專(zhuān)利名稱(chēng)：羧酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(下文簡(jiǎn)稱(chēng)為“VEGF”)受體拮抗作用的新羧酸衍生物或其可藥用鹽。
背景技術(shù)：
VEGF(血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子)是一種對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞表現(xiàn)出極高特異性的生長(zhǎng)因子。VEGF及其受體在胎盤(pán)形成等生理性血管新生過(guò)程中具有重要作用。已經(jīng)報(bào)道的VEGF受體有Flt-1(fms樣酪氨酸激酶)和KDR(含激酶插入?yún)^(qū)的受體)(Advances in CancerResearch，vol.67，pp.281-316，1995)。據(jù)報(bào)道VEGF及其受體不僅在生理血管新生中有重要作用，而且在糖尿病性視網(wǎng)膜病、慢性風(fēng)濕病和實(shí)性腫瘤等疾病中觀察到的病理性血管新生中有重要作用(Advances in Cancer Research，vol.67，pp.281-316，1995)，且與這些疾病的發(fā)展密切相關(guān)。此外，已知VEGF及其受體不僅與血管新生有關(guān)還與血管通透性增高有關(guān)。據(jù)報(bào)道VEGF導(dǎo)致的血管通透性增高與癌性腹水潴留或缺血再灌注損傷后的腦水腫等病理癥狀密切相關(guān)(J.Clin.Invest，vol.104，pp.1613-1620，1999)。因此認(rèn)為能抑制VEGF與其受體相結(jié)合的物質(zhì)對(duì)于治療各種與VEGF導(dǎo)致的病理性血管新生相關(guān)的疾病是有用的，并且能緩解與VEGF導(dǎo)致的高血管通透性相關(guān)的病理癥狀。有VEGF受體拮抗作用的低分子量化合物例如包括在JP-A-12-72653(WOO1/02344)中記載的氨基苯甲酸衍生物，如5-氨基-2-(4-羧基苯氧基)-N-[3-{4-(1-十八烷基氧基)-苯基}丙?；鵠苯甲酸。
但是，上述氨基苯甲酸衍生物在水中的溶解度不夠充分。
本發(fā)明的目的是提供一種用作VEGF受體拮抗劑并具有優(yōu)良物理性能的化合物，用以治療與VEGF導(dǎo)致血管新生相關(guān)的疾病以及改善VEGF導(dǎo)致的病理癥狀。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問(wèn)題，發(fā)明人經(jīng)過(guò)不懈的研究之后發(fā)現(xiàn)下式(1)代表的羧酸衍生物及其可藥用鹽具有VEGF受體拮抗作用而且具有優(yōu)良的水溶性，從而完成了本發(fā)明。
本發(fā)明提供了下式(1)代表的羧酸衍生物或其可藥用鹽 其中環(huán)A表示苯環(huán)、萘環(huán)或包含1-4個(gè)從氮原子、氧原子和硫原子中任意選取的雜原子的雜環(huán)，W表示C1-5亞烷基，Z表示單鍵或亞苯基，R1與R2相同或不同，各自獨(dú)立表示氫原子、鹵原子、C1-5烷基或C1-10烷氧基，R3表示氫原子、鹵原子、C1-12烷基、C2-5炔基、三氟甲基、乙炔基、氰基、硝基、-CH2-R6代表的基團(tuán)[其中R6表示C1-5烷硫基，或下式代表的基團(tuán) (其中m代表0或1，n表示0-3的整數(shù))]，或下式代表的基團(tuán) [其中環(huán)B表示苯環(huán)或含1-3個(gè)從氮原子、氧原子、硫原子中任意選取的雜原子的單環(huán)雜環(huán)，R7表示氫原子或C1-5烷基，R8表示氫原子、C1-5烷基或下式代表的基團(tuán) (其中R9與R10相同或不同且各自獨(dú)立表示氫原子、鹵原子、C1-5烷基或C1-5烷氧基，p表示0-8的整數(shù))]，或-Y-R11代表的基團(tuán)(其中Y是-CO-、-O-、-S-或-SO2-代表的基團(tuán)，R11表示C1-10烷基、被1-3個(gè)氟原子取代的甲基、苯基、被C1-5烷基取代的苯基、被C1-5烷氧基取代的苯基、C2-8二烷基氨基或環(huán)氨基)]，R4是下式代表的基團(tuán) (其中R12表示氫原子或被C1-5烷氧基取代的苯氧基，q表示1-5的整數(shù)，r表示10-24的整數(shù))，且R5表示氫原子或C1-5烷基。
本發(fā)明所用的術(shù)語(yǔ)定義如下。
