專利名稱:含有粒性的白細(xì)胞集落刺激因子的穩(wěn)定藥劑及其生產(chǎn)方法
本發(fā)明是關(guān)于一種含粒性白細(xì)胞集落刺激因子的制劑。本發(fā)明特別與一種含粒性白細(xì)胞集落刺激因子的穩(wěn)定藥劑有關(guān)，這種藥劑可以防止活性組分(例如粒性白細(xì)胞集落刺激因子)由于裝制品容器壁吸附，或結(jié)合，聚合乃至氧化而失活或丟失。
化療是治療多種感染疾病的一種方法，但是近來發(fā)現(xiàn)，化療會引起某些嚴(yán)重的臨床問題例如耐藥菌的形成，病原菌的變化以及嚴(yán)重的付作用。為了避免與化療有關(guān)的這些問題，包括例如抗生素，殺菌劑等化療劑的應(yīng)用，因此想采用一種能夠活化感染菌宿主予防能力的物質(zhì)，從而使前述化療問題能全部解決。在宿主的多種予防能力中，白細(xì)胞的吞噬細(xì)菌作用在細(xì)菌感染的初期據(jù)信影響最強(qiáng)，因此可以設(shè)想通過促進(jìn)中性白細(xì)胞的生長，分化進(jìn)入成熟期可以大大加強(qiáng)宿主的抗感染能力。粒性白細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)是具有上述作用的一種十分有用物質(zhì)，并且本發(fā)明的同一受讓人過去曾遞交過一份有關(guān)利用G-CSF作為一種抗感染藥的專利(日本專利申請No23777/1985)。
如上所述，當(dāng)前進(jìn)行的化療存在著多種不可避免的問題，因此正在盡力采用能夠活化宿主或感染病人予防能力的藥物。無可置疑，G-CSF本身具有活化宿主予防作用的能力，而且還發(fā)現(xiàn)，如果將其與能活化宿主予防能力的一種物質(zhì)合并應(yīng)用于臨床的話，G-CSF則會有極大療效。
G-CSF用量極少，G-CSF含量為0.1-500微克(最好為5-50微克)的藥物服用劑量通常為每個成年人每周1-7次。但是G-CSF易于被容器例如安瓿或注射器壁所吸附。因此如果藥物以這種水溶液形式注射的話，它便會被吸附于其容器例如安瓿或注射器壁上。這樣一來由于吸附可能導(dǎo)致的損失結(jié)果使得G-CSF既不能充分表現(xiàn)藥物的活性，也使得必須加入超過需要量的G-CSF。
此外，G-CSF不穩(wěn)定，對環(huán)境因素例如溫度，濕度、氧和紫外線高度敏感。由于這些因子的作用，G-CSF可發(fā)生物理或化學(xué)變化，例如結(jié)合，聚合，和氧化并且大大喪失活性。如果以十分精確的方式，極少量地服用G-CSF的話，這些現(xiàn)象會導(dǎo)致難以完全起到治療作用。
因此需要發(fā)展一種穩(wěn)定的G-CSF藥劑，它能夠充分防止其有效組分活性下降。這就是提供一種穩(wěn)定G-CSF藥劑的本發(fā)明主要目標(biāo)。
本發(fā)明人為了提高含有G-CSF藥劑的穩(wěn)定性，進(jìn)行了深入的研究，并且發(fā)現(xiàn)如果加入可藥用的表面活性劑、糖類、蛋白質(zhì)或高分子量化合物則可以有效達(dá)到這個目的。
因此，本發(fā)明含有G-CSF的穩(wěn)定藥劑可以被G-CSF和從藥用表面活性劑、糖類、蛋白質(zhì)和高分子量化合物中挑選的至少一種物質(zhì)來定性。
