專利名稱：用于治療體溫調(diào)節(jié)機(jī)能障礙的5ht的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療、預(yù)防、減輕或抑制血管舒縮不穩(wěn)定的方法以及實(shí)現(xiàn)該作用的組合物。更具體而言，本發(fā)明涉及化合物和化合物的組合物以及它們的應(yīng)用，所述應(yīng)用是通過調(diào)節(jié)血清素(5HT)水平來激活5HT2a受體。本發(fā)明還涉及一種增強(qiáng)通過5HT2a受體的5HT信號的方法，所述受體使用組合療法治療體溫調(diào)節(jié)紊亂、使用5HT1a拮抗劑和血清素再攝取抑制劑(SRI)的組合、藥物組合物及含該藥物組合物的產(chǎn)品。
背景技術(shù)：
眾所周知，熱潮紅是由性固醇水平的波動引起的，在男性和女性中它們都可以是分裂的而不起作用。熱潮紅可持續(xù)最多30分鐘，頻率可從一周幾次到每天發(fā)作很多次。當(dāng)病人突然感覺到熱迅速從臉部擴(kuò)展到前胸和背部，然后遍布身體其余部分時(shí)，即發(fā)生了熱潮紅。發(fā)病時(shí)通常伴隨有大量出汗。它們有時(shí)每小時(shí)出現(xiàn)幾次，并經(jīng)常發(fā)生在晚上。夜間發(fā)生熱潮紅和出汗可造成睡眠不足，導(dǎo)致心理上和情緒上的癥狀，如緊張、疲勞、煩躁不安、失眠、抑郁、記憶力下降、頭痛、焦慮、緊張膽怯或注意力不集中(Murphy等，3rdInt′I Synposium on RecentAdvances in Urological Cancer Diagnosis and Treatment-Proceedings，巴黎，法國SCI3-7(1992))。
對于患有乳腺癌而幸存的女性而言熱潮紅甚至?xí)鼑?yán)重，原因如下1)很多乳腺癌幸存者服用三苯氧胺，其最常見的副作用是熱潮紅，2)很多治療過乳腺癌的女性由于化療而過早絕經(jīng)，3)有乳腺癌史的女性由于擔(dān)心可能再發(fā)生乳腺癌而通常拒絕雌激素治療(Waldinger等，Maturitas，2000，36(3)165-168頁)。
男人也會由于甾類激素(雄激素)缺乏而出現(xiàn)熱潮紅。在與年齡相關(guān)的雄激素減少情況下確是如此(katovich等，Proceedings of the Society forExperimental Biology & Medicine，1990.193(2)129-35頁)，以及在極端情況下，即與前列腺癌治療有關(guān)的激素缺乏時(shí)也是如此(Berendsen等，EuropeanJournal of Pharmacology，2001.419(1)47-54頁)。多達(dá)三分之一的這些病人將出現(xiàn)持久和頻繁的癥狀，情況嚴(yán)重到足以導(dǎo)致明顯不適和不便。
絕經(jīng)熱潮紅最常用的治療方法是激素替代療法(口服、透皮或通過植入物)，然而一些病人不能忍受雌激素或雄激素治療(Berendsen，Maturitas，2000.36(3)155-164頁，F(xiàn)ink等，Nature，1996.383(6598)306頁)。另外，一般不推薦對患有或具有患激素敏感性癌風(fēng)險(xiǎn)(如，乳腺癌或前列腺癌)的女性或男性使用激素替代療法。因此臨床上正在評估非甾族療法(如，氟西汀(fluoxetine)、帕羅西汀(paroxetine)和可樂定(clonidine))。W09944601公開了一種通過用氟西汀給藥而減輕女性熱潮紅的方法。還研究了治療熱潮紅的其他方法，包括甾類、α-腎上腺素能激動劑和β-阻斷劑，已取得了不同程度的成功(Waldinger等，Maturitas，2000.36(3)165-168頁)。
Berendsen等(《歐洲藥理學(xué)雜志》，2001，419(1)47-54頁)和Fink，G.等(Clinical & Experimental Pharmacology & Physiology，1998.25(10)764-75頁)報(bào)道，5-HT2a受體拮抗劑適于治療熱潮紅。
熱潮紅是巨大的生理和心理壓力的根源。雖然性激素和神經(jīng)遞質(zhì)的平衡對于保持正常的體溫調(diào)節(jié)是至關(guān)重要的，但有關(guān)體溫調(diào)節(jié)機(jī)能障礙的機(jī)理本身基本上是未知的。體溫調(diào)節(jié)紊亂往往采取藥物治療，然而尚未提出幾乎沒有副作用的滿意療法。因此，基于體溫調(diào)節(jié)的多面性，可用多種治療法和途徑治療血管舒縮不穩(wěn)定。
本發(fā)明的目的在于促進(jìn)5HT2a受體給信號以減輕血管舒縮不穩(wěn)定的新機(jī)理。
發(fā)明概述本發(fā)明提供一種治療罹患體溫調(diào)節(jié)紊亂或易于體溫調(diào)節(jié)紊亂的主體的方法，該方法包括用治療有效量的一種或多種激動5HT2a受體的化合物對主體給藥。
