專利名稱：一種新的烏雞白鳳濃縮丸及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新的烏雞白鳳濃縮丸，其配方及制備工藝，特別是采用了膜分離技術(shù)、冷凍干燥技術(shù)、超微粉碎技術(shù)，采用壓制法或塑制法等工藝方法，使其在1000g丸劑中所包含的生藥量提高到原來的3-4倍。
背景技術(shù)：
烏雞白鳳丸出自明代龔云林的《壽世保元》，2000版中國藥典一部收載了該品種。全方以烏雞(去毛爪腸)、人參、鹿角膠、牡蠣(煅)、白芍、當(dāng)歸、甘草、黃芪、鱉甲(制)、香附(醋制)、天冬、桑螵蛸、熟地、生地、川芎、鹿角霜、銀柴胡、芡實(炒)、山藥、丹參組成，具有補氣養(yǎng)血、調(diào)經(jīng)止帶之功。用于氣血兩虛，身體瘦弱，腰膝酸軟，月經(jīng)不調(diào)，崩漏帶下，為傳統(tǒng)的婦科良藥。
而普通工藝制備的烏雞白鳳濃縮丸處方為烏雞(去毛爪腸)640g、人參128g、鹿角膠128g、牡蠣(煅)48g、白芍128g、當(dāng)歸144g、甘草32g、黃芪32g、鱉甲(制)64g、香附(醋制)128g、天冬64g、桑螵蛸48g、熟地黃256g、地黃256g、川芎64g、鹿角霜48g、銀柴胡26g、芡實(炒)64g、山藥128g、丹參128g，制備工藝為取黃芪、當(dāng)歸、川芎、白芍、與烏雞同置罐內(nèi)，加入黃酒2000g，加蓋密閉，蒸至烏雞爛后撈出，雞湯濃縮至適量，拌入桑螵蛸、同上述藥物一起烘干后與香附、芡實、山藥、銀柴胡、鱉甲、鹿角霜、人參、特蠣、甘草、丹參、及鹿角膠(取鹿角膠84g制鹿角膠珠)共制成細(xì)粉備用；取地黃、熟地黃、天冬加水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，放置后取上清液濃縮至相對密度為1.25-1.30(65℃)的清膏，并將鹿角膠44g烊化后加入混勻，得濃縮液，上述藥粉用濃縮液泛丸，干燥，即得1000g的濃縮丸。該工藝制備的濃縮丸服用量大(一次9g，一日一次)、吸收慢、口味不佳。我們通過采用膜分離技術(shù)，除去藥材中大量的雜質(zhì)，減少烏雞白鳳丸的服用劑量，降低藥物毒副作用，改善口感；通過應(yīng)用冷凍干燥技術(shù)，改善難粉碎藥材的物理性質(zhì)，使其易于粉碎；通過運用超微粉碎技術(shù)，提高烏雞白鳳丸的某些藥理作用指標(biāo)。經(jīng)上述工藝改進(jìn)制備的烏雞白鳳丸臨床療效有所提高，副作用減少。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種新的烏雞白鳳丸配方，配方如下烏雞(去毛爪腸)1920g-2560g、人參384g-512g、鹿角膠384g-512g、牡蠣(煅)144g-192g、白芍384g-512g、當(dāng)歸432g-576g、甘草96g-128g、黃芪96g-128g、鱉甲(制)192g-256g、香附(醋制)384g-512g、天冬192g-256g、桑螵蛸144g-192g、熟地黃768g-1024g、地黃768g-1024g、川芎192g-256g、鹿角霜144g-192g、銀柴胡78g-104g、芡實(炒)192g-256g、山藥384g-512g、丹參384g-512g，優(yōu)選的是烏雞(去毛爪腸)1920g、人參384g、鹿角膠384g、牡蠣(煅)144g、白芍384g、當(dāng)歸432g、甘草96g、黃芪96g、鱉甲(制)192g、香附(醋制)384g、天冬192g、桑螵蛸144g、熟地黃768g、地黃768g、川芎192g、鹿角霜144g、銀柴胡78g、芡實(炒)192g、山藥384g、丹參384g，以及，烏雞(去毛爪腸)2560g、人參512g、鹿角膠512g、牡蠣(煅)192g、白芍512g、當(dāng)歸576g、甘草128g、黃芪128g、鱉甲(制)256g、香附(醋制)512g、天冬256g、桑螵蛸192g、熟地黃1024g、地黃1024g、川芎256g、鹿角霜192g、銀柴胡104g、芡實(炒)256g、山藥512g、丹參512g、以上配方中，藥物的量是以生藥量計算的，上述量可以制備成1000g左右的本發(fā)明的濃縮丸制劑。
以上量藥材，在進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)時可增加它們的量，但它們之間的比例不變，對于特殊病人，可適當(dāng)增加或減少其中某個或某些藥材的量，以適應(yīng)這些病人的需要，但增加或減少的量以仍然具有組方的特性功能為準(zhǔn)，一般不超過上述量的一倍。
