專利名稱：用于促進(jìn)人體自身epa、dha合成的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物的應(yīng)用，具體涉及一種用于促進(jìn)人體自身EPADHA合成的藥物。
1978年Dyerberg的流行病學(xué)的研究指出，愛斯基摩人不僅心肌梗塞的發(fā)病率低，而且類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡等以自身免疫異常為原因的慢性炎癥性疾患的發(fā)病率明顯低于當(dāng)?shù)氐陌追N人，大量食用海魚和海獸，從中攝取多量的EPA(二十碳五烯酸，C205，n-3Eicosapentaenoic Acid)、DHA(二十二碳六烯酸，C226，n-3Docosahexaenoic Acid)無疑是一個(gè)重要的原因。
近10年來，對(duì)脂肪酸代謝產(chǎn)物PGs(前列腺素，Prostaglandins)和LTs(白三烯，Leukotrienes)的研究結(jié)果使得EPA和DHA的代謝及其與生命現(xiàn)象的密切關(guān)系被基本闡明。
EPA是3烯PGs與5烯LTs的前體，亦被視為AA(花生四烯酸，C204，n-6 Arachidonic acid，)的類似物。在典型的歐美膳食中，攝入的是以亞油酸為主的n-6脂肪酸，在體內(nèi)代謝成AA。亞油酸大量存在于植物的種子油中。n-3脂肪酸的來源是α-亞麻酸，存在于植物的綠葉、大豆油及海洋生物中。這2型脂肪酸的代謝產(chǎn)物PGs，LTs在生物學(xué)上有重要的意義；前二者與C203，n-6脂肪酸的代謝產(chǎn)物一起被稱為廿碳脂肪酸衍生物(Eicosanoids)。
近年的研究指出，高膽固醇并不是心血管疾患最主要的危險(xiǎn)因子。Dyerberg的研究表明，愛斯基摩人攝入的膽固醇比丹麥人多2倍，但心肌梗塞的發(fā)生率卻只有丹麥人的1/10以下。在美國進(jìn)行的一項(xiàng)為期7年的試驗(yàn)表明，限制從食物中攝取膽固醇以及服用降膽固醇藥物僅可使血漿膽固醇輕微降低而心肌梗塞的死亡率與不限制膽固醇，不服用降膽固醇藥物的對(duì)照組相比并無差異。現(xiàn)代的研究指出，血小板的聚集能才是心血管疾患最危險(xiǎn)的因子。自50年代起，亞油酸降低膽固醇有益于健康的理論是占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)的油脂營養(yǎng)理論。在植物油有益于健康的觀點(diǎn)下，亞油酸被過量地?cái)z取，攝入的食物中n-3/n-6的比值越來越小。由于AA的廿碳脂肪酸衍生物升高了血小板的聚集能、刺激平滑肌增生，及使血管痙攣等，不僅導(dǎo)致了心血管病的發(fā)病率增高，而且導(dǎo)致了癌癥的發(fā)生和轉(zhuǎn)移及自身免疫系統(tǒng)疾患等。
魚油中的n-3系脂肪酸主要是與n-6系脂肪酸競(jìng)爭(zhēng)性地和Δ6不飽和酶，碳鏈延長酶，Δ5不飽和酶作用，抑制了亞油酸在人體內(nèi)代謝成AA；EPA、DHA與AA競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合進(jìn)入磷脂質(zhì)，這不僅改善了膜的性質(zhì)而且減少了AA由于磷脂酶A2水解作用的游離；EPA競(jìng)爭(zhēng)性地和脂氧酶、環(huán)氧酶作用抑制了AA的代謝；EPA代謝成各種低生物活性的廿碳脂肪酸衍生物，但其并不抑制AA在內(nèi)皮細(xì)胞代謝成PGI2。
n-3/n-6脂肪酸的平衡導(dǎo)致了它們的代謝產(chǎn)物廿碳脂肪酸衍生物的平衡。這是維持人體健康的根本因素，也是魚油作用最主要的機(jī)制。
志愿者服用魚油后，血小板和紅細(xì)胞膜脂肪酸組成中EPA、DHA的含量增加，可降低血小板的粘附力，增加紅細(xì)胞的變形能力，不僅有抗血栓炎癥的作用，還有抗衰老作用。老年人缺乏n-3系必需脂肪酸EPA、DHA可能是患老年性疾患的重要原因。
魚油中含有不飽和脂肪酸EPA、DHA等，在營養(yǎng)學(xué)和醫(yī)學(xué)上有重要的作用，但易于氧化是一個(gè)大問題，而且魚油帶有魚腥氣，雖制成軟膠囊，方便攜帶和服用，但保存期(貨架壽命)有限，部分人服用后有反胃現(xiàn)象，難以忍受魚油氣味，老年人服用亦易引起滑腸現(xiàn)象。而且不同魚種的魚油其EPA、DHA的含量差別甚大，再加上加工工藝和設(shè)備的不同，不同品牌魚油膠丸的內(nèi)在質(zhì)量參差不齊，消費(fèi)者無所適從。
本發(fā)明的目的是公開調(diào)血脂類藥物的新用途。
本發(fā)明公開了調(diào)節(jié)血脂類藥物在調(diào)節(jié)血脂的同時(shí)可促進(jìn)人體自身EPA、DHA合成，升高紅細(xì)胞、血小板膜脂肪酸組成中的EPA、DHA含量，達(dá)到與服用大劑量魚油相同的效果，可用于抗衰老和老年癡呆癥的預(yù)防，起到促進(jìn)人體健康的作用。
