醇122g；(6)取上述包合物和甘露醇混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得。
實施例5(1)原料藥郁金2000g；(2)取郁金，用超臨界二氧化碳萃取法提取，萃取溫度45℃，壓力30MPa，解析溫度55℃，壓力20MPa，平均流量40kg/h，萃取1h，得郁金揮發(fā)油，備用；(3)郁金藥渣加6倍量pH5的85％乙醇滲漉提取，合并滲漉液，減壓回收乙醇并濃縮至1g生藥/ml，高速離心，超濾，超濾液上已處理好的XAD-4型大孔吸附樹脂柱吸附，用4倍柱體積的水洗脫后，再用3倍柱體積85％乙醇溶液洗脫，取乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到總姜黃素；(4)取郁金揮發(fā)油、總姜黃素，采用飽和水溶液法用HP-β-CD進行包合，總姜黃素用乙醇溶解，得總姜黃素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加熱溶解，冷至室溫，按照郁金揮發(fā)油和總姜黃素HP-β-CD＝1∶15的比例(v/g)加入郁金揮發(fā)油、總姜黃素溶液，攪拌180分鐘，取出冷藏24小時，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時，得到包合物100g；(5)本發(fā)明的制劑的處方為包合物100g，乳糖100g；(6)取上述包合物和乳糖混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得。
權利要求
1.一種郁金凍干粉針劑，其特征在于它是由從郁金提取的揮發(fā)油和總姜黃素的HP-β-CD包合物4-10重量份和藥用輔料10-16重量份制備而成，其中總姜黃素以姜黃素計含量為90％-95％。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種郁金凍干粉針劑，其制備方法包括以下步驟(1)原料藥組成郁金；(2)取郁金，用超臨界二氧化碳萃取法提取，萃取溫度45℃，壓力30MPa，解析溫度55℃，壓力20MPa，平均流量40kg/h，萃取1-2h，得郁金揮發(fā)油，備用；(3)郁金藥渣加4-8倍量pH5-6的85％乙醇滲漉提取，合并滲漉液，減壓回收乙醇并濃縮至1g生藥/ml，高速離心，上清液上已處理好的大孔吸附樹脂柱吸附，用4倍柱體積的水洗脫后，再用3-5倍柱體積80％-90％乙醇溶液洗脫，取乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到總姜黃素；(4)取郁金揮發(fā)油、總姜黃素，采用飽和水溶液法用HP-β-環(huán)糊精進行包合，總姜黃素用乙醇溶解，得總姜黃素溶液，HP-β-CD以30ml/g的比例加水加熱溶解，冷至室溫，按照郁金揮發(fā)油和總姜黃素∶HP-β-CD＝1∶15-20的比例(v/g)加入郁金揮發(fā)油、總姜黃素溶液，攪拌180分鐘，取出冷藏24小時，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時，得到包合物；(5)取上述包合物和藥用輔料混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的郁金凍干粉針劑，藥用輔料為甘露醇或乳糖或葡聚糖中的一種。
4.根據(jù)權利要求2所述的郁金凍干粉針劑，超臨界二氧化碳萃取法提取的萃取溫度為45℃，壓力為30MPa，解析溫度為55℃，壓力為20MPa，平均流量為40kg/h，萃取時間為1-2h。
5.根據(jù)權利要求2所述的郁金凍干粉針劑，其中大孔吸附樹脂為非極性大孔吸附樹脂。
6.根據(jù)權利要求2所述的郁金凍干粉針劑，其中大孔吸附樹脂型號為XAD-4型或HPD-300型。
7.根據(jù)權利要求2所述的郁金凍干粉針劑，其中大孔吸附樹脂洗脫的乙醇濃度為84％-86％。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種郁金凍干粉針劑及其制備方法，其特征在于從中藥郁金中提取揮發(fā)油和總姜黃素，將揮發(fā)油、總姜黃素用HP－β－CD包合，提高了揮發(fā)油和姜黃素成分的穩(wěn)定性、溶解度，包合物與藥用輔料混合，制備成凍干粉針劑。藥理實驗結果表明，本發(fā)明的郁金凍干粉針劑具有較好的藥理作用。
文檔編號A61P1/16GK1634414SQ20041008672
公開日2005年7月6日 申請日期2004年10月29日 優(yōu)先權日2004年10月29日
發(fā)明者張平 申請人:張平