專利名稱：注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及羥基喜樹堿抗癌藥品制備技術(shù)，具體是一種注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑及其制備方法。
羥基喜樹堿能夠抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶I(TOPO I)將DNA斷鏈重新接合的正常功能，并進(jìn)一步造成DNA單鏈的斷裂，抑制DNA復(fù)制，干擾細(xì)胞周期(抑制S期，延遲G2期)，以及使染色體DNA產(chǎn)生斷裂，降解等多種效應(yīng)，在機(jī)體多種調(diào)控蛋白的協(xié)同作用的綜合結(jié)果下，最終導(dǎo)致癌瘤細(xì)胞的死亡。
羥基喜樹堿在動(dòng)物試驗(yàn)中表現(xiàn)出良好的抗腫瘤活性。臨床上對(duì)胃腸道癌、肝癌、膀胱癌、頭頸部腫瘤、肺癌等有較好療效；其主要副作用是骨髓抑制和消化道反應(yīng)，但較之喜樹堿的毒副反應(yīng)明顯減輕，因此在臨床上受到歡迎和重視。羥基喜樹堿由于具有獨(dú)特的抗腫瘤作用機(jī)制，很適合與其它化療藥包括蒽環(huán)類、鬼臼乙叉甙以及抗代謝劑、烷類等抗癌藥進(jìn)行聯(lián)合化療，也適合與生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、放療等合用，在臨床上具有廣泛的應(yīng)用前景，曾長(zhǎng)期被列為國家基本藥物。國際上，許多國家也看到了該類藥的廣闊前景，斥巨資進(jìn)行開發(fā)和研究。
目前，市售羥基喜樹堿(HCPT)制劑均為注射水針，羥基喜樹堿水針劑雖然臨床上對(duì)多種腫瘤有良好的療效，但由于劑型的限制而穩(wěn)定性不佳，有效期僅為1年，實(shí)際上存放8個(gè)月即開始出現(xiàn)少量沉淀、變深等變質(zhì)情況。且水針劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)都為地方標(biāo)準(zhǔn)，所用定量方法為紫外檢測(cè)法，5％純度以上即為合格，約有15％的雜質(zhì)，批次間差異大，而臨床實(shí)踐表明毒副作用與雜質(zhì)的含量呈正相關(guān)，這樣就給臨床用藥安全性和有效性造成一定影響。
本發(fā)明注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑，由以下原料組成羥基喜樹堿1.5-6.0g， 氨基乙酸0.5-15.0g，乳糖 30.0-720.0g， 氫氧化鈉2.0-20.0g，注射用水 加至1500-6000ml，共制成1000支。
一種注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑的制備方法，其特征在于采取如下步驟a、按上述制劑處方配料，取氫氧化鈉、60-80％處方量的氨基乙酸和50-300ml的注射用水制取緩沖液，緩沖液呈堿性，pH為7.5-10.5，其中氫氧化鈉濃度為0.2％-2.0％(W/L)，氨基乙酸濃度為0.1-3.0mol/L；b、將處方量的羥基喜樹堿原料加入所述緩沖液中，攪拌溶解得溶液①；c、將乳糖放入裝有50-300ml注射用水的配料罐中，水溫為15-50℃，攪拌溶解得溶液②；d、將溶液①和氨基乙酸余量倒入溶液②中，攪拌，調(diào)節(jié)溶液pH至8.0-11.0，加注射用水至處方量，測(cè)定藥液濃度，通過過濾膜過濾除菌至貯液罐，分裝，半壓塞，用凍干機(jī)凍干，壓塞，包裝。
本注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑組方合理，制劑疏松多孔而復(fù)溶性好，水分低，純度高，符合國家標(biāo)準(zhǔn)，臨床上適用于原發(fā)性肝癌、胃腸道癌、膀胱癌、頭頸部腫瘤、肺癌、白血病等惡性腫瘤的治療。