采用例如日本專利申請No153273/1984，269455/1985，269456/1985，270838/1985，270839/1985說明書敘述的任何方法可以得到含有G-CSF的本發(fā)明藥劑。例如可以通過培養(yǎng)患口腔癌病人瘤細(xì)胞的一種細(xì)胞株(CNCM登記號I-315或I-483)或者在一種適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞中(例如大腸桿菌，C127細(xì)胞或中國倉鼠卵巢細(xì)胞)通過重組DNA(是采用人G-CSF編碼基固作用制備得到的)表達(dá)來制備人的G-CSF。
任何高度提純的人G-CSF都可以作為G-CSF加至本發(fā)明的藥劑中。最好是從一種產(chǎn)生人G-CSF的培養(yǎng)細(xì)胞上清液中分離人的G-CSF，并且還可以從一種含有人G-CSF活性多肽編碼基因的重組載體轉(zhuǎn)化過的宿主中得到一種具有人G-CSF活性的多肽或糖蛋白。
兩例最好的人G-CSF例子如下(1)具有下列物理化學(xué)性質(zhì)的人G-CSFⅰ)分子量采用十二烷基磺酸鈉-聚丙酰胺凝膠電泳測定分子量大約為19，000±1，000。
ⅱ)等電點(diǎn)在PI＝5.5±0.1，PI＝5.8±0.1和PI＝6.1±0.1三個等電點(diǎn)中至少有一個是其等電點(diǎn)。
ⅲ)紫外吸收最大吸收值在280nm，最小吸收值在250nm。
ⅳ)N末端21個殘基氨基酸順序?yàn)镠2N-蘇-脯-亮-甘-脯-丙-絲-絲-亮-脯-谷氨酰胺-絲-苯丙-亮-亮-賴-胱-亮-甘-谷氨酰胺-纈-(2)人G-CSF或是具有人粒性白細(xì)胞刺激因子活性的一種多肽，此多肽是部分或全部以下述氨基酸序列表達(dá)的?；蚴且环N含有所敘多肽和一個糖鏈部分的一種糖蛋白。
(Met)nThr Pro Leu Gly Pro Ala Ser Ser Leu ProGln Ser Phe Leu Leu Lys Cys Leu Glu Gln ValArg Lys Ile Gln Gly Asp Gly Ala Ala Leu GlnGlu Lys Leu (Val Ser Glu)mCys Ala Thr Tyr LysLeu Cys His Pro Glu Glu Leu Val Leu Leu GlyHis Ser Leu Gly Ile Pro Trp Ala Pro Leu SerSer Cys Pro Ser Gln Ala Leu Gln Leu Ala GlyCys Leu Ser Gln Leu His Ser Gly Leu Phe LeuTyr Gln Gly Leu Leu Gln Ala Leu Glu Gly IleSer Pro Glu Leu Gly Pro Thr Leu Asp Thr LeuGln Leu Asp Val Ala Asp Phe Ala Thr Thr IleTrp Gln Gln Met Glu Glu Leu Gly Met Ala ProAla Leu Gln Pro Thr Gln Gly Ala Met Pro AlaPhe Ala Ser Ala Phe Gln Arg Arg Ala Gly GlyVal Leu Val Ala Ser His Leu Gln Ser Phe LeuGlu Val Ser Tyr Arg Val Leu Arg His Leu AlaGln Pro(規(guī)定m是0或1;并且n是0或1)。
