專利名稱：一種擬多晶型hiv蛋白酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及(3R，3aS，6aR)-六氫呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基(1S，2R)-3-[[(4-氨基苯基)磺?；鵠(異丁基)氨基]-1-芐基-2-羥基丙基氨基甲酸酯的新穎的擬多晶型物、其制備方法以及其作為藥物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
在病毒蛋白質(zhì)前體的加工過(guò)程中需要病毒編碼的蛋白酶，它對(duì)病毒復(fù)制必不可少。對(duì)蛋白質(zhì)前體加工的干擾可抑制感染性病毒顆粒的形成。因此，病毒蛋白酶的抑制劑可用來(lái)預(yù)防或治療慢性和急性病毒感染。(3R，3aS，6aR)-六氫呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基(1S，2R)-3-[[(4-氨基苯基)磺?；鵠(異丁基)氨基]-1-芐基-2-羥基丙基氨基甲酸酯具有HIV蛋白酶抑制活性并且特別適于抑制HIV-1和HIV-2病毒。
(3R，3aS，6aR)-六氫呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基(1S，2R)-3-[[(4-氨基苯基)磺?；鵠(異丁基)氨基]-1-芐基-2-羥基丙基氨基甲酸酯的結(jié)構(gòu)如下所示 式(X)在EP 715618、WO 99/67417、US 6,248,775和Bioorganic andChemistry Letters，Vol.8，pp.687-690，1998，“Potent HIV proteaseinhibitors incorporating high-affinity P2-igands and (R)-(hydroxyethylamino)sulfonamide isostere”中公開(kāi)了結(jié)構(gòu)式(X)的化合物及其制備方法，所有這些通過(guò)引用整體結(jié)合到本文。
用于制備商業(yè)用途藥物制劑的藥物必須符合某些標(biāo)準(zhǔn)，包括GMP(藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范)和ICH(國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)議)的指導(dǎo)原則。這些標(biāo)準(zhǔn)包括由多種不同的物理、化學(xué)和藥學(xué)參數(shù)組成的技術(shù)要求。正是由于要考慮這些不同的參數(shù)，才使得藥物制劑成為一門復(fù)雜的技術(shù)學(xué)科。
例如，用于制備藥物制劑的藥物必須達(dá)到可接受的純度。現(xiàn)在已制定有指導(dǎo)原則來(lái)規(guī)定化學(xué)合成生產(chǎn)新藥中雜質(zhì)的限度和合格標(biāo)準(zhǔn)，即在新藥的合成、純化和貯存過(guò)程中最可能出現(xiàn)的實(shí)際和潛在的雜質(zhì)。對(duì)藥物的降解產(chǎn)物、或藥物與賦形劑和/或直接接觸容器/密封系統(tǒng)之間反應(yīng)產(chǎn)物的允許量也建立了指導(dǎo)原則。
穩(wěn)定性也是在創(chuàng)制藥物制劑時(shí)需要考慮的一個(gè)參數(shù)。良好的穩(wěn)定性可保證在藥物制劑的有效期內(nèi)藥物的化學(xué)完整性能得以保持，藥物制劑的有效期是指當(dāng)在理想的或規(guī)定的貯存條件下貯存時(shí)產(chǎn)品可靠保持其質(zhì)量特性的時(shí)間范圍。在此期間，給藥的風(fēng)險(xiǎn)幾乎沒(méi)有，這是因?yàn)榫哂袧撛谖ｋU(xiǎn)的降解產(chǎn)物的存在不會(huì)對(duì)接受者的健康造成有害的后果，也不會(huì)因活性成分含量的降低而造成用藥不足。
不同的因素，例如光線照射、溫度、氧、濕度和在溶液中對(duì)pH的敏感性可能影響穩(wěn)定性并可決定有效期和貯存條件。
生物利用度也是在設(shè)計(jì)藥學(xué)可接受制劑的藥物運(yùn)載方案中要考慮的一個(gè)參數(shù)。生物利用度涉及的是在給藥后某一特定藥物的完整形式在全身循環(huán)中出現(xiàn)的量和比率。因此一種藥物所表現(xiàn)的生物利用度在決定藥物作用部位是否能達(dá)到有效治療濃度時(shí)具有重大意義。
理化因素和藥物技術(shù)配方對(duì)藥物的生物利用度具有影響。因此，當(dāng)要提高生物利用度時(shí)，要考察到藥物的多個(gè)特性如解離常數(shù)、溶解速率、溶解度、多晶型物和顆粒大小。
它還與確定所選藥物制劑是否能夠生產(chǎn)，更恰當(dāng)?shù)卣f(shuō)是大規(guī)模生產(chǎn)有關(guān)。
正是考慮到許多不同的技術(shù)要求及其影響參數(shù)，所以我們不能明確地預(yù)知哪種藥物制劑可被接受。同樣地，我們意外地發(fā)現(xiàn)，對(duì)結(jié)構(gòu)式(X)的化合物固體狀態(tài)的某些改進(jìn)對(duì)其在藥物制劑上的適用性具有正面的影響。
發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明涉及用于制備藥物制劑的擬多晶型式(X)化合物。這些擬多晶型物使藥物制劑的穩(wěn)定性和生物利用度提高?？梢陨a(chǎn)得純度足夠高的擬多晶型物以滿足藥用，更具體地說(shuō)是在生產(chǎn)抑制哺乳動(dòng)物HIV蛋白酶活性的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明涉及的第一個(gè)方面是提供(3R，3aS，6aR)-六氫呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基(1S，2R)-3-[[(4-氨基苯基)磺?；鵠(異丁基)氨基]-1-芐基-2-羥基丙基氨基甲酸酯的擬多晶型物。
所提供的擬多晶型物包括結(jié)構(gòu)式(X)化合物的醇溶劑合物，更具體地說(shuō)是C1-C4醇的溶劑合物；水溶劑合物；烷溶劑合物，更具體地說(shuō)是C1-C4氯代烷的溶劑合物；酮溶劑合物，更具體地說(shuō)是C1-C5酮的溶劑合物；醚溶劑合物，更具體地說(shuō)是C1-C4醚的溶劑合物；環(huán)醚溶劑合物；酯溶劑合物，更具體地說(shuō)是C1-C5酯的溶劑合物；和磺酸溶劑合物，更具體地說(shuō)是C1-C4磺酸溶劑合物。優(yōu)選擬多晶型物是藥學(xué)上可接受的溶劑合物，如水合物和乙醇溶劑合物。具體的擬多晶型物有結(jié)構(gòu)式(X)化合物的A型(乙醇溶劑合物)、B型(水合物)、C型(甲醇溶劑合物)、D型(丙酮溶劑合物)、E型(二氯甲烷溶劑合物)、F型(乙酸乙酯溶劑合物)、G型(1-甲氧基-2-丙醇溶劑合物)、H型(苯甲醚溶劑合物)、I型(四氫呋喃溶劑合物)、J型(異丙醇溶劑合物)。另外一個(gè)具體的擬多晶型物為結(jié)構(gòu)式(X)化合物的K型(甲磺酸溶劑合物)。
本發(fā)明的第二個(gè)方面涉及擬多晶型物的制備方法。擬多晶型式(X)化合物可通過(guò)將結(jié)構(gòu)式(X)的化合物與有機(jī)溶劑、水或水和水混溶性有機(jī)溶劑的混合物結(jié)合后用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)結(jié)晶的方法來(lái)獲得所需要的擬多晶型物。
本發(fā)明的第三個(gè)方面涉及在用于抑制哺乳動(dòng)物HIV蛋白酶活性的藥物制劑的生產(chǎn)中應(yīng)用本發(fā)明的擬多晶型物。本發(fā)明在治療領(lǐng)域的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案涉及使用藥學(xué)上可接受的擬多晶型式(X)化合物來(lái)治療需要哺乳動(dòng)物的HIV病毒性疾病，該方法包括給予所述哺乳動(dòng)物有效劑量的藥學(xué)上可接受的擬多晶型式(X)化合物。
下列附圖提供了本發(fā)明擬多晶型物特性的其它信息。
附圖簡(jiǎn)述

