專利名稱：骨量降低病治療劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有EP4促效劑作為有效成分的骨量降低病治療劑。
更詳細(xì)地講，本發(fā)明涉及含有EP4促效劑作為有效成分的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、癌骨轉(zhuǎn)移、高鈣血癥、佩吉特氏病、骨缺損、骨壞死等骨量降低病的治療和/或預(yù)防劑，以及骨折后的骨形成、骨移植后的骨形成、人工關(guān)節(jié)手術(shù)后的骨形成、脊椎固定手術(shù)后的骨形成、其它骨重建手術(shù)后的骨形成等骨形成促進(jìn)和愈合促進(jìn)劑。
背景技術(shù)：
骨重建周期大約為120～150天，其中包括破骨細(xì)胞的骨吸收、造骨細(xì)胞的骨形成和休止期(稱為骨質(zhì)重建)。健康成人的骨吸收和骨形成受到嚴(yán)密控制，總骨量幾乎沒(méi)有變化。但在骨量降低病中，二者的平衡受到破壞，并引起骨質(zhì)量降低和骨組織老化。骨質(zhì)量的降低可達(dá)到20～30％，并易引起骨折，由此也可造成臥床不起、身體變形等，有時(shí)股關(guān)節(jié)骨折等某些部位的骨折還會(huì)導(dǎo)致死亡。
骨量降低病的代表性病癥為骨質(zhì)疏松癥。骨質(zhì)疏松癥是以骨質(zhì)量降低、骨組織老化為主要癥狀的全身性疾病。
目前認(rèn)為引起骨質(zhì)疏松癥的原因多種多樣，其中最多的是認(rèn)為由于年齡增長(zhǎng)，特別是女性閉經(jīng)后激素不平衡所致。目前的治療，主要采用雌激素、維生素D和降鈣素等藥劑。但使用激素有致癌(特別是乳腺癌、子宮癌等)的危險(xiǎn)，故不能稱其為安全的治療方法。
另外，作為第二代治療劑，一直在使用二膦酸鹽，但是存在一旦停止用藥就會(huì)引起復(fù)發(fā)的問(wèn)題。
再者，所有治療方法即使可以延緩骨質(zhì)疏松癥發(fā)展，但卻很難使減少了的骨質(zhì)再生。
另一方面，已知前列腺素E2(略作PGE2)是花生四烯酸級(jí)聯(lián)(arachidonic acid cascade)過(guò)程中的代謝產(chǎn)物。它具有多樣化的功能，例如細(xì)胞保護(hù)作用、子宮收縮、引起疼痛、消化道蠕動(dòng)促進(jìn)、提神作用、胃酸分泌抑制作用、降血壓作用、利尿作用等。
一般認(rèn)為PGE2參與骨吸收過(guò)程(J.Dent Res.59(10)，1635(1980)；Nature 266，6455(1977))。
此外，已有專利申請(qǐng)公開(kāi)了將PGE1和PGE2經(jīng)口或靜脈內(nèi)施用于狗時(shí)，肉眼或在顯微鏡下觀察到了骨組織生長(zhǎng)及骨量增加的情況，但其投藥量為1000μg/kg/天，這相對(duì)于PG是相當(dāng)高的劑量，所以難以確定它是否起到了本質(zhì)性作用。因此從投藥量考慮，它難以成為具有實(shí)用性的藥劑。
近年來(lái)的研究表明，PGE2受體中存在著分別起不同作用的亞型?，F(xiàn)在已知的亞型大致有四種，分別稱為EP1、EP2、EP3、EP4(NegishiM.et al，J.Lipid Mediators Cell Signaling 12，379-391(1995))。通過(guò)研究它們所起的作用，找出各自的且不與其它亞型受體相結(jié)合的化合物，就有可能得到副作用更小的藥劑。
最近，有關(guān)EP2促效劑對(duì)骨質(zhì)疏松癥有效(WO98/279769)，EP4拮抗劑對(duì)高骨吸收癥有效(GB2,330,307)的專利申請(qǐng)已有公開(kāi)。
歐洲專利公開(kāi)第855389號(hào)描述了通式(IA)所示的化合作為EP4受體結(jié)合劑是有效的。該專利雖然說(shuō)明了其觀點(diǎn)，即，通式(IA)所示的化合物對(duì)于骨形成異常的治療和預(yù)防是有效的，但是并沒(méi)有記述或說(shuō)明EP4促效劑或拮抗劑對(duì)骨形成起什么樣的作用。
如上所述，雖然提出PGE2或PGE1與骨代謝有關(guān)，并指出實(shí)際上與其中的亞型有關(guān)，但具體是哪種亞型的拮抗劑或促效劑有效，卻諸說(shuō)不一、模糊不清。
發(fā)明公開(kāi)為了找到具有骨形成促進(jìn)作用的骨量降低治療劑，本發(fā)明人等合成了種種選擇性結(jié)合各種PGE亞型的化合物，并分別對(duì)它們進(jìn)行了研究，以找到具有骨形成促進(jìn)作用的化合物。
結(jié)果表明，過(guò)去一般認(rèn)為EP4拮抗劑可以抑制骨吸收，所以對(duì)骨量降低病有效，而EP4促效劑可增加骨吸收并使骨量減少，所以應(yīng)對(duì)骨量降低病是無(wú)效的，但本發(fā)明卻意外地發(fā)現(xiàn)了低劑量的EP4促效劑即可使骨量和骨密度增加，從而完成了本發(fā)明。
另外，作為代表性的EP4促效劑，后述式(IA)～(IJ)所示的化合物，通過(guò)實(shí)驗(yàn)確認(rèn)具有EP4促效劑活性。
本發(fā)明涉及含有EP4促效劑作為有效成分的骨量降低病治療和/或預(yù)防劑。
本發(fā)明首次確認(rèn)了EP4促效劑具有骨量增加、骨密度增加、骨形成促進(jìn)的作用。