本發(fā)明還提供由內(nèi)源產(chǎn)生的化合物，如血清素激動5HT2a受體的方法。本發(fā)明包括一種方法，其中內(nèi)源產(chǎn)生的血清素受一種5HT1a拮抗劑和一種SRI調(diào)節(jié)。在本發(fā)明的一些方面，5HT1a拮抗劑和SRI可由具有雙重活性的單一化合物提供。還提供一種使用組合療法的方法，包括結(jié)合使用有效量的第一成分和有效量的第二成分向主體給藥，其中第一組分為5HT1a拮抗劑、其衍生物和或藥學(xué)上可接受的鹽，第二組分為血清素再攝取抑制劑、其衍生物和或藥學(xué)上可接受的鹽。在另一實(shí)施方案中，提供一種激動5HT2a受體的方法，該方法是與5HT1a拮抗劑一起使用諸如氟西汀、帕羅西汀、舍曲林(sertraline)和氟伏沙明(fluvoxamine)、阿莫沙平(amoxapine)、多塞平(doxepin)、丁氨苯丙酮(bupropion)和阿米替林(amitriptyline)的任何化合物來給藥。
還提供一種方法，其中用外源性給藥的化合物激動5HT2a受體。
本發(fā)明還提供一種產(chǎn)品，其包含有效量的血清素再攝取抑制劑(SRI)和5HT1a拮抗劑作為組合制劑，用于同時(shí)、分別或依次地治療和/或預(yù)防體溫調(diào)節(jié)紊亂。
本發(fā)明另一方面涉及5HT2a激動劑在制備用于治療和/或預(yù)防體溫調(diào)節(jié)紊亂的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供SRI和5HT1a拮抗劑在制備用于同時(shí)、分別或依次地治療和/或預(yù)防所述體溫調(diào)節(jié)紊亂的組合制劑中的用途。優(yōu)選5HT2a激動劑選自1-(2，5-二甲氧基-4-碘苯基)-2氨基丙烷(DOI)和(±)-2，5-二甲氧基-4-溴苯丙胺氫溴酸鹽(DOB)。SRI優(yōu)選地選自氟西汀、帕羅西汀、舍曲林、氟伏沙明、度洛西汀(duloxetine)、阿莫沙平、多塞平、丁氨苯丙酮、西酞普蘭和阿米替林。5HT1a拮抗劑優(yōu)選地選自N-[2-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]乙基]-N-2-吡啶基環(huán)己烷羧酰胺(WAY-100635)、(R)-N-(2-甲基-(4-吲哚基-1-哌嗪基)乙基)-N-(2-吡啶基)環(huán)己烷羧酰胺和NAD-299(Astra Zeneca)。5HT1a拮抗劑最優(yōu)選為N-[2-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]乙基]-N-2-吡啶基環(huán)己烷羧酰胺。
附圖簡述從以下的詳細(xì)說明和附圖可以更全面地理解本發(fā)明，這形成本申請的一部分。


圖1A和1B描述了5HT2a受體在體溫調(diào)節(jié)中的作用(參考實(shí)施例1)。
圖2A和2B表示5HT2c受體與血管舒縮不穩(wěn)定的嗎啡依賴的大鼠模型中的體溫調(diào)節(jié)無關(guān)(*表示與佐劑對照相比，p＜0.05)(參考實(shí)施例2)。
圖3A和3B表示用SRI和5HT1a組合使5HT信號重定向到5HT2a受體在減輕熱潮紅中的作用(*表示與佐劑對照相比，p＜0.05)(參考實(shí)施例3)。
圖4A和4B表示與SRI結(jié)合的5HT1a受體拮抗作用在減輕熱潮紅中的作用(參考實(shí)施例4)。圖4A*表示與佐劑對照相比，p＜0.05；Ω表示與氟西汀10mg/kg相比，p＜0.05。圖4B*表示與佐劑對照相比，p＜0.05；Ψ表示與WAY-100635 0.1mg/kg相比，p＜0.05；Φ表示與WAY-100635 1.0mg/kg相比，p＜0.05。
圖5A表示5HT2a受體拮抗劑(MDL-100907)阻斷SRI，如氟西汀和5HT1a受體拮抗劑(WAY-100635)結(jié)合的能力。圖5B表示一劑量(10mg/kg)的氟西汀(一種SRI化合物)對于減輕熱潮紅是無效的，但被5HT2a受體拮抗劑增效。圖5C表示有效量(30mg/kg)的氟西汀(一種SRI化合物)類似地被5HT2a受體拮抗劑增效(參考實(shí)施例5)。*表示與佐劑對照相比，p＜0.05；Φ表示與0.01mg/kg的MDL-100907相比，p＜0.05；Ψ表示與0.1mg/kg的MDL-100907相比，p＜0.05。
發(fā)明詳述本發(fā)明包括治療、預(yù)防、減輕或抑制主體中，優(yōu)選人體中血管舒縮不穩(wěn)定的方法，該方法包括使用治療有效量的一種或多種激動5HT2a受體的化合物進(jìn)行給藥。該5HT2a受體可被內(nèi)源或外源產(chǎn)生的化合物所激動。本發(fā)明還包括其中內(nèi)源產(chǎn)生的化合物是血清素的方法。內(nèi)源產(chǎn)生的血清素可通過5HT1a拮抗劑和SRI的組合、藥物組合物及含該藥物組合物的產(chǎn)品進(jìn)行調(diào)節(jié)。