調(diào)節(jié)血脂類藥物包括膽酸螯合劑、煙酸類調(diào)脂藥、苯氧乙酸類、HMG-CoA還原酶抑制劑及其他調(diào)脂藥，這些降脂藥通常是通過降低血清中極低密度脂蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白及膽固醇濃度；或升高血清高密度脂蛋白、抑制血小板聚集等起到治療高脂血癥及動(dòng)脈粥樣硬化等癥的作用。
本發(fā)明通過一系列試驗(yàn)證明上述調(diào)節(jié)血脂類藥物在調(diào)節(jié)血脂的同時(shí)對(duì)血小板、紅細(xì)胞膜脂肪酸成分(AA、EPA、DHA)、抗衰老因素(ET-1、TXB2/6-酮-PGF1α、MDA/SOD)等均有影響。一、研究對(duì)象1.原發(fā)性高脂血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)近1、2月內(nèi)未服用任何降脂或影響血脂及細(xì)胞膜脂肪酸成份的藥物，在飲食控制情況下兩次(間隔≥2周)測(cè)空腹(＞12小時(shí)以上)，(1)血清總膽固醇(TC)≥5.95mmol/L，(2)甘油三酯(TG)≥2.26mmol/L，(3)高密度脂蛋白(HDL-C)男≤1.04mmol/L，女≤1.17mmol/L。符合上述任一項(xiàng)并排除了由糖尿病、甲狀腺功能失常，痛風(fēng)，肝、膽、胰和腎臟疾患等引起的繼發(fā)性高脂血癥。
2.對(duì)象本院門診入選共91例。男67例，女24例，平均年齡53.1±8.9(33-73歲)，體重指數(shù)(BMI)≤24者20例，＞24者71例。高血脂類型IIa型19例，IIb型20例，IV型52例。二、研究方法1.受試者隨機(jī)分為三組，普拉固(P)組30例，服普拉固(上海施貴寶藥廠提供)10mg，每日晚餐時(shí)一次；力平脂(F)組33例，服力平脂微?；z囊200mg(法國利博福尼制藥廠生產(chǎn)，每膠囊含非諾貝特200mg)；魚油(FO)組28例，服魚油膠囊5.4g(上海東海制藥廠提供，每一膠囊0.45g，含EPA、DHA315mg)分三次服用。治療前及治療后6周，12周分別測(cè)定血清TC及TG(比色法)、HDL-C及LDL-C(單抗一步法)、載脂蛋白AI(ApoA1)、載脂蛋白B100(ApoB100)及Lp(a)(散射比濁法)、血糖及肝腎功能。血漿ET-1、TXB2、6-酮-PGF1α(放免法)。
2.血小板懸液的制備肘靜脈取血，ACD抗凝，1000rpm離心15分鐘取上層富含血小板血漿400ul，再以3000rpm離心沉淀15分鐘獲壓積血小板，CGS緩沖液洗滌血小板三次，以Hepes-Tyrode緩沖液制成經(jīng)洗滌的血小板懸液。
3.紅細(xì)胞及紅細(xì)胞膜的制備取ACD抗凝血，2500rpm離心5分鐘，去上層富血小板血漿，下層再經(jīng)2500rpm離心15分鐘，得壓積紅細(xì)胞。用生理鹽水洗滌三次，配成經(jīng)洗滌的紅細(xì)胞懸液，再加蒸餾水1.5ml混勻置-18℃使其凍結(jié)，然后復(fù)溫解凍，使紅細(xì)胞破裂，離心沉淀2500Rpm5分鐘，去上層液后用蒸餾水洗滌三次得紅細(xì)胞膜。
4.氣相色譜法測(cè)定血小板、紅細(xì)胞膜脂肪酸成分應(yīng)用HP-5880FID檢測(cè)器，取分離的血小板，紅細(xì)胞樣品加入預(yù)先配制好的含BHT(0.05W/V)的氯仿一甲醇(2∶1)溶液2ml，超聲抽提15分鐘，加入無水硫酸鈉0.5克，轉(zhuǎn)移到20ml玻璃管內(nèi)，置于37℃恒溫水浴中，用純氮吹干，再加入14％三氟化硼一乙醚甲醇溶液2ml，密閉置于80℃水浴30min后取出，待冷卻后加入正己烷(1ml)萃取三次，合并萃取液，加入無水硫酸鈉0.5克，轉(zhuǎn)移出正己烷溶液，并用氮?dú)獯蹈桑谜和?.5ml，每次進(jìn)樣1ul。用面積歸一化法計(jì)算。
5.SOD血漿、MDA測(cè)定應(yīng)用貝克曼Bu-640紫外分光光度計(jì)，用羥胺發(fā)色法測(cè)定SOD，用硫代巴比妥酸法測(cè)定MDA。