本發(fā)明中的骨量降低病是指伴隨骨密度降低、骨組織老化等癥狀并引起骨量降低的疾病。骨量降低病的具體例子為，1)原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥(例如，年齡增長(zhǎng)引起的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、閉經(jīng)引起的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、摘除卵巢手術(shù)引起的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥等)，2)繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥(例如，糖皮質(zhì)激素誘發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)性骨質(zhì)疏松癥、固定誘發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、肝素誘發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、免疫抑制誘發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、由腎功能衰竭引發(fā)的骨質(zhì)疏松癥、炎癥性骨質(zhì)疏松癥、由庫(kù)欣氏綜合癥引起的骨質(zhì)疏松癥、風(fēng)濕性骨質(zhì)疏松癥等)，3)癌骨轉(zhuǎn)移、高鈣血癥、佩吉特氏病，骨缺損(齒槽骨缺損、下鄂骨缺損、小兒突發(fā)性骨缺損等)、骨壞死等骨病。
除了治療上述疾病以外，本發(fā)明還包括骨科手術(shù)后的骨形成(例如，骨折后的骨形成、骨移植后的骨形成、人工關(guān)節(jié)手術(shù)后的骨形成、脊椎固定手術(shù)后的骨形成、其它骨重建手術(shù)后的骨形成等)促進(jìn)和愈合促進(jìn)劑，同時(shí)還包括骨移植替代療法。
本發(fā)明中的EP4促效劑是指在PGE2受體內(nèi)，只與亞型EP4受體選擇性結(jié)合，而不與或幾乎不與其它亞型EP1、EP2、EP3等結(jié)合，并具有促效劑作用的所有化合物。
因此，本發(fā)明不僅包括目前已知的EP4促效劑，而且還包括今后新發(fā)現(xiàn)的EP4促效劑，并且，不僅具有PG骨架的化合物，而且不具備PG骨架的EP4促效劑也可以達(dá)到本發(fā)明的目的。
由于這些化合物選擇性結(jié)合EP4，所以沒(méi)有由EP1引起的疼痛、由EP2引起的子宮松弛作用、由EP3引起的子宮收縮等作用，是對(duì)上述肌體行為沒(méi)有影響的藥劑。
后述的實(shí)驗(yàn)表明，EP4促效劑具有強(qiáng)力的骨形成促進(jìn)作用，因此，它對(duì)包括骨質(zhì)疏松癥在內(nèi)的上述各種骨量降低病是有效的。
本發(fā)明中所用化合物的優(yōu)選方案是選自由下述通式(IA)～(ID)所示化合物組成的EP4促效劑的化合物。
通式(IA)所示的化合物 (式中，R1A表示羥基、C1～4烷氧基或NR6AR7A基(基團(tuán)中，R6A和R7A是分別表示氫原子或C1～4烷基)；R2A表示氫原子或羥基；R3A表示(i)C1～8烷基、C2～8鏈烯基、或C2～8炔基，(ii)苯基或C3～7環(huán)烷基，(iii)用苯基或C3～7環(huán)烷基取代的C1～8烷基、C2～8鏈烯基或C2～8炔基(其中，當(dāng)R2A為氫原子時(shí)，(i)和(ii)的烷基、鏈烯基、炔基也可以被一個(gè)羥基取代)；符號(hào) 表示雙鍵或單鍵。其中，包括8-表體平衡混合物)通式(IB)所示的化合物 (式中，R1B表示羥基、C1～6烷氧基、或NR6BR7B基(基團(tuán)中，R6B和R7B分別表示氫原子或C1～6烷基)；R2B表示氫原子或羥基；R3B表示單鍵或C1～6亞烷基；R4B表示(i)用1～3個(gè)C1～6烷氧基或鹵素原子取代的C1～8烷基、C2～8鏈烯基、或C2～8炔基，
(ii)苯氧基或C3～7環(huán)烷氧基，(iii)呋喃基、呋喃氧基、噻吩基、噻吩氧基、萘基、萘氧基、鄰苯二甲?；?phthalanyl)、或鄰苯二甲酰氧基(phthalanyloxy)，(iv)用1～3個(gè)下述基團(tuán)取代的苯基、苯氧基、C3～7環(huán)烷基、或C3～7環(huán)烷氧基，C1～6烷基、C2～6鏈烯基、C2～6炔基、C1～6烷氧基、C1～6烷氧基-C1～6烷基、C1～6烷氧基-C1～6烷氧基、C2～6鏈烯氧基-C1～6烷基、用1～3個(gè)羥基取代的C1～6烷基、用1～3個(gè)鹵素原子取代的C1～6烷基、C1～6烷硫基、C1～6烷硫基-C1～6烷基、C1～6烷硫基-C1～6烷氧基、C2～6鏈烯硫基-C1～6烷基、C1～6烷基磺?；u素、三鹵代甲基、氰基、硝基、氨基、羥基、C3～7環(huán)烷基、C3～7環(huán)烷氧基、C3～7環(huán)烷基-C1～6烷基、C3～7環(huán)烷氧基-C1～6烷基、苯基、
苯氧基、苯基-C1～6烷基、苯基-C2～6鏈烯基、苯基-C2～6炔基、苯氧基-C1～6烷基、苯氧基-C2～6鏈烯基、苯氧基-C2～6炔基、呋喃基、呋喃氧基、呋喃基-C1～6烷基、呋喃氧基-C1～6烷基、噻吩基、噻吩氧基、噻吩基-C1～6烷基、或噻吩氧基-C1～6烷基、(上述的苯基、呋喃基、噻吩基、環(huán)烷基也可以被1～3個(gè)C1～6烷基、C1～6烷氧基、C1～6烷氧基-C1～6烷基、硝基、鹵素、三鹵代甲基、氨基、或羥基取代)；或(v)用1～3個(gè)下述基團(tuán)取代的呋喃基、呋喃氧基、噻吩基、噻吩氧基、萘基、萘氧基、鄰苯二甲?；?、或鄰苯二甲酰氧基，C1～6烷基、C2～6鏈烯基、C2～6炔基、C1～6烷氧基、C1～6烷氧基-C1～6烷基、C1～6烷氧基-C1～6烷氧基、C2～6鏈烯氧基-C1～6烷基、用1～3個(gè)羥基取代的C1～6烷基、用1～3個(gè)鹵素原子取代的C1～6烷基、C1～6烷硫基、