圖1、圖2和圖3是A型(1∶1)粉末的X射線衍射圖譜。
圖4圖為標(biāo)有原子的三維結(jié)構(gòu)的A型(1∶1)。
圖5為A型、B型、D型、E型、F型、H型(1∶1)和無(wú)定形物在1800-100cm-1和3300-2000cm-1羰基伸縮區(qū)域拉曼光譜的比較。
圖6是A型、B型、D型、E型、F型、H型(1∶1)和無(wú)定形物在600-0cm-1羰基伸縮區(qū)域擴(kuò)展拉曼光譜的比較。
圖7是A型、B型、D型、E型、F型、H型(1∶1)和無(wú)定形物在1400-800cm-1羰基伸縮區(qū)域的擴(kuò)展拉曼光譜比較。
在圖5、6和7中，P1對(duì)應(yīng)于A型，P18對(duì)應(yīng)于B型，P19對(duì)應(yīng)于無(wú)定形物，P25對(duì)應(yīng)于E型，P27對(duì)應(yīng)于F型，P50對(duì)應(yīng)于D型，P68對(duì)應(yīng)于H型，P69對(duì)應(yīng)于C型，P72對(duì)應(yīng)于I型，P81對(duì)應(yīng)于G型。
圖8是A型(1∶1)的示差掃描量熱法熱譜圖。
圖9是反映A型晶體產(chǎn)物分子結(jié)構(gòu)振動(dòng)方式的紅外光譜圖。
圖10是反映B型晶體產(chǎn)物分子結(jié)構(gòu)振動(dòng)方式的紅外光譜圖。
圖11A型、B型和無(wú)定形物在4000-400cm-1光譜范圍的紅外光譜圖。
圖12A型、B型和無(wú)定形物在3750-2650cm-1光譜范圍的紅外光譜圖。
圖13A型、B型和無(wú)定形物在1760-1580cm-1光譜范圍的紅外光譜圖。
圖14A型、B型和無(wú)定形物在980-720cm-1的紅外光譜圖。光譜范圍在圖11、12、13和14中，曲線A對(duì)應(yīng)于A型，曲線B對(duì)應(yīng)于B型，曲線C對(duì)應(yīng)于無(wú)定形物。
圖15A型(曲線D)、吸附/解吸附(ADS/DES)后A型(曲線E)和ADS/DES水合試驗(yàn)后A型(曲線F)的DSC熱譜圖曲線。
圖16A型(曲線D)、ADS/DES后A型(曲線E)和ADS/DES水合試驗(yàn)后A型(曲線F)的熱重(TG)曲線。
圖17A型在25℃干燥氮?dú)庵幸詴r(shí)間為函數(shù)的TG曲線。
圖18A型的ADS/DES曲線。
圖19A型水合試驗(yàn)的ADS/DES曲線。
圖20B型的ADS/DES曲線。
圖21K型的紅外光譜圖。
圖22K型的拉曼光譜圖。
圖23K型的，DSC曲線。
圖24K型的TG曲線。
圖25批號(hào)1的K型的ADS/DES等溫線。
圖26批號(hào)2的K型的ADS/DES等溫線。
詳細(xì)說(shuō)明術(shù)語(yǔ)“多晶形性”指一種化學(xué)結(jié)構(gòu)能夠以不同晶形存在，已知包括藥物的許多有機(jī)化合物均能夠以不同晶形存在。同樣地，“多晶型物”成“多晶型”包括包埋有溶劑分子、具有不同程度的水合化或溶劑合化并以無(wú)定形物、晶體和無(wú)水物形式存在的藥物，在晶體硬度、形狀和大小上存在不同的藥物。不同的多晶型物在物理特性例如溶解度、溶出度、固態(tài)穩(wěn)定性以及在制片過(guò)程中粉末流動(dòng)性和粉末壓緊性方面的加工性能上不同。
術(shù)語(yǔ)“無(wú)定形物”定義為不存在三維長(zhǎng)程有序排列的形式。在無(wú)定形物中分子相對(duì)于另一個(gè)分子的位置實(shí)質(zhì)上是無(wú)序的，即不存在分子有序網(wǎng)格結(jié)構(gòu)排列。
術(shù)語(yǔ)“晶體”定義為其中的分子相對(duì)于另一個(gè)分子的位置依照三維網(wǎng)格結(jié)構(gòu)排列的形式。
術(shù)語(yǔ)“無(wú)水型”指其中基本上不含有水分的一種特殊形式?！八献饔谩敝赶蛞蕴囟ㄐ问酱嬖诘奈镔|(zhì)中加入水分子的過(guò)程，而“水合物”是通過(guò)加入水分子而形成的物質(zhì)?！叭軇┖献饔谩敝赶蛞跃w形式存在的物質(zhì)中摻入溶劑分子的過(guò)程。同樣地，術(shù)語(yǔ)“溶劑合物”定義為含有化學(xué)計(jì)量或非化學(xué)計(jì)量溶劑的晶體形式。因?yàn)樗且环N溶劑，所以溶劑合物也包括水合物。術(shù)語(yǔ)“擬多晶型物”指在其晶格結(jié)構(gòu)中摻入有溶劑分子的多晶型物。術(shù)語(yǔ)擬多晶型性常用來(lái)指溶劑合物(Byrn，Pfeiffer，Stowell，(1999)Solid-state Chemistry of Drugs，2nd Ed.，published by SSCI，Inc)。
本發(fā)明提供3R，3aS，6aR)-六氫呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基(1S，2R)-3-[[(4-氨基苯基)磺?；鵠(異丁基)氨基]-1-芐基-2-羥基丙基氨基甲酸酯的擬多晶型物。
在一個(gè)實(shí)施方案中擬多晶型物為結(jié)構(gòu)式(X)化合物的醇溶劑合物，更具體地說(shuō)是C1-C4醇的溶劑合物；水溶劑合物；烷溶劑合物，更具體地說(shuō)是C1-C4氯代烷的溶劑合物；酮溶劑合物，更具體地說(shuō)是C1-C5酮的溶劑合物；醚溶劑合物，更具體地說(shuō)是C1-C4醚的溶劑合物；環(huán)醚溶劑合物；酯溶劑合物，更具體地說(shuō)是C1-C5酯的溶劑合物；或磺酸溶劑合物，更具體地說(shuō)是C1-C4磺酸溶劑合物。術(shù)語(yǔ)“C1-C4醇”指至少一個(gè)羥基取代并任選被一個(gè)烷氧基取代的具有1至4個(gè)碳原子的直鏈和/或支鏈飽和烴和不飽和烴，例如甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇和1-甲氧基-2-丙醇等。術(shù)語(yǔ)“C1-C4氯代烷”指被至少一個(gè)氯原子取代的具有1至4個(gè)碳原子的直鏈和/或支鏈飽和烴和不飽和烴，例如二氯甲烷等。術(shù)語(yǔ)“C1-C5酮”指一般式為R’-C(＝O)-R的溶劑，式中R和R’可以相同或不同，并且為甲基或乙基，例如丙酮等。術(shù)語(yǔ)“C1-C4醚”指一般式為R’-O-R的溶劑，式中R和R’可以相同或不同，并且為苯基、甲基或乙基，例如苯甲醚等。術(shù)語(yǔ)“環(huán)醚”指含有一個(gè)或兩個(gè)氧環(huán)原子的四元至六元單環(huán)烴，例如四氫呋喃等。術(shù)語(yǔ)“C1-C5酯”指一般式為R’-O-C(＝O)-R的溶劑，式中R和R’可以是相同或不同，并且為甲基或乙基，例如乙酸乙酯等。術(shù)語(yǔ)“C1-C4磺酸”指一般式為R-SO3H的溶劑，式中R是具有1-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和烴，例如甲磺酸、乙磺酸、丁磺酸、2-甲基-1-丙磺酸等。
本發(fā)明的擬多晶型物優(yōu)選形式為藥學(xué)上可接受的擬多晶型物，如水合物、諸如乙醇溶劑合物的醇溶劑合物。
在本說(shuō)明書(shū)中列舉了幾種擬多晶型物，包括結(jié)構(gòu)式(X)化合物的A型(乙醇溶劑合物)、B型(水合物)、C型(甲醇溶劑合物)、D型(丙酮溶劑合物)、E型(二氯甲烷溶劑合物)、F型(乙酸乙酯溶劑合物)、G型(1-甲氧基-2-丙醇溶劑合物)、H型(苯甲醚溶劑合物)、I型(四氫呋喃溶劑合物)、J型(異丙醇溶劑合物)或K型(甲磺酸溶劑合物)。
溶劑合物可存在不同比率的溶劑化。晶體中溶劑的含量比例隨所給的條件不同而不同。結(jié)構(gòu)式(X)化合物的溶劑合物的晶體中每1分子結(jié)構(gòu)式(X)化合物可含至多5分子的溶劑，不同的溶劑化狀態(tài)包括如半溶劑合物、單溶劑合物、二溶劑合物、三溶劑合物結(jié)晶、中間體溶劑合物結(jié)晶及其混合物存在。通常，結(jié)構(gòu)式(X)化合物與溶劑的比例可在(5∶1)至(1∶5)的范圍內(nèi)。具體地說(shuō)，比例可在每1分子結(jié)構(gòu)式(X)化合物約0.2-約3分子溶劑的范圍內(nèi)。更具體地說(shuō)，比例可在每1分子結(jié)構(gòu)式(X)化合物約1-約2分子溶劑的范圍內(nèi)，優(yōu)選比例為每1分子結(jié)構(gòu)式(X)化合物1分子溶劑。
溶劑合物還可存在不同水平的水合作用。因此，結(jié)構(gòu)式(X)化合物的溶劑合物晶體在某些情況下，其部分或整個(gè)晶體結(jié)構(gòu)中可包含水分子。因此，本發(fā)明書(shū)中所用的術(shù)語(yǔ)“A型”指結(jié)構(gòu)式(X)化合物的乙醇溶劑合物形式，每1分子結(jié)構(gòu)式(X)化合物、中間體溶劑合物晶體及其混合物中含有至多5分子的溶劑；它還可以選擇性地含有額外的包含在其部分或整個(gè)晶體結(jié)構(gòu)中的水分子。這一點(diǎn)同樣適用于B型至K型。當(dāng)需要表示一個(gè)具體的A型物時(shí)，應(yīng)在A型后加上溶劑合物的比例，例如，每1分子結(jié)構(gòu)式X)化合物1分子乙醇以A型(1∶1)表示。
X射線粉末衍射是鑒定包括擬多晶型式(X)化合物在內(nèi)的多晶型物特征以及區(qū)分結(jié)構(gòu)式(X)化合物的溶劑合物晶體與此化合物其它結(jié)晶或非結(jié)晶形式的一門技術(shù)。同樣地，可以在Bragg-Brentano型PhillipsPW 1050/80粉末衍射儀上采集X-射線粉末衍射圖譜。取A型(1∶1)粉末，每個(gè)樣品約200mg，裝于0.5mm毛細(xì)玻璃管中，按本技術(shù)領(lǐng)域中的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行分析。X射線發(fā)生器在45Kv和32mA條件下操作，用銅Kα光線作為放射源。樣品在χ軸方向無(wú)旋轉(zhuǎn)，數(shù)據(jù)在4-60°范圍內(nèi)以2θ步長(zhǎng)采集。如圖1、2和3所示，A型(1∶1)具有的2θ角度位置的特征峰在7,04°±0,5°，9,24°±0,5°，9,96°±0,5°，10,66°±0,5°，11,30°±0,5°，12,82°±0,5°，13,80°±0,5°，14,56°±0,5°，16,66°±0,5°，17,30°±0,5°，18,28°±0,5°，19,10°±0,5°，20,00°±0,5°，20,50°±0,5°，21,22°±0,5°，22,68°±0,5°，23,08°±0,5°，23,66°±0,5°，25,08°±0,5°，25,58°±0,5°，26,28°±0,5°，27,18°±0,5°，28,22°±0,5°，30,20°±0,5°，31,34°±0,5°，32,68°±0,5°，33,82°±0,5°，39,18°±0,5°，41,20°±0,5°，42,06°±0,5°和48,74°±0,5°。
在另一組分析實(shí)驗(yàn)中，用X射線單衍射對(duì)A型(1∶1)進(jìn)行分析，結(jié)果得到以下晶體構(gòu)象，如下表所示。
表1晶體數(shù)據(jù)

