專利名稱：局部用的藥物學(xué)載體的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于局部給藥藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物的載體。
背景技術(shù)：
在本說明書中，在引用或討論文件、條目或知識(shí)項(xiàng)目時(shí)，這種引用或討論不能被視作認(rèn)可該文件、條目或知識(shí)項(xiàng)目在優(yōu)先權(quán)日是共有常識(shí)的一部分；或者已知與解決有關(guān)本說明書的任何問題的嘗試相關(guān)。
藥物運(yùn)輸?shù)闹饕繕?biāo)是要在目的作用位點(diǎn)產(chǎn)生合適的生物學(xué)效果，載體的選擇對(duì)于局部釋放的藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物的功效非常重要。然而，如果藥物不具有正確的生化屬性來確保在通過皮膚后以生物學(xué)活性形式從制劑中釋放到靶作用位點(diǎn)，那么該藥物的生物學(xué)活性將是亞理想的。
藥物通過皮膚轉(zhuǎn)移當(dāng)藥物從制劑中釋放時(shí)，首先分散到角質(zhì)層的外層脂中，吸收的程度主要取決于該藥物在這些脂中的溶解度和該藥物在皮膚和制劑間的分配系數(shù)。使該吸收程度最大化的簡單方法是選擇能使藥物劑量達(dá)到其溶解度極限的制劑組分。Ostrenga等通過操縱水和丙二醇的配比來提高兩種皮質(zhì)固醇的溶解性和分散特性證實(shí)了這一原則，這證明了最有效的制劑是那些在最終藥物產(chǎn)品中含有足量丙二醇而能溶解最大藥物濃度的制劑(Ostrenga J.Steinmetz C，Poulsen B.Significance ofvehicle composition 1.Relationship between topical vehicle composition，skin penetrability，and clinical efficacy.J.Pharm.Sci.1971；601175-1179)。
已有報(bào)道稱過飽和系統(tǒng)比促進(jìn)藥物皮膚滲透的單一系統(tǒng)具有更高的熱動(dòng)力學(xué)活性。使用揮發(fā)性和非揮發(fā)性溶劑混合物的藥物溶劑系統(tǒng)作為載體，在揮發(fā)性化合物從皮膚揮發(fā)后，該系統(tǒng)在皮膚表面產(chǎn)生過飽和溶液而刺激藥物吸收。人們認(rèn)為一些透皮膚途徑運(yùn)輸系統(tǒng)(transdermal patch delivery systems)具有從皮膚吸收水的能力，產(chǎn)生過飽和溶液而提高藥物的熱動(dòng)力活性，于是就促進(jìn)了該藥物通過皮膚。然而，使用混合的揮發(fā)性或非揮發(fā)性運(yùn)輸系統(tǒng)的一個(gè)主要問題是制備可再生系統(tǒng)困難，因?yàn)閾]發(fā)的速度和程度很大程度上依賴于應(yīng)用過程中的環(huán)境條件。吸收動(dòng)力學(xué)的不確定性導(dǎo)致藥物的運(yùn)輸效果發(fā)生波動(dòng)且臨床效果不可靠。
如果沒有合適的溶劑系統(tǒng)，可以使用懸液。在這些制劑中，加入的藥物化合物的顆粒大小對(duì)有效吸收有非常大的影響。Barrett等用氟輕松(fluocinolone acetonide)證明了這一點(diǎn)(Barrett CW，Hadgraft JW，Caron GA，Sarkany I.The effect of particle size and vehicle on thepercutaneous absorption of fluocinolone acetonide.Brit.J.Dermatol.1965；77576-78)，將該制劑應(yīng)用到志愿者前臂的皮膚上并測量血管收縮的程度，使用微粉化藥物的那些制劑的效果最大，該微粉化藥物用丙二醇制成了溶液。這表明藥物的溶解性和分散屬性在促進(jìn)皮膚吸收方面是非常重要的參數(shù)。在理論上這意味著具有良好的油和水溶解性和平衡的分散系數(shù)的藥物會(huì)更好地透過皮膚。
現(xiàn)代藥物一般不具有最佳的溶解特性，該溶解特性通常用溶解參數(shù)來量化。已經(jīng)證實(shí)皮膚的該參數(shù)大約為10，因此具有與其相似溶解參數(shù)的藥物可以自由溶解而產(chǎn)生大的跨皮膚濃度梯度或高的分散系數(shù)。Potts和Guy對(duì)皮膚滲透性數(shù)據(jù)進(jìn)行分析證實(shí)了其重要性(Potts RO，Guy RH.Predicting skin permeability.Pharm.Res.1992；9663-669)，Potts和Guy測定了90種化合物水溶液的滲透性，并證實(shí)了通過皮膚的滲透系數(shù)(Kp)與辛醇-水分散系數(shù)和分子量間存在如下關(guān)系Log Kp(cm S-1)＝-6.3+0.71logP-0.0061MW(r2＝0.69)該等式強(qiáng)調(diào)了溶解性和分散系數(shù)的重要性，但是與許多數(shù)學(xué)結(jié)構(gòu)式表示的活性關(guān)系一樣，其對(duì)三維問題給出一個(gè)二維答案。例如，用該等式計(jì)算通過皮膚的流量產(chǎn)生一個(gè)依賴于分散系數(shù)的拋物線，這仍然不清楚。如果存在真正的線性濃度梯度，那么該濃度梯度越高，皮膚吸收性就越高。該關(guān)系不是線性的事實(shí)證明了存在身體限制，如皮膚毛孔數(shù)量或物化壓力，另外，溶解性、分解性和分散性也促進(jìn)膜的轉(zhuǎn)運(yùn)。這表明logP(高親脂性化合物)高時(shí)，角質(zhì)層向外轉(zhuǎn)運(yùn)的速率是有限的或具有高logP值的藥物一般具有低的水溶解性。這意味著脂溶性藥物傾向于駐留在磷脂膜中，因?yàn)樗鼈兲烊坏厥怯H脂性的，也就是說，該藥物停留在皮膚中不能釋放到靶位點(diǎn)。
基于上述等式和相關(guān)的假設(shè)，藥物是通過濃度梯度轉(zhuǎn)移通過皮膚的，這表明logP為1-3的藥物更可能通過皮膚而擴(kuò)散。然而，這僅能用來鑒別較容易通過皮膚的藥物，并不能促進(jìn)低溶解性、高親脂性藥物的轉(zhuǎn)運(yùn)。
皮膚促進(jìn)劑許多現(xiàn)代藥物是親脂性的，所以已設(shè)計(jì)出了許多皮膚促進(jìn)劑和各種配制技術(shù)來提高其跨皮膚吸收。皮膚促進(jìn)劑一般通過溶解或干擾脂基質(zhì)來特定地修飾角質(zhì)層結(jié)構(gòu)，從而提高藥物化合物的滲透性。該促進(jìn)劑的例子包括化合物如羊醋酸、油酸、氮酮(Azone)、癸甲基亞砜和羥基月桂酸。例如，在角質(zhì)層脫脂后黃體酮的皮膚吸收增加了143％，在將角質(zhì)層完全去除后提高到843％。利用這種介入式修飾，重復(fù)使用該系統(tǒng)治療的經(jīng)常報(bào)道的疾病包括接觸性皮炎，皮膚發(fā)紅，癢和需要藥膏在身體四周移動(dòng)或在身體四周使用藥物來防止局部發(fā)炎的炎癥。據(jù)說上述發(fā)紅在除去斑點(diǎn)后數(shù)小時(shí)內(nèi)消失，但是在使用這種跨膜運(yùn)輸系統(tǒng)的長期危險(xiǎn)和安全方面得到越來越多的關(guān)注，這主要是因?yàn)樗幬餄B透性的提高是以破壞皮膚最重要的保護(hù)層為代價(jià)的。