C1～6烷硫基-C1～6烷基、C1～6烷硫基-C1～6烷氧基、C2～6鏈烯硫基-C1～6烷基、C1～6烷基磺?；?、鹵素、三鹵代甲基、氰基、硝基、氨基、羥基、C3～7環(huán)烷基、C3～7環(huán)烷氧基、C3～7環(huán)烷基-C1～6烷基、C3～7環(huán)烷氧基-C1～6烷基、苯基、苯氧基、苯基-C1～6烷基、苯基-C2～6鏈烯基、苯基-C2～6炔基、苯氧基-C1～6烷基、苯氧基-C2～6鏈烯基、苯氧基-C2～6炔基、呋喃基、呋喃氧基、呋喃基-C1～6烷基、呋喃氧基-C1～6烷基、噻吩基、噻吩氧基、噻吩基-C1～6烷基、或噻吩氧基-C1～6烷基、(上述苯基、呋喃基、噻吩基、環(huán)烷基也可以被1～3個(gè)C1～6烷基、C1～6烷氧基、C1～6烷氧基-C1～6烷基、硝基、鹵素、三鹵代甲基、氨基、或羥基取代)；R5B表示氫原子或C1～6烷基；符號(hào) 表示雙鍵或單鍵；其中，當(dāng)R2B為氫原子時(shí)，R3B表示的C1～6亞烷基也可以被一個(gè)羥基取代，并包括8-表體平衡混合物)通式(IC)表示的化合物 (式中，R1C表示羥基、C1～6烷氧基、或NR6CR7C基(基團(tuán)中，R6C和R7C分別表示氫或C1～4烷基)；R2C表示氧代基、鹵素、或O-COR8C基(基團(tuán)中，R8C表示C1～4烷基、苯基、或苯基(C1～4烷基))；R3C表示氫或羥基；R4Ca和R4Cb分別獨(dú)立地表示氫或C1～4烷基；R5C表示用以下基團(tuán)取代的苯基，(i)1～3個(gè)的C1～4烷氧基-C1～4烷基、C2～4鏈烯氧基-C1～4烷基、C2～4炔氧基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷氧基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷基(C1～4烷氧基)-C1～4烷基、苯氧基-C1～4烷基、苯基-C1～4烷氧基-C1～4烷基、C1～4烷硫基-C1～4烷基、C2～4鏈烯硫基-C1～4烷基、C2～4炔硫基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷硫基-C1～4烷基、
C3～7環(huán)烷基(C1～4烷硫基)-C1～4烷基、苯硫基-C1～4烷基、或苯基-C1～4烷硫基-C1～4烷基，(ii)C1～4烷氧基-C1～4烷基和C1～4烷基、C1～4烷氧基-C1～4烷基和C1～4烷氧基、C1～4烷氧基-C1～4烷基和羥基、C1～4烷氧基-C1～4烷基和鹵素、C1～4烷硫基-C1～4烷基和C1～4烷基、C1～4烷硫基-C1～4烷基和C1～4烷氧基、C1～4烷硫基-C1～4烷基和羥基、或C1～4烷硫基-C1～4烷基和鹵素，(iii)鹵代烷基或羥基-C1～4烷基，或(iv)C1～4烷基和羥基；符號(hào) 表示單鍵或雙鍵；其中，R2C為O-COR8C基時(shí)，8-9位表示雙鍵)通式(ID)表示的化合物 (式中，AD表示C2～8亞烷基、C2～8亞鏈烯基、C1～4亞烷基-亞苯基、或C2～4亞鏈烯基-亞苯基；R1D表示羥基、C1～6烷氧基、C1～6烷氧基-C1～6烷氧基、HO-C1～6烷氧基、或NR6DR7D基(基團(tuán)中，R6D和R7D分別表示氫原子或C1～4烷基)；R2D表示氧代基、鹵素、或R8D-COO-基(基團(tuán)中，R8D表示氫原子、C1～4烷基、苯基、苯基(C1～4烷基)、C1～4烷氧基、HOOC-C1～4烷基、C1～4烷氧基-羰基-C1～4烷基、HOOC-C2～4鏈烯基、或C1～4烷氧基-羰基-C2～4鏈烯基)；R3D表示氫原子或羥基；R4D表示C1～4亞烷基；
R5D表示用以下基團(tuán)取代的苯基，(i)1～3個(gè)的C1～4烷氧基-C1～4烷基、C2～4鏈烯氧基-C1～4烷基、C2～4炔氧基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷氧基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷基(C1～4烷氧基)-C1～4烷基、苯氧基-C1～4烷基、苯基-C1～4烷氧基-C1～4烷基、C1～4烷硫基-C1～4烷基、C2～4鏈烯硫基-C1～4烷基、C2～4炔硫基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷硫基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷基(C1～4烷硫基)-C1～4烷基、苯硫基-C1～4烷基、或苯基-C1～4烷硫基-C1～4烷基，(ii)C1～4烷氧基-C1～4烷基和C1～4烷基、C1～4烷氧基-C1～4烷基和C1～4烷氧基、C1～4烷氧基-C1～4烷基和羥基、C1～4烷氧基-C1～4烷基和鹵素、C1～4烷硫基-C1～4烷基和C1～4烷基、C1～4烷硫基-C1～4烷基和C1～4烷氧基、C1～4烷硫基-C1～4烷基和羥基、或C1～4烷硫基-C1～4烷基和鹵素，(iii)鹵代-C1～4烷基或羥基-C1～4烷基，或(iv)C1～4烷基和羥基；符號(hào) 表示單鍵或雙鍵；其中，當(dāng)R2D為式R8D-COO-基時(shí)，R1D表示C1～6烷氧基、C1～6烷氧基-C1～6烷氧基、或HO-C1～6烷氧基，8-9位表示雙鍵)作為本發(fā)明所用的化合物中更優(yōu)選方案的EP4促效劑，例如以下化合物(其中，各式下方的括號(hào)內(nèi)描述的是記載該化合物的專利公報(bào)說(shuō)明書(shū)中的實(shí)施例序號(hào))。