強(qiáng)度測(cè)量

結(jié)構(gòu)分辨率和精密度

所得A型(1∶1)的三維結(jié)構(gòu)如圖4所示。
表2顯示的是A型(1∶1)的原子坐標(biāo)(x104)和等量各向同性位移參數(shù)(2x103)。原子的編號(hào)如圖4所示。x、y和z分?jǐn)?shù)坐標(biāo)表示原子相對(duì)于單位晶胞原點(diǎn)的位置。U(eq)定義為正交化Uij張量痕量的三分之一。


表3顯示的是A型(1∶1)的各向位移參數(shù)(2x103)。
各向位移因子的指數(shù)按下式計(jì)算-2π2[h2a*2U11+...+2hka*b*U12]


拉曼光譜法被廣泛用于闡明分子結(jié)構(gòu)、結(jié)晶性和多晶型性。低頻拉曼模式在區(qū)分晶體中不同的分子堆積時(shí)特別有用。同樣地，拉曼光譜被記錄在配備有一個(gè)光電倍增管和光學(xué)多通道檢測(cè)器的BrukerFT-Raman RFS100光譜儀上。置于石英毛細(xì)管內(nèi)的樣品被氬離子激光所激發(fā)。樣品上的激光功率調(diào)到約100mW，光譜分辨率約為2cm-1。我們發(fā)現(xiàn)A型、B型、D型、E型、F型和H型(1∶1)和無(wú)定型物具有圖5、6和7所示的拉曼光譜。
此外，我們還用μATR(微減總反射比)附件(帶硅晶的HarrickSplit-Pea)對(duì)A型和B型進(jìn)行了鑒定。紅外光譜用Nicolet Magna 560FTIR分光光度計(jì)、鍍鍺KBr分光器和帶KBr窗口檢測(cè)器的DTGS來(lái)獲得。在分辨率為1cm-1、每個(gè)樣品32次掃描、波長(zhǎng)4000-400cm-1范圍以及應(yīng)用基線校正的條件下測(cè)量光譜。所得A型的波數(shù)如下表4所示。
表4

vs＝極強(qiáng)，s＝強(qiáng)，m＝中等，w＝弱，vw＝極弱，br＝寬圖9中的紅外光譜反映的是晶體分子結(jié)構(gòu)的振動(dòng)方式。
所得B型的波數(shù)如下表5所示。
表5

(1)vs＝極強(qiáng)，s＝強(qiáng)，m＝中等，w＝弱，vw＝極弱，br＝寬圖10中的紅外光譜反映的是B型晶體分子結(jié)構(gòu)的振動(dòng)方式。
用相同的紅外分析方法，我們對(duì)B型和無(wú)定形物也進(jìn)行了鑒定并且同A型進(jìn)行了比較，如圖11-14所示。不同的物理形式其紅外光譜表現(xiàn)出明顯的不同，其中最相關(guān)的列于表6。
表6

(1)s＝強(qiáng)，m＝中等，w＝弱，vw＝極弱，br＝寬典型的A型、B型和無(wú)定形物可通過(guò)著眼于每種形式特定吸收帶的光譜解釋來(lái)鑒別。我們注意到不同形式之間的獨(dú)特的特定光譜差異處于三個(gè)光譜范圍從3750至2650cm-1(范圍1)，從1760至1580cm-1(范圍2)和從980至720cm-1(范圍3)。
范圍1(從3750到2650cm-1)圖11A型表現(xiàn)出雙帶，其最大吸收在3454m-1和3429cm-1。B型在3615cm-1處有單一吸收帶，而無(wú)定形物在3362cm-1處有單一吸收帶。
范圍2(從1760到1580cm-1)圖12A型在1646cm-1處有單一吸收帶；B型在1630cm-1處有單一吸收帶；而無(wú)定形物在1628cm-1處有單一吸收帶，它明顯比B型帶要強(qiáng)。此外，與A型和B型在約1704cm-1處的帶相比，無(wú)定形物在1704cm-1處有一較弱的寬帶。
范圍3(從980到720cm-1)圖13A型在911、890、876、862和841cm-1有一組明顯的吸收帶。
B型有一組類似的帶，但無(wú)876cm-1帶。無(wú)定形物在約750cm-1處有單一的寬帶，而A型和B型都在約768cm-1和743cm-1處有兩個(gè)最大吸收帶。
熱顯微術(shù)是研究固態(tài)動(dòng)力學(xué)時(shí)另一個(gè)實(shí)用的技術(shù)。可以對(duì)溶液或熔化物晶核形成過(guò)程的動(dòng)力學(xué)包括分析晶核形成速度進(jìn)行定量。最簡(jiǎn)單而又應(yīng)用最廣的方法是熔點(diǎn)的測(cè)定。同樣地，可將配有加熱裝置的Mettler FP82型控制器用于Leitz顯微鏡。將少量的A型顆粒置于載玻片上并以每分種10℃的速度加熱的同時(shí)進(jìn)行觀察。我們發(fā)現(xiàn)A型(1∶1)的熔解范圍在90℃至110℃之間。
作為另一種鑒定方式，A型(1∶1)的溶解性也是一種值得研究的對(duì)象。在約23℃時(shí)它在不同溶劑中的溶解度測(cè)定如下
表7A型(1∶1)的近似溶解度(mg/ml)

我們進(jìn)一步檢測(cè)了以pH為函數(shù)的溶解度。同樣地，我們?cè)诓煌琾H溶劑中對(duì)A型(1∶1)在水中的溶解度進(jìn)行了測(cè)量。過(guò)量的溶質(zhì)用溶劑在20℃平衡至少24小時(shí)。在去除不溶解的化合物后，用紫外分光光度計(jì)對(duì)溶液中的溶質(zhì)濃度進(jìn)行測(cè)定。
表8以pH為函數(shù)的A型(1∶1)的溶解度