本發(fā)明還提供用以上配方制備烏雞白鳳濃縮丸的制備方法，包括以下步驟a、將處方中含揮發(fā)油的植物藥材(當(dāng)歸、香附、川芎)經(jīng)水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，提取后揮發(fā)油后的上述藥材，并入步驟b再提?。籦、將人參、白芍、當(dāng)歸、甘草、黃芪、香附(醋制)、天冬、熟地黃、地黃、川芎、銀柴胡、丹參，用水或醇提取有效成分，所得提取液濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥得干粉；c、將處方中烏雞(去毛爪腸)、鹿角膠、牡蠣(煅)鱉甲(制)、桑螵蛸、鹿角霜經(jīng)黃酒炮制蒸干，與山藥、芡實粗粉混合，經(jīng)冷凍干燥后，再經(jīng)超微粉碎得微粉；d、將揮發(fā)油，用天然高分子材料為囊材，經(jīng)微囊化技術(shù)制備成微囊，洗滌低溫干燥后制成微囊粉，或揮發(fā)油不制成干燥微囊粉，待用；e、將步驟b的干粉、步驟c的微粉、步驟d的微囊粉混合均勻，得混合粉，或?qū)⒉襟Eb的干粉、步驟c的微粉混合均勻，將步驟d的待用揮發(fā)油噴入，密閉一段時間，得混合粉；f、將步驟e的混合粉用壓丸機壓制成丸，干燥、打光即得濃縮丸成品。以上步驟可分為兩種工藝，工藝A和工藝B，其中的工藝A如下1、將處方中含揮發(fā)油的植物藥材(當(dāng)歸、香附、川芎)經(jīng)水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油后，再將人參、白芍、當(dāng)歸、甘草、黃芪、香附(醋制)、天冬、熟地黃、地黃、川芎、銀柴胡、丹參等十二味植物類藥材，提取有效成分，所得提取液經(jīng)納濾膜濃縮后得濃縮液，再經(jīng)冷凍干燥得干粉。
2、將處方中烏雞(去毛爪腸)、鹿角膠、牡蠣(煅)鱉甲(制)、桑螵蛸、鹿角霜等六味動物類藥材經(jīng)黃酒炮制蒸干，與山藥、芡實粗粉混合，經(jīng)冷凍干燥后，再經(jīng)超微粉碎得微粉；3、將另提的揮發(fā)油，用天然高分子材料為囊材，經(jīng)微囊化技術(shù)制備成微囊，洗滌低溫干燥后得微囊粉；4、將干粉、微粉、微囊粉混合均勻，用壓丸機壓制成丸，干燥、打光即得濃縮丸成品。
工藝B如下1、將處方中含揮發(fā)油的植物藥材(當(dāng)歸、香附、川芎)經(jīng)水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油后，人參、白芍、當(dāng)歸、甘草、黃芪、香附(醋制)、天冬、熟地黃、地黃、川芎、銀柴胡、丹參等植物類藥材(山藥、芡實除外)，提取有效成分，所得提取液經(jīng)納濾膜濃縮后得濃縮液，再經(jīng)冷凍干燥得干粉；2、將處方中動物類藥材經(jīng)黃酒炮制蒸干后，與山藥、芡實粗粉混合，經(jīng)冷凍干燥后，再經(jīng)超微粉碎得微粉；
3、將以上微粉、干粉混勻，將另提的揮發(fā)油噴入，密閉2-6小時；4、用制丸機制丸，干燥、打光，即得濃縮丸成品。
以上提取步驟可采用水提或醇提，也可采用水提醇沉或醇提水沉，所述醇優(yōu)選的為醫(yī)藥用的乙醇，濃度可為30％-100％。所述天然高分子材料為明膠、阿拉伯膠。所述微囊化技術(shù)，是常規(guī)技術(shù)，可采用以下技術(shù)，將所提揮發(fā)油與4％阿拉伯膠溶液(體積比為1∶25)倒入組織搗碎機中，高速攪拌1分鐘制得揮發(fā)油乳濁液，將4％明膠溶液(與阿拉伯膠等量體積)與乳濁液混合，攪拌10分鐘，置37℃水浴中，不斷攪拌，滴加10％醋酸溶液適量。調(diào)PH值為4，加入酸化蒸餾水(PH值4.5)200毫升稀釋，不斷攪拌降溫至25℃，再置冰浴中降溫至10℃以下，加37％甲醛，并用20％氫氧化鈉調(diào)PH值為8-9，繼續(xù)攪拌1小時。靜置，傾去上清液，微囊用蒸餾水洗至無甲醛味，低溫干燥即得揮發(fā)油微囊粉。所述的超微粉碎可采用流能磨超微粉碎，所得的微粉粒度為3-20μm。
本發(fā)明的制劑為老的已經(jīng)上市的制劑服用劑量的1/3-1/4，極大的減少服用量，方便服用。本發(fā)明收集原料藥材的揮發(fā)油成分，更好的利用了原料藥材的有效成分，保證藥物療效，用水提或醇提法并經(jīng)過納濾膜濃縮可除去其中的纖維素、蛋白質(zhì)、果膠、樹膠等無效的大分子有機雜質(zhì)，可減少副作用，增強臨床使用療效。
以下通過實驗說明本發(fā)明的有益效果。
藥理藥效比較實驗我們對烏雞白鳳丸(濃縮丸)實施例1(工藝A)、實施例2(工藝B)、老的普通工藝的三種制劑的補氣養(yǎng)血、調(diào)經(jīng)止血等藥理藥效以及毒性方面作用進(jìn)行了以下比較研究。
材料和方法1.1實驗材料1.1.1動物 昆明種健康小白鼠，體重18-22g，雄雌各半，隨機分組，由江西醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供，合格證號021-9601。Wistar大鼠，體重200-250g，雄雌各半，隨機分組，由江西醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供，合格證號021-9602。