本發(fā)明可用于治療絕經(jīng)誘發(fā)的熱潮紅、化學(xué)或手術(shù)誘發(fā)的類固醇缺乏(癌癥幸存者)、雄激素切除治療和抗雌激素治療等。本發(fā)明對于不能接受基于類固醇治療的患者是特別有用的。
以下定義提供了說明書中術(shù)語和縮寫的完整意思。
說明書中對應(yīng)于測量、技術(shù)、性質(zhì)或化合物的單位的縮寫如下“min”指分鐘、“h”指小時(shí)、“μL”指微升、“mL”指毫升、“μM”指微摩爾/體積、“mM”指毫摩爾/體積、“M”指摩爾/體積、“mmole”指毫摩爾、“SEM”指平均標(biāo)準(zhǔn)誤差以及“IU”指國際單位?！唉ぁ妗敝肝膊勘砥囟鹊淖兓?，以納洛酮(naloxone)誘發(fā)潮紅前15分鐘基準(zhǔn)TST取準(zhǔn)?！唉ST”指TST相對于基準(zhǔn)的變化，“ED50值”指達(dá)到終點(diǎn)讀數(shù)布居數(shù)的50％的劑量。
“尾部表皮溫度”縮寫為TST。
“血清素再攝取抑制劑”縮寫為SRI。選擇性血清素再攝取抑制劑是一類SRI，縮寫為SRI。SRI的實(shí)例非限定性地包括氟西汀、帕羅西汀、舍曲林、度洛西汀、氟伏沙明、阿莫沙平、多塞平、丁氨苯丙酮、西酞普蘭和阿米替林。
“血清素”縮寫為5HT。
“皮下的”縮寫為sc。
本說明書的正文中使用很多術(shù)語。這里使用的術(shù)語“治療法”包括預(yù)防性的(如預(yù)防藥)、治愈性的或減緩性的治療法，這里使用的“治療”也包括預(yù)防性的、治愈性的或減緩性的治療。
這里使用的術(shù)語“主體”是指可用本發(fā)明組合物、方法治療的動物，包括人類。如未特別指定一種性別，術(shù)語“主體”指男性和女性。
術(shù)語“患者”包括可從血管舒縮紊亂的治療或預(yù)防中受益的任何動物。術(shù)語患者包括雌性動物，該雌性動物包括人，就人而言，不僅指已絕經(jīng)的老年婦女，也指已過早絕經(jīng)、做過子宮切除術(shù)或者由于其他原因而抑制了雌激素產(chǎn)生的婦女，如那些長期用皮質(zhì)類固醇給藥、罹患Cushions綜合癥或性腺發(fā)育不良的人。術(shù)語“患者”并不限于女性。
術(shù)語“過早絕經(jīng)”是指40歲前出現(xiàn)的由未知原因引起的卵巢衰竭?？赡芘c抽煙、生活在高海拔地區(qū)或者營養(yǎng)狀態(tài)不良有關(guān)。人工絕經(jīng)可能是由卵巢切除手術(shù)、化療、骨盆輻射或任何損害卵巢供血的方法引起的。
卵巢切除術(shù)是指切除卵巢，會導(dǎo)致類固醇缺乏(Merchenthaler等，Maturitas，1998，Nov 16；30(3)307-316頁)。
術(shù)語“絕經(jīng)前”是指在絕經(jīng)以前，術(shù)語“絕經(jīng)期”是指在絕經(jīng)期間，術(shù)語“絕經(jīng)后”是指在絕經(jīng)以后。
術(shù)語“熱潮紅”是已知的術(shù)語，指體溫陣發(fā)性紊亂，通常表現(xiàn)在表皮溫度突然升高，一般伴隨有主體出汗和排汗。
術(shù)語“熱潮紅”可與術(shù)語血管舒縮不穩(wěn)定、血管舒縮機(jī)能障礙、體溫調(diào)節(jié)紊亂、盜汗、熱冷戰(zhàn)、血管舒縮障礙或血管舒縮失調(diào)替換使用。
“治療有效量”是指在劑量和必需時(shí)間周期內(nèi)達(dá)到預(yù)期結(jié)果的有效量。應(yīng)該認(rèn)識到的是，本發(fā)明治療有效量的成分視不同患者而異，不僅與所選的特定化合物、成分或組合物、給藥途徑以及成分(單獨(dú)使用或與一或多種組合藥物進(jìn)行組合)在個(gè)體內(nèi)產(chǎn)生預(yù)期響應(yīng)的能力有關(guān)，而且與以下因素有關(guān)，例如要減輕的疾病狀態(tài)或病情的嚴(yán)重性，個(gè)體的年齡、性別、體重，患者的狀態(tài)以及需治療的病情的嚴(yán)重程度，共用的藥物或具體的飲食以及特定的患者和本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他因素；合適的劑量最終由主治醫(yī)生的判斷而定?？梢哉{(diào)整給藥方案以產(chǎn)生最佳的治療響應(yīng)。治療有效量也指這樣的量，該量使成分的有益療效超過其任何毒性的或有害影響。
優(yōu)選地，用本發(fā)明化合物給藥的劑量和時(shí)間是使得熱潮紅指數(shù)比開始治療前的熱潮紅指數(shù)有所降低。與開始治療前的熱潮紅嚴(yán)重性相比，這樣的治療也有利于減輕所經(jīng)受的熱潮紅整體的嚴(yán)重性或強(qiáng)度分布。主體優(yōu)選為人類，可以是女性，特別優(yōu)選絕經(jīng)期間、絕經(jīng)的或絕經(jīng)后的女性。根據(jù)本發(fā)明也可治療男性特征消失(andropausal)的男性患者。
