一種含活性多糖和核苷酸的酵母在奶牛飼料中的應用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物化學技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用工業(yè)廢酵母制備的新型含活性多糖(葡聚糖、甘露聚糖，甘露寡糖)和核苷酸(腺苷酸、胞苷酸、鳥苷酸、尿苷酸)的酵母飼料。
【背景技術(shù)】
[0002]酵母細胞中含有豐富的營養(yǎng)成分，除了含有多種必需氨基酸和必需脂肪酸，豐富的維生素、礦物質(zhì)、多種消化酶及生長刺激素等。還含有一定量RNA和大量的活性多糖葡聚糖和甘露寡糖。
[0003]酵母細胞營養(yǎng)豐富，但酵母細胞壁成分復雜，細胞內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)和生理活性物質(zhì)很難被動物有效吸收利用，大部分作為廢棄物被排出動物體外。破壁酵母是采用物理或生物化學方法破碎酵母細胞壁，使酵母細胞內(nèi)容物充分釋放到胞外和大分子物質(zhì)適當降解的一種產(chǎn)品。酵母細胞經(jīng)破碎后，細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、氨基酸、核酸、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)和谷胱甘肽、海藻糖、過氧化物歧化酶(SOD)等生理活性物質(zhì)被釋放到胞外，細胞壁中葡聚糖和甘露聚糖被部分分解為寡糖，蛋白質(zhì)部分分解為多肽，營養(yǎng)作用和功能性都大大提高(王鵬銀，王海燕等，釀酒酵母源飼料添加劑的研宄與應用[J]，飼料添加劑，2011，32 (2): 30-35)。
[0004]有研宄指出酵母及其產(chǎn)物能增強水產(chǎn)動物免疫功能，提高水產(chǎn)動物抗病能力，提高育苗成活率。酵母中含有許多活性成分，如β -葡聚糖和甘露寡糖。它們在動物體內(nèi)分別行使各自的功能，能對細菌、真菌和病毒引起的疾病以及運輸、接種、氣候等變化引起的應激反應產(chǎn)生非特異性免疫力(孟思妤，孟長明等，酵母產(chǎn)物在水產(chǎn)飼料中的應用前景[J]，漁業(yè)致富指南，2010，18:56-57)。
[0005]β -葡聚糖能刺激動物體產(chǎn)生對機體免疫功能起關(guān)鍵作用的巨噬細胞，可清除體內(nèi)損傷、衰亡的細胞核侵入體內(nèi)的病原微生物。甘露寡糖能促進有益菌的增生，而有益菌又是良好的免疫激活劑，能有效提高抗干擾素和巨噬細胞的活性，通過產(chǎn)生抗體和提高巨噬作用活性等刺激免疫，從而激發(fā)機體體液和細胞免疫，促進免疫器官發(fā)育及T淋巴細胞和B淋巴細胞增多，從而增強機體的免疫功能(張紅梅，姜會民，酵母甘露寡糖對鯉魚非特異性免疫的影響[J]，飼料研宄，2006，10:9-11)。
[0006]核苷酸是生物體內(nèi)的遺傳物質(zhì)的基本單位，是構(gòu)成RNA的單體，也是蛋白合成的必需的中間體，并且在細胞結(jié)構(gòu)、代謝、能量和功能調(diào)節(jié)方面具有重要作用。已有研宄證明核苷酸具有促進家禽的生長和提高其免疫功能(向梟，周興華等，酵母核苷酸對鯉生長性能、體組成及血清免疫指標的影響[J]，動物營養(yǎng)學報2011，23(1):171-178)。
[0007]免疫功能是維持奶牛機體健康的基礎(chǔ)，奶牛各種疾病的發(fā)生都與免疫功能有關(guān)，如果機體出現(xiàn)免疫抑制，就會導致各種疾病的發(fā)生，這些疾病的發(fā)生會降低生產(chǎn)性能和繁殖性能，影響奶品質(zhì)并導致淘汰率升高，從而給養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失(薛俊欣，張克春，奶牛免疫功能的影響因素[J]，乳業(yè)科學與技術(shù)，2011.3:142-144)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種含活性多糖和核苷酸的酵母飼料。通過給奶牛喂食此飼料，可以增加奶牛及初生犢牛免疫力，又可以解決工業(yè)廢酵母對環(huán)境的污染。
[0009]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:
[0010]一種含活性多糖和核苷酸的酵母在奶牛飼料中的應用，
[0011]其中，所述的含活性多糖和核苷酸的酵母，含有活性多糖成分為葡聚糖、甘露聚糖和甘露寡糖，活性多糖總含量為酵母的I?20wt% (優(yōu)選3?15wt% )，含有核苷酸的成分為腺苷酸、胞苷酸、鳥苷酸和尿苷酸，核苷酸的總含量為酵母的I?20wt% (優(yōu)選5?15wt% ) ο
[0012]其中，所述的含活性多糖和核苷酸的酵母在奶牛飼料中的添加量為整體飼料干重的2?50wt %，優(yōu)選5?15wt %。
[0013]其中，所述的含活性多糖和核苷酸的酵母是按如下方法制備得到:將釀酒酵母發(fā)酵，發(fā)酵液經(jīng)固液分離，固體部分加水配成酵母液，添加中性蛋白酶和核酸酶Pl酶解酵母自身含有的甘露糖蛋白和核糖核酸，從而得到含活性多糖和核苷酸的酵母。
[0014]其中，釀酒酵母發(fā)酵條件為:發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)基配方:發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)基配方:葡萄糖 5 ?50g/L，(NH4) 2S041 ?10g/L，H3PO4I ?10ml/L，MgSO4I ?10g/L，F(xiàn)eSO40.5 ?5g/L，用氨水將培養(yǎng)基PH調(diào)節(jié)為3?8 ;25?40°C下50?300rpm發(fā)酵培養(yǎng)10?30小時。優(yōu)選的發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:葡萄糖 30g/L，(NH4) 2S044g/L，H3PO4L 5ml/L，MgSO4L 5g/L，F(xiàn)eSO40.8g/L，用氨水將培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)為4.0。優(yōu)選的釀酒酵母發(fā)酵條件為:32°C下10rpm發(fā)酵培養(yǎng)18小時。
[0015]其中，發(fā)酵液經(jīng)固液分離，固體部分加水配成干固含量為10?18wt%的酵母液，優(yōu)選15wt%。
[0016]其中，固體部分加水配成酵母液后，升溫至60?100°C，保溫0.5?5h后降溫至30?70°C，再各添加0.1% g/mL含量的中性蛋白酶和0.1 % v/v含量的核酸酶Pl反應2?8h，酶解酵母自身含有的甘露糖蛋白和核糖核酸，反應結(jié)束后用噴干成粉末，得到含活性多糖和核苷酸的酵母。優(yōu)選的是，固體部分加水配成酵母液后，升溫至90°C，保溫30分鐘后降溫至60°C，再添加0.1% g/mL含量的中性蛋白酶和0.1% v/v含量的核酸酶Pl反應5h，酶解酵母自身含有的甘露糖蛋白和核糖核酸，反應結(jié)束后用噴干成粉末，得到含活性多糖和核苷酸的酵母。
[0017]其中，所述的中性蛋白酶，其酶活為10000?100000U/g ;所述的核酸酶P1，其酶活為 500 ?5000U/mlo
[0018]中性蛋白酶酶活定義為:lg固體酶粉，在30°C，pH7.5條件下，I分鐘水解酪蛋白產(chǎn)生I μ g酪氨酸為一個酶活力單位，以U/g表示。
[0019]核酸酶Pl酶活定義為:在37°C，pH5.3下酶解核糖核酸，I分鐘釋放1.0ymol的酸溶性核苷酸的酶量為一個酶活力單位，以U/ml表示。
[0020]其中，該飼料應用于奶牛分娩前I?4周直至分娩，優(yōu)選奶牛分娩前4周直至分娩。
[0021]其中，用該飼料飼養(yǎng)的奶牛分娩后得到的犢牛，其血清白蛋白量為180?410mg/dL0
[0022]其中，用該飼料飼養(yǎng)的奶牛分娩，其初乳中輪狀病毒突變率為37?75%。
[0023]基于廢酵母中活性多糖和核苷酸的免疫功能，將其作為奶牛的飼料，不僅能提高奶牛的非特異性免疫，使其病死率下降，又可以解決工業(yè)廢酵母污染環(huán)境的問題。
[0024]有益效果:本發(fā)明的優(yōu)越性在于:
[0025]1、隨著本酵母飼料作為奶牛的飼料使用時間的延長，增加了犢牛血清白蛋白含量。
[0026]2、本酵母飼料作為奶牛的飼料使牛初乳中輪狀病毒在一定程度上變異，使其不致病。
【具體實施方式】
[0027]根據(jù)下述實施例，可以更好地理解本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易理解，實施例所描述的內(nèi)容僅用于說明本發(fā)明，而不應當也不會限制權(quán)利要求書中所詳細描述的本發(fā)明。
[0028]以下實施例中，血清白蛋白用ELISA試劑盒檢測，輪狀病毒突變率用GICA法檢測。