Morgan，TM等(1998)″Enhanced transdermal delivery of sexhormones in swine with a novel topical aerosol″J.Pharm.Sci.87(10)1219-1225的研究調(diào)查了睪丸激素和雌二醇的跨膜運(yùn)輸，其使用含有滲透促進(jìn)劑padimate O的新的定量的局部用氣霧劑。該作者宣稱該劑量系統(tǒng)是可變的，能四處移動(dòng)而提供更大的應(yīng)用表面積。但是定量裝置的有效使用需要配合且需要手工靈巧。而且，該劑量四處移動(dòng)是不必要的，因?yàn)樵摯龠M(jìn)劑是羥基月桂酸，其會(huì)損害皮膚并導(dǎo)致發(fā)炎和紅斑。因此。這種氣霧劑定量給藥系統(tǒng)并不比含有促進(jìn)劑的藥膏更具有優(yōu)勢。
已經(jīng)進(jìn)行了許多嘗試來制備對(duì)皮膚具有較小刺激性的藥物運(yùn)輸系統(tǒng)，但是沒有一種提供了商業(yè)上可接受的產(chǎn)品。例如●美國專利No.6,479,540揭露了使用基于母育酚的運(yùn)輸系統(tǒng)來溶解帶電荷的雙染色性和可溶性的藥物活性化合物。該專利教導(dǎo)了帶電荷的生育酚酯，如磷酯、琥珀酸酯、天冬氨酸酯形成離子對(duì)作為合適的藥物底物分別與母育酚乳劑結(jié)合。因此該制劑使活性化合物更具親脂性并與微囊(miscelles)結(jié)合而更好地轉(zhuǎn)運(yùn)通過粘膜。
●美國專利No.5,583,105揭露了使用母育酚和母育酚衍生物，包括生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(TPGS)作為溶劑來高濃度溶解某藥物以用于藥物學(xué)用途。在藥物運(yùn)輸領(lǐng)域乳劑和使用增溶劑的乳化作用具有很長的歷史。TPGS是用作藥物學(xué)可接受的水混溶性增溶劑，沒有關(guān)于TPGS與親脂性藥物間會(huì)發(fā)生任何其它相互作用的任何教導(dǎo)。
●國際專利WO 96/21440公開了通過共價(jià)連接肌醇磷酸和二磷酸酯分子來提高醫(yī)藥試劑的生物利用率的方法。據(jù)說相對(duì)于未配合試劑，該得到的配合物使水溶性增加。
因此，有效的局部用藥物運(yùn)輸需要該藥物能溶解于生物學(xué)介質(zhì)的水溶液并具有合適的形式而使單個(gè)藥物分子或藥物分子的非常小的集合體能夠轉(zhuǎn)移。這個(gè)目的對(duì)于具有脂溶性而沒有良好水溶性的藥物是非常困難的，除非該運(yùn)輸系統(tǒng)被正常的膜轉(zhuǎn)移細(xì)胞所識(shí)別。這種藥物分子具有疏水性區(qū)域，因此在轉(zhuǎn)運(yùn)發(fā)生時(shí)在介電常數(shù)高的水富集介質(zhì)中形成大的聚集體。
因此，需要能局部地運(yùn)輸大量藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物并提高該藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物在靶位點(diǎn)的吸收而不傷害皮膚的合適載體本發(fā)明的簡要說明驚訝地發(fā)現(xiàn)，含有藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的磷酸脂，如磷酸生育酚與藥物或該藥物的磷酸化類似物的復(fù)合體的載體組合物可以使藥物學(xué)或藥理學(xué)上的活性化合物快速有效地轉(zhuǎn)運(yùn)。
當(dāng)局部應(yīng)用時(shí)，所述藥物通過皮膚吸收而不會(huì)產(chǎn)生發(fā)炎或損壞的跡象。這種載體可以用于需要慢性調(diào)控的治療和需要該載體來減少副作用并改善病人狀況的情況。
公知地，許多親脂性磷酸酯在細(xì)胞功能方面非常重要，其可以在體內(nèi)被有效地轉(zhuǎn)運(yùn)。這些轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制能耐受與該親脂性磷酸酯結(jié)合的物質(zhì)，因而使這些化合物具有作為促進(jìn)劑的獨(dú)特性質(zhì)。
根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供了用于局部給藥藥物學(xué)和藥理學(xué)活性化合物的載體，所述的載體包括有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體。
優(yōu)選地，上述藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的磷酸衍生物復(fù)合體選自生育酚的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體。
根據(jù)本發(fā)明的第二方面，提供了提高局部給藥的藥物學(xué)和藥理學(xué)活性化合物的功效和跨膜運(yùn)輸?shù)姆椒?，該方法包括將所述的藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物與載體結(jié)合的步驟，該載體包括有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體。
優(yōu)選地，上述藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的磷酸衍生物復(fù)合體選自生育酚的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體。
本發(fā)明還提供了有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體，如生育酚磷酸衍生物復(fù)合體與其它的載體制備中的賦型劑一起用于局部給藥藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物的用途。
本發(fā)明還提供了含有一種或多種藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物和載體的藥物學(xué)組合物，該載體包括有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體，如生育酚的磷酸衍生物復(fù)合體。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了提高局部給藥的藥物學(xué)和藥理學(xué)活性化合物的功效和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的方法，該方法包括將該藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物與載體結(jié)合，該載體包括有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體。
