專利名稱：一種從天然植物中提取治療惡性腫瘤產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從天然藥用植物中提取有效成分制備成藥方面的技術(shù)，確切地談屬于精細(xì)有機(jī)化工提取技術(shù)。商品名稱毅愛隆膠囊、散劑、顆粒劑、片劑、注射劑。英文名稱The productive technology for extracting a product treatingmalignant tumor from natural plants其中一種有效成分中文名20(s)-人參皂甙-Rh2；英文名20(s)-ginsenoside-Rh2；化學(xué)名3β-O-達(dá)瑪-24-烯-吡喃葡萄糖甙。
國外現(xiàn)有技術(shù)是這樣記載的癌癥是威脅患者生命的主要病癥之一，目前治療癌癥的主要手段是放化療，但放化療在殺死腫瘤細(xì)胞的同時也大量殺死正常細(xì)胞。因而引起許多毒副反應(yīng)，如白細(xì)胞、血小板急劇減少，病人抗病能力下降，其他正常器官功能大受影響，從而引起惡心、嘔吐、厭食、脫發(fā)、潰瘍、炎癥等多種并發(fā)癥。在醫(yī)院里，許多患者沒有被病魔打倒卻被放化療引起的并發(fā)癥奪取了生命。尤其是被迫中斷放化療的患者，由于患者抗病力較以前大大下降，病魔會以更快的速度蔓延全身，威脅患者的生命。本著綜合治療、聯(lián)合用藥的原則，中西結(jié)合，在放化療前、中、后的一段時間內(nèi)服用一些既抑制腫瘤生長、擴(kuò)散，又能減輕放化療毒副反應(yīng)的藥物，取得更好的殺死腫瘤細(xì)胞的效果。人參有抗腫瘤、抗衰老、抗輻射等多種生物學(xué)活性。人參皂甙被公認(rèn)是一類主要的有效成分，迄今已確定結(jié)構(gòu)的至少在40種以上。人參皂甙-Rh2的體內(nèi)、體外實驗已證實具有抑制癌細(xì)胞的繁殖與生長的作用。臨床前試驗研究顯示，該藥對肺癌細(xì)胞、Morris肝癌細(xì)胞、小鼠的B16黑色素瘤細(xì)胞具有較明顯的特異性抑瘤作用。其作用機(jī)理被認(rèn)為是再分化誘導(dǎo)作用；既人參皂甙-Rh2并非直接殺傷癌細(xì)胞，而是使癌細(xì)胞在其增殖過程中產(chǎn)生再分化。從而使癌細(xì)胞不能再增殖而停止一定的繁殖期中，誘導(dǎo)其逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞。相反，與20(s)-人參皂甙-Rh2分子結(jié)構(gòu)相似的-Rh1不但不抑制B16瘤細(xì)胞的生長，反而明顯促進(jìn)黑素合成，且呈濃度依賴性關(guān)系。-Rh1屬原人參三醇配基的皂甙，β-D-葡萄糖基結(jié)合在原人參三醇的C6位上，僅糖基結(jié)合位置之差異，其抑瘤作用大為不同，這說明了分子構(gòu)效關(guān)系的重要意義。因此廣大藥學(xué)工作者正在尋求大量生產(chǎn)-Rh2的制備方法，這對于研制一種高效低毒的抗癌天然藥物，以克服化學(xué)合成抗癌藥物的毒性，為癌癥病人解除痛苦具有重要意義。
本發(fā)明的目的公開一種先進(jìn)、安全、方法簡單、收益率為35％以上的制取20(s)-人參皂甙-Rh2及組合物的生產(chǎn)工藝。
本發(fā)明的目的通過如下方案來實現(xiàn)。
本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思分為四個部分A精細(xì)有機(jī)化工提取有效成分原料為人參、西洋參、三七、西洋參莖葉皂甙。
通式 (1)式中R1、R2、R3分別為不同糖鏈。(1)式中-OR3＝H時，為原人參二醇系列皂甙，R1＝H時，為原人參三醇系列皂甙。
將(1)式的皂甙在強(qiáng)堿催化下在高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑中水解，得20(s)-人參皂甙-Rh2組合物。
通式 (2)式中R＝glu-，A＝H時為20(s)-人參皂甙-Rh2；R＝H，A＝glu-O-時為20(s)-人參皂甙-Rh1；R＝glu-glu-，A＝H時為20(s)-人參皂甙-Rg3；R＝A＝H，為20(s)-原人參二醇；R＝H，A＝OH時，為20(s)-原人參三醇。
將(2)式所示化合物用硅膠柱層析法，以氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水(2∶2∶4∶1，下層)洗脫，得(3)式化合物 (3)式化合物為20(s)-人參皂甙-Rh2。
B物理化學(xué)溫度的定位發(fā)明者經(jīng)反復(fù)實驗，發(fā)現(xiàn)反應(yīng)中的難點(diǎn)是溫度，溫度高反應(yīng)速度快，而一般的溶劑，達(dá)到沸點(diǎn)溫度，再無法提高溫度，一般采用高壓釜進(jìn)行高溫、高壓水解反應(yīng)。本發(fā)明采用高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑，在普通的容器中進(jìn)行(1)式所示三萜皂甙堿性水解制備20(s)-人參皂甙-Rh2及其組合物。該法先進(jìn)、安全、方法簡單、收率高、成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