例如，式(IE) (WO00/03980號(hào)，實(shí)施例3)式(IF) (EP985663號(hào)，實(shí)施例2)，式(IG) (PCT/JP99/04934號(hào)，實(shí)施例8-6)，式(IH) (PCT/JP99/04934號(hào)，實(shí)施例2)，和式(IJ) (PCT/JP99/04934號(hào)，實(shí)施例2-11)所示的前列腺素衍生物、其烷基酯、其非毒性鹽和它們的環(huán)糊精籠形包合物。[酯]式(IA)～(IJ)所示的本化合物，可以通過(guò)公知的方法轉(zhuǎn)化成酯。通過(guò)轉(zhuǎn)化成酯的形式，可提高化合物的穩(wěn)定性和吸收性，所以作為藥品將會(huì)更有效。優(yōu)選烷基酯、更優(yōu)選C1～4烷基酯、最優(yōu)選甲基酯。[鹽]式(IA)～(IJ)所示的本化合物，可以通過(guò)公知的方法轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的鹽。優(yōu)選無(wú)毒的水溶性鹽。適宜的鹽有堿金屬(鉀、鈉等)鹽、堿土金屬(鈣、鎂等)鹽、銨鹽、可藥用有機(jī)胺(四甲基銨、三乙基胺、甲基胺、二甲基胺、環(huán)戊基胺、苯甲基胺、苯乙基胺、哌啶、乙醇胺、二乙醇胺、三(羥甲基)胺、賴氨酸、精氨酸、N-甲基-D-葡萄糖胺等)的鹽。另外，式(1A)～(IJ)所示的本化合物還可以用工作的方法轉(zhuǎn)化成水合物。[籠形包合物]式(IA)～(IJ)所示的本化合物及其酯，可以采用α-、β-或γ-環(huán)糊精或它們的混合物，通過(guò)GB1,351,238號(hào)或GB1,419,221號(hào)說(shuō)明書(shū)中所述的方法轉(zhuǎn)化成環(huán)糊精籠形包合物。通過(guò)轉(zhuǎn)換成環(huán)糊精籠形包合物，可增加穩(wěn)定性并提高水溶性，所以適合作為藥劑使用。[本化合物的制備方法]通式(IA)～(IJ)所示的化合物與其制備方法均記載在下述各申請(qǐng)中。
通式(IA)所示的化合物歐洲專利公開(kāi)號(hào)855389號(hào)通式(IB)所示的化合物歐洲專利公開(kāi)號(hào)985663號(hào)通式(IC)所示的化合物國(guó)際專利公開(kāi)號(hào)WO00/03980號(hào)通式(ID)所示的化合物國(guó)際專利申請(qǐng)?zhí)朠CT/JP99/04934號(hào)式(IE)所示的化合物國(guó)際專利公開(kāi)號(hào)WO00/03980號(hào)式(IF)所示的化合物歐洲專利公開(kāi)號(hào)985663號(hào)式(IG)所示的化合物國(guó)際專利申請(qǐng)?zhí)朠CT/JP99/04934號(hào)式(IH)所示的化合物國(guó)際專利申請(qǐng)?zhí)朠CT/JP99/04934號(hào)式(IJ)所示的化合物國(guó)際專利申請(qǐng)?zhí)朠CT/JP99/04934號(hào)實(shí)施本發(fā)明的最佳方案以下，結(jié)合參考例和實(shí)施例詳細(xì)敘述本發(fā)明，但本發(fā)明并不局限在這些范圍。實(shí)施例1骨形成促進(jìn)作用實(shí)驗(yàn)使用6月齡小獵犬/CSK系狗，3～6只為一組。
把(11α，15α，13E)-9-氧代-11，15-二羥基-16-(3-甲氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲-5-硫代前列腺素-13-烯酸甲酯(式(IE)所示化合物的甲酯)的α-環(huán)糊精籠形包合物(α-環(huán)糊精籠形包合物中的有效成分含量為25％W/W)、(11α，15α，13E)-9-氧代-11，15-二羥基-16-(3-甲氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲-3，7-二硫代前列腺素-13-烯酸(式(IF)所示的化合物)、(9β，11α，15α，5Z，13E)-9-氯代-11，15-二羥基-16-(3-乙氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲前列腺素-5，13-二烯酸(式(IG)所示的化合物)、(11α，15α，13E)-9-氧代-11，15-二羥基-16-(3-甲氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲前列腺素-13-烯酸(式(IH)所示化合物的甲酯)和(11α，15α，5Z，13E)-9-氧代-11，15-二羥基-16-(3-乙氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲前列腺素-5，13-二烯酸(式(IJ)所示的化合物)溶解在生理食鹽水中，有效給藥量分別為2、5、10和25μg/kg/天，一天24小時(shí)，連續(xù)用藥4周。給藥是用滯留導(dǎo)管并通過(guò)大腿靜脈進(jìn)行，給藥速度為0.2ml/kg/小時(shí)。對(duì)于對(duì)照組，使用等量的生理食鹽水。給藥結(jié)束后，屠宰各組動(dòng)物并進(jìn)行解剖檢查。(1)測(cè)定骨面積用10％福爾馬林緩沖溶液將取出的大腿骨固定后，在距滑車槽25mm的中央部位，垂直于骨軸將大腿骨切成10mm寬的圓片。在一定距離對(duì)接近骨端部的一面進(jìn)行拍照，輸入到計(jì)算機(jī)中，通過(guò)圖像解析測(cè)定骨面積。結(jié)果如以下表1所示。
表1

***p＜0.001(表示在Dunnett檢驗(yàn)中的明顯差異)討論測(cè)定結(jié)果表明，與未處置對(duì)照組相比，式(IE)所示的化合物的用量在10μg/kg/天以上時(shí)，使骨面積增加了2.8倍。特別是用量為25μg/kg/天時(shí)，骨面積增加是未處置對(duì)照組的7倍以上。
與未處置對(duì)照組相比，式(IF)、(IH)和(IJ)所示的化合物在用量為5μg/kg/天時(shí)，也可使骨面積增加2.8～5.3倍。并且，式(IG)所示化合物在用量為25μg/kg/天時(shí)，骨面積增加是未處置對(duì)照組的4.2倍。(2)測(cè)定骨密度從側(cè)面對(duì)(1)中所用的1cm寬的試樣進(jìn)行X光拍照，然后輸入到計(jì)算機(jī)中，測(cè)定一定寬度范圍內(nèi)單位面積的放射線量，求出骨密度(微型聚焦X射線放大攝影系統(tǒng)μFX-1000(富士膠卷))。結(jié)果如表2所示。
