專利名稱：一種治療心腦血管疾病的制劑及其制備方法和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑及其制備，特別是涉及用劍葉龍血樹經(jīng)提取加工制成的中藥制劑。
背景技術(shù)：
本發(fā)明的背景來源于對(duì)血竭、廣西血竭和劍葉龍血樹的有關(guān)文獻(xiàn)記載。
龍血竭和劍葉龍血樹主要含黃酮類成分，另含少量苷類、萜類和甾醇類成分；藥理研究表明，廣西血竭具有明顯的抗血栓、增加纖溶和改善血液流變學(xué)等作用，其中黃酮類成分是活血化瘀的主要有效成分；多家醫(yī)院用于治療腦血栓、冠心病、糖尿病高血脂癥有較好療效。本發(fā)明對(duì)劍葉龍血樹進(jìn)行了系統(tǒng)的資源、化學(xué)成分和藥理研究，發(fā)現(xiàn)劍葉龍血樹提取物具有明顯的抑制血小板聚集、抗心肌缺氧和改善血液流變學(xué)等作用。進(jìn)而對(duì)劍葉龍血樹的有效部位進(jìn)行深入研究，旨在開發(fā)出高效、低毒的治療心腦血管疾病的新藥。
心腦血管病在我國的死因構(gòu)成比中居首位，其中冠心病在心血管病的位次已由50年代的第四位上升到80年代至目前的第一位。因此，尋找、開發(fā)安全有效的治療和預(yù)防冠心病的藥物是重大的課題之一。故本項(xiàng)目立足當(dāng)?shù)刭Y源，開發(fā)出一種療效確切的心腦血管用藥。
劍葉龍血樹植物資源豐富，廣布于云南和廣西南部，且容易栽培，為其深入開發(fā)提供了良好物質(zhì)基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種中藥制劑，該制劑以百合科植物劍葉龍血樹的藥用部位為原料，經(jīng)過提取步驟制備成的。
本發(fā)明的制劑，其中劍葉龍血樹的藥用部位選自，劍葉龍血樹的根、莖、含脂木材、樹脂，優(yōu)選的是含脂木材。
本發(fā)明還包括用本發(fā)明的制劑制備預(yù)防和/或治療心腦血管疾病的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明還包括本發(fā)明的制劑的制備方法，其特征在于，經(jīng)過以下步驟，g.將劍葉龍血樹的藥用部位粉碎，h.用水或堿性有機(jī)溶劑提取，
i.回收溶劑，提取液調(diào)節(jié)pH值到酸性，濾過，j.沉淀加水洗滌至中性，干燥，加有機(jī)溶劑提取，k.回收有機(jī)溶劑，提取液濃縮，干燥，粉碎得藥物活性成分；l.以步驟e制得的藥物活性成分為原料，按常規(guī)方法制成制劑。
本發(fā)明的制備方法具體可以是以下方法，取劍葉龍血樹，粉碎成粗粉，加含0.2‰～0.7‰氫氧化鈉的25～75％乙醇回流提取二次，每次加4～14倍量，每次0.5～2小時(shí)，濾過，濾液合并，回收乙醇，至無醇味，放冷，加5～20％的鹽酸調(diào)節(jié)pH值為1～3，放置6～18小時(shí)，濾過，沉淀加水洗滌至中性，干燥，粉碎成粗粉，加醋酸乙酯回流提取二次，每次加3～12倍量，每次0.5～2小時(shí)，濾過，濾液合并，回收醋酸乙酯并減壓濃縮至相對(duì)密度在80℃下為1.1～1.6的稠膏，85℃以下干燥，粉碎，過篩，得藥粉；上述步驟得到的藥粉為含有藥物活性物質(zhì)的提取物，按藥用劑型添加輔料，制成制劑。
本發(fā)明的中藥制劑具有活血祛瘀，通脈止痛之功效。可用于胸痹心痛，心血瘀阻證，癥見心胸疼痛，如刺如絞，固定不移，甚則心痛徹背，或痛引肩背，常伴有胸悶心悸，短氣，面色晦暗，口唇青紫。舌質(zhì)紫暗，或有瘀斑，舌下脈絡(luò)青紫，脈小弦或細(xì)澀；冠心病心絞痛見上述癥候者亦適用之，還可以適用于血瘀型的腦血管疾病，如中風(fēng)、頭痛、眩暈等。本發(fā)明優(yōu)選用于血瘀證型的心血管疾病的治療應(yīng)用。
用本發(fā)明的方法制成的劍葉龍血樹提取物是本發(fā)明的藥物制劑的活性成分提取物，其中含有黃酮類物質(zhì)，經(jīng)過對(duì)黃酮類物質(zhì)的含量測定，總酚含量大于30％，優(yōu)選的指標(biāo)是總酚含量大于50％。
使用劍葉龍血樹藥用部位5000g可以制成活性成分提取物50～1250g，以上劍葉龍血樹藥用部位500g是以生藥計(jì)算的，此劑量可制成藥物制劑1000劑，所述1000劑指，制成的成品藥物制劑，如制成膠囊制劑1000粒，片劑1000片，顆粒劑1000袋，口服液1000安瓶等，作為顆粒劑也可以制成大包裝，如100～500袋，具體可以是100袋、125袋、200袋、250袋、500袋等，每袋可作為1次服用劑量。
以上劑量，可制成50～1000次服用劑量的制劑，如作為片劑，制成1000片，每次服用劑量可以是1～20片，共可服用50～1000次。如作為顆粒劑，制成125袋，每次服用1～2袋，共可服用62.5～125次。
