用熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于混合菌固態(tài)發(fā)酵飼料技術(shù)領(lǐng)域，具體是用熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿 菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木馨渣的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 木馨渣是生產(chǎn)木馨淀粉和酒精后的副產(chǎn)物，主要成分是纖維素，含有少量的蛋白 質(zhì)，目前主要用作動物飼料。但因木質(zhì)化程度高，適口性差，動物消化利用率低，而且新鮮木 馨渣水分含量高，在儲存過程中容易變黑、發(fā)酸變質(zhì)，現(xiàn)在仍有大量的木馨渣被丟棄，既是 一種資源浪費，也會對環(huán)境造成一定程度的污染破壞，隨著木馨渣產(chǎn)量的不斷增加，木馨渣 的處理和利用已成為一個亟需解決的問題。微生物發(fā)酵處理木馨渣可W改善木馨渣的適口 性，提高營養(yǎng)價值和飼料轉(zhuǎn)化率，同時有利于解決膽存時發(fā)霉變質(zhì)問題。許多研究表明采用 單一菌種處理木馨渣，使其營養(yǎng)價值提高不多，實際應(yīng)用不理想，混合菌發(fā)酵可W利用菌種 之間的協(xié)調(diào)互作關(guān)系，擴大對發(fā)酵底物的適應(yīng)性和生產(chǎn)菌的防雜菌能力，處理效果較為理 想，混合菌發(fā)酵木馨渣選擇菌種是關(guān)鍵，有益微生物菌種品種繁多，但是目前研究的品種及 搭配非常有限，植物乳桿菌、熱帶假絲酵母和枯草芽抱桿菌運=種菌之間的組合處理木馨 渣的研究基本未見報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供一種用熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài) 發(fā)酵木馨渣的方法，為探索最佳木馨渣發(fā)酵條件，改善木馨渣品質(zhì)，提高其適口性，為木馨 渣的開發(fā)及利用提供參考。
[0004] 本發(fā)明的技術(shù)方案是：用熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā) 酵木馨渣的方法，包括如下步驟：
[0005] (1)將新鮮木馨渣在65°C下烘干后作為發(fā)酵原料；
[0006] (2)向經(jīng)過步驟(1)處理過的木馨渣中按木馨渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分添加 1%的尿素 或者添加1%尿素+0.6%紅糖，添加尿素作為氮源，添加紅糖用于調(diào)節(jié)木馨渣的可溶性糖濃 度；
[0007] (3)將熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物乳桿菌的菌液Wl: 1:1的體積比混合， 按木馨渣干物質(zhì)5%的量進行接種，使每克干木馨渣中熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物 乳桿菌的活菌含量分別達到1.5 X l〇6cfu/g，6.3 X l〇4cfu/g，2.2 X l〇5cfu/g;
[000引（4)將步驟(3)添加了熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物乳桿菌混合制劑的木馨 渣，用生理鹽水調(diào)制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙締薄膜袋中，用真空累抽出袋 內(nèi)的空氣至真空狀態(tài)，密封，置于室溫下膽藏；
[0009] (5)將步驟(4)包裝好的木馨渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物。
[0010] 本發(fā)明應(yīng)用的微生物菌種來源:枯草芽抱桿菌(Bacillus SUbtiliS);植物乳桿菌 (Xactobacillus plantarum);布氏乳桿菌(Xactobasillus buchneri)均購買于中國工業(yè) 微生物菌種保藏管理中屯、。
[0011] 本發(fā)明應(yīng)用的尿素和紅糖均為市購。
[0012] 本發(fā)明應(yīng)用的培養(yǎng)基:MRS的液體培養(yǎng)基用于植物乳桿菌活化和菌液培養(yǎng);MRS固 體培養(yǎng)基用于植物乳桿菌涂板計數(shù);M邸液體培養(yǎng)基用于熱帶假絲酵母的活化和菌液培養(yǎng)； M邸固體培養(yǎng)基用于熱帶假絲酵母涂板計數(shù);葡萄糖營養(yǎng)液體使用于枯草芽抱桿菌的菌種 活化和菌液培養(yǎng);葡萄糖營養(yǎng)瓊脂使用于枯草芽抱桿菌的涂板計數(shù)。
[0013] 試驗菌種的活化及擴培：安飯管凍干菌種^活化^按5%添加量接種到相應(yīng)的液 體培養(yǎng)基中，熱帶假絲酵母和枯草芽抱桿菌的培養(yǎng)條件為溫度30°C，ISOrpm搖床培養(yǎng)，植物 乳桿菌的培養(yǎng)條件為溫度37°C，靜態(tài)培養(yǎng)。