我們還測(cè)量了以HPβCD(羥丙基-β-環(huán)糊精)為函數(shù)的A型(1∶1)的溶解度。過(guò)量的產(chǎn)物用溶劑在20℃平衡2天。在去除不溶解的化合物后，用紫外分光光度計(jì)對(duì)溶液中溶質(zhì)的濃度進(jìn)行測(cè)定。
表9A型(1∶1)的溶解度與HPβCD的關(guān)系

本發(fā)明的第二個(gè)領(lǐng)域涉及擬多晶型物的制備方法。擬多晶型式(X)化合物可通過(guò)將結(jié)構(gòu)式(X)的化合物與有機(jī)溶劑、或水、或水和水混溶性有機(jī)溶劑的混合物化合后，用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)結(jié)晶并分離出所需要的擬多晶型物的方法來(lái)制備。
使用的誘導(dǎo)結(jié)晶的方法應(yīng)理解為那些生產(chǎn)晶體的方法，包括例如將結(jié)構(gòu)式(X)的化合物溶解或分散到一種溶媒中，將結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的溶液或分散系和溶劑調(diào)至適宜的濃度，并將所述溶液或分散系調(diào)至適宜溫度，施加適宜的壓力，除去和/或分離去不需要的物質(zhì)或雜質(zhì)，如需要，將形成的結(jié)晶干燥以得到固態(tài)的擬多晶型物。
將結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的溶液或分散系以及溶劑調(diào)至適宜的濃度并不意味著必然要增加結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的濃度。在某些情形下，降低或保持濃度不變也許更為優(yōu)選。將所述溶液或分散系調(diào)至適宜溫度，應(yīng)理解為加熱、冷卻或保持在適宜溫度下等操作。
用于獲得適宜濃度的方法是本技術(shù)領(lǐng)域中常用的那些方法。例如通過(guò)常壓蒸餾、真空蒸餾、分餾、恒沸蒸餾、薄膜蒸發(fā)、其它本技術(shù)領(lǐng)域公知的方法以及這些方法的組合。獲得適宜濃度的另一可選方法同樣涉及結(jié)構(gòu)式(X)的化合物和溶劑溶液的飽和，例如，通過(guò)加入足夠量的非溶劑到該溶液中以達(dá)到飽和點(diǎn)。另一些使該溶液飽和的適當(dāng)方法包括，例如通過(guò)向該溶液中加入另一些結(jié)構(gòu)式(X)化合物和/或從該溶液中蒸發(fā)一部分溶劑。正如本說(shuō)明書(shū)所述，飽和溶液包括處于其飽和點(diǎn)或超過(guò)其飽和點(diǎn)即過(guò)飽和的溶液。
可以通過(guò)純化、過(guò)濾、洗滌、沉淀或類似的方法來(lái)除去和/或分離不需要的物質(zhì)或雜質(zhì)。例如可以通過(guò)已知的固液分離的方法來(lái)進(jìn)行分離。本技術(shù)領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的過(guò)濾工藝同樣可以用于本工序?？梢酝ㄟ^(guò)諸如離心或使用Buchner式濾器、Rosenmund濾器或板框壓濾等方法來(lái)進(jìn)行過(guò)濾。在上面公布的工序中優(yōu)選插入管線內(nèi)過(guò)濾或安全過(guò)濾，以增加所得多晶型物的純度。此外，諸如硅膠、Arbocel、dicalite硅藻土等之類的過(guò)濾劑也可用于從目的晶體中分離雜質(zhì)。
也可將所得結(jié)晶干燥，而且如果采用了不止一次結(jié)晶過(guò)程，此干燥過(guò)程可任選用于不同的結(jié)晶階段。干燥方法包括所有那些本技術(shù)領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法，如加熱、應(yīng)用真空、空氣或氣體循環(huán)、加入干燥劑、冷凍干燥、噴霧干燥、蒸發(fā)等或這些方法的組合。
結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的擬多晶型物的結(jié)晶方法包括多個(gè)方法或其變體的組合。例如，結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的擬多晶型物的結(jié)晶可按如下進(jìn)行在適宜的溫度下將結(jié)構(gòu)式(X)的化合物溶解或分散于溶劑中，將一部分所述溶劑蒸發(fā)以增加結(jié)構(gòu)式(X)的化合物在所述溶液或分散液中的濃度，冷卻所述混合物，任選洗滌和/或過(guò)濾以及干燥所得結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的溶劑合物晶體。結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的擬多晶型物也可以按如下制備將結(jié)構(gòu)式(X)的化合物溶解或分散于溶劑介質(zhì)中，冷卻所述溶液或分散液，然后過(guò)濾和干燥所得擬多晶型物。另一個(gè)制備結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的溶劑合物的實(shí)施例如下將結(jié)構(gòu)式(X)的化合物于溶媒中飽和，任選過(guò)濾、洗滌以及干燥所得晶體。
成晶同樣可涉及一個(gè)以上的結(jié)晶過(guò)程。在某些情況下，由于不同的原因，如提高目的溶劑合物的質(zhì)量，進(jìn)行一個(gè)、兩個(gè)或多個(gè)額外的結(jié)晶步驟是有利的。例如，本發(fā)明的擬多晶型物也可按如下步驟來(lái)制備向結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的起始原料中加入溶劑，在固定的溫度下攪拌該溶液至該物質(zhì)完全溶解，用真空蒸餾濃縮該溶液，并冷卻。第一次結(jié)晶發(fā)生后，用溶劑再次洗滌形成的晶體，然后用溶劑來(lái)溶解結(jié)構(gòu)式(X)的化合物以形成所需要的擬多晶型物。反應(yīng)混合物的重結(jié)晶發(fā)生后，回流冷卻。任選將形成的擬多晶型物過(guò)濾并使之干燥。
將結(jié)構(gòu)式(X)的化合物溶解或分散于有機(jī)溶劑、水或一種水和水混溶性有機(jī)溶劑的混合物中時(shí)，我們可以獲得不同程度的分散體系，如懸濁液、乳濁液、淤漿或混合物；或優(yōu)選獲得均質(zhì)的單相溶液。
溶媒中可選擇性地含有添加劑，例如，一種或多種常用于制備晶體懸浮液以及文獻(xiàn)中詳細(xì)記載的分散劑、表面活性劑或其它添加劑或其混合物。添加劑的使用利于改善晶體的形狀，它是通過(guò)增加蓬松度和降低表面積而改善晶體的形狀的。
含有所述溶媒的溶液可任選對(duì)其用如高剪切混合器、勻漿器或其組合來(lái)進(jìn)行一定時(shí)間的攪拌或劇烈攪動(dòng)，以產(chǎn)生滿意大小液滴的有機(jī)化合物。
用于本發(fā)明的有機(jī)溶劑實(shí)施例包括C1-C4醇如甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇、1-甲氧基-2-丙醇等；C1-C4氯代烷如二氯甲烷；C1-C4酮如丙酮；C1-C4醚如苯甲醚等；環(huán)醚如四氫呋喃；C1-C4酯如乙酸乙酯；C1-C4磺酸如甲磺酸、乙磺酸、丁磺酸、2-甲基-1-丙磺酸等。
水和水混溶性有機(jī)溶劑的混合物實(shí)施例包括水與所有上述所列的只要是能與水混溶的任何溶劑的混合物，如乙醇/水，比例例如為50/50。
優(yōu)選溶劑為那些藥學(xué)上可接受的溶劑。然而，藥學(xué)上不可接受的溶劑也可用于藥學(xué)上可接受的擬多晶型物的制備。
在優(yōu)選方法中，溶劑為藥學(xué)上可接受的溶劑，因?yàn)檫@可得到藥學(xué)上可接受的擬多晶型物。在一更優(yōu)選方法中，溶劑為乙醇。
在一具體實(shí)施方案中，藥學(xué)上可接受的結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的擬多晶型物可以不一定為藥學(xué)上可接受的結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的擬多晶型物為原料制備。例如，A型可以J型為原料制備。而擬多晶型物也可以無(wú)定形物為原料制備。
在水和水混溶性有機(jī)溶劑的混合物中，水的含量可以不同，可占體積百分比的約5％至約95％，優(yōu)選為體積百分比的約25％至約75％，更優(yōu)選為體積百分比的約40％至約60％。
還必須注意的是所選有機(jī)溶劑(純的、變性的或其它)的質(zhì)量也影響到所得擬多晶型物的質(zhì)量。
沉淀溫度的控制和加入晶種也可選擇性地用于提高結(jié)晶過(guò)程、顆粒大小分布和產(chǎn)物的形成的重現(xiàn)性。由此，當(dāng)沒(méi)有接種結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的晶體時(shí)，結(jié)晶過(guò)程會(huì)受到影響，優(yōu)選在結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的晶體存在即向該溶液中加入晶種時(shí)結(jié)晶。在不同的溫度也可進(jìn)行多次晶種接種。晶種的量因溶液的量不同而不同，可事先由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定。
每一結(jié)晶步驟的結(jié)晶時(shí)間會(huì)因所用條件、所采用的方法和/或所用溶劑的不同而不同。
另外，在晶型轉(zhuǎn)換后可對(duì)大顆?；蝾w粒聚合物進(jìn)行破碎以獲得所需的均一顆粒大小。因此，結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的溶劑合物結(jié)晶形式在轉(zhuǎn)形后還可任選對(duì)其進(jìn)行碾磨。碾磨或碾碎指使用本技術(shù)領(lǐng)域熟知的降低粉末顆粒大小的方法和設(shè)備物理性地破碎大的顆?；蝾w粒的聚合物。所得顆粒大小范圍在微米至納米，產(chǎn)生的晶體即為納米晶體、微米晶體。