本發(fā)明的中藥制劑，是通過將劍葉龍血樹經(jīng)過提取或其他方式加工，制成藥物活性物質(zhì)，隨后，以該物質(zhì)為藥物活性物質(zhì)，需要時(shí)加入藥物可接受的載體，按照制劑學(xué)的常規(guī)技術(shù)制成的。所述活性物質(zhì)可以通過提取中藥原料得到，也可以通過其他方式得到，如通過粉碎、壓榨、煅燒、研磨、過篩、滲漉、萃取、水提、醇提、酯提、酮提、層析等法得到，提取方法可以采取超聲提取、微波提取、超臨界提、大孔樹脂提取等，這些活性物質(zhì)可以是浸膏形式的物質(zhì)，可以是干浸膏也可以是流浸膏，根據(jù)制劑的不同需要，制成不同的濃度。提取時(shí)使用合適的溶劑，這些溶劑可選自，水、乙醇、甲醇、丙醇、丙酮、丁酮、醋酸乙酯、正丁醇等，溶液的堿化可以使用氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水、碳酸鈉、碳酸氫鈉等，PH值的范圍為7～14。
本發(fā)明的藥物制劑中的活性物質(zhì)提取物，其在制劑中所占重量百分比可以是0.1～99.9％，其余為藥物可接受的載體。本發(fā)明的藥物制劑，以單位劑量形式存在，所述單位劑量形式是指制劑的單位，如片劑的每片，膠囊的每粒膠囊，注射劑的每支等，單位劑量中，含有活性物質(zhì)的量為50～1250mg，優(yōu)選的是150～800mg。
本發(fā)明的藥物制劑可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括片劑、膠囊劑、口服液、糖漿劑、顆粒劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、注射劑、栓劑、霜?jiǎng)?、噴霧劑、滴丸劑、貼劑、緩釋制劑、控釋制劑等。
本發(fā)明的藥物制劑，其口服給藥的制劑可含有常用的賦形劑，諸如粘合劑、填充劑、稀釋劑、潤滑劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑和濕潤劑，必要時(shí)可對(duì)片劑進(jìn)行包衣。
適用的填充劑包括纖維素、甘露糖醇、乳糖和其它類似的填充劑。適宜的崩解劑包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羥基乙酸淀粉鈉。適宜的潤滑劑包括，例如硬脂酸鎂。適宜的藥物可接受的濕潤劑包括十二烷基硫酸鈉。
可通過混合，填充，壓片等常用的方法制備固體口服組合物。進(jìn)行反復(fù)混合可使活性物質(zhì)分布在整個(gè)使用大量填充劑的那些組合物中。
口服液體制劑的形式例如可以是水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或合劑，或者可以是一種在使用前可用水或其它適宜的載體復(fù)配的干燥產(chǎn)品。這種液體制劑可含有常規(guī)的添加劑，諸如懸浮劑，例如山梨醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪，乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨醇一油酸酯或阿拉伯膠；非水性載體(它們可以包括食用油)，例如杏仁油、分餾椰子油、諸如甘油的酯的油性酯、丙二醇或乙醇；防腐劑，例如對(duì)羥基苯甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸，并且如果需要，可含有常規(guī)的香味劑或著色劑。
對(duì)于注射劑，制備的液體單位劑型含有本發(fā)明的活性物質(zhì)和無菌載體。根據(jù)載體和濃度，可以將此化合物懸浮或者溶解。溶液的制備通常是通過將活性物質(zhì)溶解在一種載體中，在將其裝入一種適宜的小瓶或安瓿前過濾消毒，然后密封。輔料例如一種局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑也可以溶解在這種載體中。為了提高其穩(wěn)定性，可在裝入小瓶以后將這種組合物冰凍，并在真空下將水除去。
本發(fā)明的藥物制劑，在制備成藥劑時(shí)可選擇性的加入適合的藥物可接受的載體，所述藥物可接受的載體選自甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素C、EDTA二鈉、EDTA鈣鈉，一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂等。
本發(fā)明的制劑在使用時(shí)根據(jù)病人的情況確定用法用量，可每日服1～4次，每次1～20劑，如1～20粒或片。
本發(fā)明的藥物制劑樣品用留樣觀察法，在模擬上市包裝條件下，置常溫和自然條件下放置一年半，按臨床研究用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢查，除當(dāng)月檢驗(yàn)外，前三個(gè)月每月檢驗(yàn)一次，以后每半年檢查一次，結(jié)果表明各項(xiàng)指標(biāo)均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，且與0月比較未見明顯變化，初步表明，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。