[0014] 接種液計數(shù):采用涂板對各菌種接種液進行計數(shù)。
[0015] 除另有說明外，本發(fā)明所述的百分比均為質(zhì)量百分比，各組分含量百分數(shù)之和為 100%。
[0016] 本發(fā)明的有益效果：
[0017] 1、經(jīng)產(chǎn)品檢測，采用熱帶假絲酵母+枯草芽抱桿菌+植物乳桿菌+尿素固態(tài)發(fā)酵木 馨渣后，得到木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物中pH值由3.49降至3.14,粗蛋白CP含量由2.58%提高到 4.82% ;采用熱帶假絲酵母+枯草芽抱桿菌+植物乳桿菌+尿素+紅糖固態(tài)發(fā)酵木馨渣后，得 到木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物中pH值由3.49降至3.17，粗蛋白CP含量由2.58 %提高到4.84 %，有效改 善了木馨渣的品質(zhì)。
[0018] 2、本發(fā)明制備方法簡單，便于操作，原料豐富易得。
【具體實施方式】
[0019] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步說明。
[0020] W下實施例僅為本發(fā)明示意性的【具體實施方式】，并非用W限定本發(fā)明的范圍。任 何本領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的構(gòu)思和原則的前提下所作的等同變化、修改與結(jié) 合，均應(yīng)屬于本發(fā)明保護范圍。
[0021] 實施例1
[0022] 本發(fā)明所述的用熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木馨渣 的方法的一個實例，具體操作步驟如下：
[0023] (1)將新鮮木馨渣在65°C下烘干后作為發(fā)酵原料；
[0024] (2)向經(jīng)過步驟(1)處理過的木馨渣中按木馨渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分添加1%的尿素 作為氮源；
[0025] (3)將熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物乳桿菌的菌液Wl: 1:1的體積比混合， 按木馨渣干物質(zhì)5%的量進行接種，使每克干木馨渣中熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物 乳桿菌的活菌含量分別達到1.5 X l〇6cfu/g，6.3 X l〇4cfu/g，2.2 X l〇5cfu/g;
[0026] (4)將步驟(3)添加了布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物乳 桿菌混合制劑的木馨渣，用生理鹽水調(diào)制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙締薄膜袋 中，用真空累抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀態(tài)，密封，置于室溫下膽藏；
[0027] (5)將步驟(4)包裝好的木馨渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物。
[00%]應(yīng)用FOSS 8400凱氏定氮儀測定木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物中的粗蛋白質(zhì)含量，經(jīng)產(chǎn)品檢測， 采用熱帶假絲酵母+枯草芽抱桿菌+植物乳桿菌+尿素固態(tài)發(fā)酵木馨渣后，得到木馨渣發(fā)酵 產(chǎn)物中PH值由3.49降至3.14,粗蛋白（CP)含量由2.58%提高到4.82%;
[0029] 實施例2
[0030] 本發(fā)明所述的用熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木馨渣 的方法的另一個實例，具體操作步驟如下：
[0031] (1)將新鮮木馨渣在65°C下烘干后作為發(fā)酵原料；
[0032] (2)向經(jīng)過步驟(1)處理過的木馨渣中按木馨渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分添加1%的尿素 +0.6 %紅糖，添加尿素作為氮源，添加紅糖用于調(diào)節(jié)木馨渣的可溶性糖濃度；
[0033] (3)將熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物乳桿菌的菌液Wl: 1:1的體積比混合， 按木馨渣干物質(zhì)5%的量進行接種，使每克干木馨渣中熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物 乳桿菌的活菌含量分別達到1.5 X l〇6cfu/g，6.3 X l〇4cfu/g，2.2 X l〇5cfu/g;