C回收率及藥物有效成分回收部分1、取人參皂甙100g，甘油600ml、氫氧化鈉100g于燒杯中，攪勻，沙浴加熱230℃最適宜溫度)，恒溫加熱30min(最適宜加熱時間)，停止加熱，放置，待溫度降至約150℃，在強(qiáng)烈攪拌下滴加水5000ml，水解產(chǎn)物自溶液中形成灰白色沉淀析出，過濾，水洗至中性，過濾后將產(chǎn)物溶于500ml無水乙醇，過濾，回收溶劑，得20(s)-人參皂甙-Rh2組合物35g，收率35％。
2、20(s)-人參皂甙-Rh2組合物10g，溶于30ml無水乙醇中，加硅膠15g，攪勻，沸水浴蒸干，研細(xì)、過200目篩，上硅膠H柱，用氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水(2∶2∶4∶1，下層)洗脫，硅膠G板TLC檢測，噴10％硫酸，105℃加熱數(shù)分鐘，顯紫色斑點(diǎn)，回收溶劑，甲醇/水重結(jié)晶，得20(s)-人參皂甙-Rh21.2g，收率3％(以皂甙計算)。
D權(quán)利要求書特征部分的三項權(quán)項A組成原料為人參、西洋參、三七、西洋參莖葉皂甙。
通式 (1)R1、R2、R3分別為不同糖鏈。
(1)式中-OR3＝H時，為原人參二醇系列皂甙，R1＝H時，為原人參三醇系列皂甙。
將(1)式的皂甙在強(qiáng)堿催化下在高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑中水解，得20(s)-人參皂甙-Rh2組合物。
通式 (2)式中R＝glu-，A＝H時為20(s)-人參皂甙-Rh2；R＝H，A＝glu-O-時為20(s)-人參皂甙-Rh1；R＝glu-glu-，A＝H時為20(s)-人參皂甙-Rg3；R＝A＝H，為20(s)-原人參二醇；R＝H，A＝OH時，為20(s)-原人參三醇。
將(2)式所示化合物用硅膠柱層析法，以氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水(2∶2∶4∶1，下層)洗脫，得(3)式化合物 (3)式化合物為20(s)-人參皂甙-Rh2。
B最佳實施方案發(fā)明者經(jīng)反復(fù)實驗，發(fā)現(xiàn)反應(yīng)中的難點(diǎn)是溫度，溫度高反應(yīng)速度快，而一般的溶劑，達(dá)到沸點(diǎn)溫度，再無法提高溫度，一般采用高壓釜進(jìn)行高溫、高壓水解反應(yīng)。本發(fā)明采用高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑，在普通的容器中進(jìn)行(1)式所示三萜皂甙堿性水解制備20(s)-人參皂甙-Rh2及其組合物。
C實例1、取人參皂甙100g，甘油600ml、氫氧化鈉100g于燒杯中，攪勻，沙浴加熱230℃最適宜溫度)，恒溫加熱30min(最適宜加熱時間)，停止加熱，放置，待溫度降至約150℃，在強(qiáng)烈攪拌下滴加水5000ml，水解產(chǎn)物自溶液中形成灰白色沉淀析出，過濾，水洗至中性，過濾后將產(chǎn)物溶于500ml無水乙醇，過濾，回收溶劑，得20(s)-人參皂甙-Rh2組合物35g，收率35％。
2、取20(s)-人參皂甙-Rh2組合物10g，溶于30ml無水乙醇中，加硅膠15g，攪勻，沸水浴蒸干，研細(xì)、過200目篩，上硅膠H柱，用氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水(2∶2∶4∶1，下層)洗脫，硅膠G板TLC檢測，噴10％硫酸，105℃加熱數(shù)分鐘，顯紫色斑點(diǎn)，回收溶劑，甲醇/水重結(jié)晶，得20(s)-人參皂甙-Rh21.2g，收率3％(以皂甙計算)。
3、20(s)-人參皂甙-Rh2組合物生產(chǎn)工藝
將從人參、西洋參、三七、西洋參莖葉中所得(1)式所示三萜皂甙為原料，用強(qiáng)堿催化，在高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑中水解。
強(qiáng)堿是指甲醇鈉、甲醇鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀。高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑是指正丁醇、丙二醇、丙三醇、二甘醇、聚乙二醇等。
將(1)式所示三萜皂甙溶于高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑中，加強(qiáng)堿催化，溫度在50～400℃，加熱1～4h，停止加熱，在攪拌下滴加水，水解產(chǎn)物形成固體自溶液中析出，過濾，水洗至中性后減壓過濾，將濾后固體溶于無水乙醇中，過濾，回收溶劑，得20(s)-人參皂甙-Rh2組合物。