1.1.2藥物烏雞白鳳丸(濃縮丸)實施例1(工藝A)、實施例2(工藝B)及普通工藝濃縮丸等由匯仁集團(tuán)有限公司購買，實驗前稱取一定量，加水溶解至所需濃度，冰箱保存，供實驗用。
注射用環(huán)磷酰胺0.2g×5瓶，成人0.2g，每日一次，江西恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，批號01092821。取環(huán)磷酰胺1瓶(200mg)，加注射用水至50ml，現(xiàn)配現(xiàn)用；都氏試劑碳酸氫鈉1.0g，氰化鉀0.05g高鐵氰化鉀0.2g，蒸餾水1000ml，測血紅蛋白用。
1.1.3主要儀器，電子秒表，上海手表三廠生產(chǎn)；721分光光度計，上海分析儀器廠生產(chǎn)；光學(xué)顯微鏡，日本產(chǎn)(奧林巴斯)。
1.2實驗方法與結(jié)果1.2.1對急性失血性小鼠血虛模型的影響取小白鼠，立即鼠尾采血測定Hb值(氰化高鐵血紅蛋白測定法)及RBC數(shù)(光學(xué)顯微鏡法)[2]，后將鼠尾傷口浸入37℃左右溫水中，放血約0.5ml，造成急性失血性血虛模型。于失血后24小時，鼠尾采血測定Hb及RBC值，分別灌胃給藥，連續(xù)7天，每日1次，末次給藥后24小時鼠尾采血測定Hb及RBC。結(jié)果表明失血后小白鼠Hb、RBC值均顯著低于失血前(P＜0.01＝。烏雞白鳳濃縮丸工藝A、工藝B及普通工藝組均能顯著促進(jìn)失血小白鼠的Hb及RBC值的恢復(fù)(P＜0.05＝。各制劑之間的作用類同。具體結(jié)果見表1、2。
表1 烏雞白鳳濃縮丸等對急性失血性血虛模型小鼠Hb的影響(g％)劑量組別動物數(shù)g 生藥/kg失血前 失血后 治療后空白對照組16- 10.32±1.757.71±0.938.29±1.04普通工藝 14 18.09.85±1.07 7.49±1.049.83±1.57▲工藝A低劑量 15 9.0 10.46±1.637.75±0.999.92±1.33▲工藝A高劑量 16 18.09.72±1.84 7.33±0.899.81±1.31▲工藝B低劑量 15 9.0 9.89±1.56 7.23±0.929.78±1.22▲工藝B高劑量 14 18.010.21±1.387.50±0.619.97±1.06▲與空白(給生理鹽水)對照組相比，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。下同。
表2烏雞白鳳濃縮丸等對急性失血性血虛模型小鼠RBC的影響(×1012)劑量組別動物數(shù)g 生藥/kg失血前失血后治療后空白對照組16- 7.32±0.815.74±0.616.84±0.75▲普通工藝 14 18.06.98±0.935.83±0.797.63±0.88▲工藝A低劑量 15 9.0 7.15±1.016.26±0.687.59±0.66▲工藝A高劑量 16 18.06.96±0.685.43±0.547.49±0.51▲工藝B低劑量 15 9.0 7.03±0.875.57±0.537.32±0.56▲工藝B高劑量 14 18.07.12±0.675.42±0.687.45±0.58▲1.2.2對小白鼠游泳時間的影響取小白鼠，分別灌胃給藥，連續(xù)7天，每日1次.末次給藥前禁食12小時，自由飲水。末次給藥后60分鐘，將每只鼠尾負(fù)重2g回形針，放于水槽(水深25cm，水溫20±0.5℃)中。計算動物自落水開始鼻孔沉入水中10秒不能浮出水面的時間(秒)，作為小鼠游泳時間指標(biāo)。結(jié)果表明烏雞白鳳濃縮丸工藝A、工藝B的高低劑量組均可明顯延長小鼠的游泳時間，但普通工藝組不能延長小鼠的游泳時間，工藝A、工藝B的作用均優(yōu)于普通工藝組。具體結(jié)果見表3。
表3烏雞白鳳濃縮丸等對小白鼠游泳時間的影響組別 動物數(shù)劑量(g生藥/kg)游泳時間(S)空白對照組 15- 387.40±194.67普通工藝 14 18.0403.07±240.23工藝A低劑量10 9.0 657.76±253.75▲☆★工藝A高劑量13 18.0714.90±187.06▲▲☆☆★★工藝B低劑量14 9.0 632.74±213.35▲☆★工藝B高劑量12 18.0684.09±166.60▲▲☆☆★★與普通工藝濃縮丸組相比，★P＜0.05，★★P＜0.01下同1.2.3對小白鼠常壓耐缺氧的影響取小白鼠，分別灌胃給藥，連續(xù)5天，每日1次給藥后60分鐘將小鼠放于125ml廣口瓶中，封口，立即計時，記錄動物死亡時間(秒)。結(jié)果表明烏雞白鳳濃縮丸工藝A、工藝B、普通工藝組均能顯著延長小白鼠常壓缺氧死亡時間，其中工藝B高劑量的作用最為明顯，且其作用優(yōu)于普通工藝組。具體結(jié)果見表4。