本發(fā)明使用的藥物包括5HT2a激動劑、具有雙重活性的單一化合物中的5HT1a拮抗劑和血清素再攝取抑制劑的組合，或化合物的組合，及其藥學(xué)上可接受的鹽，以及藥學(xué)上可接受的載體。該組合物可包含一種或多種5HT2a激動劑，或者一種或多種血清素再攝取抑制劑和5HT1a拮抗劑的每種作為活性成分，或者一種或多種同時(shí)具有血清素再攝取抑制劑活性和5HT1a拮抗劑活性的化合物，以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。
術(shù)語“調(diào)節(jié)”指增強(qiáng)或抑制生物活性或方法的功能性的能力，例如受體結(jié)合或信號活性。這樣的增強(qiáng)或抑制可視出現(xiàn)的特定情況而定，如活化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑和/或只在特定細(xì)胞類型中顯現(xiàn)。該調(diào)節(jié)可括及任何化合物，例如，抗體、小分子、肽、低聚肽、多肽或蛋白質(zhì)，優(yōu)選小分子或肽。
術(shù)語“抑制”是指局部或全部地、在性能上或活性上起到減少、壓制、減輕、預(yù)防、降低或消除的作用。術(shù)語“抑制”可同時(shí)適用于體外和體內(nèi)系統(tǒng)。這里使用的術(shù)語“抑制劑”指起抑制作用的任何藥劑。
本發(fā)明范圍內(nèi)，5HT1a拮抗劑和血清素再攝取抑制劑可以制成藥學(xué)上可接受的鹽形式。這里使用的術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”指由藥學(xué)上可接受的非毒性的酸，包括無機(jī)酸和有機(jī)酸制得的鹽。合適的非有機(jī)鹽包括無機(jī)酸和有機(jī)酸，例如，醋酸、苯磺酸、安息香酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙烯磺酸、富馬酸、葡糖酸、谷氨酸、氫溴酸、鹽酸、羥基乙磺酸、乳酸、蘋果酸、馬來酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、帕姆(pamoic)酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、對甲苯磺酸等。特別優(yōu)選鹽酸、氫溴酸、磷酸和磺酸，最優(yōu)選鹽酸鹽。
此外，本發(fā)明的化合物可以與藥學(xué)上可接受的溶劑(如水、乙醇等)不相溶和相溶的形式存在。通常，對于本發(fā)明而言，認(rèn)為相溶形式等價(jià)于不相溶形式。
本發(fā)明的一些化合物可含有手性中心，并且這樣化合物可以異構(gòu)體(即，對映體)的形式存在。本發(fā)明包括所有這樣的異構(gòu)體和包括消旋體混合物的該異構(gòu)體的任何混合物。
給藥途徑可以是將5HT2a激動劑或者5HT1a拮抗劑與血清素再攝取抑制劑有效運(yùn)送到適宜的或預(yù)期的作用位置的任何途徑，例如口服、經(jīng)鼻、肺部的、透皮的，如被動輸送或離子滲透輸送，或胃腸外給藥，如直腸、儲存、皮下、靜脈內(nèi)、尿道內(nèi)、肌肉內(nèi)、鼻內(nèi)、眼用的溶液或軟膏。此外，5HT1a拮抗劑和血清素再攝取抑制劑可并行或同時(shí)給藥。
術(shù)語“組合療法”是指用兩種或多種治療劑或化合物給藥，來治療本說明書中描述的治療情形或紊亂，例如熱潮紅、出汗、與體溫調(diào)節(jié)有關(guān)的情形或紊亂等。這樣的給藥包括同時(shí)用這些治療劑或化合物共同給藥，例如，以同時(shí)具有5HT1a拮抗劑和血清素再攝取抑制劑活性的單一化合物形式，或用于5HT1a拮抗劑和血清素再攝取抑制劑活性中第一個(gè)的多種、不同化合物形式。此外，這樣的給藥還包括以并行方式使用每類治療劑。在兩種情況下的治療法中，該藥物組合對于本文所述情形和紊亂都產(chǎn)生了有益療效。
術(shù)語“中樞神經(jīng)系統(tǒng)”或“CNS”包括大腦和脊髓。術(shù)語“周圍神經(jīng)系統(tǒng)”或“PNS”包括神經(jīng)系統(tǒng)中CNS部分以外的所有部分，如腦神經(jīng)和脊神經(jīng)以及植物性神經(jīng)系統(tǒng)。
術(shù)語“成分”、“藥”“藥學(xué)上活性劑”、“藥劑”和“藥物”在此可替換使用，用來指如抗體、小分子、核酸分子、肽、低聚肽、多肽或蛋白質(zhì)的化合物，或含有這些化合物的組合物，當(dāng)向機(jī)體(人或動物)給藥時(shí)，通過局部和/或全身作用，其可引起藥學(xué)上和/或生理上的效果。這里的藥劑可直接作用于5HT2a受體，或產(chǎn)生組合的血清素再攝取抑制作用和5HT1a拮抗作用來調(diào)節(jié)5HT2a受體的信號。