結(jié)構(gòu)式(X)的化合物的擬多晶型物制備工藝的產(chǎn)率為10％或以上，更優(yōu)選產(chǎn)率為從40％至100％不等。有趣地是，產(chǎn)率一般在70-100％之間不等。
本發(fā)明的擬多晶型物優(yōu)選純度為大于90％。本發(fā)明的擬多晶型物更優(yōu)選純度為大于95％。本發(fā)明的擬多晶型物特別優(yōu)選純度為大于99％。
本發(fā)明的第三個(gè)領(lǐng)域涉及一種藥物制劑，它含有有效治療劑量量的擬多晶型式(X)化合物和藥學(xué)上可接受的載體或其稀釋劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及應(yīng)用藥學(xué)上可接受的擬多晶型式(X)化合物，優(yōu)選A型，用于生產(chǎn)治療逆轉(zhuǎn)錄病毒如HIV感染疾病(如獲得性免疫缺陷綜合癥(AIDS)和艾滋病相關(guān)綜合征(ARC))的藥物。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療哺乳動(dòng)物如人類的逆轉(zhuǎn)錄病毒感染如HIV感染的方法，該方法包括給予需要哺乳動(dòng)物有效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒量的藥學(xué)上可接受的擬多晶型式(X)化合物，優(yōu)選A型。
本發(fā)明還涉及治療HIV病毒感染的方法，它包括降低HIV病毒滴度。本發(fā)明還涉及一種治療所述HIV病毒感染的方法，該方法包括增加CD4+細(xì)胞數(shù)。本發(fā)明同樣涉及一種治療所述HIV病毒感染的方法，該方法包括抑制哺乳動(dòng)物中的HIV蛋白酶活性。
藥學(xué)上可接受的擬多晶型式(X)化合物，優(yōu)選為A型，在本說(shuō)明書(shū)中也稱作活性藥物成分，可以根據(jù)治療的疾病通過(guò)適當(dāng)途徑來(lái)給藥，優(yōu)選口服。根據(jù)接受者的情況不同選擇不同的優(yōu)選給藥途徑是值得贊揚(yáng)的。
對(duì)于上述的每種功效和適應(yīng)癥，所需的活性成分的量依賴于多個(gè)因素，包括所治療疾病的嚴(yán)重性和接受者的健康情況，并最終由主治醫(yī)生或獸醫(yī)決定。優(yōu)選滿意劑量可以是在一天中每隔適宜的時(shí)間間隔給予一、二、三或四或更多次亞劑量。
對(duì)于口服給藥劑型，將本發(fā)明的擬多晶型物與適當(dāng)?shù)奶砑觿┤缳x形劑、穩(wěn)定劑或惰性釋釋劑混合，并采用通常的方法將其制成合適的給藥劑型如片劑、包衣片、硬膠囊劑以及水性、醇性或油性溶液制劑。合適的惰性載體的實(shí)施例為阿拉拍膠、氧化鎂、碳酸鎂、磷酸鉀、乳糖、葡萄糖或淀粉，具體地說(shuō)是玉米淀粉。在這種情況下，可以以干法和濕法制粒的形式進(jìn)行制備。適宜的油性賦形劑或溶劑為植物或動(dòng)物油，如葵花油或鱈魚(yú)肝油。適宜的水或醇溶液的溶劑為水、乙醇、糖溶液或其混合物。聚乙二醇和聚丙二醇也可用作其它給藥劑型的助劑。
對(duì)于皮下的或靜脈內(nèi)的給藥，擬多晶型式(X)化合物，如需要，與常用的物質(zhì)如穩(wěn)定劑、乳化劑或其它助劑一起，制成溶液、懸濁液或乳濁液。擬多晶型式(X)化合物也可凍干，所得凍干品可用于例如注射劑或大輸液的生產(chǎn)。合適的溶劑為諸如水、生理鹽溶液或醇如乙醇、丙醇、甘油以及糖溶液如葡萄糖或甘露糖溶液或上述各種溶劑的混合物。
以氣霧劑或噴霧劑為給藥劑型的合適的藥物制劑為諸如擬多晶型式(X)化合物在藥學(xué)上可接受的溶劑如乙醇或水或這些溶劑的混合物中的溶液、懸濁液或乳濁液。如需要，該制劑還可另含藥用助劑如表面活性劑、乳化劑和穩(wěn)定劑以及拋射劑。該制品通常含有的活性化合物的濃度為重量百分比的約0.1％至50％，具體地說(shuō)為約0.3％至3％。
本發(fā)明的擬多晶型物也可以為含微米、納米、皮米級(jí)大小顆粒的擬多晶型式(X)化合物的制劑，該制劑可含其它藥用助劑，并可任選轉(zhuǎn)變成固體形式。
可以很方便地將本發(fā)明的擬多晶型物配制成納米顆粒的形式，該顆粒表面上吸附有一種表面改進(jìn)劑，此表面活性劑的量足以維持顆粒的實(shí)際平均顆粒粒徑小于1000nm。有效的表面改進(jìn)劑包括那些可與抗逆轉(zhuǎn)錄病毒物的表面物理粘附但并不與抗逆轉(zhuǎn)錄病毒物化學(xué)結(jié)合的表面改進(jìn)劑。
也可很方便地將擬多晶型式(X)化合物貯存于包裝材料中，此包裝材料可保護(hù)其免受機(jī)械的、環(huán)境的、生物的或化學(xué)的危害或降解。藥物的條件調(diào)節(jié)可通過(guò)采用不能滲透濕氣的包裝材料如真空密封包裝袋而達(dá)到。藥物產(chǎn)品如片劑、膠囊劑的條件調(diào)節(jié)，可通過(guò)采用如鋁泡板而達(dá)到。
應(yīng)該明白的是，除上述具體述及的成分外，本發(fā)明的制劑還包含其它的本技術(shù)領(lǐng)域中常用的那些與待改進(jìn)的制劑類型相關(guān)的助劑，例如，那些適于口服給藥的助劑，包括增香劑或矯味劑。
下列實(shí)施例僅用來(lái)說(shuō)明本發(fā)明，并不意味本發(fā)明僅限于此范疇。
實(shí)施例1工業(yè)化規(guī)模合成A型(1∶1)按如下步驟進(jìn)行。首先，將異丙醇和(3R，3aS，6aR)-六氫呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基(1S，2R)-3-[[(4-氨基苯基)磺?；鵠(異丁基)氨基]-1-芐基-2-羥基丙基氨基甲酸酯配制成溶液。在70℃、200-500mbar壓力下用真空蒸餾法將該溶液濃縮，并將其經(jīng)約10小時(shí)從溫度＞35℃冷卻至15-20℃。形成的晶體用13升異丙醇再次洗滌，過(guò)濾。接著在乙醇/水(90升/90升)中進(jìn)行重結(jié)晶。然后進(jìn)行一次新的分散過(guò)程，但代之的溶劑是60升乙醇。在反應(yīng)混合物從乙醇中的重結(jié)晶發(fā)生后，經(jīng)10小時(shí)從回流溫度冷卻至-15℃。將形成的乙醇溶劑合物過(guò)濾并使其在約50℃和約7mbar的條件下干燥。本工藝的得率至少為75％。
實(shí)施例2在另一實(shí)施例中制備了D型和B型的混合物。在生成D型的重結(jié)晶過(guò)程中用丙酮作為溶劑。重結(jié)晶過(guò)程包括在70ml丙酮中攪拌初始原料化合物(10g)的步驟。然后將該溶液回流直至化合物完全溶解。加入40ml水，然后將該溶液緩慢冷卻至室溫并攪拌過(guò)夜。將形成的晶體過(guò)濾并在50℃的真空烤箱中干燥。從結(jié)晶過(guò)程獲得了7.6g產(chǎn)物，本工藝的得率約75％。
實(shí)施例3在另一實(shí)施例中制備了J型晶體。在生成J型的結(jié)晶過(guò)程中用異丙醇作為溶劑。重結(jié)晶過(guò)程包括在熱溶劑中溶解初始原料的步驟。然后將該溶液冷卻至室溫。將形成的晶體過(guò)濾并在50℃的真空烤箱中干燥。晶體中含約50mol％異丙醇。
實(shí)施例4在本實(shí)施例中，我們計(jì)算了熱重法(TG)實(shí)驗(yàn)中不同的擬多晶型物的質(zhì)量損失。熱重法是一種測(cè)量樣品在加熱、冷卻或維持一定溫度下的質(zhì)量變化的技術(shù)。將約2-5mg樣品置于樣品盤上并插入配有Bruker FTIR Spectrometer vector 22型號(hào)為Netzsch Thermo-Microbalance TG 209的TG爐中。樣品在氮?dú)庵幸?0℃/min的速度加熱至最終溫度250℃。殘存溶劑的檢測(cè)限在0.1％的數(shù)量級(jí)水平上，因?yàn)樵诤苷臏囟确秶鷥?nèi)(幾攝氏度)仍有明顯的逐漸的溶劑損失。
獲得的TG數(shù)據(jù)如下A型在25-138℃溫度范圍觀測(cè)到的重量損失為4.2％(乙醇+少量水分)，在25-200℃溫度范圍為6.9％(乙醇+CO2)。乙醇損失率在120℃時(shí)達(dá)到最大值。CO2損失是由于化學(xué)降解并在約190℃存在。
B型在25-78℃溫度范圍觀測(cè)到的重量損失為3.4％(水分)，在25-110℃溫度范圍為5.1％(乙醇+水，T＞78℃)。在110-200℃溫度范圍另有1.1％的重量損失(乙醇)。
C型在25-83℃溫度范圍觀測(cè)到的重量損失為2.1％(水分+甲醇)，在25-105℃溫度范圍為4.2％(甲醇，T＞78℃，不同步驟)。在105-200℃溫度范圍還另有2.1％的重量損失(甲醇)。在氣相中沒(méi)有觀測(cè)到乙醇。
D型在25-50℃溫度范圍觀測(cè)到的重量損失為0.1％，在25-108℃溫度范圍為4.2％(丙酮+乙醇，T＞50℃)，在25-157℃溫度范圍為8.2％(丙酮+乙醇，T＞108℃)，在25-240℃溫度范圍為10.5％(丙酮+乙醇，T＞157℃)。
E型在25-75℃溫度范圍觀測(cè)到的重量損失為0.2％(水分)，在25-108℃溫度范圍為1.8％(二氯甲烷+乙醇，T＞75℃)，在25-157℃溫度范圍為6.8％(二氯甲烷+乙醇，T＞108℃)，在25-240℃溫度范圍為8.8％(二氯甲烷+乙醇，T＞157℃)。
F型在25-50℃溫度范圍觀測(cè)到的重量損失為0.1％(估計(jì)是水分)，在25-108℃溫度范圍為1.7％(乙酰乙酯+乙醇，T＞50℃)，在25-157℃溫度范圍為6.6％(乙酰乙酯+乙醇，T＞108℃)，在25-240℃溫度范圍為9％(乙酰乙酯+乙醇，T＞157℃)。
G型在25-50℃溫度范圍觀測(cè)到的重量損失為0.0％，在25-108℃溫度范圍為3.7％(1-甲氧基-2-丙醇+乙醇，T＞50℃，很明顯的步驟)，在25-157℃溫度范圍為8％(1-甲氧基-2-丙醇+乙醇，T＞108℃)，在25-240℃溫度范圍為12.5％(1-甲氧基-2-丙醇+乙醇，T＞157℃)。
H型在25-100℃溫度范圍觀測(cè)到的重量損失為0.8％(苯甲醚+少量乙醇)，在25-200℃溫度范圍為8.8％(苯甲醚+乙醇，T＞100℃)。
I型在25-89℃溫度范圍觀測(cè)到的重量損失為0.3％(水分)，在25-200℃溫度范圍為11.0％(四氫呋喃，T＞89℃)。在氣相中沒(méi)有觀測(cè)到乙醇。
表10顯示熱重法(TG)實(shí)驗(yàn)中不同結(jié)晶形式粗略預(yù)計(jì)的質(zhì)量損失。
失重(％)(M+x.LM＝100％)