6.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。均數(shù)比較用t檢驗(yàn)分析統(tǒng)計(jì)。多組間比較用方差分析統(tǒng)計(jì)。不同指標(biāo)間用線性相關(guān)分析。三、結(jié)果1.服藥后三組血清TC，P組及F組均顯著下降(P組優(yōu)于F組)，F(xiàn)O組無差異。LDL-C水平，三組均明顯下降(P＜0.05-0.001)，以FO組最優(yōu)。三組血清TG均有顯著下降(P＜0.01-0.001)，F(xiàn)組優(yōu)于P組及FO組。三組治療后ApoB100都明顯降低(P＜0.05-0.001，F(xiàn)組最著)。三組Lp(a)都有下降，但僅F組治療12周后有差異(P＜0.05)，HDL-C三組均升高，但唯F組顯著(P＜0.05-0.001)。HDL-C與TG，三組均呈顯著負(fù)相關(guān)(r＝-0.375-0.914，P＜0.05-0.001)。三組治療6周后，ApoAl顯著升高(P＜0.05-0.001)，12周后僅F組有差異(P＜0.05)。見表1表1 普拉固、力平脂、魚油調(diào)節(jié)血脂療效 (X±SD)藥 時(shí) 例TG Tch LDL-C HDL-C ApoA1 ApoB100 Lp(a)物 間 數(shù) (mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)(g/L) (g/L)(mg/L)普 0周 303.36±2.47 6.23±1.29 2.89±0.51 1.19±0.34 1.25±0.28 1.24±0.39 206.95±210.83拉 6周 302.31±1.36**5.49±1.07***2.52±0.38***1.37±1.30 1.53±0.23***1.19±0.29 213.36±244.70固 12周 302.11±1.21**5.58±1.45**2.65±0.49**1.58±2.03 1.31±0.18 1.11±0.27*180.47±261.34力 0周 333.86±2.48 5.95±1.15 2.95±0.56 1.08±0.32 1.28±0.26 1.21±0.33 243.59±316.38平 6周 331.70±1.15***5.50±1.42*2.58±0.48**1.32±0.31***1.62±0.26***1.15±0.36 230.67±277.36脂 12周 331.48±0.81***5.63±1.15*2.53±0.44*1.21±0.32*1.43±0.21*0.98±0.28***146.14±192.67*魚 0周 283.54±2.27 5.70±1.33 2.91±0.48 1.14±0.39 1.25±0.16 1.15±0.28 113.83±119.496周 282.23±1.16**5.48±1.25 2.35±0.33***1.09±0.42 1.36±0.31*1.20±0.31 131.11±109.65油 12周 281.94±0.94***5.68±1.21 2.50±0.47***1.25±1.31 1.29±0.21 1.02±0.26*103.82±120.93注與“0周”比，*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.0012.三種血脂調(diào)節(jié)劑對(duì)血小板脂肪酸成分的影響血小板AA三組治療后有降低，但無明顯差異(P＞0.05)。EPA、DHA三組治療后均有顯著升高(P＜0.05-0.001)。見表2表2 三種調(diào)脂藥對(duì)血小板、紅細(xì)胞膜脂肪酸成分的影響(X±SD)藥例 時(shí) 血小板脂肪酸成分(％) 紅細(xì)胞膜脂肪酸成分(％)物數(shù) 間AA EPADHA AA EPA DHAP 30 治前 5.85±1.750.263±0.161 0.352±0.221 6.60±1.84 0.795±0.301 1.36±0.6630 6周 5.34±1.270.430±0.204***0.573±0.284***6.19±1.16 1.00±0.37***1.90±0.85***組30 12周 5.05±2.500.571±0.226***0.809±0.225***5.44±1.29**1.03±0.29***2.03±0.47***F 33 治前 6.26±1.700.226±0.110 0.351±0.234 6.87±1.63 0.761±0.257 1.58±0.7033 6周 5.34±1.250.517±0.245***0.626±0.299***6.89±1.00*1.05±0.33***1.90±0.45*組33 12周 4.56±2.21***0.596±0.191***0.865±0.246***5.11±1.03***1.04±0.25**2.18±0.49***FO28 治前 5.55±1.600.280±0.151 0.426±0.343 6.16±1.06 0.704±0.272 1.34±0.7528 6周 5.27±2.080.354±0.129*0.564±0.293 5.97±1.07 0.801±0.233**2.47±0.79***組28 12周 5.20±1.330.540±0.265***0.746±0.256**5.17±1.06*0.961±0.182***2.51±0.59***對(duì)照組30 治前 4.9±0.9 0.595±0.351 0.859±0.251 4.98±1.07 1.03±1.176 2.52±0.75注與治前比，*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.0013.