表4烏雞白鳳濃縮丸等對小鼠常壓耐缺氧時間的影響組別動物數(shù) 劑量(g生藥/Kg)耐缺氧時間(S) 延長百分率(％)空白對照組16 - 634.07±102.47普通工藝 1618.0 803.06±123.10 12.66A工藝低 169.0 836.50±127.13▲13.19A工藝高 1618.0 863.40±153.96▲13.61B工藝低 169.0 860.51±137.13▲13.57B工藝高 1618.0 988.44±154.06▲▲☆★15.581.2.4對環(huán)磷酰胺所致小鼠白細(xì)胞降低的影響取小鼠，常規(guī)分組外加設(shè)環(huán)磷酰胺模型組，給藥前先測外周血正常白細(xì)胞總數(shù)后，按組分別灌胃藥物或生理鹽水，連續(xù)7天。給藥后第4天，除空白對照組外，其余均腹腔注射環(huán)磷酰胺100mg/kg，再繼續(xù)灌胃藥物或生理鹽水，注射環(huán)磷酰胺后第4、7天分別重復(fù)測查外周血白細(xì)胞總數(shù)。結(jié)果表明環(huán)磷酰胺可使小鼠白細(xì)胞(WBC)明顯降低(與給環(huán)磷酰胺前及與空白對照組比較，均為P＜0.01＝，烏雞白鳳濃縮丸工藝A、工藝B和普通工藝對環(huán)磷酰胺所致小鼠白細(xì)胞總數(shù)低下，均有明顯的提升作用；其中工藝A高劑量的作用最為明顯，其作用明顯優(yōu)于普通工藝組。結(jié)果見表5。
表5烏雞白鳳濃縮丸等對環(huán)磷酰胺所致小刀WBC降低的作用(×109)組別 動物數(shù)劑量給環(huán)磷 給環(huán)磷酰給環(huán)磷酰g生藥/kg 酰胺前 胺后4天 胺后7天空白對照組 14 - 5.7±1.15.8±1.45.9±1.5環(huán)磷酰胺模型組 14 - 5.7±2.12.9±0.43.5±0.4普通工藝 16 18.05.8±1.12.3±0.44.8±0.6※A工藝低 14 9.0 5.7±2.03.6±0.3※4.4±0.3※A工藝高 14 18.06.1±1.24.3±0.4※※★☆6.6±0.5※※★☆B工藝低 16 9.0 5.9±1.43.1±0.24.5±0.9※B工藝高 13 18.06.0±1.43.8±0.4※5.2±0.5※與環(huán)磷酰胺模型組相比較，※P＜0.05，※※P＜0.01。下同。
1.2.5 對環(huán)磷酰胺所致小鼠胸腺系數(shù)、脾指數(shù)和腎上腺系數(shù)的影響分組及給藥方法等同1.2.4，動物在注射環(huán)磷酰胺第7天并取血后處死，取胸腺、脾臟和腎上腺稱重，計算胸腺系數(shù)、脾指數(shù)和腎上腺系數(shù)，結(jié)果表明環(huán)磷酰胺可使小鼠的胸腺系數(shù)、脾指數(shù)和腎上腺上腺系數(shù)明顯降低(與空白對照組比較，均為P＜0.01＝，烏雞白鳳濃縮丸工藝A、工藝B和普通工藝等對環(huán)磷酰胺所致小鼠胸腺系數(shù)、脾指數(shù)和腎上腺系數(shù)的降低等均無明顯影響。結(jié)果見表6。
表6烏雞白鳳濃縮丸等對環(huán)磷酰胺所致小鼠胸腺系數(shù)、脾指數(shù)和腎上腺系數(shù)降低的影響(mg/g)組別動物 劑量 胸腺系數(shù) 脾指數(shù) 腎上腺系數(shù)數(shù)(g生藥/kg)空白對照組 14-2.97±0.543.32±0.85 0.45±0.12環(huán)磷酰胺模型組 14-1.85±0.432.31±0.81 0.30±0.09普通工藝 16 18.0 1.57±0.442.33±0.43 0.49±0.86A工藝低 14 9.0 1.91±0.472.30±0.40 0.30±0.11A工藝高 14 18.0 1.68±0.732.24±0.51 0.35±0.10B工藝低 16 9.0 2.11±0.752.49±0.65 0.38±0.13B工藝高 13 18.0 2.02±0.692.59±1.05 0.31±0.091.2.6對小鼠出血時間的影響取小白鼠，給藥同上，連續(xù)給藥7天，末次給藥后1小時，將小鼠斷尾3mm，待血液自行流出開始計時，每隔30s用濾紙吸去血液1次，直至出血自然停止，計算各組出血時間。結(jié)果表明烏雞白鳳濃縮丸工藝A、工藝B和普通工藝等均能明顯縮短正常小鼠出血時間，各制劑之間的作用無明顯差異。具體結(jié)果見表7。