表2

***p＜0.001(表示在Dunnett檢驗(yàn)中的明顯差異)討論測(cè)定結(jié)果表明，式(IE)所示的本化合物的用量在10和25μg/kg/天時(shí)，骨密度增加分別是未處置組的1.5倍和1.7倍。由此可見(jiàn)，作為EP4促效劑的本化合物在用量為10μg/kg/天以上時(shí)，可明顯增加骨面積和骨密度，并具有骨形成促進(jìn)作用。實(shí)施例2EP4促效劑活性的測(cè)定通過(guò)以下實(shí)驗(yàn)確認(rèn)了式(IA)～(IJ)所示化合物可與EP4結(jié)合，并呈現(xiàn)出促效劑活性。
使用表達(dá)EP4受體的CHO細(xì)胞，測(cè)定式(IA)～(IJ)所示本化合物的促效劑活性(參照FEBS Letters 364，339，(1995)，在本發(fā)明中作了部分改進(jìn))。測(cè)定結(jié)果表明，所有化合物均可使cAMP上升，因此是EP4促效劑。實(shí)施例3骨形成促進(jìn)作用實(shí)驗(yàn)方法使用11周齡SD系雌性大鼠(平均重量為271g)，8只為一組。用戊巴比妥麻醉后，切開(kāi)鼠的側(cè)腹部，摘除卵巢，然后縫合。對(duì)于模擬組，只切開(kāi)并縫合，不摘除卵巢。
將(11α，15α，13E)-9-氧代-11，15-二羥基-16-(3-甲氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲-5-硫代前列腺素-13-烯酸甲酯(式(IE)所示化合物的甲酯)的α-環(huán)糊精籠形包合化合物(α-環(huán)糊精籠形包合物中的有效成分含量為25％W/W)溶解在生理鹽水中。從卵巢摘除手術(shù)后第6天開(kāi)始，用上述制劑在雌鼠的頸背部皮下給藥，每隔8小時(shí)一次，一天三次，每次30μg/5ml/kg給藥2個(gè)月。對(duì)模擬組和對(duì)照組使用生理鹽水。試驗(yàn)結(jié)束后，屠宰各組動(dòng)物并剖檢。用末梢骨骨密度測(cè)定裝置(XCT-960A，Norland Stolatec公司)測(cè)定左大腿骨的海綿骨區(qū)域的骨密度。結(jié)果如下表所示。
表3

###p＜0.001vs模擬組***p＜0.001vs對(duì)照組均進(jìn)行T檢驗(yàn)討論由表3可知，與對(duì)照組(未給藥組)相比，本化合給藥組明顯可增加骨密度。[毒性]可確認(rèn)式(IE)所示本化合物的毒性相當(dāng)?shù)停鳛樗幤肥褂檬鞘职踩?。例如，向大鼠靜脈內(nèi)給藥時(shí)，式(IE)所示本化合物的甲酯的最大耐用量可達(dá)30ml/kg動(dòng)物體重以上。
產(chǎn)業(yè)上的實(shí)用性[作為藥品的適用性]本發(fā)明中所用的EP4促效劑具有骨形成促進(jìn)作用，故可有效治療和/或預(yù)防骨量降低病。這里，骨量降低病是指伴隨骨密度降低、骨組織老化等癥狀并引起骨量降低的疾病。例如，1)原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥(例如，年齡增長(zhǎng)引起的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、閉經(jīng)引起的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、卵巢摘除手術(shù)引起的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥等)，2)繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥(例如，糖皮質(zhì)激素誘發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)性骨質(zhì)疏松癥、固定誘發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、肝素誘發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、免疫抑制誘發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、腎功能衰竭引起的骨質(zhì)疏松癥、炎癥性骨質(zhì)疏松癥、庫(kù)欣氏綜合癥引起的骨質(zhì)疏松癥、風(fēng)濕性骨質(zhì)疏松癥等)，3)癌骨轉(zhuǎn)移、高鈣血癥、佩吉特氏病、骨缺損(齒槽骨缺損、下顎骨缺損、小兒突發(fā)性骨缺損等)、骨壞死等骨病。
除了治療上述骨病以外，本發(fā)明還包括骨科手術(shù)后的骨形成(例如骨折后的骨形成、骨移植后的骨形成、人工關(guān)節(jié)手術(shù)后的骨形成、脊椎固定手術(shù)后的骨形成、其它骨重建手術(shù)后的骨形成等)促進(jìn)及愈合促進(jìn)劑，也包括骨移植替代療法。
為達(dá)到上述目的，本發(fā)明中使用的EP4促效劑、其酯、其非毒性鹽、以及它們的環(huán)糊精籠形包合物，通常以口服或非口服方式局部用藥。并且通過(guò)制成前藥形式，可使其具有無(wú)刺激性，以及吸收及穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。
給藥量隨年齡、體重、癥狀、治療效果、給藥方法、處理時(shí)間等不同而有所差異，通常，每個(gè)成人以一次的劑量范圍是1μg～100mg，一天一次至數(shù)次口服給藥；或者以一次的劑量范圍是0.1μg～10mg，優(yōu)選0.2mg～5mg的范圍，一天一次至數(shù)次非口服給藥(優(yōu)選透皮給藥、皮下給藥、靜脈內(nèi)給藥)。