在熱重法的另一組試驗(yàn)中，將A型、吸附/解吸附后的A型以及吸附/解吸附水合試驗(yàn)后的A型都轉(zhuǎn)移到鋁制樣品盤上。在一TAInstrument Hi-Res TGA 2950熱重儀上按如下條件記錄下TG曲線■起始溫度室溫■加熱速度20℃/min■分辨因子4■最終條件300℃或＜80[(w/w)％]樣品的TG曲線匯總于圖16。
表11顯示的是測(cè)試的各型物的質(zhì)量損失

至80℃溫度時(shí)的重量損失主要是因?yàn)闃悠分械娜軇?水分)的蒸發(fā)。超過(guò)80℃溫度的重量損失則主要是因?yàn)闃悠分械娜軇?乙醇)的蒸發(fā)。
以時(shí)間為函數(shù)的在25℃干燥氮?dú)庵蠥型的TG曲線匯總于圖17。在25℃下10小時(shí)后的重量損失約為0.6％。這是因?yàn)槿軇┑恼舭l(fā)。實(shí)施例5在另一實(shí)施例中，我們還進(jìn)行了差示掃描量熱法(DSC)的測(cè)量。為此，我們使用了Perkin Elmer DSC 204熱分析系統(tǒng)。精密稱取2-5mgA型樣品至DSC樣品盤中。實(shí)驗(yàn)在敞開(kāi)的樣品盤中進(jìn)行。樣品平衡至約30℃，然后以每分鐘10℃的速度加熱，至最終溫度為200℃為止。按照本技術(shù)領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)的方法獲取DSC數(shù)據(jù)。A型經(jīng)差示掃描量熱法(DSC)鑒定表明，在80-119℃的范圍內(nèi)有一次急劇的吸熱過(guò)程，在約105.6℃處顯示有一峰，其開(kāi)始處的ΔH＝-98.33J/g。結(jié)構(gòu)式(X)化合物的乙醇溶劑合物結(jié)晶A型(1∶1)表現(xiàn)出相應(yīng)的溫度曲線圖形，如圖8所示。
在另一組DSC測(cè)量中，我們對(duì)A型、吸附/解吸附后的A型以及吸附/解吸附水合試驗(yàn)后的A型進(jìn)行了檢測(cè)。將約3mg樣品轉(zhuǎn)移到30μl有孔的鋁制Perkin Elmer樣品盤中。樣品盤用適當(dāng)?shù)纳w子封閉后，按如下條件在Perkin Elmer Pyris DSC上記錄下DSC曲線■起始溫度25℃■加熱速度10℃/min■最終溫度150℃■氮?dú)饬魉?0ml/minA型表現(xiàn)出的吸熱信號(hào)在約104.6℃，由于乙醇蒸發(fā)和產(chǎn)品熔化引起的熔化熱為95.8J/g。由于吸附/解吸附后的A型是乙醇溶劑合物A型和水合物B型的混合物，因此它表現(xiàn)出寬的吸熱信號(hào)。吸附/解吸附水合試驗(yàn)后的A型表現(xiàn)出的吸熱信號(hào)在約73.5℃，由于水分蒸發(fā)和產(chǎn)品熔化引起的熔化熱為126J/g。熱量譜曲線如圖15所示。
實(shí)施例6在另一實(shí)施例中，對(duì)A型在三種不同的條件下的穩(wěn)定性進(jìn)行了測(cè)試。這些條件包括25℃和60％RH、40℃和75％RH以及50℃。這些試驗(yàn)表明在25℃和60％RH條件下的長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)中，乙醇和水的含量是穩(wěn)定的。
表12顯示的是A型的穩(wěn)定性試驗(yàn)。25℃和60％RH(相對(duì)濕度)條件下的長(zhǎng)期穩(wěn)定性，樣品容器為棕色瓶。