表7烏雞白鳳濃縮丸對小鼠出血時間的影響(min)組別 動物數(shù)劑量(g生藥/kg)出血時間抑制率(％)空白對照組 14-5.8±1.4普通工藝 14 18.0 4.1±0.9▲29.3工藝A低劑量12 9.04.4±0.8▲24.1工藝A高劑量14 18.0 4.1±1.2▲29.3工藝B低劑量12 9.04.3±0.9▲25.8工藝B高劑量14 18.0 4.2±1.1▲27.61.2.7 對小鼠碳粒廓清能力的影響末次給藥后30分鐘，尾靜脈注射印度墨汁0.1ml/10g體重，于注射后第2、8分鐘用吸管(預(yù)先用肝素溶液濕潤)，分別從眶后靜脈叢取血20μl，溶于2ml 0.1％Na2CO3溶液中搖勻，置721型分光光度計在波長640nm下比色，測定光密度OD值，計算K和a，結(jié)果表明烏雞白鳳濃縮丸工藝A、工藝B和普通工藝等均能明顯提高小鼠碳粒廓清能力(P＜0.05)，提示烏雞白鳳濃縮丸等對免疫功能有一定的增強作用；其中工藝A高劑量、工藝B高劑量的作用最為明顯(P＜0.01)，且其作用明顯優(yōu)于普通工藝組。結(jié)果見表8。
表8烏雞白鳳濃縮丸等對小鼠碳粒廓清功能影響組別 劑量(g生藥/kg) Ka空白對照組- 0.015±0.012 5.25±1.10普通工藝 18.00.026±0.012▲6.38±1.10A工藝低 9.0 0.033±0.016▲6.39±0.53A工藝高 18.00.042±0.013▲▲★☆7.83±1.10B工藝低 9.0 0.032±0.009▲6.83±1.19▲B工藝高 18.00.041±0.012▲▲★☆7.75±1.10▲▲★☆1.2.8對小鼠的鎮(zhèn)痛作用觀察取小白鼠，分別灌胃給藥，連續(xù)5天，每日1次，空白組和陽性對照組給同體積的生理鹽水，第六天繼續(xù)灌胃給藥(此時間性對照組給度冷丁)，一小時后腹腔注射0.6％的冰醋本2ml/只，立即記時并注意觀察小鼠的機體活動情況，觀察并記錄小鼠從給冰醋酸至產(chǎn)生扭體反應(yīng)的時間和15分鐘內(nèi)小鼠產(chǎn)生扭體反應(yīng)的次數(shù)，結(jié)果表明烏雞白鳳濃縮丸工藝A、工藝B及普通工藝組不能明顯延長冰醋酸引起疼痛反應(yīng)的潛伏期，但工藝A和工藝B組均能顯著減少小鼠產(chǎn)生扭體反應(yīng)的次數(shù)，其中工藝B高劑量的作用最為明顯，其作用優(yōu)于普通工藝組，具體結(jié)果見表9。
表9烏雞白鳳濃縮丸等對小鼠鎮(zhèn)痛作用的觀察組別動物數(shù) 劑量(g生藥/kg) 潛伏期(min) 扭體次數(shù)空白對照組14 - 5.22±0.93 11.75±4.58度冷丁140.8 9.03±3.62▲▲2.60±2.03▲▲☆☆★★普通工藝 1218.0 6.27±1.73 8.78±3.77
工藝A低劑量139.05.50±1.457.66±3.68▲工藝A高劑量1218.0 4.83±2.177.45±3.03▲工藝B低劑量149.05.05±2.837.78±4.12▲工藝B高劑量1318.0 5.25±1.365.78±2.63▲▲☆★1.2.9對大鼠離體子宮平滑肌的影響調(diào)節(jié)電子水浴鍋，保持恒溫，麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)的臺氏液為30ml，保持37±0.5℃；調(diào)整張力換能器，氧氣發(fā)生器、BL-410生物信號采集處理系統(tǒng)等。
離體子宮平滑肌的制備取250-280g的雌性大鼠，拉脫頸椎處死，立即剖開腹腔，取出子宮置入盛有冷的史密期液中，沿子宮壁分離脂肪，將子宮剪成2cm左右的段。
將子宮管兩端穿線結(jié)扎，一端第于通氣鉤上，另一端系于肌張力換能器上，連接記錄儀。通氣調(diào)節(jié)速度為1-2個氣泡/s(以不影響子宮平滑肌的自主舒縮運動為度)；觀察正常子宮平滑肌運動，待舒縮穩(wěn)定后，描記一段平滑肌的正常曲線，然后分別向浴槽中加入各種藥液0.3ml觀察子宮平滑肌的活動情況，描記舒縮曲線；每種藥液做10個標(biāo)本，電腦自動分析給藥后15分鐘的子宮活動頻率，結(jié)果表明烏雞白鳳濃縮丸工藝A、工藝B和普通工藝等均能明顯增加正常大鼠離體子宮平滑肌的活動上頻率，但各制劑之間的作用無明顯差異。具體結(jié)果見表10。
表10烏雞白鳳濃縮丸對大鼠離體子宮平滑肌的影響組別 樣本數(shù)劑量(g生藥/ml)頻率(次/min)空白對照組 10 -1.77±0.22普通工藝 10 0.009 3.22±0.27▲工藝A低劑量10 0.0045 2.98±0.40▲工藝A高劑量10 0.009 3.21±0.55▲工藝B低劑量10 0.0045 3.14±0.45▲工藝B高劑量10 0.009 3.36±0.58▲烏雞白鳳濃縮丸工藝A、工藝B和普通工藝等藥理藥效試驗研究的結(jié)果表明，在生藥給藥量相同的情況下，使用工藝A、工藝B除去藥材中大量的雜質(zhì)，大大減少服用劑量，使其減少到原有劑量的1/4后，所制得的濃縮丸劑與普通工藝一樣，仍具有明顯的補血止血、抗應(yīng)激、鎮(zhèn)痛和增強免疫功能等作用，有一定的促進(jìn)子宮收縮的能力，而且與普通工藝制備的烏雞白鳳濃縮丸相比，工藝A在抗應(yīng)激的延長小鼠游泳時間、提升環(huán)磷酰胺所致小鼠WBC降低和增強免疫功能等方面的作用更為明顯；工藝B在抗應(yīng)激的延長小鼠游泳時間和耐缺氧、以及鎮(zhèn)痛作用、增強免疫功能等方面的作用更為明顯。