本發(fā)明的這一方面包括用于藥物學(xué)和藥理學(xué)活性化合物局部給藥的載體，所述的載體包括有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體。
本發(fā)明所用的術(shù)語“載體”是指在局部地向人或其它動(dòng)物皮膚給藥時(shí)為了達(dá)到系統(tǒng)性或皮膚性效果所使用的任何制劑。其包括但不限于設(shè)計(jì)來改變吸收動(dòng)力學(xué)以利于線性釋放的霜?jiǎng)?、洗劑、凝膠、乳劑、脂質(zhì)體、氣霧劑、藥膏、泥敷劑、皮下長效劑(subcutaneous depots)、貼膏和持續(xù)釋放系統(tǒng)。
本發(fā)明所用的術(shù)語“有效量”是指能使藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物以一定量滲透過角質(zhì)層到達(dá)皮膚的表皮或真皮層而可檢測程度地有效緩解患者呈現(xiàn)的一種或多種癥狀的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體的量。藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體的該有效量的范圍高至該載體總重量的99％w/w。本發(fā)明的普通技術(shù)人員能夠理解實(shí)際的量根據(jù)藥物的不同而不同。對(duì)于提供藥物治療范圍的量該有效量是足夠的。使用的量還依賴于所用的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體是否具有配制屬性，如增溶作用或表面活性。如果藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸酯復(fù)合體具有增溶劑的作用，那么該有效量將依賴于制劑中的藥物濃度，其范圍為40-90％w/w，優(yōu)選為45-75％w/w，更優(yōu)選為50-60％w/w。當(dāng)藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸酯復(fù)合體不需要增溶屬性時(shí)，該有效量的范圍可以為0.01-20％w/w，優(yōu)選為1-15％w/w，更優(yōu)選為5-10％w/w。
優(yōu)選地(當(dāng)增溶屬性是不需要時(shí))，生育酚的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體的該有效量的范圍為載體總重量的0.1-10％w/w，更優(yōu)選為5-10％w/w，更優(yōu)選為7.5％w/w。
術(shù)語“藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物”是指不帶電荷且不容易形成氫鍵，因而能容易地插入到脂質(zhì)層的、能磷酸化(該磷酸基是親水的，而使該化合物具有表面活性)的，且可接受地用于藥物學(xué)化合物或促進(jìn)藥物學(xué)化合物吸收的化合物。這種化合物的例子包括生育酚(維生素E)、視黃醇(維生素A)、甲萘醌(維生素K)、生育三烯醇和鈣化醇(維生素D)?；谖覀儗?duì)磷酸生育酚復(fù)合體的測試結(jié)果，我們預(yù)計(jì)其它藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的磷酸衍生物會(huì)產(chǎn)生同樣的結(jié)果。該預(yù)計(jì)是基于如下事實(shí)親脂性的磷酸化合物已知對(duì)于分子功能是重要的且在體內(nèi)能有效轉(zhuǎn)運(yùn)。雖然沒有相關(guān)的理論，但是可以相信這些親脂性的磷酸化合物具有支持皮膚中的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制的功能，因此其具有作為促進(jìn)劑的獨(dú)特價(jià)值。
上述“藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的磷酸衍生物”包括通過氧與磷酸基的磷原子共價(jià)結(jié)合而形成碳-氧-磷鍵的化合物。該氧原子一般來源于親脂性的藥學(xué)上可接受的化合物的羥基，該磷酸衍生物可以以游離磷酸或其鹽，具有兩分子藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的磷酸酯或其中的游離磷酸氧原子與烷基或取代的烷基結(jié)合的磷脂?；衔锏男问酱嬖凇?br> 術(shù)語“親脂性化合物的磷酸衍生物復(fù)合體”是指親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物的反應(yīng)產(chǎn)物和一種或多種復(fù)合的試劑，該試劑選自兩性表面活性劑、陽離子表面活性劑、具有氮功能基的氨基酸和富含這些氨基酸的蛋白質(zhì)，如國際專利申請(qǐng)No.PCT/AU01/01476中的公開。
優(yōu)選地，生育酚的該磷酸衍生物復(fù)合體由單磷酸生育酚衍生物和雙磷酸生育酚的混合物制備，其中單磷酸生育酚衍生物的含量不少于雙磷酸生育酚的量，例如該混合物含70％的磷酸生育酚和25％的雙磷酸生育酚。
上述優(yōu)選的復(fù)合體試劑選自精氨酸、賴氨酸和三取代胺，如具有如下結(jié)構(gòu)式的氨基酸NR1R2R3其中R1選自C6到C22直鏈或支鏈混合烷基基團(tuán)及其羰基衍生物；R2和R3獨(dú)立地選自H、CH2COOX、CH2CHOHCH2SO3X、CH2CHOHCH2OPO3X、CH2CH2COOX、CH2COOX、CH2CH2CHOHCH2SO3X或CH2CH2CHOHCH2OPO3X，其中如果是R2和R3不都是H時(shí)，X是H、Na、K或者鏈烷醇胺；
其中當(dāng)R1是RCO時(shí)，R2可以是CH3，R3可以是(CH2CH2)N(C2H4OH)-H2CHOPO3，或者R2和R3可以都是N(CH2)2N(C2H4OH)CH2COO-。
優(yōu)選地，上述生育酚的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合物選自十二烷基亞氨基二丙酸單磷酸生育酚、十二烷基亞氨基二丙酸二磷酸生育酚和其混合物。