5HT2a受體的活性可被內(nèi)源的激動劑，如5-HT內(nèi)源地激動，或通過用5HT2a激動劑，如藥或其他合成配體給藥而外源地激動?！?HT2a受體活性”包括由(1)內(nèi)源的激動劑、(2)外源的激動劑和(3)內(nèi)源和外源的激動劑的組合所誘發(fā)的活性。此外，受體的活化可歸因于與天然的、變異的或改性的受體有關(guān)的結(jié)構(gòu)性活化。受體可被純化或者存在于體外或體內(nèi)系統(tǒng)中。
本發(fā)明的藥劑可在需要時(shí)給藥或連續(xù)式給藥。需觀察變化所需的治療時(shí)間和治療后等待響應(yīng)的間隔可根據(jù)預(yù)期的效果而改變。對于采用一種以上藥劑的組合療法，該藥劑可被同時(shí)給藥，或者在錯(cuò)開的時(shí)間給藥。
一個(gè)實(shí)施方案中，在鼠類體溫調(diào)節(jié)模型中5HT2a拮抗劑誘發(fā)潮紅，而5HT2a激動劑出人意料地減輕了所誘發(fā)的潮紅。然而已發(fā)現(xiàn)，一些5HT2a激動劑具有不希望的致幻的副作用。因此，在本發(fā)明的其它實(shí)施方案中，5HT2a受體的激動劑中，親合力低于諸如DOI或DOB的化合物的激動劑、部分激動劑或內(nèi)源的激動劑消除了5HT2a激動劑不希望的副作用，而保持了減輕血管舒縮癥狀的療效。舉例來說，可調(diào)節(jié)5HT水平，從而通過其內(nèi)源配體活化5HT2a受體。
在另一實(shí)施方案中，利用DOI(5-HT2a/2c激動劑)的5-HT2a受體激動作用對于防止納洛酮誘發(fā)的尾部表皮溫度的升高具有希望的效果。DOI和DOB是5HT2a激動劑的非限定性實(shí)例。該效果類似于已用此模型評價(jià)的其他臨床治療熱潮紅中所觀察到的效果(Merchenthaler等，Maturitas.，1998.30(3)307-16頁)。此外，在此模型中5-HT2C激動劑和拮抗劑沒有效果，這表明5-HT2a受體得到了調(diào)節(jié)。
在又一實(shí)施方案中，由內(nèi)源的配體、血清素(5-HT)增強(qiáng)的5-HT2a受體的活化提供了一種減輕熱潮紅(使體溫調(diào)節(jié)正?；?而無不希望的致幻副作用的方法。包含5-HT1a受體拮抗劑和SRI的組合療法能夠增強(qiáng)通過5HT2a受體的5HT信號，足以減輕熱潮紅。
再一實(shí)施方案中，5HT2a激動劑選自1-(2，5-二甲氧基-4-碘苯基)-2-氨基丙烷鹽酸鹽(DOI)和(±)-2，5-二甲氧基-4-溴苯丙胺氫溴酸鹽(DOB)。在另一實(shí)施方案中，SRI選自氟西汀、帕羅西汀、舍曲林、氟伏沙明、度洛西汀、阿莫沙平、多塞平、丁氨苯丙酮、西酞普蘭和阿米替林。在又一實(shí)施方案中，5HT1a拮抗劑選自N-[2-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]乙基]-N-2-吡啶基環(huán)己烷羧酰胺(WAY-100635)、(R)-N-(2-甲基-(4-吲哚基-1-哌嗪基)乙基)-N-(2-吡啶基)環(huán)己烷羧酰胺和NAD-299(Astra Zeneca)。
在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，化合物通過外部作用方式作用于5HT2a受體。
實(shí)施例在以下實(shí)施例中進(jìn)一步說明本發(fā)明，除非另有說明，實(shí)施例中所有份數(shù)和百分比以重量計(jì)，溫度為攝氏度。應(yīng)理解的是，這些實(shí)施例雖然描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，但僅為示例性說明。根據(jù)以上的討論和這些實(shí)施例，本領(lǐng)域技術(shù)人員可確定本發(fā)明的基本特征，可對本發(fā)明進(jìn)行各種變化和改進(jìn)，使其適應(yīng)多種用途和情形，而不會偏離本發(fā)明的精神和范圍。
通用方法試劑按WO91/18602中所述合成MDL-100907(5HT2a拮抗劑)。以下試劑可購買到氟西汀(SRI，Sigma)、1-(2，5-二甲氧基-4-碘苯基)-2-氨基丙烷(5HT2a激動劑，DOI，Sigma)、WAY-100635(5HT1a拮抗劑，描述在US 6127357中，在此引作參考)、嗎啡堿丸(Murty Pharmaceuticals，Lexington，KY)、氯胺酮(ketamine)(Phoenix Pharmaceuticals，Belmont，CA)和納洛酮(ResearchBiochemicals International，St.Louis，MO)。