實(shí)施例7吸附-解吸附試驗(yàn)將約23mg A型轉(zhuǎn)移到SGA 100型VTI蒸發(fā)吸附分析儀中，在下列條件下記錄下與大氣濕度對(duì)應(yīng)的重量變化■干燥溫度40℃■平衡5min內(nèi)≤0.05％或60min。
■數(shù)據(jù)采集間隔0.05％或2min。
■溫度25℃■第一次循環(huán)吸附RH(％)5，10，20，30，40，50，60，70，80，90，95解吸附RH(％)95，90，80，70，60，50，40，30，20，10，5■第二次循環(huán)吸附RH(％)5，10，20，30，40，50，60，70，80，90，95解吸附RH(％)95，90，80，70，60，50，40，30，20，10，5在干燥階段記錄到約0.6％的重量損失。所得干燥產(chǎn)品無(wú)吸濕性，它在高相對(duì)濕度處才吸收最高為0.7％的水分。在解吸附循環(huán)中記錄到1.4％的重量損失，這表明產(chǎn)品在損失乙醇溶劑合物。ADS/DES后所得的產(chǎn)品為乙醇溶劑合物形式和水合物形式的混合物。
ADS/DES曲線匯總于圖18。
吸附-解吸附水合試驗(yàn)將約23mg A型轉(zhuǎn)移到SGA 100型VTI蒸發(fā)吸附分析儀中，在下列條件下記錄與大氣濕度對(duì)應(yīng)的重量變化■平衡5min內(nèi)≤0.0005％或90min。
■數(shù)據(jù)采集間隔0.05％或2min■溫度25℃■循環(huán)吸附/解吸附RH(％)5.95重復(fù)循環(huán)11次在本試驗(yàn)結(jié)束時(shí)記錄到5.2％的重量損失。這與TG試驗(yàn)結(jié)果(TG5.4％，至80℃時(shí))具有可比性。乙醇溶劑合物形式已轉(zhuǎn)變?yōu)樗衔镄问健DS/DES水合試驗(yàn)曲線匯總于圖19。
實(shí)施例8我們?cè)贏型化合物貯存后，對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行了研究，貯存化合物的樣品容器的內(nèi)蓋由單層LD-PE(繩帶式密封)制成，外蓋由PETP/Alu/PE(Moplast)制成并熱熔封。長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)在25℃/60％RH條件下進(jìn)行，而加速穩(wěn)定性試驗(yàn)在40℃/75％RH的條件下進(jìn)行，為期6個(gè)月。在不同時(shí)間點(diǎn)分析樣品，其結(jié)果如下表所示。
表13在25℃/60％RH條件下的長(zhǎng)期穩(wěn)定性

C晶體表14在40℃/75％RH的條件下的加速穩(wěn)定性

在表13和14所述條件下A型具有化學(xué)的和結(jié)晶學(xué)的穩(wěn)定性。
實(shí)施例9我們?cè)贏型化合物貯存后，對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行了研究，貯存化合物的樣品容器的內(nèi)蓋由單層LD-PE(繩帶式密封)制成，外蓋由VaporLoc袋(LPS)制成并熱熔封。長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)在25℃/60％RH條件下進(jìn)行，而加速穩(wěn)定性試驗(yàn)在40℃/75％RH的條件下進(jìn)行，為期6個(gè)月。在不同時(shí)間點(diǎn)分析樣品，其結(jié)果如下表所示。
表15在25℃/60％RH條件下的長(zhǎng)期穩(wěn)定性

表16在40℃/75％RH的條件下的加速穩(wěn)定性

在表15和16所述條件下A型具有化學(xué)的和結(jié)晶學(xué)的穩(wěn)定性。
實(shí)施例10為進(jìn)行化學(xué)穩(wěn)定性試驗(yàn)，將A型在不同的條件下貯存1、4和8周。這些條件為40℃/75％RH、50℃、RT/＜5％RH、RT/56％RH、RT/75％RH以及0.3da ICH光照。在貯存后用HPLC分析以及用肉眼檢查化合物。在本試驗(yàn)中所用的HPLC方法為HPLC方法909。測(cè)試結(jié)果報(bào)告如下表。
表17

可以得出如下結(jié)論A型在所有的試驗(yàn)條件下貯存時(shí)在化學(xué)上是穩(wěn)定的。
實(shí)施例11用熱重法(TG)、差示掃描量熱法(DSC)和紅外光譜法(IR)對(duì)B型的不同組分進(jìn)行鑒定。測(cè)試結(jié)果報(bào)告如下表。
表18

～水合物對(duì)照與對(duì)照相同實(shí)施例12對(duì)38mg B型在25℃和不同的相對(duì)濕度條件下進(jìn)行水分吸附和解吸附研究。我們記錄下以相對(duì)濕度為函數(shù)的重量變化。結(jié)果如圖20所示。在干燥階段，我們記錄到了B型約有5.6％的重量損失。所得干燥產(chǎn)品具有吸濕性，在高相對(duì)濕度條件下它可吸附高達(dá)6.8％的水分。經(jīng)過(guò)解吸附程序后，仍有約1.2％的水分殘留在樣品中。經(jīng)過(guò)ADS/DES后所得產(chǎn)品為水合物與無(wú)定形物的混合物。
實(shí)施例13我們?cè)诓煌琾H的溶劑中測(cè)量了B型在水中的溶解度。過(guò)量的溶質(zhì)用溶劑在20℃平衡至少24小時(shí)。在去除不溶解的化合物后，用紫外分光光度計(jì)對(duì)溶液中的濃度進(jìn)行測(cè)定。
表19

實(shí)施例14在室溫(RT)及＜5％、56％和75％相對(duì)濕度(RH)、50℃以及40℃/75％RH條件下貯存化合物2周的時(shí)間后，對(duì)B型的晶體結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性進(jìn)行研究。樣品用熱重法(TG)、差示掃描量熱法(DSC)、紅外光譜法(IR)和X射線衍射(XRD)進(jìn)行分析。測(cè)試結(jié)果報(bào)告如下表。
表20

～Ref與對(duì)照相同±Ref與對(duì)照相似≠Ref與對(duì)照不同實(shí)施例15在化學(xué)穩(wěn)定性試驗(yàn)方案中，將B型在不同的條件下貯存1、4和9周。這些條件為40℃/75％RH、50℃、RT/＜5％RH、RT/56％RH、RT/75％RH以及0.3da ICH光照。在貯存后，用HPLC分析以及用肉眼檢查化合物。在本試驗(yàn)中所用的HPLC方法為HPLC方法909。測(cè)試結(jié)果報(bào)告如下表，從中可以得出如下結(jié)論B型在化學(xué)上是穩(wěn)定的。
表21

實(shí)施例16K型由在室溫下向A型THF溶液中加入純甲磺酸而制備。然后將K型與堿金屬鹵化物混合并壓制成丸(歐洲藥典)，在下列條件下用紅外光譜法(IR)進(jìn)行分析■裝置Nicolet Magna 560 FTIR分光光度計(jì)■掃描次數(shù)32■分辨率1cm-1■波長(zhǎng)范圍4000-400cm-1■基線校正是■檢測(cè)器配備有KBr窗口的DTGS■分光器鍍鍺KBr■堿金屬鹵化物KBr(溴化鉀)K型的紅外光譜圖如圖21所示，它反映的是甲磺酸溶劑合物晶體分子結(jié)構(gòu)的振動(dòng)方式。
表22

(1)vs＝極強(qiáng)，s＝強(qiáng)，m＝中等，w＝弱，vw＝極弱，br＝寬實(shí)施例17將K型轉(zhuǎn)移到玻璃毛細(xì)管測(cè)定池中，在下列條件下用拉曼光譜法進(jìn)行分析■拉曼模式非彌散拉曼■裝置Nicolet FT-Ramah模塊■掃描次數(shù)64■分辨率4cm-1■波長(zhǎng)范圍3700-100cm-1■激光NdYVO4■激光頻率1064cm-1■檢測(cè)器InGaAs■分光器CaF2■樣品幾何學(xué)180°反射■偏振無(wú)K型的拉曼光譜圖如圖22所示，它反映的是甲磺酸溶劑合物晶體分子結(jié)構(gòu)的振動(dòng)方式。
表23

(1)vs＝極強(qiáng)，s＝強(qiáng)，m＝中等，w＝弱，vw＝極弱，br＝寬實(shí)施例18將約3mg K型轉(zhuǎn)移到一標(biāo)準(zhǔn)鋁制TA-Instument樣品盤上。樣品盤用合適的蓋子封閉，在配有RCS冷卻單元的TA-Instument Q1000MTDSC上按如下條件記錄DSC曲線■起始溫度25℃■加熱速度10℃/min■最終溫度200℃■氮?dú)饬魉?0ml/minDSC曲線如圖23所示，它顯示的是伴隨著晶體分解的熔化過(guò)程。K型的熔化發(fā)生在158.4℃。由于分解，熔化熱計(jì)算僅可用于顯示產(chǎn)品的晶體性質(zhì)。
實(shí)施例19將K型轉(zhuǎn)移到鋁制樣品盤上。在TA Instrument Hi-Res TGA 2950熱重儀上按如下條件記錄TG曲線■起始溫度室溫■加熱速度20℃/min■分辨因子4■最終條件300℃或＜80[(w/w)％]樣品的TG曲線如圖24所示。至60℃時(shí)約有0.2％的重量損失，其原因是溶劑的蒸發(fā)。超過(guò)140℃時(shí)的重量損失則是因?yàn)楫a(chǎn)品的蒸發(fā)和分解。
實(shí)施例20吸附-解吸附將約21mg K型轉(zhuǎn)移到SGA 100型VTI蒸發(fā)吸附分析儀中，在下列條件下記錄與大氣濕度相應(yīng)的重量變化干燥溫度40℃平衡5min內(nèi)≤0.05％或60min。
數(shù)據(jù)采集間隔0.05％或2min。
溫度25℃第一次循環(huán)吸附RH(％)5，10，20，30，40，50，60，70，80，90，95解吸附RH(％)95，90，80，70，60，50，40，30，20，10，5第二次循環(huán)吸附RH(％)5，10，20，30，40，50，60，70，80，90，95解吸附RH(％)95，90，80，70，60，50，40，30，20，10，5吸附-解吸附等溫線如圖25所示。K型具有吸濕性。在最初的干燥階段中記錄到0.3％的重量損失，這與TG結(jié)果具有可比性。K型在高相對(duì)濕度處可吸收最高為1.5％的水分。在解吸附循環(huán)中可將產(chǎn)品完全干燥。
在另一次試驗(yàn)中，我們對(duì)約18mg甲磺酸溶劑合物檢測(cè)，以研究在25℃及不同的相對(duì)濕度條件下水分被K型的吸附與解吸附。我們記錄下以相對(duì)濕度為函數(shù)的重量變化。結(jié)果如圖26所示。
在干燥階段中我們記錄到K型有約0.6％的重量損失。所得干燥產(chǎn)品有輕微吸濕性，它在高相對(duì)濕度處可吸收最高為1.7％的水分。在解吸附循環(huán)中可將產(chǎn)品完全干燥。
實(shí)施例21我們?cè)诓煌琾H的溶劑中測(cè)量了K型在水中的溶解度。過(guò)量的溶質(zhì)用溶劑在20℃平衡至少48小時(shí)。在去除不溶解的化合物后，用紫外分光光度計(jì)對(duì)溶液中的濃度進(jìn)行測(cè)定。
表24