本發(fā)明中“Cx-y”指其后的基團(tuán)含x至y個(gè)碳原子。
A定義中的含1-4個(gè)從氮原子、氧原子和硫原子中任意選取的雜原子的雜環(huán)，指含1-4個(gè)從氮原子、氧原子和硫原子中任意選取的雜原子的單環(huán)或稠環(huán)雜環(huán)，例子包括呋喃環(huán)、噻吩環(huán)、吡咯環(huán)、噁唑環(huán)、異噁唑環(huán)、噻唑環(huán)、異噻唑環(huán)、咪唑環(huán)、吡唑環(huán)、噁二唑環(huán)、噻二唑環(huán)、四唑環(huán)、吡啶環(huán)、噠嗪環(huán)、嘧啶環(huán)、吡嗪環(huán)、呋喃并呋喃環(huán)、噻吩并呋喃環(huán)、咪唑并噻唑環(huán)、苯并呋喃、苯并噻吩環(huán)、吲哚環(huán)、中氮茚環(huán)、苯并噁唑環(huán)、苯并異噁唑環(huán)、苯并噻唑環(huán)、苯并異噻唑環(huán)、苯并咪唑、苯并吡唑環(huán)、苯并三唑環(huán)、嘌呤環(huán)、鄰苯二甲酰亞胺環(huán)、喹啉環(huán)、異喹啉環(huán)、喹唑啉環(huán)、喹喔啉環(huán)、香豆素環(huán)、異香豆素環(huán)、二苯并呋喃環(huán)、萘并呋喃環(huán)、二苯并噻吩環(huán)、萘并噻吩環(huán)、吖啶環(huán)、菲啶環(huán)、吩噻嗪環(huán)。其中優(yōu)選噻吩環(huán)、噻唑環(huán)、異噁唑環(huán)、苯并噻唑環(huán)、鄰苯二甲酰亞胺環(huán)、香豆素環(huán)或二苯并呋喃環(huán)。
B定義中的含1-3個(gè)從氮原子、氧原子和硫原子中任意選取的雜原子的單環(huán)雜環(huán)，其例子包括呋喃環(huán)、噻吩環(huán)、吡咯環(huán)、噁唑環(huán)、異噁唑環(huán)、噻唑環(huán)、異噻唑環(huán)、咪唑環(huán)、吡唑環(huán)、噁二唑環(huán)、噻二唑環(huán)和四唑環(huán)。其中優(yōu)選噁唑環(huán)和噁二唑環(huán)。
“C1-5亞烷基”指含1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基，其例子包括亞甲基、甲基亞甲基、亞乙基、三亞甲基、甲基亞乙基、四亞甲基、乙基亞乙基、二甲基亞乙基和五亞甲基。
“C1-5烷基”、“C1-10烷基”、“C1-12烷基”分別指含1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、含1-10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、含1-12個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基。其例子包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、正己基、異己基、正辛基、正癸基。
鹵原子指氟原子、氯原子、溴原子和碘原子。
“C1-5烷硫基”指含1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基硫基，其例子包括甲硫基、乙硫基、正丙基硫基、異丙基硫基、正丁基硫基、異丁基硫基、叔丁基硫基和正戊基硫基。
“C1-5烷氧基”指含1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，其例子包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基和正戊氧基?！癈1-10烷氧基”指含1-10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，其例子除了包括上述之外，還包括正己氧基、正庚氧基和正癸氧基。
“被C1-5烷基取代的苯基”指被含1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基取代的苯基，其例子包括2-甲基苯基、3-乙基苯基、2-正丙基苯基、4-異丙基苯基、2-正丁基苯基、2-異丁基苯基、4-叔丁基苯基和3-正戊基苯基。
“被C1-5烷氧基取代的苯基”指被含1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基取代的苯基，其例子包括2-甲氧基苯基、4-乙氧基苯基、3-正丙氧基苯基、3-異丙氧基苯基、3-正丁氧基苯基、4-異丁氧基苯基、4-叔丁氧基苯基和2-正戊氧基苯基。