劑量所有化合物溶解在無菌水中，除了MDL-100907溶解在Tween 80中，皮下注射(sc)并按以下劑量給藥氟西汀(10mg/kg)、WAY-100635(0.01、0.1和1.0mg/kg)、DOI(1mg/kg)、MDL-100907(0.3和1mg/kg)和納洛酮(1.0mg/kg)。氯胺酮(Ketaject，Phoenix Pharmaceuticals，Belmont，CA)以40mg/kg進(jìn)行肌內(nèi)給藥，所確定的劑量應(yīng)能起到溫和鎮(zhèn)靜作用，但不引起尾部表皮溫度(TST)的變化。
動物從商家(Taconic，Germantown，NY)購得切除卵巢的Sprague-Dawley大鼠(180-220g)，各自放在25℃的房間里，12小時(shí)的光照/黑暗周期。動物可隨意攝取標(biāo)準(zhǔn)的大鼠食物和水。
嗎啡依賴的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ颓谐殉驳拇笫竺刻熳⑸渥魟┮淮危掷m(xù)8-9天，使壓力反應(yīng)最小，然后在測試當(dāng)天用化合物給藥。一天4劑量，在背部肩胛區(qū)通過皮下(sc)植入兩片緩釋的嗎啡丸(75mg/丸)來誘發(fā)嗎啡依賴性。該模型基于已建立的嗎啡依賴的由納洛酮誘發(fā)潮紅的模式，其通過雌激素治療是可逆的(Katovich等，Proceeding of the Society for Experimental Biology & Medicine，1990.193(2)129-35頁)。植入后的四到六天，用阿片樣拮抗劑(納洛酮)引起嗎啡減退，造成TST暫時(shí)升高。在典型實(shí)驗(yàn)中，在注射納洛酮前的1小時(shí)用最后劑量的測試化合物向大鼠給藥。用納洛酮使大鼠溫和地鎮(zhèn)靜下來，并將連接到MacLab數(shù)據(jù)獲取系統(tǒng)的熱敏電阻綁在尾底部。然后連續(xù)監(jiān)測尾部表皮溫度，持續(xù)35分鐘，建立基準(zhǔn)溫度。接著用納洛酮給藥，再測量TST，持續(xù)60分鐘(總記錄時(shí)間為95分鐘)。
OVX-誘發(fā)的體溫調(diào)節(jié)機(jī)能障礙模型為了測定測試化合物對于體溫調(diào)節(jié)的影響，通過遙測來監(jiān)控切除卵巢的大鼠的TST。該模型改進(jìn)了早先報(bào)道的基于雌激素調(diào)節(jié)的晝間TST模式的規(guī)程(Berendsen等，《歐洲藥理學(xué)雜志》，2001，419卷1期47-54頁)。適應(yīng)環(huán)境后，將溫度和身體活性傳感器(Physio Temp TA10TA-F40，DataSciences International)皮下植入到背部的肩胛區(qū)，溫度探測器的頂端皮下通到尾部，并固定在超出底部2厘米處。經(jīng)過7天恢復(fù)期后，監(jiān)測基準(zhǔn)TST記錄，最多持續(xù)3天，以建立基準(zhǔn)。然后用單一劑量的測試化合物或佐劑向大鼠給藥，連續(xù)監(jiān)測TST，最多持續(xù)12小時(shí)。由于TST在整個(gè)24小時(shí)期間的活性(黑暗)和非活性(光照)階段之間變化，通過在光照周期或黑暗周期剛要開始前用藥，在這些階段的每一階段期間測定該測試化合物的作用。
統(tǒng)計(jì)分析為了分析嗎啉依賴的大鼠中由納洛酮誘發(fā)的TST變化，用兩因子重復(fù)測量法分析所有數(shù)據(jù)。因子為“治療”和“時(shí)間”(重復(fù))。該模型適于測試治療組之間的反應(yīng)是否有明顯差別。從用納洛酮給藥(時(shí)間記為0)之前的20分鐘(-20)到治療后的60分鐘之間以5分鐘為間隔分析數(shù)據(jù)。將前三個(gè)讀數(shù)平均，作為基準(zhǔn)TST值。以ΔTST(每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的TST-基準(zhǔn))分析所有數(shù)據(jù)。對每一時(shí)間點(diǎn)治療組之間的多重比較(最小平方差(LSD)p-值)進(jìn)行分析，然而，用納洛酮給藥后15分鐘時(shí)TST變化是最大的，該時(shí)間點(diǎn)給出了潮紅減輕的最佳指標(biāo)。適當(dāng)時(shí)，計(jì)算ED50的估計(jì)值。用對數(shù)法測定ED50值，該線介于最大響應(yīng)(納洛酮后15分鐘ΔTST)和最小響應(yīng)(納洛酮之前的平均基準(zhǔn)溫度)之間。ED50值表示由納洛酮誘發(fā)的潮紅減輕50％時(shí)測試化合物的劑量。