制備這兩類G-CSF的詳細(xì)方法見日本專利申請No153273/1984，269455/1985，269456/1985，270838/1985和270839/1985的說明書，所有這些已全部由本發(fā)明受讓人遞交。
另外一種可以采用的方法是使產(chǎn)生G-CSF的細(xì)胞和一種自我增生的惡性腫瘤細(xì)胞融合，然后在加有或不加有促細(xì)胞分裂素的條件下培養(yǎng)得到的雜交瘤。
按照要求，采用任何已知的方法進(jìn)一步提純和濃縮后得到的含人G-CSF溶液可以冷凍保存，或者冷凍干燥脫水后，可以保存這種溶液。
為了得到含G-CSF的穩(wěn)定藥劑，可以采用本發(fā)明專門提到的過程來制備所有這些人G-CSF。
用于本發(fā)明含有G-CSF穩(wěn)定藥劑的表面活性劑典型例子敘述如下具有6-18HLB的非離子表面活性劑，例如脫水山梨糖醇脂肪酸酯(如脫水山梨糖醇辛酸單酯，脫水山梨糖醇月桂酸單酯，和脫水山梨糖醇棕櫚酸單酯)，甘油脂肪酸酯(例如甘油辛酸單酯，甘油肉蔻酸單脂和甘油硬脂肪酸單酯)，聚甘油脂肪酸酯(例如十甘油硬脂肪酸單酯，十甘油硬脂肪酸雙酯，和十甘油亞油酸單酯)，聚氧乙烯脫水山梨糖醇脂肪酸酯(如聚氧乙烯脫水山梨糖醇月桂酸單酯，聚氧乙烯脫水山梨糖醇油酸單酯，聚氧乙烯脫水山梨糖醇硬脂肪酸單酯，聚氧乙烯脫水山梨糖醇油酸三酯和聚氧乙烯脫水山梨糖醇，硬脂肪酸三酯)，聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯(如聚氧乙烯山梨醇硬脂肪酸四酯，和聚氧乙烯山梨醇油酸四酯)，聚乙烯甘油脂肪酸酯(如聚氧乙烯甘油硬脂肪酸單酯)，聚乙烯甘醇脂肪酸酯(如聚乙烯甘醇硬脂肪酸二酯)，聚氧乙烯烷基醚(如聚氧乙烯月桂醚)，聚氧乙烯聚氧丙烯烷基醚(如聚氧乙烯聚氧丙烯甘醇醚，聚氧乙烯聚氧丙烯丙醚和聚氧乙烯聚氧丙烯十六烷基醚)，聚氧乙烯烷代苯基醚(如聚氧乙烯壬基醚)，聚氧乙烯蓖麻油，聚氧乙基硬蓖麻油(聚氧乙基氫化蓖麻油)，聚氧乙醇的蜂蠟衍生物(如聚氧乙基山梨醇蜂蠟)，聚氧乙烯羊毛脂衍生物(如聚氧乙烯羊毛脂)，和聚氧乙烯脂肪酸酰胺(如聚乙烯硬脂肪酸酰胺);非離子表面活性劑，例如有一個C10-C18烷基的烷基硫酸鹽，(如十六烷基硫酸鈉，十二烷基硫酸鈉和油硫酸鈉)，聚氧乙烯烷基醚硫酸鹽，其中氧乙烯平均克分子數(shù)為2-4，并且烷基有10-18個碳原子(如聚氧乙烯十二烷基硫酸鈉)，烷基硫代琥珀酸酯，其中烷基有8-18個碳原子(如十二烷基硫代琥珀酸酯鈉);中性表面活性劑，例如卵磷脂，甘油磷酸脂，腦磷脂(如神經(jīng)鞘磷脂)，和蔗糖脂肪酸酯，其中脂肪酸有12-18個碳原子。當(dāng)然這些表面活性劑既可以單獨(dú)比可以混合用。
上面列出的表面活性劑用量最好是按重量每1份G-CSF用1-10000份活性劑。
用于本發(fā)明制備含G-CSF穩(wěn)定藥劑用的糖類可選擇作藥用的有單糖，寡糖和多糖及磷脂和核苷酸衍生物。典型例子如下三價和更高的蔗糖醇，例如甘油，赤蘚醇，阿糖醇，木糖醇，山梨醇和甘露糖醇;酸性糖例如葡萄糖醛酸，艾杜糖醛酸，神經(jīng)氨糖酸，半乳糖醛酸，葡萄糖酸，甘露糖醛酸，葡萄糖酮酸，半乳糖酮酸和古洛糖酮酸，透明質(zhì)酸及其鹽，硫酸軟骨素及其鹽，還有肝素，菊粉，幾丁質(zhì)及其衍生物，糊精，平均分子量為5000-150000的葡聚糖和藻酸及其鹽。無論是單用還是合用，所有這些糖類都是有益的。