“被C1-5烷氧基取代的苯氧基”指被含1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基取代的苯氧基，其例子包括3-甲氧基苯氧基、4-乙氧基苯氧基、4-正丙氧基苯氧基、3-異丙氧基苯氧基、2-正丁氧基苯氧基、4-異丁氧基苯氧基、3-叔丁氧基苯氧基和4-正戊氧基苯氧基。
被1-3個(gè)氟原子取代的甲基指氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。
C2-10二烷基氨基指被兩個(gè)相同或不同且各含1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基取代的氨基，其例子包括二甲基氨基、N-乙基-N-甲基氨基、二乙基氨基、N-乙基-N-異丙基氨基、二丙基氨基、二異丙基氨基、二丁基氨基、二異丁基氨基和二戊基氨基。
環(huán)氨基的例子包括環(huán)丙啶基、氮雜環(huán)丁烷基、吡咯烷基、哌啶子基、奎寧環(huán)基和嗎啉代。
本發(fā)明中可藥用鹽的例子包括，與硫酸、鹽酸、磷酸等無(wú)機(jī)酸的鹽，與乙酸、草酸、乳酸、酒石酸、富馬酸、馬來(lái)酸、甲磺酸或苯磺酸等有機(jī)酸的鹽，與三乙胺或甲基胺等胺的鹽，以及與鈉離子、鉀離子或鈣離子等金屬離子的鹽。
本發(fā)明的有些化合物表現(xiàn)出多晶形現(xiàn)象，本發(fā)明包括其任一種晶形。
本發(fā)明的化合物(1)可以通過(guò)下述方法來(lái)制備。
1)其中R5表示C1-5烷基的本發(fā)明化合物被稱(chēng)為化合物(1a)，化合物(1a)可以通過(guò)下列反應(yīng)式所示的方法來(lái)制備。
上述反應(yīng)式中，A、W、Z、R1、R2、R3和R4與前文中定義的相同，R13表示C1-5烷基，X表示離去基團(tuán)如鹵原子、甲磺酰氧基、三氟甲磺酰氧基或?qū)妆交酋Ｑ趸?br> 可以利用氨基化合物(8)作為起始原料來(lái)制備本發(fā)明化合物(1a)。換言之，可以通過(guò)氨基化合物(8)與羧酸化合物(9)縮合來(lái)制備酰胺化合物(10)。
在該縮合反應(yīng)中，優(yōu)選使用縮合劑。縮合劑的例子包括亞硫酰鹵如亞硫酰氯或亞硫酰溴，鹵化磷如三氯化磷、三溴化磷或五氯化磷，鹵化氫如氯化氫、溴化氫或碘化氫，鹵甲酸烷基酯如氯甲酸甲酯、氯甲酸乙酯或溴甲酸乙酯，碳二亞胺化合物如二環(huán)己基碳二亞胺或1-乙基-3-(3-二甲基氨基)丙基碳二亞胺，磺酰氯如甲磺酰氯，磷化合物如磷酸二苯酯或二苯基磷酰氯，三苯基膦，偶氮二甲酸二乙酯和N，N-羰基二咪唑。
使用亞硫酰鹵、鹵化磷、鹵代甲酸烷基酯等時(shí)，優(yōu)選在堿存在下進(jìn)行反應(yīng)，堿的例子包括堿金屬氫氧化物如氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀，堿金屬碳酸鹽如碳酸鋰、碳酸鈉或碳酸鉀，堿金屬碳酸氫鹽如碳酸氫鈉或碳酸氫鉀，堿金屬氫化物如氫化鈉或氫化鉀，堿金屬如金屬鈉或金屬鉀，氨基堿金屬如氨基鈉，氨，氨水，有機(jī)堿如三乙胺、二異丙基乙基胺、三正丁基胺、1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0.]-5-壬烯、1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-7-十一碳烯、吡啶或N，N-二甲基氨基吡啶，堿金屬烷氧化物如甲醇鈉、乙醇鈉或叔丁醇鉀，有機(jī)金屬化合物如甲基鋰、正丁基鋰、仲丁基鋰、叔丁基鋰、N，N-二異丙基氨基鋰或雙(三甲基甲硅烷基)氨基鈉。
該反應(yīng)可以在有溶劑或無(wú)溶劑下進(jìn)行。所用溶劑的例子包括醇類(lèi)如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、叔丁醇、2-甲氧基甲醇或乙二醇，醚類(lèi)如二噁烷、四氫呋喃、二甲氧基乙烷、異丙醚或二乙醚，腈類(lèi)如乙腈，酮類(lèi)如丙酮或甲乙酮，脂肪烴如石油醚、正己烷或環(huán)己烷，芳香烴如苯、甲苯、二甲苯或氯苯，酯類(lèi)如乙酸乙酯或丙酸乙酯，烷基鹵化物如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳或1，2-二氯乙烷，吡啶，N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜和水。
溶劑和試劑的種類(lèi)及其用量根據(jù)反應(yīng)采用的反應(yīng)條件和基質(zhì)適當(dāng)選擇。