本發(fā)明還提供本發(fā)明制劑的質(zhì)量控制方法，該法同時(shí)可以用來控制以其為原料的中成藥的內(nèi)部質(zhì)量，如上述方法生產(chǎn)的片劑、膠囊、注射液、顆粒、滴丸、貼片、丸劑等藥物制劑的質(zhì)量。本發(fā)明的藥物制劑的質(zhì)量控制方法，包括以下步驟d.鑒別e.檢查f.含量測定其中鑒別采用以下方法(1)取片劑或膠囊劑約0.5g，加氯仿10ml，振搖10分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液，另取龍血素A和龍血素B對(duì)照品，加氯仿制成每1ml各含0.25mg的溶液，作為對(duì)照品溶液，按照中國藥典2000年版一部附錄VI B規(guī)定的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠GF254薄層板上，以比例為8∶3∶1的石油醚-酯酸乙酯-丙酮為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)取片劑或膠囊劑約5mg，加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液，另取7，4’-二羥基黃酮對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。按照中國藥典2000年版一部附錄VI B規(guī)定的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以比例為8∶1的氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；其中檢查采用以下方法(1)干燥失重取片劑或膠囊劑1.0g，在105℃干燥至恒重，減失重量不得過5.0％(中國藥典2000年版一部附錄IX G)；(2)熾灼殘?jiān)? 取片劑或膠囊劑1.0g，依法檢查(中國藥典2000年版一部附錄IX J)，遺留殘?jiān)坏眠^3.0％；(3)重金屬 取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?，依法檢查(中國藥典2000年版一部附錄IX E第二法)，含重金屬不得過百萬分之二十；其中含量測定采用以下方法對(duì)于總酚，含量測定的方法為(1)7，4’-二羥基黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密稱取干燥至恒重的7，4’-二羥基黃酮對(duì)照品10mg，置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作儲(chǔ)備液。取儲(chǔ)備液2ml，置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作對(duì)照品溶液。分別精密量取0ml，1.0ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml，3.0ml，置25ml量瓶中，分別加無水乙醇5.0ml，4.0ml，3.5ml，3.0ml，2.5ml和2.0ml。再分別依次加入0.1％～1％的十二烷基磺酸鈉溶液2ml，0.1％～2％的鐵氰化鉀溶液1ml，0.1％～2％三氯化鐵1ml，搖勻，至暗處放置2～10min后，加0.1M的鹽酸定容至刻度，再至暗處放置20～35min。按照中國藥典2000年版一部附錄VB規(guī)定的分光光度法，以0號(hào)樣品為空白對(duì)照，在780±5nm處測定吸收度，在以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；(2)測定 精密稱取片劑或膠囊劑10mg，置25ml量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液1ml，置25ml量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密吸取供試驗(yàn)品溶液5ml，置25ml量瓶中，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法，自“依次加入0.1％～1％的十二烷基磺酸鈉溶液2ml”起，依法測定，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出重量，計(jì)算，即得，本品按干燥品計(jì)算，含總酚以7，4’-二羥基黃酮(C15H10O3)計(jì)算，不得少于50％；對(duì)于龍血素A和龍血素B，含量測定的方法為(1)照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定；
(2)色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-冰醋酸溶液(1→95)(33.5∶66.5)為流動(dòng)相；檢測波長為280nm。理論板數(shù)按龍血素A和龍血素B峰計(jì)算應(yīng)不低于3000；(3)對(duì)照品溶液的制備 精密稱取80℃下減壓干燥至恒重的龍血素A和龍血素B對(duì)照品適量，分別加甲醇制成每1ml含0.01mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；(4)供試品溶液的制備 取本品約40mg，精密稱定，加0.35％的氫氧化鈉溶液25ml，微熱使溶解，放冷，用醋酸乙酯振搖提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，用水25ml洗滌，分取醋酸乙酯提取液，蒸發(fā)至干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解，并轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；(5)測定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每1g含龍血素A(C17H18O4)，不得少于3.0mg；含龍血素B(C18H20O5)，不得少于4.0mg。