本發(fā)明所用的術(shù)語“藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物”是指可以應(yīng)用于人或牲畜的藥物學(xué)活性化合物。藥物化合物的例子包括但不限于麻醉型止痛劑，如嗎啡和左啡諾(Levorphanol)；非麻醉型止痛劑，如可待因和醋氨酚；皮質(zhì)類固醇(Corticosteroids)，如可的松；麻醉劑，如丙泊酚(propofol)；止嘔劑，如東莨菪堿；類交感神經(jīng)藥，如腎上腺素(Adrenaline)和多巴胺；抗癲癇藥，如磷苯妥英(fosphenytoin)；抗發(fā)炎藥，如布洛芬，包括α-布洛芬、丁子香酚、水飛薊賓(Silybin)、大豆異黃酮，環(huán)烯醚萜甙(iridoid glycosides)，包括桃葉珊瑚苷和梓醇；倍半萜烯內(nèi)酯，包括Arnica chamissonis的假愈創(chuàng)木內(nèi)脂(pseudoguaianolide)；萜，包括迷迭香酸和迷迭香酚；苯酚配醣包括水楊酸鹽、水揚(yáng)酸、水楊甙及水楊酸；triterpenestaxasterol或α-山萵苣醇；異山萵苣醇，p-對(duì)羥基苯乙酸衍生物蒲公英甙；對(duì)苯二酚衍生物，包括熊果甙；苯烷酮(phenylalkanones)，包括生姜和shagaols，金絲桃素；?；g苯三糖苷(acylphloroglucides)包括黃腐酚、蛇麻酮、律草酮和2-甲基丁-3-烯-2-醇。該藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物可以是任何合適的形式，包括磷酸衍生物。
本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員都知道在載體中可以使用那些其它的賦形劑。其它賦形劑的選擇依賴于藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物的屬性。其它賦形劑的例子包括溶劑、表面活性劑、緩和劑、防腐劑、著色劑、芳香劑等。其它賦形劑的選擇還依賴于所用的局部給藥的形式。
用于本發(fā)明載體的一般的賦形劑含有61.95％的去離子水、5.00％的丙三醇、0.05％的EDTA三鈉、0.50％的卡波姆(carbomer)(CarbopolUltrez 10)、2.00％的Phoenoxol T(棕櫚醇和ceteareth-20)、1.00％甘油硬脂酸脂(Emerest 2400)、5.00％異丙基豆蔻酸脂(Pelemol IPM)、3.50％十六烷基己酸乙酯(Pelemol 168)、3.50％異十六烷基山崳酸鹽酯(Pelemol ICB)、3.00％油酸芥酸甲酯(CetiolIJ-600)、0.50％矽靈(Dow200，100cst.)、5.00％去離子水、0.50％三乙醇胺(99％)和1.00％Germaben II(丙二醇，雙咪唑烷基脲，羥苯甲酯(methylparaben)和羥苯丙酯(propylparaben))。
附圖的簡要說明

圖1在去卵巢無毛兔的血漿樣品中測得的總雌激素(平均值±SE)的改變，對(duì)該兔應(yīng)用含有大約0.17ug的雌激素(E)或磷酸雌激素(EP)的制劑；圖2在去卵巢無毛兔的血漿樣品中測得的總雌激素(平均值±SE)的改變，對(duì)該兔應(yīng)用含有大約0.17ug溶于乙醇的E或EP的制劑；圖3在應(yīng)用含有氚E或EP的制劑后24小時(shí)，去卵巢無毛兔中氚E與氚EP的吸收百分比；
圖4在去卵巢無毛兔的血漿樣品中測得的總睪丸激素(平均值±SE)的改變，對(duì)該兔應(yīng)用含有大約1.00ug±0.02ug的T或TP的制劑；圖5在6小時(shí)(上圖)和2小時(shí)(放大圖，下圖)后記錄的阿托品(2mg/kg，IV)制劑對(duì)有意識(shí)兔的心跳(HR)的影響。箭頭表示給藥的時(shí)間；圖6在6小時(shí)(上圖)和2小時(shí)(放大圖，下圖)后記錄的阿托品(20mg/kg，IV)制劑對(duì)有意識(shí)兔的動(dòng)脈血壓(MAP)的影響。箭頭表示給藥的時(shí)間；圖7在24小時(shí)(上圖)和2小時(shí)(放大圖，下圖)后記錄的阿托品(20mg/kg，IV)制劑對(duì)有意識(shí)兔的心跳(HR)的影響。箭頭表示給藥的時(shí)間；圖8在24小時(shí)(上圖)和2小時(shí)(放大圖，下圖)后記錄的阿托品(20mg/kg，IV)制劑對(duì)有意識(shí)兔的動(dòng)脈血壓(MAP)的影響。箭頭表示給藥的時(shí)間；圖92小時(shí)后測得的在腹膜內(nèi)給予3或10mg/kg嗎啡對(duì)爪收縮時(shí)間的影響；圖102小時(shí)(匯集的數(shù)據(jù))后測得的在載體中含10mg/kg嗎啡對(duì)爪收縮時(shí)間的影響；圖11對(duì)照載體(每一種n＝3)或嗎啡(每一種n＝3)的圖2數(shù)據(jù)的日平均圖；圖122小時(shí)(匯集的數(shù)據(jù))后測得的在載體中含10mg/kg嗎啡對(duì)爪收縮時(shí)間的影響；
圖13對(duì)照載體(每一種n＝3)或嗎啡(每一種n＝3)的圖4數(shù)據(jù)的日平均圖；實(shí)施例通過下面的非限制性實(shí)施例進(jìn)一步解釋和闡述本發(fā)明。
實(shí)施例1本發(fā)明的載體霜?jiǎng)┲苽淙缦?
1.Vital Health Sciences Pty Ltd2.B.F.Goodrich，Incorporated3.Phoenix Chemical，Incorporated4.Cognis，Incorporated5.Dow-Corning，Incorporated6.ISP Corporation步驟步驟將相A系列減去Carbomer與十二烷基亞氨基二丙酸磷酸生育酚攪拌混合，溶解后，將Carbomer分散在該溶液中。開始加熱相A到70-75℃，進(jìn)行足夠的攪拌。徹底攪拌使十二烷基亞氨基二丙酸磷酸生育酚分散在Carbomer膠中?；旌舷郆的各系列，加熱到75-80℃，進(jìn)行足夠的攪拌。使相A均一并維持在70-75℃，使相B均一并維持在75-80℃。將相B加入到相A中，進(jìn)行足夠的攪拌。將相AB冷卻到50℃，然后將相C溶液加入到AB中。繼續(xù)攪拌ABC直到45℃。將相D加入到ABC中，繼續(xù)攪拌到35℃。
實(shí)施例2在該實(shí)施例中評(píng)估了雌二醇和磷酸雌二醇在無毛兔模型中的跨膜運(yùn)輸。
方法動(dòng)物在用異氟烷(isoflurane)麻醉的情況下將23只雌性白化病無毛兔的卵巢切除，試驗(yàn)前恢復(fù)10天。這樣清除了體內(nèi)的所有雌性激素。
血液樣品在使用雌二醇(N＝5)和磷酸雌二醇(N＝6)制劑后0、1、2、4、8、16和24小時(shí)，從意識(shí)受限鼠的尾靜脈取得血液樣品，收集血液到EDTA管中，然后5000rpm離心10分鐘。收集血漿，在-80℃保存直到測試。
跨皮膚制劑的制備和應(yīng)用雌二醇和磷酸雌二醇由Vital HealthSciences Pty Ltd提供，并在應(yīng)用前約1小時(shí)以20ug/ml的濃度配制到實(shí)施例1的載體霜?jiǎng)┲小?br> 磷酸雌二醇(EP)將4.3mg EP溶解在17.3ml丙酮(0.25mg/ml)中，20ul轉(zhuǎn)移到Eppendorf管中并將溶劑在氮?dú)饬髦姓舭l(fā)。然后加入0.999g實(shí)施例1的載體霜?jiǎng)?，用玻璃棒混合并離心。重復(fù)5次，最后的濃度為4.90ug/ml。
雌二醇(E)將6.7mg溶解在26.8ml純乙醇(0.25mg/ml)中，20ul轉(zhuǎn)移到Eppendorf管中并將溶劑在氮?dú)饬髦姓舭l(fā)。然后加入1.003g實(shí)施例1的載體霜?jiǎng)貌ＡО艋旌喜㈦x心。重復(fù)5次，最后的濃度為4.89ug/ml。
溶于乙醇的E和EP制劑將0.5mg E和EP與50ml部分乙醇混合，將20ul這種溶液直接應(yīng)用到皮膚上。