本發(fā)明化合物(1a)可以通過(guò)用酯化合物(11)將酰胺化合物(10)酰胺基團(tuán)上的氮原子烷基化來(lái)制備。
該反應(yīng)優(yōu)選在堿存在下進(jìn)行反應(yīng)，堿的例子包括堿金屬氫氧化物如氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀，堿金屬碳酸鹽如碳酸鋰、碳酸鈉或碳酸鉀，堿金屬碳酸氫鹽如碳酸氫鈉或碳酸氫鉀，堿金屬氫化物如氫化鈉或氫化鉀，堿金屬如金屬鈉或金屬鉀，氨基堿金屬如氨基鈉，氨，氨水，有機(jī)堿如三乙胺、二異丙基乙基胺、三正丁基胺、1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0.]-5-壬烯、1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-7-十一碳烯、吡啶或N，N-二甲基氨基吡啶，堿金屬烷氧化物如甲醇鈉、乙醇鈉或叔丁醇鉀，有機(jī)金屬化合物如甲基鋰、正丁基鋰、仲丁基鋰、叔丁基鋰、N，N-二異丙基氨基鋰或雙(三甲基甲硅烷基)氨基鈉。
該反應(yīng)可以在有溶劑或無(wú)溶劑下進(jìn)行。所用溶劑的例子包括醇類(lèi)如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、叔丁醇、2-甲氧基甲醇或乙二醇，醚類(lèi)如二噁烷、四氫呋喃、二甲氧基乙烷、異丙醚或二乙醚，腈類(lèi)如乙腈，酮類(lèi)如丙酮或甲乙酮，脂肪烴如石油醚、正己烷或環(huán)己烷，芳香烴如苯、甲苯、二甲苯或氯苯，酯類(lèi)如乙酸乙酯或丙酸乙酯，烷基鹵化物如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳或1，2-二氯乙烷，吡啶，N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜和水。
溶劑和試劑的種類(lèi)及其用量根據(jù)反應(yīng)采用的反應(yīng)條件和基質(zhì)適當(dāng)選擇。
2)其中R5表示氫原子的本發(fā)明化合物被稱(chēng)為化合物(1b)，化合物(1b)可以由本發(fā)明的化合物(1a)來(lái)制備。
也就是說(shuō)，本發(fā)明的化合物(1b)可以通過(guò)本發(fā)明化合物(1a)的酯部分水解來(lái)制備。
該反應(yīng)是在酸性或堿性條件下進(jìn)行的普通酯水解反應(yīng)。酸性條件指鹽酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、甲磺酸、三氟甲磺酸、磷酸、多聚磷酸等單獨(dú)使用或任意組合使用的條件。堿性條件指使用堿金屬氫氧化物如氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀，堿金屬碳酸鹽如碳酸鋰、碳酸鈉或碳酸鉀，或氨。
該反應(yīng)可以在有溶劑或無(wú)溶劑下進(jìn)行。所用溶劑的例子包括醇類(lèi)如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、叔丁醇、2-甲氧基甲醇或乙二醇，醚類(lèi)如二噁烷、四氫呋喃、二甲氧基乙烷、異丙醚或二乙醚，腈類(lèi)如乙腈，酮類(lèi)如丙酮或甲乙酮，脂肪烴如石油醚、正己烷或環(huán)己烷，芳香烴如苯、甲苯、二甲苯或氯苯，酯類(lèi)如乙酸乙酯或丙酸乙酯，烷基鹵化物如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳或1，2-二氯乙烷，吡啶，N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜和水。
反應(yīng)中，溶劑和試劑的種類(lèi)及其用量根據(jù)反應(yīng)采用的反應(yīng)條件和基質(zhì)適當(dāng)選擇。
式(1)代表的本發(fā)明羧酸化合物或其可藥用鹽用于治療VEGF相關(guān)的疾病時(shí)，本發(fā)明的化合物可以口服或非腸道使用。其劑型為片劑、膠囊、顆粒劑、abstracts、粉劑、錠劑、膏、霜、乳液、懸浮液、栓劑、注射劑等，可以根據(jù)常規(guī)制劑技術(shù)來(lái)制備(例如，日本藥典第十二版所述方法)。劑型可以根據(jù)患者年齡和治療目的等條件適當(dāng)選擇。在制備各種劑型時(shí)，可以使用常規(guī)賦形劑(例如結(jié)晶纖維素、淀粉、乳糖、甘露醇等)、粘合劑(例如羥丙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等)、潤(rùn)滑劑(例如硬脂酸鎂、滑石等)、崩解劑(例如羧甲基纖維素鈣等)等。用于治療成年人時(shí)，本發(fā)明化合物的劑量為每天1-2000mg，一次或分次服用。該劑量可根據(jù)各個(gè)患者的年齡、體重和條件而不同。