上面列出的糖類用量，按重量最好是1份G-CSF1-10000份糖。
用于本發(fā)明含G-CSF穩(wěn)定藥劑的蛋白質(zhì)典型例子包括人血清清蛋白質(zhì)，人血清球蛋白，白明膠，酸處理過的白明膠(平均分子量＝7000-100，000)，堿處理過的白明膠(平均分子量＝7000-100，000)和膠原蛋白。無可置疑，這些蛋白既可以單用也可以混合用。
上面所列蛋白質(zhì)用量按重量每份G-CSF可以加1-20，000份。
可用于本發(fā)明含G-CSF穩(wěn)定藥劑的高分子化合物典型例子包括天然多聚物例如羥丙基纖維素，羥甲基纖維素，羧甲基纖維素鈉和羥乙基纖維素;合成的多聚物例如聚乙烯乙二酸(分子量＝300-6，000)，聚乙烯醇(分子量＝20，000-100，000)和聚乙烯吡咯烷酮(分子量＝20，000-100，000)。無可置疑這些高分子化合物既可單用也可合并使用。
列于上面的高分子量化合物的最適用量按重量每份G-CSF加入1-20，000份。
除了上述表面活性劑，糖類、蛋白質(zhì)或高分子化合物外，還可以從氨基酸，含硫還原劑和抗氧化劑類中選擇至少一種加至本發(fā)明含有G-CSF的藥劑中。闡明的氫基酸包括甘氨酸，蘇氨酸，色氨酸，賴氨酸，羥賴氨酸，組氨酸，精氨酸，半胱氨酸，胱氨酸和甲硫氨酸。所提到的含硫還原劑包括N-乙酰高半胱氨酸，N-乙酰高半胱氨酸，硫辛酸，硫二甘醇，硫乙醇胺，硫甘油，硫山梨醇，硫乙二醇酸及其鹽，硫代硫酸鹽，硫氫酸鈉，焦亞硫酸鈉，亞硫酸鈉，硫羥乳酸，二硫蘇糖醇，谷胱甘肽，和一種溫和的帶有巰基的硫還原劑，例如一種C1-C7硫鏈烷酸。所提到的抗氧化劑包括，異抗壞血酸，二丁羥甲苯，丁羥茴香醚，de-α-生育酸，生育酚醋酸鹽，L-抗壞血酸及其鹽，L-抗壞血酸棕櫚鹽，L-抗壞血酸硬脂酸鹽，三戊基棓酸鹽，丙基棓酸鹽和螯合劑例如乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)，焦磷酸鈉和偏磷酸鈉。
上述氨基酸，含硫還原劑和抗氧化劑或其混合物按重量每份G-CSF加量1-10，000份。
為了以合適劑量形式配制本發(fā)明含G-CSF的穩(wěn)定制劑，可以加入下列一種或多種試劑稀釋劑，助溶劑，等滲劑，賦形劑，PH調(diào)節(jié)劑潤膚劑和緩沖液。
本發(fā)明的穩(wěn)定G-CSF藥劑既可以配制口服用，也可以非腸道用，例如以多種方式進(jìn)行注射。服用的特定方式?jīng)Q定了不同的劑量。典型的劑型包括適用于口服的例如片劑，丸劑，膠囊，小粒和懸液，溶液，懸液和冷干制劑主要用于靜脈注射，肌肉注射等下注射和等內(nèi)注射，適于透過粘膜服用的如直腸栓劑，滴鼻劑和陰道栓劑。
根據(jù)本發(fā)明，從表面活性劑，糖類，蛋白質(zhì)或高分子化合物類物質(zhì)中至少可選擇一種加至含G-CSF的藥劑中，這樣一來，同時可以防止吸附于容器壁或注射器上，而且可以在相當(dāng)長時間內(nèi)保持穩(wěn)定。關(guān)于利用上述物質(zhì)穩(wěn)定G-CSF和防止吸附的詳細(xì)機(jī)制已經(jīng)弄清。在表面活性劑存在時，作為巰水蛋白的G-CSF表面被表面活性劑所復(fù)蓋，形成可溶物，這樣一來，板少量的G-CSF也可以防止被吸附于容器壁和注射器上。糖類或親水的高分子化合物在G-CSF和容器及注射器壁之間形成水合層，因此可以有效防止吸附G-CSF。蛋白則和G-CSF競爭吸附于容器和注射器壁上，因此可以有效抑制G-CSF的吸附。