三種血脂調(diào)節(jié)劑對(duì)紅細(xì)胞膜脂肪酸成分的影響紅細(xì)胞膜AA三組治療后顯著降低(P＜0.05-0.001)，EPA，DHA三組均顯著增高(P＜0.05-0.001)。見表24.三種調(diào)脂藥對(duì)血小板、紅細(xì)胞膜n-6/n-3比值的影響血小板AA與EPA比值三組于治療后均有明顯下降(P＜0.05)。血小板AA與DHA比值三組均有顯著降低(P＜0.05-0.01)。紅細(xì)胞膜AA與EPA比值三組于治療后降低明顯(P＜0.05-0.01)，紅細(xì)胞膜AA與DHA比值三組均有降低，F(xiàn)組、FO組明顯(P＜0.05-0.01)。見表3表3 三種調(diào)脂藥對(duì)血小板、紅細(xì)胞膜脂肪酸比值的影響(X±S)藥物 例數(shù) 時(shí)間 血小板脂肪酸比值 紅細(xì)胞膜脂肪酸比值A(chǔ)A/EPA AA/DHA AA/EPA AA/DHAP 30治前18.38±6.23 15.35±8.23 10.38±6.34 4.88±2.64306周 14.61±5.38 10.21±5.86 7.04±5.32 3.57±1.98組3012周10.38±6.71*7.68±4.28**5.28±2.69*2.98±1.67F 33治前19.58±6.28 14.02±7.23 10.04±6.21 5.34±2.78336周 13.11±5.38 10.78±6.87 7.31±4.23 3.36±1.92組3312周9.95±5.71*7.28±3.89*4.78±2.31**2.78±0.67**FO28治前18.89±7.03 14.38±6.23 9.93±5.83 4.96±2.23286周 16.67±6.82 10.23±5.46 7.16±3.89 3.83±2.07組2812周9.73±4.28*6.98±3.89*5.21±2.61*2.23±1.78*對(duì)照組30治前9.23±3.24 5.79±2.35 5.03±2.01 2.07±0.99注與治前比，*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.0015.普拉固、力平脂、魚油對(duì)ET-1的影響血漿ET-1水平三組均有顯著降低(P＜0.001)，且血清TC、TG、LDL-C降低與血漿ET-1下降有明顯的相關(guān)性。TC與ET-1相關(guān)性P組，r＝0.999(P＜0.001)，F(xiàn)組，r＝0.992(P＜0.001)；FO組，r＝0.683(P＜0.001)TG與ET-1相關(guān)性P組，r＝0.974(P＜0.001)，F(xiàn)組.r＝0.97(P＜0.001)；FO組，r＝0.95(P＜0.001)，LDL-C與ET-1P組，r＝0.962(P＜0.001)；F組，r＝0.963(P＜0.001)；FO組，r＝0.993(P＜0.001)。見表4表4 三種調(diào)脂藥物對(duì)ET-1的影響(X±SD pg/ml)藥物 例數(shù) 0周 6周 12周普拉固3077.69±32.3444.16±12.87***40.96±12.49***力平脂3377.10±26.6550.56±24.90***45.06±26.97***魚 油2877.68±36.4244.31±10.77***38.11±13.38***注與“0周”比，***P＜0.0016.普拉固、力平脂、魚油對(duì)TXB2、6-酮-PGF1α及其比值的影響。血漿TXB2水平，三組于治療12周后均較治療前有降低，6-酮-PGF1α于服藥6周，12周后較服藥前三組均有明顯增高(P＜0.01-0.001)，TXB2/6-酮-PGF1α比值與正常對(duì)照組(在門診選擇健康志愿者30名)比較于治療6周、12周后顯著降低(P＜0.05-0.01)。TXB2/6-酮-PGF1α比值下降與TC(除FO組)、TG、LDL-C、ET-1呈顯著正相關(guān)(P＜0.001)。TG與TXB2/6-酮PGF1αP組r＝0.996、F組r＝0.999、FO組r＝0.974；TC與TXB2/6-酮PGF1αP組r＝0.941F組r＝0.921、FO組r＝0.206；LDL-C與TXB2/6-酮PGF1αP組r＝0.832、F組r＝0.999、FO組r＝0.790；ET-1與TXB2/6-酮PGF1αP組r＝0.988、F組r＝0.999、FO組r＝0.968。