在麻醉兔背脊皮膚的大約4cm2的區(qū)域標(biāo)記上不能擦除的點(diǎn)標(biāo)記，將各種制劑用于該區(qū)域。用彎曲的玻璃桿涂抹器將約30±3.2mg制劑(含有0.15±0.02ug E或EP)應(yīng)用到所述位點(diǎn)，“涂抹”該制劑直到其被皮膚吸收，這費(fèi)時(shí)5-10分鐘。在該過程中要注意該制劑粘度的任何改變，對(duì)于每個(gè)動(dòng)物，稱量應(yīng)用制劑的量并測量應(yīng)用位點(diǎn)的面積。
器官收集檢測24小時(shí)后，用過量的麻醉劑將動(dòng)物殺死，收集所有的器官，在-80℃保存直到測試。
總雌激素RIA用商業(yè)可用的總雌激素試劑盒(ICNPharmaceuticals，catalogue #07-140205)與100％的17β-雌二醇和雌激素酮的交互反應(yīng)劑進(jìn)行RIA，該測試的標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為2.5-100pg/ml(r2＝-0.943)。通過一系列的峰測試法測定抽提效率，用二乙醚作為兔血漿和器官的抽提溶劑的抽提效率為90-98％，這種溶劑不會(huì)干擾該測試。測試的血漿體積為100ul。
結(jié)果制劑應(yīng)用在上述動(dòng)物背部使用制劑的平均面積(±SE)對(duì)于E和EP分別為3.88±0.03cm2和3.88±0.07cm2。在E和EP組中這些制劑的平均用量為0.15±0.02ug。在該研究中沒有炎性癥狀出現(xiàn)，如紅斑或水腫。
血漿中的總雌性激素在兩動(dòng)物組中都出現(xiàn)可檢測水平的雌激素(標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為2.5-100pg/ml)，在E組中，應(yīng)用后2、8和16小時(shí)測得的最大血漿濃度為16.63±8.18(平均值±SE)pg/ml；在EP組中應(yīng)用后16小時(shí)測得的最大血漿濃度為49.16±13.21pg/ml(圖1)。所有值都減去t＝0時(shí)的基準(zhǔn)測量值以校正血漿中存在的背景水平。
討論本研究評(píng)價(jià)了EP和E在雌性無毛兔中的跨膜運(yùn)輸，當(dāng)磷酸雌二醇應(yīng)用超過24小時(shí)時(shí)，血液中的雌二醇濃度就會(huì)一直升高(在2、4和16小時(shí)時(shí)p＜0.01具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)。等劑量應(yīng)用時(shí)，與E處理相比，EP產(chǎn)生至少兩倍的激素血漿濃度，這清楚地表明將EP包含在在實(shí)施例1的載體中運(yùn)輸可以提供更有效的運(yùn)輸E的制劑。十分有趣的是，將E應(yīng)用到實(shí)施例1的載體中后，運(yùn)輸?shù)挠坞x雌二醇的量也十分顯著，更重要的是，E或EP處理都不產(chǎn)生任何炎性癥狀。
Morgan等(Morgan TM，O′Sullivan HMM，Reed BL，F(xiàn)innin BC.Transdermal Delivery of Estradiol in Postmenopausal Women with aNovel Topical Aerosol.J.Pharm.Sci.1998；87(10)1226-1128)每天將3mg含有皮膚促進(jìn)劑的雌二醇載體運(yùn)輸?shù)?位絕經(jīng)后婦女的超過30cm2的區(qū)域，持續(xù)9天，在該研究的最后，用商業(yè)上的放射性免疫檢測試劑盒檢測雌二醇和雌激素酮，給藥后24小時(shí)雌二醇的平均血液水平為53±7pg/ml。這就是說比13.5pg/ml的循環(huán)性雌二醇的基線水平明顯地提高了4倍，可作為臨床相應(yīng)劑量。
相反，在該實(shí)施例中，將0.17ug應(yīng)用到動(dòng)物背部，E組和EP組的應(yīng)用表面積分別為3.88±0.03cm2和3.88±0.07cm2，在E組中應(yīng)用后16小時(shí)檢測到了最大血漿濃度為16.63±8.18(平均值±SE)pg/ml，在EP組中的同一時(shí)間點(diǎn)檢測到最大濃度為49.16±13.21pg/ml(圖1)。忽略動(dòng)物模型與人皮膚間在皮膚生理學(xué)上的不同，即使在本發(fā)明的含有載體的組合物中完全使用更小劑量也能達(dá)到大致一樣的雌二醇水平。
雖然使用不同的模型，但是與其它研究進(jìn)行比較表明本發(fā)明的載體刺激雌二醇轉(zhuǎn)運(yùn)通過皮膚。
結(jié)論本試驗(yàn)證實(shí)無毛兔模型可以運(yùn)輸有用劑量的雌二醇，由于無毛兔與人皮膚的屬性相似，因此可以推定以本發(fā)明所述形式制備的磷酸雌二醇可以有效地用于激素取代療法。有趣的是，本實(shí)施例用非常低的藥物劑量而使藥物劑量的雌二醇得到有效的運(yùn)輸。很明顯該載體能釋放大量的游離雌二醇到血液中，因此有可能在作用位點(diǎn)促進(jìn)需要的生物學(xué)反應(yīng)。
該試驗(yàn)還證實(shí)，在兩治療臂(treatment arms)中使用該載體不僅能提高磷酸雌二醇的吸收還提高雌二醇的吸收。這表明載體依賴性吸收刺激并不依賴于所用藥物的相似性。
雖然沒有相關(guān)的理論，但是上述轉(zhuǎn)運(yùn)的提高明顯是因?yàn)楸景l(fā)明的載體與角質(zhì)層的脂發(fā)生了良性的交互反應(yīng)，且可能與本發(fā)明載體的獨(dú)特表面系統(tǒng)有關(guān)。
與以前公開的關(guān)于乙醇制劑的文獻(xiàn)相一致，大量的雌二醇通過皮膚運(yùn)輸，這可能是因?yàn)橹|(zhì)層斷裂而導(dǎo)致了細(xì)胞吸收。但是，使用該乙醇制劑后，會(huì)產(chǎn)生皮膚發(fā)炎、紅斑和損傷。當(dāng)使用實(shí)施例1的載體時(shí)皮膚不會(huì)發(fā)炎。
實(shí)施例3在該實(shí)施例中測定了3H-雌二醇(3H-E)和3H-磷酸雌二醇(3H-EP)在無毛兔模型中的快速跨皮膚滲透。
方法動(dòng)物在本研究中使用6只雌性白化病無毛兔(每治療組N＝3)。
跨皮膚制劑的制備和應(yīng)用3H-E和3H-EP由Vital Health SciencesPty Ltd提供，并在應(yīng)用前約1小時(shí)制備到實(shí)施例1的載體霜?jiǎng)┡浜衔镏小?br> 將20ul的3H-E和3H-EP等份分配到1ml的Eppendorf管中，將溶劑在氮?dú)饬髦袕?H-E和3H-EP中蒸發(fā)。一旦完全干燥，將0.498g的實(shí)施例1的載體加入到3H-E中，0.502g加入到3H-EP中，用玻璃棒混合，離心1分鐘。重復(fù)5次。
在麻醉兔背脊皮膚的大約4cm2的區(qū)域標(biāo)記上不能擦除的點(diǎn)標(biāo)記，將各種制劑用于該區(qū)域。用彎曲的玻璃桿涂抹器將約30mg制劑(含有5ug的3H-E和3H-EP)應(yīng)用到所述位點(diǎn)?！巴磕ā痹撝苿┲榔浔黄つw吸收，這費(fèi)時(shí)5-10分鐘。將tegaderm(3M)膏劑應(yīng)用到該區(qū)域以防止動(dòng)物將上述制劑擦除。