除了防止G-CSF吸附外，上述物質(zhì)也可以防止G-CSF分子的結(jié)合或聚合。在存在表面活性劑，糖類、蛋白質(zhì)或高分子化合物時，單個G-CSF分子分散在這些物質(zhì)中，G-CSF分子間的相互作用大大降低，以至引起其結(jié)合或聚合能力的顯著減少。此外，這些物質(zhì)會阻止在高溫和潮濕下加速的自動氧化過程，或防止氧化引起的結(jié)合或聚合。加入一種氨基酸，含硫還原劑或一種抗氧化劑可以進(jìn)一步增強(qiáng)防止G-CSF自動氧化、結(jié)合或聚合的效應(yīng)。
上述問題對注射溶液和懸液值得特別注意，但是在以其它劑型例如片劑配制G-CSF的過程中也有這些問題。對于后一種情況加入表面活性劑，糖類、蛋白質(zhì)或高分子化合物也有效。
通過加入選自表面活性劑，糖類，蛋白質(zhì)和高分子化合物類的一種物質(zhì)，G-CSF高度穩(wěn)定，可以長時間保持活性，這將在下例中得以證實(shí)。為了達(dá)到這一目的，這些物質(zhì)中每一種的數(shù)量特別是其下限是關(guān)鍵的，如下范圍是理想的按重量每一份G-CSF加入1-10，000份糖，1-20，000份蛋白質(zhì)和1-20，000份高分子化合物。
根據(jù)本發(fā)明，表面活性劑，糖類，蛋白質(zhì)和/或高分子化合物按特定濃度使用，其作用不僅在于防止G-CSF被吸附于容器和注射器壁上，而且也在于加強(qiáng)含G-CSF藥劑的穩(wěn)定性。從而就可能保障病人服用少量而且是高度精確劑量的G-CSF。由于G-CSF很貴，這樣使用將會導(dǎo)致生產(chǎn)含G-CSF藥劑價格降低。
為了進(jìn)一步闡明本發(fā)明，提供了下列例子，但這不意味著作為一種限制。在這些例子中，采用下述任何一種方法都可以確定G-CSF的剩余活性。
a)小鼠骨髓細(xì)胞軟瓊脂法混合馬血清(0.4ml)，0.1毫升樣品，0.1mlC3H/He(雌性)鼠骨髓細(xì)胞懸液(0.5-1×0.5核細(xì)胞)和0.4ml含有0.75%瓊脂的修改MeCoy的5A培養(yǎng)液，側(cè)至組織培養(yǎng)的塑料平皿中(35mmφ)凝固，于37℃在5%CO2/95%空氣和100%濕度下培養(yǎng)5天。計算形成的集落數(shù)(一個集落含有至少50個細(xì)胞)并測定活性，形成一個集落定為一個活性單位。
按照下列步驟配制方法(a)用的修改的MeCoy5A培養(yǎng)液。
修改的MeCoy的5A培養(yǎng)溶液(雙倍濃度)12克MeCoy的5A培養(yǎng)液(Gibco)，2.55克MEM氨基酸-維生素培養(yǎng)基(Nissui Seiyaku公司)2.18克碳酸氫鈉和50，000單位青霉素G鉀鹽兩次溶解在500毫升蒸餾水中，然后，通過微孔濾膜(0.22μm)無菌過濾溶液。
(b)反相高效液相層析使用反相C8柱(4.6mm×300mm，5μm)和正丙醇/三氟醋酸混合液作為流動相，在下述梯度洗脫的條件下確定G-CSF(注射相當(dāng)于1微克的量)的剩余活性
時間(秒) 溶劑(A) 溶劑(B) 梯度