見表5表 5三種調(diào)脂藥物對(duì)TXB2、PGF1α及其比值的影響 (X±SD pg/ml)藥物 時(shí)間 例數(shù) TXB2PGF1αTXB2/PGF1α普0周3083.58±40.6433.72±15.19 2.88±2.54拉6周3090.02±50.3468.56±28.23**1.28±0.57*固12周 3076.83±46.2885.71±21.64***0.77±0.47**力0周3396.81±45.5134.52±16.28 2.76±1.68平6周3394.27±52.2265.72±21.08**1.24±0.75*脂12周 3386.65±58.6290.67±48.63***1.02±0.80**0周28101.35±50.62 41.13±28.72 2.30±1.76魚6周28111.26±52.43 88.75±48.96**1.52±1.18**油12周 2889.98±66.3486.96±14.28***1.02±0.78***正常對(duì)照組 66.88±65.9544.72±45.78 1.68±1.16注與“0周”比，***P＜0.0017.三種調(diào)脂藥對(duì)血漿MDA、SOD的影響用藥前三組MDA均高于正常入(在門診選擇健康志愿者30名)，用藥后，SOD與正常人比無差異。三組血漿MDA均有顯著下降(P＜0.05-0.001)。見表6表6 三種調(diào)脂藥物對(duì)血漿(MDA、SOD)的影響 (X±SD)血漿MDA 血漿SOD藥物 例數(shù) 時(shí)間 (noml/ml)(noml/ml)P 30治前 54.2±23.042.2±15.1306周41.2±19.4**39.9±10.9組3012周 31.5±6.5***37.0±5.1F 33治前 51.8±21.235.7±13.9336周33.7±12.0**34.7±12.7組3312周 28.5±9.5***36.8±5.3FO8 治前 43.5±16.137.5±12.0286周37.5±14.6**33.1±8.0組2812周 31.4±6.1***35.8±6.8正常參對(duì)組30治前 31.7±5.9 43.6±11.7注與治前比*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001四、討論1.三種血脂調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)血脂的療效與特點(diǎn)血清TC、LDL-C、Lp(a)增高，HDL-C降低是引起和加重動(dòng)脈粥樣硬化(AS)，早發(fā)冠心病(CHD)的重要危險(xiǎn)因素已十分明確。降脂治療不僅延緩了AS的進(jìn)程，而且還有消退粥樣斑塊作用。
本研究對(duì)高脂血癥者分別應(yīng)用普拉固、力平脂、魚油三種不同的血脂調(diào)節(jié)劑，結(jié)果三藥均有良好的血脂調(diào)節(jié)作用。其中降TC，普拉固組優(yōu)于力平脂組，魚油作用不大。降LDL-C三藥均有效而以FO組顯著，可能系天然魚油中EPA、DHA影響了細(xì)胞膜脂肪酸成分，修飾了細(xì)胞膜LDL受體。研究表明，異常增高的TG可產(chǎn)生過多小而密LDL亞組分和低HDL-C血癥，這與CHD發(fā)病密切相關(guān)。本研究三種血脂調(diào)節(jié)劑降TG作用明顯，降A(chǔ)poB100、Lp(a)，升HDL-C、ApoA1均有作用，但力平脂為顯著。可見，三藥在調(diào)節(jié)血脂方面各有側(cè)重，IIa型高脂血癥首選普拉固，IIb型及IV型高脂血癥首選力平脂，IV型高脂血癥首選魚油，魚油屬純天然制劑，含人體多種必需多不飽和脂肪酸，不良反應(yīng)少。
2.三種調(diào)脂藥對(duì)致動(dòng)脈粥樣硬化，抗衰老因素影響的探討目前認(rèn)為，高脂血癥時(shí)血中ET濃度與血清總TC、LDL-C、VLDL濃度呈正相關(guān)。有報(bào)導(dǎo)，動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿ET濃度明顯增高，且與受累血管的數(shù)量呈正相關(guān)，認(rèn)為參與了粥樣硬化的形成，可能是動(dòng)脈粥樣硬化病變的標(biāo)志物。
本發(fā)明研究中三組高脂血癥病人，用藥前后ET-1水平均值均較正常人增高，三組治療后ET-1水平下降顯著，ET-1水平降低與血TG、TC、LDL-C下降呈顯著正相關(guān)。其機(jī)理參考文獻(xiàn)及結(jié)合本研究結(jié)果認(rèn)為1.血脂調(diào)節(jié)劑改善了細(xì)胞膜脂肪酸的組成，從而改善了血管內(nèi)皮功能；2.TC、LDL-C降低，抑制了ET的分泌；3.血脂調(diào)節(jié)劑可減輕或消除動(dòng)脈粥樣硬化斑塊，內(nèi)皮損傷得以改善，ET分泌減少；4.血脂調(diào)節(jié)劑降低了增高的血脂水平，尤其是LDL-C，進(jìn)而導(dǎo)致OXLDL降低，刺激了細(xì)胞膜上ET受體合成增加；5.增加了血漿ET清除代謝。血漿ET清除代謝-是在肺部，二是平滑肌細(xì)胞，三是腎臟排泄。肺是ET的主要代謝場(chǎng)所。推測(cè)血脂調(diào)節(jié)劑降低了血脂濃度，使血液粘滯度下降，改善了動(dòng)脈粥樣硬化血管壁的組織結(jié)構(gòu)，從而增加肺、腎血流，促進(jìn)了ET的清除代謝，使ET水平下降。