當(dāng)然，如上所述，給藥量應(yīng)隨各種條件而變化，因此有時(shí)給藥量可少于上述給藥量范圍，有時(shí)也需要超過(guò)上述給藥量范圍。
使用本發(fā)明化合物時(shí)，可以采用口服的固體組合物、液體組合物和其它組合物，非口服的注射劑，軟膏等外用制劑，貼于皮膚的貼劑，以及栓劑等形式。
口服用固體組合物包括片劑、丸劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑等。
膠囊劑包括硬膠囊和軟膠囊。
在這些固體組合物中，一種或一種以上的活性物質(zhì)與至少一種惰性稀釋劑，例如乳糖、甘露糖醇、甘露醇、葡萄糖、羥丙基纖維素、微晶纖維素、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、偏硅酸鋁酸鎂相混合。
組合物中按照常規(guī)方法還可以添加除惰性稀釋劑以外的其它添加物，例如可以含有硬脂酸鎂等潤(rùn)滑劑、纖維素乙醇酸鈣等崩解劑、谷氨酸或天冬氨酸等助溶劑。片劑或丸劑根據(jù)需要也可以使用白糖、明膠、羥丙基纖維素、羥丙基纖維素苯二甲酸酯等胃溶性或腸溶性物質(zhì)的薄膜包覆，并可具有2層以上的被膜層。進(jìn)而，也包括使用明膠等可吸收物質(zhì)的膠囊。
口服液體組合物含有可藥用乳濁劑、溶液劑、糖漿和酏劑等。在這種液體組合物中，一種或一種以上的活性物質(zhì)含在通常使用的惰性稀釋劑(例如純水、乙醇)中。除惰性稀釋劑以外，該組合物內(nèi)還可以含有濕潤(rùn)劑、懸浮劑等輔助劑，甜味劑，調(diào)味劑，芳香劑，防腐劑。
口服的其它組合物含有一種或一種以上的活性物質(zhì)，并用其本身已知的方法配制成噴霧劑。該組合物中，除了惰性稀釋劑以外，還可以含有亞硫酸氫鈉等穩(wěn)定劑和可賦予等滲性的穩(wěn)定化劑，氯化鈉、檸檬酸鈉或檸檬酸等等滲劑。在美國(guó)專利第2,868,691號(hào)及美國(guó)專利第3,095,355號(hào)說(shuō)明書(shū)中詳細(xì)說(shuō)明了噴霧劑的制備方法。
本發(fā)明的非口服注射劑中含有無(wú)菌的水性或非水性溶劑、懸浮劑、乳濁劑。水性溶劑、懸浮劑包括有注射用蒸餾水和生理鹽水。作為非水性溶液劑、懸浮劑，例如丙二醇、聚乙二醇、橄欖油等植物油、乙醇等醇類、聚山梨酸酯80(注冊(cè)商標(biāo))等。在這些組合物中還可以含有防腐劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑、分散劑、穩(wěn)定化劑、助溶劑(例如，谷氨酸、天冬氨酸等)等輔助劑。上述成分采用過(guò)濾器過(guò)濾滅菌、配合使用滅菌劑或輻射滅菌等方法進(jìn)行滅菌。這些注射劑也可以先制成無(wú)菌的固體組合物，并可在臨用前將其溶解在經(jīng)無(wú)菌化處理或無(wú)菌的注射用蒸餾水或其它溶劑中使用。
非口服形式的其它組合物含有一種或一種以上的活性物質(zhì)，并以常規(guī)方法制成外用液劑、軟膏、涂抹劑、貼劑、栓劑等。
軟膏中除白凡士林等基劑外，還可以含有pH調(diào)節(jié)劑、表面活性劑、防腐劑、乳化劑、分散劑、穩(wěn)定化劑、助溶劑等。制劑例1凍干制劑用常規(guī)方法將下述各成分混合，然后用常規(guī)方法對(duì)溶液進(jìn)行滅菌處理，取1ml分別填充在小玻璃瓶中，然后采用常規(guī)方法凍干，即可得到100支每瓶?jī)?nèi)含有0.2mg活性成分的注射劑。(11α，15α，13E)-9-氧代-11，15-二羥基-16-(3-甲氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲-5-硫代前列腺素-13-烯酸甲酯·α-環(huán)糊精 ……………80mg(含量20mg)甘露醇 ………………5g蒸餾水 ……………100ml制劑例2軟膏用常規(guī)方法將下述成分混合，取10g分別填充在管中，即可得到100支每管內(nèi)含有0.2mg活性成分的軟膏劑。(11α，15α，13E)-9-氧代-11，15-二羥基-16-(3-甲氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲-5-硫代前列腺素-13-烯酸甲酯·α-環(huán)糊精 ……………800mg(含量200mg)白凡士林………………1kg
權(quán)利要求
1.一種骨量降低病的治療和/或預(yù)防劑，它含有EP4促效劑作為有效成分。
2.權(quán)利要求1所述的治療和/或預(yù)防劑，其中，骨量降低病為原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥。
3.權(quán)利要求2所述的治療和/或預(yù)防劑，其中，原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥為年令增長(zhǎng)引起的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、閉經(jīng)引起的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、卵巢摘除手術(shù)引起的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥。
4.權(quán)利要求1所述的治療和/或預(yù)防劑，其中，骨量降低病為繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥。