結(jié)果和討論該研究清楚地表明，在用本發(fā)明進(jìn)行跨皮膚應(yīng)用時(shí)EP相對(duì)于E更容易被吸收(圖3)，同時(shí)藥物形式對(duì)雌二醇轉(zhuǎn)運(yùn)量的提高有非常大的影響。注意上述載體刺激兩種藥物類似物快速轉(zhuǎn)運(yùn)通過皮膚是重要的。本研究還進(jìn)行了單皮膚層分析，揭露了在應(yīng)用后24小時(shí)皮膚中殘留最小量的E或EP。在上皮和真皮中發(fā)現(xiàn)較高水平的EP，這是因?yàn)樵谠?4小時(shí)期間較大體積的EP轉(zhuǎn)移通過皮膚。
結(jié)論本試驗(yàn)證實(shí)，上述無毛兔模型可以運(yùn)輸有用劑量的雌二醇，很明顯該載體能釋放大量的游離雌二醇到血液中，因此有可能在作用位點(diǎn)促進(jìn)需要的生物學(xué)反應(yīng)。
該試驗(yàn)還證實(shí)，在兩治療臂(treatment arms)中使用該載體不僅能提高磷酸雌二醇的吸收還能提高雌二醇的吸收。這表明載體依賴性吸收刺激不依賴于所用藥物的相似性。
實(shí)施例4在該實(shí)施例中測定了睪丸激素和磷酸睪丸激素在無毛兔模型中的跨皮膚運(yùn)輸。
方法動(dòng)物在用異氟烷(isoflurane)麻醉的情況下將12只雌性白化病無毛兔的卵巢切除，在試驗(yàn)前恢復(fù)15天。
血液樣品在使用睪丸激素(N＝6)和磷酸睪丸激素(N＝6)制劑后0、1、2、4、8、16和24小時(shí)，從意識(shí)受限鼠的尾靜脈中取得血液樣品，收集血液到EDTA管中，然后5000rpm離心10分鐘。收集血漿，在-80℃保存直到測試。
睪丸激素和磷酸睪丸激素由Vital Health Sciences Pty Ltd提供，并在應(yīng)用前約1小時(shí)制備到實(shí)施例1的載體中。
磷酸睪丸激素(TP)將4.41mg TP溶解到15ml水中，然后用乙醇加到100ml。將1ml轉(zhuǎn)移到Eppendorf管中并將溶劑在氮?dú)饬髦姓舭l(fā)。然后加入1.00g實(shí)施例1的載體，用玻璃棒混合并離心。重復(fù)5次。
睪丸激素(T)將3.94mg TP溶解到15ml水中，然后用乙醇加到100ml。將1ml轉(zhuǎn)移到Eppendorf管中并將溶劑在氮?dú)饬髦姓舭l(fā)。然后加入1.00g實(shí)施例1的載體，用玻璃棒混合并離心。重復(fù)5次。
在麻醉兔背脊皮膚的大約4cm2的區(qū)域標(biāo)記上不能擦除的點(diǎn)標(biāo)記，將各種制劑用于該區(qū)域。用彎曲的玻璃桿涂抹器將約30mg制劑(含有1ug T或TP)應(yīng)用到所述位點(diǎn)，“涂抹”該制劑知道其被皮膚吸收，這費(fèi)時(shí)5-10分鐘。在該過程種要注意該制劑粘度的任何改變。
結(jié)果制劑應(yīng)用在T和TP組中這些制劑的平均用量為1ug±0.02ug。
血漿中的總睪丸激素在兩動(dòng)物組中都出現(xiàn)可檢測水平的睪丸激素(標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為2.5-100pg/ml)，在T組中，應(yīng)用后1、8和16小時(shí)測得的最大血漿濃度為30.90±11.00(平均值±SE)pg/ml。所有值都減去t＝0時(shí)的基準(zhǔn)測量值以校正血漿中存在的背景水平。
對(duì)于雄性，睪丸激素的正常水平為437-707pg/ml，對(duì)于雌性為24-47pg/ml。因此上述所應(yīng)用的1ug劑量可以提供雌性的治療劑量。
討論當(dāng)睪丸激素和磷酸睪丸激素都使用時(shí)，血液中的睪丸激素的濃度增加，這表明實(shí)施例1載體中配制的睪丸激素和磷酸睪丸激素提供了運(yùn)輸睪丸激素的有效制劑。
實(shí)施例5在該實(shí)施例中測定了使用實(shí)施例1的載體，阿托品在兔中的跨皮膚運(yùn)輸。
靜脈內(nèi)(IV)研究向有意識(shí)的Sprague Dawley兔給予硫酸阿托品(Sigma Catalogue #A-0257)(n＝3)或磷酸阿托品(n＝4)的IV注射劑，劑量為2mg/kg，監(jiān)測6小時(shí)。在給予任一阿托品制劑之前向所有的動(dòng)物(n＝7)給予生理鹽水，結(jié)果如圖5和6所示。
將硫酸阿托品給予非試驗(yàn)兔后前60分鐘比給藥前基準(zhǔn)值，P＜0.05。
將硫酸阿托品給予24小時(shí)前用磷酸阿托品預(yù)處理過的兔后前30分鐘比給藥前基準(zhǔn)值，P＜0.05。
將磷酸阿托品給予非試驗(yàn)兔后前30分鐘比給藥前基準(zhǔn)值，P＜0.05。
結(jié)果5分鐘內(nèi)生理鹽水(n＝7)對(duì)心率(HR)和平均動(dòng)脈壓(MAP)的影響可以忽略不計(jì)。
硫酸阿托品(n＝3)使HR顯著增加(1-way ANOVA重復(fù)測試，P＜0.05)，但不影響MAP，如同所期望的那樣。該影響在注射后持續(xù)大約60分鐘。
磷酸阿托品(n＝4)使HR顯著增加(1-way ANOVA重復(fù)測試，P＜0.05)，但不影響MAP，如同所期望的那樣。該影響在注射后持續(xù)大約30分鐘。
將硫酸阿托品給予(在第二天)四分之三的已預(yù)先接受了磷酸阿托品(即在接受了磷酸阿托品之后)的兔，硫酸阿托品引起與磷酸阿托品非常相似時(shí)間段的HR增加(1-way ANOVA重復(fù)測試，P＜0.05)。
跨膜膏藥研究使有意識(shí)的Sprague Dawley兔接受硫酸阿托品(以20mg/kg配制在實(shí)施例1所述的載體中，n＝6)或磷酸阿托品(以20mg/kg配制在實(shí)施例1所述的載體中，n＝6)，這些物質(zhì)局部地應(yīng)用到背臀部皮膚(在24小時(shí)前已刮過并用“去毛劑”處理過)。然后將暴露于藥/載體的皮膚區(qū)域用Tegaderm(3M)藥膏覆蓋，監(jiān)測動(dòng)物24小時(shí)。還通過靜脈內(nèi)給藥使有意識(shí)的Sprague Dawley兔接受2mg/kg的硫酸阿托品。結(jié)果如圖7和8所示。
硫酸阿托品給藥后6小時(shí)比給藥前基準(zhǔn)值，P＜0.01(1-way RMANOVA)。
硫酸阿托品的影響比載體，P＜0.01(2-way RM ANOVA)。
磷酸阿托品給藥后5分鐘比給藥前基準(zhǔn)值，P＜0.01(1-way RMANOVA)。
磷酸阿托品處理/相互反應(yīng)時(shí)間比載體，+P＜0.05(2-way RMANOVA)。
結(jié)果在24小時(shí)內(nèi)實(shí)施例1的載體單獨(dú)(n＝7)對(duì)心率(HR)和平均動(dòng)脈壓(MAP)的影響可以忽略不計(jì)。
在兔中6小時(shí)內(nèi)硫酸阿托品導(dǎo)致HR快速、穩(wěn)定的升高，到24小時(shí)恢復(fù)。與其自身的用藥前基準(zhǔn)值和IV給藥的硫酸阿托品(1-wayANOVA重復(fù)測量，P＜0.01)及載體處理組(2-way ANOVA重復(fù)測試，P＜0.01)相比，該效果顯著。硫酸阿托品并不改變MAP。