血栓烷A2(Thromboxane，TXA2)與前列環(huán)素(prostacyclin，PGI2)是前列腺素代謝中的兩個(gè)重要產(chǎn)物。TXA2與PG I2失衡是引起動(dòng)脈粥樣硬化的原因之一。TXA2主要由血小板生成，其代謝物是TXB2，PG I2主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞生成，其代謝物為6-酮-PGF1α。糖尿病、高齡、脂代謝紊亂、動(dòng)脈粥樣硬化形成中脂質(zhì)過氧化物(Lpo)的大量產(chǎn)生、內(nèi)皮細(xì)胞損傷及ET-1升高，均可抑制前列環(huán)素合成酶，降低PGI2的合成與釋放，同時(shí)促進(jìn)血小板TXA2產(chǎn)生。此外，血膽固醇增高直接作用于血小板，使TXA2釋放增加。本研究三組高脂血癥患者治療前TXB2/6-酮-PGF1α值增高，平衡失調(diào)，治療6周、12周后比值顯著降低，TXB2/6-酮-PGF1α比值與TC、TG、LDL、ET-1下降呈正相關(guān)。這說明三種血脂調(diào)節(jié)劑均能通過調(diào)整血脂，改善內(nèi)皮功能，抑制ET-1產(chǎn)生，增加PG I2的合成與釋放，同時(shí)抑制TXA2生成，從而調(diào)節(jié)TXB2/6-酮-PGF1α比值，糾正平衡失調(diào)。
隨著自由基理論的發(fā)展，自由基、脂質(zhì)過氧化與疾病的關(guān)系日益引起人們的廣泛重視，目前發(fā)現(xiàn)許多疾病的發(fā)生或病理發(fā)展過程與自由基及其脂質(zhì)過氧化反應(yīng)密切相關(guān)，如心血管疾病、衰老、腫瘤、創(chuàng)傷等。超氧化物歧化酶(SOD)是體內(nèi)重要的自由基清除劑，其作用是清除超氧陰離子自由基；丙二醛(MDA)是體內(nèi)最重要的過氧化脂質(zhì)(LPO)代謝產(chǎn)物。它在組織或血漿中的水平能較好反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度，目前這兩個(gè)參數(shù)臨床已廣泛用于評(píng)價(jià)機(jī)體、自由基代謝水平。血清過氧化脂質(zhì)增加與AS的發(fā)生與發(fā)展關(guān)系密切，超氧化物歧化酶可延緩和阻止AS的形成與發(fā)展。本研究示三組高脂血癥者服藥前血漿MDA均高于正常組，SOD與正常組無差異。治療后三組MDA均有顯著下降，SOD無變化。MDA/SOD比值三組均有明顯降低。提示三種調(diào)脂藥在調(diào)整血脂的同時(shí)，具有抑制脂質(zhì)過氧化作用，同時(shí)對(duì)糾正氧化與抗氧化的平衡具有重要作用。這可能是隨著調(diào)脂藥對(duì)血脂的調(diào)整，間接調(diào)整了LPO(代謝物MDA)及與SOD的平衡；同時(shí)，調(diào)脂藥可能通過非調(diào)脂作用即血小板、內(nèi)皮素功能的改善，抑制了LPO激活所致。
LPO及脂褐素(LF)在體內(nèi)的含量隨年齡的增長而增加，被認(rèn)為是衰老的重要指征。體內(nèi)LPO含量增加又可加速衰老，故通常檢測(cè)LPO(或MDA)與LF含量作為研究抗衰老的重要指標(biāo)。體內(nèi)n-6系A(chǔ)A隨年齡增長而增加并與MDA成正相關(guān)，n-3系EPA、DHA隨年齡增長而減少，與MDA成負(fù)相關(guān)。本研究應(yīng)用三種血脂調(diào)節(jié)劑后，MDA含量，MDA/SOD比值、n-6/n-3比值均顯著下降，提示有抗衰老作用。
3、三種血脂調(diào)節(jié)劑對(duì)血小板、紅細(xì)胞膜必須脂肪酸成份影響的研究大量的研究表明，血漿脂質(zhì)代謝紊亂及血小板功能異常在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生中起重要作用。Watanabe等認(rèn)為膜脂肪成分的改變可影響血小板功能。
研究表明血清脂質(zhì)如膽固醇增高可影響血小板、紅細(xì)胞膜脂肪成分比率，影響血小板聚集，活化功能及5-羥色胺的釋放。體內(nèi)不飽和脂肪酸如AA，DHA、EPA一般并不游離存在，而是以磷脂的形式存在于細(xì)胞膜中，激素，神經(jīng)刺激，血氧張力過低等都可激活磷脂酶，使花生四烯酸從膜磷脂中游離出來，游離的AA在環(huán)氧化酶、前列腺素合成酶的作用下分別產(chǎn)生TXA2(代謝物TXB2)、PGI2(代謝物6-酮-PGF1α，TXA2可使血管強(qiáng)烈收縮，PGI2使血管擴(kuò)張。