5.權(quán)利要求4所述的治療和/或預(yù)防劑，其中，繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥為糖皮質(zhì)激素誘發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)性骨質(zhì)疏松癥、固定誘發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、肝素誘發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、免疫抑制誘發(fā)性骨質(zhì)疏松癥，腎功能衰竭引發(fā)的骨質(zhì)疏松癥、炎癥性骨質(zhì)疏松癥、庫(kù)欣氏綜合癥引起的骨質(zhì)疏松癥、或風(fēng)濕性骨質(zhì)疏癥。
6.權(quán)利要求1所述的治療和/或預(yù)防劑，其中，骨量降低病為癌骨轉(zhuǎn)移、高鈣血癥、佩吉特氏病、骨缺損、骨壞死。
7.權(quán)利要求1或6所述的治療和/或預(yù)防劑，其中，骨量降低病為齒槽骨缺損、下鄂骨缺損、小兒突發(fā)性骨缺損。
8.權(quán)利要求1所述的治療劑，其中，骨量降低病的治療為骨折后的骨形成、骨移植后的骨形成、人工關(guān)節(jié)手術(shù)后的骨形成、脊柱固定手術(shù)后的骨形成、骨重建手術(shù)后的骨形成、骨移植替代療法。
9.權(quán)利要求1所述的骨量降低病的治療和/或預(yù)防劑，其中，EP4促效劑是具有前列腺素骨架的化合物。
10.權(quán)利要求9所述的治療和/或預(yù)防劑，其中，具有前列腺素骨架的化合物是選自通式(IA)所示化合物組的化合物、其非毒性鹽或其環(huán)糊精籠形包合物； 式中，R1A表示羥基、C1～4烷氧基、或NR6AR7A基(基團(tuán)中，R6A和R7A分別表示氫原子或C1～4烷基)，R2A表示氫原子或羥基，R3A表示(i)C1～8烷基、C2～8鏈烯基、或C2～8炔基，(ii)苯基或C3～7環(huán)烷基，(iii)用苯基或C3～7環(huán)烷基取代的C1～8烷基、C2～8鏈烯基、或C2～8炔基(其中，當(dāng)R2A為氫原子時(shí)，(i)和(ii)的烷基、鏈烯基、炔基也可以被一個(gè)羥基取代)，符號(hào) 表示雙鍵或單鍵，其中，包括8-表體平衡混合物。
11.權(quán)利要求9所述的治療和/或預(yù)防劑，其中，具有前列腺素骨架的化合物是通式(IB)所示的化合物、其非毒性鹽或其環(huán)糊精籠形包合物； 式中，R1B表示羥基，C1～6烷氧基、或NR6BR7B基(基團(tuán)中，R6B和R7B是分別表示氫原子或C1～6烷基)，R2B表示氫原子或羥基，R3B表示單鍵或C1～6亞烷基，R4B表示(i)用1～3個(gè)C1～6烷氧基或鹵素原子取代的C1～8烷基、C2～8鏈烯基、或C2～8炔基，(ii)苯氧基或C3～7環(huán)烷氧基，(iii)呋喃基、呋喃氧基、噻吩基、噻吩氧基、萘基、萘氧基、鄰苯二甲?；蜞彵蕉柞Ｑ趸?iv)用1～3個(gè)下述基團(tuán)取代的苯基、苯氧基、C3～7環(huán)烷基、或C3～7環(huán)烷氧基，C1～6烷基、C2～6鏈烯基、C2～6炔基、C1～6烷氧基、C1～6烷氧基-C1～6烷基、C1～6烷氧基-C1～6烷氧基、C2～6鏈烯氧基-C1～6烷基、用1～3個(gè)羥基取代的C1～6烷基、用1～3個(gè)鹵素原子取代的C1～6烷基、C1～6烷硫基、C1～6烷硫基-C1～6烷基、C1～6烷硫基-C1～6烷氧基、C2～6鏈烯硫基-C1～6烷基、C1～6烷基磺酰基、鹵素、三鹵代甲基、氰基、硝基、氨基、羥基、C3～7環(huán)烷基、C3～7環(huán)烷氧基、C3～7環(huán)烷基-C1～6烷基、C3～7環(huán)烷氧基-C1～6烷基、苯基、苯氧基、苯基-C1～6烷基、苯基-C2～6鏈烯基、苯基-C2～6炔基、苯氧基-C1～6烷基、苯氧基-C2～6鏈烯基、苯氧基-C2～6炔基、呋喃基、呋喃氧基、呋喃基-C1～6烷基、呋喃氧基-C1～6烷基、噻吩基、噻吩氧基、噻吩基-C1～6烷基、或噻吩氧基-C1～6烷基、上述苯基、呋喃基、噻吩基、環(huán)烷基也可以被1～3個(gè)C1～6烷基、C1～6烷氧基、C1～6烷氧基-C1～6烷基、硝基、鹵素、三鹵代甲基、氨基、或羥基取代，或(v)用1～3個(gè)下述基團(tuán)取代的呋喃基、呋喃氧基、噻吩基、噻吩氧基、萘基、萘氧基、鄰苯二甲?；?、或鄰苯二甲酰氧基，C1～6烷基、C2～6鏈烯基、C2～6炔基、C1～6烷氧基、C1～6烷氧基-C1～6烷基、C1～6烷氧基-C1～6烷氧基、C2～6鏈烯氧基-C1～6烷基、用1～3個(gè)羥基取代的C1～6烷基、用1～3個(gè)鹵素原子取代的C1～6烷基、C1～6烷硫基、C1～6烷硫基-C1～6烷基、C1～6烷硫基-C1～6烷氧基、C2～6鏈烯硫基-C1～6烷基、C1～6烷基磺?；?、鹵素、三鹵代甲基、氰基、硝基、氨基、羥基、C3～7環(huán)烷基、C3～7環(huán)烷氧基、C3～7環(huán)烷基-C1～6烷基、C3～7環(huán)烷氧基-C1～6烷基、苯基、苯氧基、苯基-C1～6烷基、苯基-C2～6鏈烯基、苯基-C2～6炔基、苯氧基-C1～6烷基、苯氧基-C2～6鏈烯基、苯氧基-C2～6炔基、呋喃基、呋喃氧基、呋喃基-C1～6烷基、呋喃氧基-C1～6烷基、噻吩基、噻吩氧基、噻吩基-C1～6烷基、或噻吩氧基-C1～6烷基、上述苯基、呋喃基、噻吩基、環(huán)烷基也可以被1～3個(gè)C1～6烷基、C1～6烷氧基、C1～6烷氧基-C1～6烷基、硝基、鹵素、三鹵代甲基、氨基、或羥基取代，R5B表示氫原子或C1～6烷基，符號(hào) 表示雙鍵或單鍵，其中，R2B為氫原子時(shí)，R3B表示的C1～6亞烷基可以被1個(gè)羥基取代，并包括8-表體平衡混合物。