[0034] (4)將步驟(3)添加了熱帶假絲酵母、枯草芽抱桿菌和植物乳桿菌混合制劑的木馨 渣，用生理鹽水調(diào)制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙締薄膜袋中，用真空累抽出袋 內(nèi)的空氣至真空狀態(tài)，密封，置于室溫下膽藏；
[0035] (5)將步驟(4)包裝好的木馨渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物。
[0036] 應(yīng)用FOSS 8400凱氏定氮儀測定木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物中的粗蛋白質(zhì)含量，使用HANNA HI 8424便捷式抑計測定木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物中的pH值。經(jīng)產(chǎn)品檢測:采用熱帶假絲酵母+枯草 芽抱桿菌+植物乳桿菌+尿素+紅糖固態(tài)發(fā)酵木馨渣后，得到木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物中抑值由3.49 降至3.17,粗蛋白CP含量由2.58%提高到4.84%。
[0037] 不同微生物添加劑對木馨渣發(fā)酵品質(zhì)及營養(yǎng)成分的影響見表1。
[0038] 表1不同微生物添加劑對木馨渣發(fā)酵品質(zhì)及營養(yǎng)成分的影響
[0039] 組別 處貍 PH 粗蛋白（％) 空白組 生理鹽水 J.4化0.0||， 2.58卻.0滬 對照組 I 尿素 3.4虹0.l)r' 4.5l±0.01 b 對照組凸 尿素+紅稱 3.45止n.0?V' 4.e>3±0.01 b 實施例 I LAB+AN+CT+BS+LAP+尿素 3,1化0.01。' 4:8站(102。 實施例 2 LAB+AN+CT+BS+LAP+尿素+化糖 3.1 巧0沿f 4.8牡0.01(
[0040] 注：同列無字母或肩標相同字母表示差異不顯著(P>〇.05)，不同小寫字母表示差 異顯著(P<0.05)。
【主權(quán)項】
1.用熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法，其特征 在于，包括如下步驟： (1) 將新鮮木薯渣在65 °C下烘干后作為發(fā)酵原料； (2) 向經(jīng)過步驟（1)處理過的木薯渣中按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分添加1%的尿素或者 添加1 %尿素+0.6 %紅糖，添加尿素作為氮源，添加紅糖用于調(diào)節(jié)木薯渣的可溶性糖濃度； (3) 將熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌的菌液以1:1:1的體積比混合，按木 薯渣干物質(zhì)5%的量進行接種，使每克干木薯渣中熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿 菌的活菌含量分別達到1 · 5 X 106cfu/g，6.3 X 104cfu/g，2.2 X 105cfu/g; (4) 將步驟(3)添加了熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌混合制劑的木薯渣， 用生理鹽水調(diào)制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋中，用真空栗抽出袋內(nèi)的 空氣至真空狀態(tài)，密封，置于室溫下貯藏； (5) 將步驟(4)包裝好的木薯渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物。
【專利摘要】用熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法，以木薯渣為發(fā)酵原料，用熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌的菌液以1:1:1的體積比混合，按木薯渣干物質(zhì)5％的量進行接種，按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加0.6％的紅糖用于調(diào)節(jié)木薯渣的可溶性糖濃度，按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分添加1％尿素作為氮源，用生理鹽水調(diào)制含水量為60～65％，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀態(tài)，密封，置于室溫下貯藏10天。經(jīng)過發(fā)酵處理后，能顯著降低發(fā)酵木薯渣的pH值，提高木薯渣的粗蛋白含量。
【IPC分類】A23K10/37, A23K10/12
【公開號】CN105558347
【申請?zhí)枴緾N201510955496
【發(fā)明人】唐慶鳳, 鄒彩霞, 韋升菊, 彭開屏, 梁辛, 楊炳壯, 梁賢威, 黃鋒, 李麗莉, 林波, 楊承劍, 彭麗娟
【申請人】廣西壯族自治區(qū)水牛研究所
【公開日】2016年5月11日
【申請日】2015年12月18日