文獻(xiàn)報(bào)道，補(bǔ)充n-3及n6PUFA可影響血小板、紅細(xì)胞膜脂肪酸成分及其聚集功能。本發(fā)明對(duì)原發(fā)性高脂血癥者分別應(yīng)用普拉固、力平脂及富含n-3脂肪酸(EPA、DHA)的魚油后，在血脂調(diào)整的同時(shí)，血小板、紅細(xì)胞膜上的必需脂肪酸都有相應(yīng)的變化，推測(cè)其原因一是補(bǔ)充了富含n-3脂肪酸的魚油直接影響了血小板、紅細(xì)胞膜上的脂肪酸成分。二是三種調(diào)脂藥通過調(diào)整血脂，間接調(diào)整了血小板、紅細(xì)胞膜上的脂肪酸成分。三是三種調(diào)脂藥可能直接作用于細(xì)胞膜，使EPA、DHA與AA競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合進(jìn)入磷脂質(zhì)，改善了膜的性質(zhì)。
n-6、n-3 PUFA廣泛存在于人體細(xì)胞膜，是細(xì)胞膜的重要組成成份，上述兩種脂肪酸都是人體必需脂肪酸。當(dāng)體內(nèi)n6/n3比值升高時(shí)，由于AA的廿碳脂肪酸衍生物(TXA2)升高了血小板的聚集、活化，刺激平滑肌增生及使血管痙攣等，不僅導(dǎo)致了心血管病的發(fā)病率增高，而且導(dǎo)致了癌癥的發(fā)生和轉(zhuǎn)移及自身免疫系統(tǒng)疾患等。n-6/n-3脂肪酸的平衡是維持人體健康的根本因素。
本研究中血小板、紅細(xì)胞膜的n-6/n-3脂肪酸(AA/EPA、AA/DHA)比值經(jīng)治療后三組均有下調(diào)，除P組紅細(xì)胞膜AA/DHA外，F(xiàn)組、FO組均有顯著意義。
通過對(duì)原發(fā)性高脂血癥者分別應(yīng)用普拉固、力平脂，魚油三種不同的血脂調(diào)節(jié)劑的研究提示高脂血癥者血小板、紅細(xì)胞膜必需脂肪酸的組成與正常人相比有異常，n-6/n-3必需脂肪酸平衡失調(diào)，致動(dòng)脈粥樣硬化，抗衰老因素TXB2/6-酮-PGF1、MDA/SOD比值失衡，ET-1異常升高。但三組應(yīng)用不同的血脂調(diào)節(jié)劑后都能有效調(diào)節(jié)血脂，同時(shí)調(diào)整血小板、紅細(xì)胞膜上必需脂肪酸的平衡，調(diào)整TXB2/6-酮-PGF1α平衡，改善血小板功能，調(diào)整MDA/SOD平衡，調(diào)節(jié)氧化、過氧化，降低ET-1、升高6-酮-PGF1α水平，改善內(nèi)皮功能，這都有利于防治動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展，有利于抗衰老。值得注意的是，對(duì)高脂血癥者應(yīng)用普拉固、力平脂血脂調(diào)節(jié)劑后產(chǎn)生了應(yīng)用富含n-3脂肪酸的魚油后一致的血小板、紅細(xì)胞膜脂肪酸成份變化的結(jié)果。
本發(fā)明研究證明攝食苯氧乙酸類降酯藥力平脂和HMG-CoA還原酶抑制劑類降酯藥普拉固有升高人血小板和紅細(xì)胞膜上EPA、DHA的含量，降低AA含量的作用。進(jìn)而利用由此產(chǎn)生的對(duì)與動(dòng)脈粥樣硬化因子、抗衰老因子如內(nèi)皮素-1(Endothelin-1，ET-1)、血栓烷B2(Thromboxane B2，TXB2)、6-酮-PGF1α(6-keto-PGF1α)以及對(duì)體內(nèi)過氧化脂質(zhì)代謝產(chǎn)物丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的不同作用，起了有益健康的作用，進(jìn)而起了抗衰老、預(yù)防老年癡呆癥的作用。
我國傳統(tǒng)的發(fā)酵制品紅曲含有抑制膽固醇產(chǎn)生的莫那克林K，即洛佛他汀，具有降脂、降糖和降壓的功效，同樣紅曲也能促進(jìn)人體自身EPA、DHA的合成。
隨著人們生活水平的不斷提高，我國人群的疾病譜發(fā)生了變化，心腦血管病的發(fā)病率不斷上升，居首位。本發(fā)明公開了力平脂和普拉固二種血脂調(diào)節(jié)劑能促進(jìn)自身EPA、DHA的合成，是苯氧乙酸類和HMG-GA還原酶抑制劑類藥物的新機(jī)制，有助于增加二類血脂調(diào)節(jié)劑的臨床應(yīng)用范疇。為人們提出了有效的防治動(dòng)脈粥樣硬化和提供合理應(yīng)用血脂調(diào)節(jié)劑的重要依據(jù)，有利于動(dòng)脈粥樣硬化的早期防治，早期控制，提高生命及生活質(zhì)量，特別是對(duì)老年人n-3脂肪酸的補(bǔ)充、記憶力衰退、早老性癡呆癥具有很好的治療價(jià)值、具有良好的社會(huì)效益與經(jīng)濟(jì)效益，值得臨床推廣應(yīng)用。
方法1、干預(yù)治療療程12周。應(yīng)用力平脂200mg(法國利搏?；谒帍S提供)，每日晚餐后一次口服。
2、服藥前后均查肝腎功能，全套血脂、血小板、紅細(xì)胞膜脂肪酸成分等。
結(jié)果1、治療前后肝腎功能均正常。