此外，我們還對烏雞白鳳濃縮丸做了急性毒性試驗(MTD法)研究。在小鼠灌胃給藥未測出LD50的情況下，24小時內(nèi)灌胃三次，測得小鼠灌胃A、B兩種工藝濃縮丸最大給藥量為420g/kg，相當(dāng)于擬臨床人用量的1200倍，為普通工藝制備的烏雞白鳳濃縮丸的4倍。
此試驗表明A、B兩種工藝濃縮丸能顯著降低藥物的毒副作用。
臨床研究烏雞白鳳濃縮丸主要由烏雞、人參、山藥、當(dāng)歸、熟地等藥物組成，具有補氣養(yǎng)血、調(diào)經(jīng)止帶之功，主要適用于婦女氣血虧損、陰精不足而致婦科諸癥，并且近年來涌現(xiàn)了一些新用法，如內(nèi)科用于血小板減少癥、再生障礙性貧血、男性乳房增生性疾病、神經(jīng)性耳鳴等癥，男性科用于精液不液化、陽痿等，此外還在皮膚科、眼科有所應(yīng)用。為觀察其療效，我們對工藝A、B烏雞白鳳濃縮丸進(jìn)行以下臨床研究。
一、婦科疾病

顯效癥狀消失，體征檢查均 恢復(fù)正?；驕p輕好轉(zhuǎn)癥狀及體征均減輕。
無效治療后癥狀，體征，檢查均改善。
二、男性精液不液化

治愈配偶懷孕。
顯效配偶雖末懷孕，但精液常規(guī)檢查連續(xù)2次均出現(xiàn)液化時間30min內(nèi)，精液、前列腺液有關(guān)指標(biāo)均正常。
有效治療后精液液化時間和粘稠度較治療前明顯縮短，精液、前列腺液有關(guān)指標(biāo)明顯好轉(zhuǎn)。
無效治療前后以上指標(biāo)無變化。
三、血小板減少癥

治愈臨床癥狀消失，BPC計數(shù)，BT CT\ BT、CT、毛細(xì)血管脆性試驗恢復(fù)正常。隨訪無復(fù)發(fā)。
有效臨床癥狀消失，2年內(nèi)復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)后每次用藥仍有效。
無效臨床指標(biāo)無變化。
通過對以上的臨床研究表明烏雞白鳳濃縮丸工藝A、工藝B、普通工藝對婦科、男性病等疾病都有明顯的療效，而工藝而工藝A臨床總有效率比工藝B較高。
具體實施例方式以下通過實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實施例11、配方參照《中華人民共和國藥典》411頁(2000版)“烏雞白鳳丸”所規(guī)定的藥材及用量比例，處方定為烏雞(去毛爪腸)2560g、人參512g、鹿角膠512g、牡蠣(煅)192g、白芍512g、當(dāng)歸576g、甘草128g、黃芪128g、鱉甲(制)256g、香附(醋制)512g、天冬256g、桑螵蛸192g、熟地黃1024g、地黃1024g、川芎256g、鹿角霜192g、銀柴胡104g、芡實(炒)256g、山藥512g、丹參512g、制得1000g濃縮丸成品。
1、制備工藝含揮發(fā)油的植物藥材(當(dāng)歸、香附、川芎)經(jīng)水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油后，與其他植物藥材(人參、黃芪、白芍、天冬、甘草、地黃、熟地黃、銀柴胡、丹參)一起分別用水為溶媒提取水溶性有效成分，提取液經(jīng)納濾膜濃縮(壓力為15-20kg)得濃縮液(相對密度1.0-1.1)，再經(jīng)冷凍干燥約25-36小時得干粉備用；動物藥材(烏雞、鹿角膠、牡蠣、鱉甲、桑螵蛸、鹿角霜)加黃酒(約1∶1)炮制蒸干約24小時，與山藥、芡實粗粉混合，經(jīng)冷凍干燥32-36小時，含水量控制在3％以下，再經(jīng)流能磨超微粉碎得微粉(粒度為3-20μm)。將所提揮發(fā)油與4％阿拉伯膠溶液(體積比為1∶25)倒入組織搗碎機中，高速攪拌1分鐘制得揮發(fā)油乳濁液，將4％明膠溶液(與阿拉伯膠等量體積)與乳濁液混合，攪拌10分鐘，置37℃水浴中，不斷攪拌，滴加10％醋酸溶液適量。調(diào)PH值為4，加入酸化蒸餾水(PH值4.5)200毫升稀釋，不斷攪拌降溫至25℃，再置冰浴中降溫至10℃以下，加37％甲醛，并用20％氫氧化鈉調(diào)PH值為8-9，繼續(xù)攪拌1小時。靜置，傾去上清液，微囊用蒸餾水洗至無甲醛味，低溫干燥即得揮發(fā)油微囊粉。將上述微粉、干粉、揮發(fā)油微囊粉混合均勻，用壓丸機壓制成丸，干燥、打光，即得濃縮丸成品。