以下通過藥效實(shí)驗(yàn)說明本發(fā)明的有益效果，所用藥物為本發(fā)明實(shí)施例1的藥物制劑，在此實(shí)驗(yàn)中稱為血脈康。
藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)1、犬心肌缺血實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明血脈康120mg/kg、60mg/kg、30mg/kg經(jīng)十二指腸給藥能明顯降低犬冠狀動(dòng)脈結(jié)扎所致心肌梗塞的ΔN-ST和Δ∑-ST水平(P＜0.05，P＜0.01)；能明顯減少血清中CPK、LD、LDH、MDA釋放，增強(qiáng)SOD活性(P＜0.05，P＜0.01)；明顯縮小心肌梗塞范圍(P＜0.05，P＜0.01)。對(duì)心肌缺血犬的動(dòng)脈收縮壓(SAP)、動(dòng)脈舒張壓(DAP)、平均動(dòng)脈壓(MAP)影響均不顯著(P＞0.05)。十二指腸給予血脈康高劑量組能抑制加快的心率，與模型組比較差異顯著(P＜0.05)。提示血脈康能明顯減輕心肌缺血程度。
2、犬心臟血流動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)結(jié)果表明血脈康120mg/kg、60mg/kg、30mg/kg與陰性對(duì)照組比較對(duì)犬血壓(SAP、DAP、MAP)、心率無顯著性差異(P＞0.05)。能明顯增加冠脈流量、心輸出量、每搏輸出量、心臟指數(shù)、心搏指數(shù)(P＜0.05，P＜0.01)，降低外周阻力。
3、血脈康360mg/kg、180mg/kg、90mg/kg三個(gè)劑量對(duì)垂體后葉素所致的大鼠心肌缺血現(xiàn)象有明顯保護(hù)作用(P＜0.01，P＜0.05)。
4、血脈康720mg/kg、360mg/kg、180mg/kg三個(gè)劑量連續(xù)7天灌胃給藥，能明顯延長因夾閉小鼠氣管而導(dǎo)致的心肌缺氧的死亡時(shí)間(P＜0.01)。
5、血脈康360mg/kg、180mg/kg、90mg/kg三個(gè)劑量對(duì)血瘀證模型大鼠的血液流變學(xué)有明顯影響，可以顯著降低全血及血漿粘度，抑制血小板聚集(P＜0.01，P＜0.05)。
毒理實(shí)驗(yàn)1、小鼠急性毒性試驗(yàn)本品經(jīng)LD50預(yù)試表明本品無法求出小鼠的LD50值，最大給藥量測定以最大藥物濃度0.5g/ml，最大給藥體積0.8ml/20g，灌胃給藥二次。給藥后連續(xù)觀察14天，結(jié)果小鼠無一只死亡，給藥后活動(dòng)正常，未發(fā)現(xiàn)小鼠在進(jìn)食、呼吸、心率、毛發(fā)色澤等方面的異常。表明血脈康最大給藥量為40g/kg，為臨床擬用劑量的1333.33倍(臨床擬用劑量為0.03g/kg)。
2、大鼠長期毒性試驗(yàn)本品2.00g/kg，1.00g/kg，0.5g/kg原料藥(相當(dāng)于臨床擬用劑量的66.7倍、33.3倍、16.67倍)，灌胃給藥，每天給藥1次，每周給藥6天，共給藥6個(gè)月。于給藥后3個(gè)月、6個(gè)月及恢復(fù)期每組中各取10只、20只、10只大鼠，雌雄各半，進(jìn)行系統(tǒng)檢測。觀察大鼠的一般表現(xiàn)、食耗量、體重變化；測量動(dòng)物血液學(xué)指標(biāo)、血液生化學(xué)指標(biāo)。試驗(yàn)結(jié)果表明，血脈康高劑量(2.00g/kg原料藥)6個(gè)月的白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞、中劑量(1.00g/kg原料藥)恢復(fù)期血小板、低劑量(0.5g/kg原料藥)恢復(fù)期淋巴細(xì)胞與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組相比有明顯差異(P＜0.05)，該藥高劑量3個(gè)月的總蛋白、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶、中劑量3個(gè)月的白蛋白、低劑量3個(gè)月的總蛋白與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組相比有明顯差異(P＜0.05，P＜0.01)，但這些數(shù)值仍在正常范圍內(nèi)。除此之外，血液學(xué)及血液生化學(xué)其余數(shù)值與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組相比均無明顯差異(P＞0.05)。系統(tǒng)尸解，對(duì)12種臟器指數(shù)及18種臟器病理組織學(xué)進(jìn)行檢測。結(jié)果未發(fā)現(xiàn)與服用該藥有關(guān)的毒副作用。