本發(fā)明的最佳實(shí)施方式接下來(lái)將提供實(shí)施例和試驗(yàn)實(shí)施例更詳細(xì)地描述本發(fā)明。
實(shí)施例1N-[3-{4-(1-十八烷氧基)苯基}丙?；鵠-N-苯基甘氨酸的制備將3-{4-(1-十八烷氧基)苯基}丙酸(2.00g，4.78mmol)和亞硫酰氯(3.26g，274.00mmol)在苯(40ml)中的懸浮液加熱回流1.5小時(shí)。向減壓除去溶劑后的殘留物中加入二氯甲烷(80ml)，并依次加入苯胺(0.60g，6.44mmol)和三乙胺(1.45g，14.3mmol)，之后在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)液用氯仿稀釋并依次用1M鹽酸和飽和鹽水洗。有機(jī)層經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥后減壓除去溶劑。向這樣得到的殘余物(1.0g，2.03mmol)中加入四氫呋喃/N，N-二甲基甲酰胺(5∶1)的混合液(30ml)以制成溶液，然后室溫下加入60％氫化鈉(0.12g，3.05mmol)，然后將所得混合物攪拌30分鐘。之后，向反應(yīng)液中滴加溴代乙酸叔丁酯(0.48g，2.44mmol)后在室溫下攪拌14小時(shí)。向反應(yīng)體系中加入飽和氯化銨水溶液，混合物用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層依次用水、飽和鹽水洗，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥后減壓除去溶劑。向所得殘余物中加入三氟乙酸(20ml)后攪拌1小時(shí)。減壓除去三氟乙酸后，殘余物在甲醇中重結(jié)晶得到N-[3-{4-(1-十八烷氧基)苯基}丙?；鵠-N-苯基甘氨酸(0.91g)，為無(wú)色粉末。
1H-NMR(300MHz，δppm in CDCl3)0.88 (3H，t，J＝7Hz)，1.25-1.79(32H，m)，2.40(2H，t，J＝8Hz)，2.85(2H，t，J＝8Hz)，3.89(2H，t，J＝7Hz)，4.39(2H，s)，6.75-7.41(9H，m)實(shí)施例2-113按照實(shí)施例1的相同方法，由相應(yīng)的氨基化合物和相應(yīng)的羧酸制備表1中的本發(fā)明化合物(實(shí)施例2-113)。


















實(shí)施例114N-[3-{4-(1-十二烷氧基)苯基}丙?；鵠-N-(2-苯氧基苯基)甘氨酸甲酯的制備將3-{4-(1-十二烷氧基)苯基}丙酸(0.60g，1.79mmol)和亞硫酰氯(0.64g，5.38 mmol)在苯(7ml)中的懸浮液加熱回流0.5小時(shí)。向減壓除去溶劑后的殘留物中加入二氯甲烷(14ml)，并依次加入2-苯氧基苯胺(0.30g，1.63mmol)和三乙胺(0.54g，5.38mmol)，將混合物在室溫下攪拌5小時(shí)。從反應(yīng)液中蒸除溶劑后，將所得殘余物溶于乙酸乙酯，依次用1M鹽酸和飽和氯化鈉水溶液洗。有機(jī)層經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥后減壓除去溶劑。這樣得到3-[4-(1-十二烷氧基)苯基]-N-(2-苯氧基苯基)丙酰胺的粗晶體(0.65g，79％)。向用正己烷洗過(guò)的60％氫化鈉(0.036g，0.70mmol)中，加入0.30g(0.60mmol)如此獲得的粗晶體在N，N-二甲基甲酰胺(4ml)中的溶液，之后室溫?cái)嚢?0分鐘，向其中加入溴乙酸甲酯(0.14g，0.90mmol)，之后室溫?cái)嚢?8小時(shí)。反應(yīng)液用乙酸乙酯稀釋?zhuān)来斡盟惋柡吐然c水溶液洗，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥后減壓除去溶劑。這樣得到的殘余物經(jīng)硅膠柱色譜(洗脫劑∶正己烷/乙酸乙酯＝5∶1)提純得到N-[3-{4-(1-十二烷氧基)苯基}丙?；鵠-N-(2-苯氧基苯基)甘氨酸甲酯(0.23g)，為無(wú)色油狀物。