為了分析體溫調(diào)節(jié)機(jī)能障礙模型中由測試化合物誘發(fā)的TST變化，進(jìn)行重復(fù)的測量分析。分析所用的模型為TST＝((GRP(組)+HR(小時(shí)))+((GRP*HR)+基準(zhǔn)))，使用非結(jié)構(gòu)化的誤差協(xié)方差矩陣。因此，記錄的最小平方平均數(shù)是期望的平均值，如同兩組有相同的基準(zhǔn)值。每小時(shí)GRP*HR間隔的Post-hoc測試實(shí)質(zhì)上是每小時(shí)組間差異的t-檢驗(yàn)。嚴(yán)格來說，除非p-值＜0.025，否則認(rèn)為結(jié)果是不顯著的。用SAS PROC MIXED(SAS，Carey，NC)進(jìn)行所有的分析。對于每個(gè)化合物，通過對服藥前一天的12小時(shí)期間的溫度讀數(shù)求平均來估算每個(gè)大鼠的基準(zhǔn)溫度。
實(shí)施例15HT2a受體對于體溫調(diào)節(jié)的作用對大鼠皮下(sc)注射佐劑(無菌水)、DOI(5HT2a/2c激動劑，Sigma)(溶解在無菌水中，以1mg/kg給藥)，5HT2a拮抗劑MDL-100907的合成按US5134149、US 5561144、US 5700812、US 5700813、US 5721249、US 5874445和US 6004980中所述，在此引作參考，將其溶解在無菌水中，并以0.3、1mg/kg給藥。所有藥物在納洛酮之前20分鐘給藥。
在用納洛酮給藥之前，MDL-100907(5HT2a拮抗劑)明顯誘發(fā)尾部表皮溫度的升高(圖1A)。相反，DOI(5HT2a/2c激動劑)明顯減輕納洛酮誘發(fā)的潮紅，而沒有影響到尾底部的表皮溫度(圖1B)。這些數(shù)據(jù)說明，DOI減輕血管舒縮不穩(wěn)定的能力是通過5HT2a受體選擇性地引入的。
實(shí)施例2血管舒縮不穩(wěn)定性的兩個(gè)大鼠模型中的5HT2c受體和體溫調(diào)節(jié)方法如通用方法部分所述，以下除外對大鼠皮下(sc)注射佐劑(無菌水)，(7bR，10aR)-1，2，3，4，8，9，10，10a-八氫-7bH-環(huán)戊[b][1，4]二氮[6，7，1-hi]吲哚(5HT2c激動劑)的合成按WO 02/42304中所述，將其溶解在無菌水中，并以0.1、3.0mg/kg給藥，將5HT2c拮抗劑(6-氯-5-甲基-1-[[2-[(2-甲基-3-吡啶基)氧]-5-吡啶基]氨基甲酰基]二氫吲哚)(Bromidge等，J.Med.Chem.，1997，40，3494-3496頁)溶解在無菌水中，并以0.1、1.0mg/kg給藥)。所有的藥物在納洛酮之前20分鐘給藥。
在嗎啡依賴的大鼠模型中所有時(shí)間的TST變化(Δ℃，平均值)說明(7bR，10aR)-1，2，3，4，8，9，10，10a-八氫-7bH-環(huán)戊[b][1，4]二氮[6，7，1-hi]吲哚(5HT2C激動劑)(板A)或者6-氯-5-甲基-1-[[2-[(2-甲基-3-吡啶基)氧]-5-吡啶基]氨基甲酰基]二氫吲哚(5HT2c拮抗劑)(板B)沒有明顯減輕納洛酮誘發(fā)的潮紅。5HT2C受體-特定化合物的活性不足說明DOI(5HT2a激動劑)的效果是由于它對5HT2a受體的作用。
實(shí)施例3用SRI和5HT1a受體拮抗劑的組合將5HT信號重定向到5HT2a對大鼠皮下注射佐劑(無菌水)，氟西汀(Sigma，St Louis，MO)以10m/kg溶解在無菌水中)，5HT1a拮抗劑，WAY-100635(Sigma，St Louis，MO)溶解在無菌水中，并以1mg/kg給藥，或者用氟西汀和WAY-100635的組合。在注射納洛酮之前1小時(shí)用氟西汀給藥，在納洛酮之前20分鐘用WAY-100635給藥。
在嗎啡依賴的大鼠模型中所有時(shí)間的TST變化(Δ℃，平均值)說明單獨(dú)用氟西汀或WAY-100635給藥沒有明顯減輕納洛酮誘發(fā)的潮紅(圖3A)。然而，氟西汀和WAY-100635的組合明顯降低納洛酮誘發(fā)的潮紅。在最大潮紅時(shí)(納洛酮后的15分鐘；Δ℃，平均值±SEM)，只有該組合治療減輕了納洛酮誘發(fā)的潮紅(圖3B)。這些數(shù)據(jù)表現(xiàn)了在減輕血管舒縮不穩(wěn)定中SRI和5HT1A受體拮抗劑之間的協(xié)同作用。此外還注意到與5HT2a受體活化有關(guān)的形象的“濕狗樣抖動”的增加。這些數(shù)據(jù)表明組合通過5HT2a受體重定向5HT信號不是5HT作用的普遍現(xiàn)象。
實(shí)施例45HT1a受體拮抗性與SRI結(jié)合的作用對大鼠皮下注射佐劑(無菌水)，或者氟西汀(Sigma，以0.1、1.0或10mg/kg溶解在無菌水中)和5HT1a拮抗劑WAY-100635(溶解在無菌水中并以1.0mg/kg給藥)，或者氟西汀(10mg/kg)和WAY-100635(0.01、0.1或1.0mg/kg)。在注射納洛酮之前1小時(shí)用氟西汀給藥，在納洛酮之前20分鐘用WAY-100635給藥。