實施例21、配方與實施例1相同2、制備工藝含揮發(fā)油的植物藥材(當(dāng)歸、香附、川芎)經(jīng)水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油后，與其他植物藥材(人參、黃芪、白芍、天冬、甘草、地黃、熟地黃、銀柴胡、丹參)一起分別用水為溶媒提取水溶性有效成分，提取液經(jīng)納濾膜濃縮(壓力為15-20kg)得濃縮液(相對密度1.0-1.1)，再經(jīng)冷凍干燥約25-36小時得干粉備用；動物藥材(烏雞、鹿角膠、牡蠣、鱉甲、桑螵蛸、鹿角霜)加黃酒(約1∶1)，密閉，蒸煮約24小時，取蒸煮稠膏，與山藥、芡實粗粉混合，經(jīng)冷凍干燥32-36小時，含水量控制在3％以下，再經(jīng)流能磨超微粉碎得微粉(粒度為3-20μm)，將以上微粉、干粉混合均勻，噴入揮發(fā)油密閉約4小時，用制丸機制丸，干燥、打光即得濃縮丸成品。
實施例31、配方與實施例1相同2、制備工藝含揮發(fā)油的植物藥材(當(dāng)歸、香附、川芎)經(jīng)水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油后，與其他植物藥材(人參、黃芪、白芍、天冬、甘草、地黃、熟地黃、銀柴胡、丹參)一起用95％乙醇為溶媒提取酯溶性有效成分，提取液經(jīng)納濾膜濃縮(壓力為15-20kg)得濃縮液(相對密度1.0-1.1)，再經(jīng)冷凍干燥約25-36小時得干粉備用；動物藥材(烏雞、鹿角膠、牡蠣、鱉甲、桑螵蛸、鹿角霜)加黃酒(約1∶1)，密閉，蒸煮約24小時，取蒸煮稠膏，與山藥、芡實粗粉混合，經(jīng)冷凍干燥32-36小時，含水量控制在3％以下，再經(jīng)流能磨超微粉碎得微粉(粒度為3-20μm)，將以上微粉、干粉混合均勻，噴入揮發(fā)油密閉約4小時，用制丸機制丸，干燥、打光即得濃縮丸成品。
實施例41、配方與實施例1相同2、制備工藝含揮發(fā)油的植物藥材(當(dāng)歸、香附、川芎)經(jīng)水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油后，與其他植物藥材(人參、黃芪、白芍、天冬、甘草、地黃、熟地黃、銀柴胡、丹參)一起用乙醇為溶媒提取酯溶性有效成分，提取液經(jīng)納濾膜濃縮(壓力為15-20kg)得濃縮液(相對密度1.0-1.1)，再經(jīng)冷凍干燥約25-36小時得干粉備用；動物藥材(烏雞、鹿角膠、牡蠣、鱉甲、桑螵蛸、鹿角霜)加黃酒(約1∶1)，密閉，蒸煮約24小時，取蒸煮稠膏，與山藥、芡實粗粉混合，經(jīng)冷凍干燥32-36小時，含水量控制在3％以下，再經(jīng)流能磨超微粉碎得微粉(粒度為3-20μm)，將以上微粉、干粉混合均勻，噴入揮發(fā)油密閉約4小時，用制丸機制丸，干燥、打光即得濃縮丸成品。
實施例51、配方參照《中華人民共和國藥典》411頁(2000版)“烏雞白鳳丸”所規(guī)定的藥材及用量比例，處方定為烏雞(去毛爪腸)1920gg、人參384g、鹿角膠384g、牡蠣(煅)144g、白芍384g、當(dāng)歸432g、甘草96g、黃芪96g、鱉甲(制)192g、香附(醋制)384g、天冬192g、桑螵蛸144g、熟地黃768g、地黃768g、川芎192g、鹿角霜144g、銀柴胡78g、芡實(炒)192g、山藥384g、丹參384g，制得1000g濃縮丸成品。
2、制備工藝含揮發(fā)油的植物藥材(當(dāng)歸、香附、川芎)經(jīng)水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油后，與其他植物藥材(人參、黃芪、白芍、天冬、甘草、地黃、熟地黃、銀柴胡、丹參)一起分別用水為溶媒提取水溶性有效成分，提取液經(jīng)納濾膜濃縮(壓力為15-20kg)得濃縮液(相對密度1.0-1.1)，再經(jīng)冷凍干燥約25-36小時得干粉備用；動物藥材(烏雞、鹿角膠、牡蠣、鱉甲、桑螵蛸、鹿角霜)加黃酒(約1∶1)炮制蒸干約24小時，與山藥、芡實粗粉混合，經(jīng)冷凍干燥32-36小時，含水量控制在3％以下，再經(jīng)流能磨超微粉碎得微粉(粒度為3-20μm)。將所提揮發(fā)油與4％阿拉伯膠溶液(體積比為1∶25)倒入組織搗碎機中，高速攪拌1分鐘制得揮發(fā)油乳濁液，將4％明膠溶液(與阿拉伯膠等量體積)與乳濁液混合，攪拌10分鐘，置37℃水浴中，不斷攪拌，滴加10％醋酸溶液適量。調(diào)PH值為4，加入酸化蒸餾水(PH值4.5)200毫升稀釋，不斷攪拌降溫至25℃，再置冰浴中降溫至10℃以下，加37％甲醛，并用20％氫氧化鈉調(diào)PH值為8-9，繼續(xù)攪拌1小時。靜置，傾去上清液，微囊用蒸餾水洗至無甲醛味，低溫干燥即得揮發(fā)油微囊粉。將上述微粉、干粉、揮發(fā)油微囊粉混合均勻，用壓丸機壓制成丸，干燥、打光，即得濃縮丸成品。
權(quán)利要求