溶劑(A)30%正丙醇和0.1%三氟醋酸溶劑(B)60%正丙醇和0.1%三氟醋酸檢測波長為210nm，剩余G-CSF活性的百分率按下述公式計算剩余G-CSF活性(%)＝ (給定時間后剩余的G-CSF量)/(最初的G-CSF量) ×100用這種方法測定的G-CSF剩余量同用小鼠骨髓細(xì)胞軟瓊脂方法(a)測得的結(jié)果有很好的相關(guān)性。
例1表1列出的一種穩(wěn)定劑加至5微克G-CSF中，混合物無菌溶于20mM緩沖液中(含100mM氯化鈉，PH7.4)，制成每毫升含5微克G-CSF的藥劑，然后冷干。根據(jù)時間所呈現(xiàn)的G-CSF活性變化，用方法(a)測定，結(jié)果見表1。術(shù)語“活性(%)”代表與起始單位相關(guān)的G-CSF的剩余活性，以下列公式表示活性(%)＝ (給定時間后的活性單位)/(起始活性單位) ×100冷干是以下列步驟進(jìn)行的把含有穩(wěn)定性的G-CSF溶液放入磺胺處理過消毒的玻璃小瓶中，在-40℃或低于-40℃冷凍4小時，接著進(jìn)行第一次干燥48小時，從-40℃加熱至0℃，壓力從0.03托增加至0.1托，然后進(jìn)行第二次干燥12小時，溫度從0℃加熱至20℃，壓力從0.03托增加至0.08托，然后將消毒的干燥氮?dú)獬淙胄∑績?nèi)部，使其達(dá)到一個大氣壓，小瓶用冷干的橡皮塞塞上，最后用鋁蓋密封。
例2向10微克G-CSF加入列于表2的一種穩(wěn)定劑，將混合物無菌溶于20mM磷酸緩沖液中(含100mM氯化鈉，PH7.4)制備成為每毫升含10微克G-CSF的藥劑，將制劑無菌裝入磺胺處理過的玻璃小瓶中，封口，制備成G-CSF溶液。采用例1的同樣方法來測定溶液中隨著時間G-CSF的活性變化，結(jié)果列于表2。
例3向10微克G-CSF加入列于表3的一種穩(wěn)定劑，將混合物無菌溶于20mM磷酸緩沖液中(含100mM氯化鈉，PH7.4)制備成每毫升含10微克G-CSF的藥劑。將1毫升制劑加至磺胺處理過的硅化玻璃小瓶中，置于4℃。每種穩(wěn)定劑防止G-CSF吸收的作用可以通過在半小時，2小時和4小時后測定溶液中G-CSF保留活性來評價。測量采用(b)所用反相高壓液相層析的方法來進(jìn)行，結(jié)果列于表3。
權(quán)利要求
1.一種含有穩(wěn)定粒性白細(xì)胞集落刺激因子的藥劑，它除了以粒性白細(xì)胞集落刺激因子作為有效成分外，至少還有一種是從藥物可接受的表面活性劑、糖、蛋白質(zhì)和高分子化合物一類物質(zhì)中選擇而來的。
2.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的包含粒性白細(xì)胞集落刺激因子的穩(wěn)定藥劑，它所含表面活化劑是按重量每分粒性白細(xì)胞集落刺激因子1-10，000分。
3.根據(jù)權(quán)利要求
1或2所述的含有粒性白細(xì)胞集落刺激因子的穩(wěn)定藥劑，其中所提到的表面活性劑至少有一種是從包括非離子表面活性劑，陰離子表面活性劑和天然表面活性劑的一組物質(zhì)中選擇而來的;非離子表面活性劑是脫水山梨醇脂肪酸酯，甘油脂肪酸酯，聚甘油脂肪酸酯，聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯，聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯，聚氧乙烯甘油脂肪酸酯，聚氧乙烯乙二醇脂肪酸酯，聚氧乙烯烷基醚，聚氧乙烯，聚氧丙烯烷基醚，聚氧乙烯苯醚，聚氧乙基化硬蔑麻油。聚氧乙基化蜂蠟衍生物，聚氧乙烯羊毛脂衍生物、或者聚氧乙烯脂肪酸酰胺;陽離子表面活性劑是烷基硫酸鹽，聚乙烯烷基醚硫酸鹽，磺基琥珀酸酯鹽，天然表面活性劑是卵磷脂，甘油磷脂，神經(jīng)鞘磷脂，蔗糖脂肪酸酯。