1H-NMR(300MHz，δppm in CDCl3)0.88(3H，t，J＝7Hz)，1.20-1.45(20H，m)，1.74(2H，m)，2.43(2H，m)，2.83(2H，m)，3.69(1H，d，J＝17Hz)，3.73(3H，s)，3.89(2H，t，J＝7Hz)，4.87(1H，d，J＝17Hz)，6.72-7.50(13H，m)實(shí)施例115-121根據(jù)實(shí)施例114化合物的制備方法得到下列本發(fā)明化合物。
N-[2-(2-甲基苯氧基)苯基]-N-[3-{4-(1-十八烷氧基)-苯基}丙酰基]甘氨酸叔丁酯(實(shí)施例115)
1H-NMR(300MHz，δppm in CDCl3)0.88(3H，t，J＝7Hz)，1.20-1.43(30H，m)，1.74(2H，m)，2.19(3H，s)，2.47(2H，m)，2.87(2H，m)，3.88(2H，t，J＝7Hz)，4.23(2H，q，J＝17Hz)，6.70-7.52(12H，m)N-[2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-N-[3-{4-(1-十八烷氧基)-苯基}丙?；鵠甘氨酸叔丁酯(實(shí)施例116)1H-NMR(300MHz，δ ppm in CDCl3)0.88(3H，t，J＝7Hz)，1.20-1.40(30H，m)，1.45(9H，s)，1.67(2H，m)，2.35(2H，m)，2.83(2H，m)，3.50(1H，d，J＝17Hz)，3.75(2H，t，J＝7Hz)，5.01(1H，d，J＝17Hz)，6.59(2H，m)，6.88(2H，m)，7.48-7.62(5H，m)，7.74(1H，m)，8.00-8.08(2H，m)，8.33(1H，m)N-[4-{1 2-(4-甲氧基苯氧基)十二烷氧基}苯基乙?；鵠-N-[2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]甘氨酸叔丁酯(實(shí)施例117)1H-NMR(300MHz，δppm in CDCl3)1.20-1.65(20H，m)，1.45(9H，s)，1.76(2H，m)，3.24(1H，m)，3.55(1H，d，J＝17Hz)，3.62(1H，m)，3.77(3H，s)，3.90(2H，t，J＝7Hz)，5.05(1H，d，J＝17Hz)，6.50(2H，m)，6.75(2H，m)，6.83(4H，m)，7.48-7.68(3H，m)，7.80(1H，m)，7.95-8.03(2H，m)，8.25(1H，m)2-氨基-N-[2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-N-[3-{4-(1-十八烷氧基)苯基}丙酰基丙酸叔丁酯(實(shí)施例118)1H-NMR(300MHz，δppm in CDCl3)0.88 (3H，t，J＝7Hz)，0.94(3H，d，J＝7Hz)，1.20-1.40(30H，m)，1.51(9H，s)，1.68(2H，m)，2.26(2H，m)，2.80(2H，m)，3.75(2H，t，J＝7Hz)，5.00(1H，q，J＝7Hz)，6.60(2H，m)，6.85(2H，m)，7.48-7.68(5H，m)，7.83(1H，m)，8.00-8.08(2H，m)，8.33(1H，m)4-氨基-N-[2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-N-[3-{4-(1-十八烷氧基)苯基}丙?；鵠丁酸乙酯(實(shí)施例119)1H-NMR(300MHz，δppm in CDCl3)0.88(3H，t，J＝7Hz)，1.19(3H，t，J＝7Hz)，1.00-1.46(30H，m)，1.63-1.96(4H，m)，2.28(4H，m)，2.80(2H，m)，3.04(1H，m)，3.80(2H，t，J＝7Hz)，4.06(2H，q，J＝7Hz)，4.30(1H，m)，6.65(2H，m)，6.90(2H，m)，7.08(1H，m)，7.56(5H，m)，8.08(2H，m)，8.34(1H，m)N-[3-{4-(1-十八烷氧基)苯基}丙?