12.權(quán)利要求9所述的治療和/或預(yù)防劑，其中，具有前列腺素骨架的化合物是選自通式(IC)所示化合物組的化合物、其非毒性鹽或其環(huán)糊精籠形包合物； 式中，R1C表示羥基、C1～6烷氧基、或NR6CR7C基(基團(tuán)中，R6C和R7C是分別表示氫或C1～4烷基)，R2C表示氧代基、鹵素、或O-COR8C基(基團(tuán)中，R8C表示C1～4烷基、苯基、或苯基(C1～4烷基))，R3C表示氫或羥基，R4Ca和R4Cb分別獨(dú)立地表示氫或C1～4烷基，R5C表示用以下基團(tuán)取代的苯基，(i)1～3個(gè)的C1～4烷氧基-C1～4烷基、C2～4鏈烯氧基-C1～4烷基、C2～4炔氧基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷氧基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷基(C1～4烷氧基)-C1～4烷基、苯氧基-C1～4烷基、苯基-C1～4烷氧基-C1～4烷基、C1～4烷硫基-C1～4烷基、C2～4鏈烯硫基-C1～4烷基、C2～4炔硫基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷硫基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷基(C1～4烷硫基)-C1～4烷基、苯硫基-C1～4烷基、或苯基-C1～4烷硫基-C1～4烷基，(ii)C1～4烷氧基-C1～4烷基和C1～4烷基、C1～4烷氧基-C1～4烷基和C1～4烷氧基、C1～4烷氧基-C1～4烷基和羥基、C1～4烷氧基-C1～4烷基和鹵素、C1～4烷硫基-C1～4烷基和C1～4烷基、C1～4烷硫基-C1～4烷基和C1～4烷氧基、C1～4烷硫基-C1～4烷基和羥基、或C1～4烷硫基-C1～4烷基和鹵素，(iii)鹵代烷基或羥基-C1-4烷基，或(iv)C1～4烷基和羥基，符號(hào) 表示單鍵或雙鍵，其中，R2C為O-COR8C基時(shí)，8-9位表示雙鍵。
13.權(quán)利要求9所述的治療和/或預(yù)防劑，其中，具有前列腺素骨架的化合物是選自通式(ID)所示化合物組的化合物、其非毒性鹽或其環(huán)糊精籠形包合物； 式中，AD表示C2～8亞烷基、C2～8亞鏈烯基、C1～4亞烷基-亞苯基、或C2～4亞鏈烯基-亞苯基，R1D表示羥基、C1～6烷氧基、C1～6烷氧基-C1～6烷氧基、HO-C1～6烷氧基、或NR6DR7D基(基團(tuán)中，R6D和R7D分別表示氫原子或C1～4烷基)，R2D表示氧代基、鹵素、或R8D-COO-基(基團(tuán)中，R8D表示氫原子、C1～4烷基、苯基、苯基(C1～4烷基)、C1～4烷氧基、HOOC-C1～4烷基、C1～4烷氧基-羰基-C1～4烷基、HOOC-C2～4鏈烯基、或C1～4烷氧基-羰基-C2～4鏈烯基)，R3D表示氫原子或羥基，R4D表示C1～4亞烷基，R5D表示用下述基團(tuán)取代的苯基，(i)1～3個(gè)的C1～4烷氧基-C1～4烷基、C2～4鏈烯氧基-C1～4烷基、C2～4炔氧基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷氧基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷基(C1～4烷氧基)-C1～4烷基、苯氧基-C1～4烷基、苯基-C1～4烷氧基-C1-4烷基、C1～4烷硫基-C1～4烷基、C2～4鏈烯硫基-C1～4烷基、C2～4炔硫基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷硫基-C1～4烷基、C3～7環(huán)烷基(C1～4烷硫基)-C1～4烷基、苯硫基-C1～4烷基、或苯基-C1～4烷硫基-C1～4烷基，(ii)C1～4烷氧基-C1～4烷基和C1～4烷基、C1～4烷氧基-C1～4烷基和C1～4烷氧基、C1～4烷氧基-C1～4烷基和羥基、C1～4烷氧基-C1～4烷基和鹵素、C1～4烷硫基-C1～4烷基和C1～4烷基、C1～4烷硫基-C1～4烷基和C1～4烷氧基、C1～4烷硫基-C1～4烷基和羥基、或C1～4烷硫基-C1～4烷基和鹵素，(iii)鹵代-C1～4烷基或羥基-C1～4烷基，或(iv)C1～4烷基和羥基，符號(hào) 表示單鍵或雙鍵，其中，R2D為式R8D-COO-基時(shí)，R1D表示C1～6烷氧基、C1～6烷氧基-C1～6烷氧基、或HO-C1～6烷氧基，8-9位表示雙鍵。
14.權(quán)利要求9所述的治療和/或預(yù)防劑，其中，EP4促效劑為，(11α，15α，13E)-9-氧代-11，15-二羥基-16-(3-甲氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲-5-硫代前列腺素-13-烯酸、(11α，15α，13E)-9-氧代-11，15-二羥基-16-(3-甲氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲-3，7-二硫代前列腺素-13-烯酸、(9β，11α，15α，5Z，13E)-9-氯-11，15-二羥基-16-(3-乙氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲前列腺素-5，13-二烯酸，(11α，15α，13E)-9-氧代-11，15-二羥基-16-(3-甲氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲前列腺素-13-烯酸、或(11α，15α，5Z，13E)-9-氧代-11，15-二羥基-16-(3-乙氧基甲基苯基)-17，18，19，20-四去甲前列腺素-5，13-二烯酸、其非毒性鹽、其甲酯、或其α-環(huán)糊精籠形包合物。
全文摘要
本發(fā)明提供含有EP
文檔編號(hào)A61P35/04GK1424918SQ00818634
公開(kāi)日2003年6月18日 申請(qǐng)日期2000年11月22日 優(yōu)先權(quán)日1999年11月24日
發(fā)明者丸山隆幸, 田中雅治 申請(qǐng)人:小野藥品工業(yè)株式會(huì)社