其生產(chǎn)全過程無菌操作，采用微孔過濾膜除菌，低溫干燥，產(chǎn)品不被破壞；真空或惰性氣體填充，不易發(fā)生氧化，貯存時(shí)間長(zhǎng)，穩(wěn)定性得以提高等優(yōu)點(diǎn)，從而延長(zhǎng)了該藥的有效期，便于貯存、運(yùn)輸和銷售，也便于保證產(chǎn)品的質(zhì)量。
實(shí)施例12mg/vial規(guī)格 1000支凍干粉針制劑配方是羥基喜樹堿1.8g， 氨基乙酸2.2g，乳糖 45.0g， 氫氧化鈉10.0g，注射用水 加至2100ml，共制成1000支。
其中，羥基喜樹堿為主藥，根據(jù)兩種生產(chǎn)規(guī)格(2mg/支，5mg/支)要求分別投料。
乳糖為賦形劑，作為注射用羥基喜樹堿凍干粉針的骨架支撐部分。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道及結(jié)合我公司其它抗腫瘤凍干制劑的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，通過模擬實(shí)際生產(chǎn)進(jìn)行了試驗(yàn)，確定了主藥與乳糖的比例對(duì)于2mg規(guī)格和5mg規(guī)格的產(chǎn)品，采用1∶20-120的比例。
緩沖溶液由氨基乙酸和氫氧化鈉等配成，提供主藥溶解時(shí)的堿性環(huán)境，對(duì)原料進(jìn)行溶解。加入氨基乙酸是為了保證原料在堿性條件下能夠溶解且不至于因堿性過高而使結(jié)構(gòu)遭到破壞。經(jīng)過多次試驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)用0.2％-2.0％(W/L)氫氧化鈉溶液與0.1-3.0mol/L的氨基乙酸溶液配制而成的緩沖液的溶解效果及緩沖性能較好，最佳實(shí)施例氨基乙酸濃度為1mol/L，氫氧化鈉濃度為1％(W/L)，二者的體積比為22∶2-20，緩沖能力較強(qiáng)。氨基乙酸的另一作用為溶液的pH值回調(diào)，原料溶解后，調(diào)整pH值在8.0-11.0范圍內(nèi)，然后過濾、分裝和凍干。
注射用水作為溶解原料的溶劑。根據(jù)藥液濃度及每支藥的充填量加入適量。乳糖采用新西蘭乳糖有限公司生產(chǎn)產(chǎn)品，符合英國藥典(1993版)1994增補(bǔ)本質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。氫氧化鈉符合GB-629-81(AR)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。氨基乙酸符合《中國藥典》95版質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
制劑的制備工藝如流程

圖1所示。
a、按實(shí)施例1制劑處方配料，取氫氧化鈉10.0g、1.32g(處方量為2.2g)的氨基乙酸和100ml的注射用水制取緩沖液，緩沖液呈堿性，pH為7.5-10.5，其中氨基乙酸濃度為1mol/L，氫氧化鈉濃度為1％(W/L) 。
b、將羥基喜樹堿1.8g加入所述緩沖液中，攪拌溶解得溶液①；c、將乳糖45.0g放入裝有100ml注射用水的配料罐中，水溫為15℃，攪拌溶解得溶液②；d、將溶液①和氨基乙酸余量0.88g倒入溶液②中，攪拌，調(diào)節(jié)溶液pH至9.0-10.5，加入注射用水余量1900ml(處方量2100ml)，測(cè)定藥液濃度，通過過濾膜過濾除菌至貯液罐，分裝(1000支)，半壓塞，用凍干機(jī)凍干，壓塞，包裝。
除菌措施藥液采用PULL公司一次性過濾膜(0.22μm，直徑為300mm，親水性)過濾除菌；膠塞等采用真空蒸汽滅菌柜滅菌、干燥(121℃，30min)；生產(chǎn)用工器具采用干熱滅菌柜滅菌(180℃，2hr)；配料罐，貯液罐、注射用水罐、凍干機(jī)等設(shè)備及管道采用在線滅菌；
本例采用通用的凍干機(jī)凍干，藥液凍干曲線見圖2。