；鵠-N-(2，4，6-三甲基苯基)甘氨酸甲酯(實(shí)施例1 20)1H-NMR(300MHz，δppm in CDCl3)0.88(3H，t，J＝7Hz)，1.17-1.48(30H，m)，1.74(2H，m)，2.15(3H，s)，2.23(2H，m)，2.27(3H，s)，2.85(2H，m)，3.76(3H，s)，3.89(2H，t，J＝7Hz)，4.09(2H，s)，6.76(2H，m)，6.89(2H，s)，6.99(2H，m)N-(2-苯基)-N-[3-{4-(1-十八烷氧基)苯基}丙酰基]-甘氨酸叔丁酯(實(shí)施例121)1H-NMR(300MHz，δppm in CDCl3)0.88(3H，t，J＝7Hz)，1.20-1.46(39H，m)，1.78-1.69(2H，m)，2.38(2H，t，J＝8Hz)，2.85(2H，t，J＝8Hz)，3.89(2H，t，J＝7Hz)，4.23(2H，s)，6.75-7.22(9H，m)實(shí)驗(yàn)實(shí)施例1[VEGF受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)]根據(jù)文獻(xiàn)(Cell Growth&Differentiation，Vol.7，pp.213-221，1996)所述方法進(jìn)行下列實(shí)驗(yàn)。
將其中Flt-1強(qiáng)制表達(dá)的NIH3T3細(xì)胞種入24孔膠原被覆板(7×104細(xì)胞/孔)，在含10％牛血清和200μg/ml Geneticin G418的Dulbecco’s modified Eagle’s medium(DMEM)中、在5％二氧化碳?xì)怏w的氣氛下、37℃培養(yǎng)24小時(shí)。細(xì)胞在緩沖液A[DMEM中含10mMHEPES(N-2-羥乙基哌嗪-N’-2-乙磺酸)和0.1％BSA(牛血清白蛋白)]中于4℃預(yù)培養(yǎng)30分鐘。然后，將培養(yǎng)基替換為緩沖液B(DMEM中含10mM HEPES和0.5％BSA)。將表2所示的實(shí)驗(yàn)化合物分別溶于二甲亞砜中并用緩沖液B將其稀釋至預(yù)定濃度，然后向其中加入[125I]-VEGF(最終濃度為25pM)。于4℃進(jìn)行結(jié)合反應(yīng)90分鐘。反應(yīng)完成后，細(xì)胞用冰冷的緩沖液A洗3次。向各個(gè)孔中分別加入0.5ml0.5M NaOH溶液，將細(xì)胞在室溫下裂解30分鐘。利用γ計(jì)數(shù)器測(cè)量各個(gè)孔中裂解細(xì)胞的放射活性，計(jì)算[125I]-VEGF的總結(jié)合量。[125I]-VEGF非特異性結(jié)合量通過(guò)10nM非標(biāo)記VEGF存在下的競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn)來(lái)測(cè)定。[125I]-VEGF的特異性結(jié)合量由[125I]-VEGF總結(jié)合量與[125I]-VEGF非特異性結(jié)合量的差值來(lái)計(jì)算。實(shí)驗(yàn)化合物的結(jié)合抑制率通過(guò)下列方程來(lái)計(jì)算。

表1

a5-氨基-2-(4-羧基苯氧基)-N-[3-{4-(1-十八烷氧基)苯基}丙酰基]苯甲酸；JP-A-12-072653(WO01/02344)中公開(kāi)的一種氨基苯甲酸衍生物實(shí)驗(yàn)實(shí)施例2[溶解度實(shí)驗(yàn)]
在螺口試管中稱(chēng)量1mg實(shí)驗(yàn)化合物，向其中加入1ml磷酸鹽緩沖液(pH6.8；20mM；離子強(qiáng)度＝0.15)，室溫遮光條件下振蕩2小時(shí)后，于25℃培養(yǎng)22小時(shí)。試管于25℃以3000rpm離心10分鐘后得到的上清液進(jìn)一步于25℃以11000rpm離心10分鐘。這樣得到的上清液用水/乙腈(1∶1)混合液以2-21倍稀釋比進(jìn)行稀釋從而制得樣品溶液(A)。0.5mg實(shí)驗(yàn)化合物溶于5ml乙腈，并用乙腈稀釋兩倍從而制得標(biāo)準(zhǔn)溶液(B)。將10μl樣品溶液(A)和10μl標(biāo)注溶液(B)根據(jù)HPLC方法測(cè)量確定各溶液中的實(shí)驗(yàn)化合物的峰面積。利用測(cè)量值根據(jù)下列方程計(jì)算實(shí)驗(yàn)化合物的溶解度(mg/ml)。


<HPLC操作條件>
柱子shiseido capcell pak UG120(4.6×150mm)流動(dòng)相乙腈/10mM乙酸銨的混合液(90∶10)檢測(cè)波長(zhǎng)230nm流速1ml/min柱溫40℃表2