磷酸阿托品使HR升高，但是僅在第5分鐘(P＜0.01)且該心跳過速衰減。與其自身的用藥前基準(zhǔn)值及載體處理組(2-way ANOVA重復(fù)測試，處理/相互反應(yīng)時(shí)間，P＜0.01)相比，該效果顯著。磷酸阿托品并不改變MAP。
結(jié)論當(dāng)通過IV和局部給藥時(shí)(直到6小時(shí))實(shí)施例1載體中配制的阿托品導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)學(xué)上明顯的心跳過速，在IV給藥后磷酸阿托品表現(xiàn)出與阿托品相似的活性，但局部給藥效果較低(參考圖3)。重要的是，在心率改變過程中平均動(dòng)脈血壓并沒有明顯的改變。這充分證明心率的改變是由于有效地跨皮膚運(yùn)輸?shù)陌⑼衅匪T導(dǎo)產(chǎn)生的，而不是由于操作實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物或其它的實(shí)驗(yàn)室條件所導(dǎo)致的。
實(shí)施例6在該實(shí)施例中測定了使用實(shí)施例1的載體，嗎啡在兔中的跨皮膚運(yùn)輸。
方法動(dòng)物有意識(shí)的Sprague Dawley兔(～280g)，每組n＝6。
跨皮膚制劑的制備鹽酸嗎啡，GLAXO Australia Pty Ltd(商品目錄號(hào)22284)。通過加入碳酸鉀，水溶液中的HCl形式形成嗎啡自由基。在過程在Monash大學(xué)完成(鹽酸嗎啡不能用于霜?jiǎng)?，因此需要使用自由?。
將嗎啡(10mg/kg)應(yīng)用到實(shí)施例1的載體中并與腹腔給予的相同劑量相比較。在嗎啡發(fā)生作用時(shí)，通過兔對(duì)心臟的延遲反應(yīng)與收縮爪所花的延遲時(shí)間來測量效果。
腹腔內(nèi)(i.p.)制劑將Glaxo Australia Pty Ltd(商品目錄號(hào)22284)的鹽酸嗎啡溶解在生理鹽水中-3和10mg/kg劑量。
檢測方法設(shè)計(jì)腳底痛覺計(jì)(plantar analgesiometer)來迅速有效地監(jiān)測小實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物的痛覺喪失水平。將一熱源(～45℃的紅外光)應(yīng)用于該動(dòng)物的后爪，使用該裝置測量收縮爪所花的時(shí)間(爪收縮反應(yīng)時(shí))。該熱的盤子提供穩(wěn)定的表面溫度，其帶有固定的，精度為0.1℃的數(shù)字溫度計(jì)和精度為0.1秒的計(jì)時(shí)器。將該動(dòng)物放在該熱盤子上，用干凈的環(huán)繞該盤子的丙烯酸籠子限制柱該動(dòng)物并監(jiān)測爪子拍打反應(yīng)。爪子拍打反應(yīng)的時(shí)間周期延長證明痛覺喪失。
系統(tǒng)性痛覺研究以兩種劑量3和10mg/kg向各個(gè)單獨(dú)組兔的腹腔(i.p.)注射生理鹽水或鹽酸嗎啡之前和之后，對(duì)有意識(shí)Sprague Dawley兔進(jìn)行痛覺喪失測試。
結(jié)果顯示在圖9中，生理鹽水(n＝6)對(duì)反應(yīng)時(shí)沒有影響。嗎啡使反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生劑量依賴性增加，這表明痛覺喪失(陽性對(duì)照)。
跨皮膚膏藥研究在應(yīng)用任何跨皮膚膏藥前至少24小時(shí)，將去毛入膏用于兔皮膚的后臀部區(qū)域(在麻醉的情況下)。使Sprague Dawley兔(～400g)接受以10mg/kg包含在實(shí)施例1的載體中的嗎啡。該劑量是根據(jù)鹽酸嗎啡腹腔注射液的圖9的結(jié)果而選擇的。然后用Tegaderm膏藥將暴露于藥物/載體的皮膚區(qū)域覆蓋，在嗎啡給藥之前或之后對(duì)所有的動(dòng)物進(jìn)行痛覺喪失測試。
在測試的第一天，使3只動(dòng)物接受單獨(dú)的實(shí)施例1的載體(vehicle)和三只接受包含在實(shí)施例1的載體中的嗎啡。在接下來的一天里，顛倒處理，而使6只兔在2天的交叉設(shè)計(jì)處理中都被給予了載體或嗎啡。在另一系列兔中可以重復(fù)該試驗(yàn)。結(jié)果顯示在圖10-13中。單獨(dú)的載體制劑(n＝6)對(duì)爪收縮反應(yīng)時(shí)沒有影響，包含在實(shí)施例1的載體中的嗎啡(n＝6)提高了爪收縮的反應(yīng)時(shí)。在第一天或第二天的交叉設(shè)計(jì)(n＝3)表明了同樣的結(jié)果，這表明嗎啡在24小時(shí)后沒有持續(xù)的效果，因?yàn)榈诙斓妮d體測試(第一天的嗎啡測試后的相同兔)與第一天其它兔的載體測試使相似的。但是，仔細(xì)觀察第一天測試的嗎啡數(shù)據(jù)(圖12)，這組兔在嗎啡給藥之前具有高的基準(zhǔn)值，可能對(duì)這組中給予嗎啡后反應(yīng)時(shí)的增加相對(duì)較小有作用。
結(jié)果對(duì)于所有組，上述反應(yīng)的時(shí)間進(jìn)程是相似的，即嗎啡的效果在應(yīng)用后15分鐘提早出現(xiàn)。在這些組中，最大效果看上去非常相似，具有相似的反應(yīng)延遲時(shí)間15-90分鐘(即在這些時(shí)間內(nèi)效果穩(wěn)定)。
一旦給予上述嗎啡治療，該兔的行為和外表表現(xiàn)出睡意和稍微的身體懶散，這更進(jìn)一步表明了在跨皮膚應(yīng)用時(shí)嗎啡在系統(tǒng)中的巨大效果。這顯示了該藥物是通過皮膚轉(zhuǎn)運(yùn)的且具有一些中樞介導(dǎo)效應(yīng)。在應(yīng)用位點(diǎn)周圍沒有出現(xiàn)紅斑或發(fā)炎的跡象。
結(jié)論總之，該數(shù)據(jù)提供了嗎啡可以用本發(fā)明的載體通過皮膚運(yùn)輸并介導(dǎo)中樞效應(yīng)的初步證據(jù)。在所有案例中都沒有出現(xiàn)與應(yīng)用區(qū)域有關(guān)的紅斑或發(fā)炎跡象。
實(shí)施例1載體中的嗎啡提高了爪收縮反應(yīng)時(shí)，這表明在跨皮膚應(yīng)用嗎啡后發(fā)生痛覺喪失。
在本說明書中使用的單詞“包含“和單詞“含有”的形式并不對(duì)本發(fā)明產(chǎn)生限定作用而排除任何改變或增加。
對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說對(duì)本發(fā)明進(jìn)行改進(jìn)或改良是顯而易見的，這些改進(jìn)和改良都包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.提高局部給藥的藥物學(xué)和藥理學(xué)活性化合物的功效和/或跨皮膚運(yùn)輸?shù)姆椒?，所述的方法包括將該藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物結(jié)合到載體中的步驟，該載體包括有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物選自生育酚、維生素A(視黃醇)、維生素K(甲萘醌)、生育三烯醇和維生素D(鈣化醇)和其混合物。