降溫段溫度低點(diǎn)-55℃ 保持7HR此時(shí)凍干箱體內(nèi)不抽真空升溫段升溫速率20℃/HR 真空度為40～50μmHg升溫段溫度高點(diǎn)20℃ 真空度為40～50μmHg溫度高點(diǎn)保持時(shí)間10HR真空度為40～50μmHg整個(gè)干燥過程中凍干機(jī)冷阱溫度要求為-40℃以下。結(jié)束干燥后，凍干箱內(nèi)真空度要求為20～50μmHg。(可選項(xiàng))產(chǎn)品充氮時(shí)要求真空度為-20μmHg.藥液在降溫段溫度低點(diǎn)-55℃下保持7小時(shí)，在升溫段溫度高點(diǎn)20℃下保持10小時(shí)。
實(shí)施例22mg/vial規(guī)格 1000支凍干粉針制劑配方是羥基喜樹堿2.0g， 氨基乙酸4.0g，乳糖 100.0g，氫氧化鈉10.0g，注射用水 加至2500ml，共制成1000支。
其制備過程如下a’、按實(shí)施例2制劑處方配料，取氫氧化鈉10g、3g(處方量為4.0g)的氨基乙酸和100ml的注射用水制取緩沖液，緩沖液呈堿性，pH為8.5-10.0，其中氨基乙酸濃度為1mol/L，氫氧化鈉濃度為1％(W/L) 。
b’、將羥基喜樹堿2.0g加入所述緩沖液中，攪拌溶解得溶液①；c’、將乳糖100.0g放入裝有200ml注射用水的配料罐中，水溫為20℃，攪拌溶解得溶液②；d’、將溶液①和氨基乙酸余量1.0g倒入溶液②中，攪拌，調(diào)節(jié)溶液pH至9.0-11.0，加入注射用水余量2200ml(處方量2500ml)，測(cè)定藥液濃度，通過過濾膜過濾除菌至貯液罐，分裝(1000支)，半壓塞，用凍干機(jī)凍干，充氮，壓塞，包裝。
本例藥液凍干曲線如圖3所示。
降溫段溫度低點(diǎn) -55℃保持7HR 此時(shí)凍干箱體內(nèi)不抽真空第一升溫段升溫速率 20℃/HR 真空度為40～50μmHg第一升溫段溫度高點(diǎn) 20℃ 保持7HR 真空度為40～50μmHg第二升溫段升溫速率 20℃/HR 真空度為40～50μmHg第二升溫段溫度高點(diǎn) 60℃ 保持7HR 真空度為40～50μmHg在壓塞工序之前向制劑中充氮?dú)?，產(chǎn)品充氮時(shí)要求真空度為-20inHg.整個(gè)干燥過程中凍干機(jī)冷阱溫度要求為-40℃以下。結(jié)束干燥后，凍干箱內(nèi)真空度要求為20～50μmHg。藥液在降溫段溫度低點(diǎn)-55℃下保持7小時(shí)，在第一升溫段溫度高點(diǎn)20℃下保持7小時(shí)，在第二升溫段溫度高點(diǎn)60℃下保持7小時(shí)。
實(shí)施例35mg/vial規(guī)格 1000支凍干粉針制劑配方組成如下羥基喜樹堿 5.0g， 氨基乙酸8.0g，乳糖 300.0g，氫氧化鈉10.0g，注射用水 加至4000ml，共制成1000支。
其制備過程如下a”、按實(shí)施例3制劑處方配料，取氫氧化鈉10g、5.6g(處方量為8.0g)的氨基乙酸和300ml的注射用水制取緩沖液，緩沖液呈堿性，pH為7.5-10.5，其中氨基乙酸濃度為1mol/L，氫氧化鈉濃度為1％(W/L)。
b”、將羥基喜樹堿5.0g加入所述緩沖液中，攪拌溶解得溶液①；c”、將乳糖300.0g放入裝有300ml注射用水的配料罐中，水溫為25℃，攪拌溶解得溶液②；d”、將溶液①和氨基乙酸余量2.4g倒入溶液②中，攪拌，調(diào)節(jié)溶液pH至8.0-10.0，加入注射用水余量3400ml(處方量4000ml)，測(cè)定藥液濃度，通過過濾膜過濾除菌至貯液罐，分裝(1000支)，半壓塞，用凍干機(jī)凍干，壓塞，包裝。
實(shí)施例3藥液凍干曲線如圖4所示。