2、血脂(mmol/L)TGTC LDL-C HDL-C服藥前 2.54 6.03 2.43 1.06服藥后 0.88 5.04 2.04 1.533、血小板膜脂肪酸成分(％)C204C205C226 C160 C180服藥前7.98 0.32 0.79 15.958.90服藥后5.60 0.89 0.90 12.988.014、紅細(xì)胞膜脂肪酸成分(％)C204C205C226 C160 C180
服藥前 6.340.891.2319.04 9.98服藥后 5.021.221.9817.03 8.37
方法1、干預(yù)治療療程12周。應(yīng)用力平脂200mg(法國利搏福悔藥廠提供)，每日晚餐后一次口服。
2、服藥前后均查肝腎功能，全套血脂、血小板、紅細(xì)胞膜脂肪酸成分等。
結(jié)果1、治療前后肝腎功能均正常。
2、血脂(mmol/L)TGTC LDL-CHDL-C服藥前 7.90 5.673.91 0.01服藥后 2.08 4.032.45 1.023、血小板膜脂肪酸成分(％)C204 C205 C226 C160C180服藥前 4.560.340.4516.33 9.97服藥后 2.320.680.9013.26 9.014、紅細(xì)胞膜脂肪酸成分(％)C204C205 C226 C160C180服藥前5.49 0.43 0.79 19.01 9.99服藥后3.36 1.65 2.15 16.90 8.36
方法1、干預(yù)治療療程12周。應(yīng)用普拉固10mg(上海中美施貴寶藥廠)，每晚餐后一次口服。
2、服藥前后均查肝腎功能，全套血脂、血小板、紅細(xì)胞膜脂肪酸成分等。
結(jié)果1、治療前后肝腎功能均正常。
2、血脂(mmol/L)TG TC LDL-C HDL-C服藥前 1.498.9 2.580.88服藥后 1.026.871.680.993、血小板膜脂肪酸成分(％)C204C205 C226 C160C180服藥前 5.65 0.32 0.41 16.89 9.96服藥后 3.49 0.67 0.89 13.92 8.914、紅細(xì)胞膜脂肪酸成分(％)C204 C205 C226 C160C180服藥前 5.690.450.8919.32 11.45服藥后 3.021.522.6616.29 8.60
方法1、干預(yù)治療療程12周。應(yīng)用普拉固10mg(上海中美施貴寶藥廠)，每晚餐后一次口服。
2、服藥前后均查肝腎功能，全套血脂、血小板、紅細(xì)胞膜脂肪酸成分等。
結(jié)果1、治療前后肝腎功能均正常。
2、血脂(mmol/L)TG TC LDL-CHDL-C服藥前 7.48 6.783.79 0.87服藥后 3.02 5.562.63 0.983、血小板膜脂肪酸成分(％)C204 C205C226C160 C180
服藥前7.890.36 0.89 16.15 8.91服藥后6.040.78 0.98 13.45 8.314、紅細(xì)胞膜脂肪酸成分(％)C204 C205C226 C160C180服藥前5.86 0.79 0.99 19.93 11.03服藥后4.32 1.43 2.65 16.98 9.2權(quán)利要求
1.血脂調(diào)節(jié)劑作為促進(jìn)人體自身EPA、DHA合成的藥物的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于血脂調(diào)節(jié)劑作為制備抗衰老和預(yù)防老年癡呆癥的藥物中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于其中所述的血脂調(diào)節(jié)劑是指苯氧乙酸類、HMG-CoA還原酶抑制劑類血脂調(diào)節(jié)劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的應(yīng)用，其特征在于其中所述的血脂調(diào)節(jié)劑為力平脂、普拉固和紅曲。
全文摘要
本發(fā)明涉及血脂調(diào)節(jié)劑作為促進(jìn)人體自身EPA、DHA合成的藥物的應(yīng)用。本發(fā)明公開了調(diào)節(jié)血脂類藥物在調(diào)節(jié)血脂的同時(shí)可促進(jìn)人體自身EPA、DHA合成,升高紅細(xì)胞、血小板膜脂肪酸組成中的EPA、DHA含量,達(dá)到與服用大劑量魚油相同的效果,可用于抗衰老和老年癡呆癥的預(yù)防,起到促進(jìn)人體健康的作用。
文檔編號(hào)A61K31/21GK1380058SQ0110594
公開日2002年11月20日 申請(qǐng)日期2001年4月10日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月10日
發(fā)明者邵力正, 李肖蓉, 王建中, 曾繁輝, 仇波 申請(qǐng)人:上海體育運(yùn)動(dòng)技術(shù)學(xué)院