專利名稱：高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制藥工業(yè)中原料藥的制備工藝，尤其是高純度原料藥的制備工藝。
背景技術(shù)：
燈盞花素系從燈盞花Erigeron breviscapus(Vant.)Hand-Mazz全草中分離出的黃酮類有效成份，其中主要為燈盞花乙素(又名燈盞乙素，野黃芩苷，以下簡稱乙素)，化學(xué)命名為4′5、6-三羥基黃酮-7-O-葡萄糖醛酸甙，目前從市場上購得的燈盞花素原料藥經(jīng)HPLC分析，乙素含量在90％左右，衍生的各種制劑在臨床上已廣泛用于治療心腦血管疾病，療效顯著，但其注射液穩(wěn)定性差，貯存時間短，臨床上個別患者用后時有冷熱反應(yīng)、皮膚瘙癢、皮疹等現(xiàn)象發(fā)生，這些現(xiàn)象的出現(xiàn)主要由于原料藥在生產(chǎn)過程中未除盡其中一些雜質(zhì)所致，這一問題自從燈盞花產(chǎn)品問世30多年來一直未能解決。
在部頒《藥品標(biāo)準(zhǔn)》記載燈盞花素注射液中對燈盞花乙素原料藥的提取，其描述僅是用活性碳處理，和加入EDTA作穩(wěn)定劑，燈盞花乙素含量達(dá)90％。有關(guān)文獻(xiàn)和專利資料中未記載對燈盞花乙素精制工藝的報道，也未報道對燈盞花乙素純度的提高及副作用的消除。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的旨在克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點，提供一種高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝。
本發(fā)明所述工藝系以燈盞花乙素的理化性質(zhì)以及化學(xué)結(jié)構(gòu)上的特征進(jìn)行工藝設(shè)計，燈盞花乙素在水中不溶，在甲醇、乙醇、丙酮中的溶解度也很小，故以這些溶劑進(jìn)行大量重結(jié)晶是不可行的。其中所含雜質(zhì)難以除去的原因，主要還是由于燈盞花乙素結(jié)構(gòu)上的羧基和多個羥基所致，形成一個強(qiáng)的帶電體，由于其靜電效應(yīng)，與其它一些成份易產(chǎn)生締合、絡(luò)合，故難以分開。根據(jù)這種因素，本發(fā)明采用以下特殊設(shè)計，利用結(jié)構(gòu)上的羥基制作成特殊的鹽溶液，通過系統(tǒng)篩選，發(fā)現(xiàn)堿金屬磷酸鹽可與乙素生成可溶性的鹽，或絡(luò)合物，這種鹽在有機(jī)溶劑中不溶，利用溶劑沉淀法進(jìn)行沉淀，達(dá)到乙素與其它雜質(zhì)分離的目的，沉淀物經(jīng)酸化離解，還原成燈盞花乙素，用HPLC分析，燈盞花乙素的純度可達(dá)到99％以上，如反復(fù)處理多次，燈盞花乙素的純度還可以提高，甚至可達(dá)到99.9％以上。
本發(fā)明所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝由以下步驟組成一、取燈盞花素置于容器中加入2倍重量以上的水，加入堿金屬磷酸鹽調(diào)節(jié)PH至4-8，使完全溶解；二、再加入重量為三倍以上的溶劑進(jìn)行沉淀，靜置，濾過，沉淀物用溶劑洗滌；三、沉淀移至含有重量百分比為10-60％溶劑的溶液中，加酸酸化至PH 1-2，沉淀濾過，水洗至中性，干燥，即得到高純度燈盞花乙素原料藥。
在上述工藝步驟(一)中所述燈盞花素為在市售燈盞花素，所加入水的量為2倍以上，其上限可以不受限制，只是加入的水量越大，在以后的步驟中應(yīng)加入的溶劑量也隨之增大，從工業(yè)成本及可行性角度考慮，一般以2-8倍為宜；所加入的堿金屬磷酸鹽為磷酸氫二鈉、磷酸三鈉、磷酸氫二鉀、磷酸三鉀，可以為其中的一種或是幾種，其加入的方式可以直接加入，也可以配制成水溶液加入，加入的量以最終調(diào)節(jié)的PH值為度；步驟(二)和(三)中所述的溶劑為能與水以任意比例相溶的有機(jī)溶劑，如甲醇、乙醇、丙酮、四氫呋喃中的一種或幾種等，步驟(二)中溶劑加入的量與步驟(一)中的水量有關(guān)，系成正比關(guān)系，一般以步驟(一)中所述燈盞花素的3-15倍為宜；步驟(二)中的靜置主要是使沉淀與液相分離，時間一般為5-30小時。步驟(三)中所加入的酸，主要作用是酸化離解沉淀物，還原燈盞花乙素，以強(qiáng)酸為宜，如鹽酸、硫酸等。上述過程可在常溫下進(jìn)行，也可以在所用溶劑的沸點溫度以下進(jìn)行，但以10-45℃為最佳。
本發(fā)明所述工藝步驟簡單，易于工業(yè)化生產(chǎn)，所制備燈盞花乙素經(jīng)高壓液相層析HPLC分析，燈盞花乙素純度在99％以上，得到了意想不到的效果和商業(yè)上的成功。高純度燈盞花乙素在工業(yè)上尤其是制藥領(lǐng)域有著極其重要的價值，它解決了燈盞花素在近30年的臨床應(yīng)用中沒有解決的技術(shù)難題，即解決了注射劑的不穩(wěn)定性；消除了該產(chǎn)品存在的發(fā)冷、發(fā)熱、皮疹、皮膚瘙癢等不良反應(yīng)；降低毒性，提高了療效和使用的安全性，LD50由原來的1314mg/kg提高到1794.98mg/kg。
本發(fā)明所制得產(chǎn)物不僅可作為原料藥，還可用作對照品。