降溫段溫度低點(diǎn)-55℃保持7HR 此時(shí)凍干箱體內(nèi)不抽真空第一升溫段升溫速率15℃/HR 真空度為40～50μmHg第一升溫段溫度高點(diǎn)5℃ 保持7HR 真空度為40～50μmHg第二升溫段升溫速率20℃/HR 真空度為40～50μmHg第二升溫段溫度高點(diǎn)30℃ 保持7HR 真空度為40～50μmHg第三升溫段升溫速率10℃/HR 真空度為40～50μmHg第三升溫段溫度高點(diǎn)50℃ 保持7HR 真空度為40～50μmHg產(chǎn)品也可選擇充氮，充氮時(shí)要求真空度為-20inHg.整個(gè)干燥過程中凍干機(jī)冷阱溫度要求為-40℃以下。結(jié)束干燥后，凍干箱內(nèi)真空度要求為20～50μmHg。本例藥液在降溫段溫度低點(diǎn)-55℃下保持7小時(shí)，在第一升溫段溫度高點(diǎn)5℃下保持7小時(shí)，在第二升溫段溫度高點(diǎn)30℃下保持7小時(shí)，在第三升溫段溫度高點(diǎn)50℃下保持7小時(shí)。
本方法采用通用的凍干工藝，根據(jù)產(chǎn)品的特點(diǎn)，其凍干曲線降溫段、升溫段、溫度保持段的主要技術(shù)參數(shù)如下降溫段溫度低點(diǎn) -30～-70℃保持2-10HR此時(shí)凍干箱體內(nèi)不抽真空升溫段升溫速率 5-45℃/HR 真空度為20～200μmHg升溫段溫度高點(diǎn)0-70℃真空度為20～200μmHg溫度高點(diǎn)保持段時(shí)間1-25HR(可分段進(jìn)行)真空度為20～200μmHg整個(gè)干燥過程中凍干機(jī)冷阱溫度要求為-40℃以下。結(jié)束干燥后，凍干箱內(nèi)真空度要求為0～200μmHg。產(chǎn)品充氮(可選項(xiàng))時(shí)要求真空度為-50～10inHg。在凍干過程中，藥液在降溫段溫度低點(diǎn)-30～-70℃下保持2-10小時(shí)，在升溫段溫度高點(diǎn)0-70℃下保持1-25HR小時(shí)，在凍干過程中藥液可分多段凍干。
本羥基喜樹堿凍干粉針制劑已經(jīng)廣東省藥品檢驗(yàn)所檢驗(yàn)，檢驗(yàn)報(bào)告如下檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)國家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)(試行)WS-046(X-036)-2001(1).(2)
送檢樣品數(shù)量 2mg規(guī)格50支；5mg規(guī)格50支。
檢驗(yàn)項(xiàng)目性狀、鑒別、堿度、水分、有關(guān)物質(zhì)、含量均勻度、異常毒素、熱原、無菌、溶液的澄清度、澄明度、含量測(cè)定。
檢驗(yàn)結(jié)果符合規(guī)定(合格)。
檢驗(yàn)結(jié)論注射用羥基喜樹堿符合國家標(biāo)準(zhǔn)。
本注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑的動(dòng)物試驗(yàn)報(bào)告如下1. 試驗(yàn)名稱注射用羥基喜樹堿局部毒性及其他安全性試驗(yàn)2. 試驗(yàn)單位中山醫(yī)科大學(xué)藥物開發(fā)中心3. 試驗(yàn)項(xiàng)目局部刺激試驗(yàn)、溶血試驗(yàn)、過敏試驗(yàn)4. 試驗(yàn)方法①、局部刺激試驗(yàn) 通過肉眼觀察給藥后家兔眼睛各構(gòu)造部分的刺激反應(yīng)(點(diǎn)眼給藥)、肉眼觀察、病理組織學(xué)檢查家兔耳血管刺激反應(yīng)(耳緣靜脈注射給藥)、肉眼觀察家兔股四頭肌(肌肉注射給藥)的刺激反應(yīng)進(jìn)行評(píng)價(jià)。
②、溶血試驗(yàn) 通過觀察藥物對(duì)家兔離體紅細(xì)胞有無溶血和凝集反應(yīng)進(jìn)行評(píng)價(jià)。
③、過敏試驗(yàn) 肉眼觀察腹腔注射給藥后豚鼠過敏反應(yīng)進(jìn)行評(píng)價(jià)。5、結(jié)論試驗(yàn)結(jié)果表明，注射用羥基喜樹堿對(duì)家兔靜脈注射、肌肉注射及點(diǎn)眼均無刺激性，對(duì)家兔紅細(xì)胞無溶血和凝集反應(yīng)，對(duì)豚鼠注射給藥未見過敏反應(yīng)。