4.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的含有粒性白細(xì)胞集落刺激因子的穩(wěn)定藥劑，其中糖類的含量以重量計算，是每分粒性白細(xì)胞集落刺激因子為1-10，000份。
5.根據(jù)權(quán)利要求
1或4所述的含有粒性白細(xì)胞集落刺激因子的穩(wěn)定藥劑，其中所談到的糖類，至少有一種是從下述一組物質(zhì)中選擇而來的甘油、赤蘚醇、阿糖醇、木糖醇、山梨醇、甘露糖醇、葡萄糖醛酸、艾杜糖醛酸，半乳糖醛酸，芳芳糖酮酸，半乳糖酮酸，古洛糖酮酸，透明質(zhì)酸及其鹽，硫酸軟骨素及其鹽，肝素、菊粉、幾丁質(zhì)及其衍生物，脫乙酰殼多糖及其衍生物，糊精，平均分子量為5000-150000的葡聚糖、藻酸及其鹽。
6.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的含有粒性白細(xì)胞集落刺激因子的穩(wěn)定藥劑，它所含蛋白質(zhì)量，以重量計算，是每份粒性白細(xì)胞刺激因子1-200，000份。
7.根據(jù)權(quán)利要求
1或6所述的含有粒性白細(xì)胞集落刺激因子的穩(wěn)定藥劑，其中談到的蛋白質(zhì)至少有一種是從下述一組物質(zhì)中選擇而來的人血清清蛋白，人血清球蛋白，白明膠，平均分子量為7000-100，000酸或堿處理的白明膠，膠原蛋白。
8.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的含有粒性白細(xì)胞集落刺激因子的穩(wěn)定藥劑，所含高分子化合物量以重量計算是每份粒性白細(xì)胞集落刺激因子1-20，000份。
9.根據(jù)權(quán)利要求
1或8所述的含有粒性白細(xì)胞集落刺激因子的穩(wěn)定藥劑，其中所談到的高分子化合物至少有一種是從下述一組物質(zhì)中選擇而來的羥丙基纖維素、羥甲基纖維素，羧甲基纖維素鈉，羥乙基纖維素分子量為300-6000的聚乙二醇分子量為20，000-100，000的聚乙烯醇，分子量為20，000-100，000的聚乙烯吡咯烷酮。
10.一種生產(chǎn)含有粒性白細(xì)胞集落刺激因子的藥劑的方法，它除了以粒性白細(xì)胞集落刺激因子作為活性成份外，至少還有一種物質(zhì)是從含有藥物可接受的表面活性劑，糖類、蛋白質(zhì)和高分子化合物的一組物質(zhì)中選擇而來的。
專利摘要
本發(fā)明揭示了含有粒性白細(xì)胞集落刺激因子的穩(wěn)定藥劑，除了粒性白細(xì)胞集落刺激因子作為有效成分外，藥劑至少包含一種物質(zhì)是從可供藥用的表面活性劑，糖類，蛋白質(zhì)和高分子化合物一類物質(zhì)中選擇而來的。
文檔編號A61K47/10GK87104963SQ87104963
公開日1988年2月24日 申請日期1987年7月18日
發(fā)明者町田實(shí) 申請人:中外制藥株式會社導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan