一種仔豬用液態(tài)復(fù)合微生態(tài)制劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于豬養(yǎng)殖功能性添加劑領(lǐng)域，具體涉及一種仔豬用液態(tài)復(fù)合微生態(tài)制劑 及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 仔豬新生2周內(nèi)腸道菌群不穩(wěn)定，容易發(fā)生變化，結(jié)腸內(nèi)首先出現(xiàn)桿菌和腸鏈球菌，隨 之出現(xiàn)雙歧桿菌并成為優(yōu)勢(shì)菌；新生2周至斷奶前，腸道菌群容易受到食物的影響，以厭氧 菌為主，主要為雙歧桿菌；在斷奶期，腸道菌群很不穩(wěn)定，乳酸桿菌線性下降，大腸桿菌線性 增加；斷奶兩周后，腸道菌群穩(wěn)定，以專性厭氧菌為主。針對(duì)上述仔豬腸道菌群發(fā)育特點(diǎn)，出 生至斷奶后2周的腸道菌群體系極不完善，極易發(fā)生應(yīng)激腸道菌群失衡，均勻腸道受損，消 化能力減少，發(fā)生腹瀉。
[0003] 研究顯示，為乳仔豬補(bǔ)飼微生態(tài)制劑，將有助于改善腸道菌群平衡，預(yù)防腹瀉，提 高生產(chǎn)性能。然而，微生態(tài)制劑的使用效果與微生態(tài)制劑的種類、含量和使用方式有密切關(guān) 系。目前的微生態(tài)制劑多為固態(tài)制制，適合于添加在飼料中，對(duì)于未采食固體飼料的新生仔 豬而言，存在補(bǔ)飼困難的問(wèn)題。
[0004] 如201310601030. 3,名稱為"一種降低仔豬應(yīng)激的微生物飼料添加劑及其制備方 法"的發(fā)明專利申請(qǐng)，由枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌、釀酒酵母菌與培養(yǎng)基、無(wú)菌水等原料進(jìn) 行發(fā)酵，然后將發(fā)酵液經(jīng)過(guò)噴霧干燥與保護(hù)劑混合得到成品；201410167179. X，名稱為"一 種復(fù)合微生態(tài)制劑、添加劑及其預(yù)混料"的發(fā)明專利申請(qǐng)，該復(fù)合微生態(tài)制劑包含枯草芽孢 桿菌CGMCC No. 8148菌粉和植物乳桿菌CGMCC No. 8150菌粉；200510097047. 5,名稱為"一 種增進(jìn)仔豬腸道功能的飼料添加劑"的發(fā)明專利，該飼料添加劑將谷氨酰胺、甘氨酰-L-谷 氨酰胺、丁酸鈉、維生素 C和葡萄糖五種物質(zhì)中的三種或三種以上物質(zhì)按一定比例配伍加 工而成。
[0005] 以上專利均為固體產(chǎn)品，固體形式下的乳桿菌處于休眠狀態(tài)，容易存活。然而，對(duì) 于未采食固體飼料的新生仔豬而言，補(bǔ)飼困難；同時(shí)，在添加劑量上范圍較廣，當(dāng)仔豬發(fā)生 疾病時(shí)采食量下降，按飼料比例添加將有可能使仔豬無(wú)法采食到足夠劑量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明為了得到乳酸菌活菌含量高的液態(tài)微生態(tài)制劑，提供了一種仔豬用液態(tài)復(fù) 合微生態(tài)制劑及其制備方法。針對(duì)仔豬腸道菌群發(fā)育和乳豬飼養(yǎng)管理的特點(diǎn)，通過(guò)殼寡糖 來(lái)強(qiáng)化微生態(tài)制劑的穩(wěn)定性，尤其是乳酸菌的穩(wěn)定性，開發(fā)了一種高效的液態(tài)復(fù)合微生態(tài) 制劑。
[0007] 為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的具體技術(shù)方案是： 一種仔豬用液態(tài)復(fù)合微生態(tài)制劑，其特征在于：每毫升液體復(fù)合微生態(tài)制劑中含乳酸 菌活菌多2*107CFU、殼寡糖30-60毫克、維生素 C 0-60毫克、丁酸鈉0-45毫克和L-谷氨酰 胺0-60暈克。
[0008] 乳桿菌對(duì)調(diào)節(jié)腸道健康具有非常重要的作用，但液體形式下的乳酸菌容易發(fā)生死 亡，通常在常溫保存2周，乳酸菌活菌含量低于l*104CFU/ml以下。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)殼寡糖可 以促進(jìn)乳酸桿菌的生長(zhǎng)，少量殼寡糖和葡萄糖協(xié)同作用時(shí)可明顯縮短乳酸桿菌的生長(zhǎng)適應(yīng) 期，促進(jìn)生長(zhǎng)。因此，本發(fā)明加入適量殼寡糖可以改善乳酸菌的適應(yīng)性，可以保證液態(tài)乳酸 菌的活菌最低量為2*109CFU，以保證在儲(chǔ)存兩周后，乳酸活菌含量還能維持在l*107CFU/ml 以上，從而維持乳酸菌活性。
[0009] 優(yōu)選地，每毫升液體復(fù)合微生態(tài)制劑中含乳酸菌活菌多2*107CFU、殼寡糖30-60毫 克、維生素 C 30-60毫克、丁酸鈉20-45毫克和L-谷氨酰胺30-60毫克。
[0010] 本發(fā)明通過(guò)進(jìn)一步研究篩選出既有利于動(dòng)物健康，又有利于維持液態(tài)下乳酸菌活 菌含量的微營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，包括維生素 C、丁酸鈉和L-谷氨酰胺。各微營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從不同機(jī)制發(fā)揮 作用，對(duì)乳酸菌的生長(zhǎng)和活性維持起著非常明顯的作用，可促進(jìn)乳酸菌生長(zhǎng)，延緩死亡。具 體作用如下： 1)在飼料中添加丁酸鈉，可以促進(jìn)腸道乳酸菌的生長(zhǎng)，降低大腸桿菌的生長(zhǎng)。乳酸菌 耐酸性，適宜在酸性條件下生長(zhǎng)，然而丁酸鈉屬于堿性，因此在培養(yǎng)達(dá)成一定活菌含量后添 加，且添加劑量要適宜。
[0011] 2)維生素 C具有抗氧化性，可以避免培養(yǎng)基中代謝產(chǎn)物和空氣對(duì)乳酸菌的破壞， 保護(hù)培養(yǎng)后期乳酸菌的活性，維持生長(zhǎng)。
[0012] 3)在飼料中添加谷氨酰胺，可以提高仔豬腸道內(nèi)雙歧桿菌含量。谷氨酰胺是氨基 酸的一種，在細(xì)胞中很容易分解成谷氨酸和氨，對(duì)細(xì)胞分裂增殖起到非常重要的作用。相比 與葡萄糖只能為正常細(xì)胞提供能量相比，谷氨酰胺可以促進(jìn)細(xì)胞再生。本發(fā)明利用谷氨酰 胺作為液態(tài)乳酸菌后期的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可以維持乳酸菌的活性和促進(jìn)生長(zhǎng)。
[0013] 4)配方中的丁酸鈉、L-谷氨酰胺和殼寡糖都是作為乳酸菌的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)物質(zhì)發(fā)揮作 用，分別提供斷鏈脂肪酸、氮、氨基酸和糖，有助于維持液態(tài)下乳酸菌的穩(wěn)定存活。
[0014] 本發(fā)明根據(jù)各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的溶解性情況、儲(chǔ)存兩周后乳酸菌活菌含量以及乳酸水平 和動(dòng)物試驗(yàn)應(yīng)用效果，對(duì)各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的適宜用量進(jìn)行了優(yōu)化，得到最優(yōu)的配方比例。
[0015] 本發(fā)明的仔豬用液體復(fù)合微生態(tài)制劑的制備方法為：利用MRS培養(yǎng)基(乳酸細(xì)菌 培養(yǎng)基）培養(yǎng)乳酸菌達(dá)到目標(biāo)活菌含量多2*109CFU/ml，按配方量將維生素 C、丁酸鈉、L-谷 氨酰胺和殼寡糖溶于培養(yǎng)基的微生態(tài)制劑液中，混勻，得到復(fù)合微生態(tài)制劑液。以保證在儲(chǔ) 存兩周后，乳酸活菌含量還能維持在l*l〇7CFU/ml以上。
[0016] 優(yōu)選地，將乳酸菌菌種接種于MRS液體培養(yǎng)基中，進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵至pH值3. 5-4. 5， 乳酸菌活菌彡2*109CFU/mL。
[0017] 由于仔豬胃腸道發(fā)育不完善，在pH值3. 5-4. 5的高酸度下，液態(tài)復(fù)合微生態(tài)制劑 更利于仔豬腸道菌群健康，刺激酶活，改善消化性能；同時(shí)，酸味更適宜仔豬味覺，利于采食 量增加，更利于仔豬使用效果的發(fā)揮。
[0018] 本發(fā)明所述的乳酸菌為屎腸球菌、植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌的復(fù)合菌，三者的比 例為1 :1 :1。
[0019] 本發(fā)明所選用屎腸球菌為國(guó)家菌種中心所收藏的菌種，保藏號(hào)為1. 223 ;植物乳 桿菌菌種保藏號(hào)為1. 0103。
[0020] 本發(fā)明將復(fù)合微生態(tài)制劑液真空包裝，并安裝定量噴嘴，置于陰涼處保存。
[0021] 優(yōu)選地，復(fù)合微生態(tài)制劑液真空包裝于棕褐色瓶中。
[0022] 乳酸菌屬于兼性厭氧菌，在有氧的情況下其生長(zhǎng)會(huì)受到抑制或死亡，真空包裝有 助于維持乳酸菌的生長(zhǎng)。棕褐色瓶有助于避光，光照具有熱效應(yīng)，溫度的升高會(huì)導(dǎo)致乳酸菌 活菌死亡，減少光照有助于維持乳酸菌的生長(zhǎng)。
[0023] 優(yōu)選地，所述的定量噴嘴每噴一次2mL，可以直接定量噴服乳仔豬，減少操作困難 和補(bǔ)飼有效性問(wèn)題。 本發(fā)明帶來(lái)的有益技術(shù)效果如下： 1、本發(fā)明的復(fù)合微生態(tài)制劑呈液態(tài)，乳酸菌活菌濃度含量高，儲(chǔ)存2周后乳酸菌活菌 含量仍保持較高水平，達(dá)到107CFU/mL級(jí)，液態(tài)中含有豐富的乳酸菌代謝產(chǎn)物，乳酸含量達(dá) 到13%以上，可以噴服乳仔豬或噴灑在飼料表面，在豬場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)使用更為方便。可以直接定量 噴服乳仔豬，減少操作困難和補(bǔ)飼有效性問(wèn)題，乳仔豬應(yīng)用效果好。在后期仔豬重量逐步增 加，抓豬噴服的操作難度增加，最好的補(bǔ)飼方法是將復(fù)合微生態(tài)制劑與教槽料混合飼喂，同 時(shí)，針對(duì)仔豬腸道菌群發(fā)育特點(diǎn)，選擇與教槽料中常用抗生素可以配伍使用的乳酸菌菌種， 制作一種可在同時(shí)使用教槽料時(shí)的復(fù)合微生態(tài)制劑。
[0024] 2、本發(fā)明針對(duì)液態(tài)乳酸生長(zhǎng)容易發(fā)生活菌死亡的特點(diǎn)，結(jié)合微營(yíng)養(yǎng)添加劑穩(wěn)定乳 酸菌生長(zhǎng)，制作穩(wěn)定的高濃度復(fù)合活菌制劑。在儲(chǔ)存2周后乳酸菌活菌含量仍保持較高水 平，達(dá)到107CFU/mL級(jí)，應(yīng)用效果更好。
[0025] 3、本發(fā)明中使用了功能性營(yíng)養(yǎng)添加劑溶解于液體微生態(tài)制劑當(dāng)中，包括維生素 C、 丁酸鈉、L-谷氨酰胺和殼寡糖以溶于液體形式添加，可以作為乳酸菌的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，穩(wěn)定活 性，延緩液體形式下乳酸菌的死亡；同時(shí)也可進(jìn)一步強(qiáng)化機(jī)體健康，促進(jìn)腸道發(fā)育，優(yōu)化產(chǎn) 品應(yīng)用效果。
[0026] 4、本發(fā)明利用功能性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)溶解液態(tài)生態(tài)制劑作為活菌營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，延緩儲(chǔ)存運(yùn) 輸過(guò)程中的死亡，保證產(chǎn)品的穩(wěn)定性。配方中的丁酸鈉、L-谷氨酰胺和殼寡糖作為液態(tài)下 乳酸菌的能量供應(yīng)物質(zhì)，維持乳酸菌的穩(wěn)定存活。少量殼寡糖和培養(yǎng)基中的葡萄糖協(xié)同作 用時(shí)可明顯縮短乳酸桿菌的生長(zhǎng)適應(yīng)期，促進(jìn)生長(zhǎng)。谷氨酰胺是氨基酸的一種，在細(xì)胞中很 容易分解成谷氨酸和氨，對(duì)細(xì)胞分裂增殖起到非常重要的作用。在液態(tài)復(fù)合乳酸菌培養(yǎng)后 期，通過(guò)額外營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的添加，改善生長(zhǎng)環(huán)境，維持活菌含量。
[0027] 5、本發(fā)明針對(duì)豬只在14天齡前采食和飲水較少的特點(diǎn)，結(jié)合整群抓豬操作時(shí)機(jī)， 在出生吃初乳前以及閹豬保健、注射疫苗，噴服該復(fù)合微生態(tài)制劑，即可降低抓豬應(yīng)激又可 調(diào)整腸道菌群穩(wěn)定，促進(jìn)健康生長(zhǎng)。
[0028] 6、本發(fā)明針對(duì)仔豬14天齡后開始逐步增加了教槽料的采食量，針對(duì)仔豬體重逐 步增加抓豬操作難度增大的特點(diǎn)，在教槽料中混合復(fù)合微生態(tài)制劑進(jìn)行補(bǔ)飼，簡(jiǎn)化了操作。
【具體實(shí)施方式】
[0029] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容作進(jìn)一步詳細(xì)的描述。
[0030] 實(shí)施例1 一種仔豬用液體復(fù)合微生態(tài)制劑，每毫升液體復(fù)合微生態(tài)制劑中含乳酸菌活菌 2*107CFU和殼寡糖40毫克。
[0031] 實(shí)施例2 一種仔豬用液體復(fù)合微生態(tài)制劑，每毫升液體復(fù)合微生態(tài)制劑中含乳酸菌活菌 3*10SCFU和殼寡糖50毫克。
[0032] 實(shí)施例3 一種仔豬用液體復(fù)合微生態(tài)制劑，每毫升液體復(fù)合微生態(tài)制劑中含乳酸菌活菌 2*101(^卩1]、殼寡糖45毫克和L-谷氨酰胺50毫克。
[0033] 制備方法為：利用MRS培養(yǎng)基培養(yǎng)乳酸菌達(dá)到目標(biāo)活菌含量彡2*109CFU/ml，按 配方量將L-谷氨酰胺和殼寡糖溶于培養(yǎng)基的微生態(tài)制劑液中，混勻，得到復(fù)合微生態(tài)制劑 液。
[0034] 實(shí)施例4 一種仔豬用液體復(fù)合微生態(tài)制劑，每毫升液體復(fù)合微生態(tài)制劑中含乳酸菌活菌 3. 5*108CFU、殼寡糖48毫克、維生素 C 50毫克和丁酸鈉38毫克。