權(quán)利要求
1.一種注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑，其特征在于由以下原料組成羥基喜樹堿1.5-6.0g， 氨基乙酸0.5-15.0g，乳糖 30.0-720.0g，氫氧化鈉2.0-20.0g，注射用水 加至1500-6000ml，共制成1000支。
2.一種注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑的制備方法，其特征在于采取如下步驟a、按權(quán)利要求1所述的制劑處方量配料，取氫氧化鈉、60-80％處方量的氨基乙酸和50-300ml的注射用水制取堿性的緩沖液；b、將處方量的羥基喜樹堿原料加入所述緩沖液中，攪拌溶解得溶液①；c、將乳糖放入裝有50-300ml注射用水的配料罐中，水溫為15-50℃，攪拌溶解得溶液②；d、將溶液①和氨基乙酸余量倒入溶液②中，攪拌，調(diào)節(jié)溶液pH至8.0-11.0，加注射用水至處方量，測(cè)定藥液濃度，通過過濾膜過濾除菌至貯液罐，分裝，半壓塞，用凍干機(jī)凍干，壓塞，包裝。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑的制備方法，其特征在于在壓塞工序之前向制劑中充氮?dú)猓涞獣r(shí)要求真空度為-20inHg。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑的制備方法，其特征在于所述緩沖液呈堿性，pH為7.5-10.5。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑的制備方法，其特征在于在凍干過程中，藥液在凍干曲線降溫段溫度低點(diǎn)-30～-70℃下保持2-10小時(shí)，在升溫段溫度高點(diǎn)0-70℃下保持1-25HR小時(shí)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑的制備方法，其特征在于在凍干過程中藥液分多段凍干。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑的制備方法，其特征在于所述氨基乙酸濃度為0.1-3.0mol/L，氫氧化鈉濃度為0.2％-2.0％(W/L)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑的制備方法，其特征在于所述氨基乙酸濃度為1mol/L，氫氧化鈉濃度為1％(W/L)。
全文摘要
本發(fā)明涉及注射用羥基喜樹堿凍干粉針制劑及其制備方法,制劑由以下原料組成:羥基喜樹堿1.5－6.0g,氨基乙酸0.5－15.0g,乳糖30.0－720.0g,氫氧化鈉2.0－20.0g及注射用水;其制法包括:a.按制劑處方配料,取氫氧化鈉、適量氨基乙酸和適量注射用水制取緩沖液;b.將羥基喜樹堿加入緩沖液中,攪拌溶解得溶液①;c.將乳糖放入裝有適量注射用水的配料罐中,攪拌溶解得溶液②;d.將溶液①和氨基乙酸余量倒入溶液②中,攪拌,調(diào)節(jié)溶液pH至8.0－11.0,加注射用水至處方量,過濾除菌至貯液罐,分裝,半壓塞,凍干,壓塞,包裝,本凍干粉針制劑組方合理,制劑疏松多孔復(fù)溶性好,水分低,純度高,符合國家標(biāo)準(zhǔn),臨床上適用于原發(fā)性肝癌、胃腸道癌、膀胱癌、頭頸部腫瘤、肺癌、白血病等惡性腫瘤的治療。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1376468SQ0211491
公開日2002年10月30日 申請(qǐng)日期2002年3月1日 優(yōu)先權(quán)日2002年3月1日
發(fā)明者宋鵬飛, 曾麗華, 寶玉榮, 王君山, 鄧胡寧, 侯常林 申請(qǐng)人:深圳萬樂藥業(yè)有限公司