3、Beagle犬長期毒性試驗(yàn)本品1.8g/kg，0.9g/kg，0.45g/kg原料藥(相當(dāng)于臨床擬用劑量的60倍、30倍、15倍)，灌胃給藥(ig)，每天一次，每周給藥6天，于給藥前、給藥后1.5個(gè)月、給藥后3個(gè)月、給藥后6個(gè)月及恢復(fù)期(8個(gè)月)測量動(dòng)物的心電圖、血液學(xué)指標(biāo)、血液生化學(xué)指標(biāo)及尿常規(guī)指標(biāo)，并于給藥前及給藥過程中觀察動(dòng)物的一般表現(xiàn)，記錄食耗量和體重變化。于給藥后3個(gè)月、6個(gè)月、恢復(fù)期每組分別對(duì)2只、4只、2只動(dòng)物進(jìn)行系統(tǒng)尸解，計(jì)算12種臟器指數(shù)，并對(duì)23種臟器進(jìn)行病理組織學(xué)檢測。結(jié)果表明，血脈康高劑量于給藥前單核細(xì)胞絕對(duì)值明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)，淋巴細(xì)胞百分率明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)，給藥1.5個(gè)月單核細(xì)胞絕對(duì)值明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)，紅細(xì)胞比容明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)；中劑量于給藥前中性粒細(xì)胞明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)，紅細(xì)胞明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)，血紅蛋白和紅細(xì)胞比容明顯低于對(duì)照組(P＜0.01)；低劑量于給藥前白細(xì)胞及中性粒細(xì)胞明顯高于對(duì)照組(P＜0.05，P＜0.01)，單核細(xì)胞明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)，紅細(xì)胞明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)，血紅蛋白和紅細(xì)胞比容明顯低于對(duì)照組(P＜0.01)，給藥6個(gè)月淋巴細(xì)胞百分率明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)，恢復(fù)期紅細(xì)胞明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。血液生化學(xué)指標(biāo)檢測結(jié)果表明，高劑量組于給藥前尿素和肌酐明顯高于對(duì)照組(P＜0.05，P＜0.01)，給藥1.5個(gè)月球蛋白明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)；中劑量組于給藥前總膽紅素明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)，恢復(fù)期總蛋白、尿素和球蛋白明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)；低劑量3個(gè)月谷丙轉(zhuǎn)胺酶明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)，6個(gè)月谷丙轉(zhuǎn)胺酶明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)。但以上這些數(shù)值均在正常范圍之內(nèi)。除此之外，該藥對(duì)受試犬的一般表現(xiàn)、體重變化、其他血液學(xué)指標(biāo)、心電圖指標(biāo)、各項(xiàng)尿常規(guī)指標(biāo)、其他血液生化學(xué)指標(biāo)、臟器指數(shù)及23個(gè)臟器組織學(xué)均無明顯影響。
具體實(shí)施例方式以下通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實(shí)施例1活性物質(zhì)提取物的制備
取劍葉龍血樹含脂木材500g，粉碎成粗粉，加含0.5‰氫氧化鈉的70％乙醇回流提取二次，每次加8倍量，每次1小時(shí)，濾過，濾液合并，回收乙醇，至無醇味，放冷，加10％的鹽酸調(diào)節(jié)pH值為2，放置10小時(shí)，濾過，沉淀加水洗滌至中性，干燥，粉碎成粗粉，加醋酸乙酯回流提取二次，每次加8倍量，每次1小時(shí)，濾過，濾液合并，回收醋酸乙酯并減壓濃縮至相對(duì)密度為1.1～1.6(80℃)的稠膏，85℃以下干燥，粉碎，過篩，即得。