1.一種新的烏雞白鳳濃縮丸，其特征在于，是由以下重量配比的中藥原料制備的，烏雞1920g-2560g、人參384g-512g、鹿角膠384g-512g、牡蠣144g-192g、白芍384g-512g、當(dāng)歸432g-576g、甘草96g-128g、黃芪96g-128g、鱉甲192g-256g、香附384g-512g、天冬192g-256g、桑螵蛸144g-192g、熟地黃768g-1024g、地黃768g-1024g、川芎192g-256g、鹿角霜144g-192g、銀柴胡78g-104g、芡實192g-256g、山藥384g-512g、丹參384g-512g，該重量配比的中藥原料可制備1000g的丸劑。
2.權(quán)利要求1的烏雞白鳳濃縮丸，其特征在于，其中藥原料的重量配比是烏雞1920g、人參384g、鹿角膠384g、牡蠣144g、白芍384g、當(dāng)歸432g、甘草96g、黃芪96g、鱉甲192g、香附384g、天冬192g、桑螵蛸144g、熟地黃768g、地黃768g、川芎192g、鹿角霜144g、銀柴胡78g、芡實192g、山藥384g、丹參384g。
3.權(quán)利要求1的烏雞白鳳濃縮丸，其特征在于，其中藥原料的重量配比是烏雞2560g、人參512g、鹿角膠512g、牡蠣192g、白芍512g、當(dāng)歸576g、甘草128g、黃芪128g、鱉甲256g、香附512g、天冬256g、桑螵蛸192g、熟地黃1024g、地黃1024g、川芎256g、鹿角霜192g、銀柴胡104g、芡實256g、山藥512g、丹參512g。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的烏雞白鳳濃縮丸的制備方法，其特征在于，包括以下步驟a、將處方中含揮發(fā)油的植物藥材當(dāng)歸、香附、川芎經(jīng)水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，提取后揮發(fā)油后的上述藥材，并入步驟b再提??；b、將人參、白芍、當(dāng)歸、甘草、黃芪、香附、天冬、熟地黃、地黃、川芎、銀柴胡、丹參，用水或醇提取有效成分，所得提取液濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥得干粉；c、將處方中烏雞、鹿角膠、牡蠣、鱉甲、桑螵蛸、鹿角霜經(jīng)黃酒炮制蒸干，與山藥、芡實粗粉混合，經(jīng)冷凍干燥后，再經(jīng)超微粉碎得微粉；d、將揮發(fā)油，用天然高分子材料為囊材，經(jīng)微囊化技術(shù)制備成微囊，洗滌低溫干燥后制成微囊粉，或揮發(fā)油不制成干燥微囊粉，待用；e、將步驟b的干粉、步驟c的微粉、步驟d的微囊粉混合均勻，得混合粉，或?qū)⒉襟Eb的干粉、步驟c的微粉混合均勻，將步驟d的待用揮發(fā)油噴入，密閉一段時間，得混合粉；f、將步驟e的混合粉用壓丸機壓制成丸，干燥、打光即得濃縮丸成品。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的制備方法，其特征在于，步驟d中所述天然高分子材料是明膠或阿拉伯膠。
6.根據(jù)權(quán)利要求4的制備方法，其特征在于，步驟b中所述用醇提取是乙醇。
7.根據(jù)權(quán)利要求4的制備方法，其特征在于，步驟b中所述濃縮采用的是納濾膜濃縮技術(shù)。
8.根據(jù)權(quán)利要求4的制備方法，其特征在于，步驟e中所述的密閉一段時間，是2-6小時。
9.根據(jù)權(quán)利要求4的制備方法，其特征在于，步驟d中所述微囊化技術(shù)，采用以下技術(shù)，將所提揮發(fā)油與4％阿拉伯膠溶液倒入組織搗碎機中，高速攪拌1分鐘制得揮發(fā)油乳濁液，將4％明膠溶液與乳濁液混合，攪拌10分鐘，置37℃水浴中，不斷攪拌，滴加10％醋酸溶液適量。調(diào)PH值為4，加入酸化蒸餾水200毫升稀釋，不斷攪拌降溫至25℃，再置冰浴中降溫至10℃以下，加37％甲醛，并用20％氫氧化鈉調(diào)PH值為8-9，繼續(xù)攪拌1小時，靜置，傾去上清液，微囊用蒸餾水洗至無甲醛味，低溫干燥即得揮發(fā)油微囊粉。
10.根據(jù)權(quán)利要求4的制備方法，其特征在于，步驟c中所述的超微粉碎是經(jīng)流能磨超微粉碎，所得的微粉粒度為3-20μm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種新的烏雞白鳳濃縮丸及制備方法，特別是采用了膜分離技術(shù)、冷凍干燥技術(shù)、超微粉碎技術(shù)，采用壓制法或塑制法等工藝方法，使其在1000g丸劑中所包含的生藥量提高到原來的3－4倍。
文檔編號A61P15/00GK1537613SQ20031010187
公開日2004年10月20日 申請日期2003年10月22日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月22日
發(fā)明者楊世林, 楊明, 朱衛(wèi)豐, 龔建平, 呂愛平, 郭惠玲, 饒毅, 徐彭, 丁楚良, 梅玲華 申請人:江西匯仁藥業(yè)有限公司