3.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中所述的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的磷酸衍生物復(fù)合體由選自精氨酸、賴氨酸和三取代胺的復(fù)合體試劑制備。
4.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中所述的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的磷酸衍生物選自該藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的單磷酸脂、該藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的雙磷酸脂及其混合物。
5.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中所述的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體的有效量是指載體總重量的1-90％w/w。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其中所述的有效量是40-90％w/w。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中所述的有效量是45-75％w/w。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中所述的有效量是50-60％w/w。
9.如權(quán)利要求5所述的方法，其中所述的有效量是1-10％w/w。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述的有效量是1-15％w/w。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述的有效量是5-10％w/w。
12.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中所述的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體選自生育酚的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體和其混合物。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體選自十二烷基亞氨基二丙酸單磷酸生育酚、十二烷基亞氨基二丙酸雙磷酸生育酚和其混合。
14.如權(quán)利要求12或13所述的方法，其中所述的生育酚的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體的有效量是指載體總重量的0.1-10％w/w。
15如權(quán)利要求14所述的方法，其中所述的有效量是5-10％w/w。
16.如權(quán)利要求15所述的方法，其中所述的有效量是約7.5％w/w。
17.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中所述的載體還含有賦型劑，該賦型劑選自溶劑、表面活性劑、緩和劑、防腐劑、著色劑、芳香劑和其混合。
18.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的載體包括7.50％十二烷基亞氨基二丙酸磷酸生育酚、61.95％的去離子水、5.00％的丙三醇、0.05％的EDTA三鈉、0.50％的卡波姆(carbomer)(Carbopol Ultrez 10)、2.00％的Phoenoxol T(棕櫚醇和ceteareth-20)、1.00％甘油硬脂酸脂(Emerest 2400)、5.00％異丙基豆蔻酸脂(Pelemol IPM)、3.50％十六烷基己酸乙酯(Pelemol 168)、3.50％異十六烷基山崳酸鹽酯(Pelemol ICB)、3.00％油酸芥酸甲酯(CetiolIJ-600)、0.50％矽靈(Dow 200，100cst.)、5.00％去離子水、0.50％三乙醇胺(99％)和1.00％Germaben II(丙二醇，雙咪唑烷基脲，羥苯甲酯(methylparaben)和羥苯丙酯(propylparaben))。
19.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中所述的藥物學(xué)和藥理學(xué)活性化合物選自嗎啡、阿托品、雌二醇和睪丸激素。
20.在局部給藥藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物時(shí)使用的載體，該載體包括有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體。
21.在局部給藥藥物學(xué)和藥理學(xué)活性化合物時(shí)使用的載體組合物，所述載體包括有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體。
22.藥物學(xué)組合物，該組合物含有一種或多種藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物和載體，該載體含有有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體。
23.有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體與其它賦型劑一起在制備用于局部給藥藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物的載體中的用途。
24.提高局部給藥的藥物學(xué)和藥理學(xué)活性化合物的功效和跨皮膚運(yùn)輸?shù)姆椒ǎ龇椒ò▽⒃撍幬飳W(xué)或藥理學(xué)活性化合物結(jié)合到載體中的步驟，該載體包括有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體。
25.用于局部給藥藥物學(xué)和藥理學(xué)活性化合物的載體，所述的載體包括有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物復(fù)合體。
全文摘要
提供了提高局部給藥的藥物學(xué)和藥理學(xué)活性化合物的功效和/或跨皮膚轉(zhuǎn)運(yùn)的方法，所述的方法包括將該藥物學(xué)或藥理學(xué)活性化合物結(jié)合在載體中的步驟，該載體包括有效量的藥物學(xué)上可接受的親脂性化合物的一種或多種磷酸衍生物。
文檔編號(hào)A61K47/22GK1684709SQ03822559
公開日2005年10月19日 申請(qǐng)日期2003年8月7日 優(yōu)先權(quán)日2002年8月9日
發(fā)明者西蒙·邁克爾·韋斯特, 戴維·卡納 申請(qǐng)人:生命健康科學(xué)有限公司