實(shí)施例2膠囊劑的制備制法實(shí)施例1得到的細(xì)粉為藥物活性物質(zhì)提取物，按藥用劑型添加輔料，制成膠囊劑1000粒、實(shí)施例3片劑的制備制法實(shí)施例1得到的細(xì)粉為藥物活性物質(zhì)提取物，按藥用劑型添加輔料，制成片劑1000片。
實(shí)施例4顆粒劑的制備制法實(shí)施例1得到的細(xì)粉為藥物活性物質(zhì)提取物，按藥用劑型添加輔料，制成沖劑250袋。
實(shí)施例5口服液的制備制法實(shí)施例1得到的細(xì)粉為藥物活性物質(zhì)提取物，按藥用劑型添加輔料，制成口服液1000支。
實(shí)施例6丸劑的制備制法實(shí)施例1得到的細(xì)粉為藥物活性物質(zhì)提取物，按藥用劑型添加輔料，制成丸劑1000丸。
權(quán)利要求
1.一種中藥制劑，由含有活性成分提取物和藥物可接受的輔料組成，其特征在于，所述含有活性成分提取物是由百合科植物劍葉龍血樹的藥用部位為原料，經(jīng)過提取步驟制備成的。
2.權(quán)利要求1的制劑，其中劍葉龍血樹的藥用部位選自，劍葉龍血樹的根、莖、含脂木材、樹脂。
3.權(quán)利要求1的制劑，是適合服用的各種劑型。
4.權(quán)利要求3的制劑是片劑、膠囊劑、口服液、糖漿劑、顆粒劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、注射劑、栓劑、霜?jiǎng)?、噴霧劑、滴丸劑、貼劑、緩釋制劑、控釋制劑。
5.權(quán)利要求1的制劑在制備預(yù)防和/或治療心腦血管疾病的藥物中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求1的制劑的制備方法，其特征在于，經(jīng)過以下步驟，a.將劍葉龍血樹的藥用部位粉碎，b.用水或堿性有機(jī)溶劑提取，c.回收溶劑，提取液調(diào)節(jié)pH值到酸性，濾過，d.沉淀加水洗滌至中性，干燥，加有機(jī)溶劑提取，e.回收有機(jī)溶劑，提取液濃縮，干燥，粉碎得藥物活性成分；f.以步驟e制得的藥物活性成分為原料，按常規(guī)方法制成制劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的制備方法，所述有機(jī)溶劑選自，乙醇、丙酮、甲醇、正丁醇、醋酸乙酯，所述提取選自，浸提、超聲提取、微波提取、超臨界提取。
8.根據(jù)權(quán)利要求6的制備方法，其特征在于，所述堿性有機(jī)溶劑是0.2‰～0.7‰氫氧化鈉的25～75％乙醇，所述調(diào)PH到酸性是用5～20％的鹽酸調(diào)節(jié)pH值為1～3。步驟d中的有機(jī)溶劑是醋酸乙酯。
9.根據(jù)權(quán)利要求6的制備方法，其特征在于，步驟a中的粉碎是粉碎成粗粉；步驟b中的堿性有機(jī)溶劑提取是加含0.2‰～0.7‰氫氧化鈉的25～75％乙醇回流提取二次，每次加4～14倍量，每次0.5～2小時(shí)，濾過，濾液合并；步驟c中回收溶劑，提取液調(diào)節(jié)pH值到酸性，濾過是回收乙醇，至無醇味，放冷，加5～20％的鹽酸調(diào)節(jié)pH值為1～3，放置6～18小時(shí)，濾過；步驟d中的沉淀加水洗滌至中性，干燥，加有機(jī)溶劑提取是沉淀加水洗滌至中性，干燥，粉碎成粗粉，加醋酸乙酯回流提取二次，每次加3～12倍量，每次0.5～2小時(shí)，濾過，濾液合并；步驟e中的回收有機(jī)溶劑，提取液濃縮，干燥，粉碎得藥物活性成分是回收醋酸乙酯并減壓濃縮至相對(duì)密度在80℃下為1.1～1.6的稠膏，85℃以下干燥，粉碎，過篩，得藥粉；步驟f中的以步驟e制得的藥物活性成分為原料，按常規(guī)方法制成制劑是以藥粉為原料加入藥物輔料制成藥物制劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的制劑的質(zhì)量控制方法，包括以下步驟a.鑒別b.檢查c.含量測定其中鑒別采用以下方法(1)取片劑或膠囊劑約0.5g，加氯仿10ml，振搖10分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液，另取龍血素A和龍血素B對(duì)照品，加氯仿制成每1ml各含0.25mg的溶液，作為對(duì)照品溶液，按照中國藥典2000年版一部附錄VIB規(guī)定的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠GF254薄層板上，以比例為8∶3∶1石油醚-酯酸乙酯-丙酮為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)取片劑或膠囊劑約5mg，加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液，另取7，4’-二羥基黃酮對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。