附圖為本發(fā)明實施例液相色譜圖。
使用儀器類型液相色譜 梯度方式恒流 檢測器紫外儀器型號島津LC-10AT 波長(nm)335nm柱溫(℃)32柱型號反向C-18柱計算方法面積歸一法分析結(jié)果表


峰參數(shù)表

具體實施方式
實施例稱市售燈盞花素原料藥1000g，加5倍體積水，用20％磷酸氫二鈉試液調(diào)PH值至7，使完全溶解，濾過，濾液加8倍丙酮沉淀，邊加邊攪拌，使沉淀完全，靜置10小時，濾過，加丙酮洗滌三次，再將沉淀物移至另一容器中，加入5倍量30％丙酮，攪勻，再加20％鹽酸調(diào)PH 1-2靜置10小時，抽濾，用水洗滌至中性，再加乙醇洗一次，烘干，即為精制燈盞花乙素，經(jīng)HPLC分析乙素含量為99.43％，如附圖所示。
檢測方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(用十八烷基鍵合硅膠為填充劑甲醇-0.1％磷酸溶液(40∶60)為流動相；檢測波長為335nm。理論板數(shù)按燈盞乙素峰計算不應(yīng)低于5000)。取本品，按照每10mg燈盞乙素加水1ml溶解，加甲醇制成每1ml約含燈盞乙素0.4mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液1.0ml，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，作為對照溶液。取對照溶液5ul注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10％。再取供試品溶液5ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2.5。測量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)峰面積并與對照溶液主成分的峰面積比較，計算出燈盞花乙素純度。
權(quán)利要求
1.一種高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝，其特征在于由以下步驟組成(一)、取燈盞花素置于容器中加入2倍重量以上的水，加入堿金屬磷酸鹽調(diào)節(jié)PH至4-8，使完全溶解；(二)、再加入重量為三倍以上的溶劑進(jìn)行沉淀，靜置，濾過，沉淀物用溶劑洗滌；(三)、沉淀移至含有重量百分比為10-60％溶劑的溶液中，加酸酸化至PH1-2，沉淀濾過，水洗至中性，干燥，即得到高純度燈盞花乙素原料藥。
2.按照權(quán)利要求1所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝，其特征在于步驟(一)中所加入的堿金屬磷酸鹽為磷酸氫二鈉、磷酸三鈉、磷酸氫二鉀、磷酸三鉀。
3.按照權(quán)利要求1所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝，其特征在于步驟(一)中加入水的量為2-8倍。
4.按照權(quán)利要求1所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝，其特征在于步驟(二)所述的溶劑為能與水以任意比例相溶的有機(jī)溶劑。
5.按照權(quán)利要求4所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝，其特征在于所述的溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、四氫呋喃中的一種或幾種。
6.按照權(quán)利要求1所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝，其特征在于步驟(二)中所述的溶劑加入量為3-15倍。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制藥工業(yè)中原料藥的制備工藝，尤其是高純度原料藥的制備工藝。本發(fā)明所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝由以下步驟組成一、取燈盞花素置于容器中加入2倍重量以上的水，加入堿金屬磷酸鹽調(diào)節(jié)pH至4－8，使完全溶解；二、再加入重量為三倍以上的溶劑進(jìn)行沉淀，靜置，濾過，沉淀物用溶劑洗滌；三、沉淀移至含有重量百分比為10－60％溶劑的溶液中，加酸酸化至pH 1－2，沉淀濾過，水洗至中性，干燥，即得到高純度燈盞花乙素原料藥。
文檔編號A61K31/7042GK1715288SQ20041006257
公開日2006年1月4日 申請日期2004年7月2日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月2日
發(fā)明者張人偉, 程惠佳, 樊獻(xiàn)俄 申請人:樊獻(xiàn)俄