在最大潮紅時(shí)(納洛酮后的15分鐘；Δ℃，平均值±SEM)，當(dāng)與WAY-100635(1.0mg/kg)組合時(shí)，氟西汀劑量依賴地減輕納洛酮誘發(fā)的潮紅(圖4A)，ED50值＝0.20±0.11。在最大潮紅時(shí)(納洛酮后的15分鐘；Δ℃，平均值±SEM)，當(dāng)與氟西汀(10mg/kg)組合時(shí)，WAY-100635劑量依賴地減輕納洛酮誘發(fā)的潮紅(圖4B)，ED50值＝0.01±0.009。這些數(shù)據(jù)表明，5HT1A受體拮抗劑是增強(qiáng)SRI的強(qiáng)烈作用的重要因素，因?yàn)樗軌蛞缘蛣┝看龠M(jìn)氟西汀作用。在WAY-100635存在下氟西汀(10mg/kg)提高的效能可能是通過5HT2a受體使5HT信號更有效重定向的結(jié)果。
實(shí)施例55HT2a拮抗作用對大鼠皮下注射佐劑(無菌水)或者氟西汀(Sigma，以10mg/kg溶解在無菌水中)和5HT1a拮抗劑WAY-100635(溶解在無菌水中，并以0.01mg/kg給藥)或者氟西汀(10或30mg/kg)和MDL-100907(5HT2a拮抗劑，0.01或0.1mg/kg)。在注射納洛酮之前55分鐘用MDL-100907給藥，15分鐘后用氟西汀或組合(氟西汀10mg/kg+WAY-1006350.01mg/kg)給藥。
在最大潮紅時(shí)(納洛酮后的15分鐘；Δ℃，平均值±SEM)，MDL-100907劑量依賴地逆反組合藥物減輕納洛酮誘發(fā)的潮紅的作用(圖5A)。相反，在最大潮紅時(shí)(納洛酮后的15分鐘；Δ℃，平均值±SEM)，MDL-100907增強(qiáng)了氟西汀(10mg/kg)的無效劑量(圖5B)。此外，在一劑量氟西汀(30mg/kg)前用MDL-100907給藥減輕了納洛酮誘發(fā)的熱潮紅，也使減輕作用增強(qiáng)。
這些數(shù)據(jù)說明，5HT2A受體拮抗性區(qū)別性地影響氟西汀(10mg/kg)/WAY-100635的組合以及氟西汀10或30mg/kg。因此，與氟西汀結(jié)合的5HT1A受體拮抗作用有別于用低劑量和高劑量的氟西汀進(jìn)行給藥，表現(xiàn)出一種不同的作用模式。
權(quán)利要求
1.一種產(chǎn)品，包含血清素再攝取抑制劑(SRI)和5HT1a拮抗劑作為組合制劑，用于同時(shí)、分別或依次地治療和/或預(yù)防血管舒縮不穩(wěn)定。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的產(chǎn)品，其中所述SRI選自氟西汀、帕羅西汀、舍曲林、氟伏沙明、度洛西汀、阿莫沙平、多塞平、丁氨苯丙酮、西酞普蘭和阿米替林。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的產(chǎn)品，其中所述5HT1a拮抗劑選自N-[2-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]乙基]-N-2-吡啶基環(huán)己烷羧酰胺、(R)-N-(2-甲基-(4-吲哚基-1-哌嗪基)乙基)-N-(2-吡啶基)環(huán)己烷羧酰胺和NAD-299。
4.5HT2a激動劑在制備用于治療和/或預(yù)防血管舒縮不穩(wěn)定的藥物中的用途。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的用途，其中所述5HT2a激動劑選自血清素、1-(2，5-二甲氧基-4-碘苯基)-2-氨基丙烷鹽酸鹽(DOI)和(±)-2，5-二甲氧基-4-溴苯丙胺氫溴酸鹽(DOB)。
6.血清素再攝取抑制劑(SRI)和5HT1a拮抗劑在制備用于同時(shí)、分別或依次地治療和/或預(yù)防所述血管舒縮不穩(wěn)定的組合制劑中的用途。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的用途，其中所述SRI選自氟西汀、帕羅西汀、舍曲林、氟伏沙明、度洛西汀、阿莫沙平、多塞平、丁氨苯丙酮、西酞普蘭和阿米替林。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7的用途，其中所述5HT1a拮抗劑選自N-[2-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]乙基]-N-2-吡啶基環(huán)己烷羧酰胺、(R)-N-(2-甲基-(4-吲哚基-1-哌嗪基)乙基)-N-(2-吡啶基)環(huán)己烷羧酰胺和NAD-299。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種通過用化合物和化合物的組合物給藥治療體溫調(diào)節(jié)紊亂的方法，所述化合物通過調(diào)節(jié)5HT水平激動5HT
文檔編號A61K31/445GK1674880SQ03819477
公開日2005年9月28日 申請日期2003年8月14日 優(yōu)先權(quán)日2002年8月15日
發(fā)明者達(dá)萊恩·科萊曼·迪謝爾, 伊什特萬·約瑟夫·梅謝恩沙勒, 利莎·利文撒爾, 金伯利·瓊·賽普, 勞倫斯·托馬斯·奧康納, 特倫斯·哈羅德·安德利 申請人:惠氏公司