工業(yè)實(shí)用性式(1)代表的本發(fā)明羧酸化合物或其可藥用鹽具有VEGF受體拮抗作用并且對(duì)于治療VEGF相關(guān)疾病是有用的。本發(fā)明化合物通過(guò)抑制配體(VEGF)與VEGF受體相結(jié)合從而抑制了血管內(nèi)皮細(xì)胞的VEGF依賴(lài)性增生并且抑制了血管新生。該化合物還能抑制VEGF導(dǎo)致的血管通透性增高。VEGF相關(guān)疾病和病理癥狀的例子包括糖尿病性視網(wǎng)膜病和其他視網(wǎng)膜病、慢性風(fēng)濕病、實(shí)性腫瘤、與缺血再灌注損傷相關(guān)的腦水腫和傷害、銀屑病、動(dòng)脈粥樣硬化、晶狀體后纖維組織形成、新生血管性綠內(nèi)障、老年性黃斑變性、甲狀腺增生(包括格雷夫斯病(Graves’disease))、慢性炎癥、肺炎、腎炎綜合癥、腫瘤征兆性免疫機(jī)能減退、腹水潴留、心內(nèi)膜液滲出(與心內(nèi)膜炎等有關(guān))以及胸膜積水存留。
權(quán)利要求
1.一種下式代表的羧酸衍生物或其可藥用鹽 其中環(huán)A表示苯環(huán)、萘環(huán)或包含1-4個(gè)從氮原子、氧原子和硫原子中任意選取的雜原子的雜環(huán)；W表示C1-5亞烷基；Z表示單鍵或亞苯基；R1與R2相同或不同，各自獨(dú)立表示氫原子、鹵原子、C1-5烷基或C1-10烷氧基；R3表示氫原子、鹵原子、C1-12烷基、C2-5炔基、三氟甲基、乙炔基、氰基、硝基、-CH2-R6代表的基團(tuán)[其中R6表示C1-5烷硫基或下式代表的基團(tuán) (其中m代表0或1，n表示0-3的整數(shù))]，或下式代表的基團(tuán) [其中環(huán)B表示苯環(huán)或含1-3個(gè)從氮原子、氧原子、硫原子中任意選取的雜原子的單環(huán)雜環(huán)，R7表示氫原子或C1-5烷基，R8表示氫原子、C1-5烷基或下式代表的基團(tuán) (其中R9與R10相同或不同且各自獨(dú)立表示氫原子、鹵原子、C1-5烷基或C1-5烷氧基，p表示0-8的整數(shù))]，或-Y-R11代表的基團(tuán)(其中Y是-CO-、-O-、-S-或-SO2-代表的基團(tuán)，R11表示C1-10烷基、被1-3個(gè)氟原子取代的甲基、苯基、被C1-5烷基取代的苯基、被C1-5烷氧基取代的苯基、C2-8二烷基氨基或環(huán)氨基)]；R4是下式表示的基團(tuán) (其中R12表示氫原子或被C1-5烷氧基取代的苯氧基，q表示1-5的整數(shù)，r表示10-24的整數(shù))，且R5表示氫原子或C1-5烷基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的羧酸衍生物或其可藥用鹽，其中環(huán)A是苯環(huán)、萘環(huán)、噻吩環(huán)、噻唑環(huán)、異噁唑環(huán)、苯并噻唑環(huán)、鄰苯二甲酰亞胺環(huán)、香豆素環(huán)或二苯并呋喃環(huán)，環(huán)B是苯環(huán)、噁唑環(huán)或噁二唑環(huán)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的羧酸衍生物或其可藥用鹽，其中m是1，n是1-3的整數(shù)；當(dāng)Y表示-CO-、-O-或-S-時(shí)，R11是C1-10烷基、被1-3個(gè)氟原子取代的甲基、苯基、被C1-5烷基取代的苯基或被C1-5烷氧基取代的苯基；當(dāng)Y表示-SO2-時(shí)，R11是C2-8二烷基氨基或環(huán)氨基。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的羧酸衍生物或其可藥用鹽，其中環(huán)A是苯環(huán)，R1與R2相同或不同且各自獨(dú)立表示氫原子或C1-5烷基，R3是-Y-R11代表的基團(tuán)或下式代表的基團(tuán) 環(huán)B是噁唑環(huán)或噁二唑環(huán)，Y是-CO-或O-，R11是苯基、被C1-5烷基取代的苯基或被C1-5烷氧基取代的苯基。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的羧酸衍生物或其可藥用鹽，其中R3是下式代表的基團(tuán) 環(huán)B是噁唑環(huán)或噁二唑環(huán)。
全文摘要
一種用作VEGF受體拮抗劑并具有優(yōu)良性能的化合物。該化合物是右式(1)代表的羧酸衍生物或其可藥用鹽，其中環(huán)A表示苯環(huán)、萘環(huán)等；W表示C
文檔編號(hào)A61K31/426GK1610659SQ0282638
公開(kāi)日2005年4月27日 申請(qǐng)日期2002年12月26日 優(yōu)先權(quán)日2001年12月27日
發(fā)明者齋藤秀次, 須賀洋一郎, 佐藤正和, 澀谷正史 申請(qǐng)人:大正制藥株式會(huì)社