實(shí)施例22對(duì)于批號(hào)為1的K型，在室溫(RT)及75％相對(duì)濕度(RH)、50℃以及40℃/75％RH條件下貯存4周后，對(duì)其晶體結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性進(jìn)行研究。對(duì)于批號(hào)為2的K型，在室溫(RT)及＜5％、56％和75％相對(duì)濕度(RH)、50℃以及40℃/75％RH條件下貯存4周后，對(duì)其晶體結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性進(jìn)行研究。樣品用熱重法(TG)、差示掃描量熱法(DSC)和紅外光譜法(IR)進(jìn)行分析。測(cè)試結(jié)果報(bào)告如下表。
表25

～Ref與對(duì)照相同±Ref與對(duì)照相似≠Ref與對(duì)照不同實(shí)施例23在化學(xué)穩(wěn)定性試驗(yàn)方案中，對(duì)于批號(hào)為1的K型，將其在不同的條件下貯存1和4周。這些條件為40℃/75％RH、50℃、RT/75％RH以及0.3da ICH光照。對(duì)于批號(hào)為2的K型，也將其在不同的條件下貯存1和4周。這些條件為40℃/75％RH、50℃、RT/＜5％RH、RT/56％RH、RT/75％RH以及0.3da ICH光照。在貯存后，用HPLC分析以及用肉眼檢查化合物。在本試驗(yàn)中所用的HPLC方法為HPLC方法909。測(cè)試結(jié)果報(bào)告如下表。
表26

實(shí)施例24我們進(jìn)行了一次隨機(jī)、安慰劑對(duì)照、雙盲、多劑量的擴(kuò)大試驗(yàn)，以考察健康受試者口服(每天兩次或三次)給藥后A型的安全性、耐受性和藥物代謝動(dòng)力學(xué)。對(duì)4種劑量的A型(400mg b.i.d.、800mg b.i.d.、800mg t.i.d.和1200mg t.i.d.)在4組(每組9人)健康受試者中進(jìn)行試驗(yàn)。每組中，6名受試者給予A型治療，3名受試者給予安慰劑，共進(jìn)行13天，在第14天早晨服用一次(b.i.d.＝每天兩次，t.i.d.＝每天三次)。
A型很容易被人體吸收，而其在重復(fù)給藥后的濃度-時(shí)間變化情況隨給藥的劑量不同而不同。一般在3天內(nèi)達(dá)到穩(wěn)態(tài)血漿濃度，雖然所有劑量水平的C0h(給藥時(shí)的濃度)和AUC24h(曲線下方的面積或生物利用度)隨時(shí)間稍有降低。400mg b.i.d.、800mg t.i.d.和1200mg t.i.d.劑量水平的AUC24h和Css，av(平均穩(wěn)態(tài)濃度)與劑量(每日劑量)成正比，在800mg b.i.d組AUC24h和Css，av超過(guò)與劑量成正比的濃度。Cmax(最大濃度)與每次服用的劑量成正比關(guān)系。在所有劑量水平，小于2％的無(wú)變化的A型在尿中排泄出體外。
權(quán)利要求
1.一種(3R，3aS，6aR)-六氫呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基(1S，2R)-3-[[(4-氨基苯基)磺?；鵠(異丁基)氨基]-1-芐基-2-羥基丙基氨基甲酸酯擬多晶型物。
2.權(quán)利要求1的擬多晶型物，其中所述擬多晶型物為水合溶劑合物、醇溶劑合物、烷溶劑合物、酮溶劑合物、醚溶劑合物、環(huán)醚溶劑合物、酯溶劑合物、磺酸溶劑合物。
3.權(quán)利要求1至2任一項(xiàng)的擬多晶型物，其中所述擬多晶型物為水合溶劑合物、C1-C4醇溶劑合物、C1-C4氯代烷溶劑合物、C1-C5酮溶劑合物、C1-C4醚溶劑合物、環(huán)醚溶劑合物、C1-C5酯溶劑合物、C1-C4磺酸溶劑合物。
4.權(quán)利要求1的擬多晶型物，其中所述擬多晶型物為水合溶劑合物、醇溶劑合物、烷溶劑合物、酮溶劑合物、醚溶劑合物、環(huán)醚溶劑合物、酯溶劑合物。
5.權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)的擬多晶型物，所述擬多晶型物為藥學(xué)可接受的擬多晶型物。
6.權(quán)利要求1的擬多晶型物，其中所述擬多晶型物選自以下溶劑合物A型(乙醇溶劑合物)、B型(水合物)、C型(甲醇溶劑合物)、D型(丙酮溶劑合物)、E型(二氯甲烷溶劑合物)、F型(乙酸乙酯溶劑合物)、G型(1-乙氧基-2-丙醇溶劑合物)、H型(苯甲醚溶劑合物)、I型(四氫呋喃溶劑合物)、J型(異丙醇溶劑合物)、K型(甲磺酸溶劑合物)。
7.權(quán)利要求1的擬多晶型物，其中所述擬多晶型物選自以下溶劑合物A型(乙醇溶劑合物)、B型(水合物)、C型(甲醇溶劑合物)、D型(丙酮溶劑合物)、E型(二氯甲烷溶劑合物)、F型(乙酸乙酯溶劑合物)、G型(1-乙氧基-2-丙醇溶劑合物)、H型(苯甲醚溶劑合物)、I型(四氫呋喃溶劑合物)、J型(異丙醇溶劑合物)。
8.權(quán)利要求1的擬多晶型物，其中所述擬多晶型物為A型溶劑合物(乙醇溶劑合物)、B型溶劑合物(水合物)。
9.權(quán)利要求1至8任一項(xiàng)的擬多晶型物，其中化合物與溶劑之比為(5∶1)至(1∶5)。
10.權(quán)利要求9的擬多晶型物，其中化合物與溶劑之比為約1∶1。
11.權(quán)利要求1至10任一項(xiàng)的擬多晶型物，所述擬多晶型物還含有水分子。
12.一種制備權(quán)利要求1至11任一項(xiàng)的擬多晶型物的方法，該方法包括如下步驟將(3R，3aS，6aR)-六氫呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基(1S，2R)-3-[[(4-氨基苯基)磺?；鵠(異丁基)氨基]-1-芐基-2-羥基丙基氨基甲酸酯與有機(jī)溶劑、水、或者水與水混溶性有機(jī)溶劑的混合物混合，然后誘導(dǎo)結(jié)晶。
13.一種藥用組合物，所述組合物含有權(quán)利要求1至11任一項(xiàng)的擬多晶型物和藥學(xué)上可接受的載體和/或稀釋劑。
14.權(quán)利要求1至11任一項(xiàng)的擬多晶型物在制備用于抑制哺乳動(dòng)物HIV蛋白酶活性的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)(3R，3aS，6aR)－六氫呋喃并[2，3－b]呋喃－3－基(1S，2R)－3－[[(4－氨基苯基)磺?；鵠(異丁基)氨基]－1－芐基－2－羥基丙基氨基甲酸酯的新穎的多晶型物及其生產(chǎn)方法。
文檔編號(hào)A61P31/12GK1668623SQ03816459
公開(kāi)日2005年9月14日 申請(qǐng)日期2003年5月16日 優(yōu)先權(quán)日2002年5月16日
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