通式 (2)式中R＝glu-，A＝H時為20(s)-人參皂甙-Rh2；R＝H，A＝glu-O-時為20(s)-人參皂甙-Rh1；R＝glu-glu-，A＝H時為20(s)-人參皂甙-Rg3；R＝A＝H，為20(s)-原人參二醇；R＝H，A＝OH時，為20(s)-原人參三醇。
4、20(s)-人參皂甙-Rh2生產(chǎn)工藝將(2)式所示化合物用硅膠柱層析法，以氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水(2∶2∶4∶1，下層)洗脫，得(3)式化合物 (3)式為20(s)-人參皂甙-Rh2
5、利用20(s)-人參皂甙-Rh2組合物制成的制劑(顆粒劑，片劑，膠囊，注射劑)本發(fā)明的積極效果提供先進(jìn)、安全、方法簡單、收率高、成本低、適合工業(yè)化生產(chǎn)的制備20(s)-人參皂甙-Rh2及組合物的生產(chǎn)工藝。
20(s)-人參皂甙-Rh2作為有效抗癌活性物質(zhì)，使20(s)-人參皂甙-Rh2及組合物的生產(chǎn)工藝實現(xiàn)工業(yè)化，對于開發(fā)新的抗癌藥物具有十分重要的意義本發(fā)明的創(chuàng)造性通過實審時提供毒理、藥理動物實驗數(shù)據(jù)來實現(xiàn)。
權(quán)利要求
1.一種從天然植物中提取治療惡性腫瘤的藥物產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝，其特征在于通式為20(s)-人參皂甙-Rh2組合物生產(chǎn)工藝 將從人參、西洋參、三七、西洋參莖葉中所得(1)式所示三萜皂甙為原料，用強(qiáng)堿催化，在高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑中水解。強(qiáng)堿是指甲醇鈉、甲醇鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀。高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑是指正丁醇、丙二醇、丙三醇、二甘醇、聚乙二醇等。將(1)式所示三萜皂甙溶于高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑中，加強(qiáng)堿催化，溫度在50～400℃，加熱1～4h，停止加熱，在攪拌下滴加水，水解產(chǎn)物形成固體自溶液中析出，過濾，水洗至中性后減壓過濾，將濾后固體溶于無水乙醇中，過濾，回收溶劑，得20(s)-人參皂甙-Rh2組合物。通式 式中R＝glu-，A＝H時為20(s)-人參皂甙-Rh2R＝H，A＝glu-O-時為20(s)-人參皂甙-Rh1；R＝glu-glu-，A＝H時為20(s)-人參皂甙-Rg3；R＝A＝H，為20(s)-原人參二醇；R＝H，A＝OH時，為20(s)-原人參三醇。
2.一種從天然植物中提取治療惡性腫瘤的藥物產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝，其特征在于通式20(s)-人參皂甙-Rh2生產(chǎn)工藝將(2)式所示化合物用硅膠柱層析法，以氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水(2∶2∶4∶1，下層)洗脫，得(3)式化合物 (3)式為20(s)-人參皂甙-Rh2
3.一種從天然植物中提取治療惡性腫瘤的藥物產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝，其特征在于利用20(s)-人參皂甙-Rh2組合物制成的制劑為散劑、顆粒劑，片劑，膠囊，注射劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及從天然藥用植物中提取有效成分制備成藥方面的技術(shù),確切地談屬于精細(xì)有機(jī)化工提取技術(shù)。商品名稱:毅愛隆膠囊、散劑、顆粒劑、片劑、注射劑。本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思分為四個部分:A精細(xì)有機(jī)化工提取有效成分;B物理化學(xué)溫度的定位;C回收率及藥物有效成分回收部分;D權(quán)利要求書特征部分的三項權(quán)項。本發(fā)明采用高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑,在普通的容器中進(jìn)行堿性水解制備20(s)－人參皂甙－Rh
文檔編號A61P35/00GK1352977SQ0013358
公開日2002年6月12日 申請日期2000年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2000年11月15日
發(fā)明者宋春祥, 宋長春 申請人:沈陽毅隆制藥有限公司