專利名稱：穿心蓮內酯及衍生物的醫(yī)學用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及草藥穿心蓮中的二萜類化合物的用途。更具體指穿心蓮內酯及衍生物的醫(yī)學用途，特別是它的抗冠狀病毒活性可在預防、治療SARS病毒疾病的藥物中應用。
(2)用于濕熱瀉痢，熱淋澀痛，濕疹瘙癢。本品苦燥性寒，有清熱解毒燥濕的功效，故凡濕熱諸癥均可應用。治胃腸濕熱，腳痛泄瀉，下痢膿血者，可單用或與馬齒莧、黃連等同用，治膀胱濕熱，淋瀝澀痛，多與車前子、白茅根、黃柏等藥合用，治濕疹瘙癢，可以本品為末，甘油調涂。
(3)用于癰腫瘡毒，蛇蟲咬傷。木品清熱解毒，燥濕消腫，故可用治濕熱火毒諸癥。治癰腫瘡毒，蛇蟲咬傷，可單用，或配金銀花、野菊花、蚤休等煎服，并用鮮品搗爛外敷，均有解毒消腫的作用。
穿心蓮內酯是從草藥穿心蓮中分離得到的一種二萜類化合物。該化合物具有清熱解毒，涼血，消腫。用于感冒發(fā)熱、咽喉腫痛、口舌生瘡、頓咳勞嗽、泄瀉痢疾、熱淋澀痛、癰腫瘡瘍、毒蛇咬傷。
由冠狀病毒引起的SARS是人類新近遇到的一種疾病，具有很強的傳染性，對人的健康和生命造成極大威脅，且在全世界范圍內嚴重影響了人們的生活和工作秩序。本發(fā)明對穿心蓮中提取獲得的穿心蓮內酯及其衍生物進行藥理篩選，證明它具有抗冠狀病毒活性，可望有助于預防和治療冠狀病毒導致的SARS，將產生巨大的社會效益。
本發(fā)明是這樣實施的穿心蓮二萜類化合物可從草藥穿心蓮中通過常規(guī)化學提取方法獲得或對天然穿心蓮二萜進行化學衍生化獲得；化學結構式如下 其中，R1，R2，R3＝H，有機酸及無機酸形成的?；皝喠蛩釟溻c加成物。
穿心蓮內酯的羥基在有機酸或無機酸存在下形成它的?；?，也可在亞硫酸氫鈉存在下形成加成物。
穿心蓮內酯的抗SARS病毒的作用試驗如下測試日期2003-5-31測試項目藥物抗SARS病毒活性篩選(病毒-細胞水平模型)測試原理以Vero-E6細胞作為病毒宿主細胞(易感細胞)，測試樣品抵抗病毒感染細胞的作用，檢測指標為細胞變性反應(CPE)以及感染細胞保護率。
測試材料和方法1.測試樣品穿心蓮內酯2.國家新藥篩選中心樣品號3.病毒株BJ-014.樣品處理樣品溶于培養(yǎng)液或DMSO，配成適宜的初始濃度，3倍稀釋，6個稀釋度。
5.測試方法把Vero-E6細胞接種于96孔培養(yǎng)板，置37℃，5％CO2培養(yǎng)，分別加入不同稀釋濃度的樣品和SARS病毒，設病毒對照、細胞對照和樣品對照。每日鏡下觀察結果，記錄CPE，并用中性紅染色測定OD值，參照對照進行樣品抗SARS病毒活性作用的計算和評價。測試結果濃度(ug/ml) CPE 感染細胞保護率100 - 10.8333.3 - 3.6511.1 - 2.303.7 + 1.371.23 ++ 1.370.41 +++ 0.98
細胞病變法(CPE)以加號表示細胞病變程度，＜25％+，25％～50％++，50％～75+++，＞75％++++。
感染細胞保護率通過比較病毒對照、細胞對照和樣品對照的OD值，計算樣品對病毒感染細胞的保護活性，保護率＞1.5倍率，初步被認為樣品對病毒感染細胞具有一定的保護活性。
*樣品細胞毒性如果樣品的細胞毒性與細胞對照比＞50％時，不做CPE評價和保護率計算。
結論所檢樣品穿心蓮內酯有保護細胞抵抗SARS病毒感染活性。
穿心蓮內酯亞硫酸氫鈉加成物制備方法穿心蓮內酯0.5克，加乙醇12毫升，加熱溶解。取1mol/L亞硫酸鈉溶液3毫升，加入2％硫酸約4毫升混合(混合液的pH應為5.6-5.9之間)，加水5毫升。將穿心蓮內酯乙醇液倒如亞硫酸鈉的硫酸溶液中，振搖(混合液的pH應為8)，加熱回流30分鐘(顏色應不變黃)后，加2％硫酸調pH至中性，回收乙醇至無乙醇味，置于小分液漏斗中，用氯仿提取3次，每次8毫升左右，分出水層，濃縮至1-2毫升，加乙醇8-10毫升溶解，過濾，濾液減壓回收乙醇至干，真空抽松，得白色穿心蓮內酯亞硫酸氫鈉加成物。
穿心蓮內酯抗SARS病毒的活性同上所述。
權利要求
1.一種由中藥穿心蓮提取的結構如下的穿心蓮內酯及其衍生物具有抗SARS病毒活性
2.根據(jù)權利要求1所述的由中藥穿心蓮提取的穿心蓮內酯及其衍生物，其特征在于在制備預防、治療SARS病毒引起疾病的藥物中應用。
3.根據(jù)權利要求2所述的由中藥穿心蓮提取的穿心蓮內酯及其衍生物，其特征在于在制備預防、治療嚴重急性呼吸道綜合癥藥物中應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有如(I)所示穿心蓮內酯結構骨架的二萜類化合物及其衍生物在醫(yī)學中的新用途。其中，R
文檔編號A61P31/14GK1454592SQ0312912
公開日2003年11月12日 申請日期2003年6月6日 優(yōu)先權日2003年6月6日
發(fā)明者左建平, 趙維民, 楊以阜, 何佩嵐, 周宇, 唐煒, 任永欣, 唐堅, 劉群芳, 田佳 申請人:中國科學院上海藥物研究所