按照中國藥典2000年版一部附錄VIB規(guī)定的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以比例為8∶1氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；其中檢查采用以下方法(1)干燥失重取片劑或膠囊劑1.0g，在105℃干燥至恒重，減失重量不得過5.0％(中國藥典2000年版一部附錄IXG)；(2)熾灼殘?jiān)∑瑒┗蚰z囊劑1.0g，依法檢查(中國藥典2000年版一部附錄IXJ)，遺留殘?jiān)坏眠^3.0％；(3)重金屬取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?，依法檢查(中國藥典2000年版一部附錄IXE第二法)，含重金屬不得過百萬分之二十；其中含量測定采用以下方法對(duì)于總酚，含量測定的方法為(1)7，4’-二羥基黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取干燥至恒重的7，4’-二羥基黃酮對(duì)照品10mg，置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作儲(chǔ)備液。取儲(chǔ)備液2ml，置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作對(duì)照品溶液。分別精密量取0ml，1.0ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml，3.0ml，置25ml量瓶中，分別加無水乙醇5.0ml，4.0ml，3.5ml，3.0ml，2.5ml和2.0ml。再分別依次加入0.1％～1％的十二烷基磺酸鈉溶液2ml，0.1％～2％的鐵氰化鉀溶液1ml，0.1％～2％三氯化鐵1ml，搖勻，至暗處放置2～10min后，加0.1M的鹽酸定容至刻度，再至暗處放置20～35min。按照中國藥典2000年版一部附錄VB規(guī)定的分光光度法，以0號(hào)樣品為空白對(duì)照，在780±5nm處測定吸收度，在以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；(2)測定精密稱取片劑或膠囊劑10mg，置25ml量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液1ml，置25ml量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密吸取供試驗(yàn)品溶液5ml，置25ml量瓶中，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法，自“依次加入0.1％～1％的十二烷基磺酸鈉溶液2ml”起，依法測定，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出重量，計(jì)算，即得，本品按干燥品計(jì)算，含總酚以7，4’-二羥基黃酮(C15H10O3)計(jì)算，不得少于50％；對(duì)于龍血素A和龍血素B，含量測定的的方法為(1)照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)測定；(2)色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-冰醋酸溶液(1→95)(33.5∶66.5)為流動(dòng)相；檢測波長為280nm。理論板數(shù)按龍血素A和龍血素B峰計(jì)算應(yīng)不低于3000；(3)對(duì)照品溶液的制備精密稱取80℃下減壓干燥至恒重的龍血素A和龍血素B對(duì)照品適量，分別加甲醇制成每1ml含0.01mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；(4)供試品溶液的制備取本品約40mg，精密稱定，加0.35％的氫氧化鈉溶液25ml，微熱使溶解，放冷，用醋酸乙酯振搖提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，用水25ml洗滌，分取醋酸乙酯提取液，蒸發(fā)至干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解，并轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；(5)測定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每1g含龍血素A(C17H18O4)，不得少于3.0mg；含龍血素B(C18H20O5)，不得少于4.0mg。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療心腦血管疾病的制劑及其制備方法和質(zhì)量控制方法，特別是涉及用劍葉龍血樹經(jīng)提取加工制成的中藥制劑。
文檔編號(hào)A61P9/00GK1628795SQ200410057398
公開日2005年6月22日 申請(qǐng)日期2004年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月31日
發(fā)明者鄒節(jié)明 申請(qǐng)人:桂林三金藥業(yè)股份有限公司